JPH069680A - ２’−フルオロ−２’，３’−ジデオキシピリミジンヌクレオシド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】酸環境において安定で、ヒト免疫不全ウイルス
（ＨＩＶ）の感染性の阻害に有効な２’−フルオロ−
２’，３’−ジデオキシピリミジンヌクレオシドの提
供。 【構成】次式： 【化１】 （式中、ＡはＯＨ基またはＮＨ₂ 基を表し、Ｂは水素原
子、ＣＨ₃ 基、ＣＦ₃ 基、ＣＨ＝ＣＨＢｒ基またはハロ
ゲン原子を表す）で表される化合物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、例えば胃内に見られる
ような酸環境において安定で、ヒト免疫不全ウイルス
（ＨＩＶ）の細胞毒性作用に対して有効な２’−フルオ
ロ−２’，３’−ジデオキシピリミジンヌクレオシドに
関する。

【０００２】

【従来の技術】後天性免疫不全症候群〔エイズ（ＡＩＤ
Ｓ）〕は、ある高い危険性のグループの中で流行性の比
率に達した致死的な疾病である。エイズのいくつかの性
質は治療を著しく困難にしている。今日ではＨＩＶまた
はヒト免疫不全ウイルスとして知られているエイズウイ
ルスの主な標的は免疫防御を導く白血球であるＴ４リン
パ球である。このＴ４細胞のエイズにおける抑制が免疫
応答の深刻な低下を引き起す。従って、エイズに対して
有効であるべき化合物は宿主の免疫から多くの助けを得
ることなく、ウイルスの作用を変化させなければならな
い。また、ウイルスは、血液−脳関門により、それがな
ければウイルスに対して有効であるかもしれない化合物
から保護されている中枢神経系の細胞をも攻撃する。そ
の宿主の感染において、ＨＩＶは特異的な細胞表面受容
体分子に結合する。ウイルスは細胞質に侵入し、そして
その外被タンパク質を脱殻し、これにより、その遺伝物
質である一本鎖ＲＮＡを放出する。ウイルスの酵素であ
る逆転写酵素は該ＲＮＡに付随する。ウイルスであるレ
トロウイルスはＲＮＡをＤＮＡへ逆転写する。そして最
後にＨＩＶゲノムのＤＮＡコピーのいくつかは宿主細胞
の染色体に組み込まれる。

【０００３】この組み込まれたウイルスゲノムはプロウ
イルスとして知られており、宿主細胞が例えば別の感染
により刺激されるまで、潜伏性のままであり得る。その
後、プロウイルスのＤＮＡはｍＲＮＡに転写され、ウイ
ルスのタンパク質の合成を支配する。プロウイルスはウ
イルスの後代の遺伝材料として役立つ他のＲＮＡのコピ
ーを産生し得る。タンパク質およびゲノムのＲＮＡは細
胞膜に集まり、凝集して新しいＨＩＶ粒子を形成し、そ
の後、該粒子は細胞から取れる。２つのＨＩＶ遺伝子、
ｔａｔおよびｔｒｓ／ａｒｔは細胞を破壊する複製の突
発を調節すると考えられている。これらの遺伝子はプロ
ウイルスのＤＮＡの転写およびウイルスタンパク質の合
成を高める小さいタンパク質をコードしている。

【０００４】いくつかの化合物が試験管内での逆転写酵
素の活性を低下させることが示されている。逆転写はウ
イルスの複製には重要であり、宿主細胞にとっては無関
係の段階である。ＨＩＶ複製はスラミン、タングステン
酸アンチモン、ホスホノホルメートおよびジデオキシヌ
クレオシドとして知られる一群のヌクレオシド類似体の
存在下で、かなり遅くなることが見出されている。

【０００５】ヌクレオシド類似体は自然に発生するヌク
レオシドに類似する一連の合成化合物であり、それらは
ＤＮＡおよびＲＮＡの化学的前駆物質である。ヌクレオ
シドは五炭糖分子に結合した単環式または二環式の塩基
からなる。類似体と天然に生じるヌクレオシドとは塩基
または糖の性質が大きくまたはわずかに相違している。
ウイルスの複製の過程でヌクレオシドに通常作用する酵
素はヌクレオシド類似体にも結合し得る。しかしなが
ら、ヌクレオシドと類似体は異なるから、類似体への結
合は酵素を不活性化し得、それによりウイルスの複製に
決定的な分子工程を破壊する。

【０００６】合成のヌクレオシド類似体である２’，
３’−ジデオキシアデノシン（ｄｄＡ）はエイズを引き
起こすヒト免疫不全ウイルスに対して試験管内で有効な
活性を有することが見出されている。ジデオキシヌクレ
オシド（５’−トリホスフェート）の活性型はウイルス
の新規の感染の逆転写の段階でウイルスの複製を抑制す
ると考えられるので、治療効果を持続させるべきである
場合には、この型の医薬は連続的に投与されなければな
らないと考えられる。毎日の処置は長期間続くので、千
人単位の患者のためには経口投与が最も実際的な経路で
あると考えられる。

【０００７】経口投与される薬物は、ヒトの胃の環境に
おいて１ないし２のｐＨ範囲に約１時間暴露される。こ
の化合物はアデノシンの４００００倍の速さでグリコシ
ド結合が酸触媒により加水分解されるので、ｄｄＡの薬
物安定性の問題を起こす結果となり得る。ｄｄＡはｐＨ
１．０、３７℃で３５秒の半減期（ｔ_1/2 ）を有するこ
とが見出されている。この化合物の分解により、その有
効性が低下するだけでなく、過剰量の分解生成物の形成
による毒性の潜在的な問題も起こり得る。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明は胃内に見られ
るような酸環境において安定で、ヒト免疫不全ウイルス
の細胞毒性作用に対して有効な合成２’−フルオロ−
２’，３’−ジデオキシピリミジンヌクレオシドの提供
を課題とする。このような本発明の化合物はヒト免疫不
全ウイルスの感染を抑制し、エイズの治療のための経口
的に投与され得るものであり、上記の従来技術の欠点を
克服し、ひいてはエイズの治療法を進歩させるものであ
る。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明の化合物はエイズ
を引き起こすウイルスであるＨＩＶウイルスに対して有
効な活性を有する。また、これらの化合物はヒトの胃内
の状態であるｐＨ１ないし２の酸性状態でも安定であ
る。本発明の化合物は次式：

【化２】 （式中、ＡはＯＨ基またはＮＨ₂ 基を表し、Ｂは水素原
子、ＣＨ₃ 基、ＣＦ₃ 基、ＣＨ＝ＣＨＢｒ基またはハロ
ゲン原子を表す）で表される。

【００１０】上記式中、ＡがＮＨ₂ 基を表し、Ｂが水素
原子を表すか、またはＡがＮＨ₂ 基を表し、Ｂがフッ素
原子を表す化合物が特に好ましい。

【００１１】本発明の化合物について、下のスキーム１
および化合物群を参照して説明する。以下に示す化合物
番号はこれらのスキーム１および化合物群に記載された
ものに一致する。

【化３】 スキーム１の脚注： ａ．（１）ＨＢｒ／ＡｃＯＨ，ＣＨ₂ Ｃｌ₂ ，室温；
（２）Ｋ₂ ＣＯ₃ ／ＭｅＯＨ／ＴＨＦ，室温（６４％） ｂ．ＢｚＣｌ／Ｐｙ，−３０℃（７８％） ｃ．（１）ＮａＨ／ＣＳ₂ ／ＤＭＦ，０℃；（２）Ｍｅ
Ｉ，０℃（９９％） ｄ．Ｂｕ₃ ＳｎＨ／ＡＩＢＮ，トルエン，還流（８６
％） ｅ．ＮＨ₃ ／ＭｅＯＨ，室温

【化４】 製造 本発明の化合物は共通中間体としてフルオロジデオキシ
糖４を用いる経路を経て合成される。化合物４は、新た
な類似体の調製毎のバートン還元を省略するから２’−
フルオロ−２’，３’−ジデオキシヌクレオシド（２’
−Ｆ−ｄｄＮ）の製造を促進する。化合物４は化合物３
から４段階でメチルキサンテート中間体を介して調製さ
れる。シリル化ピリミジン５または８と、化合物４から
インシトゥ合成された１−α−ブロモ誘導体との反応に
より保護ヌクレオシド６，９が主として得られる。保護
ヌクレオシド６，９はメタノール性アンモニアにより標
的化合物７ａ−ｄ，１０ａ−ｂとされる。５−クロロシ
トシン１１を得るための困難さのために、該化合物は４
−トリアゾール誘導体を用いて相当するウリジン（７
ｃ）を介して製造される。化合物１２ｂはゼブラリンフ
ァミリーの構成員である。ゼブラリン（４−デアミノシ
チジン）およびその類似体は重要な生物学的特性を有す
る。化合物１２ｂは、生物学的活性が２’，３’−ジデ
オキシ系に拡げられ得るかどうかを決定するために、ス
キーム１に記載された経路により調製される。

【００１２】ヌクレオシドのこの系列に対して決定した
分配係数は２．０ｌｏｇユニット、脂肪族親和性で１０
０倍の変動の範囲をカバーしていた。しかし、ｌｏｇＰ
値は全て陰性であり（表１）、このことは親水性を示
す。全てのシトシンジデオキシヌクレオシドは有機変性
剤を低率で含む緩衝化移動相での逆相ＨＰＬＣによりク
ロマトグラフィー的に対称的ピークを示した（表１）。
しかし、化合物２ｂと化合物１０ａはＨＰＬＣにより分
離できず、一緒に注入したとき同一ピークに溶離した。
これらの２種のジデオキシシチジン類似体にとってフッ
素原子の付加はその置換が糖であるか塩基であるかに関
係なく、疎水性に同様のマイナーな増加を与えた。

【表１】 表１の脚注 ａ：平均値±３回の測定値の標準偏差 ｂ：以下の移動相が４．６×２５０ｍｍ ５μｍ超球Ｏ
ＤＳカラムと共に１．０ｍｌ／分で使用された：Ａ）２
％，Ｂ）４％，Ｃ）６％，Ｄ）７％またはＥ）１０％Ｃ
Ｈ₃ ＣＮ（ｐＨ７．０，０．０１Ｍリン酸緩衝液中）お
よびＦ）グラジエント溶離液。全てのジデオキシヌクレ
オシドが移動相Ａ−Ｅで４−９分の保持時間を有してい
た。 ｃ：ｋ＝（ｖ_r −ｖ₀ ）／ｖ₀ または（ｔ_r −ｔ₀ ）／
ｔ₀ ；ｐＨ７．０，０．０１Ｍリン酸緩衝液中の４％Ｃ
Ｈ₃ ＣＮの移動相が使用された。 ｄ：４．６×２５０ｍｍ ５μｍ超球ＯＤＳカラムの
み；ｖ₀ ＝１．９０ｍｌ ｅ：ガードカラムを有する４．６×２５０ｍｍ ５μｍ
超球ＯＤＳカラム；ｖ₀＝２．３１ｍｌ ｆ：酸安定性研究のための内部標準

【００１３】酸安定性 ｄｄＣ（２ａ）とＦ−ｄｄ−ａｒａ−Ｃ（１０ａ）のグ
リコシド結合のｐＨ１，３７℃，１２０時間での切断を
研究した。ｄｄＣはシトシンの同時形成を伴ってゆっく
り加水分解される（図１）。ジデオキシプリン系の場合
のように、２’−フッ素置換は酸安定性を増加させ、化
合物１０ａは上記の条件下でこの時間の間に完全に安定
であり、５日間にわたり化合物１０ａ濃度の低下はな
く、そしてシトシン形成は認められなかった。一般的
に、２’，３’−ジデオキシピリミジンは相当する
２’，３’−ジデオキシプリン程、酸感受性ではない。
このことは、ｐＨ１，３７℃でのｄｄＣ（２ａ）の相対
分解速度（ｔ_1/2 ＝１０９時間，図１）および化合物１
ａの相対分解速度（ｔ_1/2 ＝３５秒）により示されてい
る。しかし、糖変性はジデオキシシチジンの酸安定性を
劇的に変更し得る。例えば、ｄｄＣは２’，３’−二重
結合を付加するｄ４Ｃ（１３）の生成により、加水分解
速度は４００倍に高められる（図１）。

【００１４】シチジンデアミナーゼ安定性 部分精製酵素 シチジンデアミナーゼ（ＣＤＡ）に対するアミノヌクレ
オシド安定性を評価するための標準条件を用いると、シ
チジン（天然基質）はこの酵素によってウリジンへの変
換に対してｔ_1/2 ＝２．５分を有する。これに対し、シ
トシンｄｄＮはＣＤＡの作用に非常に耐性である。２３
時間後、ｄｄＣ（２ａ）および５ＦｄｄＣ（２ｂ）はわ
ずかな濃度低下（約５％）を示すのみで、一方２’−Ｆ
−ｄｄ−ａｒａＣ類似体（１０ａ，１０ｂ，１１）で脱
アミノ化は観察されなかった（データは示されていな
い）。これらのデータはｄｄＣならびに３’−デオキシ
シチジン類似体の初期の研究と一致し、そしてテトラヒ
ドロウリジン、ＣＤＡインヒビターが化合物２ａ，１０
ａの抗−ＨＩＶ効力を高めるという観察を解明しない。

【００１５】サルの血漿 アカゲザルを用いたごく初期の生体内での研究におい
て、高いＣＤＡレベル（ｄｄＵ８−９％形成）を有する
種がｄｄＣのｉｖ投与後２４時間で観察された。このた
め、２０μＭ ｄｄＣ（２ａ）および化合物１０ａの試
験管内での安定性がアカゲザルの血漿中で比較された。
これらの２種のジデオキシヌクレオシドの濃度において
非常に遅い、そしてパラレルな低下が観察され（２８時
間わたり１４％消失）、これはアカゲザルにおける化合
物２ａ安定性のごく初期の生体内研究と非常に関連す
る。少量のｄｄＵは試験管内で２２時間後ｄｄＣ保温混
合物に検出され得るけれども、相当する脱アミノ化精製
物（７ａ）は化合物１０ａに対して観察されなかった。

【００１６】抗ＨＩＶ活性 ２’−フルオロジデオキシプリン置換の立体化学と抗Ｈ
ＩＶ活性との関係が確立されている（本願の原出願参
照）。Ｄｅ Ｃｌｅｒｃｑ等はまた、３’位に対する関
係を確立し、フッ素の抗ＨＩＶ有効性立体化学は２’位
における「ｕｐ」とは異なり、３’位では「ｄｏｗｎ」
であることを示した。３’−フルオロ−２’，３’−ジ
デオキシウリジンに対して、特にアグリコンが５−クロ
ロ置換を含んでいた場合に優れた抗ＨＩＶ活性が見出さ
れているので、本発明者等は、同様の関係が２’−フル
オロジデオキシピリミジン系に観察され得るかどうかを
決定することを試みた。化合物２ｂ，７ａ−ｄ，１０
ａ，１０ｂ，１１および１２ｂはＡＴＨ８およびＣＥＭ
細胞においてＨＩＶ−１の細胞変性効果の阻害剤として
試験管内で評価された。

【００１７】２’−フルオロ−ｄｄ−ａｒａ−Ｃ系にお
いて親化合物１０ａは種々の宿主細胞系において抗ＨＩ
Ｖ活性を有することが示された。ＡＴＨ８およびＣＥＭ
系を用いた本発明者等の発見（表２，３）はそれらのデ
ータと一致している。それは化合物２ｂおよび１０ａと
ｄｄＣ（２ａ）との比較から、Ｃ２’でのフッ素化がＣ
５でのアグリコンのフッ素化に比べ、効力および活性に
非常に強力な作用を有することが明らかである。

【００１８】２’，５−ジフルオロ類似体（１０ｂ）は
Ｃ８１６６細胞中でＨＩＶに対して１００μＭ濃度で不
活性であると報告されている。その研究において、活性
の欠如は個々の一フッ素化された化合物１０ａ，２ｂの
報告された抗ＨＩＶ特性の点で驚くべきであると記載さ
れている。本発明者等はｄｄＣ（２ａ）、５−Ｆ−ｄｄ
Ｃ（２ｂ）、２’−Ｆ−ｄｄ−ａｒａ−Ｃ（１０ａ）お
よび２’，５−ｄｉＦ−ｄｄ−ａｒａ−Ｃ（１０ｂ）の
ＡＴＨ８系中での抗ＨＩＶ活性の直接比較を行った（表
２）。本発明者等が以前報告したように、化合物２ａお
よび２ｂは宿主細胞に顕著な毒性がなく、０．５〜１．
０μＭ濃度範囲で完全に保護的である。２’−フルオロ
類似体（１０ａ）は活性であるが、効力において劣る。
ｄｄＣおよび化合物１０ａで１００％保護を示す１．０
μＭ濃度で、ジフルオロ類似体（１０ｂ）はＡＴＨ８細
胞に対して不活性で非毒性である（表２）。しかし５μ
Ｍでは明らかに活性が認められている。これは、より高
い濃度での追加の実験の必要を示唆していた。

【００１９】図２は典型的な投与量応答実験の結果を示
す。ＡＴＨ８細胞に対する顕著な毒性のない完全な保護
は１０と１００μＭの間の濃度で達成された。同様の毒
性での完全な保護は５００μＭ（評価された最高濃度）
でさえも観察された。これらの結果と従来の研究の結果
との間に注目される活性の相違は、異なる宿主細胞系が
抗ＨＩＶ評価に対して使用される場合に、通常ではな
く、そして異なる宿主細胞系が１０００倍以上異なる抗
ウイルス薬剤効果を得ることができる十分に確立された
事実と一致する。結果の同様のスペクトルはＨＩＶ感染
ＣＥＭ細胞系を用いて観察される。表３は化合物２ａお
よび２ｂに対するのと同様の高い抗ＨＩＶ効力を示す
が、２’位へのフッ素原子の付加後（１０ａ）はいくら
か低い効力が観察された。ジフルオロ化合物は糖部分に
フッ素のない化合物に比べ約５００倍低い効力である
が、十分に高い濃度で使用されるならば、完全に保護的
であることが証明された（図３）。

【表２】

【表３】

【００２０】

【実施例】次に本発明の実施例に基づいて本発明をさら
に詳細に説明する。５−クロロ−ａｒａ−Ｃ（サル血漿
ＣＤＡ安定性研究のためのＨＰＬＣ内部標準）、ｄｄ
Ｕ、ｄｄＣ（２ａ）およびｄ４Ｃ（１３）はＮＣＩ，Ｄ
ＣＴ，ＤＴＰの薬剤合成および化学部門から入手した。
化合物２ｂ，３，４，９ａおよび１０ａは上記のように
して製造した。５ａ−ｄおよび８ａ−ｂのための親化合
物はウリジン（酸安定性研究のためのＨＰＬＣ内部標
準）であるので、市販されている。アカゲザル血漿はDa
vid Poplack 博士（ＮＣＩ，ＤＣＴ，ＣＯＰの小児腫瘍
学部門）により提供された。融点はMelTemp II装置によ
り測定され、そして補正された。ＵＶスペクトルはBeck
man Model 34分光光度計に記録されるか、またはPerkin
-Elmer LC-235 ジオードアレイ分光光度計でＨＰＬＣ分
析の間にオン−ザ−フライで記録された。プロトンＮＭ
ＲスペクトルはVarian XL-200 光度計で計測した。化学
シフトはＴＭＳに対するｐｐｍで示され、そして試料が
走行する溶媒に対して参照させる。分析および調製ＴＬ
Ｃ分析はユニプレートＧＨＬＦシリカゲル上で行われた
（Analtech, それぞれ２５０および１０００μＭ）。湿
気感受性反応は１１０℃で予め乾燥させたフラスコ中ア
ルゴン下で行われた。エーテルおよびＴＨＦはナトリウ
ム／ベンゾフェノンケチルから蒸留された。シリル化試
薬は１ｍｌバイアル（Analtech）中に予め混合した。

【００２１】陽イオン高速原子衝撃質量分析（ＦＡＢ）
スペクトルはVG 7070E質量分析計を加速電圧６ｋＶおよ
び分解能１５００で操作して得られた。グリセロールお
よび３−ニトロベンジルアルコール（ＮＢＡ）が単一マ
トリックスとして使用され、そしてイオン化は、８．４
−８．９ｋＶで加速されたキセノンイオンの１．０−
１．２ｍＡビームの電荷交換中和により誘導されたキセ
ノン原子のビームにより行われた。スペクトルは１０ｓ
／分解の走査速度でＶＧ １１／２５０ Ｊ⁺ データシ
ステムの対照の下で得られ、そしてマトリックスバック
グラウンドは自動的に差し引かれた。

【００２２】５−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジデオキシ
−２−フルオロ−α−Ｄ−スレオ−ペントスラノシルブ
ロミドとピリミジン塩基との一般的カップリング操作 この中間体ブロモ糖はメチル５−Ｏ−ベンゾイル−２，
３−ジデオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−スレオ−ペン
トフラノシド（４）から全ての例においてインシトゥ合
成された。化合物４のＣＨ₂ Ｃｌ₂ （１０−１５ｍｌ）
中の溶液（０．５−１．５モル）を酢酸中のＨＢｒ溶液
〔３３％（４．１Ｍ），６−８当量〕で処理し、そして
室温で１時間攪拌した。反応混合物を次に減圧下室温で
濃縮し、直後に高真空に晒し微量の酢酸を除去する。残
渣をＣＨ₂ Ｃｌ₂ （５０ｍｌ）中に溶解させ、水（３×
１０ｍｌ）および飽和ＮａＨＣＯ₃ 水（３×１０ｍｌ）
で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ₂ ＳＯ₄ ）、そして真空下で
濃縮すると粗製のブロモ糖が約９５％の収率で得られ
る。一方、ピリミジン（３．５当量）を、乾燥ＣＨ₃Ｃ
Ｎ（１０ｍｌ）中の塩基の懸濁液を過剰のＮ，Ｏ−ビス
（トリメチルシリル）トリフルオロアセトアミド（ＢＳ
ＴＦＡ，３ｍｌ）と室温で３０分間、または透明な溶液
が得られるまで攪拌することにより過シリル化した。溶
液および過剰な試薬を高真空下で除去し、そして残留油
状物を周囲の湿気から保護した。油状残留物を直後に乾
燥１，２−ジクロロエタン（２０ｍｌ）中に溶解させ、
そして生成溶液を乾燥１，２−ジクロロエタン（２０ｍ
ｌ）中のブロモ糖の新たに調製された溶液に添加した。
反応混合物を次に窒素雰囲気下で加熱により還流し（ウ
ラシル類似体に対して４８時間およびシトシン類似体に
対して４時間）、冷却し、メタノール（１０ｍｌ）と処
理し、そしてセライトパッドに通して濾過した。濾液を
減圧により乾燥するまで減少させ、そして残渣を調製用
シリカゲルＴＬＣ（Analtech 2000 μ）により下記の溶
媒混合物を用いて精製し、所望の生成物を不定形泡状物
または結晶固体として得た。

【００２３】次に個々の中間体および目的化合物の製造
について説明する。元素分析データは表４にまとめて示
した。 １−（５−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジデオキシ−２−
フルオロ−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノシル）ウラシ
ル（６ａ） この化合物は調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中の５％メタ
ノール）後に収率４９％で泡として得られ、そして次の
段階に直接使用された；¹ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ
２．２０−２．８０（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３’_a.b ），４．
５８（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４’，Ｈ−５’_a.b ），５．２８
（ｄｍ，Ｊ_2',F＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．７
０（ｄｄ，Ｊ_5,6 ＝８Ｈｚ．Ｊ_5.NH＝２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ
−５；Ｊ＝２Ｈｚ Ｄ₂ Ｏ交換後に消失），６．０５
（ｄｄ，Ｊ_1',F＝２０Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝３Ｈｚ，１Ｈ，
Ｈ−１’），７．３５−８．１０（ｍ，６Ｈ，Ｈ−６，
Ｐｈ），８．１８（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ，Ｄ₂ Ｏ交換
後に消失）。

【００２４】１−（５−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジデ
オキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノ
シル）−５−フルオロウラシル（６ｂ） この化合物は調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中の５％メタ
ノール）後に収率７６％で固体として得られた；融点１
５９−１６２℃（メタノール／エーテル）；¹Ｈ ＮＭ
Ｒ（メタノール−ｄ₄ ）δ２．０５−２．８０（ｍ，２
Ｈ，Ｈ−３’_{a. b} ），４．４６（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４’，
Ｈ−５’_a.b ），５．２０（ｄｍ，Ｊ_2',2'F＝５３Ｈ
ｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．９５（ｄｄｄ，Ｊ_1',2'F＝
１９Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝３Ｈｚ，Ｊ_1',5F ＝１．６Ｈｚ，
１Ｈ，Ｈ−１’），７．３０−８．００（ｍ，６Ｈ，Ｈ
−６，Ｐｈ）。元素分析結果（Ｃ₁₆Ｈ₁₄Ｆ₂ Ｎ₂ Ｏ₅ ）
Ｃ，Ｈ，Ｎ。

【００２５】１−（５−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジデ
オキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノ
シル）−５−クロロウラシル（６ｃ） この化合物は調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中の５％メタ
ノール）後に収率５６％（出発物質の回収の後６４％）
で固体として得られた；融点１８０−１８２℃（メタノ
ール／エーテル）；¹ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ２．
２５−２．８５（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３’_a.b ），４．６０
（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４’，Ｈ−５’_a.b ），５．２８（ｄ
ｍ，Ｊ_2',F＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），６．２０
（ｄｄ，Ｊ_1',F＝１９Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝３Ｈｚ，１Ｈ，
Ｈ−１’），７．４０−８．１５（ｍ，６Ｈ，Ｈ−６，
Ｐｈ），８．４８（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ，Ｄ₂ Ｏ交換
後消失）。元素分析結果（Ｃ₁₆Ｈ₁₄ＣｌＦＮ₂ Ｏ₅ ・
０．２Ｈ₂ Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

【００２６】１−（５−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジデ
オキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノ
シル）チミン（６ｄ） この化合物は調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中の５％メタ
ノール）後に収率５０％で泡として得られ、そして次の
段階に直接使用された；¹ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ
１．８５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃ ），２．２５−２．８５
（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３’_a.b ），４．５８（ｍ，３Ｈ，Ｈ
−４’，Ｈ−５’_a.b ），５．２５（ｄｍ，Ｊ_2',F＝５
３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），６．０６（ｄｄ，Ｊ_1',F＝
２０Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１’），７．
４０−８．１５（ｍ，６Ｈ，Ｈ−６，Ｐｈ），８．２２
（ｂｒ ｓ，１Ｈ，ＮＨ，Ｄ₂ Ｏ交換後に消失）。

【００２７】１−（５−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジデ
オキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノ
シル）−５−フルオロシトシン（９ｂ） この化合物は調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中の１０％メ
タノール）後に収率６６％で固体として得られた；融点
１６３−１６６℃（酢酸エチル／エーテル）；¹ Ｈ Ｎ
ＭＲ（メタノール−ｄ₄ ）δ２．１０−２．８０（ｍ，
２Ｈ，Ｈ−３’_a.b ），４．５０（ｍ，３Ｈ，Ｈ−
４’，Ｈ−５’_a.b ），５．２０（ｄｍ，Ｊ_2',2'F＝５
３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．９４（ｄｄｄ，Ｊ
_1',2'F＝１９Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝２．７Ｈｚ，Ｊ_1',5F ＝
１．７Ｈｚ，Ｈ−１’），７．３０−８．００（ｍ，６
Ｈ，Ｈ−６，Ｐｈ）。元素分析結果（Ｃ₁₆Ｈ₁₅Ｆ₂ Ｎ₃
Ｏ₄ ・０．５Ｈ₂ Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。微量のもう１つの異
性体、おそらくα−アノマー（Ｒ_f＝０．４）もまた検
出されたが、単離されなかった。

【００２８】一般的脱ブロッキング操作 飽和メタノール性アンモニア（２０ｍｌ）中の保護ヌク
レオシド（０．１−０．４ミリモル）の溶液を圧力ボト
ル中室温で１６−２４時間攪拌した。溶媒を真空下で除
去し、そして残渣を調製用シリカゲルＴＬＣ（Analtech
2000 μ）により精製し、所望の最終生成物を得た。

【００２９】１−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ
−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノシル）ウラシル（７
ａ） この化合物は化合物６ａから、調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃ
ｌ₂ 中の１０％メタノール）後に収率５８％で固体とし
て得られた；融点１５７−１５９℃（メタノール／エー
テル）；¹ Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ２．００（ｍ，１
Ｈ，Ｈ−３’_a ），２．４０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−
３’_b ），３．６０（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５’_a.b ），４．
２０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），５．２０（ｄｍ，Ｊ_2',F
＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．７０（ｄ，Ｊ_5,6
＝８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−５），５．９５（ｄｄ，Ｊ_1',F＝
１９Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１’），７．
７０（ｄｄ，Ｊ_5,6 ＝８Ｈ，Ｊ_6,F ＝２Ｈ，１Ｈ，Ｈ−
６）；ＭＳ（ＦＡＢ，グリセロール）ｍ／ｚ（相対強
度）２３１（ＭＨ⁺ ，６７），１１３（ｂ＋２Ｈ，１０
０）。元素分析結果（Ｃ₉ Ｈ₁₁ＦＮ₂ Ｏ₄ ）Ｃ，Ｈ，
Ｎ。

【００３０】１−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ
−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノシル）−５−フルオロ
ウラシル（７ｂ） この化合物は化合物６ｂから、調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃ
ｌ₂ 中の１０％メタノール）後に収率６１％で固体とし
て得られた；融点１５６−１５８℃（メタノール／エー
テル）；¹ Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ２．００（ｍ，１
Ｈ，Ｈ−３’_a ），２．４５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−
３’_b ），３．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５’_a.b ），４．
２０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），５．２０（ｄｍ，Ｊ
_2',2'F＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．９４（ｄ
ｍ，Ｊ_1',2'F＝１８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１’），７．８６
（ｄｄ，Ｊ_6,5F＝７Ｈｚ，Ｊ_6,2'F ＝２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ
−６）；ＭＳ（ＦＡＢ，グリセロール）ｍ／ｚ（相対強
度）２４９（ＭＨ⁺ ，１００），１３１（ｂ＋２Ｈ，５
１）。元素分析結果（Ｃ₉ Ｈ₁₀Ｆ₂ Ｎ₂ Ｏ₄ ・０．２５
Ｈ₂ Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

【００３１】１−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ
−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノシル）−５−クロロウ
ラシル（７ｃ） この化合物は化合物６ｃから、調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃ
ｌ₂ 中の１０％メタノール）後に収率６５％で固体とし
て得られた；融点１６７−１６８℃（メタノール／エー
テル）；¹ Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ２．００（ｍ，１
Ｈ，Ｈ−３’_a ），２．４５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−
３’_b ），３．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５’_a.b ），４．
１９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），５．２０（ｄｍ，Ｊ_2',F
＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．９４（ｄｄ．Ｊ
_1',F＝１８Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−
１’），７．９７（ｄ，Ｊ_6,F ＝２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−
６）；ＭＳ（ＦＡＢ，ＮＢＡ）ｍ／ｚ（相対強度）２６
５（ＭＨ⁺ ，４６），１４７（ｂ＋２Ｈ，２９）。元素
分析結果（Ｃ₉ Ｈ₁₀ＦＣｌＮ₂ Ｏ₄ ・０．５Ｈ₂ Ｏ）
Ｃ，Ｈ，Ｎ。

【００３２】１−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ
−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノシル）チミン（７ｄ） この化合物は化合物６ｄから、調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃ
ｌ₂ 中の１０％メタノール）後に収率６７％で固体とし
て得られた；融点１６３−１６５℃（メタノール／エー
テル）；¹ Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ１．７８（ｓ，３
Ｈ，ＣＨ ₃ ），２．００（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３’_a ），
２．４５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３’_b ），３．６５（ｍ，２
Ｈ，Ｈ−５’_a.b ），４．２０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−
４’），５．２０（ｄｍ，Ｊ_2',F＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ
−２’），５．９６（ｄｄ．Ｊ_1',F＝１９Ｈｚ，Ｊ
_1',2' ＝３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１’），７．５６（ｄ，Ｊ
_6,F ＝１Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−６）；ＭＳ（ＦＡＢ，グリセ
ロール）ｍ／ｚ（相対強度）２４５（ＭＨ⁺ ，１０
０），１２７（ｂ＋２Ｈ，６２）。元素分析結果（Ｃ₁₀
Ｈ₁₃ＦＮ₂ Ｏ₄）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

【００３３】１−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ
−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノシル）−５−フルオロ
シトシン（１０ｂ） この化合物は化合物９ｂから、調製用ＴＬＣ（ＣＨ₂ Ｃ
ｌ₂ 中の２５％メタノール）後に収率９８％で褐色固体
として得られた；融点１３５−１３８℃（メタノール／
エーテル）；¹ Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ２．００（ｍ，
１Ｈ，Ｈ−３’_a ），２．５０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−
３’_b ），３．６５（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５’_a.b），４．
２５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），５．２５（ｄｍ，Ｊ
_2',2'F＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．９２（ｄ
ｍ，Ｊ_1',2'f＝１８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１’），７．８３
（ｄｄ，Ｊ_6,5F＝６．５Ｈｚ，Ｊ_6,2'F ＝１．５Ｈｚ，
１Ｈ，Ｈ−６）；小さい三重項および四重項（それぞれ
δ１．０５および３．４２）は再結晶化に使用されたエ
チルエーテルの痕跡に相当する；この溶媒は真空中で延
長された加熱にも係わらず物質に強力に付着したままで
ある。この現象は融点が予想以上に高いことを説明する
かもしれない。ＭＳ（ＦＡＢ，グリセロール）ｍ／ｚ
（相対強度）２４８（ＭＨ⁺ ，１００），１３０（ｂ＋
２Ｈ，５２）。元素分析結果（Ｃ₉ Ｈ₁₁Ｆ₂ Ｎ₃ Ｏ₃ ・
０．８Ｈ₂ Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

【００３４】５−クロロ−１−（２，３−ジデオキシ−
２−フルオロ−β−Ｄ−スレオ−ペントフラノシル）シ
トシン（１１） 乾燥ピリジン（１０ｍｌ）中の化合物６ｃ（０．１８
ｇ，０．４８ミリモル）の溶液をＰＯＣｌ₃ （９２μ
ｌ，０．９８ミリモル）と乾燥ピリジン１５ｍｌ中の
１，２，４−トリアゾール（０．２７０ｇ，３．９１ミ
リモル）との予備混合された溶液と処理した。反応混合
物を室温で３時間攪拌した。揮発物を真空下で除去し、
そして残渣をＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中に溶解させ、水で洗浄し
（２×５０ｍｌ）、そして乾燥させた（Ｎａ₂ Ｓ
Ｏ₄ ）。溶媒を蒸発させて粗製トリアゾール誘導体を褐
色泡状物として得た。この物質を圧力ボトルに移し、そ
して飽和メタノール性アンモニア（４０ｍｌ）の存在下
１６時間攪拌した。減圧下で揮発物を除去した後、残渣
をＣＨ₂ Ｃｌ₂ ：メタノールの３：１混合物中に溶解さ
せ、セライトのショートパッドに通して濾過して無機塩
を除去し、そして再び乾燥するまで減少させた。調製用
シリカゲルＴＬＣ（Analtech 2000 μ，ＣＨ₂ Ｃｌ₂ 中
の１５％メタノール）による残渣の精製により白色泡状
物として化合物１１を０．０８２ｇ（６７％）得た（Ｒ
_f ＝０．３２）。メタノール／アセトン／エーテルから
の結晶化により融点１８０−１８２℃の白色結晶固体が
得られた；¹ Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ２．００（ｍ，１
Ｈ，Ｈ−３’_a ），２．４０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−
３’_b ），３．６２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−５’_a.b ），４．
２０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），５．２０（ｄｍ，Ｊ_2',F
＝５３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−２’），５．９０（ｄｄ，Ｊ
_1',F＝１８Ｈｚ，Ｊ_1',2' ＝３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−
１’），７．９２（ｄ，Ｊ_6,F ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ
−６）；ＭＳ（ＦＡＢ，ＮＢＡ）ｍ／ｚ（相対強度）２
６４（ＭＨ⁺ ，１００），１４６（ｂ＋２Ｈ，５３）。
元素分析結果（Ｃ₉Ｈ₁₁ＣｌＦＮ₃ Ｏ₃ ・０．５Ｈ
₂ Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。第２バンド（Ｒ_f ＝０．４９）は収
率１０％で不定形固体を供給し、化合物７ｃと同一であ
ることが確認された。

【００３５】

【表４】

【００３６】ＨＩＶ細胞変性効果阻害アッセイ ＡＴＨ８細胞 ＨＩＶ細胞変性効果阻害アッセイを以下のようにして行
った。２０００００個の標的ＣＤ４⁺ ＡＴＨ８細胞を無
細胞ＨＩＶ−１／ＩＩＩ_B に１０００ＴＣＩＤ₅₀（５０
％組織培養物感染投与量）の投与量で１時間暴露し、イ
ンターロイキン２含有新鮮培養培地２ｍｌ中に再び懸濁
し、そして５％ＣＯ₂ を含有する含湿空気中で試験化合
物の存在下または不在下に３７℃で培養した。培養８日
目、生存細胞を染料排除法を用いて計測した。活性であ
ることが見出された化合物は別の試験により２ないし４
回評価された。報告されているデータは代表的な試験か
らのものである。ウイルスに対する％保護は以下の式に
より決定された：１００×〔｛（ＨＩＶ−１に暴露され
化合物の存在下で培養された生存細胞数）−（ＨＩＶ−
１に暴露され化合物の不在下で培養された生存細胞
数）｝／｛（培養のみされた生存細胞数）−（ＨＩＶ−
１に暴露され化合物の不在下で培養された生存細胞
数）｝〕。標的細胞への化合物の％毒性は以下の式によ
り決定された：１００×〔１−（化合物の存在下で培養
された生存細胞総数）／（培養のみされた生存細胞総
数）〕。０に等しいか、または０以下の計算された％は
０％と記載されている。 ＣＥＭ細胞 試験化合物をＤＭＳＯ中に溶解させ、培養培地で希釈
し、そして陽性対照としてＡＺＴを用いて、ＨＩＶ感染
Ｔ４＋ＣＥＭリンパ球に添加した。試験化合物と処理さ
れた非感染細胞、および該化合物を有するか、または有
しない感染細胞を対照として使用する。５％ＣＯ₂ 雰囲
気中３７℃で６日間の保温後、ＸＴＴアッセイが活性を
決定するために利用される。

【００３７】以上記載してきたように、本発明の化合物
は、ヒトの胃内に見出されるような酸環境でも安定であ
るので、ｐＨ緩衝液を必要とせずに、容易に、当該技術
分野で十分に知られた薬理学的に許容され得る担体を用
いて、経口投与に適する投与形態で配合され得る。その
ような担体により、本発明の化合物をエイズの治療を受
ける患者による経口摂取のための錠剤、丸薬、カプセル
剤、液剤、ゲル等に配合することができるようになる。

【００３８】投与すべき正確な投与量は通常の実験によ
り決定される。しかしながら、一般的には、ジデオキシ
ヌクレオシドの実験的な使用から既に知られている量と
同等か、それより少ない量であり得る。なお、本発明の
化合物の主な投与経路も経口であるが、特にヒトにおけ
る生物的利用性を評価するための臨床検査の間には非経
口的に投与されてもよい。

【００３９】上記の特定の実施態様の記載は、本発明の
一般的な性質を完全に表しているので、第三者は現在の
知識を利用して、種々の施用のために、一般的概念を逸
脱することなく、特定の実施態様に、容易に変形および
／または適合させることができ、従って、そのような適
合および変形は開示された実施態様の等価物の意味およ
び範囲内で理解される。本明細書で使用された専門用語
または学術用語は説明を目的とするものであり、制限を
目的とするものではない。

【図面の簡単な説明】

【図１】０．１Ｎ ＨＣｌ（ｐＨ１．１），３７℃での
各種ヌクレオシドの分解率を示すグラフである。図中、
●＝２’−Ｆ−ｄｄ−ａｒａ−Ｃ（化合物１０ａ），■
＝ｄｄＣ（化合物２ａ），▲＝ｄ４Ｃ（化合物１３）。

【図２】２’，５−ｄｉ−Ｆ−ｄｄ−ａｒａ−Ｃ（化合
物１０ｂ）およびｄｄＣ（化合物２ａ）のＡＴＨ８細胞
中での細胞変性効果の阻害を示すグラフである。図中、
白ヌキカラムは示された濃度での未感染の処理細胞中で
の細胞毒性を示し、黒ヌリカラムはＨＩＶ感染細胞中で
の化合物の有効性を示す。

【図３】２’，５−ｄｉ−Ｆ−ｄｄ−ａｒａ−Ｃ（化合
物１０ｂ）によるＨＩＶ−１の細胞変性効果からＣＥＭ
細胞の保護を示すグラフである。図中、●は化合物１０
ｂによる効果を示し、▲は未感染未処理細胞の成長を示
す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ツェン，クリストファー，クー−ホー アメリカ合衆国，マリーランド 20866, バートンスヴィル，アルマナック ドライ ブ，14527 (72)発明者 マルキーズ，ヴィクター，イー. アメリカ合衆国，マリーランド 20879, ガイザースバーグ ドゥーリトル ストリ ート 20020

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 次式： 【化１】 （式中、ＡはＯＨ基またはＮＨ₂ 基を表し、Ｂは水素原
   子、ＣＨ₃ 基、ＣＦ₃ 基、ＣＨ＝ＣＨＢｒ基またはハロ
   ゲン原子を表す）で表される化合物。
2. 【請求項２】 上記式中、ＡがＮＨ₂ 基を表し、Ｂが水
   素原子を表す請求項１記載の化合物。
3. 【請求項３】 上記式中、ＡがＮＨ₂ 基を表し、Ｂがフ
   ッ素原子を表す請求項１記載の化合物。