JPH06504930A

JPH06504930A - 神経の治療および再生に使用するための生物分解性および生物吸収性ガイドチャンネル

Info

Publication number: JPH06504930A
Application number: JP4503965A
Authority: JP
Inventors: デッラ・バッレ，フランチェスコ; ロメオ，アウレリオ; カッレガーロ，ランフランコ
Original assignee: フィディーア・ソシエタ・ペル・アチオニ
Priority date: 1991-02-11
Filing date: 1992-02-10
Publication date: 1994-06-09
Also published as: AU1189792A; CA2100792A1; ES2077397T3; WO1992013579A1; DE69203596D1; GR3017764T3; DK0571415T3; US5735863A; EP0571415A1; EP0571415B1; ITPD910032A0; ATE125158T1; DE69203596T2; CA2100792C; ITPD910032A1; IT1247157B

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】神経の治療および再生に使用するための生物分解性および生物吸収性ガイドチャンネル発明の分野本発明は、神経組織の修復および再生に使用するため、および末梢神経に対する外傷の治療のための生物分解性ガイドチャンネルからなる医療用具、ならびに該ガイドチャンネルの製造方法および使用方法に関する。

発明の背景末梢神経に対する外傷を治療するために通常用いられている外科的方法の代替法を見い出すための研究が、損傷を受けた神経の再生を補助するものとして種々形式の神経ガイドを用いる実験に研究者を導いた。この分野の研究の大部分は、再生が起こるようにしながら神経断端を適所に保持して生物学的条件を可能にするチャンネルまたは管状ガイドを使用することに焦点が当てられていた。また、これらの縮小バイブラインは、結合組織が関与する浸潤作用を回避または遅延させた。このようなチャンネルまたはガイドの例は、種々のポリマーまたはそれらの誘導体から得られる［Ｄｕｃｋｅｒら：　ｖｏｌ、　２８．　Ｊ、　Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ、　５８２−５８７．１９６１１１　；　ｉｌｉр■■ ｅｙら：　ｖｏｌ、１９．　Ｓｕｒｇｉｃａｌ　Ｆｏｒｕｍ、　５１９−５２８．　１９６８　；　Ｌｕｎｄｂｏｒｇら：　ｖｏｌ、　４１D　Ｊ、　Ｎｅｕｒ。

ｐａｔｈ、　ｉｎ　Ｅｘｐ、Ｎｅｕｒｏｌ、、　４１２−４２２．１９８２　；　Ｍｏ１ａｎｄｅｒら：　ｖｏｌ、５．１ｌｕｓｃｌｅ　＆@Ｎｅｒｖｅ、　５４−５８．　１９８２　：　Ｕｚｍａｎら：　ｖｏｌ、　９．　Ｊ、　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、　Ｒｅｓ、　３２５−３３８．１９８３　；　Ｎ凾奄撃≠唐轣F　ｖｏｌ。

２９、　Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ　Ａｔ５ｏｃ、Ａｒｔｉｆ、　Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｏｒｇａｎｓ、　３０７−３１３．１９８３　；米国■魔S゜５３４．３４９．１９８５］。

さらに、損傷を受けた神経の機能回復を増大させるために、管状ガイドは神経修復に伝統的に使用される生物学的ポリマー（または、それらの混合物）によって調製されている［１Ｉａｄｉｓｏｎら：　ＶＯｌ、　４４．８ｒａｉｎ　Ｒｅｓ、　、　３２５−３３４．１９８５　：　Ｙａｎｎａｓら：u ｏ１．１１．　Ｔｒａｎｓ、Ｓｏｃ、’Ｂｉｏｍａｔ、、　１４６．　１９８５Ｈｆｉｌｌｉａｍｓら：　ｖｏｌ、　２６４．　Ｊ、　Ｃｏ高吹AＮｅｕｒａｌ。

２８４−２９０．１９８７１゜また、このガイド中に種々の成長因子を導入することの可能性を評価する研究も行われている［Ｐｏ１ｉｔｉｓら：　ｖｏｌ、２５３．　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、、　１−１２．１９８２　：　Ａｅｂｉｓｃｈｅｒら：　ＰＣＴ　Ｗｏ　９０１０５５５２］。

既知の方法によりガイド中に成長因子を用いることの問題は、このガイドが水溶液中で安定ではなく、これらの半減期が週単位ではなく時間単位で測定されるものであり、一方において完全な神経再生には数週間かかることである。これらの条件においては因子の放出を制御することができず、これらはポーラスで投与されることが多い。従って、再生に関与している神経細胞の長期刺激は不可能である。

神経ガイドの分野における一層の進歩が、天然ポリマーに対して行なった化学的修飾の程度、使用した置換の種類に応じて時間が変化してその場に残存する生物適合性および生物分解性ガイドを得るためのポリマーを調製することによって行われティる［Ｆａｖｅｒｏ　Ｇ、ら：　ＸＸＸＶＩ　Ｔｒａｎｓ、＾ｍ、　Ｓｏｃ、＾ｒｔｉｆ、ｏｒｇａｎｓ、　Ｍ２９１−Ｍ２Ｏ３，P９９０］。この場合にも、神経断端は縫合によってガイドの内側に固定されるが、使用する材料の性質によって、チャンネル膜を経る物質の選択的輸送を得ることができ、これにより再生中の神経の周りに理想的な環境を創出することができる。

これらの材料は、神経再生用の再吸収性ガイドの利点を、成長のために最良の環境を創出する可能性と一体にする。生物適合性および生物吸収性の材料を用いてガイドを作成するために種々の方法が提案されている。最も簡単かつ迅速な方法は、生物適合性および生物吸収性の材料を適当なダイから押出すことによる。ある種の生物適合性および生物吸収性の材料によって調製され、押出し法または他の製造法によって製造されたガイドの使用は、神経断端に外科的に縫合されながら断裂する傾向によって制限される。

従って、損傷を受けた神経の治療において使用するための生物適合性および生物吸収性のガイドチャンネルであって、神経の再生、成長および修復を刺激、増強または促進する成長因子との組合せにおいて成長因子に対して増強された環境を提供し、そして断裂に対して耐性であるガイドチャンネルの必要性が存在している。

発明の要約即ち、本発明は、同時押出しされた末梢神経系に対して薬学的に活性な成長因子などの生物学的な活性因子と混合され、断裂耐久性にされた、生物適合性および生物吸収性ポリマーを用いて調製された管状膜から構成される改良型のガイドチャンネルを提供するものである。

本明細書において用いる「活性因子」なる用語は、神経系に対して生物活性を有するあらゆる物質または化合物を意味する。このような「活性因子」は、神経組織の成長または再生を促進、増強および／または刺激する活性を有するのが好図１は、本発明の神経ガイドチャンネルを製造する際に有用な装置の概略図である。

図２は、移植して１０日後の本発明の神経ガイドチャンネルの電子顕微鏡写真である。

図３は、移植して４週間後の本発明の神経ガイドチャンネルの電子顕微鏡写真本発明に係るガイドチャンネルは生物適合性および生物吸収性のポリマー材料から調製され、通常、長さが約５〜８０關（好ましくは２０ｍ５）であり、約１〜１０關（好ましくは３龍）の内径を有し、約８０〜１０００μ１１（好ましくは４００μ■）の厚みを有し、そして８〜５０ｍｇ（好ましくは２０ｍｇ）の重量（４〜２５ｍｇ／ｃ■、好ましくは１０ａ＋ｇ／ｃ■に対応する）を有する。複合構造として調製されるガイドは生物適合性および生物吸収性材料のマトリックスから構成され、同一材料または異なってはいるが生物適合性および生物吸収性である材料の糸のコイルが埋め込まれている。また、このガイドチャンネルは、ポリマーマトリックス中に織り込んだ管（滑らかな織り方）を埋め込むことによっても得ることができる。この場め込まれた糸（単一材料または複数材料の組合せからなっていてよい）は、縫合糸または外科針によるガイドの亀裂および断裂に対する防御材として、また、強化材として働（。この強化材は１本の鎖または共により合わせた数本の鎖からなっていてよく、乾燥または湿潤条件で既知の押出し法によって製造することができる。

この強化糸は、最低１５０デニールの値（ＵＮＩ　８５１７／８４）、最低０．４ｇ／デニールの破断点引張強さおよび最低２９６の伸び（ＵＮＩ　１９３２／８６）を有しているのが好ましい。ガイドあたりのコイル化糸の層の最低数は、特に耐久性あるねじ込み構造を得るために、１ａｍ”あたり２および３であるのが好ましい。生物適合性および生物吸収性材料のマトリックスは、ねじ込み強化材を完全に取り囲んでいるのが好ましい。

即ち、本発明のガイドチャンネルにおいては、生物分解性の糸は生物分解性マトリックス中に埋め込まれている。マトリックス中への糸の埋め込みは、生成物の機械的性質を著しく増大させ、巻取製造法、織管製造法または管状製造法によって好ましく達成することができる。

上記のように、強化糸とガイドチャンネルマトリックスの両方は生物適合性および生物吸収性材料から製造される。特に、ガイドはヒアルロン酸の誘導体、とりわけヒアルロン酸のエステルからなる半合成材料から製造される。これらのヒアルロン酸の半合成誘導体は、特にヒアルロン酸と薬理学的に不活性なアルコールのエステル誘導体であり、例えば欧州特許公開Ｎｏ、　０２１６４５３および米国特許Ｎｏ。

４、８５１．５２１に記載されている誘導体である。これらの材料を本発明に従って使用するに特に遺したものにしている性質は、これらが免疫原性ではなく、従って十分に許容性であることである。ヒアルロン酸エステルからなる本発明のガイドチャンネルは、水に不溶性であって適切な生成物を好都合に形成し、なお身体に吸収性であり（即ち、「生物吸収性」）、身体において天然に存在するポリマーに分解される（即ち、これらは生物適合性である）。

ヒアルロン酸のエステル本発明において有用なヒアルロン酸のエステルは、ヒアルロン酸と脂肪族、アリール脂肪族、環式脂肪族または複素環式アルコールとのエステルであり、全てがエステル化されているもの（いわゆる「全エステル」）またはヒアルロン酸のカルボキシル基の一部だけがエステル化されているもの（いわゆる「部分エステル」）、およびこの部分エステルと薬理学的な見地から許容性または生物適合性である有機塩基または金属との塩である。

有用なエステルは、好ましくは、それ自体が顕著な薬理学的作用を持たないアルコール、例えば脂肪族系列の飽和アルコールまたは環式脂肪族系列の単純アルコールなどから導かれるエステルである。

カルボン酸基の一部が遊離のまま残っている上記のエステル（即ち、部分エステル）においては、これらは金属または有機塩基によりて、例えばアルカリもしくはアルカリ土類金属またはアンモニアもしくは含窒素有機塩基によって塩化されていてもよい。

ヒアルロン酸（ｒＨＹＪ　）のエステルの大部分は、ＨＹそれ自体とは異なり、有機溶媒中へのある程度の溶解性を与える。この溶解性は、エステル化されたカルボキシル基の割合およびカルボキシルに結合されるアルキル基の種類に依存する。

即ち、全てのカルボキシル基がエステル化されたＨＹ化合物は、室温で、例えばジメチルスルホキシド中で良好な溶解性を示す（ＨＹのベンジルエステルはＤＭＳＯ中に２００ｍｇ／ｍｌ程度溶解する）。また、ＨＹの全エステルの大部分は、ＨＹおよび特にその塩とは異なり、水への溶解性に劣り、実質的に水に不溶性である。この溶解性は、特定の顕著な粘弾性と共に、ＨＹエステルを神経ガイドチャンネルとして使用するに特に好ましいものにする。

本発明のガイドチャンネルとして使用するためのヒアルロン酸のカルボキシル基のエステル化成分として用いられる脂肪族系列のアルコールは、例えば最大３４個の炭素原子を有するアルコールであり、このアルコールは飽和または不飽和であってよく、また、他の遊離の官能基または官能基で修飾された基、例えばアミン、ヒドロキシル、アルデヒド、ケトン、メルカプタンもしくはカルボキシル基によって、またはこれらから導かれる基、例えばヒドロカルビルもしくはジ−ヒドロカルビルアミン基［以下において「ヒドロカルビル」なる用語は、炭化水素の１価の基（例えば、ＣＳＨ，４１型）だけではな（，２価または３価の基（例えば、「アルキレンＪ　Ｃ，Ｈ！＠または「アルキリデンＪ　Ｃ，Ｈ！、）をも意味するように用いる］、エーテルもしくはエステル基、アセタールもしくはケタール基、チオエーテルもしくはチオエステル基、およびエステル化されたカルボキシルもしくはカルバミド基および１またはそれ以上のヒドロカルビル基により置換されたカルバミドによって、ニトリル基によって、またはハロゲンによって置換されていてもよい。

ヒドロカルビル基を含む上記の基の中で、それらは最大６個の炭素原子を有する低級脂肪族基（例えば、アルキル）であるのが好ましい。また、このようなアルコールは異項原子（例えば、酸素、窒素および硫黄原子）によって炭素原子鎖中で遮断されていてもよい。１または２個のこのような官能基で置換されたアルコールが好ましい。

使用するに好ましい上記群のアルコールは最大１２個、特に６個の炭素原子を有するアルコールであり、上記のアミン、エーテル、エステル、チオエーテル、チオエステル、アセタール、ケタール基中のヒドロカルビル原子は最大４個の炭素原子を有するアルキル基であり、また、エステル化されたカルボキシルもしくは置換カルバミド基においてはヒドロカルビル基は同じ数の炭素原子を有するアルキルであり、そしてアミンもしくはカルバミド基においては最大８個の炭素原子を有するアルキレンアミンもしくはアルキレンカルバミド基であってもよい。

これらアルコールの中で特に好ましいのは、飽和であって非置換のアルコール、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ −ブチル、アミル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、ノニルおよびドデシルアルコールであり、特に直鎖のアルコール、例えばｎ−オクチルおよびｎ−ドデシルアルコールである。この群の置換アルコールの中で、２価のアルコール、例えばエチレングリコール、プロピレングリコールおよびブチレングリコール、３価のアルコール、例えばグリセリン、アルデヒドアルデヒド、例えばタルトロンアルコール、カルボキシルアルコール、例えば乳酸、例えばグリコール酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、アミノアルコール、例えばｎ−アミノエタノール、アミノプロパツール、ｎ−アミノブタノールおよびこれらのアミノ官能基におけるジメチル化およびジエチル化誘導体、コリン、ピロリジニルエタノール、ピペリジニルエタノール、ピペラジニルエタノールおよび対応するｎ−プロピルまたはｎ −ブチルアルコールの誘導体、モノチオエチレングリコールまたはそのアルキル誘導体、例えばメルカプタン官能基におけるエチル誘導体が有用である。

高級飽和脂肪族アルコールの中で好ましいのはセチルアルコールおよびミリシルアルコールであるが、本発明の目的には１または２個の二重結合を有する高級不飽和アルコールが特に重要であり、例えば特に多くの必須油に含まれテルペンに親和性を有するアルコール、例えばシトロネロール、ゲラニオール、ネロール、ネロリドール、リナロール、ファルネソール、フィトールが重要である。不飽和の低級アルコールの中では、アリルアルコールとプロパルギルアルコールを考慮に入れることが必要である。アリール脂肪族アルコールの中で好ましいのは、唯一のベンゼン残基を有し、脂肪族鎖が最大４個の炭素原子を有し、ベンゼン残基が１〜３個のメチルもしくはヒドロキシル基またはハロゲン原子（特に、塩素、臭素およびヨウ素）によって置換されていることがあり、脂肪族鎖が遊離のアミノ基またはモノもしくはジメチル化されたアミノ基を含む群から選択される１またはそれ以上の官能基によって、またはピロリジンもしくはピペリジン基によって置換されていてもよいアルコールである。これらのアルコールの中で最も好ましいのは、ベンジルアルコールおよびフェネチルアルコールである。

環式脂肪族または脂肪族環式脂肪族系列のアルコールは、単環式または多環式炭化水素から導いてよく、好ましくは最大３４個の炭素原子を有していてよく、未置換であうでもよいし、また１またはそれ以上の置換基（例えば、脂肪族アルコールに対して上に挙げた置換基）を含んでいてもよい。単環式炭化水素から導かれるアルコールの中で好ましいのは、最大１２個の炭素原子を有し、環が好ましくは５〜７個の炭素原子を有するアルコールであり、これは例えば１〜３個の低級アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピルまたはイソプロピル基によって置換されていてもよい。この群の具体的なアルコールとしては、次のものが最も好ましいニジクロヘキサノール、シクロヘキサンジオール、１，２．３−シクロヘキサントリオールおよび１．３．５−シクロヘキサントリオール（フロログルシトール）、イノシトール、およびｐ−メタンから導かれるアルコール、例えばカルボメントール、メントールおよびα−γテルピネオール、１−テルピネオール、４−テルピネオールおよびピペリトール、または「テルピネオール」として既知のこれらアルコールの混合物、１，４−および１，８−テルピン。縮合環を有する炭化水素（例えば、ツジャン、ピナンまたはコンファン）から導かれるアルコールの中では、次のものが好ましい：ツジャノール、サビノール、ピノール水和物、ＤおよびＬ−ボルネオールおよびＤおよびＬ−イソボルネオール。

本発明のＨＹエステルの製造方法衷床Δ：ヒアルロン酸のエステルはカルボン酸のエステル化のための自体既知の方法によって、例えば、遊離のヒアルロン酸を触媒物質（例えば、強力な無機酸または酸型のイオン交換勧賞）の存在下に所望のアルコールと、または無機もしくは有機塩基の存在下に所望のアルコール残基を導入することができるエステル化試薬と処理することによって調製することができる。エステル化試薬としては、文献で既知の試薬を用いることができる。これらは、例えば、特に種々の無機酸または有機スルホン酸、例えば水素酸のエステル、即ちヒドロカルビル／Ｘロゲン化物、例えばヨウ化メチルもしくはエチル、または中性のスルフェートもしくはヒドロカルビル酸、アルファイト、カーボネート、シリケート、ホスファイトもしくはヒドロカルビルスルホネート、例えばメチルベンゼンもしくはｐ−トルエンスルホネートまたはメチルもしくはエチルクロロスルホネートである。この反応は、適当な溶媒、例えばアルコール、好ましくはカルボキシル基中に導入すべきアルキル基に対応するアルコール中で起こるであろう。しかし、この反応は、非極性溶媒、例えばケトン、エーテル、例えばジオキサン、または非プロトン性溶媒、例えばジメチルスルホキシド中でも起こるであろう。塩基としては、例えばアルカリもしくはアルカリ土類金属もしくはマグネシウムもしくは銀酸化物の水和物、またはこれら金属のいずれかの塩基性の塩、例えば炭酸塩が使用可能であり、有機塩基の中では、３級窒素塩基、例えばピリジンまたはコリジンが使用可能である。塩基の代わりに、塩基型のイオン交換勧賞を使用することもできる。

別のエステル化法は、金属塩または有機含窒素塩基との塩、例えばアンモニウムまたはアンモニウム置換塩を用いる。好ましくは、アルカリもしくはアルカリ土類金属の塩を用いるが、他の任意の金属塩を用いることもできる。また、エステル化試薬は上に挙げたものと同じであり、溶媒も同じである。非プロトン性溶媒、例えばジメチルスルホキシドおよびジメチルホルムアミドを用いるのが好ましい。

この方法または後記の他の方法に従って得たエステルにおいては、所望により、部分エステルの遊離のカルボキシル基を自体既知の方法で塩化してもよい。

方迭１．：また、ヒアルロン酸の４級アンモニウム塩をエーテル化試薬と、好ましくは非プロトン性有機溶媒中で処理することからなる方法によって、ヒアルロン酸エステルを製造することもできる。

有機溶媒としては、非プロトン性溶媒、例えばジアルキルスルホキシド、ジアルキルカルボキサミド、特に低級アルキルのジアルキルスルホキシド、とりわけジメチルスルホキシド、および低級脂肪族酸の低級アルキルのジアルキルアミド、例えばジメチルもしくはジエチルホルムアミドまたはジメチルもしくはジエチルアセトアミドを用いるのが好ましい。

しかし、必ずしも非プロトン性ではない他の溶媒も考慮に入れるべきであり、これらは、例えばアルコール、エーテル、ケトン、エステル、特に比較的低い沸点を有する脂肪族または複素環式アルコールおよびケトン、例えばヘキサフルオロイツブロバノール、トリフルオロエタノールおよびＮ−メチルピロリドンである。

この反応は、約０〜１００℃、特に約２５〜７５℃の温度範囲で、例えば約３０ ℃で行なうのが好ましい。

エステル化は、上記溶媒のいずれか、例えばジメチルスルホキシド中の上記アンモニウム塩にエステル化試薬を徐々に添加することによって行なうのが好ましい。

アルキル化試薬としては、上記の試薬、特にヒドロカルビルハロゲン化物、例えばハロゲン化アルキルを用いることができる。出発の４級アンモニウム塩としては、好ましくは１〜６個の炭素原子のアルキル基を有する低級テトラアルキル化アンモニウム用いるのが好ましい。はとんどの場合、テトラブチルアンモニウムのヒアルロン酸塩を用いる。ヒアルロン酸の金属塩（好ましくは上記した塩のいずれか、特にナトリウムまたはカリウム塩）を水溶液中において４級アンモニウム塩基により塩化されたスルホン酸樹脂と反応させることによって、これらの４級アンモニウム塩を製造することができる。

先に記した方法の１つの変法は、ジメチルスルホキシドなどの適当な溶液中に懸濁させたヒアルロン酸のカリウムまたはナトリウム塩を、触媒量の４級アンモニウム塩（例えば、テトラブチルアンモニウムのヨウ化物）の存在下に適当なアルキル化試薬と反応させることからなる。

ヒアルロン酸エステルを製造するために、あらゆる起源のヒアルロン酸、例えば上記の天然の出発原料（例えば、オントリのとさか）から抽出した酸を用いることができる。この酸の調製は文献に記載されている：精製されたヒアルロン酸を用いるのが好ましい。特に使用されるのは、広範囲に変化する分子量を有する有機原料の抽出によって直接得られる完全な酸の分子分画からなるヒアルロン酸であり、例えば１３ミリオンの分子量を有する完全な酸の約９０〜８０％（ＭＷ＝１１．７〜１０．４ミリオン）から０．２％（ＭＷ＝３０．０００）に至る分画であり、好ましくは５％〜０．２％の分画である。このような分画は文献に記載された種々の方法によって、例えば加水分解、酸化、酵素法または物理的方法、例えば機械的もしくは放射による方法によって得ることができる。即ち、最初の抽出物は公知の方法と同様にして得ることが多い（例えば、上記の「化粧品」において引用したＢａ１ａｚｓらの論文を参照）。得られた分子分画の分離および精製は既知の方法、例えば分子濾過によって行なう。

さらに有用な分画はヒアルロン酸から得られる精製分画であり、例えば欧州特許公開Ｎｏ、　０１３８５７２に記載されている分画である。

上記の特定のエステル化法の出発塩の調製のためのＨＹと上記金属との塩化は、自体既知の方法によって、例えばＨＹを計算した塩基量と、例えばアルカリ水和物または該金属の塩基性の塩（例えば、炭酸塩または炭酸水素塩）と反応させることによって行なう。

部分エステルにおいては、所望の化学量論的な塩化度が得られるように塩基の量を供することにより、残存しているカルボキシル基の全部またはその一部だけを塩化することができる。適切な塩基度を有していると、広範囲に異なる解離定数を持ち、従って溶液中または治療適用時に「その場」で所望のｐＨを与えるエステルを得ることができる。

（以下、余白）製造実施例：以下の実施例は、本発明のガイドチャンネルに使用されるヒアルロン酸エステルの製造を例示するものである。

実施例１−ヒアルロン酸（ＨＹ）の（部分）プロピルエステルの製造−５０％エステル化カルボキシル基 −５０％塩形成カルボキシル基（Ｎａ）モノマー単位２０＋Ｅｑに相当する分子量１７０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０ｗｌに溶解し、ヨウ化プロピル１．　８ｇ　（１０，６＋Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

水６２冨１及び塩化ナトリウム９ｇを含有する溶液を加え、得られた混合物を一定撹拌下にアセトン３５００ｗｌ中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、５：１アセトン／水５００富１で３回、アセトンで３回洗浄し、最後に３０℃で８時間減圧乾燥した。

次いで、得られた生成物を１％塩化ナトリウム水溶液５５０諺ｌに溶解し、その溶液をアセトン３００　Ｃｈｉ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、アセトン／水（５：　１）５００ｍＡ’で２回、アセトン５００ｍ１で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の部分プロピルエステル化合物７．９ｇを得た。ｌ、Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ　［＾モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１６０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５ ℃のジメチルスルホキシド６２０■ｌに溶解し、ヨウ化イソプロピル１．　８ｇ　（１０，６■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

水６２ｍ１及び塩化ナトリウム９ｇを含有する溶液を加え、得られた混合物を一定撹拌下にアセトン３５００１ｉ中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、５：１アセトン／水５００ｍ１で３回、アセトンで３回洗浄し、最後に３０℃で８時間減圧乾燥した。

次いで、得られた生成物を１％塩化ナトリウム水溶液５５　Ｃｈｉに溶解し、その溶液をアセトン３０００ｗｌ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、アセトン／水（５：　１）５００窟ｆで２回、アセトン５００＠ｌで３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の部分イソプロピルエステル化合物７．８ｇを得た。Ｒ，Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、　Ｃ，１ｌａｒｋｕｎａｓ［Ａｎａｌ、Ｃｈｅｗ、　３３．１０２８− １０３０（１９６１）コの方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

モノマー単位２０１ＥＱに相当する分子量２５０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０＊１に溶解し、ヨウ化エチル２．５ｇ　（１５，９ｍＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

水６２ｍ１及び塩化ナトリウム９ｇを含有する溶液を加え、得られた混合物を一定撹拌下にアセトン３５００１Ｉｌ中にゆっ（りと注加した。生成される沈殿物を濾取し、５：１アセトン／水５００ｍｊ！で３回、アセトンで３回洗浄し、最後に３０℃で８時間減圧乾燥した。

次いで、得られた生成物を１％塩化ナトリウム水溶液５５０諺ｌに溶解し、その溶液をアセトン３０００Ｍｌ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、アセトン／水（５：　１）５００＋＋４で２回、アセトン５００１１で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の部分エチルエステル化合物７．９ｇを得た。Ｒ，ｔｌ、Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ　［＾ｎ実施例４−ヒアルロン酸（ＨＹ）の（部分）メチルエステルの製造−７５％エステル化カルボキシル基−２５％塩形成カルボキシル基（Ｎａ）モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量８０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０ｇｆに溶解し、ヨウ化メチル２．２６ｇ　（１５，９■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

水５２ｍｌ及び塩化ナトリウム９ｇを含有する溶液を加え、得られた混合物を一定撹拌下にアセトン３５００富ｌ中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、５：１アセトン／水５０　Ｑｍｊ！で３回、アセトンで３回洗浄し、最後１；３０℃で８時間減圧乾燥した。

次いで、得られた生成物を１％塩化ナトリウム水溶液５５　Ｑ＋＋ｊ！に溶解し、その溶液をアセトン３０００ｗｌ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、アセトン／水（５：　１）５００ｍ／で２回、アセトン５００ｍ１で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の部分メチルエステル化合物７．８ｇを得た。Ｒ，Ｅｌ、　Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、　Ｃ，）ｌａｒｋｕｎａｓ［Ａｎａｌ、ｃｈｅｍ、　３３．１０２８ −１０３０（１９６１））の方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例５−ヒアルロン酸（ＨＹ）のメチルエステルの製造モノマー単位２０＋ｏＥｑに相当する分子量１２０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０１１’に溶解し、ヨウ化メチル３ｇ　（２１，２■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

得られた混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００菖ｌ中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００１Ｚで４回洗浄し、最後に３０ ℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のメチルエステル生成物８ｇを得た。Ｒ，Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ［Ａｎａｌ。Ｃｈｅ＋＊、　３３．１０２８− １０３０（１９６１）］の方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例６−ヒアルロン酸（ＨＹ）のエチルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量８５．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２　Ｃｈｉに溶解し、ヨウ化エチル３．３ｇ　（２１，２■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

得られた混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００ｍｌ中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５０ＯＮ１で４回洗浄し、最後に３０ ℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のエチルエステル生成物８ｇを得た。Ｒ，Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、　Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ［Ａｎａｌ、ｃｈｅｍ、　３３．１０２８−１０３０（１９６１）コの方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例７−ヒアルロン酸（ＨＹ）のプロピルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０冨ｌに溶解し、ヨウ化プロピル３．６ｇ　（２１，２■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

得られた混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００厘！中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００ｍ１で４回洗浄し、最後に３０ ℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のプロピルエステル生成物８．３ｇを得た。Ｒ，Ｈ，Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ［Ａｎａｌ、Ｃｈｅｔ　３３．１０２８− １０３０（１９６１）］の方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例８−ヒアルロン酸（ＨＹ）の（部分）ブチルエステルの製造−５０％エステル化カルボキシル基−５０％塩形成カルボキシル基（Ｎａ）モノマー単位２０鵬Ｅｑに相当する分子量６２０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６に溶解し、ヨウ化ｎ−ブチル１．　９５ｇ　（１０．　６＋＋＋Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

水６２ｍｌ及び塩化ナトリウム９ｇを含有する溶液を加え、得られた混合物を一定撹拌下にアセトン３　５　０　Ｃｈｉ中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、５：１アセトン／水５００＠ｊ！で３回、アセトンで３回洗浄し、最後に３０℃で８時間減圧乾燥した。

次いで、得られた生成物を１％塩化ナトＩＪ’Ｆム水溶液５５０ｍｌに溶解し、その溶液をアセトン３０００冨！中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、アセトン／水（５　：　１）５００＊ｉ’で２回、アセトン５００ｍｌで３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の部分ブチルエステル化合物８ｇを得た。Ｒ」、　Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ．Ｃ．Ｍａｒｋｕｎａｓ　［Ａｎａｌ。

Ｃｈｅｔ　３３，１０２ｇ−１０３０（１９６１）］の方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

釈Ｖ士士二些Δ１旦ｎ旦」堕し祉土げ上貼上と五＝勘匣皇（二輩伍と！位地ｐ乏Ｊヒ罎謙壓漠たげ５竺（公吠モノマー単位２０＋ｅＥｑに相当する分子量１８０．０００を有して（鳥るＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６に溶解し、テトラブチルアンモニウム・ヨーダイト２ｇ及びクロロ酢酸エチル１。

８　４　ｇ　（１　５■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

水５　２ｍｌ及び塩化ナトＩＪ’７ム９ｇを含有する溶液を加え、得られた混合物を一定撹拌下にアセトン３　５　０　０ｍｌ中にゆっくりと注加した。生成される沈殿物を濾取し、５：１アセトン／水５００冨ｌで３回、アセトンで３回洗浄し、最後；；３０℃で８時間減圧乾燥した。

次いで、得られた生成物を１％塩化ナトリウム水溶液５　５　Ｃｈｉに溶解し、その溶液をアセトン３　０　０　０．１中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、アセトン／水（５　：　１）５００ｇｊ！で２回、アセトン５０Ｑｍｌで３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の部分エトキシカルボニルメチルエステル化合物１０ｇを得た。

Ｒ．Ｈ，　Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ．Ｃ．Ｍａｒｋｕｎａｓ　［Ａｎａｌ，Ｃｈｅｗ．　３３．１０２８−１０３０（１９６１）］の方法を使用し、このエトキシエステル基の定量測定を行った。

実施例１０−ヒアルロン酸（ＨＹ）のｎ−ペンチルエステルの製造モノマー単位２ＱｍＥｑに相当する分子量６２０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６　２　０１ｉに溶解し、ｎ−ペンチル・プロミド３．８ｇ（２５■Ｅｑ）及びヨーダイト・テトラブチルアンモニウム０．２ｇを加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

得られた混合物を酢酸エチル３　５　０　Ｃｈｉ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、酢酸エチル５　０　（：ｈｌで４回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のｎ−ペンチルエステル生成物８．７ｇを得た。Ｓｉｇｇｉａ　Ｓ。

及び■ａｎｎ　Ｊ．　Ｇ．　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕ垂刀h　４版。

Ｊｏｈｎ　ｆｉｌｅｙ　ａｎｄ　Ｓｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例１１−ヒアルロン酸（ＨＹ）のイソペンチルエステルの製造モノマー単位２０ａＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６　２　Ｃｈｉに溶解し、イソペンチル・プロミド３．８ｇ　（２５■Ｅｑ）及びテトラブチルアンモニウム・ヨーダイト０．２ｇを加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

得られた混合物を酢酸エチル３　５　０　Ｑｇｆ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、酢酸エチル５０Ｃｈｉで４回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のイソペンチルエステル生成物８．６ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ。

及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕ垂刀h　４版。

Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例１２−ヒアルロン酸（ＨＹ）のベンジルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０Ｉｉに溶解し、ベンジル・プロミド４．５ｇ　（２５■Ｅｑ）及びテトラブチルアンモニウム・ヨーダイト０．２ｇを加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

得られた混合物を酢酸エチル３５００ｗｌ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、酢酸エチル５００１ｉ＋で４回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のベンジルエステル生成物９ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＢａｎｎＪ、Ｇ、　’Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　iｏｈｎ　Ｖｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例１３−ヒアルロン酸（ＨＹ）のβ−フェニルエチルエステルの製造モノマー単位２ＱｗＥｑに相当する分子量１２５，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０Ｉｉに溶解し、２−ブロモエチルベンゼン４．６ｇ（２５■Ｅｑ）及びテトラブチルアンモニウム・ヨーダイト１８５＋＋ｇを加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

得られた混合物を酢酸エチル３５００ｗｌ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、酢酸エチル５００＋ｊ’で４回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のβ−フェニルエチルエステル生成物９．１ｇを得た。Ｓｉｇｇｆａ　Ｓ、及びｌ１ｌａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ≠戟@ｇｒｏｕｐｓ− ４版、　Ｊｏｈｎ　ｆｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例１４−ヒアルロン酸（ＨＹ）のベンジルエステルの製造分子量１６２．０００を有するＨＹのカリウム塩３ｇをジメチルスルホキシド２００菖Ｅに懸濁し、テトラブチルアンモニウム・ヨーダイト１２０ｍｇ及びベンジル・プロミド２．４ｇを加えた得られた懸濁液を撹拌下に３０℃にて４８時間維持させた。この混合物を酢酸エチル１００　Ｃｈｉ中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、酢酸エチル１５Ｃｈｉで４回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。

これにより、標題のベンジルエステル生成物３．１ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及刀ａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ″S版、　Ｊｏｈｎｆｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

モノマー単位２０ＩＩＥｑに相当する分子量１６５．１００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０１１に溶解し、ヨウ化プロピル２．９ｇ　（１７■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

次いで、水６２諺１及び塩化ナトリウム９ｇを含有する溶液を加え、得られた混合物を一定撹拌下にアセトン３５００．１中にゆっ（りと注加した。生成される沈殿物を濾取し、５：１アセトン／水５００Ｉｉで３回、アセトンで３回洗浄し、最後に３０℃で８時間減圧乾燥した。

次ぎに、得られた生成物を１％塩化ナトリウム水溶液５５　Ｃｈｉに溶解し、その溶液をアセトン３０００８１中にゆっくりと一定の撹拌下に注加した。形成される沈殿物を濾過し、アセトン／水（５：　１）５００ｇｉ’で２回、アセトン５００ｍ１で３回洗浄し、最後に３０℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の部分プロピルエステル化合物８ｇを得た。Ｒ，ｌ　Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ　［Ａｎａｌ、Ｃｈｅｍ、　３３．１０２８−１０３０（１９６１）］の方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例１６−ヒアルロン酸（ＨＹ）のｎ−オクチルエステルの製造モノマー単位２０＠Ｅｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０Ｉｉに溶解し、１ −ブロモオクタン４．　１ｇ　（２１，２菖Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０ ℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００ｗｌ中にゆっ（りと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５０　Ｃｈｉで４回洗浄し、最後に３０ ℃で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題のオクチルエステル化合物９．３ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕ獅モ狽堰B ｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例１７−ヒアルロン酸（ＨＹ）のイソプロピルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０Ｉｉに溶解し、臭化イソプロピル２．６ｇ　（２１，２鳳Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５０　Ｃｈｉ中にゆっくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００寓１で４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題のイソプロピルエステル化合物８゜３ｇを得た。Ｒ」、Ｃｕｎｄｉｆｆ及びＰ、Ｃ，Ｍａｒｋｕｎａｓ　［Ａｎａｌ、Ｃｈｅｔ　３３．１０２ｇ−１０３０（１９６１）コの方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

潰モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０Ｉｉに溶解し、２．６−ジクロロベンジル・プロミド５．０８ｇ　（２１，２鳳Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５０Ｃｈｉで４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の２．６−ジクロロベンジルエステル生成物９．７ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びｌ１ａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　” Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　ｆｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載■ れている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例１９−ヒアルロン酸（ＨＹ）の４−　ｔｅｒｔブチルベンジルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０厘ｌに溶解し、４−ｔｅｒｔブチルベンジル・プロミド４．８１ｇ　（２１，２鳳Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５　ＯＣｈｉ中にゆっくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００Ｉｉで４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の４−ｔｅｒｔブチルベンジルエステル生成物９．８ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　” Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　Ｖｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例２０−ヒアルロン酸（ＨＹ）のヘプタデシルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０＋１１に溶解し、ヘプタデシル・プロミド６、　８ｇ　（２１，２■Ｅｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５０　Ｃｈｌ中にゆうくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００８１で４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題のヘプタデシルエステル生成物１１ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆ浮獅モ■ ｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　１Ｆｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例２１−ヒアルロン酸（ＨＹ）のオクタデシルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０Ｒ１に溶解し、オクタデシル・プロミド７．１ｇ　（２１，２ａＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５０Ｑｍｆで４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題のオクタデシルエステル生成物１１ｇを得た。５１ｇ１ａ　Ｓ、及びＥｌａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　Ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆ浮獅モ■ ｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ″４版、　Ｊｏｈｎ　ｆｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例２２−ヒアルロン酸（ＨＹ）の３−フェニルプロピルエステルの製造モノマー単位２０ＩＩＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２　Ｃｈｌに溶解し、３−フェニルプロピル・プロミド４．２２ｇ　（２１，２ａＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００＠ｌ中にゆっくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００８１で４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の３−フェニルプロピルエステル生成物９ｇを得た０５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉ■ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　ｆｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２　Ｑｍｌに溶解し、３．　４．　５−トリメトキシベンジル・クロリド４．６ｇ　（２１，２ａＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００ｗｌ中にゆっくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００＠ｌで４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題の３．　４．　５−）リメトキシベンジルエステル生成物１０ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｔｕ＋　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−P７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例２４−ヒアルロン酸（ＨＹ）のシンナミルエステルの製造モノマー単位２０■Ｅｑに相当する分子量１７０．０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２　（：ｈｌに溶解し、シンナミル・プロミド４．２９ｇ　（２１，２ａＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００菖！中にゆっくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５０Ｑｇｆで４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題のシンナミルエステル生成物９．３ｇを得た。５１ｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕ獅モ■ ｉｏｎａｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例２５−ヒアルロン酸（ＨＹ）のデシルエステルの製造モノマー単位２０■ Ｅｑに相当する分子量１７０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２　ＱｍＪに溶解し、１−ブロモデカン４．７ｇ　（２１，２ａＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００富！中にゆっくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００ｍ１で４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題のデシルエステル生成物９．５ｇを得た。５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　’Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎモ狽奄盾獅■ ｌ　ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

実施例２６−ヒアルロン酸（ＨＹ）のノニルエステルの製造モノマー単位２０ｍＥｑに相当する分子量１７０，０００を有しているＨＹテトラブチルアンモニウム塩１２．４ｇを２５℃のジメチルスルホキシド６２０＠ｌに溶解し、１−ブロモノナン４．４ｇ　（２１，２ａＥｑ）を加え、得られた溶液を３０℃にて１２時間維持させた。

この混合物を一定撹拌下に酢酸エチル３５００−ｘ中にゆっくりと注加した。

生成される沈殿物を濾取し、酢酸エチル５００ｍ１で４回洗浄し、最後に３０℃ で２４時間減圧乾燥した。これにより、標題のノニルエステル生成物９ｇを得た。

５１ｇｇ１ａ　Ｓ、及びＨａｎｎ　Ｊ、　Ｇ、　”Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｖｉａ　ｆｕｎｃｔｉ盾獅≠戟@ｇｒｏｕｐｓ”　４版、　Ｊｏｈｎ　Ｖｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓの１６９−１７２頁に記載されている方法を使用し、このエステル基の定量測定を行った。

（以下、余白）活性因子本発明のガイドチャンネル中で使用することができる活性因子は具体的には神経組織の再生、成長または修復を増進、促進または刺激する因子である。様々な因子が神経の再生を刺激または増進することが知られており、これら因子は例えばポリツク（ｆｏｌｉｃｋｅ）ら、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　Ｕ、　Ｓ、　Ａ、　、第８３巻、　３０１２−３０P６．１９８６　；ライデル（Ｒｙｄｅｌ）ら、　Ｊ、　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、、第１巻、　３６３９ −３６５３．１９８８　；レビ・モンタルチーニ（Ｌｅｖｉ　Ｍｏｎｔａｌｃｉｎｉ）、５ｃｉｅｎｃｅ、第２３７巻、　１１５４−１１６２．１９８７およびこの文献に挙げられている文献；ブルーカー（Ｂｒｏｏｋｅｒ）ら、　１ｌｕｓｃｌｅ　ａｎｄ　Ｎｅｒｖｅ　１３．７８５−８００．１９９０などに記述されている。重要な成長因子は神経成長因子（ＮＧＦ）、酸型（ａ−ＦＧＦ）または塩基型（ｂ−ＦＧＦ）の線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、毛様体向神経性因子（ＣＮＴＦ）、脳由来向神経性因子（ＢＤＮＦ）、およびニューロトロピン−３（ＮＴ−３）である。またこれら成長因子の生物学的活性を促進または増進するガングリオシドまたはそれらの合成および半合成誘導体などの物質も存在する（パンチｍ；（Ｖａｎｔｉｎｉ）ら、　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、　４４８．２５２−２５８．１９８８）。例えば天然に存在するガングリオシド、欧州特許第００７２７２２号に記述されているような内部エステルガングリオシド誘導体、および欧州特許第０１６７４４９号に記述されているようなガングリオシドのエステルおよびアミド誘導体などが有用である。

さらにこれら成長因子はヒト活性な因子であることが好ましく、組換えＤＮＡ技術で生産することができる。

神経ガイドチャンネルの製造以下にＮＧＦのβ−型とＣＮＴＦを代表的な活性成分として使用し、本発明に従って製造されるガイドチャンネルの例について記述する。しかし一般的にガイドチャンネルを製造するには、ガイドを製造するために使用するポリマーを含有する押出槽中に適当量の活性因子を溶解する。本発明の曲折糸からなる神経ガイドは円筒スチール鋳型が重分配器の動きと同調して回転する装置を用いて製造される。この装置は市販のモーターで駆動することができ、また同調性は１平方センチメートルあたりに所望の数のコイルと所望の数の層が得られるような機械的または電気的装置によって得ることができる。

本発明のガイドチャンネルは「巻取り生産法」を用いて製造することが好ましい。このシステム自体は工業的生産において公知であるが、この方法が過去に神経ガイドチャンネルの製造に適用されたことはなかった。本発明者らは巻取り生産法を使用することによって、非常に高度な精度を得ると共に改善された神経ガイドチャンネルを提供することに初めて成功したのである。

本発明方法によれば、フィラメント巻きは通常、フィラメント糸または糸をまず樹脂によって濡し、次いで回転しているマンドレルのまわりに均一かつ規則的に巻き取る操作と考えられる。次いで完成したパターンを硬化させ、マンドレルを取り除く。

本発明によれば、神経ガイドチャンネルとして使用するための複合構造は図１に模式的に描かれた装置を用いて製造される。図１に記載の装置は所望の神経ガイドチャンネルの内径（例えば１．５ｍｍ）に等しい外径を有する磨きＡｌ５Ｉ３１６スチールの円筒鋳型１からなる。適当なモーター２で駆動した時に鋳型がその軸上で回転するように設置する。重分配器３はスチール鋳型１の軸を上下動するように設置され、モーター４によって動かされる。スピード制御５はモーター２および４のスピードを独立して調節するためのものである。

神経ガイドチャンネルはヒアルロン酸エステル材料溶液の適当量を規定の一定速度で回転するように設定されたスチール鋳型１上に分配することによって製造される。次に重分配器３がヒアルロン酸エステルからなる糸を保持しつつ規定された分配速度と一定速度で動き始める。分配器３をスチール鋳型１に沿って少なくとも２回動かし、適当な装置で過剰の材料を除去することにより、所望の特性を有するガイドチャンネルが得られる。

上述のように、ヒアルロン酸エステルの曲折糸を続いてヒアルロン酸エステル（曲折糸を製造するために使用したエステルと同じでもよ（、また、異なっていてもよい）からなる生物適合性、生物吸収性材料中に埋め込むこともできる。

したがって本発明によれば、神経の再連結を容易にし、縫合糸または外科針による引き裂きに対して顕著な耐性を持ち、所望であれば同時押出しされた成長因子もしくは神経の再生にとって生物学的または薬学的に有用な物質を有する、生物適合性かつ生物吸収性材料製のガイドを製造することが可能である。本発明はこのようなガイドを製造する技術をも提供する。

本発明のガイドを得るために必要な装置と操作を下記実施例に記述するが、これらはあくまで例示を目的とするものである。

実施例２７ＨＹＡＦＦ１１ｐ７５と命名された７５％のエステル化率を有するヒアルロン酸ベンジルエステル製のガイドを図１に示す装置を用いて製造する。

ガイドはヒアルロン酸ベンジルエステル溶液の適当量（ガイドの最終重量の１０ないし５０倍）を規定の一定速度（例えば１１５ｒｐｍ）で回転するように設定したスチール鋳型上に分配し、次いでヒアルロン酸ベンジルエステル糸を保持する分配器を一定の規定の分配速度（例えば毎分１４ｃｍ）で動がし始めることによって製造される。分配器をスチール鋳型に沿って少なくとも２回動かし、適当な装置で過剰の材料を除去することにより、下記の特性を有するガイドチャンネルが得られる：長さ２０ｍｍ：直径１．５ｍｍ；厚さ２００μｍ：１平方センチメートルあたり７コイルの密度で２層のコイル糸；総重量２０ｍｇ（１０ｍｇ／ａｍに相当する）。

実施例２８ＨＹＡＦＦ１１ｐ７５という名称の７５％エステル化されたヒアルロン酸ベンジルエステル製であって複合構造のガイドがヒトＮＧＦを同時押出しすることによって得られる。実施例２７に記載のように、ガイドは、ヒトＮＧＦのβサブユニットの適当量（例えば０．５ｍｇ）を溶解させたヒアルロン酸ベンジルエステル溶液の適当量（ガイドの最終重量の１０ないし５０倍）を規定の一定速度（例えば１１５ｒｐｍ）で回転するスチール鋳型上に分配し、次いでヒアルロン酸ベンジルエステル製の糸を保持する分配器を規定の一定の分配速度（例えば毎分１４ｃｍ）で動かし始めることによって製造される。重分配器を鋳型の縦方向に沿って少な（とも２回動かし、過剰の材料を適当な装置で除去することにより下記の特性を有するガイドチャンネルが得られる：長さ２０ｍｍ；直径１．５ｍｍ；厚さ２００μｍ：１平方センチメートルあたり７コイルの密度で２層のコイル糸；総重量２０ｍｇ（１０ｍｇ／ａｍに相当する）。

実施例２９ＨＹＡＦＦ１１ｐ７５という名称の７５％エステル化されたヒアルロン酸ベンジルエステル製であって複合構造のガイドがヒトＣＮＴＦを同時押出しすることによって得られる。実施例１に記載のように、ガイドは、ヒトＣＮＴＦ成長因子とヒアルロン酸ベンジルエステルの溶液の適当量（ガイドの最終重量の１０ないし５０倍）を規定の一定速度（例えば１１５ｒｐｍ）で回転するように設定したスチール鋳型上に分配し、次いでヒアルロン酸ベンジルエステル製の糸を保持する分配器を一定の規定の分配速度（例えば毎分１４ｃｍ）で動かし始めることによって製造される。重分配器をスチール鋳型の縦方向に沿って少なくとも２回動かし、過剰の材料を適当な装置で除去することにより下記の特性を有するガイドチャンネルが得られる：長さ２０ｍｍ；直径１．５ｍｍ；厚さ２００μｍ：１平方センチメートルあたり７コイルの密度で２層のコイル糸；総重量２０ｍｇ（１０ｍｇ／ｃｍに相当する）。

実施例３０ＨＹＡＦＦ１１ｐ７５という名称の７５％エステル化されたヒアルロン酸ベンジルエステル製であって複合構造のガイドがヒトＢＤＮＦを同時押出しすることによって得られる。実施例２７に記載のように、ガイドは、ヒトＢＤＮＦ成長因子とヒアルロン酸ベンジルエステルの溶液の適当量（ガイドの最終重量の１０ないし５０倍）を規定の一定速度（例えば１１５ｒｐｍ）で回転するように設定したスチール鋳型上に分配し、次いでヒアルロン酸ベンジルエステル製の糸を保持する分配器を一定の規定の分配速度（例えば毎分１４ｃｍ）で動かし始めることによって製造される。重分配器をスチール鋳型の縦方向に沿って少なくとも２回動かし、過剰の材料を適当な装置で除去することにより下記の特性を有するガイドチャンネルが得られる：長さ２０ｍｍ；直径１．５ｍｍ；厚さ２００μｍ：１平方センチメートルあたり７コイルの密度で２層のコイル糸：総重量２０ｍｇ（１０ｍｇ／ｃｍに相当する）。

実施例３１ＨＹＡＦＦ１１ｐ７５という名称の７５％エステル化されたヒアルロン酸ベンジルエステル製であって複合構造のガイドがガングリオシドの適当な混合物を同時押出しすることによって得られる。

実施例２７に記載のように、ガイドは、例えばＣｒｏｎａｓｓｉａｌという商標のガングリオシドの適当な混合物２０ｍｇとヒアルロン酸ベンジルエステルの溶液の適当量（ガイドの最終重量の１０ないし５０倍）を規定の一定速度（例えば１１５ｒｐｍ）で回転するように設定したスチール鋳型上に分配し、次いでヒアルロン酸ベンジルエステル製の糸を保持する分配器を一定の規定の分配速度（例えば毎分１４ｃｍ）で動かし始めることによって製造される。重分配器をスチール鋳型の縦方向に沿って少な（とも２回動かし、過剰の材料を適当な装置で除去することにより下記の特性を有するガイドチャンネルが得られる：長さ２０ｍｍ：直径１゜５ｍｍ；厚さ２００μｍ；１平方センチメートルあたり７コイルの密度で２層のコイル糸：総重量２０ｍｇ（１０ｍｇ／ｃｍに相当する）。

実施例３２ＨＹＡＦＦ１１ｐ７５という名称の７５％エステル化されたヒアルロン酸ベンジルエステル製であって複合構造のガイドが半合成ガングリオシドの適当な混合物を同時押出しすることによって得られる。

実施例２７に記載のように、例えば５ｉｎａｓｓｉａｌ”という商標の半合成ガングリオシドの適当な混合物２０ｍｇとヒアルロン酸ベンジルエステルの溶液の適当量（ガイドの最終重量の１０ないし５０倍）を規定の一定速度（例えば１１５ｒｐｍ）で回転するように設定したスチール鋳型上に分配し、次いでヒアルロン酸ベンジルエステル製の糸を保持する分配器を一定の規定の分配速度（例えば毎分１４ｃｍ）で動かし始めることによってガイドの同時押出が行われる。分配器をスチール鋳型の縦方向に沿って少なくとも２回動かし、過剰の材料を適当な装置で除去することにより下記の特性を有するガイドチャンネルが得られる：長さ２０ｍｍ；直径１．５ｍｍ；厚さ２００μｍ：１平方センチメートルあたり７コイルの密度で２層のコイル糸；総重量２０ｍｇ（１０ｍｇ／ｃｍに相当する）。

実施例３３ＨＹＡＦＦＩＩという名称の１００％エステル化されたヒアルロン酸の全ベンジルエステル製であって、糸／ポリマーマトリックスの複合構造を有するガイドチャンネルを次のように製造する。最低破断点引張強さ１．３ｇ／デニールおよび２３％伸び率を有するＨＹＡＦＦＩＩで構成された５００デニール糸を６本の針上で直径１．５ｍｍの管型に滑らかに織り込んだ。このようにして得た管を織り込み管の直径に等しい外径を有するＡｌ５Ｉ３１６磨きスチール製の円筒鋳型に被せた。次にこの鋳型と管を実施例２７に記載の装置に設置した。装置を作動させ、１１５ｒｐｍの速度で鋳型を回転させた。１３５ｍｇ／ｍ１の濃度のＨＹＡＦＦＩＩ／ジメチルスルホキシドの溶液の適当量を回転している鋳型の上に分配した。

次にＨＹＡＦＦ１１／ジメチルスルホキシド溶液を凝固させて管を鋳型から取り出すために鋳型を無水エタノールに浸漬した。このようにして形成したガイドチャンネルは長さ２０ｍｍ、厚さ３５０μｍであり、１．５ｍｍの内径と２５ｍｇ（１２，５ｍｇ／ｃｍ）の重量を有する。

実施例３４４００デニール糸が最低破断点引張強さ１．１ｇ／デニールおよび１８５伸び率を有するＨＹＡＦＦ１１ｐ７５で構成されており、ポリマーマトリックスが全ＨＹＡＦＦＩＩで構成されている糸／ポリマーマトリックスの複合構造を有するガイドチャンネルを以下の手法に従って製造した。

糸を６本の針上で直径１．５ｍｍの管型に滑らかに織り込んだ。このようにして得た管を轍り込み管の直径に等しい外径を有するＡｌ５Ｉ３１６磨きスチール製の円筒鋳型に被せた。次にこの鋳型と管を実施例２７に記載の装置に設置した。

装置を作動させ、１１５ｒｐｍの速度で鋳型を回転させた。１３５ｍｇ／ｍｌの濃度のＨＹＡＦＦＩＩ／ジメチルスルホキシドの溶液の適当量を回転している鋳型の上に分配した。

次にＨＹＡＦＦＩＩ／ジメチルスルホキシド溶液を凝固させて管を鋳型から取り出すために鋳型を無水エタノールに浸漬した。このようにして形成したガイドチャンネルは長さ２０ｍｍ、厚さ３５０μｍであり、１．５ｍｍの内径と２５ｍｇ（１２，５ｍｇ／ｃｍ）の重量を有する。

実施例３５糸が全ＨＹＡＦＦ１１（３０％）とＨＹＡＦＦ１１ｐ７５（７０％）の混合物であり、マトリックスが全ＨＹＡＦＦＩＩからなる糸／ポリマーマトリックスの複合構造を有するガイドチャンネルを以下の手法に従って製造した。

２００デニール全ＨＹＡＦＦ１１糸、最低破断引張強さ１ｇ／デニールおよび１８％伸び率と２５０デニールＨＹＡＦＦ１１ｐ７５糸、最低破断引張強さ０゜９ｇ／デニールおよび２０％伸び率を紡糸機を用いて混合して２つの製品からなる１つの糸を形成させる。

この糸を６本の針上で直径１．５ｍｍの管型に滑らかに織り込んだ。このようにして得た管を織り込み管の直径に等しい外径を有するＡｌ５Ｉ３１６磨きスチール製の円筒鋳型に被せた。次にこの鋳型と管を実施例１に記載の装置に設置した。装置を作動させ、１１５ｒｐｍの速度で鋳型を回転させた。１３５ｍｇ／ｍ１の濃度のＨＹＡＦＦ１１／ジメチルスルホキシドの溶液の適当量を回転している鋳型の上に分配した。

薬学的試験本発明に従って製造されたガイドは抹消神経系の神経の再生にとってのがイドとして使用することができる。この目的のためにはガイドを、その機能的特性、具体的にはその内部に沿う軸素成長を導くというその能力を損なうことな（、縫合によって神経断端に固定する。下記の試験は本発明の対象であるガイドの有用性を例示し、それらの機能的特性および生物吸収特性を立証するものである。

試験１体重的２５０〜３００ｇのラットをこの試験に使用する。それらの坐骨神経を中点で切開する。自発的な収縮の後に８ｍｍの間隙が得られるように２ｍｍの神経を除去する。近位および遠位断端を、予め食塩溶液で満たし９−０ナイロン縫糸で保持した上述の実施例の１つに記述されているガイド（例えば実施例２８：長さ２０ｍｍ、直径１．５ｍｍ、厚さ２００μｍ、１平方センチメートルあたり７コイルの密度で２層のコイル）中に挿入する。縫合中および縫合後はガイドは無傷のままであつた。手術の９０日後に再生した神経を機能について評価した。

その結果は、本発明の対象である技術に従って製造された神経ガイドが軸素の成長を助け、導き得ることを示している。再生された神経をさらに調べると、ガイドの生物吸収性（図２）と神経機能の回復（図３）が示される。

本発明を上述のように説明したので、これらの方法を様々に改変できることは明らかである。そのような改変は本発明の思想と目的からの逸脱であるとはみなされないし、当業者には明らかであるような改変はすべて後述の請求の範囲に包含される。

国際調査報告国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】

１．損傷を受けた神経組織の治療に使用するための医療用具であって、（ａ）生物適合性および生物吸収性の水不溶性ヒアルロン酸エステルからなるマトリックス；（ｂ）該マトリックス中に埋め込まれる生物適合性および生物吸収性の水不溶性ヒアルロン酸エステルからなる糸；および（ｃ）損傷を受けた神経組織の治療に活性を有する活性因子；からなる管状の生物適合性および生物吸収性複合体からなる医療用具。
２．ヒアルロン酸エステルがヒアルロン酸と薬理学的に不活性なアルコールとの全または部分エステルである請求項１に記載の医療用具。
３．アルコールが脂肪族、アリール脂肪族、環式脂肪族または複素環式アルコールである請求項２に記載の医療用具。
４．脂肪族アルコールがＣ１−１２脂肪族アルコールである請求項３に記載の医療用具。
５．エステルがヒアルロン酸の全エステルである請求項１〜４のいずれかに記載の医療用具。
６．エステルがヒアルロン酸の部分エステルである請求項１〜４のいずれかに記載の医療用具。
７．脂肪族アルコールがベンジルアルコールである請求項２に記載の医療用具。
８．ヒアルロン酸エステルがベンジルアルコールで７５％エステル化されたヒアルロン酸エステルである請求項１に記載の医療用具。
９．活性因子が、神経成長因子、毛様体神経栄養因子、脳由来の神経栄養因子、ニューロトロピン−３、ガンダリオシド、ガンダリオシド誘導体、およびこれらの混合物からなる群から選ばれる一員である請求項１〜８のいずれかに記載の医療用具。
１０．活性因子と糸がマトリックス中に同時押出しされる請求項９に記載の医療用具。
１１．最低１５０デニールの値、最低０．４ｇ／デニールの破断点引張強さ、および最低２％の伸びを有する請求項１〜１０のいずれかに記載の医療用具。
１２．約４〜２５ｍｇ／ｃｍの重量を有する請求項１〜１１のいずれかに記載の医療用具。
１３．８０〜１０００μｍの厚みを有する請求項１〜１２のいずれかに記載の医療用具。
１４．複合体が少なくとも２層のコイル化された糸からなる請求項１〜１３のいずれかに記載の医療用具。
１５．コイル化された糸の密度が少なくとも３コイル／ｃｍ２である請求項１４に記載の医療用具。
１６．マトリックスと糸の織り込み管からなる請求項１〜１５のいずれかに記載の医療用具。
１７．織り込み管が生物分解性かつ不溶性のヒアルロン酸エステル中に埋め込まれている請求項１６に記載の医療用具。
１８．損傷を受けた神経の治療のための、請求項１〜１６のいずれかに記載の医療用具の使用。
１９．神経組織の再生を増強、促進または刺激するための、請求項１〜１６のいずれかに記載の医療用具の使用。
２０．生物適合性および生物吸収性の水不溶性ヒアルロン酸エステルからなるマトリックスおよび糸であって、該糸が該マトリックス中に埋め込まれた管状の生物適合性および生物吸収性複合体内に損傷を受けた神経を確保することからなる神経組織の治療方法。
２１．ヒアルロン酸エステルがヒアルロン酸と薬理学的に不活性なアルコールとの全または部分エステルである請求項２０に記載の方法。
２２．アルコールがＣ１−１２脂肪族アルコールである請求項２１に記載の方法。
２３．アルコールがベンジルアルコールである請求項２１に記載の方法。
２４．生物適合性および生物吸収性の水不溶性ヒアルロン酸エステルからなる糸およびマトリックスであって、糸分配器に機能的に結合させた回転円筒鋳型を用いて、該糸を該マトリックス中に埋め込んで巻取ることからなる医療用具の製造方法。