JPH06217797A - ナトリウムイオンの定量方法 - Google Patents
ナトリウムイオンの定量方法Info
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- JPH06217797A JPH06217797A JP1192493A JP1192493A JPH06217797A JP H06217797 A JPH06217797 A JP H06217797A JP 1192493 A JP1192493 A JP 1192493A JP 1192493 A JP1192493 A JP 1192493A JP H06217797 A JPH06217797 A JP H06217797A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 簡便にかつ迅速なナトリウムイオンの定量法
を提供する。 【構成】 水性媒体中、試料中のナトリウムイオンを及
び単環式クラウンエーテルの存在下、β−ガラクトシダ
ーゼにβ−ガラクトシダーゼの基質を作用させ、反応後
β−ガラクトシダーゼの基質または反応生成物の量の変
化を測定することを特徴とするナトリウムイオンの定量
方法。
を提供する。 【構成】 水性媒体中、試料中のナトリウムイオンを及
び単環式クラウンエーテルの存在下、β−ガラクトシダ
ーゼにβ−ガラクトシダーゼの基質を作用させ、反応後
β−ガラクトシダーゼの基質または反応生成物の量の変
化を測定することを特徴とするナトリウムイオンの定量
方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は単環式クラウンエーテル
の存在下、β−ガラクトシダーゼ反応を用いたナトリウ
ムイオンの定量方法に関する。
の存在下、β−ガラクトシダーゼ反応を用いたナトリウ
ムイオンの定量方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】β−ガラクトシダーゼの基質にβ−ガラ
クトシダーゼを作用させるとナトリウムイオン量に比例
してβ−ガラクトシダーゼの活性が増加することが知ら
れており、これを利用する生体試料中のナトリウムイオ
ンの酵素的定量方法が知られている。該定量方法におい
ては、一般に生体試料中のナトリウムイオン濃度が高濃
度であるため、検量線の直線性が得られにくく、ナトリ
ウムイオン濃度を減少させる目的で、次式（Ａ）
クトシダーゼを作用させるとナトリウムイオン量に比例
してβ−ガラクトシダーゼの活性が増加することが知ら
れており、これを利用する生体試料中のナトリウムイオ
ンの酵素的定量方法が知られている。該定量方法におい
ては、一般に生体試料中のナトリウムイオン濃度が高濃
度であるため、検量線の直線性が得られにくく、ナトリ
ウムイオン濃度を減少させる目的で、次式（Ａ）
【０００３】
【化２】
【０００４】で表される4,7,13,16,21- ペンタオキサ-
1,10-ジアザビシクロ[8.8.5] トリコサン〔クリプトフ
ィクス（商標名）２２１〕を添加する方法が知られてい
る〔クリニカルケミストリー（Clinical Chemistory)，
34巻,2295 頁，1988年〕。
1,10-ジアザビシクロ[8.8.5] トリコサン〔クリプトフ
ィクス（商標名）２２１〕を添加する方法が知られてい
る〔クリニカルケミストリー（Clinical Chemistory)，
34巻,2295 頁，1988年〕。
【０００５】１８−クラウン−６等の単環式クラウンエ
ーテルがナトリウムイオンと配位することがジャーナル
オブ オルガニックケミストリー（J.Org.Chem.),47
巻,147頁，1982年に記載されている。
ーテルがナトリウムイオンと配位することがジャーナル
オブ オルガニックケミストリー（J.Org.Chem.),47
巻,147頁，1982年に記載されている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】クリプトフィクス２２
１等二環式化合物を用いる方法は、クリプテートの解離
速度が小さく測定までの予備反応に時間がかかり、測定
操作の簡便さに欠けること、またこのような性質からク
リプトフィクス２２１とβ−ガラクトシダーゼをプレイ
ンキュベーションさせるため、クリプトフィクス２２１
によりβ−ガラクトシダーゼの安定性が損なわれ低濃度
のナトリウムイオンの定量性に欠けること等の問題があ
り、より良い方法の開発が望まれている。
１等二環式化合物を用いる方法は、クリプテートの解離
速度が小さく測定までの予備反応に時間がかかり、測定
操作の簡便さに欠けること、またこのような性質からク
リプトフィクス２２１とβ−ガラクトシダーゼをプレイ
ンキュベーションさせるため、クリプトフィクス２２１
によりβ−ガラクトシダーゼの安定性が損なわれ低濃度
のナトリウムイオンの定量性に欠けること等の問題があ
り、より良い方法の開発が望まれている。
【０００７】本発明により、定量性が良く、迅速かつ簡
便な生体中のナトリウムイオンの新規な定量方法が提供
される。
便な生体中のナトリウムイオンの新規な定量方法が提供
される。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明は、水性媒体中、
試料中のナトリウムイオン及び単環式クラウンエーテル
の存在下、β−ガラクトシダーゼにβ−ガラクトシダー
ゼの基質を作用させ、反応後β−ガラクトシダーゼの基
質または反応生成物の量の変化を測定することを特徴と
するナトリウムイオンの定量方法に関する。
試料中のナトリウムイオン及び単環式クラウンエーテル
の存在下、β−ガラクトシダーゼにβ−ガラクトシダー
ゼの基質を作用させ、反応後β−ガラクトシダーゼの基
質または反応生成物の量の変化を測定することを特徴と
するナトリウムイオンの定量方法に関する。
【０００９】本発明において、水性媒体とは、緩衝液、
生理食塩水等水を含有する液体を表し、緩衝液として
は、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−塩酸緩
衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、シ
ュウ酸緩衝液、フタル酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、グリシ
ン緩衝液、バルビタール緩衝液またはグッド（ＧＯＯ
Ｄ）の緩衝液等があげられる。
生理食塩水等水を含有する液体を表し、緩衝液として
は、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン−塩酸緩
衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、シ
ュウ酸緩衝液、フタル酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、グリシ
ン緩衝液、バルビタール緩衝液またはグッド（ＧＯＯ
Ｄ）の緩衝液等があげられる。
【００１０】ナトリウムイオンを含む試料とは、水性媒
体に混和する試料であればどのようなものでもよいが、
血液、血清、細胞等原子吸光法では測定しにくい生体中
の試料についても測定できる。
体に混和する試料であればどのようなものでもよいが、
血液、血清、細胞等原子吸光法では測定しにくい生体中
の試料についても測定できる。
【００１１】単環式クラウンエーテルとは、単環式クラ
ウンエーテルでナトリウムイオンと錯体を形成するもの
であればどのようなものでもよいが、式（Ｉ）
ウンエーテルでナトリウムイオンと錯体を形成するもの
であればどのようなものでもよいが、式（Ｉ）
【００１２】
【化３】
【００１３】｛式中、ｍは０〜２の整数を表し、ｎは４
〜８の整数を表し、Ｒ1 、Ｒ2 およびＲ3 は同一または
異なって、水素、鎖中に１〜３個のエーテル結合を有し
てもよいヒドロキシ置換もしくは非置換の低級アルキ
ル、低級アルコキシ、低級アルケニルまたはアラルキル
を表し、ここで化合物中に複数存在するＲ1 、Ｒ2 およ
びＲ3 （ｍ＝２の場合）は同一または異なってもよく、
またｍ＝２のとき、−ＣＨ 2 ＣＨ2 ＮＲ3 −は、隣接ま
たは−ＯＣＲ1 Ｒ2 ＣＨ2 −のくり返し単位の任意の位
置にはさまれていてもよい｝で表される化合物であるこ
とが好ましい。
〜８の整数を表し、Ｒ1 、Ｒ2 およびＲ3 は同一または
異なって、水素、鎖中に１〜３個のエーテル結合を有し
てもよいヒドロキシ置換もしくは非置換の低級アルキ
ル、低級アルコキシ、低級アルケニルまたはアラルキル
を表し、ここで化合物中に複数存在するＲ1 、Ｒ2 およ
びＲ3 （ｍ＝２の場合）は同一または異なってもよく、
またｍ＝２のとき、−ＣＨ 2 ＣＨ2 ＮＲ3 −は、隣接ま
たは−ＯＣＲ1 Ｒ2 ＣＨ2 −のくり返し単位の任意の位
置にはさまれていてもよい｝で表される化合物であるこ
とが好ましい。
【００１４】式（Ｉ）において、低級アルキルおよび低
級アルコキシのアルキル部分とは、直鎖または分岐状の
炭素数１〜６のアルキルを表し、例えばメチル、エチ
ル、プロピル、イソプロピル、ブチル、tert−ブチル、
ペンチル、ヘキシル等があげられ、エーテル結合を有
し、ヒドロキシで置換されていてもよいアルキルとして
は例えば、−ＣＨ2 ＯＣＨ3 、−ＣＨ2 ＯＣＨ2 ＣＨ2
ＯＣＨ3 、−ＣＨ2 ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ2 ＯＣＨ3 、−Ｃ
Ｈ2 ＣＨ2 ＯＣＨ3 、−ＣＨ2 ＣＨ2 ＯＣＨ2 ＣＨ 2 Ｏ
ＣＨ3 等があげられる。低級アルケニルとは直鎖または
分岐状の炭素数２〜６の例えばビニル、アリル、イソプ
ロペニル等があげられる。アラルキルとしては、炭素数
７〜２０のベンジル、フェネチル、ベンズヒドリル、フ
ェニルプロピル等があげられる。
級アルコキシのアルキル部分とは、直鎖または分岐状の
炭素数１〜６のアルキルを表し、例えばメチル、エチ
ル、プロピル、イソプロピル、ブチル、tert−ブチル、
ペンチル、ヘキシル等があげられ、エーテル結合を有
し、ヒドロキシで置換されていてもよいアルキルとして
は例えば、−ＣＨ2 ＯＣＨ3 、−ＣＨ2 ＯＣＨ2 ＣＨ2
ＯＣＨ3 、−ＣＨ2 ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ2 ＯＣＨ3 、−Ｃ
Ｈ2 ＣＨ2 ＯＣＨ3 、−ＣＨ2 ＣＨ2 ＯＣＨ2 ＣＨ 2 Ｏ
ＣＨ3 等があげられる。低級アルケニルとは直鎖または
分岐状の炭素数２〜６の例えばビニル、アリル、イソプ
ロペニル等があげられる。アラルキルとしては、炭素数
７〜２０のベンジル、フェネチル、ベンズヒドリル、フ
ェニルプロピル等があげられる。
【００１５】以下、式（Ｉ）で示される化合物を化合物
（Ｉ）と称する。化合物（Ｉ）は市販されていて入手で
き、また「機能性環状化合物の応用，武田裕之編，アイ
・ピー・シー社刊，１９９０年」等を参考にして製造す
ることができる。
（Ｉ）と称する。化合物（Ｉ）は市販されていて入手で
き、また「機能性環状化合物の応用，武田裕之編，アイ
・ピー・シー社刊，１９９０年」等を参考にして製造す
ることができる。
【００１６】本発明に用いられる代表的な化合物（Ｉ）
の構造を第１表に示す。
の構造を第１表に示す。
【００１７】
【表１】
【００１８】本発明におけるβ−ガラクトシダーゼとは
酵素番号〔ＥＣ．３．２．１．２３〕に属する酵素であ
ればよく、動物中、微生物中または植物中から採取した
β−ガラクトシダーゼあるいはそれらを遺伝子工学によ
り改変し製造した酵素が含まれる。
酵素番号〔ＥＣ．３．２．１．２３〕に属する酵素であ
ればよく、動物中、微生物中または植物中から採取した
β−ガラクトシダーゼあるいはそれらを遺伝子工学によ
り改変し製造した酵素が含まれる。
【００１９】β−ガラクトシダーゼの基質とは、、合成
品あるいは天然物のいずれでもよく、例えば、β−Ｄ−
ガラクトシド、アリールβ−Ｄ−ガラクトシド、アルキ
ルβ−Ｄ−ガラクトシド、３，６−ジヒドロキシフルオ
ランβ−Ｄ−ガラクトシド、ニトロフェニルβ−Ｄ−ピ
ラノグリコシド、ニトロフェニルβ−Ｄ−ガラクトシ
ド、ラクチノール、ラクトース、４−メチルウムベリフ
ェリルβ−Ｄ−ガラクトシド等があげられる。
品あるいは天然物のいずれでもよく、例えば、β−Ｄ−
ガラクトシド、アリールβ−Ｄ−ガラクトシド、アルキ
ルβ−Ｄ−ガラクトシド、３，６−ジヒドロキシフルオ
ランβ−Ｄ−ガラクトシド、ニトロフェニルβ−Ｄ−ピ
ラノグリコシド、ニトロフェニルβ−Ｄ−ガラクトシ
ド、ラクチノール、ラクトース、４−メチルウムベリフ
ェリルβ−Ｄ−ガラクトシド等があげられる。
【００２０】反応液中で減少するβ−ガラクトシダーゼ
の基質量の変化は、前述の例えば、ニトロフェニルエス
テル等の基質の減少を吸光度等で測定することにより求
めることができる。
の基質量の変化は、前述の例えば、ニトロフェニルエス
テル等の基質の減少を吸光度等で測定することにより求
めることができる。
【００２１】反応液中で生成するβ−ガラクトシダーゼ
反応生成物の量は、例えば前述の基質から、β−ガラク
トシダーゼ反応により生成するガラクトース、アグリコ
ン部、３，６−ジヒドロキシフルオラン、ニトロフェノ
ール等を比色法、吸光光度法、蛍光光度法、酸化還元測
定法、高速液体クロマトグラフィー法等で測定すること
により求めることができる。また、該酵素反応をガラク
トースデヒドロゲナーゼ等と共役させて、生成する還元
型補酵素量を定量してもよい。
反応生成物の量は、例えば前述の基質から、β−ガラク
トシダーゼ反応により生成するガラクトース、アグリコ
ン部、３，６−ジヒドロキシフルオラン、ニトロフェノ
ール等を比色法、吸光光度法、蛍光光度法、酸化還元測
定法、高速液体クロマトグラフィー法等で測定すること
により求めることができる。また、該酵素反応をガラク
トースデヒドロゲナーゼ等と共役させて、生成する還元
型補酵素量を定量してもよい。
【００２２】以下に本発明のナトリウムイオンの定量法
について説明する。トリス（ヒドロキシメチル）アミノ
メタン−塩酸緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、コハ
ク酸緩衝液、シュウ酸緩衝液、フタル酸緩衝液、ホウ酸
緩衝液、グリシン緩衝液、バルビタール緩衝液またはグ
ッド（ＧＯＯＤ）の緩衝液等の緩衝液（１５０〜１００
０ｍＭ／Ｌ溶液：ｐＨ６．５〜９．５）に、化合物
（Ｉ）の５０〜１０００ｍＭ／Ｌ溶液および試料を加え
る。該溶液にβ−ガトシダーゼの基質２５０μＭ／Ｌ〜
４ｍＭ／Ｌまたはβ−ガラクトトシダーゼ２５〜７５０
０単位／Ｌを添加し、８〜５０℃で１秒間以上予備反応
させる。次に前記と同量のβ−ガラクトトシダーゼおよ
びβ−ガラクトシダーゼの基質を各々加え、８〜５０℃
で１秒以上反応させる。反応液中で減少するβ−ガラク
トシダーゼの基質量を上述の方法により測定するかまた
は反応液中で生成するβ−ガラクトシダーゼ反応生成物
の量を上述の方法により測定し、β−ガラクトシダーゼ
反応で消費された基質量を測定する。当該酵素反応にお
いては、試料中のナトリウムイオン相当量の基質が消費
されるので、当該測定法によりナトリウムイオンの定量
を行うことができる。
について説明する。トリス（ヒドロキシメチル）アミノ
メタン−塩酸緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、コハ
ク酸緩衝液、シュウ酸緩衝液、フタル酸緩衝液、ホウ酸
緩衝液、グリシン緩衝液、バルビタール緩衝液またはグ
ッド（ＧＯＯＤ）の緩衝液等の緩衝液（１５０〜１００
０ｍＭ／Ｌ溶液：ｐＨ６．５〜９．５）に、化合物
（Ｉ）の５０〜１０００ｍＭ／Ｌ溶液および試料を加え
る。該溶液にβ−ガトシダーゼの基質２５０μＭ／Ｌ〜
４ｍＭ／Ｌまたはβ−ガラクトトシダーゼ２５〜７５０
０単位／Ｌを添加し、８〜５０℃で１秒間以上予備反応
させる。次に前記と同量のβ−ガラクトトシダーゼおよ
びβ−ガラクトシダーゼの基質を各々加え、８〜５０℃
で１秒以上反応させる。反応液中で減少するβ−ガラク
トシダーゼの基質量を上述の方法により測定するかまた
は反応液中で生成するβ−ガラクトシダーゼ反応生成物
の量を上述の方法により測定し、β−ガラクトシダーゼ
反応で消費された基質量を測定する。当該酵素反応にお
いては、試料中のナトリウムイオン相当量の基質が消費
されるので、当該測定法によりナトリウムイオンの定量
を行うことができる。
【００２３】本発明方法を実施する際、反応液の濁りの
発生防止等のため、必要に応じてトリトンＸ−１００等
の界面活性剤を加えることができる。また必要に応じて
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ヒト血清アルブミン
（ＨＳＡ）、ヒト免疫グロブリン、卵白アルブミン等の
タンパク質、ジメチルスルホキシド等の可溶化剤、ジチ
オスライトール等の抗酸化剤、硫酸マグネシウム等のβ
−ガラクトシダーゼの活性化剤、塩化リチウム、リチウ
ムエチレンビス（オキシエチレンニトリロ）テトラ酢酸
リチウム（ＥＧＴＡ）等のクラウンエーテルの効果を増
強するためのナトリウムの阻害剤を添加することも可能
である。
発生防止等のため、必要に応じてトリトンＸ−１００等
の界面活性剤を加えることができる。また必要に応じて
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ヒト血清アルブミン
（ＨＳＡ）、ヒト免疫グロブリン、卵白アルブミン等の
タンパク質、ジメチルスルホキシド等の可溶化剤、ジチ
オスライトール等の抗酸化剤、硫酸マグネシウム等のβ
−ガラクトシダーゼの活性化剤、塩化リチウム、リチウ
ムエチレンビス（オキシエチレンニトリロ）テトラ酢酸
リチウム（ＥＧＴＡ）等のクラウンエーテルの効果を増
強するためのナトリウムの阻害剤を添加することも可能
である。
【００２４】本発明に用いた単環式クラウンエーテル
は、クリプトフィクス２２１よりナトリウムとの結合力
が極めて弱いものの、ナトリウムイオンの取り込み、放
出速度が大きいため、測定までの予備反応に時間がかか
らず、β−ガラクトシダーゼとのプレインキュベーショ
ンの必要が無いため、β−ガラクトシダーゼの安定性を
損なうことも無い。従って単環式クラウンエーテルを用
いた本発明により、定量性が良く、迅速かつ簡便な生体
中のナトリウムイオンの新規な定量方法が提供される。
は、クリプトフィクス２２１よりナトリウムとの結合力
が極めて弱いものの、ナトリウムイオンの取り込み、放
出速度が大きいため、測定までの予備反応に時間がかか
らず、β−ガラクトシダーゼとのプレインキュベーショ
ンの必要が無いため、β−ガラクトシダーゼの安定性を
損なうことも無い。従って単環式クラウンエーテルを用
いた本発明により、定量性が良く、迅速かつ簡便な生体
中のナトリウムイオンの新規な定量方法が提供される。
【００２５】以下に本発明の実施例を示す。
【００２６】
実施例１ （１）ナトリウムイオン検量線用標準液の作成 塩化ナトリウム（和光純薬工業製）を蒸留水で希釈し、
反応液中７０ｍＭ／Ｌ、１４０ｍＭ／Ｌ、１８０ｍＭ／
Ｌのナトリウム検量線用標準液を調製した。
反応液中７０ｍＭ／Ｌ、１４０ｍＭ／Ｌ、１８０ｍＭ／
Ｌのナトリウム検量線用標準液を調製した。
【００２７】（２）ナトリウムイオンの定量試験管にナ
トリウムイオン検量線用標準液０．０３ｍＬを添加した
後、予め３７℃に加温したβ−ガラクトシダーゼ（シグ
マ社製）５５０単位／Ｌ、ＤＬ−ジチオスライトール
（シグマ社製）５ｍＭ／Ｌ、硫酸マグネシウム（シグマ
社製）１１．２ｍＭ／Ｌ、塩化リチウム（和光純薬）２
４ｍＭ／ＬおよびリチウムＥＧＴＡ（シグマ社製）０．
５ｍＭ／Ｌを含む５００ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ
７．４）２．０ｍＬを加えた。これに予め３７℃に加温
した１８−クラウン−６（和光純薬製）３６０ｍＭ／Ｌ
およびｏ−ニトロフェニルβ−Ｄ−ピラノグリコシド
（メルク社製）２ｍＭ／Ｌを含む蒸留水１．０ｍＬを加
え、攪拌混合させて３７℃で反応させて１分間に生成す
るｐ−ニトロフェノールの量を、分光光度計（ＵＶ３４
００日立製）を用いて４２０ｎｍの可視部の吸収強度か
ら定量した。得られた検量線を図１に示した。
トリウムイオン検量線用標準液０．０３ｍＬを添加した
後、予め３７℃に加温したβ−ガラクトシダーゼ（シグ
マ社製）５５０単位／Ｌ、ＤＬ−ジチオスライトール
（シグマ社製）５ｍＭ／Ｌ、硫酸マグネシウム（シグマ
社製）１１．２ｍＭ／Ｌ、塩化リチウム（和光純薬）２
４ｍＭ／ＬおよびリチウムＥＧＴＡ（シグマ社製）０．
５ｍＭ／Ｌを含む５００ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ
７．４）２．０ｍＬを加えた。これに予め３７℃に加温
した１８−クラウン−６（和光純薬製）３６０ｍＭ／Ｌ
およびｏ−ニトロフェニルβ−Ｄ−ピラノグリコシド
（メルク社製）２ｍＭ／Ｌを含む蒸留水１．０ｍＬを加
え、攪拌混合させて３７℃で反応させて１分間に生成す
るｐ−ニトロフェノールの量を、分光光度計（ＵＶ３４
００日立製）を用いて４２０ｎｍの可視部の吸収強度か
ら定量した。得られた検量線を図１に示した。
【００２８】クリプトフィクス２２１はβ−ガラクトシ
ダーゼとのプレインキュベーションを必要とする方法で
１１０〜１６０ｍＭのナトリウム濃度で検量線の直線性
が得られることが知られている（Clinical Chemistory
，34巻,2295 頁，1988年) 。図１によれば、１８−ク
ラウン−６はクリプトフィクス２２１と異なり、β−ガ
ラクトシダーゼとのプレインキュベーションを行わない
より簡便な方法で、７０〜１８０ｍＭのナトリウム濃度
で検量線の直線性が得られた。
ダーゼとのプレインキュベーションを必要とする方法で
１１０〜１６０ｍＭのナトリウム濃度で検量線の直線性
が得られることが知られている（Clinical Chemistory
，34巻,2295 頁，1988年) 。図１によれば、１８−ク
ラウン−６はクリプトフィクス２２１と異なり、β−ガ
ラクトシダーゼとのプレインキュベーションを行わない
より簡便な方法で、７０〜１８０ｍＭのナトリウム濃度
で検量線の直線性が得られた。
【００２９】実施例２ナトリウムイオン検量線用標準液
の代わりにヒトから得た血清２検体を試料として用い、
アルブミン５ｇ／Ｌを反応液に添加する以外は、実施例
１と同様の方法によりナトリウム濃度を測定した。結果
を第２表に示した。
の代わりにヒトから得た血清２検体を試料として用い、
アルブミン５ｇ／Ｌを反応液に添加する以外は、実施例
１と同様の方法によりナトリウム濃度を測定した。結果
を第２表に示した。
【００３０】
【表２】
【００３１】第２表によれば、本発明方法による測定値
と炎光法による測定値が一致した。
と炎光法による測定値が一致した。
【００３２】実施例３１８−クラウン−６の代わりにＮ
−〔２−（メトキシエトキシ）エチル〕モノアゾ−１５
−クラウン−５を用いる以外は実施例１と同様の方法に
より得た検量線を図２に示した。
−〔２−（メトキシエトキシ）エチル〕モノアゾ−１５
−クラウン−５を用いる以外は実施例１と同様の方法に
より得た検量線を図２に示した。
【００３３】図２によれば、Ｎ−〔２−（メトキシエト
キシ）エチル〕モノアゾ−１５−クラウン−５も１８−
クラウン−６と同様にプレインキュベーションを行わな
いより簡便な方法で、１１０〜１８０ｍＭのナトリウム
濃度で検量線の直線性が得られた。
キシ）エチル〕モノアゾ−１５−クラウン−５も１８−
クラウン−６と同様にプレインキュベーションを行わな
いより簡便な方法で、１１０〜１８０ｍＭのナトリウム
濃度で検量線の直線性が得られた。
【００３４】
【発明の効果】本発明により、定量性および再現性がよ
く、簡便にかつ迅速にナトリウムイオンを測定すること
ができる方法が提供される。
く、簡便にかつ迅速にナトリウムイオンを測定すること
ができる方法が提供される。
【図１】 １８−クラウン−６を用いたときのナトリウ
ムの検量線。
ムの検量線。
【図２】 Ｎ−〔２−（メトキシエトキシ）エチル〕モ
ノアゾ−１５−クラウン−５を用いたときのナトリウム
の検量線。
ノアゾ−１５−クラウン−５を用いたときのナトリウム
の検量線。
Claims (2)
- 【請求項１】 水性媒体中、試料中のナトリウムイオン
及び単環式クラウンエーテルの存在下、β−ガラクトシ
ダーゼにβ−ガラクトシダーゼの基質を作用させ、反応
後β−ガラクトシダーゼの基質または反応生成物の量の
変化を測定することを特徴とするナトリウムイオンの定
量方法。 - 【請求項２】 単環式クラウンエーテルが式（Ｉ） 【化１】 ｛式中、ｍは０〜２の整数を表し、ｎは４〜８の整数を
表し、Ｒ1 、Ｒ2 およびＲ3 は同一または異なって、水
素、鎖中に１〜３個のエーテル結合を有してもよいヒド
ロキシ置換もしくは非置換の低級アルキル、低級アルコ
キシ、低級アルケニルまたはアラルキルを表し、ここで
化合物中に複数存在するＲ1 、Ｒ2 およびＲ3 （ｍ＝２
の場合）は同一または異なってもよく、またｍ＝２のと
き、−ＣＨ 2 ＣＨ2 ＮＲ3 −は、隣接または−ＯＣＲ1
Ｒ2 ＣＨ2 −のくり返し単位の任意の位置にはさまれて
いてもよい｝で表される化合物である請求項１記載の定
量方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1192493A JPH06217797A (ja) | 1993-01-27 | 1993-01-27 | ナトリウムイオンの定量方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1192493A JPH06217797A (ja) | 1993-01-27 | 1993-01-27 | ナトリウムイオンの定量方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06217797A true JPH06217797A (ja) | 1994-08-09 |
Family
ID=11791238
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1192493A Withdrawn JPH06217797A (ja) | 1993-01-27 | 1993-01-27 | ナトリウムイオンの定量方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06217797A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016031885A1 (ja) * | 2014-08-27 | 2016-03-03 | 合同酒精株式会社 | ラクターゼ溶液及びそれを用いた乳 |
| KR20160044275A (ko) * | 2014-10-15 | 2016-04-25 | 경희대학교 산학협력단 | 초임계 추출용 신규 킬레이트 리간드, 이의 제조방법 및 이를 이용한 금속추출방법 |
-
1993
- 1993-01-27 JP JP1192493A patent/JPH06217797A/ja not_active Withdrawn
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016031885A1 (ja) * | 2014-08-27 | 2016-03-03 | 合同酒精株式会社 | ラクターゼ溶液及びそれを用いた乳 |
| JP5931303B1 (ja) * | 2014-08-27 | 2016-06-08 | 合同酒精株式会社 | ラクターゼ溶液及びそれを用いた乳 |
| KR20160044275A (ko) * | 2014-10-15 | 2016-04-25 | 경희대학교 산학협력단 | 초임계 추출용 신규 킬레이트 리간드, 이의 제조방법 및 이를 이용한 금속추출방법 |
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