JPH06165671A - 線虫の天敵微生物の増殖方法 - Google Patents
線虫の天敵微生物の増殖方法Info
- Publication number
- JPH06165671A JPH06165671A JP4343551A JP34355192A JPH06165671A JP H06165671 A JPH06165671 A JP H06165671A JP 4343551 A JP4343551 A JP 4343551A JP 34355192 A JP34355192 A JP 34355192A JP H06165671 A JPH06165671 A JP H06165671A
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- Japan
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- microorganism
- natural enemy
- nematode
- growth
- phase
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- Pending
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- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】天敵微生物の増殖相の中で増殖活性の高い相を
微生物増殖用の接種源として培地に添加することによっ
て、効率の良い線虫の天敵微生物の増殖方法を提供す
る。 【構成】天敵微生物の一連の増殖形態中、最も増殖活性
が高い増殖相を線虫の体内から採取して接種源とした。
微生物増殖用の接種源として培地に添加することによっ
て、効率の良い線虫の天敵微生物の増殖方法を提供す
る。 【構成】天敵微生物の一連の増殖形態中、最も増殖活性
が高い増殖相を線虫の体内から採取して接種源とした。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は作物に被害をもたらす植
物寄生性線虫の防除手段として有用な、線虫の天敵微生
物の生産に関するものである。
物寄生性線虫の防除手段として有用な、線虫の天敵微生
物の生産に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】土壌中に棲息する線虫を防除するため
に、従来は薫蒸剤などの化学的防除剤が使用されてき
た。しかし環境汚染への懸念から、化学薬剤を用いず線
虫の天敵微生物を用いて線虫害を防除する方法が求めら
れている。
に、従来は薫蒸剤などの化学的防除剤が使用されてき
た。しかし環境汚染への懸念から、化学薬剤を用いず線
虫の天敵微生物を用いて線虫害を防除する方法が求めら
れている。
【０００３】線虫の天敵微生物の中で絶対寄生菌に分類
されているパストリア属細菌は、寄主線虫のみを宿主と
して増殖するために、土壌の生物環境を攪乱しない好適
な微生物として実用化が望まれている。
されているパストリア属細菌は、寄主線虫のみを宿主と
して増殖するために、土壌の生物環境を攪乱しない好適
な微生物として実用化が望まれている。
【０００４】本微生物の増殖方法としては、植物の土壌
に微生物を寄生させた線虫を接種して、植物の根で増殖
した微生物を回収する方法がおこなわれている。しかし
この方法による微生物の増殖効率は、農業への適用には
不十分な水準である。
に微生物を寄生させた線虫を接種して、植物の根で増殖
した微生物を回収する方法がおこなわれている。しかし
この方法による微生物の増殖効率は、農業への適用には
不十分な水準である。
【０００５】このため微生物培養の手段によってこの微
生物を直接的に培養しようとする試みが、本微生物の胞
子や、微生物を寄生させた線虫の二期幼虫が接種源とし
て用いておこなわれたが、現在まで成功に至っていな
い。ウィリアムズらは、胞子を用いた本微生物の培養に
ついて検討し、人工培養に成功しなかったと報告してい
る（Journal of Applied Bacteriology (1989) 67,145-
156)。
生物を直接的に培養しようとする試みが、本微生物の胞
子や、微生物を寄生させた線虫の二期幼虫が接種源とし
て用いておこなわれたが、現在まで成功に至っていな
い。ウィリアムズらは、胞子を用いた本微生物の培養に
ついて検討し、人工培養に成功しなかったと報告してい
る（Journal of Applied Bacteriology (1989) 67,145-
156)。
【０００６】ビショップらは（Biocontrol Science & T
echnology (1991)1.101-104) 、線虫の体内から採取し
た天敵微生物の増殖相を微生物の接種源として増殖用の
培地に加えて人工培養に適した培地の組成を検討した。
ビショップらは本微生物の同調的な調製が難しく、接種
源として不適な発生が進んだために増殖活性が低下した
微生物の相が混入することを報告している。
echnology (1991)1.101-104) 、線虫の体内から採取し
た天敵微生物の増殖相を微生物の接種源として増殖用の
培地に加えて人工培養に適した培地の組成を検討した。
ビショップらは本微生物の同調的な調製が難しく、接種
源として不適な発生が進んだために増殖活性が低下した
微生物の相が混入することを報告している。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、難培養性で
あるために絶対寄生菌とみなされているパストリア属細
菌を人工培養するための手段を提供することにある。
あるために絶対寄生菌とみなされているパストリア属細
菌を人工培養するための手段を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者はパストリア属
細菌の増殖の難易に影響を与える因子について鋭意検討
した結果、接種源として用いる寄生菌の増殖相の増殖活
性が人工培養における増殖の成否を決定する重要因子で
あることを知見し、線虫の体内から採取した寄生菌の増
殖活性の高い相を接種源として使用することにより、さ
らに好適な増殖用の培地を用いることによってパストリ
ア属細菌が人工培地中で良好に増殖して多数の胞子を形
成することを発見して本発明を完成した。なお、ここで
述べる増殖活性の高い相とは、パストリア属細菌の増殖
相のうち、マザーコロニーから後期ベジタティブまでの
段階の増殖相を指す（BHATTACHARYA & SWARUP,Indian
J.Nematol.,18(1):61-70,1988, SAYRE & WERGIN,J.Bact
eriol.129:1091-1101,1977） 。
細菌の増殖の難易に影響を与える因子について鋭意検討
した結果、接種源として用いる寄生菌の増殖相の増殖活
性が人工培養における増殖の成否を決定する重要因子で
あることを知見し、線虫の体内から採取した寄生菌の増
殖活性の高い相を接種源として使用することにより、さ
らに好適な増殖用の培地を用いることによってパストリ
ア属細菌が人工培地中で良好に増殖して多数の胞子を形
成することを発見して本発明を完成した。なお、ここで
述べる増殖活性の高い相とは、パストリア属細菌の増殖
相のうち、マザーコロニーから後期ベジタティブまでの
段階の増殖相を指す（BHATTACHARYA & SWARUP,Indian
J.Nematol.,18(1):61-70,1988, SAYRE & WERGIN,J.Bact
eriol.129:1091-1101,1977） 。
【０００９】本発明は線虫の体内から採取した天敵微生
物の増殖活性の高い増殖相を微生物の接種源として増殖
用の培地に加えることを特徴とする人工培養法を用い
た、パストリア属細菌の製造方法である。
物の増殖活性の高い増殖相を微生物の接種源として増殖
用の培地に加えることを特徴とする人工培養法を用い
た、パストリア属細菌の製造方法である。
【００１０】本発明で使用される天敵微生物を内包する
線虫は、宿主植物−寄生性線虫−天敵微生物の三員培養
系によって供給することができる。三員培養系から、天
敵微生物の適当な発生の時期に植物の根を回収し、本微
生物を内包して生存している線虫を適当な組成の培地に
加え、線虫を破砕して内包されている本微生物を培地中
に放出する方法によって、本微生物は人工培地中で良好
な増殖を示す。
線虫は、宿主植物−寄生性線虫−天敵微生物の三員培養
系によって供給することができる。三員培養系から、天
敵微生物の適当な発生の時期に植物の根を回収し、本微
生物を内包して生存している線虫を適当な組成の培地に
加え、線虫を破砕して内包されている本微生物を培地中
に放出する方法によって、本微生物は人工培地中で良好
な増殖を示す。
【００１１】このような本発明の増殖活性の高い増殖相
の取得方法は、胞子を人為的に発芽させて増殖可能な相
を得ることが難しい天敵微生物の人工培養のための手法
として好適である。
の取得方法は、胞子を人為的に発芽させて増殖可能な相
を得ることが難しい天敵微生物の人工培養のための手法
として好適である。
【００１２】
【実施例】以下本発明を実施例によりさらに詳細に説明
する。
する。
【００１３】人工培養培地の作製 スピロプラズマ培養用のＳＰ−４培地（ATCC Medium ha
ndbook,pp49,1st Ed.,1984）７５ｍｌとセノラデティス
・エレガンスの破砕液２５ｍｌを混合し、苛性ソ−ダで
ｐＨを６．２に合わせ、滅菌濾過をおこなって人工培養
用の培地を作製した。
ndbook,pp49,1st Ed.,1984）７５ｍｌとセノラデティス
・エレガンスの破砕液２５ｍｌを混合し、苛性ソ−ダで
ｐＨを６．２に合わせ、滅菌濾過をおこなって人工培養
用の培地を作製した。
【００１４】実施例１ トマトにパストリア・ペネトランスの胞子が付着してい
るメロイドギネ・インコグニータを接種し、２８℃で栽
培した。線虫接種の１７日後、そのトマトの根を回収
し、滅菌してメロイドギネ・インコグニータの雌成虫を
取り出した。この雌成虫を潰してパストリア・ペネトラ
ンスの増殖活性の高い増殖相を取得した。
るメロイドギネ・インコグニータを接種し、２８℃で栽
培した。線虫接種の１７日後、そのトマトの根を回収
し、滅菌してメロイドギネ・インコグニータの雌成虫を
取り出した。この雌成虫を潰してパストリア・ペネトラ
ンスの増殖活性の高い増殖相を取得した。
【００１５】培養器に人工培養培地を５００μｌを入
れ、６７匹のメロイドギネ・インコグニ−タの雌成虫よ
り取得した増殖活性の高いパストリア・ペネトランスの
増殖相を加え、炭酸ガスインキュベ−タ−中で２８℃に
保った。培養開始８日後に遠心分離機を用いてパストリ
ア・ペネトランスを回収し、増殖相の増加について観察
した。
れ、６７匹のメロイドギネ・インコグニ−タの雌成虫よ
り取得した増殖活性の高いパストリア・ペネトランスの
増殖相を加え、炭酸ガスインキュベ−タ−中で２８℃に
保った。培養開始８日後に遠心分離機を用いてパストリ
ア・ペネトランスを回収し、増殖相の増加について観察
した。
【００１６】培養開始時と８日後のパストリア・ペネト
ランスの各相の観察数を表１に示した。
ランスの各相の観察数を表１に示した。
【００１７】表１ 雌成虫１匹当たりのパストリア属細菌の発生期の形態の
数 増殖期 初期 後期 四葉期 培養開始時 ４８００ ０ ０ ８日後 ２０４００ ５２００ ６８００
数 増殖期 初期 後期 四葉期 培養開始時 ４８００ ０ ０ ８日後 ２０４００ ５２００ ６８００
【００１８】比較例１ 線虫を接種した後、２８℃で２３日間栽培したトマトを
用いて実施例１と同様に実験を行った。栽培日数が１７
日間のものに比べてパストリア・ペネトランスの発生は
進んでおり、各増殖相のうち初期のものは少なく後期や
四葉期のものが大部分を占めていた。
用いて実施例１と同様に実験を行った。栽培日数が１７
日間のものに比べてパストリア・ペネトランスの発生は
進んでおり、各増殖相のうち初期のものは少なく後期や
四葉期のものが大部分を占めていた。
【００１９】培養開始時と８日後のパストリア・ペネト
ランスの各相の観察数を表２に示した。
ランスの各相の観察数を表２に示した。
【００２０】 表２ 雌成虫１匹当たりのパストリア属細菌の発生期の形態の数 増殖期 初期 後期 四葉期 二葉期 胞子形成期 培養開始時 ６１６ １３９０ １７６０ ６００ １６０ ８日後 ８２４ ７６０ ４９６ ４８ ０
【００２１】参考例１ 線虫を接種した後、２８℃で１９日間栽培したトマトを
用いて実施例１と同様に実験を行った。培養器に人工培
養培地８００μl を入れ、７０匹のメロイドギネ・イン
コグニータの雌成虫より取得した増殖期のパストリア・
ペネトランスを加え、炭酸ガスインキュベーター内で２
８℃に保った。培養開始１０日後に遠心分離機を用いて
パストリア・ペネトランスを回収し、胞子形成について
観察した。
用いて実施例１と同様に実験を行った。培養器に人工培
養培地８００μl を入れ、７０匹のメロイドギネ・イン
コグニータの雌成虫より取得した増殖期のパストリア・
ペネトランスを加え、炭酸ガスインキュベーター内で２
８℃に保った。培養開始１０日後に遠心分離機を用いて
パストリア・ペネトランスを回収し、胞子形成について
観察した。
【００２２】培養開始時と１０日後のパストリア・ペネ
トランスの各相の観察数を表３に示した。
トランスの各相の観察数を表３に示した。
【００２３】 表３ 雌成虫１匹当たりのパストリア属細菌の発生期の形態の数 増殖期 初期 後期 四葉期 二葉期 胞子形成期 培養開始時 ２６１０ １４６０ ７４０ １６０ ５０ １０日後 １４８０ ２００ １００ ３０ ４４９０
【００２４】
【発明の効果】線虫の体内から採取した天敵微生物の増
殖活性の高い増殖相を微生物の接種源として増殖用の培
地に加えることを特徴とする本発明の人工培養法は、胞
子を発芽させることがきわめて困難な絶対寄生菌とされ
ている天敵微生物、とくにパストリア属細菌の人工培養
のための手法して好適である。
殖活性の高い増殖相を微生物の接種源として増殖用の培
地に加えることを特徴とする本発明の人工培養法は、胞
子を発芽させることがきわめて困難な絶対寄生菌とされ
ている天敵微生物、とくにパストリア属細菌の人工培養
のための手法して好適である。
Claims (3)
- 【請求項１】 線虫の体内から採取した天敵微生物の増
殖相を微生物の接種源として増殖用の培地に加えること
を特徴とする人工培養法を用いた線虫の天敵微生物の増
殖方法。 - 【請求項２】 線虫の天敵微生物がパストリア属細菌で
ある請求項１に記載の線虫の天敵微生物の増殖方法。 - 【請求項３】 請求項１の目的に適した天敵微生物の増
殖相を取得する方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4343551A JPH06165671A (ja) | 1992-12-01 | 1992-12-01 | 線虫の天敵微生物の増殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4343551A JPH06165671A (ja) | 1992-12-01 | 1992-12-01 | 線虫の天敵微生物の増殖方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06165671A true JPH06165671A (ja) | 1994-06-14 |
Family
ID=18362401
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4343551A Pending JPH06165671A (ja) | 1992-12-01 | 1992-12-01 | 線虫の天敵微生物の増殖方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06165671A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999008534A1 (en) * | 1997-08-15 | 1999-02-25 | University Of Florida | Novel compositions and methods for controlling nematodes |
-
1992
- 1992-12-01 JP JP4343551A patent/JPH06165671A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999008534A1 (en) * | 1997-08-15 | 1999-02-25 | University Of Florida | Novel compositions and methods for controlling nematodes |
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