JPH059745B2 - - Google Patents
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Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、標準的な阻止剤に対して不平行な阻
止曲線を示す体液中の細胞外マトリクス蛋白質プ
ロコラーゲンペプチド又はラミニンP1を、１
価の抗体断片の使用下に免疫学的に測定する方法
並びにこのために好適な１価の抗体断片に関す
る。 従来の技術 免疫学的方法は、例えば血清または尿のような
体液中の、および製織抽出物中の蛋白質およびペ
プチドを特異的および定量的に検出するための、
大きい感度および特異性に優れかつ従つて臨床診
断学に極めて重要であると認められている標準的
方法である。 放射線免疫学的分析は、できるだけ高純度の抗
原（例えば蛋白質またはペプチド）を適当な試験
動物に使用し抗血清を製造することに基づく。こ
の抗血清を、放射性にマーキングされた所定量の
抗原および検査すべき体液と一緒にインキユベー
トする。体液が相応する抗原を含有する場合、形
成された免疫錯体中にわずかな放射能が認められ
る、それというのも放射性マーキングされた１部
の抗原が、体液中に存在するマーキングせざる抗
原により置換されるからである。この放射能マー
キングされた抗原の置換率（阻止率）が体液の添
加量に比例する。この置換反応は、別個のバツチ
中で、既知濃度の精製抗原にマーキングせる蛋白
質／抗血清混合物を添加することにより校正され
る。一般に、２つの阻止剤（精製蛋白質ないしは
体液）で平行な阻止曲線が認められ、その結果体
液中の抗原量が２つの曲線を比較することにより
計算されることができる。 同じ原理に基づく酵素免疫分析の場合、免疫反
応の成分として酵素を使用する（EIA ELISA）。
さらに、マーキングを弗化クロムで実施すること
が可能である。 しかしながら、１連の混合物中で、精製せる標
準蛋白質および体液の阻止曲線が不平行な経過を
示すことが認められる（第１図ａ）。この場合、
通例は、体液曲線の勾配が標準蛋白質曲線よりも
小である。明白にこのことが、量的評価における
著るしい不安定の原因となるか、または量的評価
を不可能とさえする。とくに、この難点が細胞外
マトリクス蛋白質の場合に生じる。 この現象を説明できるのは、体液が、完全な蛋
白質を含有せず、抗体に対し低い親和性を有する
変性された（例えば蛋白質溶解により分解され
た）形で含有するという仮説である。他の説明
は、例えば、検査すべき体液の大きい蛋白質濃度
または粘度のような詳細に特性表示されない一連
の技術的パラメータが包含され、これらパラメー
タが不特定に阻止曲線の変動に寄与することであ
る。 この難点の典型的な観察が、アミノプロペプチ
ド（プロコラーゲンペプチド型）の放射線免疫
分折を研究した際に行なわれた（ローデ等
（Rohde et al.）、Eur.J.Clin.Invest.第９巻、451
〜459頁（1979年））。この場合、血清中の完全な
ペプチドが検出されることができ、かつ真正のア
ミノペプチドと比べ平行な阻止曲線を示した。こ
れに対し尿は、分解せる形のペプチドを含有し、
かつその免疫学的活性が不平行な阻止曲線により
特徴づけられる（第１図ａ）。従つて、尿中のプ
ロコラーゲンの定量は不可能である。 発明が解決しようとする問題点 従つて、本発明の根底をなす課題は、この難点
を解決し、かつ、不利な技術的条件下にある蛋白
質の簡単な定量を可能ならしめる方法をつくり出
すことである。 問題点を解決するための手段 本発明によれば、この課題は、標準的阻止剤に
対し不平行な阻止曲線を示す体液中の細胞外マト
リクス蛋白質プロコラーゲンペプチド又はラミ
ニンP1を免疫学的に定量するための、抗血清と
して特異的な１価の抗体断片を使用する方法によ
り解決される。 免疫学的試験において、１価の抗体断片を使用
することが文献から公知である。しかしながら従
来より一般に、２価の抗体および１価の抗体断片
間に親和力差がないと見做されていた。従つて例
えば、抗体のクレアチンキナーゼに対する阻止作
用では、このために２価または１価の抗体を使用
した際にクレアチンキナーゼ活性に対する差が認
められなかつた（ヴユルツブルク（U.
Wu¨rzburg）、Kontakte3、10〜17頁（1978年））。 従つて意外だつたのは、２価の抗体に代る１価
の抗体断片の使用が、例えば細胞外マトリクス蛋
白質の免疫学的定量における阻止曲線の明白な改
善を生じるか、ないしは若干の場合には免疫学的
定量が全くはじめて可能になることである。 アミノプロペプチドの例からは、完全なプロコ
ラーゲンペプチドをマーキング蛋白質および標準
阻止剤として使用する免疫試験における抗体およ
び１価の抗体断片の比較分析が、２つの場合とも
比較可能な検出感度を示す。尿サンプルは、１価
の抗体断片を使用する試験で平行な阻止曲線を示
し、かつそれとともにこの物質中のプロコラーゲ
ンペプチド型の信頼性ある定量を許容する（第
１図ｂ）。 しかしまた、血清中のアミノプロペプチドを定
量する場合、２価の抗体の代りに１価の抗体断片
を使用するのが有利である。血清の分析は、抗体
断片試験で測定した場合、同じ血清を２価の抗体
により測定した場合と比べ５〜６倍高濃度のプロ
コラーゲンペプチドを示す。血清のモレキユラシ
ーブクロマトグラフイーによる生化学的分析は、
ほぼ５分の１のアミノプロペプチドが完全な物質
（分子量45000）として存在し、残分が分解せる状
態（分子量10000）として存在することを示す。
２価の抗体を使用する試験は、もつぱら完全なア
ミノプロペプチドを検出し、抗体断片試験により
２つの形態が検出され、それにより方法の感度が
改善される。完全な形および分解せる形のアミノ
プロペプチドの、抗体断片試験による広範囲な分
析は、血清−および尿分析の、例えば肝臓フイブ
ローゼの診断への有効な拡張を表わす。 体液中の定量が糖尿病および肝臓疾患の診断に
重要である、前記種類のもう１つの蛋白質の例
が、ヒトラミニンP1である。この場合も、１価
の抗体断片を使用することにより免疫学的定量法
の改善を得ることができた。本発明に適当である
蛋白質の他の例は、コラーゲン、プロコラーゲン
およびフイブロネクチンのような細胞外マトリク
ス蛋白質である。 細胞外マトリクス蛋白質のような蛋白質を、本
発明による１価の抗体断片を使用し免疫学的に定
量するため、公知の全ての免疫学的方法が使用さ
れることができる。例えば、RIA試験の全ての実
施形、例えば、逐次的飽和度分析または平衡分
析、クロラミンＴ（Chloramin Ｔ）またはボルト
ン−ハンター試薬（Bolton−Hunter−Reagenz）
を使用するマーキングが使用されることができる
（文献：フエルバー（Felber）、Meth.Biochem.
Anal.第22巻、１頁、1974年；スケリー等
（Skelly et al.）、Clin.Chem.第19巻、146〜186
頁、1973年）。このことは、酵素免疫試験にも該
当する。制限されるのは、試験が、例えば抗体と
ブドウ球菌の蛋白質Ａとの錯体化のように抗体の
Fc成分（Fab不在）に基づく限り分離技術であ
る。他の、例えば結合または溶解せる形の第２の
抗体の分離法は同じである。同じく、弗化クロム
マーキングせる抗体を使用する方法が適当であ
る。 一般に抗血清の製造は、抗原を試験動物、有利
にウサギに注射することにより行なわれる。この
場合有利に、完全フロイントアジユバントの存在
において作業される。ウサギを使用する際の殊に
適当な用量として、１頭当り0.5〜１mgが有利で
あると判明した。その後に、形成された抗血清
が、当業者に公知の方法で取得され、かつ引続
き、例えば親和クロマトグラフイーの方法により
精製されることができる。 免疫グロブリンに対する第２の抗体を使用する
沈殿は、Fab試験の殊に好適な実施形態である。
この目的で、抗血清がFabに対し十分な抗体を含
有する。従つて、Fabを使用する免疫化は不必要
である。殊に有利な結果が、山羊抗血清を使用し
得られた。 １価の抗体断片は、精製せる抗体から、または
抗血清の免疫グロブリンフラクシヨンから常法に
より製造されることができる。有利な実施例にお
いて、抗体がペプシンにより分解される。引続き
還元され、かつこの方法でFab′断片が得られる。
本発明のもう１つの有利な実施例において、還元
条件下のパパイン分野により製造されたFab断片
が使用される。 効 果 本発明によれば、さもなければ定量困難な、例
えば細胞外マトリクス蛋白質のような蛋白質が高
精度および極めて高感度で免疫学的方法により定
量されうるということが達成され、その場合マー
キングが、放射性に行なわれてもよく、または他
の公知のマーキング法の１つにより代えられるこ
ともできる。本発明は、前記種類の蛋白質ではじ
めて免疫学的定量を可能にした。 実施例 以下に、本発明を実施例につき詳説する。 例 １ プロコラーゲン−−ペプチドを、胎生仔牛の
皮膚から取得しかつ精製する。欧州特許明細書第
4940号に記載されたように、抗血清を、ウサギで
プロコラーゲンまたはプロコラーゲン−−ペ
プチドに対し製造する。 RIA試験のため、プロコラーゲン−−ペプチ
ド25μｇを沃素125 0.5〜１ｍCiでクロラミン−Ｔ
法の使用下にマーキングし、かつ結合せざる沃素
を透析することにより除去する。抗血清から、免
疫グロブリン−Ｇ−フラクシヨンをDEAEセルロ
ースで、または、特異的な抗体を、プロコラーゲ
ン−−カラムでの親和クロマトグラフイによ
り、標準法で取得する。これら物質を、ペプシン
分解および還元することにより１価のFab′断片
（ニソノフ等（Nisonoff et al.）Arch.Biochem.
Biophys.第89巻、230〜244頁（1960年））に変え
るか、またはパパイン分解することにより１価の
Fab断片（メージユ（Mage）、Meth.Enzymol.第
70巻、142〜150頁、1980年）に変える。引続きこ
れら断片を、モレキユラシーブクロマトグラフイ
ーによりセフアクリルＳ−200（Sephacryl、登録
商標名）（カラム1.5×120cm中炭酸水素アンモニ
ウム0.2M）で、分解せざる抗体または２価の断
片と分離した。 その後にRIA試験を、欧州特許明細書第4940号
に記載されたように界面活性剤（トウイーン
（Tween）20 0.04％）の存在において実施した。
その後に免疫錯体の沈殿を、免疫グロブリンＧに
対する第２の抗体を使用し実施するが、これはま
た当業者に常用の他の方法により実施してもよ
い。 例 ２ 例１に記載せるように実施するが、但し欧州特
許明細書第4940号に記載されたようにして得られ
たラミニン断片P1から出発する。マーキング、
精製およびRIA試験を例１に記載せるように実施
する。 例 ３ 生物学的サンプル中のアミノプロペプチドの量
を、本発明によりFab′断片を用いて、標準阻止
剤としてのペプチド・コル（Peptids Col）１〜
３の使用下に測定した。 年令20〜65才の一般的成人53人の血清並びに７
個の尿サンプルの分析は、変動率10〜20％で良好
な再現性を示した。 結果を第１表にまとめた。 【表】
止曲線を示す体液中の細胞外マトリクス蛋白質プ
ロコラーゲンペプチド又はラミニンP1を、１
価の抗体断片の使用下に免疫学的に測定する方法
並びにこのために好適な１価の抗体断片に関す
る。 従来の技術 免疫学的方法は、例えば血清または尿のような
体液中の、および製織抽出物中の蛋白質およびペ
プチドを特異的および定量的に検出するための、
大きい感度および特異性に優れかつ従つて臨床診
断学に極めて重要であると認められている標準的
方法である。 放射線免疫学的分析は、できるだけ高純度の抗
原（例えば蛋白質またはペプチド）を適当な試験
動物に使用し抗血清を製造することに基づく。こ
の抗血清を、放射性にマーキングされた所定量の
抗原および検査すべき体液と一緒にインキユベー
トする。体液が相応する抗原を含有する場合、形
成された免疫錯体中にわずかな放射能が認められ
る、それというのも放射性マーキングされた１部
の抗原が、体液中に存在するマーキングせざる抗
原により置換されるからである。この放射能マー
キングされた抗原の置換率（阻止率）が体液の添
加量に比例する。この置換反応は、別個のバツチ
中で、既知濃度の精製抗原にマーキングせる蛋白
質／抗血清混合物を添加することにより校正され
る。一般に、２つの阻止剤（精製蛋白質ないしは
体液）で平行な阻止曲線が認められ、その結果体
液中の抗原量が２つの曲線を比較することにより
計算されることができる。 同じ原理に基づく酵素免疫分析の場合、免疫反
応の成分として酵素を使用する（EIA ELISA）。
さらに、マーキングを弗化クロムで実施すること
が可能である。 しかしながら、１連の混合物中で、精製せる標
準蛋白質および体液の阻止曲線が不平行な経過を
示すことが認められる（第１図ａ）。この場合、
通例は、体液曲線の勾配が標準蛋白質曲線よりも
小である。明白にこのことが、量的評価における
著るしい不安定の原因となるか、または量的評価
を不可能とさえする。とくに、この難点が細胞外
マトリクス蛋白質の場合に生じる。 この現象を説明できるのは、体液が、完全な蛋
白質を含有せず、抗体に対し低い親和性を有する
変性された（例えば蛋白質溶解により分解され
た）形で含有するという仮説である。他の説明
は、例えば、検査すべき体液の大きい蛋白質濃度
または粘度のような詳細に特性表示されない一連
の技術的パラメータが包含され、これらパラメー
タが不特定に阻止曲線の変動に寄与することであ
る。 この難点の典型的な観察が、アミノプロペプチ
ド（プロコラーゲンペプチド型）の放射線免疫
分折を研究した際に行なわれた（ローデ等
（Rohde et al.）、Eur.J.Clin.Invest.第９巻、451
〜459頁（1979年））。この場合、血清中の完全な
ペプチドが検出されることができ、かつ真正のア
ミノペプチドと比べ平行な阻止曲線を示した。こ
れに対し尿は、分解せる形のペプチドを含有し、
かつその免疫学的活性が不平行な阻止曲線により
特徴づけられる（第１図ａ）。従つて、尿中のプ
ロコラーゲンの定量は不可能である。 発明が解決しようとする問題点 従つて、本発明の根底をなす課題は、この難点
を解決し、かつ、不利な技術的条件下にある蛋白
質の簡単な定量を可能ならしめる方法をつくり出
すことである。 問題点を解決するための手段 本発明によれば、この課題は、標準的阻止剤に
対し不平行な阻止曲線を示す体液中の細胞外マト
リクス蛋白質プロコラーゲンペプチド又はラミ
ニンP1を免疫学的に定量するための、抗血清と
して特異的な１価の抗体断片を使用する方法によ
り解決される。 免疫学的試験において、１価の抗体断片を使用
することが文献から公知である。しかしながら従
来より一般に、２価の抗体および１価の抗体断片
間に親和力差がないと見做されていた。従つて例
えば、抗体のクレアチンキナーゼに対する阻止作
用では、このために２価または１価の抗体を使用
した際にクレアチンキナーゼ活性に対する差が認
められなかつた（ヴユルツブルク（U.
Wu¨rzburg）、Kontakte3、10〜17頁（1978年））。 従つて意外だつたのは、２価の抗体に代る１価
の抗体断片の使用が、例えば細胞外マトリクス蛋
白質の免疫学的定量における阻止曲線の明白な改
善を生じるか、ないしは若干の場合には免疫学的
定量が全くはじめて可能になることである。 アミノプロペプチドの例からは、完全なプロコ
ラーゲンペプチドをマーキング蛋白質および標準
阻止剤として使用する免疫試験における抗体およ
び１価の抗体断片の比較分析が、２つの場合とも
比較可能な検出感度を示す。尿サンプルは、１価
の抗体断片を使用する試験で平行な阻止曲線を示
し、かつそれとともにこの物質中のプロコラーゲ
ンペプチド型の信頼性ある定量を許容する（第
１図ｂ）。 しかしまた、血清中のアミノプロペプチドを定
量する場合、２価の抗体の代りに１価の抗体断片
を使用するのが有利である。血清の分析は、抗体
断片試験で測定した場合、同じ血清を２価の抗体
により測定した場合と比べ５〜６倍高濃度のプロ
コラーゲンペプチドを示す。血清のモレキユラシ
ーブクロマトグラフイーによる生化学的分析は、
ほぼ５分の１のアミノプロペプチドが完全な物質
（分子量45000）として存在し、残分が分解せる状
態（分子量10000）として存在することを示す。
２価の抗体を使用する試験は、もつぱら完全なア
ミノプロペプチドを検出し、抗体断片試験により
２つの形態が検出され、それにより方法の感度が
改善される。完全な形および分解せる形のアミノ
プロペプチドの、抗体断片試験による広範囲な分
析は、血清−および尿分析の、例えば肝臓フイブ
ローゼの診断への有効な拡張を表わす。 体液中の定量が糖尿病および肝臓疾患の診断に
重要である、前記種類のもう１つの蛋白質の例
が、ヒトラミニンP1である。この場合も、１価
の抗体断片を使用することにより免疫学的定量法
の改善を得ることができた。本発明に適当である
蛋白質の他の例は、コラーゲン、プロコラーゲン
およびフイブロネクチンのような細胞外マトリク
ス蛋白質である。 細胞外マトリクス蛋白質のような蛋白質を、本
発明による１価の抗体断片を使用し免疫学的に定
量するため、公知の全ての免疫学的方法が使用さ
れることができる。例えば、RIA試験の全ての実
施形、例えば、逐次的飽和度分析または平衡分
析、クロラミンＴ（Chloramin Ｔ）またはボルト
ン−ハンター試薬（Bolton−Hunter−Reagenz）
を使用するマーキングが使用されることができる
（文献：フエルバー（Felber）、Meth.Biochem.
Anal.第22巻、１頁、1974年；スケリー等
（Skelly et al.）、Clin.Chem.第19巻、146〜186
頁、1973年）。このことは、酵素免疫試験にも該
当する。制限されるのは、試験が、例えば抗体と
ブドウ球菌の蛋白質Ａとの錯体化のように抗体の
Fc成分（Fab不在）に基づく限り分離技術であ
る。他の、例えば結合または溶解せる形の第２の
抗体の分離法は同じである。同じく、弗化クロム
マーキングせる抗体を使用する方法が適当であ
る。 一般に抗血清の製造は、抗原を試験動物、有利
にウサギに注射することにより行なわれる。この
場合有利に、完全フロイントアジユバントの存在
において作業される。ウサギを使用する際の殊に
適当な用量として、１頭当り0.5〜１mgが有利で
あると判明した。その後に、形成された抗血清
が、当業者に公知の方法で取得され、かつ引続
き、例えば親和クロマトグラフイーの方法により
精製されることができる。 免疫グロブリンに対する第２の抗体を使用する
沈殿は、Fab試験の殊に好適な実施形態である。
この目的で、抗血清がFabに対し十分な抗体を含
有する。従つて、Fabを使用する免疫化は不必要
である。殊に有利な結果が、山羊抗血清を使用し
得られた。 １価の抗体断片は、精製せる抗体から、または
抗血清の免疫グロブリンフラクシヨンから常法に
より製造されることができる。有利な実施例にお
いて、抗体がペプシンにより分解される。引続き
還元され、かつこの方法でFab′断片が得られる。
本発明のもう１つの有利な実施例において、還元
条件下のパパイン分野により製造されたFab断片
が使用される。 効 果 本発明によれば、さもなければ定量困難な、例
えば細胞外マトリクス蛋白質のような蛋白質が高
精度および極めて高感度で免疫学的方法により定
量されうるということが達成され、その場合マー
キングが、放射性に行なわれてもよく、または他
の公知のマーキング法の１つにより代えられるこ
ともできる。本発明は、前記種類の蛋白質ではじ
めて免疫学的定量を可能にした。 実施例 以下に、本発明を実施例につき詳説する。 例 １ プロコラーゲン−−ペプチドを、胎生仔牛の
皮膚から取得しかつ精製する。欧州特許明細書第
4940号に記載されたように、抗血清を、ウサギで
プロコラーゲンまたはプロコラーゲン−−ペ
プチドに対し製造する。 RIA試験のため、プロコラーゲン−−ペプチ
ド25μｇを沃素125 0.5〜１ｍCiでクロラミン−Ｔ
法の使用下にマーキングし、かつ結合せざる沃素
を透析することにより除去する。抗血清から、免
疫グロブリン−Ｇ−フラクシヨンをDEAEセルロ
ースで、または、特異的な抗体を、プロコラーゲ
ン−−カラムでの親和クロマトグラフイによ
り、標準法で取得する。これら物質を、ペプシン
分解および還元することにより１価のFab′断片
（ニソノフ等（Nisonoff et al.）Arch.Biochem.
Biophys.第89巻、230〜244頁（1960年））に変え
るか、またはパパイン分解することにより１価の
Fab断片（メージユ（Mage）、Meth.Enzymol.第
70巻、142〜150頁、1980年）に変える。引続きこ
れら断片を、モレキユラシーブクロマトグラフイ
ーによりセフアクリルＳ−200（Sephacryl、登録
商標名）（カラム1.5×120cm中炭酸水素アンモニ
ウム0.2M）で、分解せざる抗体または２価の断
片と分離した。 その後にRIA試験を、欧州特許明細書第4940号
に記載されたように界面活性剤（トウイーン
（Tween）20 0.04％）の存在において実施した。
その後に免疫錯体の沈殿を、免疫グロブリンＧに
対する第２の抗体を使用し実施するが、これはま
た当業者に常用の他の方法により実施してもよ
い。 例 ２ 例１に記載せるように実施するが、但し欧州特
許明細書第4940号に記載されたようにして得られ
たラミニン断片P1から出発する。マーキング、
精製およびRIA試験を例１に記載せるように実施
する。 例 ３ 生物学的サンプル中のアミノプロペプチドの量
を、本発明によりFab′断片を用いて、標準阻止
剤としてのペプチド・コル（Peptids Col）１〜
３の使用下に測定した。 年令20〜65才の一般的成人53人の血清並びに７
個の尿サンプルの分析は、変動率10〜20％で良好
な再現性を示した。 結果を第１表にまとめた。 【表】
第１図は完全なおよび分解せる状態のプロコラ
ーゲンの放線免疫試験結果を示すもので、第１
図ａおよび第１図ｂはそれぞれ(a)２価の抗体
（Ig6）および(b)１価の抗体断片を使用した阻止曲
線である。
ーゲンの放線免疫試験結果を示すもので、第１
図ａおよび第１図ｂはそれぞれ(a)２価の抗体
（Ig6）および(b)１価の抗体断片を使用した阻止曲
線である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ (a) 体液中の蛋白質プロコラーゲンペプチ
ド又はラミニンP1 (b) 標準蛋白質プロコラーゲンペプチド又はラ
ミニンP1よりなる標識抗原及び (c) 抗体 の競合的抗原反応からなる、体液中の蛋白質を
免疫学的に測定する方法において、抗体とし
て、抗原に対して１価の結合作用をする抗体を
使用する ことを特徴とする、体液中の蛋白質を免疫学的に
測定する方法。 ２ 標識をラジオアイソトープにより行うことを
特徴とする、特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３ 免疫グロブリンをペプシン分解しかつ引続き
還元することにより製造された１価の抗体を使用
することを特徴とする、特許請求の範囲第１項又
は第２項のいずれか１項に記載の方法。 ４ 還元条件下にパパイン分解することにより製
造された１価の抗体を使用することを特徴とす
る、特許請求の範囲第１項又は第２項のいずれか
１項に記載の方法。 ５ 体液中の蛋白質がプロコラーゲンペプチド
であることを特徴とする、特許請求の範囲第１項
から第４項までのいずれか１項に記載の方法。 ６ 体液中の蛋白質がラミニンP1であることを
特徴とする、特許請求の範囲第１項から第４項ま
でのいずれか１項に記載の方法。 ７ 体液が尿であることを特徴とする、特許請求
の範囲第１項から第６項までのいずれか１項に記
載の方法。 ８ 体液が血清であることを特徴とする、特許請
求の範囲第１項から第６項までのいずれか１項に
記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19833331627 DE3331627A1 (de) | 1983-09-01 | 1983-09-01 | Verfahren zur immunologischen bestimmung fuer proteine in koerperfluessigkeiten, unter verwendung monovalenter antikoerperfragmente |
| DE3331627.9 | 1983-09-01 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6091263A JPS6091263A (ja) | 1985-05-22 |
| JPH059745B2 true JPH059745B2 (ja) | 1993-02-05 |
Family
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|---|---|---|---|
| JP59180844A Granted JPS6091263A (ja) | 1983-09-01 | 1984-08-31 | 体液中蛋白質の免疫学的定量法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4609629A (ja) |
| EP (1) | EP0143209B1 (ja) |
| JP (1) | JPS6091263A (ja) |
| AT (1) | ATE69889T1 (ja) |
| DE (2) | DE3331627A1 (ja) |
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| US5264370A (en) * | 1988-12-12 | 1993-11-23 | Bainbridge Laboratories, Inc. | Detection of basement membrane components as diagnostic of cancer and other diseases |
| US5512657A (en) * | 1988-12-12 | 1996-04-30 | Bainbridge Sciences, Inc. | Detection of complexes which include basement membrane components as diagnostic of cancer and other diseases |
| EP1942116B1 (de) * | 1994-08-11 | 2014-01-22 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Monoklonale Antikörper zur selektiven immunologischen Bestimmung von hochmolekularen, intakten Lamininformen in Körperflüssigkeiten |
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