JPH0588421B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPH0588421B2 JPH0588421B2 JP58039299A JP3929983A JPH0588421B2 JP H0588421 B2 JPH0588421 B2 JP H0588421B2 JP 58039299 A JP58039299 A JP 58039299A JP 3929983 A JP3929983 A JP 3929983A JP H0588421 B2 JPH0588421 B2 JP H0588421B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- procollagen
- peptide
- type
- antibody
- type iii
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 23
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 23
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims abstract description 12
- 101100328884 Caenorhabditis elegans sqt-3 gene Proteins 0.000 claims description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 claims description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 2
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 claims description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-YPZZEJLDSA-N iodine-125 Chemical compound [125I] ZCYVEMRRCGMTRW-YPZZEJLDSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims 1
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 abstract description 16
- 230000003053 immunization Effects 0.000 abstract description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 abstract description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 abstract description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 11
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 4
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 3
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 241000283977 Oryctolagus Species 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100328886 Caenorhabditis elegans col-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6887—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from muscle, cartilage or connective tissue
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/80—Fluorescent dyes, e.g. rhodamine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/804—Radioisotope, e.g. radioimmunoassay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/819—Multifunctional antigen or antibody
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/824—Immunological separation techniques
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はプロコラーゲン−ペプチド（型）お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総
免疫学的測定法に関する。
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総
免疫学的測定法に関する。
プロコラーゲン（型）は主として網状結合組
識中に存在する特殊なコラーゲン（型）の生合
成上の前駆物質形態である。このものは、コラー
ゲナーゼで処理することにより分子から除去され
うる付加的にアミノ末端に局在するペプチド分節
〔プロコラーゲン−ペプチド（型）〕によりこの
コラーゲン（型）とは相異する。プロコラーゲ
ン−ペプチド（型）自体はコラーゲナーゼを用
いてさらに破片Col1、Col2およびCol3に分解さ
れ、これらはそれ自体既知の蛋白化学的方法によ
り単離されうる〔H.Nowack氏他「Eur.J.
Biochem.」第70巻第205〜216頁（1976年）およ
びP.Bruckner氏他「Eur.J.Biochem.」第90巻第
595〜603頁（1978年）参照〕。
識中に存在する特殊なコラーゲン（型）の生合
成上の前駆物質形態である。このものは、コラー
ゲナーゼで処理することにより分子から除去され
うる付加的にアミノ末端に局在するペプチド分節
〔プロコラーゲン−ペプチド（型）〕によりこの
コラーゲン（型）とは相異する。プロコラーゲ
ン−ペプチド（型）自体はコラーゲナーゼを用
いてさらに破片Col1、Col2およびCol3に分解さ
れ、これらはそれ自体既知の蛋白化学的方法によ
り単離されうる〔H.Nowack氏他「Eur.J.
Biochem.」第70巻第205〜216頁（1976年）およ
びP.Bruckner氏他「Eur.J.Biochem.」第90巻第
595〜603頁（1978年）参照〕。
血清中におけるプロコラーゲン−ペプチド（
型）の濃度についての研究では、この濃度が肝臓
の線維組織増殖疾患で高まることを示している
〔H.Rhode氏他「Eur.J.Clin.Invest.」第９巻第451
〜459頁（1979年）参照〕。この抗原を検出するた
めの放射線免疫学的方法はヨーロツパ特許第4940
号明細書に記載されている。家兎をプロコラーゲ
ン（型）またはプロコラーゲン−ペプチド（
型）で免疫賦与することにより、プロコラーゲン
−ペプチド（型）に対して高い親和性を示す抗
体が得られることが知られている。しかしながら
プロコラーゲン−ペプチドCol1（型）に対して
見出される親和性はわずかであつた（Rhode氏他
上記文献参照）。
型）の濃度についての研究では、この濃度が肝臓
の線維組織増殖疾患で高まることを示している
〔H.Rhode氏他「Eur.J.Clin.Invest.」第９巻第451
〜459頁（1979年）参照〕。この抗原を検出するた
めの放射線免疫学的方法はヨーロツパ特許第4940
号明細書に記載されている。家兎をプロコラーゲ
ン（型）またはプロコラーゲン−ペプチド（
型）で免疫賦与することにより、プロコラーゲン
−ペプチド（型）に対して高い親和性を示す抗
体が得られることが知られている。しかしながら
プロコラーゲン−ペプチドCol1（型）に対して
見出される親和性はわずかであつた（Rhode氏他
上記文献参照）。
今や驚くべきことに、プロコラーゲン−ペプチ
ドCol1（型）で免疫賦与することにより、プロ
コラーゲン−ペプチドCol1（型）およびプロコ
ラーゲン−ペプチド（型）に対して同じ親和性
を示す抗体が得られることが見出された。かかる
抗体はまたプロコラーゲン−ペプチド（型）で
免疫賦与することによつても得られうる。
ドCol1（型）で免疫賦与することにより、プロ
コラーゲン−ペプチドCol1（型）およびプロコ
ラーゲン−ペプチド（型）に対して同じ親和性
を示す抗体が得られることが見出された。かかる
抗体はまたプロコラーゲン−ペプチド（型）で
免疫賦与することによつても得られうる。
従来の測定法で血清中のプロコラーゲン−ペプ
チド（型）を捕捉することが可能であつた。今
やこの新規な抗体の特別な性質は、体液中の両抗
原すなわちプロコラーゲン−ペプチド（型）お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総
量を免疫学的方法により測定せしめうることであ
る。崩壊産物Col1も同様にこの抗体に結合され
るので、プロコラーゲン−ペプチド（型）およ
びプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総量
の計測は診断上の付加的な資料となりうる。この
ことは特に血清または組織区中の高められた蛋白
分解酵素活性と結びついた疾患における価値の増
大を意味する。何故ならばかかる場合血清中に崩
壊産物Col1が多量に見出され、これはしかしな
がら従来法では捕捉しえなかつたものであつたか
らである。
チド（型）を捕捉することが可能であつた。今
やこの新規な抗体の特別な性質は、体液中の両抗
原すなわちプロコラーゲン−ペプチド（型）お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総
量を免疫学的方法により測定せしめうることであ
る。崩壊産物Col1も同様にこの抗体に結合され
るので、プロコラーゲン−ペプチド（型）およ
びプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総量
の計測は診断上の付加的な資料となりうる。この
ことは特に血清または組織区中の高められた蛋白
分解酵素活性と結びついた疾患における価値の増
大を意味する。何故ならばかかる場合血清中に崩
壊産物Col1が多量に見出され、これはしかしな
がら従来法では捕捉しえなかつたものであつたか
らである。
それゆえ本発明はプロコラーゲン−ペプチド
（型）およびプロコラーゲン−ペプチドCol1
（型）の両抗原を同時に免疫学的に測定するに
当り、 ａ 検査試料に関して過剰である一定量の抗プロ
コラーゲン−ペプチドCol1（型）血清を前記
両抗原を含有する試料と反応せしめ、標識形態
にある前記両抗原のうちの一方の一定量を加
え、形成された抗原−抗体複合物を分離しそし
てその複合物および／または上澄み液中の標識
抗原の量を測定するか、または ｂ 検査試料に関して過剰である一定量の前記血
清を前記両抗原を含有する試料と反応せしめ、
該血清中の抗体の未反応量を担体に結合した特
定の過剰量の前記両抗原のうちの一方で固定
し、特定の過剰量の標識形態にある第２抗体と
反応させそして次に結合されたおよび／または
遊離の第２抗体の量を測定する ことを特徴とする方法に関する。
（型）およびプロコラーゲン−ペプチドCol1
（型）の両抗原を同時に免疫学的に測定するに
当り、 ａ 検査試料に関して過剰である一定量の抗プロ
コラーゲン−ペプチドCol1（型）血清を前記
両抗原を含有する試料と反応せしめ、標識形態
にある前記両抗原のうちの一方の一定量を加
え、形成された抗原−抗体複合物を分離しそし
てその複合物および／または上澄み液中の標識
抗原の量を測定するか、または ｂ 検査試料に関して過剰である一定量の前記血
清を前記両抗原を含有する試料と反応せしめ、
該血清中の抗体の未反応量を担体に結合した特
定の過剰量の前記両抗原のうちの一方で固定
し、特定の過剰量の標識形態にある第２抗体と
反応させそして次に結合されたおよび／または
遊離の第２抗体の量を測定する ことを特徴とする方法に関する。
この方法では既知放射線免疫検定（RIA）方法
ならびに酵素免疫検定方法および他の標識付け例
えば螢光標識付け、色素標識付けなどを用いる類
似の測定法が使用されうる。方法ａ）では放射性
標識付けが好ましく、また方法ｂ）では酵素標識
付けが好ましい。かかる方法は専門家には知られ
ておりそしてここでは詳細に記載する必要はな
い。この検出反応では標識付けされたプロコラー
ゲン−ペプチドはヨーロツパ特許第4940号の記載
からそれ自体既知の方法で抗体を競り合うので、
従つて形成された抗体−抗体複合物中における標
識付けされた抗原の量は、標識付けされていない
抗原が測定すべき試料中に多く含有されればされ
るほどよりわずかとなる。それゆえ複合物の標識
例えば放射能または酵素活性、あるいは抗原−抗
体複合物を分離した後の上澄み液の標識がプロコ
ラーゲン−ペプチド（型）またはプロコラーゲ
ン−ペプチドCol1（型）の既知量を含有する試
料により作成された検査曲線に基づき検査すべき
試料中に含有される抗原量を確認するのに使用さ
れうる。方法ｂ）では方法ａ）におけると同様に
複合物中の標識が測定されるのが好ましい。
ならびに酵素免疫検定方法および他の標識付け例
えば螢光標識付け、色素標識付けなどを用いる類
似の測定法が使用されうる。方法ａ）では放射性
標識付けが好ましく、また方法ｂ）では酵素標識
付けが好ましい。かかる方法は専門家には知られ
ておりそしてここでは詳細に記載する必要はな
い。この検出反応では標識付けされたプロコラー
ゲン−ペプチドはヨーロツパ特許第4940号の記載
からそれ自体既知の方法で抗体を競り合うので、
従つて形成された抗体−抗体複合物中における標
識付けされた抗原の量は、標識付けされていない
抗原が測定すべき試料中に多く含有されればされ
るほどよりわずかとなる。それゆえ複合物の標識
例えば放射能または酵素活性、あるいは抗原−抗
体複合物を分離した後の上澄み液の標識がプロコ
ラーゲン−ペプチド（型）またはプロコラーゲ
ン−ペプチドCol1（型）の既知量を含有する試
料により作成された検査曲線に基づき検査すべき
試料中に含有される抗原量を確認するのに使用さ
れうる。方法ｂ）では方法ａ）におけると同様に
複合物中の標識が測定されるのが好ましい。
溶液からの抗原−抗体複合物の分離は過、吸
引過、遠心分離などのような当業者に知られた
そのための慣用方法により遂行されうる。抗血清
を固体担体例えば試薬ガラス器具の内壁に結合さ
せて使用することも可能である。
引過、遠心分離などのような当業者に知られた
そのための慣用方法により遂行されうる。抗血清
を固体担体例えば試薬ガラス器具の内壁に結合さ
せて使用することも可能である。
好ましくは本方法は、高特異的な抗プロコラー
ゲン−ペプチドCol1（型）血清を用いて形成さ
れた抗原−抗体複合物をその高特異的な血清に対
応する第２の抗体を使用して未反応抗原から分離
して実施される。ここで好ましいのはその抗血清
の取得に使用された動物種のγ−グロブリンに対
する抗体である。抗原すなわちプロコラーゲン−
ペプチド（型）またはプロコラーゲン−ペプチ
ドCol1（型）の標識付けは蛋白質の標識付けに
ついて知らされた方法を用いて実施されうる。放
射線核種を用いる放射性標識付けの場合は125Iを
使用するのが好ましい。この放射線核種を用いる
標識付けにはクロラミンＴ法〔P.J.McConahey
氏他「Int.Arch.Allergy」第29巻第185頁（1966
年）参照〕が好ましい。
ゲン−ペプチドCol1（型）血清を用いて形成さ
れた抗原−抗体複合物をその高特異的な血清に対
応する第２の抗体を使用して未反応抗原から分離
して実施される。ここで好ましいのはその抗血清
の取得に使用された動物種のγ−グロブリンに対
する抗体である。抗原すなわちプロコラーゲン−
ペプチド（型）またはプロコラーゲン−ペプチ
ドCol1（型）の標識付けは蛋白質の標識付けに
ついて知らされた方法を用いて実施されうる。放
射線核種を用いる放射性標識付けの場合は125Iを
使用するのが好ましい。この放射線核種を用いる
標識付けにはクロラミンＴ法〔P.J.McConahey
氏他「Int.Arch.Allergy」第29巻第185頁（1966
年）参照〕が好ましい。
プロコラーゲン−ペプチド（型）およびプロ
コラーゲン−ペプチドCol1（型）を測定するた
めの酵素免疫検定方法はまた当該動物種例えば家
兎のγ−グロブリンに対する抗体が酵素標識付け
されるようにも実施されうる。この様式の酵素免
疫検定では、抗原−抗体複合物の形成後に残留す
る抗プロコラーゲン−ペプチド血清部分を担体に
結合したプロコラーゲン−ペプチド（型）また
はプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）に結合
させそして次に家兎のγ−グロブリンに対する酵
素標識付けされた抗体と反応させることにより測
定する。
コラーゲン−ペプチドCol1（型）を測定するた
めの酵素免疫検定方法はまた当該動物種例えば家
兎のγ−グロブリンに対する抗体が酵素標識付け
されるようにも実施されうる。この様式の酵素免
疫検定では、抗原−抗体複合物の形成後に残留す
る抗プロコラーゲン−ペプチド血清部分を担体に
結合したプロコラーゲン−ペプチド（型）また
はプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）に結合
させそして次に家兎のγ−グロブリンに対する酵
素標識付けされた抗体と反応させることにより測
定する。
次に結合された酵素標識付けされた抗体量を酵
素反応を測定することにより定量し、そしてこれ
は試料中のプロコラーゲン−ペプチド（型）お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の未
知量と反比例する。
素反応を測定することにより定量し、そしてこれ
は試料中のプロコラーゲン−ペプチド（型）お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の未
知量と反比例する。
本発明による測定法にとつて、プロコラーゲン
−ペプチドCol1（型）に対する適当な抗血清を
入手することが決定的である。このものはまたプ
ロコラーゲン−ペプチド（型）に対して親和性
を有する。
−ペプチドCol1（型）に対する適当な抗血清を
入手することが決定的である。このものはまたプ
ロコラーゲン−ペプチド（型）に対して親和性
を有する。
免疫賦与するには合目的々にはプロコラーゲン
−ペプチドCol1（型）が使用される。免疫賦与
は複合フロインド氏アジユバンドの存在下にヤギ
のような実験動物、好ましくは家兎にプロコラー
ゲン−ペプチドCol1（型）を皮下注射すること
により遂行される。この場合抗原量は１動物当り
0.2〜0.5mgである。
−ペプチドCol1（型）が使用される。免疫賦与
は複合フロインド氏アジユバンドの存在下にヤギ
のような実験動物、好ましくは家兎にプロコラー
ゲン−ペプチドCol1（型）を皮下注射すること
により遂行される。この場合抗原量は１動物当り
0.2〜0.5mgである。
以下の例により本発明をさらに説明する。
例 １
プロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の調製
プロコラーゲン−ペプチド（型）60mgを必要
量の緩衝液（緩衝液１：0.05Mトリス／HCl、PH
8.0、0.02M CaCl2）中に溶解させそして55℃に
加温する。420単位のコラーゲナーゼを添加後こ
の混合物を55℃で15分間培養する。37℃に冷却し
そして420単位のコラーゲナーゼを添加した後培
養をさらに３時間続行する。次にこの混合物を２
種の緩衝液（緩衝液２：0.005Mトリス／HCl、
PH8.6、2M尿素、緩衝液３：0.005Mトリス／
HCl、PH8.6、8M尿素）で透析しそして緩衝液３
で平衡化されたDEAE−セルロースカラム（1.6
×５cm）に加える。
量の緩衝液（緩衝液１：0.05Mトリス／HCl、PH
8.0、0.02M CaCl2）中に溶解させそして55℃に
加温する。420単位のコラーゲナーゼを添加後こ
の混合物を55℃で15分間培養する。37℃に冷却し
そして420単位のコラーゲナーゼを添加した後培
養をさらに３時間続行する。次にこの混合物を２
種の緩衝液（緩衝液２：0.005Mトリス／HCl、
PH8.6、2M尿素、緩衝液３：0.005Mトリス／
HCl、PH8.6、8M尿素）で透析しそして緩衝液３
で平衡化されたDEAE−セルロースカラム（1.6
×５cm）に加える。
カラム上に結合された蛋白質をNaCl勾配（０
〜0.3M）を用いて溶離する。溶出液を230nmで
の吸収についておよびプロコラーゲン−ペプチド
（型）に対して特異的である抗体を使用して抗
原活性について再検査する。カラムから溶出する
最後のピークは通常プロコラーゲン−ペプチド
Col1（型）を含有する。このペプチドを0.01M
（MH4）2CO3で透析して脱塩しそして凍結乾燥す
る。
〜0.3M）を用いて溶離する。溶出液を230nmで
の吸収についておよびプロコラーゲン−ペプチド
（型）に対して特異的である抗体を使用して抗
原活性について再検査する。カラムから溶出する
最後のピークは通常プロコラーゲン−ペプチド
Col1（型）を含有する。このペプチドを0.01M
（MH4）2CO3で透析して脱塩しそして凍結乾燥す
る。
免疫学的測定（RIA）の実施
25μｇのプロコラーゲン−ペプチド（型）を
１ミリキユリーの沃素125を用いクロラミンＴ法
により標識付けしそして結合しなかつた沃素を透
析により除去する。放射線免疫試験を実施するに
際してそれ以上の段階は好ましくは0.04％の非イ
オン系洗浄剤例えばツイーン20の存在下に実施
される。結合曲線はそれぞれ2nｇの標識付けさ
れたプロコラーゲン−ペプチド（型）またはプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1（型）を用いて測
定される。血清または他の体液の未知試料中にお
けるプロコラーゲン−ペプチド（型）およびプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総量の濃
度は以下の抑制試験で測定される。
１ミリキユリーの沃素125を用いクロラミンＴ法
により標識付けしそして結合しなかつた沃素を透
析により除去する。放射線免疫試験を実施するに
際してそれ以上の段階は好ましくは0.04％の非イ
オン系洗浄剤例えばツイーン20の存在下に実施
される。結合曲線はそれぞれ2nｇの標識付けさ
れたプロコラーゲン−ペプチド（型）またはプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1（型）を用いて測
定される。血清または他の体液の未知試料中にお
けるプロコラーゲン−ペプチド（型）およびプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の総量の濃
度は以下の抑制試験で測定される。
一定量の抗体を未知試料と４℃で16時間予備培
養しそして標識付けされたペプチド2ngを添加し
た後、さらに８時間４℃で培養する。次に過剰の
家兎免疫グロブリンに対する抗体を加えそして免
疫複合物中に結合された抗原を溶液から分離す
る。未知試料の抑制活性を標識付けされてないプ
ロコラーゲン−ペプチド（型）またはプロコラ
ーゲン−ペプチドCol1（型）の標準濃度の活性
と比較する。
養しそして標識付けされたペプチド2ngを添加し
た後、さらに８時間４℃で培養する。次に過剰の
家兎免疫グロブリンに対する抗体を加えそして免
疫複合物中に結合された抗原を溶液から分離す
る。未知試料の抑制活性を標識付けされてないプ
ロコラーゲン−ペプチド（型）またはプロコラ
ーゲン−ペプチドCol1（型）の標準濃度の活性
と比較する。
試料として健康な患者の血清を抑制試験に用い
るならば、RIAを用いてプロコラーゲン−ペプチ
ド（型）について見出されたよりも典型的には
およそ３倍高いプロコラーゲン−ペプチドCol1
（型）＋プロコラーゲン−ペプチド（型）の値
が見出される。
るならば、RIAを用いてプロコラーゲン−ペプチ
ド（型）について見出されたよりも典型的には
およそ３倍高いプロコラーゲン−ペプチドCol1
（型）＋プロコラーゲン−ペプチド（型）の値
が見出される。
例 ２
酵素免疫検定による免疫学的測定
血清または他の体液の未知試料中におけるプロ
コラーゲン−ペプチド（型）濃度を下記酵素免
疫試験を用いて測定する。
コラーゲン−ペプチド（型）濃度を下記酵素免
疫試験を用いて測定する。
一定量の抗プロコラーゲン−ペプチドCol1（
型）血清を未知試料と４℃で２時間半予備培養す
る。次にこの混合物をミクロ力価プレートのプロ
コラーゲン−ペプチド20ngを積層させた凹部に
ピペツトに加えそして４℃で18時間培養する。上
澄み液を注ぎ出しそして凹部を生理食塩溶液で洗
つたのち家兎のγ−免疫グロブリンに対する酵素
標識付けされた抗体（例えばペルオキシダーゼ標
識付け）の一定量を加えそして室温で５時間培養
する。上澄み液を注ぎ出しそして生理食塩溶液で
洗つた後酵素基質（ペルオキシターゼ標識付け
H2O2の場合）および色原体（例えばｏ−フエニ
レンジアミン）の添加により酵素反応を開始させ
る。室温で30分間培養した後、6M HCl 50μlの
添加により反応を停止させる。適当な測光計を用
い30分後に溶液の着色強度を測定する。この着色
強度は結合された酵素標識付けされた抗体の量と
反比例し従つて試料中のプロコラーゲン−ペプチ
ドの未知量と反比例する。プロコラーゲン−ペプ
チド（型）またはプロコラーゲン−ペプチド
Col1（型）の既知量を含有する溶液を用いて作
成された検定曲線を用いて試料中のプロコラーゲ
ン−ペプチド（型）＋プロコラーゲン−ペプチ
ドCol1（型）の量が調査されうる。
型）血清を未知試料と４℃で２時間半予備培養す
る。次にこの混合物をミクロ力価プレートのプロ
コラーゲン−ペプチド20ngを積層させた凹部に
ピペツトに加えそして４℃で18時間培養する。上
澄み液を注ぎ出しそして凹部を生理食塩溶液で洗
つたのち家兎のγ−免疫グロブリンに対する酵素
標識付けされた抗体（例えばペルオキシダーゼ標
識付け）の一定量を加えそして室温で５時間培養
する。上澄み液を注ぎ出しそして生理食塩溶液で
洗つた後酵素基質（ペルオキシターゼ標識付け
H2O2の場合）および色原体（例えばｏ−フエニ
レンジアミン）の添加により酵素反応を開始させ
る。室温で30分間培養した後、6M HCl 50μlの
添加により反応を停止させる。適当な測光計を用
い30分後に溶液の着色強度を測定する。この着色
強度は結合された酵素標識付けされた抗体の量と
反比例し従つて試料中のプロコラーゲン−ペプチ
ドの未知量と反比例する。プロコラーゲン−ペプ
チド（型）またはプロコラーゲン−ペプチド
Col1（型）の既知量を含有する溶液を用いて作
成された検定曲線を用いて試料中のプロコラーゲ
ン−ペプチド（型）＋プロコラーゲン−ペプチ
ドCol1（型）の量が調査されうる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ プロコラーゲン−ペプチド（型）およびプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1（型）の両抗原を
同時に免疫学的に測定するに当り、 ａ 検査試料に関して過剰である一定量の抗プロ
コラーゲン−ペプチドCol1（型）血清を前記
両抗原を含有する試料と反応せしめ、標識形態
にある前記両抗原のうちの一方の一定量を加
え、形成された抗原−抗体複合物を分離しそし
てその複合物および／または上澄み液中の標識
抗原の量を測定するか、または ｂ 検査試料に関して過剰である一定量の前記血
清を前記両抗原を含有する試料と反応せしめ、
該血清中の抗体の未反応量を担体に結合した特
定の過剰量の前記両抗原のうちの一方で固定
し、特定の過剰量の標識形態にある第２抗体と
反応させそして次に結合されたおよび／または
遊離の第２抗体の量を測定する ことを特徴とする方法。 ２ 標識付けが放射性、酵素性または蛍光性標識
付けであることを特徴とする前記特許請求の範囲
第１項記載の方法。 ３ 前記方法ａ）において抗原−抗体複合物の分
離がその抗体に対して親和性を有する第２の抗体
を用いて遂行されることを特徴とする前記特許請
求の範囲第１項または第２項記載の方法。 ４ 前記方法ａ）において放射性標識付けが用い
られることを特徴とする前記特許請求の範囲第１
〜３項のいずれか一つに記載の方法。 ５ 標識付けが沃素125を用いて遂行されること
を特徴とする前記特許請求の範囲第１〜４項のい
ずれか一つに記載の方法。 ６ 前記方法ｂ）において酵素が標識付けに用い
られることを特徴とする前記特許請求の範囲第１
〜５項のいずれか一つに記載の方法。 ７ 複合物中における標識抗原が測定されること
を特徴とする前記特許請求の範囲第１〜６項のい
ずれか一つに記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19823209149 DE3209149A1 (de) | 1982-03-13 | 1982-03-13 | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
| DE32091494 | 1982-03-13 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58168961A JPS58168961A (ja) | 1983-10-05 |
| JPH0588421B2 true JPH0588421B2 (ja) | 1993-12-22 |
Family
ID=6158138
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58039299A Granted JPS58168961A (ja) | 1982-03-13 | 1983-03-11 | プロコラーゲン―ペプチド類の測定法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4504587A (ja) |
| EP (1) | EP0089008B1 (ja) |
| JP (1) | JPS58168961A (ja) |
| AT (1) | ATE55489T1 (ja) |
| DE (2) | DE3209149A1 (ja) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3209149A1 (de) * | 1982-03-13 | 1983-10-06 | Hoechst Ag | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
| US4628027A (en) * | 1982-05-19 | 1986-12-09 | Molecular Engineering Associates, Ltd. | Vitro diagnostic methods using monoclonal antibodies against connective tissue proteins |
| DE3331627A1 (de) * | 1983-09-01 | 1985-03-21 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Verfahren zur immunologischen bestimmung fuer proteine in koerperfluessigkeiten, unter verwendung monovalenter antikoerperfragmente |
| SE8304836D0 (sv) * | 1983-09-09 | 1983-09-09 | Pharmacia Ab | Sett att bestemma forendringar i ledbrosk |
| US5030576A (en) * | 1986-04-30 | 1991-07-09 | Genentech, Inc. | Receptors for efficient determination of ligands and their antagonists or agonists |
| US4859609A (en) * | 1986-04-30 | 1989-08-22 | Genentech, Inc. | Novel receptors for efficient determination of ligands and their antagonists or agonists |
| US5316914A (en) * | 1986-09-04 | 1994-05-31 | Fuji Yakuhin Kogyo Kabushiki Kaisha | Method for determining human collagen peptides by way of enzyme immunoassay |
| ES2056850T3 (es) * | 1987-05-02 | 1994-10-16 | Hoechst Ag | Anticuerpo monoclonal para la determinacion inmunologica selectiva de peptido de procolageno (tipo iii) y procolageno (tipo iii) en liquidos corporales. |
| DE3714634A1 (de) * | 1987-05-02 | 1988-11-17 | Hoechst Ag | Verfahren zur selektiven immunologischen bestimmung von intaktem prokollagen peptid (typ iii) und prokollagen (typ iii) in koerperfluessigkeiten und mittel zu dessen durchfuehrung |
| US5679583A (en) * | 1987-05-02 | 1997-10-21 | Hoechst Aktiengesellschaft | Monoclonal antibodies for the selective immunological determination of intact procollagen peptide (type III) and procollagen (type III) in body fluids |
| GB2208865B (en) * | 1987-08-19 | 1991-12-11 | Farmos Group Ltd | Purified propeptide of procollagen type iii, antibody to the propeptide and assay method using the antibody. |
| US6010862A (en) * | 1987-11-06 | 2000-01-04 | Washington Research Foundation | Methods of detecting collagen type III degradation in vivo |
| US6027903A (en) * | 1987-11-06 | 2000-02-22 | Washington Research Foundation | Kit for detecting analyte indicative of type I collagen resorption in vivo |
| US5320970A (en) * | 1987-11-06 | 1994-06-14 | Washington Research Foundation | Detection of collagen degradation in vivo |
| US6153732A (en) * | 1987-11-06 | 2000-11-28 | Washington Research Foundation | Kit for detecting analyte indicative of type II collagen resorption in vivo |
| US5300434A (en) * | 1987-11-06 | 1994-04-05 | Washington Research Foundation | Hybridoma cell line producing an antibody to type-I collagen amino-terminal telopeptide |
| US5962639A (en) * | 1987-11-06 | 1999-10-05 | Washington Research Foundation | Synthetic peptides corresponding to telopeptide sequences of cross-linked type I collagen metabolites |
| US5702909A (en) * | 1987-11-06 | 1997-12-30 | Washington Research Foundation | Methods of detecting collagen type II degradation in vivo |
| US4973666A (en) * | 1987-11-06 | 1990-11-27 | Washington Research Foundation | Peptide fragments containing HP and LP cross-links |
| ES2065350T3 (es) * | 1988-04-27 | 1995-02-16 | Hoechst Ag | Anticuerpo monoclonal para la determinacion immunologica selectiva de peptido (tipo iii) intacto y procolageno (tipo iii) en liquidos corporales. |
| US5541295A (en) * | 1993-02-12 | 1996-07-30 | The Board Of Governors For Higher Education State Of Rhode Island And Providence Plantations | Detection of type II collagen and its peptides |
| DK104093D0 (da) * | 1993-09-17 | 1993-09-17 | Osteometer A S | Fremgangsmaade til bestemmelse af collagen-fragmenter i legemsvaesker, test-kit og midler til udoevelse af fremgangsmaaden og anvendelse af fremgangsmaaden til diagnosticering af lidelser associeret til collagen-metabolismen |
| US6110689A (en) * | 1994-01-21 | 2000-08-29 | Osteometer A/S | Method of assaying collagen fragments in body fluids, a test kit and means for carrying out the method and use of the method to diagnose the presence of disorders associated with the metabolism of collagen |
| GB9506050D0 (en) | 1995-03-24 | 1995-05-10 | Osteometer A S | Assaying collagen fragments in body fluids |
| ATE199185T1 (de) | 1994-10-17 | 2001-02-15 | Osteometer Biotech As | Einschätzung der fragmentierungsmuster von kollagen in körperflüssigkeiten und diagnose von mit dem kollagenmetabolismus zusammenhängenden störungen |
| US6107047A (en) * | 1996-03-21 | 2000-08-22 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
| GB9617616D0 (en) | 1996-08-22 | 1996-10-02 | Osteometer Biotech As | Assaying protein fragments in body fluids |
| US6660481B2 (en) | 1996-12-09 | 2003-12-09 | Osteometer Biotech A/S | Sandwich assays for collagen type I fragments |
| US6117646A (en) * | 1997-09-22 | 2000-09-12 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
| US7541149B1 (en) | 1998-05-28 | 2009-06-02 | Siemens Healthcare Diagnostics, Inc. | Monoclonal antibody and assay for detecting PIIINP |
| US6916903B2 (en) | 1998-06-19 | 2005-07-12 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
| US6602980B1 (en) | 1998-06-19 | 2003-08-05 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
| US20120058948A1 (en) * | 2006-10-16 | 2012-03-08 | Stultz Collin M | Collagen peptides as immune modulators |
| JP2011510297A (ja) * | 2008-01-18 | 2011-03-31 | バトリックス・メディカル・インコーポレイテッド | 動脈瘤のための診断バイオマーカー |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2816841A1 (de) * | 1978-04-18 | 1979-10-31 | Max Planck Gesellschaft | Radioimmunologische bestimmung von prokollagen (typ iii) und prokollagen- peptid (typ iii) |
| DE3209149A1 (de) * | 1982-03-13 | 1983-10-06 | Hoechst Ag | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
-
1982
- 1982-03-13 DE DE19823209149 patent/DE3209149A1/de not_active Withdrawn
-
1983
- 1983-03-10 EP EP83102338A patent/EP0089008B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1983-03-10 DE DE8383102338T patent/DE3381781D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1983-03-10 AT AT83102338T patent/ATE55489T1/de active
- 1983-03-11 US US06/474,457 patent/US4504587A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-03-11 JP JP58039299A patent/JPS58168961A/ja active Granted
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| EUR.J.BIOCHEM=1976 * |
| EUR.J.BIOCHEM=1978 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0089008A3 (en) | 1986-02-12 |
| EP0089008A2 (de) | 1983-09-21 |
| EP0089008B1 (de) | 1990-08-08 |
| US4504587A (en) | 1985-03-12 |
| DE3381781D1 (de) | 1990-09-13 |
| ATE55489T1 (de) | 1990-08-15 |
| DE3209149A1 (de) | 1983-10-06 |
| JPS58168961A (ja) | 1983-10-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0588421B2 (ja) | ||
| US5202234A (en) | Myocardial infarction immunoassay | |
| US20070166776A1 (en) | Immunoassay and kit for an early and simultaneous detection of biochemical markers in a patient's sample | |
| US5382515A (en) | Creative kinase-MB immunoassay for myocardial infarction and reagents | |
| US5382522A (en) | Immunoassay for creatine kinase-MB and creatine kinase-BB isoforms and reagents | |
| AU654497B2 (en) | Analyte variant analysis | |
| JP3499570B2 (ja) | Ｔｓｈレセプター自己抗体を検出するためのレセプター結合アッセイ | |
| US20070184504A1 (en) | Assay for anti-INGAP antibodies | |
| EP0150905A2 (en) | Anti-idiotype assay using fluorescent energy transfer | |
| JPS63292061A (ja) | 完全無傷なプラコラーゲンペプチド（３型）およびプロコラーゲン（３型）の選択的な免疫学的測定法 | |
| US20080293161A1 (en) | Detection of Carbohydrate Biomarkers | |
| JPH0213396A (ja) | 選択的免疫学的定量のためのモノクローナル抗体 | |
| JP2000515854A (ja) | 脳タンパク質ｓ―１００の存在の測定方法 | |
| JPH10507266A (ja) | 体液中のコラーゲンの断片化パターンの評価とコラーゲンの代謝に関連する疾患の診断 | |
| US4786591A (en) | Process for determining the binding capacity of thyroxin-binding globulin | |
| JPH07110879B2 (ja) | モノクロナール抗体 | |
| EP0938678A1 (en) | Method and kit for the diagnosis of troponin i | |
| EP0140242B1 (en) | Method for assaying basic fetoprotein and reagent therefor | |
| JPS59203958A (ja) | α↓１−プロティナ−ゼインヒビタ−・カリクレイン結合物測定用試薬 | |
| AU2002346529B2 (en) | Immunoassay and kit for an early and simulataneous detection of biochemical markers in a patient's sample | |
| JP2727477B2 (ja) | ＰＴＨｒＰのサンドイッチ法による免疫学的測定法 | |
| EP0467782A1 (en) | Myocardial infarction immunoassay | |
| JPH11512527A (ja) | 検出用物質を形成する検出分子の混合物によるイムノアッセイ | |
| EP0089367A1 (en) | Monoclonal antibody detection system | |
| JPH0785085B2 (ja) | フイブロネクチン測定試薬 |