JPH0588421B2 - - Google Patents
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- JPH0588421B2 JPH0588421B2 JP58039299A JP3929983A JPH0588421B2 JP H0588421 B2 JPH0588421 B2 JP H0588421B2 JP 58039299 A JP58039299 A JP 58039299A JP 3929983 A JP3929983 A JP 3929983A JP H0588421 B2 JPH0588421 B2 JP H0588421B2
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- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はプロコラーゲン−ペプチド(型)お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総
免疫学的測定法に関する。
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総
免疫学的測定法に関する。
プロコラーゲン(型)は主として網状結合組
識中に存在する特殊なコラーゲン(型)の生合
成上の前駆物質形態である。このものは、コラー
ゲナーゼで処理することにより分子から除去され
うる付加的にアミノ末端に局在するペプチド分節
〔プロコラーゲン−ペプチド(型)〕によりこの
コラーゲン(型)とは相異する。プロコラーゲ
ン−ペプチド(型)自体はコラーゲナーゼを用
いてさらに破片Col1、Col2およびCol3に分解さ
れ、これらはそれ自体既知の蛋白化学的方法によ
り単離されうる〔H.Nowack氏他「Eur.J.
Biochem.」第70巻第205〜216頁(1976年)およ
びP.Bruckner氏他「Eur.J.Biochem.」第90巻第
595〜603頁(1978年)参照〕。
識中に存在する特殊なコラーゲン(型)の生合
成上の前駆物質形態である。このものは、コラー
ゲナーゼで処理することにより分子から除去され
うる付加的にアミノ末端に局在するペプチド分節
〔プロコラーゲン−ペプチド(型)〕によりこの
コラーゲン(型)とは相異する。プロコラーゲ
ン−ペプチド(型)自体はコラーゲナーゼを用
いてさらに破片Col1、Col2およびCol3に分解さ
れ、これらはそれ自体既知の蛋白化学的方法によ
り単離されうる〔H.Nowack氏他「Eur.J.
Biochem.」第70巻第205〜216頁(1976年)およ
びP.Bruckner氏他「Eur.J.Biochem.」第90巻第
595〜603頁(1978年)参照〕。
血清中におけるプロコラーゲン−ペプチド(
型)の濃度についての研究では、この濃度が肝臓
の線維組織増殖疾患で高まることを示している
〔H.Rhode氏他「Eur.J.Clin.Invest.」第9巻第451
〜459頁(1979年)参照〕。この抗原を検出するた
めの放射線免疫学的方法はヨーロツパ特許第4940
号明細書に記載されている。家兎をプロコラーゲ
ン(型)またはプロコラーゲン−ペプチド(
型)で免疫賦与することにより、プロコラーゲン
−ペプチド(型)に対して高い親和性を示す抗
体が得られることが知られている。しかしながら
プロコラーゲン−ペプチドCol1(型)に対して
見出される親和性はわずかであつた(Rhode氏他
上記文献参照)。
型)の濃度についての研究では、この濃度が肝臓
の線維組織増殖疾患で高まることを示している
〔H.Rhode氏他「Eur.J.Clin.Invest.」第9巻第451
〜459頁(1979年)参照〕。この抗原を検出するた
めの放射線免疫学的方法はヨーロツパ特許第4940
号明細書に記載されている。家兎をプロコラーゲ
ン(型)またはプロコラーゲン−ペプチド(
型)で免疫賦与することにより、プロコラーゲン
−ペプチド(型)に対して高い親和性を示す抗
体が得られることが知られている。しかしながら
プロコラーゲン−ペプチドCol1(型)に対して
見出される親和性はわずかであつた(Rhode氏他
上記文献参照)。
今や驚くべきことに、プロコラーゲン−ペプチ
ドCol1(型)で免疫賦与することにより、プロ
コラーゲン−ペプチドCol1(型)およびプロコ
ラーゲン−ペプチド(型)に対して同じ親和性
を示す抗体が得られることが見出された。かかる
抗体はまたプロコラーゲン−ペプチド(型)で
免疫賦与することによつても得られうる。
ドCol1(型)で免疫賦与することにより、プロ
コラーゲン−ペプチドCol1(型)およびプロコ
ラーゲン−ペプチド(型)に対して同じ親和性
を示す抗体が得られることが見出された。かかる
抗体はまたプロコラーゲン−ペプチド(型)で
免疫賦与することによつても得られうる。
従来の測定法で血清中のプロコラーゲン−ペプ
チド(型)を捕捉することが可能であつた。今
やこの新規な抗体の特別な性質は、体液中の両抗
原すなわちプロコラーゲン−ペプチド(型)お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総
量を免疫学的方法により測定せしめうることであ
る。崩壊産物Col1も同様にこの抗体に結合され
るので、プロコラーゲン−ペプチド(型)およ
びプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総量
の計測は診断上の付加的な資料となりうる。この
ことは特に血清または組織区中の高められた蛋白
分解酵素活性と結びついた疾患における価値の増
大を意味する。何故ならばかかる場合血清中に崩
壊産物Col1が多量に見出され、これはしかしな
がら従来法では捕捉しえなかつたものであつたか
らである。
チド(型)を捕捉することが可能であつた。今
やこの新規な抗体の特別な性質は、体液中の両抗
原すなわちプロコラーゲン−ペプチド(型)お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総
量を免疫学的方法により測定せしめうることであ
る。崩壊産物Col1も同様にこの抗体に結合され
るので、プロコラーゲン−ペプチド(型)およ
びプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総量
の計測は診断上の付加的な資料となりうる。この
ことは特に血清または組織区中の高められた蛋白
分解酵素活性と結びついた疾患における価値の増
大を意味する。何故ならばかかる場合血清中に崩
壊産物Col1が多量に見出され、これはしかしな
がら従来法では捕捉しえなかつたものであつたか
らである。
それゆえ本発明はプロコラーゲン−ペプチド
(型)およびプロコラーゲン−ペプチドCol1
(型)の両抗原を同時に免疫学的に測定するに
当り、 a 検査試料に関して過剰である一定量の抗プロ
コラーゲン−ペプチドCol1(型)血清を前記
両抗原を含有する試料と反応せしめ、標識形態
にある前記両抗原のうちの一方の一定量を加
え、形成された抗原−抗体複合物を分離しそし
てその複合物および/または上澄み液中の標識
抗原の量を測定するか、または b 検査試料に関して過剰である一定量の前記血
清を前記両抗原を含有する試料と反応せしめ、
該血清中の抗体の未反応量を担体に結合した特
定の過剰量の前記両抗原のうちの一方で固定
し、特定の過剰量の標識形態にある第2抗体と
反応させそして次に結合されたおよび/または
遊離の第2抗体の量を測定する ことを特徴とする方法に関する。
(型)およびプロコラーゲン−ペプチドCol1
(型)の両抗原を同時に免疫学的に測定するに
当り、 a 検査試料に関して過剰である一定量の抗プロ
コラーゲン−ペプチドCol1(型)血清を前記
両抗原を含有する試料と反応せしめ、標識形態
にある前記両抗原のうちの一方の一定量を加
え、形成された抗原−抗体複合物を分離しそし
てその複合物および/または上澄み液中の標識
抗原の量を測定するか、または b 検査試料に関して過剰である一定量の前記血
清を前記両抗原を含有する試料と反応せしめ、
該血清中の抗体の未反応量を担体に結合した特
定の過剰量の前記両抗原のうちの一方で固定
し、特定の過剰量の標識形態にある第2抗体と
反応させそして次に結合されたおよび/または
遊離の第2抗体の量を測定する ことを特徴とする方法に関する。
この方法では既知放射線免疫検定(RIA)方法
ならびに酵素免疫検定方法および他の標識付け例
えば螢光標識付け、色素標識付けなどを用いる類
似の測定法が使用されうる。方法a)では放射性
標識付けが好ましく、また方法b)では酵素標識
付けが好ましい。かかる方法は専門家には知られ
ておりそしてここでは詳細に記載する必要はな
い。この検出反応では標識付けされたプロコラー
ゲン−ペプチドはヨーロツパ特許第4940号の記載
からそれ自体既知の方法で抗体を競り合うので、
従つて形成された抗体−抗体複合物中における標
識付けされた抗原の量は、標識付けされていない
抗原が測定すべき試料中に多く含有されればされ
るほどよりわずかとなる。それゆえ複合物の標識
例えば放射能または酵素活性、あるいは抗原−抗
体複合物を分離した後の上澄み液の標識がプロコ
ラーゲン−ペプチド(型)またはプロコラーゲ
ン−ペプチドCol1(型)の既知量を含有する試
料により作成された検査曲線に基づき検査すべき
試料中に含有される抗原量を確認するのに使用さ
れうる。方法b)では方法a)におけると同様に
複合物中の標識が測定されるのが好ましい。
ならびに酵素免疫検定方法および他の標識付け例
えば螢光標識付け、色素標識付けなどを用いる類
似の測定法が使用されうる。方法a)では放射性
標識付けが好ましく、また方法b)では酵素標識
付けが好ましい。かかる方法は専門家には知られ
ておりそしてここでは詳細に記載する必要はな
い。この検出反応では標識付けされたプロコラー
ゲン−ペプチドはヨーロツパ特許第4940号の記載
からそれ自体既知の方法で抗体を競り合うので、
従つて形成された抗体−抗体複合物中における標
識付けされた抗原の量は、標識付けされていない
抗原が測定すべき試料中に多く含有されればされ
るほどよりわずかとなる。それゆえ複合物の標識
例えば放射能または酵素活性、あるいは抗原−抗
体複合物を分離した後の上澄み液の標識がプロコ
ラーゲン−ペプチド(型)またはプロコラーゲ
ン−ペプチドCol1(型)の既知量を含有する試
料により作成された検査曲線に基づき検査すべき
試料中に含有される抗原量を確認するのに使用さ
れうる。方法b)では方法a)におけると同様に
複合物中の標識が測定されるのが好ましい。
溶液からの抗原−抗体複合物の分離は過、吸
引過、遠心分離などのような当業者に知られた
そのための慣用方法により遂行されうる。抗血清
を固体担体例えば試薬ガラス器具の内壁に結合さ
せて使用することも可能である。
引過、遠心分離などのような当業者に知られた
そのための慣用方法により遂行されうる。抗血清
を固体担体例えば試薬ガラス器具の内壁に結合さ
せて使用することも可能である。
好ましくは本方法は、高特異的な抗プロコラー
ゲン−ペプチドCol1(型)血清を用いて形成さ
れた抗原−抗体複合物をその高特異的な血清に対
応する第2の抗体を使用して未反応抗原から分離
して実施される。ここで好ましいのはその抗血清
の取得に使用された動物種のγ−グロブリンに対
する抗体である。抗原すなわちプロコラーゲン−
ペプチド(型)またはプロコラーゲン−ペプチ
ドCol1(型)の標識付けは蛋白質の標識付けに
ついて知らされた方法を用いて実施されうる。放
射線核種を用いる放射性標識付けの場合は125Iを
使用するのが好ましい。この放射線核種を用いる
標識付けにはクロラミンT法〔P.J.McConahey
氏他「Int.Arch.Allergy」第29巻第185頁(1966
年)参照〕が好ましい。
ゲン−ペプチドCol1(型)血清を用いて形成さ
れた抗原−抗体複合物をその高特異的な血清に対
応する第2の抗体を使用して未反応抗原から分離
して実施される。ここで好ましいのはその抗血清
の取得に使用された動物種のγ−グロブリンに対
する抗体である。抗原すなわちプロコラーゲン−
ペプチド(型)またはプロコラーゲン−ペプチ
ドCol1(型)の標識付けは蛋白質の標識付けに
ついて知らされた方法を用いて実施されうる。放
射線核種を用いる放射性標識付けの場合は125Iを
使用するのが好ましい。この放射線核種を用いる
標識付けにはクロラミンT法〔P.J.McConahey
氏他「Int.Arch.Allergy」第29巻第185頁(1966
年)参照〕が好ましい。
プロコラーゲン−ペプチド(型)およびプロ
コラーゲン−ペプチドCol1(型)を測定するた
めの酵素免疫検定方法はまた当該動物種例えば家
兎のγ−グロブリンに対する抗体が酵素標識付け
されるようにも実施されうる。この様式の酵素免
疫検定では、抗原−抗体複合物の形成後に残留す
る抗プロコラーゲン−ペプチド血清部分を担体に
結合したプロコラーゲン−ペプチド(型)また
はプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)に結合
させそして次に家兎のγ−グロブリンに対する酵
素標識付けされた抗体と反応させることにより測
定する。
コラーゲン−ペプチドCol1(型)を測定するた
めの酵素免疫検定方法はまた当該動物種例えば家
兎のγ−グロブリンに対する抗体が酵素標識付け
されるようにも実施されうる。この様式の酵素免
疫検定では、抗原−抗体複合物の形成後に残留す
る抗プロコラーゲン−ペプチド血清部分を担体に
結合したプロコラーゲン−ペプチド(型)また
はプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)に結合
させそして次に家兎のγ−グロブリンに対する酵
素標識付けされた抗体と反応させることにより測
定する。
次に結合された酵素標識付けされた抗体量を酵
素反応を測定することにより定量し、そしてこれ
は試料中のプロコラーゲン−ペプチド(型)お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の未
知量と反比例する。
素反応を測定することにより定量し、そしてこれ
は試料中のプロコラーゲン−ペプチド(型)お
よびプロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の未
知量と反比例する。
本発明による測定法にとつて、プロコラーゲン
−ペプチドCol1(型)に対する適当な抗血清を
入手することが決定的である。このものはまたプ
ロコラーゲン−ペプチド(型)に対して親和性
を有する。
−ペプチドCol1(型)に対する適当な抗血清を
入手することが決定的である。このものはまたプ
ロコラーゲン−ペプチド(型)に対して親和性
を有する。
免疫賦与するには合目的々にはプロコラーゲン
−ペプチドCol1(型)が使用される。免疫賦与
は複合フロインド氏アジユバンドの存在下にヤギ
のような実験動物、好ましくは家兎にプロコラー
ゲン−ペプチドCol1(型)を皮下注射すること
により遂行される。この場合抗原量は1動物当り
0.2〜0.5mgである。
−ペプチドCol1(型)が使用される。免疫賦与
は複合フロインド氏アジユバンドの存在下にヤギ
のような実験動物、好ましくは家兎にプロコラー
ゲン−ペプチドCol1(型)を皮下注射すること
により遂行される。この場合抗原量は1動物当り
0.2〜0.5mgである。
以下の例により本発明をさらに説明する。
例 1
プロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の調製
プロコラーゲン−ペプチド(型)60mgを必要
量の緩衝液(緩衝液1:0.05Mトリス/HCl、PH
8.0、0.02M CaCl2)中に溶解させそして55℃に
加温する。420単位のコラーゲナーゼを添加後こ
の混合物を55℃で15分間培養する。37℃に冷却し
そして420単位のコラーゲナーゼを添加した後培
養をさらに3時間続行する。次にこの混合物を2
種の緩衝液(緩衝液2:0.005Mトリス/HCl、
PH8.6、2M尿素、緩衝液3:0.005Mトリス/
HCl、PH8.6、8M尿素)で透析しそして緩衝液3
で平衡化されたDEAE−セルロースカラム(1.6
×5cm)に加える。
量の緩衝液(緩衝液1:0.05Mトリス/HCl、PH
8.0、0.02M CaCl2)中に溶解させそして55℃に
加温する。420単位のコラーゲナーゼを添加後こ
の混合物を55℃で15分間培養する。37℃に冷却し
そして420単位のコラーゲナーゼを添加した後培
養をさらに3時間続行する。次にこの混合物を2
種の緩衝液(緩衝液2:0.005Mトリス/HCl、
PH8.6、2M尿素、緩衝液3:0.005Mトリス/
HCl、PH8.6、8M尿素)で透析しそして緩衝液3
で平衡化されたDEAE−セルロースカラム(1.6
×5cm)に加える。
カラム上に結合された蛋白質をNaCl勾配(0
〜0.3M)を用いて溶離する。溶出液を230nmで
の吸収についておよびプロコラーゲン−ペプチド
(型)に対して特異的である抗体を使用して抗
原活性について再検査する。カラムから溶出する
最後のピークは通常プロコラーゲン−ペプチド
Col1(型)を含有する。このペプチドを0.01M
(MH4)2CO3で透析して脱塩しそして凍結乾燥す
る。
〜0.3M)を用いて溶離する。溶出液を230nmで
の吸収についておよびプロコラーゲン−ペプチド
(型)に対して特異的である抗体を使用して抗
原活性について再検査する。カラムから溶出する
最後のピークは通常プロコラーゲン−ペプチド
Col1(型)を含有する。このペプチドを0.01M
(MH4)2CO3で透析して脱塩しそして凍結乾燥す
る。
免疫学的測定(RIA)の実施
25μgのプロコラーゲン−ペプチド(型)を
1ミリキユリーの沃素125を用いクロラミンT法
により標識付けしそして結合しなかつた沃素を透
析により除去する。放射線免疫試験を実施するに
際してそれ以上の段階は好ましくは0.04%の非イ
オン系洗浄剤例えばツイーン20の存在下に実施
される。結合曲線はそれぞれ2ngの標識付けさ
れたプロコラーゲン−ペプチド(型)またはプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1(型)を用いて測
定される。血清または他の体液の未知試料中にお
けるプロコラーゲン−ペプチド(型)およびプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総量の濃
度は以下の抑制試験で測定される。
1ミリキユリーの沃素125を用いクロラミンT法
により標識付けしそして結合しなかつた沃素を透
析により除去する。放射線免疫試験を実施するに
際してそれ以上の段階は好ましくは0.04%の非イ
オン系洗浄剤例えばツイーン20の存在下に実施
される。結合曲線はそれぞれ2ngの標識付けさ
れたプロコラーゲン−ペプチド(型)またはプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1(型)を用いて測
定される。血清または他の体液の未知試料中にお
けるプロコラーゲン−ペプチド(型)およびプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の総量の濃
度は以下の抑制試験で測定される。
一定量の抗体を未知試料と4℃で16時間予備培
養しそして標識付けされたペプチド2ngを添加し
た後、さらに8時間4℃で培養する。次に過剰の
家兎免疫グロブリンに対する抗体を加えそして免
疫複合物中に結合された抗原を溶液から分離す
る。未知試料の抑制活性を標識付けされてないプ
ロコラーゲン−ペプチド(型)またはプロコラ
ーゲン−ペプチドCol1(型)の標準濃度の活性
と比較する。
養しそして標識付けされたペプチド2ngを添加し
た後、さらに8時間4℃で培養する。次に過剰の
家兎免疫グロブリンに対する抗体を加えそして免
疫複合物中に結合された抗原を溶液から分離す
る。未知試料の抑制活性を標識付けされてないプ
ロコラーゲン−ペプチド(型)またはプロコラ
ーゲン−ペプチドCol1(型)の標準濃度の活性
と比較する。
試料として健康な患者の血清を抑制試験に用い
るならば、RIAを用いてプロコラーゲン−ペプチ
ド(型)について見出されたよりも典型的には
およそ3倍高いプロコラーゲン−ペプチドCol1
(型)+プロコラーゲン−ペプチド(型)の値
が見出される。
るならば、RIAを用いてプロコラーゲン−ペプチ
ド(型)について見出されたよりも典型的には
およそ3倍高いプロコラーゲン−ペプチドCol1
(型)+プロコラーゲン−ペプチド(型)の値
が見出される。
例 2
酵素免疫検定による免疫学的測定
血清または他の体液の未知試料中におけるプロ
コラーゲン−ペプチド(型)濃度を下記酵素免
疫試験を用いて測定する。
コラーゲン−ペプチド(型)濃度を下記酵素免
疫試験を用いて測定する。
一定量の抗プロコラーゲン−ペプチドCol1(
型)血清を未知試料と4℃で2時間半予備培養す
る。次にこの混合物をミクロ力価プレートのプロ
コラーゲン−ペプチド20ngを積層させた凹部に
ピペツトに加えそして4℃で18時間培養する。上
澄み液を注ぎ出しそして凹部を生理食塩溶液で洗
つたのち家兎のγ−免疫グロブリンに対する酵素
標識付けされた抗体(例えばペルオキシダーゼ標
識付け)の一定量を加えそして室温で5時間培養
する。上澄み液を注ぎ出しそして生理食塩溶液で
洗つた後酵素基質(ペルオキシターゼ標識付け
H2O2の場合)および色原体(例えばo−フエニ
レンジアミン)の添加により酵素反応を開始させ
る。室温で30分間培養した後、6M HCl 50μlの
添加により反応を停止させる。適当な測光計を用
い30分後に溶液の着色強度を測定する。この着色
強度は結合された酵素標識付けされた抗体の量と
反比例し従つて試料中のプロコラーゲン−ペプチ
ドの未知量と反比例する。プロコラーゲン−ペプ
チド(型)またはプロコラーゲン−ペプチド
Col1(型)の既知量を含有する溶液を用いて作
成された検定曲線を用いて試料中のプロコラーゲ
ン−ペプチド(型)+プロコラーゲン−ペプチ
ドCol1(型)の量が調査されうる。
型)血清を未知試料と4℃で2時間半予備培養す
る。次にこの混合物をミクロ力価プレートのプロ
コラーゲン−ペプチド20ngを積層させた凹部に
ピペツトに加えそして4℃で18時間培養する。上
澄み液を注ぎ出しそして凹部を生理食塩溶液で洗
つたのち家兎のγ−免疫グロブリンに対する酵素
標識付けされた抗体(例えばペルオキシダーゼ標
識付け)の一定量を加えそして室温で5時間培養
する。上澄み液を注ぎ出しそして生理食塩溶液で
洗つた後酵素基質(ペルオキシターゼ標識付け
H2O2の場合)および色原体(例えばo−フエニ
レンジアミン)の添加により酵素反応を開始させ
る。室温で30分間培養した後、6M HCl 50μlの
添加により反応を停止させる。適当な測光計を用
い30分後に溶液の着色強度を測定する。この着色
強度は結合された酵素標識付けされた抗体の量と
反比例し従つて試料中のプロコラーゲン−ペプチ
ドの未知量と反比例する。プロコラーゲン−ペプ
チド(型)またはプロコラーゲン−ペプチド
Col1(型)の既知量を含有する溶液を用いて作
成された検定曲線を用いて試料中のプロコラーゲ
ン−ペプチド(型)+プロコラーゲン−ペプチ
ドCol1(型)の量が調査されうる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 プロコラーゲン−ペプチド(型)およびプ
ロコラーゲン−ペプチドCol1(型)の両抗原を
同時に免疫学的に測定するに当り、 a 検査試料に関して過剰である一定量の抗プロ
コラーゲン−ペプチドCol1(型)血清を前記
両抗原を含有する試料と反応せしめ、標識形態
にある前記両抗原のうちの一方の一定量を加
え、形成された抗原−抗体複合物を分離しそし
てその複合物および/または上澄み液中の標識
抗原の量を測定するか、または b 検査試料に関して過剰である一定量の前記血
清を前記両抗原を含有する試料と反応せしめ、
該血清中の抗体の未反応量を担体に結合した特
定の過剰量の前記両抗原のうちの一方で固定
し、特定の過剰量の標識形態にある第2抗体と
反応させそして次に結合されたおよび/または
遊離の第2抗体の量を測定する ことを特徴とする方法。 2 標識付けが放射性、酵素性または蛍光性標識
付けであることを特徴とする前記特許請求の範囲
第1項記載の方法。 3 前記方法a)において抗原−抗体複合物の分
離がその抗体に対して親和性を有する第2の抗体
を用いて遂行されることを特徴とする前記特許請
求の範囲第1項または第2項記載の方法。 4 前記方法a)において放射性標識付けが用い
られることを特徴とする前記特許請求の範囲第1
〜3項のいずれか一つに記載の方法。 5 標識付けが沃素125を用いて遂行されること
を特徴とする前記特許請求の範囲第1〜4項のい
ずれか一つに記載の方法。 6 前記方法b)において酵素が標識付けに用い
られることを特徴とする前記特許請求の範囲第1
〜5項のいずれか一つに記載の方法。 7 複合物中における標識抗原が測定されること
を特徴とする前記特許請求の範囲第1〜6項のい
ずれか一つに記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19823209149 DE3209149A1 (de) | 1982-03-13 | 1982-03-13 | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
DE32091494 | 1982-03-13 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS58168961A JPS58168961A (ja) | 1983-10-05 |
JPH0588421B2 true JPH0588421B2 (ja) | 1993-12-22 |
Family
ID=6158138
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP58039299A Granted JPS58168961A (ja) | 1982-03-13 | 1983-03-11 | プロコラーゲン―ペプチド類の測定法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4504587A (ja) |
EP (1) | EP0089008B1 (ja) |
JP (1) | JPS58168961A (ja) |
AT (1) | ATE55489T1 (ja) |
DE (2) | DE3209149A1 (ja) |
Families Citing this family (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3209149A1 (de) * | 1982-03-13 | 1983-10-06 | Hoechst Ag | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
US4628027A (en) * | 1982-05-19 | 1986-12-09 | Molecular Engineering Associates, Ltd. | Vitro diagnostic methods using monoclonal antibodies against connective tissue proteins |
DE3331627A1 (de) * | 1983-09-01 | 1985-03-21 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Verfahren zur immunologischen bestimmung fuer proteine in koerperfluessigkeiten, unter verwendung monovalenter antikoerperfragmente |
SE8304836D0 (sv) * | 1983-09-09 | 1983-09-09 | Pharmacia Ab | Sett att bestemma forendringar i ledbrosk |
US5030576A (en) * | 1986-04-30 | 1991-07-09 | Genentech, Inc. | Receptors for efficient determination of ligands and their antagonists or agonists |
US4859609A (en) * | 1986-04-30 | 1989-08-22 | Genentech, Inc. | Novel receptors for efficient determination of ligands and their antagonists or agonists |
US5316914A (en) * | 1986-09-04 | 1994-05-31 | Fuji Yakuhin Kogyo Kabushiki Kaisha | Method for determining human collagen peptides by way of enzyme immunoassay |
ES2056850T3 (es) * | 1987-05-02 | 1994-10-16 | Hoechst Ag | Anticuerpo monoclonal para la determinacion inmunologica selectiva de peptido de procolageno (tipo iii) y procolageno (tipo iii) en liquidos corporales. |
DE3714634A1 (de) * | 1987-05-02 | 1988-11-17 | Hoechst Ag | Verfahren zur selektiven immunologischen bestimmung von intaktem prokollagen peptid (typ iii) und prokollagen (typ iii) in koerperfluessigkeiten und mittel zu dessen durchfuehrung |
US5679583A (en) * | 1987-05-02 | 1997-10-21 | Hoechst Aktiengesellschaft | Monoclonal antibodies for the selective immunological determination of intact procollagen peptide (type III) and procollagen (type III) in body fluids |
GB2208865B (en) * | 1987-08-19 | 1991-12-11 | Farmos Group Ltd | Purified propeptide of procollagen type iii, antibody to the propeptide and assay method using the antibody. |
US6010862A (en) * | 1987-11-06 | 2000-01-04 | Washington Research Foundation | Methods of detecting collagen type III degradation in vivo |
US6027903A (en) * | 1987-11-06 | 2000-02-22 | Washington Research Foundation | Kit for detecting analyte indicative of type I collagen resorption in vivo |
US5320970A (en) * | 1987-11-06 | 1994-06-14 | Washington Research Foundation | Detection of collagen degradation in vivo |
US6153732A (en) * | 1987-11-06 | 2000-11-28 | Washington Research Foundation | Kit for detecting analyte indicative of type II collagen resorption in vivo |
US5300434A (en) * | 1987-11-06 | 1994-04-05 | Washington Research Foundation | Hybridoma cell line producing an antibody to type-I collagen amino-terminal telopeptide |
US5962639A (en) * | 1987-11-06 | 1999-10-05 | Washington Research Foundation | Synthetic peptides corresponding to telopeptide sequences of cross-linked type I collagen metabolites |
US5702909A (en) * | 1987-11-06 | 1997-12-30 | Washington Research Foundation | Methods of detecting collagen type II degradation in vivo |
US4973666A (en) * | 1987-11-06 | 1990-11-27 | Washington Research Foundation | Peptide fragments containing HP and LP cross-links |
ES2065350T3 (es) * | 1988-04-27 | 1995-02-16 | Hoechst Ag | Anticuerpo monoclonal para la determinacion immunologica selectiva de peptido (tipo iii) intacto y procolageno (tipo iii) en liquidos corporales. |
US5541295A (en) * | 1993-02-12 | 1996-07-30 | The Board Of Governors For Higher Education State Of Rhode Island And Providence Plantations | Detection of type II collagen and its peptides |
DK104093D0 (da) * | 1993-09-17 | 1993-09-17 | Osteometer A S | Fremgangsmaade til bestemmelse af collagen-fragmenter i legemsvaesker, test-kit og midler til udoevelse af fremgangsmaaden og anvendelse af fremgangsmaaden til diagnosticering af lidelser associeret til collagen-metabolismen |
US6110689A (en) * | 1994-01-21 | 2000-08-29 | Osteometer A/S | Method of assaying collagen fragments in body fluids, a test kit and means for carrying out the method and use of the method to diagnose the presence of disorders associated with the metabolism of collagen |
GB9506050D0 (en) | 1995-03-24 | 1995-05-10 | Osteometer A S | Assaying collagen fragments in body fluids |
ATE199185T1 (de) | 1994-10-17 | 2001-02-15 | Osteometer Biotech As | Einschätzung der fragmentierungsmuster von kollagen in körperflüssigkeiten und diagnose von mit dem kollagenmetabolismus zusammenhängenden störungen |
US6107047A (en) * | 1996-03-21 | 2000-08-22 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
GB9617616D0 (en) | 1996-08-22 | 1996-10-02 | Osteometer Biotech As | Assaying protein fragments in body fluids |
US6660481B2 (en) | 1996-12-09 | 2003-12-09 | Osteometer Biotech A/S | Sandwich assays for collagen type I fragments |
US6117646A (en) * | 1997-09-22 | 2000-09-12 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
US7541149B1 (en) | 1998-05-28 | 2009-06-02 | Siemens Healthcare Diagnostics, Inc. | Monoclonal antibody and assay for detecting PIIINP |
US6916903B2 (en) | 1998-06-19 | 2005-07-12 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
US6602980B1 (en) | 1998-06-19 | 2003-08-05 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
US20120058948A1 (en) * | 2006-10-16 | 2012-03-08 | Stultz Collin M | Collagen peptides as immune modulators |
JP2011510297A (ja) * | 2008-01-18 | 2011-03-31 | バトリックス・メディカル・インコーポレイテッド | 動脈瘤のための診断バイオマーカー |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2816841A1 (de) * | 1978-04-18 | 1979-10-31 | Max Planck Gesellschaft | Radioimmunologische bestimmung von prokollagen (typ iii) und prokollagen- peptid (typ iii) |
DE3209149A1 (de) * | 1982-03-13 | 1983-10-06 | Hoechst Ag | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
-
1982
- 1982-03-13 DE DE19823209149 patent/DE3209149A1/de not_active Withdrawn
-
1983
- 1983-03-10 EP EP83102338A patent/EP0089008B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1983-03-10 DE DE8383102338T patent/DE3381781D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1983-03-10 AT AT83102338T patent/ATE55489T1/de active
- 1983-03-11 US US06/474,457 patent/US4504587A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-03-11 JP JP58039299A patent/JPS58168961A/ja active Granted
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
EUR.J.BIOCHEM=1976 * |
EUR.J.BIOCHEM=1978 * |
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Publication number | Publication date |
---|---|
EP0089008A3 (en) | 1986-02-12 |
EP0089008A2 (de) | 1983-09-21 |
EP0089008B1 (de) | 1990-08-08 |
US4504587A (en) | 1985-03-12 |
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