JPH04144692A - ジフルクトース・ジアンヒドリドiの製造方法 - Google Patents
ジフルクトース・ジアンヒドリドiの製造方法Info
- Publication number
- JPH04144692A JPH04144692A JP2265907A JP26590790A JPH04144692A JP H04144692 A JPH04144692 A JP H04144692A JP 2265907 A JP2265907 A JP 2265907A JP 26590790 A JP26590790 A JP 26590790A JP H04144692 A JPH04144692 A JP H04144692A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- streptomyces
- inulin
- dfai
- solution
- mci
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 23
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 claims abstract description 21
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 claims abstract description 19
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims abstract description 14
- GTDPSWPPOUPBNX-UHFFFAOYSA-N ac1mqpva Chemical compound CC12C(=O)OC(=O)C1(C)C1(C)C2(C)C(=O)OC1=O GTDPSWPPOUPBNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 28
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 28
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 16
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 abstract description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 abstract description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 abstract description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 abstract description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 abstract description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 abstract description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 2
- 108010090785 inulinase Proteins 0.000 abstract 2
- 240000005528 Arctium lappa Species 0.000 abstract 1
- 235000003130 Arctium lappa Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000008078 Arctium minus Nutrition 0.000 abstract 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 abstract 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 abstract 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract 1
- 240000008892 Helianthus tuberosus Species 0.000 abstract 1
- 235000003230 Helianthus tuberosus Nutrition 0.000 abstract 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 abstract 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract 1
- 235000020429 malt syrup Nutrition 0.000 abstract 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 13
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 10
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 10
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 7
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 7
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 6
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 6
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 3
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 3
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 3
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N aldehydo-L-rhamnose Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 2
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BJHIKXHVCXFQLS-UYFOZJQFSA-N fructose group Chemical group OCC(=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO BJHIKXHVCXFQLS-UYFOZJQFSA-N 0.000 description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007362 sporulation medium Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 241000186074 Arthrobacter globiformis Species 0.000 description 1
- 241000186073 Arthrobacter sp. Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-WHFBIAKZSA-N LL-2,6-diaminopimelic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC[C@H](N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 241000187130 Streptomyces chartreusis Species 0.000 description 1
- 238000000184 acid digestion Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N aldehydo-D-xylose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 229940099112 cornstarch Drugs 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000013615 non-nutritive sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- -1 textonone Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
[産業上の利用分野]
本発明は、ジフルクトース・ジアンヒドリドI(以下r
DFAI Jと称す)の製造方法に関するものである
。
DFAI Jと称す)の製造方法に関するものである
。
[従来の技術及び発明が解決しようとする問題点1DF
AIはフルクトース2分子が1−2′、2−1′の間で
脱水縮合した構造を持つ三糖類であり、ジャクソンらに
より1929年に単離同定されている。
AIはフルクトース2分子が1−2′、2−1′の間で
脱水縮合した構造を持つ三糖類であり、ジャクソンらに
より1929年に単離同定されている。
(Bur、 5tand、 J、 Re5−、3.12
7.1929)。
7.1929)。
DFAIは、動物体内では代謝されない、非発酵性の糖
であるため低カロリー甘味剤として注目されており、今
後美容食等多方面に利用されることが予想される。
であるため低カロリー甘味剤として注目されており、今
後美容食等多方面に利用されることが予想される。
ジャクソンらは、フルクトースを主成分とする多糖であ
るイヌリンを酸加水分解することにより、DFAIを得
ているが収率はわずか2%弱であり、化学的にイヌリン
を加水分解する方法は効率的とはいえない。
るイヌリンを酸加水分解することにより、DFAIを得
ているが収率はわずか2%弱であり、化学的にイヌリン
を加水分解する方法は効率的とはいえない。
そこで近年、微生物学的方法を利用してイヌリンからD
FAIを製造する方法が提唱されている。例えば、特定
のかび(Carbohydr 、 Res 、 、互、
340゜1979 )或いはアルスロバクタ−・グロ
ビフォルミス(特開昭62 + 275693号公報)
の産生ずるイヌリン分解酵素を用いてイヌリンがらDF
AIを生成させることが報告されている。また、本発明
者らの一部は、アルスロバクタ−・エスピー(MCI
2493 )の産生ずるイヌリン分解酵素によりDFA
Iが生成することを報告している(特願平2−4499
6号)。しかしながら、微生物学的方法によるDFAI
の製造方法については、まだ数が少なく、効率的に生産
する酵素の提供が必要である。
FAIを製造する方法が提唱されている。例えば、特定
のかび(Carbohydr 、 Res 、 、互、
340゜1979 )或いはアルスロバクタ−・グロ
ビフォルミス(特開昭62 + 275693号公報)
の産生ずるイヌリン分解酵素を用いてイヌリンがらDF
AIを生成させることが報告されている。また、本発明
者らの一部は、アルスロバクタ−・エスピー(MCI
2493 )の産生ずるイヌリン分解酵素によりDFA
Iが生成することを報告している(特願平2−4499
6号)。しかしながら、微生物学的方法によるDFAI
の製造方法については、まだ数が少なく、効率的に生産
する酵素の提供が必要である。
またストレプトマイセス属に属する細菌がDFAIを生
成させる酵素を生産していることについては、まだ報告
されていない。
成させる酵素を生産していることについては、まだ報告
されていない。
[問題を解決するための手段]
そこで、本発明者らはイヌリンからDFAIを微生物学
的方法により製造する方法について鋭意研究を進めた結
果、ストレプトマイセス属に属する細菌、例えばストレ
プトマイセス・エスピーMCI2524 (微工研菌寄
第11734号)または、ストレプトマイセス・エスピ
ーMCI 2525 (微工研菌寄第11735号)由
来のイヌリン分解酵素が効率よ< DFAIを生産する
ことを見いだし、本発明を完成するに至った。
的方法により製造する方法について鋭意研究を進めた結
果、ストレプトマイセス属に属する細菌、例えばストレ
プトマイセス・エスピーMCI2524 (微工研菌寄
第11734号)または、ストレプトマイセス・エスピ
ーMCI 2525 (微工研菌寄第11735号)由
来のイヌリン分解酵素が効率よ< DFAIを生産する
ことを見いだし、本発明を完成するに至った。
すなわち本発明の要旨は、イヌリン含有溶液に、ストレ
プトマイセス属に属する細菌由来のイヌリン分解酵素を
作用させてDFAIを生成させることを特徴とするDF
AIの製造方法に存する。
プトマイセス属に属する細菌由来のイヌリン分解酵素を
作用させてDFAIを生成させることを特徴とするDF
AIの製造方法に存する。
以下、本発明を説明するに、本発明で使用するイヌリン
分解酵素は、ストレプトマイセス属に属する細菌、たと
えば、ストレプトマイセス、エスピーMCI 2524
(微工研菌寄第11734号)または、ストレプトマ
イセス・エスピーMCI 2525 (微工研菌寄第1
1735号)由来のものが好適である。
分解酵素は、ストレプトマイセス属に属する細菌、たと
えば、ストレプトマイセス、エスピーMCI 2524
(微工研菌寄第11734号)または、ストレプトマ
イセス・エスピーMCI 2525 (微工研菌寄第1
1735号)由来のものが好適である。
ストレプトマイセス・エスピーMCI 2524 及ヒ
ストレプトマイセス・エスピーMCI 2525は、本
発明者等により、天然土壌から分離された細菌であり、
その菌学的性状は次の通りである。
ストレプトマイセス・エスピーMCI 2525は、本
発明者等により、天然土壌から分離された細菌であり、
その菌学的性状は次の通りである。
ストレプトマイセス・エスピーMCI 2524につい
てa)形態学的特徴 胞子形成培地として、スターチ・無機塩寒天培地、及び
酵母エキス・麦芽エキス寒天培地を用い、27°C11
4日間培養後観察した。コロニーの色調は白〜灰色。基
中菌糸は分岐して伸長し分断は見られない。気菌糸は単
純分岐である。胞子鎖の形態はスターチ、無機塩寒天培
地上では、多くのものは長鎖のラセン状を示し、酵母エ
キス・麦芽エキス寒天培地上では、胞子形成が貧弱でホ
ック状から1〜2回のループ状を示す。胞子は楕円形〜
短円筒状、表面はトゲ状の突起におおわれている。
てa)形態学的特徴 胞子形成培地として、スターチ・無機塩寒天培地、及び
酵母エキス・麦芽エキス寒天培地を用い、27°C11
4日間培養後観察した。コロニーの色調は白〜灰色。基
中菌糸は分岐して伸長し分断は見られない。気菌糸は単
純分岐である。胞子鎖の形態はスターチ、無機塩寒天培
地上では、多くのものは長鎖のラセン状を示し、酵母エ
キス・麦芽エキス寒天培地上では、胞子形成が貧弱でホ
ック状から1〜2回のループ状を示す。胞子は楕円形〜
短円筒状、表面はトゲ状の突起におおわれている。
b)各培地上における性状
ISP[インターナショナル・ストレプトマイセス。
プロジェクト(International Stre
ptomyces Project)]規定の各種培地
上で27°C214日間培養後の性状は次に示すとおり
である。
ptomyces Project)]規定の各種培地
上で27°C214日間培養後の性状は次に示すとおり
である。
C)
生理学的性状
1)生育温度範囲
2)生育pH範囲
3)ゼラチンの液化
4)デンプンの加水分解
5)脱脂乳の凝固
ペプトン化
6)メラニン様色素の生成
(ペプトン・酵母エキス・鉄寒天、
トリプトン・酵母エキス寒天
及びチロシン寒天培地上)
7)硝酸塩の還元
8) NaC1耐性
15〜45°C
pH5〜10
陽性
陽性
陰性
陽性
陽性
陰性
7%で弱い生育
10%で生育せず
9)各種糖類からの酸の生成
り−グルコース
L−アラビノース
D−キシロース
D−フラクトース
シュークロース
L−ラムノース 士
ラフィノース +
イノシトール +
D−マンニトール +
+:利用する。±:利用が疑わしい、−:利用しないd
ン 菌体成分について MCI 2524号菌の細胞壁アミノ酸タイプは、全菌
体水解物の分析によりり、L−ジアミノピメリン酸が検
出されたことから、細胞壁タイプI型であることが確認
された。また、糖組成についても全菌体水解物中からグ
ルコース、ガラクトース及びリボースが検出されたが、
特徴的なパターンは認められなかった。
ン 菌体成分について MCI 2524号菌の細胞壁アミノ酸タイプは、全菌
体水解物の分析によりり、L−ジアミノピメリン酸が検
出されたことから、細胞壁タイプI型であることが確認
された。また、糖組成についても全菌体水解物中からグ
ルコース、ガラクトース及びリボースが検出されたが、
特徴的なパターンは認められなかった。
e)分類学的考察
以上の結果から当該放線菌(MCI 2524号菌)は
5trc且頃匹匹竪属に帰属することが判明した。
5trc且頃匹匹竪属に帰属することが判明した。
さらに野々村らによって提案されている、5tre t
om ces属のISP菌種検索(J 、 Ferme
nt 。
om ces属のISP菌種検索(J 、 Ferme
nt 。
technol 、、 Vol 、 52 、No 、
2 、p 、 78−92 、1974 )及びパー
ジエイズマニュアルオブシステマティノク バクテリオ
ロジ−(Bergey’s Manual ofsys
tematic Bacteriolgy 、 Vol
、 4 、 p 、 2451〜2492 。
2 、p 、 78−92 、1974 )及びパー
ジエイズマニュアルオブシステマティノク バクテリオ
ロジ−(Bergey’s Manual ofsys
tematic Bacteriolgy 、 Vol
、 4 、 p 、 2451〜2492 。
1989 )から種レベルの検索を行った。MCI25
24号菌は1)コロニー色調は灰色を呈する、2)ラセ
ン状の胞子鎖を形成し、胞子表面はトゲ状である、3)
メラニン様色素を生成する、4)特徴的な可溶性色素を
生成しないなどの特徴を有する。このような特徴を有す
る菌種としてれ胛匹瓜沙。
24号菌は1)コロニー色調は灰色を呈する、2)ラセ
ン状の胞子鎖を形成し、胞子表面はトゲ状である、3)
メラニン様色素を生成する、4)特徴的な可溶性色素を
生成しないなどの特徴を有する。このような特徴を有す
る菌種としてれ胛匹瓜沙。
S、fili 1nensis、S、canus、S、
chromofuscus S、antim coti
CUSなどが挙げられる。そこで本菌株とISP指定の
標準菌株の各種性状を比較したところ、下表に示すよう
に炭素源の資化性、NaC1耐性、その他の生理性状に
おいて一致しない点があった。従って本菌株をジ胆四凹
息朋sp 、 MCI 2524号菌を同定した。
chromofuscus S、antim coti
CUSなどが挙げられる。そこで本菌株とISP指定の
標準菌株の各種性状を比較したところ、下表に示すよう
に炭素源の資化性、NaC1耐性、その他の生理性状に
おいて一致しない点があった。従って本菌株をジ胆四凹
息朋sp 、 MCI 2524号菌を同定した。
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
2、ストレプトマイセス・エスピーMCI 2525に
ついてa)形態学的特徴 胞子形成培地として、スターチ・無機塩寒天培地及び酵
母エキス・麦芽エキス寒天培地を用い、27°C114
日間培養後観察した。コロニーの色調は白〜青味灰色。
ついてa)形態学的特徴 胞子形成培地として、スターチ・無機塩寒天培地及び酵
母エキス・麦芽エキス寒天培地を用い、27°C114
日間培養後観察した。コロニーの色調は白〜青味灰色。
基土菌糸は分枝して伸長し分断は見られない。気菌糸は
対生または疑似輪生分枝が見られる。
対生または疑似輪生分枝が見られる。
胞子鎖の形態は多くのものは長鎖のラセン状を示し、胞
子の分節が明瞭でない。胞子表面はトゲ状の突起におお
われている。
子の分節が明瞭でない。胞子表面はトゲ状の突起におお
われている。
b)各培地上における性状
ISP [インターナショナル・ストレプトマイセス・
プロジェクト(International Stre
ptomyces Project )]規定の各種培
地上で27°C114日間培養後の性状は次に示すとお
りである。
プロジェクト(International Stre
ptomyces Project )]規定の各種培
地上で27°C114日間培養後の性状は次に示すとお
りである。
Cン 生理学的性状
1)生育温度性状
2)生育pH範囲
3)ゼラチンの液化
4)デンプンの加水分解
5)脱脂乳の凝固
ペプトン化
6)メラニン様色素の生成
(ペプトン・酵母エキス・鉄寒天。
トリプトン・酵母エキス寒天 陽性及びチロシン寒
天培地上) 7)硝酸塩の還元 陽性8) Na
C1耐性 7%で弱い生育10%で2
,3コロニー生育 9)各種糖類からの酸の生成 り−グルコース L−アラビノース D−キシロース D−フラクトース シュークロース 15〜45°C pH4〜9 + + 陰性 陰性 L−ラムノース + ラフィノース + イノシトール + D−マンニトール + +;利用する、±:利用が疑わしい、−二利用しないd
)菌体成分について MCI 2525号菌の細胞壁アミノ酸タイプは、全菌
体氷解物の分析のよりり、L−ジアミノピノリン酸が検
出されたことから、細胞壁タイプI型であることが確認
された。また、糖組成についても全菌体水解物中〜グル
コース、ガラクトース、及びリボースが検出されたが、
特徴的なパターンは認められ4かった。
天培地上) 7)硝酸塩の還元 陽性8) Na
C1耐性 7%で弱い生育10%で2
,3コロニー生育 9)各種糖類からの酸の生成 り−グルコース L−アラビノース D−キシロース D−フラクトース シュークロース 15〜45°C pH4〜9 + + 陰性 陰性 L−ラムノース + ラフィノース + イノシトール + D−マンニトール + +;利用する、±:利用が疑わしい、−二利用しないd
)菌体成分について MCI 2525号菌の細胞壁アミノ酸タイプは、全菌
体氷解物の分析のよりり、L−ジアミノピノリン酸が検
出されたことから、細胞壁タイプI型であることが確認
された。また、糖組成についても全菌体水解物中〜グル
コース、ガラクトース、及びリボースが検出されたが、
特徴的なパターンは認められ4かった。
e)分類学的考察
以上の結果から当該放線菌(MCI 2525号菌戸7
至属に帰属することが判明した。
至属に帰属することが判明した。
さらに野々村らによって提案されている、シ翌逆墜二属
のISP菌種検索表(J、Fermentechnol
、、Vol、 52. No、2 、 p 、78−9
2.1974 )から種しlルの検索を行った。MCI
2524号菌は1)コロニーイは青味灰色を里する、
2)ラセン状の胞子鎖を形成し、胞子表面はトゲ状であ
る、3)メラニン様色素を生成する、4)特徴的な可溶
性色素を生成しないなどの特徴を有する。このような特
徴を有する菌種としてS、chartreusis 、
S、coerulescens、 S、1anatu
sなどが挙げられる。そこで本菌株とISP指定の標準
菌株の各種性状を比較したところ、下表に示すように炭
素源の資化性、NaC1耐性、その他生理性状において
一致しない点があった。したがって本菌株をジ胆臨四五
匹sp 、 MCI 2525号菌と同定した。
のISP菌種検索表(J、Fermentechnol
、、Vol、 52. No、2 、 p 、78−9
2.1974 )から種しlルの検索を行った。MCI
2524号菌は1)コロニーイは青味灰色を里する、
2)ラセン状の胞子鎖を形成し、胞子表面はトゲ状であ
る、3)メラニン様色素を生成する、4)特徴的な可溶
性色素を生成しないなどの特徴を有する。このような特
徴を有する菌種としてS、chartreusis 、
S、coerulescens、 S、1anatu
sなどが挙げられる。そこで本菌株とISP指定の標準
菌株の各種性状を比較したところ、下表に示すように炭
素源の資化性、NaC1耐性、その他生理性状において
一致しない点があった。したがって本菌株をジ胆臨四五
匹sp 、 MCI 2525号菌と同定した。
I
+
+
+
+
十
+
+
十
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
本発明で使用する、ストレプトマイセス属に属する細菌
は、通常の微生物が利用しうる栄養物を含有する培地で
培養することにより容易に増殖させることができる。炭
素源としては、グルコース、水飴、テキストノン、シュ
ークロース澱粉、糖蜜、動・植物油等を使用できる。ま
た窒素源として大豆粉、小麦胚芽、コーンステイープリ
カー、綿実粕、肉エキス、ペプトン酵母エキス、硫酸ア
ンモニウム、硝酸ソーダ、尿素等を使用できる。その他
必要に応じ、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグ
ネシウム、コバルト、塩素、燐酸、硫酸及びその他のイ
オンを生成する無機塩類を添加する事は有効である。
は、通常の微生物が利用しうる栄養物を含有する培地で
培養することにより容易に増殖させることができる。炭
素源としては、グルコース、水飴、テキストノン、シュ
ークロース澱粉、糖蜜、動・植物油等を使用できる。ま
た窒素源として大豆粉、小麦胚芽、コーンステイープリ
カー、綿実粕、肉エキス、ペプトン酵母エキス、硫酸ア
ンモニウム、硝酸ソーダ、尿素等を使用できる。その他
必要に応じ、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグ
ネシウム、コバルト、塩素、燐酸、硫酸及びその他のイ
オンを生成する無機塩類を添加する事は有効である。
本発明においては、キクイモ、ゴボウ等のイヌリン含有
量の高い植物の抽出液及びまたはイヌリンを唯一の炭素
源として含む溶液中で上記ストレプトマイセス属に属す
る細菌、たとえば、ストレプトマイセスエスピ−MCI
2524または、ストレプトマイセスエスピーMCI
2525由来のイヌリン分解酵素を作用させる。
量の高い植物の抽出液及びまたはイヌリンを唯一の炭素
源として含む溶液中で上記ストレプトマイセス属に属す
る細菌、たとえば、ストレプトマイセスエスピ−MCI
2524または、ストレプトマイセスエスピーMCI
2525由来のイヌリン分解酵素を作用させる。
その際、該細菌そのものを作用させても良いし、また該
細菌から該酵素を抽出し、そのまま、あるいは固定化等
を行い作用させても良い。
細菌から該酵素を抽出し、そのまま、あるいは固定化等
を行い作用させても良い。
細菌そのものを作用させる場合、例えば炭素源としての
イヌリンを約1〜10%含有し、その他、窒素源として
、大豆粉、小麦胚芽、コーンステイープリカー綿実粕、
肉エキス、ペプトン酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝
酸ソーダ、尿素等、更に必要に応じナトリウム、カリウ
ム、マグネシウム、コバルト、塩素、燐酸、硫酸及びそ
の他のイオンを生成する事のできる無機塩類等を添加し
た培地に本菌を接種し振どう培養をおこなう。この際培
養温度は20〜37°Cが、また培養時間は12〜12
0時間が好適である。得られた培養液を遠心分離により
除菌し、その上清中の酵素を加熱処理により失活させる
。そして濃縮を行ない、例えばこれを活性炭カラムに吸
着させる。蒸留水でフルクトースを溶出させた後、5%
エタノール水溶液にて溶出を行う。
イヌリンを約1〜10%含有し、その他、窒素源として
、大豆粉、小麦胚芽、コーンステイープリカー綿実粕、
肉エキス、ペプトン酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝
酸ソーダ、尿素等、更に必要に応じナトリウム、カリウ
ム、マグネシウム、コバルト、塩素、燐酸、硫酸及びそ
の他のイオンを生成する事のできる無機塩類等を添加し
た培地に本菌を接種し振どう培養をおこなう。この際培
養温度は20〜37°Cが、また培養時間は12〜12
0時間が好適である。得られた培養液を遠心分離により
除菌し、その上清中の酵素を加熱処理により失活させる
。そして濃縮を行ない、例えばこれを活性炭カラムに吸
着させる。蒸留水でフルクトースを溶出させた後、5%
エタノール水溶液にて溶出を行う。
この分画中にDFAIが得られるので、その分画を濃縮
乾固すると所望のDFAIを得ることができる。
乾固すると所望のDFAIを得ることができる。
また酵素を作用させる場合、例えば前記方法により培養
を行った培養液を遠心分離により除菌し、得られた炉液
を作用させてもよいし、或いは、該炉液を更に硫安(6
5%飽和)を加え塩析を行い、析出した沈殿物を遠心分
離により取得し、少量の水に懸濁させたのち透析を行い
、得られる粗酵素液を作用させてもよい。
を行った培養液を遠心分離により除菌し、得られた炉液
を作用させてもよいし、或いは、該炉液を更に硫安(6
5%飽和)を加え塩析を行い、析出した沈殿物を遠心分
離により取得し、少量の水に懸濁させたのち透析を行い
、得られる粗酵素液を作用させてもよい。
この培養炉液又は粗酵素液を例えば、pH6,0に調節
した0、01−0.1 Mのリン酸緩衝液中で約5%以
上の濃度のイヌリン30〜60°Cで30分間以上作用
させる事等によっても所望のDFAIがえられる。
した0、01−0.1 Mのリン酸緩衝液中で約5%以
上の濃度のイヌリン30〜60°Cで30分間以上作用
させる事等によっても所望のDFAIがえられる。
もとより、精製酵素を作用させてもよく、かかる精製酵
素は例えばDEAE −Toyopearl 650
M 、 SP −Toyopearl 650 Mカ
ラム(東ソー製)によるイオン交換クロマトグラフティ
ーにて精製を行った後Toyopearl HW55F
でゲル濾過を行うことにより、電気泳動により単一バン
ドを示す酵素標品を得ることができる。
素は例えばDEAE −Toyopearl 650
M 、 SP −Toyopearl 650 Mカ
ラム(東ソー製)によるイオン交換クロマトグラフティ
ーにて精製を行った後Toyopearl HW55F
でゲル濾過を行うことにより、電気泳動により単一バン
ドを示す酵素標品を得ることができる。
ストレプトマイセス・エスピーMCI 2524由来の
酵素標品は至適pHは6.0であり、また、55°Cで
最大活性を示した。同酵素はpH4,5〜9.0の範囲
で安定である。また、同酵素は30分間の熱処理では6
5°Cまでは安定であり、5DS−ポリアクリルアミド
電気泳動による分子量は約36,000であった。
酵素標品は至適pHは6.0であり、また、55°Cで
最大活性を示した。同酵素はpH4,5〜9.0の範囲
で安定である。また、同酵素は30分間の熱処理では6
5°Cまでは安定であり、5DS−ポリアクリルアミド
電気泳動による分子量は約36,000であった。
またストレプトマイセス、エスピーMCI 2525由
来の酵素標品の至適pHは5.3であり、また、55°
Cで最大活性を示した。同酵素はpH5〜10の範囲で
あり30分間の熱処理では60°Cまで安定である。ま
た、5DS−ポリアクリルアミド電気泳動による分子量
は約35,000であった。
来の酵素標品の至適pHは5.3であり、また、55°
Cで最大活性を示した。同酵素はpH5〜10の範囲で
あり30分間の熱処理では60°Cまで安定である。ま
た、5DS−ポリアクリルアミド電気泳動による分子量
は約35,000であった。
[実施例]
以下に実施例をあげて本発明の方法さらに具体的に説明
するが本発明はその要旨を越えない限りこれらに限定さ
れるものではない。
するが本発明はその要旨を越えない限りこれらに限定さ
れるものではない。
実施例1
市販イヌリン5%、酵母エキス0.02%、硝酸ナトリ
ウム0.2%、硫酸マグネシウム0.05%、塩化カリ
ウム0.05%、リン酸カリウム0.05%、塩化第二
鉄0.001%を含んだ培地150m1をpH7,0に
調整して1206C20分間蒸気滅菌した。この滅菌し
た培地にストレプトマイセス・エスピーMCI 252
4 菌を一白金耳接種し、160rpmで30°C17
2時間培養した。
ウム0.2%、硫酸マグネシウム0.05%、塩化カリ
ウム0.05%、リン酸カリウム0.05%、塩化第二
鉄0.001%を含んだ培地150m1をpH7,0に
調整して1206C20分間蒸気滅菌した。この滅菌し
た培地にストレプトマイセス・エスピーMCI 252
4 菌を一白金耳接種し、160rpmで30°C17
2時間培養した。
培養液の660 nmでのODは約12であった。
培養終了後遠心分離により菌体を除去し、培養炉液を得
た。得られた培養炉液を100 ’Cで1o分間加熱処
理することにより、酵素を失活させ、約10m1にまで
減圧濃縮した。この液は活性炭カラム(活性炭50gと
セライトNo、 53550 gの混合物を蒸留水にて
充填)に吸着させ、蒸留水1eを流したのも5%エタノ
ール水溶液で溶出した。
た。得られた培養炉液を100 ’Cで1o分間加熱処
理することにより、酵素を失活させ、約10m1にまで
減圧濃縮した。この液は活性炭カラム(活性炭50gと
セライトNo、 53550 gの混合物を蒸留水にて
充填)に吸着させ、蒸留水1eを流したのも5%エタノ
ール水溶液で溶出した。
溶出ピークを集めて減圧濃縮にて乾固してDFAIの粉
末を得た。得られたDFAIは原料イヌリンにたいして
収′:$13%であった。薄層クロマトグラフィー(シ
リカゲルプレート(Merck社)):展開溶媒n−ブ
タノール:エタノール:水=2:1:1(v/v/v)
によると、イヌリンの酸分解により得られた標準のDF
AIと■値(0,6)が一致した。
末を得た。得られたDFAIは原料イヌリンにたいして
収′:$13%であった。薄層クロマトグラフィー(シ
リカゲルプレート(Merck社)):展開溶媒n−ブ
タノール:エタノール:水=2:1:1(v/v/v)
によると、イヌリンの酸分解により得られた標準のDF
AIと■値(0,6)が一致した。
実施例2
実施例1で得られた培養炉液40m1を、10%のイヌ
リンを含む0.05 Mリン酸緩衝液40m1に加えて
50°Cで3時間反応させた。
リンを含む0.05 Mリン酸緩衝液40m1に加えて
50°Cで3時間反応させた。
反応液を加熱し酵素を失活させた後、活性炭カラムクロ
マトグラフィーを行い、5%エタノール水溶液にて溶出
させ、溶出液を減圧濃縮にて乾固してDFAIの粉末を
得た。HPLCで定量したところ、得られたDFAIは
2.2gであった。
マトグラフィーを行い、5%エタノール水溶液にて溶出
させ、溶出液を減圧濃縮にて乾固してDFAIの粉末を
得た。HPLCで定量したところ、得られたDFAIは
2.2gであった。
実施例3
実施例1と同様な培地にストレプトマイセス・エスピー
MCI 2525菌を一白金耳接種し160rpmで3
0°C172時間振どう培時間待った。培養液の660
nmでのODは約12であった。培養終了後遠心分離に
より菌体を除去し培養炉液を得た。得られた培養炉液を
10分間加熱処理する事により、酵素を失活させ、約1
0m1にまで減圧濃縮した。実施例1と同様な方法で、
精製してDFAIの粉末を得た。収率は原料イヌリンに
対して18%であった。
MCI 2525菌を一白金耳接種し160rpmで3
0°C172時間振どう培時間待った。培養液の660
nmでのODは約12であった。培養終了後遠心分離に
より菌体を除去し培養炉液を得た。得られた培養炉液を
10分間加熱処理する事により、酵素を失活させ、約1
0m1にまで減圧濃縮した。実施例1と同様な方法で、
精製してDFAIの粉末を得た。収率は原料イヌリンに
対して18%であった。
実施例4
実施例3で得られた培養炉液40m1を20%のイヌリ
ンを含む0.05Mリン酸緩衝40m1に加えて500
Cで5時間反応させた。
ンを含む0.05Mリン酸緩衝40m1に加えて500
Cで5時間反応させた。
実施例2と同様な方法で精製し、DFAIを得た。
得られたDFAIはHPLCで定量したところ5.7g
であった。
であった。
実施例5
ストレプトマイセス・エスピーMCI 2524菌を実
施例1と同様な方法で培養し、2eの培養液を得た。培
養後遠心分離により除菌し上清を粗酵素液とした。2e
の粗酵素液にハイポーラス型強塩基性陰イオン交換樹脂
HPA75(三菱化成社製)を67mM KH2PO4
−NaHPO4(pH6,92)リン酸緩衝液で緩衝化
したものを50 ml (湿潤状態)加え、室温で2時
間振盪撹拌し酵素を吸着固定化した。固定化酵素懸濁液
を上記リン酸緩衝液200m1で3回洗浄後吸引沖過し
て湿潤固定化酵素を得た。この固定化酵素を内径20m
mのカラムに充てんし、50°Cに保温した。この充て
んカラムに毎分0.1 mlで水を流し安定化させた後
、イヌリン3%水溶液1ぞを流速0.1m/minで流
して反応させた。反応後減圧濃縮し実施例1と同様に活
性炭カラムを用いて精製したところ13.5 gのDF
AIを得た。
施例1と同様な方法で培養し、2eの培養液を得た。培
養後遠心分離により除菌し上清を粗酵素液とした。2e
の粗酵素液にハイポーラス型強塩基性陰イオン交換樹脂
HPA75(三菱化成社製)を67mM KH2PO4
−NaHPO4(pH6,92)リン酸緩衝液で緩衝化
したものを50 ml (湿潤状態)加え、室温で2時
間振盪撹拌し酵素を吸着固定化した。固定化酵素懸濁液
を上記リン酸緩衝液200m1で3回洗浄後吸引沖過し
て湿潤固定化酵素を得た。この固定化酵素を内径20m
mのカラムに充てんし、50°Cに保温した。この充て
んカラムに毎分0.1 mlで水を流し安定化させた後
、イヌリン3%水溶液1ぞを流速0.1m/minで流
して反応させた。反応後減圧濃縮し実施例1と同様に活
性炭カラムを用いて精製したところ13.5 gのDF
AIを得た。
[発明の効果]
本発明のストレプトマイセス・エスピー MCI252
4 (微工研菌寄第11734号)、及び、ストレプト
マイセス・エスピーMCI 2525 (微工研菌寄第
11735号)等のストレプトマイセス属に属する細菌
由来のイヌリン分解酵素はイヌリンからDFAIを高収
率で製造することができる。
4 (微工研菌寄第11734号)、及び、ストレプト
マイセス・エスピーMCI 2525 (微工研菌寄第
11735号)等のストレプトマイセス属に属する細菌
由来のイヌリン分解酵素はイヌリンからDFAIを高収
率で製造することができる。
DFAIはダイエツト甘味料などとして広い分野での利
用が期待できる。
用が期待できる。
Claims (2)
- (1)イヌリン含有溶液に、ストレプトマイセス属に属
する細菌由来のイヌリン分解酵素を作用させてジフルク
トース・ジアンヒドリド I を生成させることを特徴と
するジフルクトース・ジアンヒドリド I の製造方法。 - (2)ストレプトマイセス属に属する細菌がストレプト
マイセス・エスピーMCI2524(微工研菌寄第11
734号)またはストレプトマイセス・エスピーMCI
2525(微工研菌寄第11735号)であることを特
徴とする請求項(1)記載の製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2265907A JPH04144692A (ja) | 1990-10-03 | 1990-10-03 | ジフルクトース・ジアンヒドリドiの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2265907A JPH04144692A (ja) | 1990-10-03 | 1990-10-03 | ジフルクトース・ジアンヒドリドiの製造方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH04144692A true JPH04144692A (ja) | 1992-05-19 |
Family
ID=17423759
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2265907A Pending JPH04144692A (ja) | 1990-10-03 | 1990-10-03 | ジフルクトース・ジアンヒドリドiの製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH04144692A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104611311A (zh) * | 2015-02-11 | 2015-05-13 | 大连民族学院 | 利用灰平链霉菌Streptomyces griseoplanus S501固态发酵生产外切菊粉酶的方法 |
-
1990
- 1990-10-03 JP JP2265907A patent/JPH04144692A/ja active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104611311A (zh) * | 2015-02-11 | 2015-05-13 | 大连民族学院 | 利用灰平链霉菌Streptomyces griseoplanus S501固态发酵生产外切菊粉酶的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4312948A (en) | Enzymic microbiological process for producing optically active aminoacids starting from hydantoins and/or racemic carbamoyl derivatives | |
US5057418A (en) | Process for the preparation of difructose dianhydride iii | |
JPH07106150B2 (ja) | 新規なl−アミノアシラ−ゼ | |
JPH04144692A (ja) | ジフルクトース・ジアンヒドリドiの製造方法 | |
US5234828A (en) | Process for producing novel heat-resistant β-galactosyltransferase | |
US5153128A (en) | Heat-resistant β-galactosyltransferase, its production process and its use | |
JPH03259090A (ja) | ジフルクトース・ジアンヒドリド3の製造法 | |
JP3003009B2 (ja) | マンノースイソメラーゼ及びそれを用いたマンノースの製造法 | |
JPH0716092A (ja) | ポルフィラン分解酵素、ネオアガロオリゴ糖およびそれらの製造方法 | |
JP2001069975A (ja) | キトサナーゼ | |
US5122460A (en) | Method of manufacturing inulotriose and/or inulotetrose using an exo-type hydrolase capable of hydrolyzing a fructan only every 3 or 4 sugar units from a terminal fructose | |
RU2077577C1 (ru) | Штамм бактерии delcya marina - продуцент щелочной фосфатазы и способ получения щелочной фосфатазы | |
JP2833081B2 (ja) | イヌロトリオース及び/又はイヌロテトラオースの製造方法 | |
JPH04237496A (ja) | 環状イヌロオリゴ糖の製造方法 | |
JPH05279377A (ja) | 新規二糖類化合物及びその製造法 | |
JPS62275694A (ja) | ジフルクト−ス、ジアンヒドリド▲iii▼の製造法 | |
JPH03292887A (ja) | 新規なエキソ型加水分解酵素及びイヌロペンタオースの製造法 | |
JPS6098982A (ja) | ポリアミン測定用酵素の製造法 | |
JPH05137572A (ja) | 耐熱性アデノシン−5’−3リン酸スルフリラーゼ及びその製造法 | |
JP2593710B2 (ja) | イヌリナーゼ活性を有する酵素組成物およびその製造法 | |
JP3917723B2 (ja) | ラクトン加水分解酵素およびその製造法 | |
JP3601618B2 (ja) | ラミナリペンタオース生産酵素の製造方法 | |
JPS59179094A (ja) | トリアゾ−ルデオキシリボヌクレオシドの製造法 | |
JPH02163082A (ja) | キトサナーゼの製造方法 | |
JPH03247295A (ja) | ジフルクトース・ジアンヒドリドiの製造方法 |