JPH04135456A - 高濃度のリゾホスファチジルコリンを含むリゾレシチンを採取する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （技術分野） 本発明は、原料となるリゾレシチンより、必要な成分を
採取する方法に係り、特に、種々の成分の中で、リゾホ
スファチジルコリン（ＬＰＧ）を高濃度に含むリゾレシ
チンを採取する方法に関するものである。

（背景技術） リゾレシチン（リゾリン脂質）は、分子中に水酸基を持
つために、レシチン（リン脂質）よりも親水性が大きく
、ｐＨや温度変化に対して安定なエマルジョンを形成す
る特徴を有するが、中でも、リゾホスファチジルコリン
（Ｌ　Ｐ　Ｃ）は、非イオン界面活性剤に似た挙動を示
し、塩類濃度の高い溶液に対しても界面活性を保つと言
われている。

このため、ＬＰＣは、食品、化粧品、医薬品等の各分野
において、広く応用が期待されているものである。

ところで、市販されているリゾレシチンは、卵黄レシチ
ンや大豆レシチン等の動植物性レシチンに、酵素を作用
させて、該レシチンを加水分解することにより、製造さ
れているが、原料によって多少組成は異なるものの、一
般に、前記リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ）の他に
、リゾホスファチジルエタノールアミン（ＬＰＥ）やり
ゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）、更にはリゾ化されてい
ない未反応の各種リン脂質を含んでおり、また多くの場
合、原料レシチンに由来する中性油脂を含んでいるので
、ＬＰＣ濃度はそれほど高くはないのである。

而して、より高濃度のＬＰＧを含むリゾレシチンを製造
するためには、アセトン等の溶剤を用いて中性油脂を除
去し、更にアルコール分画を行なう方法が知られている
。しかし、この方法は、操作が面倒である上に、大豆レ
シチン等の植物性レシチンから得られたリゾレシチンを
原料とする場合等には、原料にＬＰＧ以外のアルコール
可溶性成分が多足に含まれることから、アルコール分画
操作を繰り返して行なっても、Ｌ　Ｐ　Ｇ濃度を７０％
以上にすることは非常に困難である問題を内在している
。

また、シリカゲル等を用いるクロマト法は、高濃度ＬＰ
Ｇを分画することは可能であるが、生産性が悪く、高価
であって、工業的手法ではないのである。

（解決課題） このような事情を背景として、本発明は為されたもので
あって、その解決課題とするところは、簡便な操作によ
って、原料リゾレシチン（リゾリン脂質混合物）の中か
ら、リゾホスファチジルコリン（Ｌ　Ｐ　Ｇ　）を効率
的に取り出して、高濃度のＬ　Ｐ　Ｇを含むリゾレシチ
ンを有利に採取することにある。

（解決手段） 上記課題を解決するために、本発明者らが鋭意研究を重
ねた結果、所定の二酸化炭素とアルコールの混合溶媒に
て、脱脂されたリゾレシチンの抽出操作を行なうと、各
種のりプリン脂質及びリゾ化されずに残った各種の未反
応のリン脂質の中にあって、リゾホスファチジルコリン
（ＬＰＧ）が抽出され易く、未反応のリン脂質は抽出さ
れ難いことを見い出し、そしてこの知見に基づいて、本
発明を完成したのである。

すなわち、本発明は、レシチンに酵素を作用させて得ら
れるリゾレシチンを脱脂した後、液体状態若しくは超臨
界状態の二酸化炭素と炭素数が１〜４のアルコールとか
らなる混合溶媒を抽出溶媒として用い、該混合溶媒にて
、前記脱脂されたリゾレシチンの抽出操作を行なって、
その抽出液から前記混合溶媒を除去することによって、
高濃度のリゾホスファチジルコリンを含むリゾレシチン
を採取することを、その要旨とするものである。

（具体的構成） ところで、本発明において、抽出操作が施されるべきリ
ゾレシチンは、動物または植物由来のレシチンが酵素に
より加水分解されたものであって、例えば、卵黄、牛脳
、腫脹等から得られる動物由来のレシチンや、大豆、と
うもろこし、なたね等の植物種子から得られる植物由来
のレシチンに、所定の酵素を作用させることにより得ら
れる。なお、通常、酵素として、ホスホリパーゼＡ２が
使用されるが、これには、市販の製剤を使用することが
出来る。また、レシチンや、リゾレシチンも各種類のも
のが製品化され、市販されているので、それらを使用す
ることが可能である。

そして、かかる酵素処理によって得られた原料リゾレシ
チンが、中性油脂を含む場合には、Ｉ−ＰＣの抽出操作
に先立って、予め油脂分が除去せしめられるのである。

油脂分の除去方法としては、従来から行なわれている公
知の各種手法を用いることが出来、例えば、アセトン抽
出や超臨界二酸化炭素抽出によって、油脂分を抽出分離
することが出来る。

また、特に、原料リゾレシチンが植物性レシチンに由来
するものである場合には、ＬＰＣの抽出操作において、
原料リゾレシチンと抽出溶媒との接触を容易にするため
に、該リゾレシチンを抽出溶媒に不溶の粉粒体と予め混
合しておくことが望ましい。何故なら、一般に、固体ま
たは液体であるリゾレシチン相に対して、抽出溶媒の浸
透は著しく悪く、リゾレシチン相の抽出溶媒に対する溶
解速度も遅いところから、単にリゾレシチンに抽出溶媒
を注入しただけでは、抽出に時間がかかり、必要以上に
抽出溶媒を使用するようになるばかりでなく、抽出溶媒
の浸透の違いにより、再現性の悪い不安定な抽出になる
恐れがあるからである。

それ故、原料リゾレシチンを、抽出操作に先立つて、予
め粉粒体と混合しておけば、抽出溶媒に対する該リゾレ
シチンの接触面積を大幅に増やして、抽出を容易にする
ことが出来るのであり、更に抽出溶媒の流路を均等にし
て、溶液の流れを一様にすることが出来るのである。

因みに、かかる粉粒体の具体例としては、後述する二酸
化炭素とアルコールとからなる抽出溶媒に不溶で且つ原
料リゾレシチンに対して不活性なもの（即ち、原料リゾ
レシチンと反応したり、強固な吸着作用を示さないもの
）であれば、特に制限はなく、でんぷん粉末、大豆蛋白
、卵白、セルロース系粉末、多孔性シリカ等が用いられ
得る。

また、抽出溶媒に配合されるアルコールが、２％以上の
水を含まなければ、デキストリン粉末も使うことが出来
る。

また、粉粒体と原料リゾレシチンとの混合比については
、均一な混合が為され得る割合に適宜に決定されればよ
いが、必要以上に粉粒体を用いることば経済的でないの
で、原料リゾレシチンの１重量部に対して、粉粒体を０
．２〜４重量部の範囲で混合するのが適当である。

さらに、原料リゾレシチンが粉末状または液状の場合は
、粉粒体と均一に混合せしめることは容易であるが、固
体または著しく高粘度の液体の場合には、原料リゾレシ
チンを適当な溶剤に溶かしてから、粉粒体と混合して、
その後乾燥するとよい。その際、原料リゾレシチンの溶
解に使用する溶剤を、後述する抽出溶媒の一成分とされ
るアルコールとする場合には、混合後の乾燥は省略する
ことが出来る。

なお、卵黄由来のリゾレシチンにおいては、卵黄中の蛋
白質が上記の粉粒体の役目を果たすので、特別に粉粒体
を添加する必要はない。要するに、原料の性状にあわせ
、抽出が均等に為されるように、粉粒体の添加を考慮す
ればよいのである。

このようにして調製された原料リゾレシチンの組成は、
リゾホスファチジルコリン（ＬＰＧ）以外に、リゾホス
ファチジルエタノールアミン（ＬＰＥ）やりゾホスファ
チジン酸（ＬＰＡ）、更には、リゾ化されずに残った未
反応のホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジル
エタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルイノシトー
ル（ＰＩ）等を含むものである。そして、本発明におい
ては、このような原料リゾレシチンに対して、以下の如
き抽出溶媒を用いて抽出操作を行なうことにより、ＬＰ
Ｃを効率的に抽出せしめ、その濃度を著しく高めるので
ある。

すなわち、本発明では、液体状態若しくは超臨界状態の
二酸化炭素と炭素数が１〜４のアルコールの混合溶媒を
、抽出溶媒として使用する。そのうちの二酸化炭素は、
抽出溶媒としてよく知られているものであるが、本発明
においては、アルコールに可溶のリゾレシチンおよび未
反応のレシチンの抽出比率をコントロールする作用も有
するのである。なお、二酸化炭素の超臨界状態は、温度
が臨界温度：　３１．１°Ｃ以上、圧力が臨界圧力＝７
゜３８ＭＰａ　（７５，２ｋｇ／ｃＪ）以」−の状態で
あって、また液体状態は、臨界温度よりも低い温度下の
状態をいう。

一方、アルコールはＬＰＧ、ＬＰＥ、ＰＣ，ＰＥ等の溶
剤として働くものであって、炭素数が１〜４のものが何
れも使用され得、その中から１種類若しくは２種類以上
が適宜に組み合わされて選択されることとなる。なお、
炭素数が４より大きいと、リゾレシチンの溶解度が低く
なり、事実上、抽出溶剤として作用し得なくなるのであ
る。また、アルコールの水分含有量は１０重量％程度以
下であることが望ましい。それを越える割合で水分が含
まれる場合には、リゾレシチンの溶解度を低下させるだ
けでなく、ＬＰＣの分別能力を低下させる等、高濃度の
ＬＰＧ抽出に悪影響を及ぼす恐れがあるからである。

そして、かかるアルコールと前記二酸化炭素の混合割合
は、前記原料リゾレシチンの組成等に応じて適宜に決定
されるところであるが、好ましくは、アルコールの配合
量が、４〜２０重量％程度である。アルコールの配合量
が、この範囲より少ない場合には、ＬＰＧの溶解度が小
さくなって収率が落ちる傾向があり２反対に混合割合が
これより大きいと、リゾレシチンの溶解性をコントロー
ルする二酸化炭素の作用が低下して、ＬＰＧ濃度が上が
り難くなる懸念があるからである。

ところで、第１図は、本発明手法が適用される抽出装置
の一例を示すフローシートであるが、そこに示されるよ
うに、ホンへ２より二酸化炭素が供給される一方、タン
ク４よりエントレーナたる所定のアルコールが供給され
、それらが流路上で所定の割合に混合されることによっ
て、抽出溶媒が調製されるようになっている。そして、
該抽出溶媒は、原料リゾレシチンが収容され、且つ所定
温度及び所定圧力に制御されている抽出器６内に供給さ
れ、以てＬＰＧの抽出が行なわれるのである。

しかる後、原料リゾレシチン中の可溶成分を溶かし込ん
だ抽出液が、抽出器６外へ取り出され、分離器８，１０
において、先ず、常圧に戻されて、−酸化炭素とアルコ
ール溶液とに分離される。次いで、常法により、減圧蒸
溜にてアルコールが除去されることにより、目的とする
高濃度のｒ、　ｐ　ｃを含むリゾレシチンを得るのであ
る。なお、３５はポンプであり、１２はフローメーター
、１４は積算式ガスメーターである。

より詳細には、上記の抽出操作に際しては、般に、温度
が低い程、または圧力が高い程、抽出溶媒に対する原料
リゾレシチンの溶解度は大きくなる。一方、未反応のホ
スファチジルコリン（ＰＣ）が原料リゾレシチン中に残
存している場合には、ＬＰＧと共に、ＰＣが抽出されて
くるので、その場合には、若干、抽出温度を高めに設定
するほうがよい。なお、より具体的な温度条件及び圧力
条件は、目的とするＬＰＣ濃度や収率、また原料リグレ
シチンの組成等に応じて、適宜に最適な条件が選ばれる
こととなるが、一般に、温度が７０°Ｃ以上ではリゾレ
シチンの熱変質が著しくなる問題があり、また過度な低
温抽出は経済的でなく、更にまた、圧力が４５ＭＰａを
越える場合には、装置設計及び維持管理上問題があると
ころから、酸化炭素として、超臨界状態のものを使用す
る場合には、温度＝３１〜６５°Ｃ１圧カニ８〜４５Ｍ
Ｐａの範囲が好ましく、より好ましくは、温度器 ＝４０〜６０°Ｃ１圧カニ１０〜３０ＭＰａである。

また、液体状態の二酸化炭素を使用する場合には、温度
ニー２０〜３０°Ｃ１圧カニ５〜８ＭＰａの範囲が好ま
しい。

このようにして、前記脱脂された原料リゾレシチンに、
二酸化炭素とアルコールとからなる抽出溶媒を適用した
場合には、各種リゾレシチン及び未反応のレシチンの中
において、ＬＰＣが最も効率的に抽出され、反対に未反
応のレシチンは抽出され難く、中でもＰＩは殆ど抽出さ
れないのである。従って、かかる抽出操作を経ることに
よって、ＰＩの殆どは残留成分として残り、また、抽出
液中にＬＰＧ以外のリゾレシチンや未反応のレシチンが
多量に混入することも効果的に抑制されることから、抽
出されるリゾレシチンのＬＰＣ濃度を著しく高めること
が出来るのである。

なお、具体的な抽出時間の設定は、抽出装置の規模、二
酸化炭素とアルコールの混合溶媒の送り量、その他の抽
出条件や原料リゾレシチンの組成等に応じて、適宜に行
なわれるところであるが、抽出時間があまり長くなると
、次第にＬＰＧ以外のアルコール可溶成分が混入してく
ることとなるため、一般に、抽出開始後の相対的に早い
時期の抽出区分を採取することが望ましい。

（実施例） 以下に、本発明の幾つかの実施例を示し、本発明を更に
具体的に明らかにすることとするが、本発明が、そのよ
うな実施例の記載によって、何等の制約をも受けるもの
でないことば、言うまでもないところである。

また、本発明には、以下の実施例の他にも、更には上記
の具体的記述以外にも、本発明の趣旨を逸脱しない限り
において、当業者の知識に基づいて種々なる変更、修正
、改良等を加え得るものであることが、理解されるべき
である。

実施例　１ 市販のリゾレシチン（協和発酵工業製、エルマイザーＡ
）から、常法に従いアセトンを用いて油脂骨を除去し、
減圧下で溶剤を除去して、粉末状の脱脂リゾレシチンを
得た。そして、この脱脂すゾレシチン：３０ｇを、約６
０ｍ２のヘキサンに）容解し、デキストリン粉末（松谷
化学製、パインフロー）：６０ｇと混合した後、４０°
Ｃ１真空下で溶剤を除去して、リゾレシチンとデキスト
リンとの粉末混合物を調製した。

次いで、この粉末混合物を５００　ｍｌの抽出容器に入
れ、超臨界二酸化炭素とエタノール（２重量％の水分を
含む）との混合溶媒（エタノール比率：・１６重間％）
を連続的に注入して、Ｌ　Ｐ　Ｇの抽出を８時間行なっ
た。抽出条件は、温度＝４０°Ｃ１圧カニ３０ＭＰａ、
溶媒の平均流量：２００１’ｌ！／ｈであった。かかる
抽出により得られたりヅレシチンの量は、２．７ｇであ
り、収率は９．０％であった。

そして、このようにして採取されたリゾレシチンの組成
を、「基準油脂分析法」　（日本油化学協会編、２．２
．８．４ａ−８６）の［リン脂質リン組成ｊに準拠した
薄層クロマトグラフ法によって分析し、主なリン脂質に
ついて、その結果を下記第１表に示した。また、抽出原
料とした脱脂リゾレシチン（コントロール）の組成も分
析し、同表に合わせて示した。

その結果より明らかなように、ＬＰＧ濃度は、３０．１
％（抽出前）から６４．８％（抽出後）にまで高められ
た。また、未反応のＰＥ、Ｐｒは、抽出されなかった。

実施例　２ ホスファチジルコリン含有■を強化した大豆レシチン（
ツルーレシチン工業製、ＰＣ３５）：１００重量部に対
して、水：５０重量部を加え、撹拌して均一な混合液と
した。そして、この混合液に、０，１％のホスホリパー
ゼＡ２製剤（ＮＯＶＯ社製、レシターゼ１０　Ｌ　）を
加え、ＩＮ水酸化ナトリウム溶液で、ｐ　Ｈを５．５〜
６．５に調整しながら、５０〜６０°Ｃで４８時間、酵
素反応を行なった。そして、得られた酵素反応物を５０
〜６０’Ｃで真空乾燥して水分を除去した後、アセトン
洗浄と真空乾燥を施して、油脂分を除去し、脱脂リゾレ
シチンを得た。

次に、この脱脂リゾレシチン＝２０ｇを、約４Ｏｍｆｌ
のエタノールに？岩屑し、デキストリン＝６０ｇと混合
した後、真空下で溶剤を除去して、リゾレシチンとデキ
ストリンの粉末混合物を調製した。

そして、この粉末混合物を５００　ｍｌの抽出容器に入
れ、超臨界二酸化炭素とエタノールの混合溶媒（エタノ
ール比率：１６重量％）を連続的に注入して、Ｌ　Ｐ　
Ｃの抽出を４時間行なった。抽出条件は、温爪：４０°
Ｃ３圧カニ３０ＭＰａ、溶媒の平均流ｆｆｌ：２０ＯＮ
ｐ／ｈてあった。かかる抽出により得られ、たリゾレシ
チンの量は、５．８ｇであり、収率は２９％であった。

かくして採取されたりヅレシチンと抽出原料とした脱脂
リゾレシチンについて、組成を分析したところ、第１表
に示す結果か得られ、Ｌ　Ｐ　Ｇ濃度が８８．１％にま
で高められていることが判った。

実施例　３ 実施例２と同様の脱脂リゾレシチン：２０ｇを、約４０
雄のエタノールに溶解し、パーライト（東回パーライト
工業製、ドブコパーライトＮｏ、　３　’４　）３０ｇ
を添加混合した後、真空下で溶剤を除去して、リゾレシ
チンとパーライトとの粉末混合物を調製した。

次いでこの粉末混合物を５００　ｍｌ、の抽出容器に入
れ、液化二酸化炭素とエタノールとの混合溶媒（エタノ
ール比率二８重量％）を連続的に注入して、Ｌ　Ｐ　Ｇ
の抽出を８時間行なった。抽出条件は、温度＝５°Ｃ１
圧カニ７ＭＰａ、溶媒の平均流量；４０ＯＮｆｆ／ｈと
した。

かくして得られたりヅレシチンの収率は２０．０％であ
った。また、採取されたリゾレシチンの組成を分析した
とごろ、ＬＰＧ濃度は８９．３％と高く、抽出溶媒に液
化二酸化炭素を配合する場合にも、超臨界二酸化炭素を
配合する場合と同様に、良好な結果が得られた。

実施例　４ 市販の粉末卵黄：１００重量部に対して、８０重量部の
水を加えて分散液を作り、この分散液に対して０．１％
のホスホリパーゼＡ２製Ｅ（ＮＯｖＯ社製、レシターゼ
ｌ０Ｌ）を加え、ＩＮ水酸化す１−リウム溶液でｐ　Ｈ
５，５〜６．５に調整しながら、５０〜６０°Ｃで２４
時間、酵素反応を行なった。

そして、得られた酵素反応物を５０〜６０°Ｃで真空乾
燥して、リゾ化粉末卵黄を得た。次いで、ごのリゾ化粉
末卵黄：　１．００　ｇを、５００　ｍ（ｌの抽出管に
入れ、温度；４０°Ｃ１圧力ニ３０ＭＰａの超臨界二酸
化炭素を用いて、平均流量４０ＯＮβ／ｈで８時間抽出
を行ない、リゾ化粉末卵黄中の油脂骨を除去した。

そして、この脱脂されたリゾ化粉末卵黄に対して、温度
：４０°Ｃ１圧力ニ３０ＭＰａ、溶媒の平均流量：４０
ＯＮｆ！、／ｈの抽出条件にて、超臨界酸化炭素とエタ
ノールの／ｌ’を合溶媒（エタノール比率＝１６重量％
）を用いて、ＬＰＣの抽出を４時間行なった。

かくして採取されたリゾレシチンと抽出原料とした脱脂
リゾ化粉末卵黄について、組成を分析したところ、第１
表に示す結果が得られ、ＬＰＣ濃度が９１．２％に高め
られていることが判った。

実施例　５〜Ｂ 超臨界二酸化炭素と混合するアルコールの種類を変更し
て調製した４種類の抽出溶媒のそれぞれを用いて、実施
例１で調製したリゾレシチンとデギストリンの粉末混合
物の抽出を行なった。

各々の抽出において得られたリゾレシチンについて、組
成を分析したところ、第１表に示す結果が得られ、何れ
もＬＰＣ濃度が効果的に高められていることが判った。

また、何れの溶媒の場合でも、ＰＥ、ＰＩは抽出されな
かった。

従って、炭素数１〜４のアルコールは何れも抽出溶媒と
して使用可能であり、とりわけ、メタノール及びエタノ
ールが良好な溶剤であることが認められた。

（発明の効果） 以−１−の説明から明らかなように、本発明手法に従え
ば、種々のリゾレシチン及びリゾ化されずに残った種々
の未反応のレシチンを含有する原料リゾレシチンより、
簡単な操作で、且つ良好な収率をもって、効率的にＩ、
ＰＣを抽出することが出来るのである。

従って、本発明手法は、工程の簡略化を図り得て、且つ
良好な生産性を達成し得る、工業生産に適した高濃度Ｌ
ＰＧを含むリゾレシチンの製造法として、極めて利用価
値の高いものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明手法が適用される抽出装置の一例を示
すフローシートである。 ２：ボンへ　　　　　４＝タンク

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. レシチンに酵素を作用させて得られるリゾレシチンを脱
   脂した後、液体状態若しくは超臨界状態の二酸化炭素と
   炭素数が１〜４のアルコールとからなる混合溶媒を抽出
   溶媒として用い、該混合溶媒にて、前記脱脂されたリゾ
   レシチンの抽出操作を行なって、その抽出液から前記混
   合溶媒を除去することを特徴とする高濃度のリゾホスフ
   ァチジルコリンを含むリゾレシチンを採取する方法。