JPH0361485A - 固定化リパーゼ酵素剤 - Google Patents
固定化リパーゼ酵素剤Info
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- JPH0361485A JPH0361485A JP1198473A JP19847389A JPH0361485A JP H0361485 A JPH0361485 A JP H0361485A JP 1198473 A JP1198473 A JP 1198473A JP 19847389 A JP19847389 A JP 19847389A JP H0361485 A JPH0361485 A JP H0361485A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、油脂の改質に使用する固定化リパーゼ酵素剤
及びその調製法に関する。
及びその調製法に関する。
固定化リパーゼ酵素剤を用いて油脂を改質する方法は公
知である。この固定化リパーゼ酵素剤は、担体にリパー
ゼを吸着保持させたものである。担体としてはセライト
、豚骨、ケイソウ土、カオリナイト、炭酸カルシウムな
どの無機質担体が一般的であるが、陰イオン交換樹脂の
ような合成吸着剤を使用したものも知られている(たと
えば特開昭61−202688号、特開昭60−989
84号参照)。しかしながらこれら従来公知の固定化リ
パーゼ酵素剤では、酵素活性を長時間維持させることが
できないという問題があった。
知である。この固定化リパーゼ酵素剤は、担体にリパー
ゼを吸着保持させたものである。担体としてはセライト
、豚骨、ケイソウ土、カオリナイト、炭酸カルシウムな
どの無機質担体が一般的であるが、陰イオン交換樹脂の
ような合成吸着剤を使用したものも知られている(たと
えば特開昭61−202688号、特開昭60−989
84号参照)。しかしながらこれら従来公知の固定化リ
パーゼ酵素剤では、酵素活性を長時間維持させることが
できないという問題があった。
したがって本発明の目的は、酵素活性を長時間維持させ
ることができる固定化リパーゼ酵素剤及びその調製法を
提供することである。
ることができる固定化リパーゼ酵素剤及びその調製法を
提供することである。
上記目的は、担体として水分保持率が3重量%以上の担
体を使用することにより達成される。すなわち本発明は
、リパーゼを水分保持率が3重量%以上の担体に吸着保
持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤を提供
するものである。本発明はさらに、リパーゼの溶液と水
分保持率が3重量%以上の担体を混合し、リパーゼを担
体に吸着させた後、乾燥することを特徴とする固定化リ
パーゼ酵素剤の調製法を提供するものである。
体を使用することにより達成される。すなわち本発明は
、リパーゼを水分保持率が3重量%以上の担体に吸着保
持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤を提供
するものである。本発明はさらに、リパーゼの溶液と水
分保持率が3重量%以上の担体を混合し、リパーゼを担
体に吸着させた後、乾燥することを特徴とする固定化リ
パーゼ酵素剤の調製法を提供するものである。
本発明において「水分保持率」とは、担体を0、01〜
1. OTorrにおいて、70℃で、60時間乾燥し
た後の担体の含水率をいう。
1. OTorrにおいて、70℃で、60時間乾燥し
た後の担体の含水率をいう。
酵素剤を構成するリパーゼは、ヒマの種子、ナタネナの
種子などの植物種子、カビ、酵母、細菌などに由来する
ものが挙げられるが、加水分解活性の高い市販の凍結乾
燥品を好適に使用できる。
種子などの植物種子、カビ、酵母、細菌などに由来する
ものが挙げられるが、加水分解活性の高い市販の凍結乾
燥品を好適に使用できる。
担体としては、水分保持率が3重量%以上のものであれ
ばよく、具体的には弱酸性もしくは強酸性陽イオン交換
樹脂が使用されるが、特に好ましいのは弱酸性陽イオン
交換樹脂である。その具体例としては、三菱化t?、■
製陽イオン交換樹脂’vVK−13及びWK−11(い
ずれもカルボン酸型)が挙げられる。
ばよく、具体的には弱酸性もしくは強酸性陽イオン交換
樹脂が使用されるが、特に好ましいのは弱酸性陽イオン
交換樹脂である。その具体例としては、三菱化t?、■
製陽イオン交換樹脂’vVK−13及びWK−11(い
ずれもカルボン酸型)が挙げられる。
本発明において、2種以上の担体を組み合せて使用して
もよい。このような場合、担体全体としての水分保持率
が3重量%以上であればよく、使用した複数の担体の水
分保持率がすべて3重量%以上である必要はない。
もよい。このような場合、担体全体としての水分保持率
が3重量%以上であればよく、使用した複数の担体の水
分保持率がすべて3重量%以上である必要はない。
又、酵素活性化剤や活性発現を目的として添加される物
質が水分保持性を有する場合にも担体の水分保持率に寄
与するものと考えられるので複合担体の水分保持率に組
み入れることは何らさしつかえない。
質が水分保持性を有する場合にも担体の水分保持率に寄
与するものと考えられるので複合担体の水分保持率に組
み入れることは何らさしつかえない。
酵素剤の調製は、常法に従って担体100重量部を2〜
200容量部の酵素溶液に浸漬し、0、01〜l 00
Torrの減圧下で1−24時間乾燥することにより行
うことができる。担体に吸着保持されるリパーゼの量が
、担体の1重量部当り0、001〜0.1重量部の範囲
となるようにするのが適当である。また、リパーゼと共
に、レシチンのような酵素活性発現剤を使用してもよい
。レシチンの添加量は、担体の1重量部当り0.001
〜0、1重量部の範囲が適当である。
200容量部の酵素溶液に浸漬し、0、01〜l 00
Torrの減圧下で1−24時間乾燥することにより行
うことができる。担体に吸着保持されるリパーゼの量が
、担体の1重量部当り0、001〜0.1重量部の範囲
となるようにするのが適当である。また、リパーゼと共
に、レシチンのような酵素活性発現剤を使用してもよい
。レシチンの添加量は、担体の1重量部当り0.001
〜0、1重量部の範囲が適当である。
酵素剤の調製の際、水の他に、酵素と、必要により添加
したレシチンを分散するためにアルコール、アセトン、
グリセロール、油脂、ヘキサン、界面活性剤等、及びこ
れらの適当な組合せを添加して分散を促進してもよい。
したレシチンを分散するためにアルコール、アセトン、
グリセロール、油脂、ヘキサン、界面活性剤等、及びこ
れらの適当な組合せを添加して分散を促進してもよい。
本発明の酵素剤は、ゴマ油、ナタネ油、綿実油、大豆油
、椿油、オリーブ油、ヒマシ油、ヤシ油、パーマ油など
の植物油、イワシ油、ニシン油、サンマ油、サメ油、鯨
油などの海産動物油、牛脂、豚脂などの陸産動物油、あ
るいはこれらの混合油の改質に有効に使用できる。
、椿油、オリーブ油、ヒマシ油、ヤシ油、パーマ油など
の植物油、イワシ油、ニシン油、サンマ油、サメ油、鯨
油などの海産動物油、牛脂、豚脂などの陸産動物油、あ
るいはこれらの混合油の改質に有効に使用できる。
エステル交換反応は窒素ガスなどの不活性ガス雰囲気中
あるいは減圧下で行うこともできる。反応温度は20〜
80℃、反応時間は1〜30時間の範囲が適当である。
あるいは減圧下で行うこともできる。反応温度は20〜
80℃、反応時間は1〜30時間の範囲が適当である。
原料油に対する酵素剤の添加量は、通常原料油100重
量部に対し酵素剤l〜20重量部とするのが適当である
。
量部に対し酵素剤l〜20重量部とするのが適当である
。
エステル交換反応およびエステル合成反応時に水が存在
するとトリグリセライドの収率低下や反応速度が小さく
なる等の問題点を生じるため原料油および反応基質は予
め減圧乾燥機などで脱水し、反応系中の水分含量を20
0ppm以下、とくに1100pp以下とするのが好ま
しい。脱水処理のために、モレキュラーシーブ3Aのよ
うな脱水剤を原料油に加えておくことが推奨される。
するとトリグリセライドの収率低下や反応速度が小さく
なる等の問題点を生じるため原料油および反応基質は予
め減圧乾燥機などで脱水し、反応系中の水分含量を20
0ppm以下、とくに1100pp以下とするのが好ま
しい。脱水処理のために、モレキュラーシーブ3Aのよ
うな脱水剤を原料油に加えておくことが推奨される。
酵素としてリゾバス・デレマー(Rhizopusde
lemar )由来のリパーゼの凍結乾燥標品(天野製
薬@製、加水分解活性3000 U/mg)を使用した
。これを水に溶かし、リパーゼ溶液(13,3mg/m
jりとし、さらに活性発現剤であるレシチンを4mg/
mj!となるように添加した。この溶液4Hにセライト
535(@マンビル社製)、陽イオン交換(封脂”vV
K−13(三菱化成■製)、陽イオン交換樹脂’VVK
−11(三菱化成@製)、陰イオン交換樹脂5A−10
AS(三菱化成@製)、陰イオン交換樹脂HPA−25
(三菱化成@製)、キレート樹脂CR−20(三菱化成
@製)、吸着樹脂HP−2MG (三菱化成■製)、吸
着樹脂HP−10(三菱化a@31り 、あるいは吸着
樹脂HP−20(三菱化成@)!!り4gを添加し、4
0℃、5 QTorr以下で16〜18時間乾燥し、酵
素剤を調製した。
lemar )由来のリパーゼの凍結乾燥標品(天野製
薬@製、加水分解活性3000 U/mg)を使用した
。これを水に溶かし、リパーゼ溶液(13,3mg/m
jりとし、さらに活性発現剤であるレシチンを4mg/
mj!となるように添加した。この溶液4Hにセライト
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@製)、吸着樹脂HP−2MG (三菱化成■製)、吸
着樹脂HP−10(三菱化a@31り 、あるいは吸着
樹脂HP−20(三菱化成@)!!り4gを添加し、4
0℃、5 QTorr以下で16〜18時間乾燥し、酵
素剤を調製した。
なたね油:粗パームオレイン=50:50(重量比)を
80℃、20Torrで20分間減圧脱水を行い水分含
量を200ppm以下とした。これにモレキュラーシー
ブ3A([ユニオン昭和社製)を油の重量に対して10
%添加したものを改質を行う油脂とした。
80℃、20Torrで20分間減圧脱水を行い水分含
量を200ppm以下とした。これにモレキュラーシー
ブ3A([ユニオン昭和社製)を油の重量に対して10
%添加したものを改質を行う油脂とした。
前記酵素剤をカラムに3g充填し、油脂が吸水しないよ
うに注意しながら前記混合油脂を3.3g/hrの流量
で通液し、装置全体を60℃に保温して反応を行ったと
ころ、活性半減期は表1のごとくであった。
うに注意しながら前記混合油脂を3.3g/hrの流量
で通液し、装置全体を60℃に保温して反応を行ったと
ころ、活性半減期は表1のごとくであった。
表
また、半減期の最も長いWK−13を用いた場合につい
て、反応16時間以降のトリグリセライド収率は99%
以上であった。
て、反応16時間以降のトリグリセライド収率は99%
以上であった。
本発明の固定化リパーゼ酵素剤は、酵素活性が長時間維
持されるので、油脂の改質操作を長時間連続的に実施す
ることができる。
持されるので、油脂の改質操作を長時間連続的に実施す
ることができる。
Claims (4)
- (1)水分保持率が3重量%以上の担体にリパーゼを吸
着保持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤。 - (2)担体が陽イオン交換樹脂である請求項(1)記載
の固定化リパーゼ酵素剤。 - (3)リパーゼの溶液と水分保持率が3重量%以上の担
体を混合し、リパーゼを担体に吸着させた後、乾燥する
ことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤の調製法。 - (4)担体が陽イオン交換樹脂である請求項(3)記載
の固定化リパーゼ酵素剤の調製法。
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---|---|---|---|
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