JPH027634B2 - - Google Patents

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JPH027634B2
JPH027634B2 JP56059570A JP5957081A JPH027634B2 JP H027634 B2 JPH027634 B2 JP H027634B2 JP 56059570 A JP56059570 A JP 56059570A JP 5957081 A JP5957081 A JP 5957081A JP H027634 B2 JPH027634 B2 JP H027634B2
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JP
Japan
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tryptophan
serine
analogs
producing
brevibacterium
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Expired
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JP56059570A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS57174096A (en
Inventor
Isamu Shiio
Shinichi Sugimoto
Kazue Kawamura
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ajinomoto Co Inc
Original Assignee
Ajinomoto Co Inc
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Filing date
Publication date
Application filed by Ajinomoto Co Inc filed Critical Ajinomoto Co Inc
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Priority to US06/367,334 priority patent/US4601982A/en
Priority to GB8211275A priority patent/GB2098603B/en
Priority to FR8206784A priority patent/FR2504149A1/fr
Publication of JPS57174096A publication Critical patent/JPS57174096A/ja
Publication of JPH027634B2 publication Critical patent/JPH027634B2/ja
Granted legal-status Critical Current

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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/22Tryptophan; Tyrosine; Phenylalanine; 3,4-Dihydroxyphenylalanine
    • C12P13/227Tryptophan
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/84Brevibacterium

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  • Chemical & Material Sciences (AREA)
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  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
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  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
本発明は、発酵法によるL−トリプトフアン
(以下、トリプトフアンと記す)の製造法に関す
る。 従来トリプトフアンの製造法としては、トリプ
トフアンの前駆物質であるアントラニル酸、イン
ドール或いは3−インドールピルビン酸よりトリ
プトフアンを製造する方法が知られている。これ
に対し本発明者たちは、5−メチルトリプトフア
ン、5−フロロトリプトフアン等のトリプトフア
ンアナログに耐性を有するブレビバクテリウム属
の微生物を用いて、糖類等の炭素源から直接発酵
法によりトリプトフアンを製造する方法を開発し
た(特公昭48−18828)。又、これらの菌株にフエ
ニルアラニン要求性あるいはチロシン要求性等の
栄養要求性を付与することによりトリプトフアン
の蓄積量が増加することも明らかにした(特公昭
48−18828)。 本発明者らは更に糖類等の炭素源からトリプト
フアンを直接発酵法により安価に製造する方法を
開発すべく研究を行なつた結果、ブレビバクテリ
ウム属の上記のようなトリプトフアンアナログ耐
性の他に更にセリンアナログに耐性を有する微生
物の中に、従来知られているものより更に大量の
トリプトフアンを生産する能力を有する菌株があ
ることを見い出した。この発明はこの知見に基づ
いて更に研究の結果完成されたものである。 本発明でいうトリプトフアンアナログとはブレ
ビバクテリウム属に属する微生物の生育を阻害す
るがL−トリプトフアンの存在によつてその阻害
が解除されるような化学物質をいい、例えば4−
低級アルキルトリプトフアン、5−低級アルキル
トリプトフアン、6−低級アルキルトリプトフア
ン、7−低級アルキルトリプトフアン、5−ハロ
ゲノトリプトフアン、6−ハロゲノトリプトフア
ン、トリプトフアンハイドロキサメート、α−低
級アルキルトリプトフアン、7−アザトリプトフ
アン等がある。 また、セリンアナログとはブレビバクテリウム
属に属する微生物の生育を阻害するが、その阻害
がトリプトフアンによつて解除されるような化学
物質をいい、例えば、N−アセチルセリン、α−
メチルセリン、O−メチルセリン、O−メチルセ
リン、O−ホスホセリン、O−アセチルセリン、
O−ジアゾアセチルセリン(アゼセリン)、セリ
ンメチルエステル、セリンハイドロキサメート、
D−セリン、β−クロロアラニン、イソセリン、
クロロセリン等がある。 本発明の方法において用いられる微生物はブレ
ビバクテリウム属に属しトリプトフアンアナログ
及びセリンアナログに耐性を有し、かつトリプト
フアンを生成する能力を有する微生物で具体的に
は例えば、ブレビバクテリウム・フラバムAJ−
11667 FERM−P5907が挙げられる。 本発明で使用する変異株は、従来知られている
トリプトフアンアナログ耐性のトリプトフアン生
産菌、例えばブレビバクテリウム・フラバム
AJ3246、ATCC21427、AJ3247(特公昭48−
18828号公報)、AJ11353FERM−P5006(特開昭
55−162771)等を親株とし、これに通常の変異誘
導操作、例えば、紫外線照射あるいはN−メチル
−N′−ニトロ−N−ニトロソグアニジン(以下、
NGと略す。)、亜硝酸等の化学薬剤処理を施し、
変異処理した菌株を親株が生育できないような量
のセリンアナログを含有する平板寒天培地で培養
し、該平板培地上に生育するコロニーを分離する
ことによつて得られる。その他、親株としてブレ
ビバクテリウム属に属するいわゆるグルタミン酸
生産性細菌として知られている微生物、例えばブ
レビバクテリウム・フラバムATCC14067、ブレ
ビバクテリウム・ラクトフアーメンタム
ATCC13869等を親株とし、上記変異操作を施し
てトリプトフアンアナログ耐性及びセリンアナロ
グ耐性を順次付与する方法によつても得られる。
この場合、両耐性の付与の順序任意に行えば良
く、これら薬剤耐性の他に従来知られているトリ
プトフアン生産性に有用な性質、例えばL−フエ
ニルアラニン、L−チロシン、L−メチオニン等
のアミノ酸に対する栄養要求性あるいはフエニル
アラニンアナログ耐性等を付与することもでき
る。 上記のブレビバクテリウム・フラバムAJ11667
はトリプトフアンアナログ及びセリンアナログに
耐性を有しないブレビバクテリウム・フラバム
AJ11668 FERM−P5908を親株として数回のNG
による変異誘導操作を施して5−フルオロトリプ
トフアン耐性及びO−ジアゾアセチルセリン耐性
を付与した変異株であり、更に上記耐性の他L−
チロシン要求性及びL−メチオニン要求性が付与
されている。 次に、このAJ11667株のトリプトフアンアナロ
グ及びセリンアナログに対する耐性度を以下の実
験例に示す。 実験例 グルコース20g/、硫酸アンモニウム10g/
、リン酸1カリウム1g/、硫酸マグネシウ
ム0.4g/、硫酸第1鉄10mg/、硫酸マンガ
ン8mg/、塩化ナトリウム0.5g/、d−ビ
オチン50μg/、ビタミンB1200μg/、L−
メチオニン150mg/、L−チロシン100mg/、
尿素3g/、寒天20g/を含むPH7.2の最少
培地を調製した。最少培地に5−フルオロ−DL
−トリプトフアン或いはO−ジアゾアセチル−L
−セリンを第1表に示した各濃度になるように溶
解して、プレート寒天培地を作り、各々のプレー
ト(直径8.5cm)に最少培地で生育したブレビバ
クテリウム・フラバムAJ11668、ブレビバクテリ
ウム・フラバムAJ11353及びブレビバクテリウ
ム・フラバムAJ11667をおよそ106コ接種したの
ち30℃で4日間培養を行ない、生成したコロニー
数を調べた。その結果を第1表に示す。
【表】 リン

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 1 ブレビバクテリウム属に属し、トリプトフア
    ンアナログ及びセリンアナログに耐性を有し、か
    つL−トリプトフアン生産能を有する微生物を液
    体培地中に好気的に培養し、培養液中にL−トリ
    プトフアンを生成蓄積せしめ、これを採取するこ
    とを特徴とするL−トリプトフアンの製造法。
JP56059570A 1981-04-20 1981-04-20 Preparation of l-tryptophan by fermentation method Granted JPS57174096A (en)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP56059570A JPS57174096A (en) 1981-04-20 1981-04-20 Preparation of l-tryptophan by fermentation method
US06/367,334 US4601982A (en) 1981-04-20 1982-04-12 Method for producing L-tryptophan by fermentation with a brevibacterium flavum mutant
GB8211275A GB2098603B (en) 1981-04-20 1982-04-19 L-tryptophan produced by fermentation
FR8206784A FR2504149A1 (fr) 1981-04-20 1982-04-20 Procede pour produire du l-tryptophane par fermentation

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JPS57174096A JPS57174096A (en) 1982-10-26
JPH027634B2 true JPH027634B2 (ja) 1990-02-20

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US (1) US4601982A (ja)
JP (1) JPS57174096A (ja)
FR (1) FR2504149A1 (ja)
GB (1) GB2098603B (ja)

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US4601982A (en) 1986-07-22
FR2504149B1 (ja) 1985-01-04
JPS57174096A (en) 1982-10-26
FR2504149A1 (fr) 1982-10-22
GB2098603A (en) 1982-11-24
GB2098603B (en) 1985-01-03

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