JPH02702A - 生物分解性眼移植物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 眼の病気の治療のために、生物分解性のマイクロカプセ
ル化された移植体を提供する。

〔従来の技術〕

眼は基本的には生涯を通じて最も重要な器官の一つであ
る。老齢化、病気および視覚に悪影響を及ぼす可能性の
ある他の要因のために、眼の健康を維持することは極め
て重要になる。盲目の主要な原因は眼の病気の治療にお
いて薬物または治療約を眼に導入することが出来ないこ
とである。正確な機構または理由は知られていないが、
（血液脳関門に類似の）血液眼関門が重要な要因となり
得ることは確かである。他方、薬物を眼に注射するとき
には、薬物は速やかに洗い出されまたは眼の内部から一
般循環へと放出される。治療的観点からは、これによっ
て治療が掻めて困難であり、薬物をまったく投与しない
に等しいこともある。

薬物を眼に投与することが本来的に困難であるため、眼
の病気の有効な医療治療はまったく不十分である。

眼の病気の多くのその原因が現在では確認されており、
治療のための適当な適用法が用いることができればその
多くは治療を行うごとができるので、前記の問題の解決
が一層必要とされている。

それ故、現在の治療法式の限界を取り除く治療法を開発
することに大きな関心が寄せられている。

一方または両方の眼房に直接に薬物を導入することはか
なりの抵抗があった。薬物の分布、放出の速度、眼の成
分への結合、細胞による濃厚化、速やかな減少および／
または不活性化等に関して多くの不確実な点があるため
に、直接導入の効力を得ようとする勇気が起こらないの
である。

ヘラ−（Ｉｌｃｌｌｅｒ）　（１）は、「制御された薬
物輸送における生物分解性ポリマー」、治療薬担体系に
おけるＣＲＣ評論、１巻、ＣＲＣブレス・ポカ・ラート
ン、フロリダ、１９８７年、３９〜９０頁に、制御され
た薬物の輸送のためのカプセル化を記載している。ヘラ
−（Ｈｅｌｌｅｒ）　（２）は、「医学と薬学にオケる
ハイドロゲル」、エヌ・エイ・ペベス（Ｎ、Ａ。

Ｐｅｐｐｅｓ）監修、ＩＩＩ巻、ＣＲＣプレス、ポカ・
ラートン、フロリダ、１９８７年、１３７〜１４９頁に
、生物腐蝕性ポリマーを記載しているので参照されたい
、ヘラ−（Ｈｅｌｌｅｒ）、Ｊ、ｏｆ　Ｃｏｎｔｒｏｌ
ｌｅｄ　Ｒｅ１ｅａｓｅ　。

１９８５年、　　２，１６７−１７７；レオング（Ｌｅ
ｏｎｇ）　　らは、ＢｉｏＭａｔｅｒｉａｌｓ％１９８
５年、ユ、　３６４−３７１にポリ無水物微小球を記載
している。ジャッカニクス（Ｊａｃｋａｎｉｅｓ）　　
ら、Ｃｏｎｔｒａｃｅ　ｔｉｏｎ、１９７３年、８，２
２７；ヨーレス（Ｙｏｌｌｅｓ）ら、「生物活性を有す
る薬剤の制御された放出」、タンクアリ−（Ｔａｎｑｕ
ａｒｙ）ら監修、ブレナム・プレス、二ニー・ヨーク、
二ニー・ヨーク、１９７４年、３章；リウ（Ｌｉｕ）　
　ら、並旦憇１郊ム１９８７年、　９４．１１５５−１
１５９およびそれに引用された文献は、眼の病気の治療
にリポソームをガラス体内に使用する研究を報告してい
る。カットライト（Ｃｕ　ｔｒ　ｉｇｈ　ｔ）らの、０
ｒａｌ　Ｓｕｒ　ｅｒ　　０ｒａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
＋ａｎｄ　０ｒａｌ　Ｐａｔｈｏｌｏ　　＋　１９７４
年、　３７，１４２およびシンドラ−（Ｓｈｉｎｄｌｅ
ｒ）ら、Ｃｏｎｔｅｍ　ｏｒａｒ　　Ｔ　　ｉｃｓ　ｉ
ｎ均リす闘工」江上胡エシェ１９７７年、叢、　２５１
−２８９も参照されたい、アンダーソン（Ａｎｄｅｒｓ
ｏｎ）ら、７す（ｄｉ−酪酸）の各種特性を記載してい
る。興味ある特許明細書としては、次のものがある。

第３．４１６．５３０号、第３，６２６，９４０号、第
３．８２８．７７７号、第３，８７０，７９１号、第３
，９１６，８９９号、第３．９４４，０６４号、第３，
９６２，４１４号、第４，００１，３８８号、第４．０
５２，５０５号、第４．０５７，６１９号、第４，１６
４，５５９号、第４，１７９，４９７号、第４，１８６
．１８４号、第４，１９０．６４２号、第４，１９０．
６４２号、第２，２８１，６５４号、第４．３０３．６
３７号、第４．３０４，７６５号、第４，３０４，７６
７号、第４，４３９，１９８号、第４，４５２，７７６
号、第４，４７４．７５１号、第４，６１３，３３０号
および第４，６１７．１８６号明細書。

下記の書籍は、リポソームの薬物担体としての使用につ
いて記載している。パパハジョポラスＮｅｗ　Ｙｏｒｋ
　Ａｃａｄｅｍ　　ｏｆ　５ｃｉｅｎｃｅ　、　　３０
８巻、およびグレゴレアズ（Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｅｓ）
とアリソン（Ａｌｌｉｓｏｎ）。

１９８０年、「生物学的系におけるリポソーム」ジョン
・ウィーリ−・アンド・サンズ、レーザーマン（Ｌｅｓ
ｅｒｍａｎ）ら、Ｎａｔｕｒｅ、　１９８１年、　２９
３．２２６−２２８：パルベット（Ｂａｒｂｅｒ）ら、
Ｓｕ　ｒａｎ＋ｏ１．５ｔｒｕｃｔ、Ｃｅ１ｌＢｉｏ、
Ｃｈｅｍ、　＋　１９８１年、２４３　２５８；ハース
（Ｈｅａ　ｔｈ）　ら、５ｃｉｅｎｃｅ、　１９８０年
、　２１０．５３９−５４１　。

リポソームの調製は、スゾカ（Ｓｚｏｋａ）とパパハジ
ョボラス（Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｕｓ）、　Ｐ
ｒｏｃ、Ｎａｔｌ、＾ｃａｄ。

鎖り用紅１９７８年、用、１４５−１４９に開示されて
いる。

〔課題を解決するための手段〕

生物混和性、特に生物分解性で、薬物を含有しマイクロ
カプセル化された移植体を前および／または後眼房へ導
入して、薬物の治療上有効量を提供して眼の状態を治療
する。マイクロカプセルはポリマー、詳細にはポリエス
テル、エーテルまたはリポソームであってもよく、それ
ぞれの場合に薬物は、眼房に導入された際の即座の放出
に対するバリヤーによって取り囲まれている。

徐放性の薬物を含有するマイクロカプセルを前および／
または後眼房に直接に導入することによって、眼の状態
、病気および異常を治療する。マイクロカプセルは、１
種型以上の薬物を含み、長時間にわたって治療上有効な
投与量でガラス体液中に放出されるように処方されてい
る。この方法では、マイクロカプセルから放出されて前
眼房に入った薬物は、角膜、眼房水、小柱網、虹彩、水
晶体および前眼房における関連構造に到達する。

後眼房に導入されたマイクロカプセルは眼房のガラス体
中に拡散し、（１０種類の異なる層からなる）全１’１
ｌｌｌ！、脈絡膜および反対側の強膜中へと拡散する。

したがって、薬物は、これを必要とする部位で利用可能
になり且つ速やかに希釈されてしまう二七無く、または
眼において有効な水準を達成するには患者に極めて高水
準の薬物を投与する必要がある全身性服用の場合とは異
なり、有効投与量に保持される。薬物がリポソームにカ
プセル化される場合には、濃厚な投与量の薬物を眼の中
に送り、−層効果的で毒性の少ない治療を行うことがで
きる。

カプセルの主な要素はポリマー性または脂質カプセル化
剤である。組成物は生物適合性、好ましくは生物分解性
である。

大くの場合は、ポリマー性組成物は有機エステルまたは
エーテルであり、分解されると、モノマーを含む生理学
的に許容される分解生成物を生じる。無水物、アミド、
オルトエステル等を、単独または他のモノマーと組み合
わせて使用してもよい、ポリマーは付加重合体または縮
合重合体、特に縮合重合体であることができる。ポリマ
ーは架橋していても架橋していないものでもよく、通常
は僅かに架橋した程度のもの以下であり、−船釣には５
％未満であり、通常は１％未満である。大くの場合、ポ
リマーは炭素および水素のほかに酸素及び窒素、特に酸
素を含む。酸素は、オキシ、例えばヒドロキシまたはエ
ーテルとして、またはカルボニル、例えばカルボン酸エ
ステルのような非オキソカルボニル等として存在しても
よい。窒素は、アミド、シアノおよびアミノとして存在
してもよい。ヘラ−（ｌｌｅｌｌｅｒ）　（１）（前記
文献）に記載のポリマーを用いてもよく、その開示内容
は具体的には前記文献を参照されたい。

ヒドロキシ脂肪族カルボン酸のポリマーであってホモポ
リマーまたはコポリマー、及び多糖類が特に興味がある
。興味あるポリエステルには、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、ラ
セミ乳酸、グリコール酸、ポリカプロラクトンのポリマ
ーおよびそれらの組み合わせがある。Ｌ−ラクテートを
用いると、徐腐蝕性ポリマーが得られるが、ラクテート
ラセミ化合物では腐蝕は実質的に高まる。

多糖類にはアルギン酸カルシウムおよび官能化セルロー
ス、特に水に不溶性で分子量が約５ｋＤ〜５００ｋＤで
あることを特徴とするカルボキシメチルセルロースエス
テルなどがある。他の興味あるポリマーには、ポリビニ
ルアルコール、エステルおよびエーテルであって生物適
合性で且つ生物分解性でも有り得るものがある。大抵は
、ポリマーの特徴は生物適合性、薬物との適合性、カプ
セル化の容易さ、生理学的環境における半減期が少なく
とも６時間、好ましくは１日より長く、ガラス体の粘度
が余り高くならず、水に不溶性であることなどである。

脂質カプセル化剤では、薬物に対して比較的耐漏洩性で
ある水晶体胞の内腔中に薬物を導入することができる。

リポソームの性質は広範囲に変化することができ、各種
の脂質を用いてリポソームを形成する。タンパクまたは
他の非脂質化合物がリポソーム膜に結合して、リポソー
ムの性状に影響することもある。タンパク性化合物が存
在しないときには、酸性のリン脂質が少なくとも少量存
在することが望ましく、タンパク性物質が存在するとき
には、リポソームは実質的に中性であることが望ましい
。

リポソームの調製に用いられる脂質には、ホスファチド
化合物、例えばホスファチジルコリン（ｐｃ）、ホスフ
ァチジルセリン（ＰＳ）およびホスファチジルエタノー
ルアミン（ＰＥ）　、スフィンゴ脂質、セレブロシド、
ガングリオシド、ステロイド、例えばコレステロール等
がある。リポソームは約１０〜５０モル％のステロイド
を有し、残りが主として脂肪族酸および有機および無機
酸のエステルであることが望ましい。少量の他の種類の
脂質物質が存在してもよく、−船釣には約１０モル％未
満であり、通常は約５モル％未満である。

マイクロカプセル化粒子を形成する生物分解性ポリマー
は酵素的または加水分解的に不安定化しやすいことが望
ましい。水溶性ポリマーは、加水分解性または生物分解
性の不安定な架橋材料で架橋して、有用な水不溶性のポ
リマーを提供することもできる。安定性の程度は、千ツ
マ−の選定、ホモポリマーとコポリマーのどちらを用い
るか、ポリマーを各種の層として用いることができまた
は混合することができる場合にポリマーの混合物を用い
ることによって、広範囲に変動することができる。

生物分解性ポリマー、特に星分解性が比較的遅いポリマ
ーを用いることによって、薬物の放出速度は粒子の破壊
よりはむしろ周囲膜または一体式ボリマー構造によって
主として制御性される拡散である。大くの場合、選択さ
れる粒子の寿命は投与の所望な間隔に少な（とも等しく
、好ましくは所望な投与間隔の少なくとも二倍であり、
所望な投与間隔の５〜１０杯の寿命を有していてもよい
。

投与の間隔は通常は少なくとも３日間であり、更に普通
には少なくとも７日間であり、−限的には少なくとも約
１５日間であり、２０日間以上であってもよい。

粒子は組成および物理的特性に就いて実質的に均質であ
ってもまたは不均質であってもよい。すなわち、中心が
一つの物質からなり且つ表面が同じまたは異なる種類の
組成の１又は複数の層を有し、それらの層が架橋し、異
なる分子量のものであったり、または異なる密度または
多孔性等を有するものであるような粒子を調製すること
ができる。例えば、中心をポリラクテート−ポリグリコ
レートコポリマーでコーティングしたラクテートとして
、初期分解速度を高めるようにすることができた。用い
られるラクテート対グリコレートのおよその比率は、約
１：０〜１の範囲にある。また、中心をポリラクテート
でコーティングしたポリビニルアルコールとして、ポリ
ラクテートの分解時に中心が溶解して速やかに眼から流
れ出してしまうようにすることもできた。

徐放性が望ましい任意の薬理活性を有する薬剤を用いて
もよい。薬物をガラス体に十分に可溶性にして薬理学的
に有効な投与量で存在するようにすることが望ましい。

用いられる薬剤は、米国特許第４，４７４，４５１号明
細書カラム４〜６および第４．３２７，７２５号明細書
カラム７〜８行目に記載されており、詳細はこれらの文
献を参照されたい。

特に興味深い薬物は、ヒドロコルチゾン（５〜２０Ｊ！
ｇ／Ｉ血漿水準）、ゲンタマイシン（６〜１０ｇ／ｍｌ
血清）、５−フルオロウラシル（約３０ｍｇ／ｋｇ体重
、血清中）、ツルビニル、ＩＬ−２、ＴＮＦ、ファカン
（１’ｈａｋａｎ）　　ａ　（グルタチオンの一成分）
、チオラーチオプロニン、ペンダザック、アセチルサリ
チル酸、トリフルオロチミジン、インターフェロン（α
、βおよびＴ）、免疫モジュレータ−２例えばリンホカ
イン、モノカイン、および成長因子等を含む。

他の興味深い薬物は、抗緑内障剤、例えばチモロールマ
レエート、ベータキソロールおよびメチプラノロールの
ようなβ−遮断薬；ピロカルピン、アセチルコリン塩酸
、イソフルロフェート、デマカリウムブロミド、エコチ
オフェートヨーダイト、ホスホリンヨーダイト、カルバ
コールやフィソスチグミンのようなマイトティックス（
ｍｉｔｏｔｉｃｓ）　；ジピベフリン塩酸のようなエピ
ネフリンおよび塩；およびジクロルフェンアミド、アセ
タゾールアミドおよびメタゾールアミド；アルドースレ
ダクターゼ阻害剤、例えばトルレスタット、リジンプリ
ル、エナラプリルおよびメタチルのような抗白内障およ
び抗糖尿病性網膜症薬；上記以外のチオール架橋剤；抗
癌剤レチン酸、メトトレキセート、アドリアマイシン、
プレオマイシン、トリアムシノロン、マイトマイシン、
シスープラチナム、ビンクリスチン、ビンブラスチン、
アクチノマイシンーＤ、アラ−Ｃ、ビサントレン、ＣＣ
Ｎ［ｌ、活性化ナイトキサン、ＤＴＩＣ，ＩＩＭＭ　、
メルフアラン、ミトラマイシン、プロカルバジン、ＶＭ
２６、ＶＰ１６およびタモキシフェン；上記以外の免疫
モジュレーター：血栓防止剤、例えば組織プラスミノー
ゲン活性剤、ウロキナーゼおよびストレプトキナーゼ；
スーパーオキシドシアムターゼのような組織損傷防止剤
；タンパクおよび核酸、例えばモノ−およびポリクロー
ン抗体、酵素、タンパクホルモンおよび遺伝子、遺伝子
フラグメントおよびプラスミド；ステロイド、特に抗炎
症性または抗線維剤、例えばコルチゾン、ヒドロコルチ
ゾン、プレドニゾロン、プレドニソン、デキサメタシン
、プロゲステロン様化合物、メトリシン（ＨＭ　Ｓ　）
およびフルオロメトロン；非ステロイド性抗炎症薬、例
えばケトロランクトロメタミン、ジクロフェナックナト
リウムおよびスプロフェン；抗生物質、例えばロリジン
（セファロリジン）、クロラムフェニコール、タリンダ
マイシン、アミカシン、トブラマイシン、メチシリン、
リンコマイシン、オキシシリン、ペニシリン、アンフォ
テリシンＢ１ポリミキシンＢ１セファロスポリン類、ア
ンピシリン、バシトラシン、カーペニシリン、セフォロ
シン、コリスチン、エリスロマイシン、ストレプトマイ
シン、ネオマイシン、ス・ルファセトアミド、バンコマ
イシン、硝酸銀、スルフイソオキサゾールジオールアミ
ンおよびテトラサイクリン；抗ウィルス剤を包含する他
の抗病原剤、例えばイドクスウリジン、トリフルオロウ
リジン、ビダラビン（アデニンアラビノシド）、アシク
ロビル（アシクログアノシン）、ピリメタミン、トリス
ルファピリミジン−２、タリンダマイシン、ニスクチン
、フルシトシン、ナタマイシン、ミコナゾールおよびピ
ペリジン誘導体、例えばジエチルカルバマシン；調節麻
痺性および散瞳剤、例えばアトロピン、シクロゲル、ス
コポラミン、ホマトロピンおよびミドリアシルがある。

他の薬剤には、抗コリン作用薬、抗凝血薬、抗線維溶解
剤、抗ヒスタミン剤、抗マラリア剤、抗毒素、キレート
剤、ホルモン、免疫抑制剤、血栓崩壊剤、ビタミン、塩
、脱感作剤、プロスタグランジン、アミノ酸、代謝物お
よび抗アレルギー剤がある。

カプセルで用いられる薬物の獄は、必要な有効投与量お
よび放出速度によって広範囲に変動する。

通常は、薬物はマイクロカプセルの約１〜８０、更に普
通には２０〜４０重量％である。

他の薬剤を、様々な目的のための処方に用いることがで
きる。薬剤のほかに、緩衝剤および防腐剤を用いること
もできる。水溶性防腐剤には、重亜硫酸ナトリウム、チ
オ硫酸ナトリウム、アスコルベート、ベンザルコニウム
クロリド、クロロブタノール、チメロザール、ホウ酸フ
ェニル水銀、パラベン、ベンジルアルコールおよびフェ
ニルエタノールがある。これらの薬剤は０．００１〜５
重量％、好ましくは０．０１〜２重景％の量で存在する
ことができる。好適な水溶性緩衝剤は、アルカリまたは
アルカリ土類炭酸塩、リン酸塩、重炭酸塩、クエン酸塩
、ホウ酸塩、酢酸塩、琥珀酸塩等、例えばリン酸、クエ
ン酸、ホウ酸、酢酸、重炭酸および炭酸ナトリウムがあ
る。これらの薬剤は、系のｐＨを２〜９、好ましくは４
〜８に維持するのに十分な量で存在することができる。

緩衝剤としては、全組成物の重量に対して重量で５％で
もよい。

粒子は狭いまたは広い範囲の粒度のものであってもよく
、通常は３００趨を超過せず、１日ゲージの針で投与す
ることが出来るものでよい。通常は、粒子範囲は平均粒
度の約２００％を超えて異なるものではなく、更に普通
には、約１００％をを超過しない。平均粒度は、通常は
５Ｊｎａ〜２ｆｆＩ１１の範囲であり、更に普通には１
０ｐａ−１ＩＩＩ１１の範囲にある。場合によっては、
平均直径が１〜２鑓の範囲の粒子を選択して大きな貯蔵
部を提供するようにするが、他の場合には粒子の平均直
径は約２５〜５００−の範囲であって小さな貯蔵部を提
供するようになる。

粒子の粒度を用いて、放出速度、治療期間および眼の中
の薬物濃度を制御することができる。ある状況では、同
じまたは異なる種類の薬剤を用いて、粒子の混合物を使
用することができる。この方法では、単回投与で薬物治
療の経路を達成することができ、放出のパターンを大幅
に変化させることもできる。

各種の技法を用いてカプセル化された薬物を製造するこ
とができる。有用な技法には、溶媒蒸発法、相分離法、
界面法等がある。

ポリマーでカプセル化された薬物の調製では、大抵の場
合には溶媒蒸発法が用いられる。このため、予備成形し
た速度調節ポリマーをクロロホルム、塩化メチレンまた
はベンゼンのような揮発性で実質的に水不混和性の溶媒
に溶解する０時には、水不混和性溶媒を、少量の水混和
性の有機補助溶媒、特に酸素化された溶媒、例えばメタ
ノール、エタノール等で改質する。通常は、水混和性の
有機補助溶媒は、約４０容積％未満であり、普通は約２
５容積％未満である。次に、このポリマー−溶媒溶液に
薬剤を加えることができる。薬物の性状によっては、薬
物を粘稠なポリマー−溶媒混合物に分散させたりまたは
薬剤を微粉化して微細な粉末、通常は約１　ｍｍ未満、
普通は約０．５　ｍｍ未満であって、約０．５ｎ以下で
あることもできる超微小粉末を得ることができる場合に
は薬剤粒子の固形物分散物とすることができる。

媒質中に用いられるポリマーの量は、所望な粒度、追加
のコーティング剤を加えるがどうか、溶液の粘度、ポリ
マーの溶解度等によって変化する。

通常は、ポリマーの濃度は１０〜８０重量％の範囲であ
る。薬剤対ポリマーの比率は所望な放出速度によって変
わり、−船釣にはポリマーの１〜８０重盪％の範囲で変
化する。

前記において得られた分散物または溶液を、水と保護コ
ロイドでもよい分散剤とからなる撹拌した水性溶液に素
早く加える。高分子分散剤として特に興味深いものは、
ポリ（ビニルアルコール）のような化合物またはスパン
洗剤のような非イオン性洗剤である。

有機層の容積は水性層よりも小さく、通常は有機層対水
性層の容積比は約１：ｌ〜１０”であり、水中油エマル
ションが生成する。撹拌速度を選択して適当な液滴の大
きさを生成させ、次の段階を通じて撹拌を継続する。

第三の段階では、微小カプセル化容器を閉じて中程度の
真空を系に適用して、揮発性有機溶媒を蒸発させる。溶
媒を急速に蒸発させると、マイクロカプセル壁に気泡や
ブローホールが生じるので、徐々に蒸発させるべきであ
る。蒸発速度は、文献に報告された経験を用いて、経験
的に決定することができる。通常は真空は約３〜１０ｍ
ｍＨＨの範囲である。蒸発が完了した後、生成するマイ
クロカプセルを遠心分離し、水で完全に洗浄し、　（例
えば濾過によって）集め、水を除去する。通常は、マイ
クロカプセルを篩を用いて二次分割して、所望な直径の
粒度範囲の粒子を単離する。

工程は、通常は室温で行うことができるが、具体的な状
況では冷却または加熱を用いて工程を最適にすることが
できる。最終生成物は通常は初期の比率で生成するので
、薬剤対ポリマーの比率を調整して最適組成物を生成さ
せるようにする。薬剤−ポリマー−溶媒混合物および水
性分散媒質の初期バルク粘度並びに撹拌速度を調整する
ことにより、所望な粒度のマイクロカプセルの生産を最
適にすることができる。更に、溶解した有機溶媒の組成
と溶媒蒸発速度を試験して、マイクロカプセル中に大き
めのまたは小さめの結晶の薬剤を有するマイクロカプセ
ルを製造することができる。

加水分解を受けやすいポリマーについては、溶媒蒸発段
階の際にマイクロカプセルを水性分散媒質に余り長時間
暴露すべきでない。

それぞれのバッチのマイクロカプセルの粒度分布は、比
較的狭くなる。しかしながら、所望ならば、これらの粒
度分画を乾式または湿式整粒法のような物理的分離法に
よって更に精製することもできる。

生体内のマイクロカプセルの潜在的薬剤放出の態様を定
義するため、秤量したマイクロカプセルの試料を、４重
量部のエタノールと６重量部の脱イオン水を含む計量し
た容積の溶液に加えることができる。この混合物を３７
℃に保持し、緩やかに撹拌してマイクロカプセルを懸濁
された状態に保持した。時間の関数としての溶解した薬
剤の出現を、吸光度が一定になるかまたは薬剤の９０％
を超える量が放出されてしまうまで、分光分析法によっ
て追跡することができる。媒質中の１時間後の薬剤濃度
は投与量中の遊離のカプセル化されていない薬剤の量を
示唆するものであり、９０％の薬剤が放出されるのに要
する時間は生体中投与鼠の手心持続時間に関連している
。一般的には、試験管内での薬物放出の１日は、生体内
での薬物放出の約３５日に等しい。放出は均一ではない
が、放出は比較的均一な放出にすることを許容するある
平均値から大きく変動することはない。

リポソームでカプセル化された薬剤を用いるときには、
カプセル化用の脂質二重層膜を様々な方法で調製するこ
とができる。一般的には、各種のリポソーム形成法およ
び化合物の脂質基への結合法が文献に記載されており、
それらの方法の任意物を用いることができる。リポソー
ムの３１４製については、特にスゾカ（Ｓｚｏｋａ）と
パパハジシボラス（ｒ’ａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｕ
ｓ）、　　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、へｃａｄ、ｓｃｉ、Ｕ
ｓＡ１９７８年、　７５，１４５−１４９を参照された
い。

リポソーム溶液は、通常はこれが作用する生理的流体と
等張である。溶液のｐＨは一般的には約６より高く且つ
約９より高くなく、更に普通には約６〜８であり、好ま
しくは約６．５〜７．５である。

生理学的に許容される各種の緩衝液、詳細としてリン酸
塩、炭酸塩および酢酸塩を用いてもよい。

薬剤の濃度は、生理学的に有効な濃度、リポソームのル
ーメン中の濃度を維持する能力、リポソームの安定性お
よび不透過性に対する化合物の影響並びにリポソームの
大きさおよび数によって変化する。薬剤濃度は約０．０
１ｍＭ〜約１００ｍＭとすることができる。緩衝液の濃
度は、一般的には約２０ｍＭ〜約１００ｍＭであるが、
溶液１１当たりの塩の濃度は一般的には約０．２５〜０
．９０％である。

マイクロカプセルは、注射、輸液、トロカール等の各種
の方法で眼に投与することができる。物質を前および／
または後眼房に導入する各種の技法が公知になっており
、例えばリウ（Ｌｉｕ）らの、１９８７年、上記文献お
よびそこに引用されている文献を参照されたい。

下記の実施例は例示のためのものであり、制限のための
ものではない。

〔実施例〕

ポリマーでカプセル　　れた 適当な重量のポリマーを、ベンゼン、塩化メチレンまた
はクロロホルムのような水に不混和性の有ａ溶媒で可溶
化する。適当量の薬剤をポリマー混合物に加えてスラリ
ーを形成させ、これを混合して実質的に均質にする０次
に、このスラリーを、激しく撹拌した脱イオン水を入れ
た容器に容積比１　：　０．５〜Ｉ　Ｘ　１０’　　（
有機スラリー；水）で滴下して加える。水は２〜５重量
％ポリビニルアルコールである。容器を密閉して、中程
度の真空を約８〜１０時間を要して徐々に加えてマイク
ロカプセルに気泡やブローホールが生しないようにする
。溶媒を留去した後、マイクロカプセルを遠心分離して
、滅菌した蔭溜水で繰返洗浄し、濾過して、水を切った
。マイクロカプセルを篩で整粒し、真空で乾燥した後、
直ちにトロカール注射によって使用して眼のガラス体液
中に導入することができる。スルファジアジンについて
は薬剤はポリマー重量の１０重量％であり、ヒドロコル
チゾンについては４０重量％であり、メトトレキセート
については２５重量％であった。薬剤は、超微小粉末≦
２０団として用いた。トロカール注射は、２０ゲージ針
を用いて行い、粒子の粒度は約０．２胴であった。

七ツマーＤＬ−乳酸をアセトンから２度再結晶し、メチ
ルエチルケトンから２度再結晶した。乳酸を重合管に入
れて、空気と残存溶媒を真空で除去し、管を加熱して乳
酸を融解させた。触媒（テトラフェニルスズ、０．０２
重量％）を加えて、管を密封して真空にし、１７０〜１
７５°Ｃで７時間加熱した。冷却した後、管を開いて、
ポリマー生成物をアセトンに溶解させ、室温にて水で沈
澱させ、真空乾燥した。ポリマーは、特にマイクロカプ
セル形成中の溶媒蒸発の際には長時間水に暴露すべきで
ない。

下記の表に結果を示す。

、表二」− １゛スルフア　螢光 ジアジン ＃−動物一ウサギ、 ”−ＡＣ（前眼房）にマイクロカプセル、・−ＰＣ（後
眼房）にマイクロカプセル。

右目の前眼房に入れたスルファジアジンを含むポリ乳酸
マイクロカプセルは、１２力月間薬剤を放出した。コン
トロールの左眼には何んら薬剤は検出されなかった。

＃−動物＝ウサギ、 ”　＝ＡＣ（前眼房）にマイクロカプセル、”　＝ｐｃ
　（後眼房）にマイクロカプセル。

表−１の実験を、更に高い投与水準を用いて繰り返した
。

２４スルフア　螢光 ジアジン ３°スルフア　螢光　０Ｏ８０ ジアジン　　　　２３８１ ４２．９− ６３．２ ８　　　３、ＯＯ，０ ＃−動物一ウサギ、 ”　＝ＡＣ（前眼房）にマイクロカプセル、”　＝ｐｃ
　（後眼房）にマイクロカプセル。

短期間を用いて、放出の経路を監視した。このデーター
は、薬剤水準が２週間以内に平衡に達したことを示して
いる（２週目の水準が８週目の水準と同じである）。動
物を解剖した８週目には後眼房の水準は０であることが
判った。このデーターは前眼房に入れた医薬は後眼房へ
は移動しなかったことを示している。

３”スルファ　螢光　０　　　０．０ ジアジン　　　　２４，２ ４４．３０ ＃＝動物＝ウサギ、 ”　＝ＡＣ（前眼房）にマイクロカプセル、・＝ＰＣ（
後眼房）にマイクロカプセル。

この実験は、−層高い投与水準を用いることを除いて、
上記実験を繰り返している。

１０匹の異なる動物を、ポリ乳酸にヒドロコルチゾン琥
珀酸塩を薬物として配合したものと共に用いた。同量の
薬物／ポリマーを各動物の右眼に投与した。各月の終わ
りに１匹の動物を屠殺してデーターを得た。結果は、下
記のことを示している。（１）眼の後眼房に入れた薬物
は検出可能な量では前眼房に移行しなかった。（２）薬
物は１０か月目の時点でも凡その平衡水準で放出された
。（３）投薬しなかった左眼には薬物が検出されなかっ
た。

１”ＭＴＸ　　　　　ＥＭ ２”ＭＴＸ　　　　　ＥＭ ３°　ＭＴＸ　　　　　Ｅ阿 ４”ＭＴＸ　　　　　ＥＭ ５°　ＭＴＸ　　　　　ＥＭ ６　°　　門ＴＸ　　　　　　　ＥＭ Ｔ　　　　　　１−一＜、０１ ７　　　　　２　　−　　−　　　＜、０１７　　　　
　３　　−　　−　　　＜、０１７　　　　４　　−　
　−　　　＜、０１Ｔ　　　　　　５　　−　　−　　
　＜、０１Ｔ　　　　　　６　　−　　−　　　＜、０
１＃−動物＝ウサギ、 ”　＝ＡＣ（前眼房）にマイクロカプセル、”　＝ＰＣ
（後眼房）にマイクロカプセル。

四−動物＝ウサギ、 ”　＝ＡＣ（前眼房）にマイクロカブ−セル、’　＝Ｐ
Ｃ（後眼房）にマイクロカプセル。

メトトレキセートをポリ乳酸に配合し、マイクロカプセ
ルを左眼の後眼房に入れた。薬物は前眼房への移行は生
じなかった。薬物は７か月目の時点でも放出されていた
。

ドクソルビシンを、メタノール中薬物３９．３５ｍを１
９．６５−のカルシオリピンと共に用いて、リポソーム
に配合した。混合物を窒素下にて蒸発によって乾燥した
。乾燥した混合物に、１００団のホスファチジルコリン
、６８．４−のコレステロールおよび３８．９ｄのステ
ライルアミンを加えた。これらを混合して、窒素下にて
乾燥した。混合物を０．８５％ＮａＣｌ　、　ｐＨ７，
４を含む０．ＯＩＭリン酸緩衝液１０ｍ１で水和した。

３０分間膨潤した後、リポソームを１５分間撹拌し、次
いで窒素下にて３７°Ｃの固定温度浴中で９０分間音波
処理をした。アントランプされた（ｕｎｔｒａｐｐｅｄ
）　　ドクソルビシンを、０．８５％ＮａＣｌ　、　ｐ
Ｈ７，４を含む０．０１Ｍリン酸緩衝液に対して４°Ｃ
で２４時間緩衝溶液を数回取り替えながら十分に透析を
行うことによってリポソームでカプセル化された薬物か
ら分離した。カルシオリピンリポソームへのドクソルビ
シンの取り込みは螢光によって計測した。用いたリポソ
ームの大きさは、９００〜１１００オングストロ一ム単
位であった。

■、ドクソルビシンの　　　　ＡＣへのパ１、　５０　
ｎ／　０．１　ｍｌドクソルビシンを１０匹のニュージ
ランド白ウサギのＡＣに注射した。ＡＣを切開してドク
ソルビシンを測定した。

２、　５０　ｎ／　０．１　ｎｉｌドクソルビシンを２
匹のウサギの各々の右および左ＡＣへ注射した。反対側
の眼には０．１０ｍ１の規定食塩水を与えた。２匹の動
物を眼の毒性について２週間観察した。

結果を表−７に示す。

太二二り 右眼にカプセル化していない薬物５０躍をＡＣへ注射し
た後の残留水性体液ドクソルビシン０　　　１　　　　
２３．５ ２　　　　２１．５ ２　　　３　　　　　０．１２５ ４　　　　　０．１４５ ４　　　　５　　　　　０．０？５ ６　　　　　０．１１ ８　　　７　　　　　０．０２５ ８　　　　　０．０３５ １６　　　　　９　　　　　　　＜０．００５１０　　
　　　　　＜０．００５ ２２．５　±　１．４１ ０．１３５　　±　０．０１ ０．０９２５±　０．０２ ０．０３０　　±　０．Ｏｌ ＜０．００５　　　　　　　　　　　０ＡＣにおけるド
クソルビシンの平均半減期は約１時間である。カプセル
化されていないドクソルビシンはＡＣを注射した後２〜
３日以内に眼の炎症と虹彩の浮腫を生じる。コントロー
ルの食塩水を注射した眼は総体的検討および細隙燈生体
鏡検では正常であることが判った。

１、　リポソームでカプセル化されたドクソルビシン５
０　ｘｌｏ、１０ｍ１を２８匹のウサギの片方の眼のＡ
Ｃへ注射した０反対側の注射をしなかった眼をコントロ
ールとして用いた。

２、　リポソーム中５０ｔｒｇのドクソルビシンを２匹
のウサギのそれぞれの一方の眼に注射し、３週間観察し
た０反対側の眼には０．１０ｍ１の規定食塩水を入れた
。

表−８にこれらの実験の結果を示す。

、表二」− 左眼にカプセル化された薬物５０ｎをＡＣ注射した後の
残留水性体液ドクソルビシン。右眼はコントロールとし
て用いる。

４０．１４ ４２．３５ ３５．６７ ３９．４６ Ｂ、１０ ４．３５ ７．３５ ３．７９ ２．２５ ２．９０ １．６７ ２．７７ ３９．４０　　±　１．４１ ５．９０　　±　２．１４ ２．４０　　±　０．５６ 表二工（続き） １．５３ １．１５ １．３２ ０．９６ ０．６７ ０．５７ ０．８８ ０．１９ ０．１２ ０．１９ ＜０．００５ ＜０．００５ ０．０１ ＜０．００５ １．２２　±　０．２２ ０．７７　±　０．１８ ０．１９　±　０．０６ ＜０．００５ 検出可能なカプセル化されたドクソルビシンは、ｒｉａ
ｌ眼房（ＡＣ）において２週間までは見出だすことがで
きた。ＡＣ注射から８日後まではかなりの星が存在した
。臨床的には、眼はカプセル化された形態には極めて良
好のままであり、炎症および虹彩の浮腫の徴候はほとん
ど見られなかった。

臨床的観察のために注射を行った２匹の動物の一方では
、少量のリポソームが内部前眼房に見出だされた。眼は
臨床的には穏やかであった。

Ｉｌｌ、　　’　　　　　ＰＣへのドクソルビシンの注
１、　ドクソルビシン５０　Ｉｊｇｌｏ、　１０ｍ１を
１０匹のウサギのそれぞれの後眼房（ＰＣ＞へ注射した
。

反対側の眼をコントロールとして用いた。

２、５０　ｔｒｙ’７０．１０ｍ１のドクソルビシンを
２匹のウサギのそれぞれの一方のＩＩＨに注射し、１週
間観察した。反対側の眼にはコントロール食塩水を注射
した。

表−９にドクソルビシン注射の結果を示す。

、表二」− 右眼のＰＣにドクソルビシン５０ｎ＠ＡＣ注射した後の
残留水性体液ドクソルビシン。左眼はコントロールとし
て用いた。

８．４０ ８．７４ ６．５４ ４．６５ ４．３ ３．４ ０．９８ ０．７５ ０．２６ ０．２１ ８．５５ ５．５９ ３．８５ ０．８６ ２゜４０ ± ± ± ± ± ０．２４ １．３４ ０．６４ ０．１６ ０．０４ 遊離のドクソルビシンの半減期は約３時間である。

臨床的には、ドクソルビシンのＰＣ注射は極めて良好で
あった。毒性の徴候は見られなかった。

ＩＶ、ＰＣへのドクソルビシンの １、　リポソームでカプセル化されたドクソルビシン５
０　ｎ／　０．　Ｉ　Ｉｌｌを２８匹のウサギの右眼の
ＰＣへ注射した。左眼をコントロールとして用いた。

２、（ドクソルビシンの配合と同様の比率で食塩水をカ
プセルに入れて調製した）空リポソームを４個の眼のガ
ラス体に下記の容量で注射した。

０．０１２５１１１１．０．０２５５ｍ１．０．０５ｍ
１および０．１０ｎ＋、動物を、コントロールとして４
力月間まで観察した。

表二二り更 右眼のＰＣにカプセル化されたドクソルビシンをを注射
した後のガラス体に残留するドクソルビシ８．５６ ７．５６ ７．０５ ５．１９ ４．１０ ３．５５ ２．９４ ３．４５ １．９２ １．６２ １．３８ ２．３８ ７．０９　　±　１．４１ ３．５１　　±　０．４８ １．８２　±　０．４３ 表ニー１０（続き） １．９８ ２．２５ １．８５ ２．４５ １．７６ ２．１３ １．６９ １．９８ ０．９８ １．３０ ２．９４ １．６５ ２．９１ ２．８９ １．０５ １．２５ ２．１３　　±　０．２７ ２．３３　　±　０．２０ １．７２　±　０．８６ ２．０２　±　１．０１ リポソームでカプセル化されたドクソルビシンは、注射
の直後に局在化した濃密な濁りとしてガラス体（ＰＣ）
に観察された。炎症過程として生じるものは、最初の７
〜１０日間に見られた。ガラス体の濁りの緑が次第に掠
れ、局在化した濃密な濁りは減少し始め、小さくなった
。ガラス体の大部分の濁りは総ての場合に起こり、実験
から１４日目土で眼底の可視化を曇らせた。このガラス
体の曇りはドクソルビシンのクリアランスとは相関せず
、これは実験の開始から２日以内に明らかになった。ド
クソルビンンの残留水？（１は一定になり、２週間目ま
ではかなりの水準に保持された。

多分、ガラス体に残留するドクソルビシンがリポソーム
と結合して、ガラス体から最少クリアランスを生じるた
めであろう。

ガラス体の濁りは、空リポソームを注射した総ての眼に
観察開始から全４か月まで見られた。この澗りは薬物関
連のものではなく、多分リポソームのリン脂質とガラス
体ゲルとの相互作用によるものと思われる。リポソーム
によってガラス体に誘発される濁りは最初の１週間まで
は消失せず、少なくとも発明叩打らの観察のに囲では永
久的なものと思われる。

上記の結果からマイクロカプセルは極めて多様な条件の
治療のために眼房の内部で有効に使用されることは明ら
かである。これらのマイクロカプセルは長期間に亙る薬
物の連続投与を可能にし、Ｑ者が局部投与のような余り
正確とはいえない方法で薬物を服用する必要がなくなる
。更に、眼における薬物の適度な治療水卓を保持するこ
とによって治療を行うことができ、小者の体内で高濃度
になり悪影響を及ぼす可能性がある部分を極力少なくす
ることができる。この薬物は、他の眼房または眼への移
行が観察されないので、適当な部位に保持される。平衡
水準は速やかに達成され且つ長１す１間保持される。更
に、長期間に亙る治療では１回または数回のみの薬物の
服用が必要なだけであり、患者が自己服用するときの負
担を軽減し、継続され制御された投薬が可能になり、患
汗の活動を干渉することが極めて少なくなる。

ポリマーおよび脂質によるカプセル化は、薬剤の投与量
が希釈されたりまたは一般の循環において分解されるこ
とから保護する。これらの薬剤はいかなる改良もなしで
各種の濃度で配合することができる。カプセル化によっ
て高濃度で医薬を投与することができ、これはａ離の薬
物より一層有効で且つ毒性が低い。更に、リポソーム中
の薬物は、リポソームが生物分解性であり且つ無毒であ
り、細胞膜に似ているので、酵素による攻撃または免疫
認識から保護することもできる。

本発明の明細書に記載した総ての刊行物および患者への
適用は、本発明が関連する当業者の技術水準を示すもの
である。総ての刊行物および特許出願明細書はそれぞれ
の個々の刊行物または特許出願代理人が参考のためであ
ると具体的且つ個別的に述べられているのと同程度に参
考として引用される。

上記発明を幾分詳細に例示によって且つ例えば理解を容
易にするために記載してきたが、ある程度の偏光および
改良は特許請求の範囲内で実施することができることは
明らかである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、眼の状態を処置するための組成物であって、即座の
   放出に対するバリヤーで取り囲まれた薬理学的に活性な
   薬剤を含んで成り、眼房へ導入することができ、そして
   前記薬剤が前記バリヤーから、該薬剤の有効投与量を長
   期間に亙って提供する速度で放出されることを特徴とす
   る組成物。 ２、前記バリヤーが薬理学的に許容される生物分解性ポ
   リマーおよびリポソームから選択される、請求項１に記
   載の組成物。 ３、眼の状態を処置する組成物であって、約３００μｍ
   以下のマイクロカプセル化された薬剤粒子を含んで成り
   、これらの粒子が薬理学的に活性な薬剤及び薬理学的に
   許容される生物分解性ポリマーを含んでなり、該組成物
   は眼房に導入することができそして前記薬剤の有効投与
   量を長期間に亙って提供する速度で分解可能であること
   を特徴とする組成物。４、前記ポリマーが縮合ポリマー
   である、請求項２または３に記載の組成物。 ５、前記粒子が薬理学的に許容される緩衝剤を含んで成
   る、請求項３に記載の組成物。 ６、前記薬剤が細胞毒性剤または成長因子の少なくとも
   一つである、請求項３に記載の組成物。 ７、前記組成物が前記眼の状態の処置のために有効な投
   与量を含み、該投与量が少なくとも１ヵ月間前記眼房に
   保持されるのに十分である、請求項３に記載の組成物。 ８、前記粒子の平均粒度が１０〜２５０μｍである、請
   求項７に記載の組成物。 ９、眼状態を処置するための組成物であって、薬理活性
   を有する薬剤を含有する等張溶液を腔部に封入している
   リポソームを含んで成り、眼房に導入することができ、
   そして前記薬剤が、該薬剤の有効投与量を長期間に亙っ
   て提供する速度で速度で眼に放出されることを特徴とす
   る組成物。 １０、前記リポソームが脂質二重層に約１０〜５０モル
   ％のコレステロールを有する、請求項９に記載の組成物
   。