JPH02500729A - 廃水の浄化方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 廃水の浄化方法 ・　本発明は、生物学的に分解可能な物質を含有する廃この種の方法は以前から 公知である。このようにたとえば“ケミカル・アブストラクツ（Ｃｈｅｍｉｃａ ｌ（Ｗａｓｔｗａｔｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　）”の項には、特に脂肪族アル コール、リン酸アルキルエステル、ケトン、炭化水素およびアミン、アンモニウ ム化合物、アミド、”塩素置換炭化水素、シアニド、複素環式化合物、炭水化物 、チオシアネート、染料、湿潤剤、除草剤、殺虫剤等の生物学的分解が記載され ている。

これらの公知方法は、専門家により不断に監視され、管理される場合にしか有効 に実施することができないという欠点を有する。このことは、異なる出所の廃水 、それと共に異なる生物学的に分解可能な物質を有する廃水も、中央の廃水処理 プラントに集め、処理される本発明の根底となる課題は、経済的に分散的に、個 々の廃水発生装置によシおよび／−！たは廃水の生成個所で実施可能な、生物学 的に分解可能な物質を含有する廃水の浄化方法を開発することであった。

この課題は、廃水を、微生物を変性しない、ゲル状有機ポリマーに埋包すること により固定化されている、生物学的分解能を有する微生物と接触させることを特 徴とする方法を提供することにより解決される。

微生物を変性しないポリマーに埋包することによる微生物の固定化と結合してい る著しい費用にもかかわらず、本発明方法は驚ろくべきことに、一定の生物的に 分解可能な脂肪族物質を含有する廃水の浄化のために通例、公知の方法よりも著 しく費用がかからない。

これはなかんずく、曲観的に明白と思われる下記の理由による。

浄化を発生工場で分散的に行なう場合、著しく少ない水量を浄化すればよい。こ のことは、汚染物の生成個所が公知であり、濃厚な形で存在するため、集中廃水 処理プラントよりも経済的であるだけでなく、効果的でもある。

本発明による方法は良好に標準化され、再生しうる。

このために必要な固定化物は工業的に製造し、相応する作業指針を添えて個々の 利用者に供給することができ、該利用者は、専門家による費用のかかる調節およ び管理を必要とせずに方法を実施することができる。

本発明による方法は、そのつど生じる廃水の生物学的分解のために特に有効であ るような微生物を使用することができる。このことは、本発明による方法の実施 のために比較的短い反応時間が必要であるにすぎないという利点を有する。

純化学的廃水処理プラントに比べて、この生物学的プラントは、経済的であり、 少ないエネルギーを必要とし、廃水の負荷が僅かであるという利点を有する。

本発明による方法の実施のために必要な微生物の種類はもちろん、浄化すべき廃 水が生物学的に分解可能な物質を含有している程度に依存する。この微生物は、 この種の分解が実施される集中廃水プラントの混合培養液から公知の方法で単離 することができる。しかし他方で、これらの微生物の多数はすでに公的な菌株保 存機関に寄託されていて、専門業界は自由に利用できる。

数種の生物学的に分解可能な物質を含有する廃水の浄化のためには、微生物混合 培養物の固定化物を使用することができる。他方で、それぞれ個々の微生物種の 固定化物を製造し、これを本発明による方法の実施前に混合することも可能であ る。微生物を変性しないポリマー中へ埋包することによる微生物の固定化は、専 門家によく知られている方法によって行なわれる。

（１，Ｃｈｉｂａｔａ″Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ　Ｅｎｚｙｍｅｓ、　Ｒｅ５ｅ ｒｃｈ　ａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　”　：　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎ ｄ　５ｏｎｓ出版、　ＮｅｗＹｏｒｋ　ｅｔ、　１　９　７　８　年　二　”Ｍ ｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｐｚｙｍｏｌｏｇｙ″　。

第４４巻（ｉ　９　、、）　；　Ｋｌａｕｓ　Ｍｏ５ｂａｃｈ　＠Ｉｍ＋ｎｏｂ ｉｌｉｚｅｄａｎｄ　Ａｒｇｈａｎｅｌｌｅｓ　”　、　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐ ｒｅｓｓ社、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ。

１９７６第、第１巻および第２巻：　Ｂｏ　Ｍａｔｔｈｉａｓｓｏｎ工ｍｍｏｂ ｉｌｉｓｅｄ　＠Ｃｅ１ｌｓ　ａｎｄ　Ｏｒｇａｎｅｌｌｓ　、　ＣＲＣＰｒｅ ｓｓＩｎｃ、社Ｂｏｃａ　Ｒａｔｏｎ　、　Ｆｌｏｒｉｄａ　、第１巻および第 ２巻）適当な固定化物は次のように例示される：アルイネ−１−’を主体とする 微生物固定化物これは、アルギン酸ナトリウム０．５〜５重量％を含有するプレ ポリマー水溶液に微生物を懸濁させ、この懸濁液を５〜４０℃の温度で攪拌下に アルミニウム塩または有利にカルシウム塩（たとえば塩化カルシウム）の０．０ １〜０．４モル水溶液に添加す石ことにより製造することができる。

カラデナンを主体とする微生物固定化物これはたとえば、２５〜５０℃に加熱さ れた、０．１〜５．０重量％のカラデナン水溶液に微生物を懸濁させ、これをゲ ル状になるまで放冷し、このデル状物を機械的に粉砕し、次いでカリウム塩（た とえば塩化カリウム）の０．２〜２．０重量％水溶液中で硬化させることによシ 製造することができる。

キトサンを主体とする微生物固定化物 これはたとえば、２０°Ｃ〜４０°Ｃに加熱された、０．５〜１３％の酸性キト サン溶液（ｐＨ４，５〜５．５に調節）に微生物を懸濁させ、この中に、たとえ ばヘキサシアノ鉄酸カリウム（ｎ）の反応イオン溶液（０，０１〜１モル／ｌの 濃度）を滴加することによシ製造することができる。

アクリルアミドおよび／またはメタクリルアミドを主体とする微生物固定化物は 、たとえば西ドイツ国特許出願公開第２２５２８８８号明細書に記載された方法 により製造することができる。

固定化物の機械的安定性および密度を高めるため、重合の前に、懸濁液に付加的 に無機または有機担体物質を添加することができる。適当な担体物質は、シリカ ゲル、ケイソウ土活性炭またはセルロースである。

このような固定化物の適当な製造方法はたとえば次のものである：微生物バイオ マスをアルギン酸ナトリウム、カラビナン等０．５〜５重量％とゲル状ケイ酸０ ．５〜３５重量％（水ガラスと酸とから製造し、引き続き脱イオン化するかまた は購入に入手）との水性混合物に懸濁させ、混合物をたとえば１〜１０％の塩化 カルシウム、塩化カリウム等の溶液に滴加する。

微生物バイオマス対デル形成剤の量の最適割合は、もちろん使用した成分の種類 に依存し、個々の場合に、専門家に周知であるような予備実験を用いて測定しな ければならない。

本発明による方法を実施することができる装置としては、たとえば場合によシ１ ０〜６５℃に加熱可能で、通気可能な攪拌機を備えた釜を使用することができ、 この中で廃水は攪拌かつ通気下に固定化物と、有機物が完全に分解されてしまう まで接触させる。浄化が行なわれた後、廃水を濾過するかまたは傾瀉し、釜に新 たに廃水を満たす。

他方で、この方法はたとえば、固定化物を含有する、場合により加熱可能な通気 可能なカラムまたはあらかじめ製造されたカートリッジに廃水を導通することに より連続的に実施することもできる。

この種の装置は、水性固定化物懸濁液を充填した装置を導通することにより、廃 気を清浄化するために使用することもできることは専門家にとり周知である。

本発明による方法を用いて良好に浄化することのできる廃水はたとえば、生物学 的に分解可能な物質として、場合によジハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミン基 、オキソ基、ニトロ基、ニトリル基、スルホネート基、サルフェート基またはホ スホネート基を有し、酸素原子または窒素原子によシ中断された脂肪族炭化水素 を含有するような廃水である。

場合により置換された炭化水素は飽和または不飽和、脂肪族または環式脂肪族で あってもよい。

場合によジ置換されたこれらの炭化水素群は、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、ア ミノ基、オキソ基、ニトロ基またはニトリル基により置換されたおよび／または 酸素原子または窒素原子によって中断された、最高８個の炭素原子を有するアル カン、アルケンまたはシクロアルカンである。

この群には、たとえば一般式： ％式％） 〔式中Ｘは・・ロゲン原子（有利に臭素原子、ヨウ素原子または特に塩素原子） を表わし、ｎは１または２の数を表わし、ｍは１ないし４の数を表わす〕で示さ れるハロゲン化炭化水素が属する。

この種のハロゲン化炭化水素、たとえば臭化メチル、ヨウ化メチル、トリクロル メタン、テトラクロルメタン、１．１−ジクロルエタン、１，２−ジクロルエタ ン、１，１．２−）リクロルエタンおよび１．１．２．２−テトラクロルエタン は微生物を用いて生物学的に分解可能であることが公知である。（”　Ａｐｐｌ 。

Ｅｎｖｉｒｏｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　”第１０巻、１９８０年、第１２２ ５頁以降；第４７巻、１９８４年、第８２５頁以降および第４９巻、１９８５年 、第６７６頁以降；”’　Ａｒｃｈ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、”第１３０巻、１ ９８１年、第３６６頁以降；Ｃｏｎ５ｅｒｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｒｅｃｙｃｌ ｉｎｇ、″第８巻、１９８５年、第９１頁以降）。

実験で判明したように、アルギン酸カルシウムを用いて製造した微生物固定化物 は、この種のハロゲン化炭化水素の微生物による分解のためにはあマシ適当でな い。それというのもこの場合生じたハロゲン化水素が妨害作用をするためである 。

さらにこの群には、１箇所または２箇所がヒドロキシ基、アミン基またはアキソ 基によジ置換されたおよび／または１個または２個の酸素原子または窒素原子に より中断された、最高６個の炭素原子を有するアルカンまたはシクロアルカンが 所属する。これらはたとえば、メタノール、エタノール、プロパツール、イソプ ロパツール、ブタノールまたはグリコールのようなアルコール、ホルムアルデヒ ドまたはアセタールアルデヒドのようなアルデヒド、アセトン、メチルエチルケ トンまたはメチル・イソブチルケトンのようなケトン、ギ酸、酢酸、プロｔオン 酸または酪酸のような酸、ジエチルエーテル、ジインプロピルエーテル、１．２ −ジメトキシエタン、テトラヒドロフランまたはジオキサンのようなエーテル、 酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸エチル、または酪酸エチルのようなエステル、メ チルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ジイソプロピルアミンのよう な脂肪族アミンまたはアセトアミド、Ｎ−メチルアセトアミドまたはジメチルホ ルムアミドのような脂肪族アミドである。この種の化合物が生物学的に分解可能 であることは、すでに前述されており、特に次の刊行物に記載されている：米国 特許第３７６４４７６号、同第３７５５０８２号明細書、”コンパゼーション・ アン−リサイクリングＣｏｎｖｅｒｓａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ 　、”第８巻、１９８５年、第９１頁以降、”　Ａｐｐｌ、　Ｅｎｖｉｒｏｎ、 　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　”６１巻、１９７６．９００頁以降、＠Ｊ、　Ｂａｃ ｔ、　”１９７２．５１３頁以降。

この群の述べるに値する物質は、アルケン誘導体、たとえばアクリル酸、アクリ ルニトリル、メタクリル酸メチルエステル、塩化ビニル、プロピレン、インブチ レン、酢酸ビニル等であシ、最初に述べたと同様に生物学的に分解することがで きる。

炭化水素の述べるに値する群は、たとえばベンジン中に出現するような、最高１ ６個の炭素原子を有する非置換アルカンの混合物である。この混合物を生物学的 に分解できることは、特に米国特許第３８７３４２４号および同第３６９１０１ ２号明細書から公知である。

場合により置換された炭化水素の群としては、乳化剤として使用される、いずれ も前記したように生物学的に分解可能な、６〜１８個の炭素原子を有する脂肪酸 、脂肪アルコール、アルキルスルホネート、アルキルサルフェートであり、最初 に述べたと同様に生物学的に分解可能である。

本発明による方法を用いると、脂肪族湿潤剤（アルキルスルホネート、アルキル サルフェート等）、殺菌剤、殺虫剤、染料または高分子物質（たとえば炭水化物 、タンパク質、ポリエチレングリコール、ポリゾロピレングリコール）を含有す る廃水を浄化できることは専門家にとり周知であるが、しかし本発明の範囲内で 、このような物質を用いた実験はこれまで実施されなかった。

下記の実施例は、本発明による方法を詳説するためのものである。個々の例に記 載した方法条件は最適なものではなく、例中で使用した微生物は公的な菌株保存 機関に寄託されており、専門分野で自由に利用できる。

例１ ａ）リン酸二水素カリウム０．６８９　、リン酸水素二ナトリウム１．０７５， ９．硫酸アンモニウム０．２５　ｇ、硫酸マグネシウム・７水和物Ｃ１，２５ｇ 、微量元素の水溶液５ｍｊ（これは１リツトルあたり塩化カルシウム５３０ｍ９ 、硫酸鉄（ｎ）・７水和物２００　ｍ９、硫酸マンガン（Ｉ［）・５水和物２０ ｍ９、硫酸銅（ＩＩ）・５水和物４０ｍ９、硫酸亜鉛（ＩＩ）・７水和物２０■ 、ホウ酸３　ｍ９、塩化コバルト（■）４ｍ９、モリブデン酸ナトリウム・２水 和物４　ｍ９および濃硫酸１．Ｑｍｉを含有する）およびジクロル培 メタン０．５ｇを含有し、ＰＨ値６．９に調節された無菌Ｚ養液５００ｍ７を有 する２ｔのエルシンマイヤー・フラスコに、プソイドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏ ｎａｓ　５ｐｅｃ、　ＤＭ　ｉ（ＮＣＩＢ、　１１６７３　）の凍結乾燥培養物 を接種し、閉鎖し、回転振とう機で１４５　ｒ、ｐ−ｍ、で、３０°Ｃで７２時 間振とうする。

それぞれ５００ｍ１の同じく無菌培養基を有する１２個の２ｔエルレンマイヤー ・フラスコに、それぞれ５Ｑｍ！の前培養物を接種し、前培養と同じ方法で４８ 時間発芽させる。

引き続き、培養液を合し、実験室用分離機Ｌ　Ｇ　２０５〔ウエストファリア・ セパレーター社（ＦｉｒｍａＷｅｓｔｆａｌｉａ　５ｅｐａｒａｔｏｒ　Ａ　Ｃ ）　／　０ｅｌｄｅ　（Ｗｅｓｔｆ、）　’：ｌでｉ　ｏｏｏｏτ、ｐ、ｍ、で 分離する。遠心分離した細胞物質を、培養基の付着成分の除去のため、無菌水道 水に再び懸濁させ、新たに遠心分離する。こうして、細菌乾燥分１１．３％の含 量を有する湿ったシンイドモナス・スペック（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　５ｐｅ ｃ、　）　（ＮＣＩＢ　１１６７３　）のバイオマス４．６ｇが得られる。

ｂ）　ｘ−カラデナン・タイプｍ１．５．ＦＣ製造元：シグマ・ケミカル社（Ｓ ｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐ、　）、セントｋ・イス；　ＵＳＡ　） を水道水４３ｍ１に添加し、熱殺菌し、その際Ｘ−カラデナンは溶解する。

次いで、溶液を４８℃に冷却し、これに０．１モルの水性リン酸塩緩衝液５＋＋ ＋／（ｐＨ７）中の湿ったシソイドモナス−スペック（Ｐｓｅｕｄｏｚｏｎａｓ 　５ｐｅｃ、　）　（ＮＣｌＢ１１６７３）のバイオマス（例ｉ　ａ）によって 製造）６ｇの４０℃の温懸濁液を添加し、この混合物を２０秒間攪拌し、これを ガラスプレートが６！の間隔を有するサンドイッチセル中に注ぎ込む。３０分間 放置した後、この物質を取り出し、目幅６龍の篩を通して押出し、それぞれ５ｇ の割合でそれぞれ２％の塩化カリウム水溶液５Ｑ＋ｎ／中で８°Ｃで１６時間硬 化させる。次いで、固定化物を濾取しこれを水道水それぞれ５０ゴに懸濁させる 。

ｃ＞　ＰＨ値自動調節機を備えた、閉じた１ｔのガラス発酵容器に、水道水２０ ０ｍ／、ジクロルメタン０．０７５ゴ（これは１ｔにつきジクロルメタン１ｇに 相当）および例１　ｂ）により製造された固定化物懸濁液１０ゴを添加し、７． ２に一値自動調節下に、６０℃で１４５ｒ、ｐ、ｍ、−で９０分間攪拌する。こ の時間後、反応混合物中のジクロルメタンは実際に完全に分解している。

濾過後、回収した固定化物は新たに使用可能工あり、活性度の損失を示さない。

例２ ５００ｍｆのエルシンマイヤー・フラスコニ、水道水１００ｍｆ、４０％のホル ムアルデヒド水溶液ｆ３．１ｍ１（これはホルムアルデヒド０．４９／ｌに相当 ）および例１ｂによシ製造された固定化物懸濁液１０ｍ１を添加し、閉鎖し、３ ０°Ｃで６０分間に１４５　ｒ、ｐ、ＩＤ、で振とうする。この時間後、ホルム アルデヒドは実際に完全に分解している。

濾過後、回収した固定化物は新たに使用可能であり、活性度の損失を示さない。

例６ 両値自動調節器を備えた、閉じた１ｔのガラス発酵容器に、水道水５００ｍｊ、 １−クロル−２−プロパノ７０−０４５ｍ７（これは１−クロル−２−ゾロパノ ン０．５ｇ／ｌに相当）および例１ｂにより製造された固定化物懸濁液１０ｍ１ を添加し、７．２に一値自動調節下に、３０°Ｃで１４５　ｒ、ｐ、ｍ、で９０ 分間攪拌する。この時間後、１−クロル−２−ゾロパノンは実際完全に分解して いる。

例４ ５００１ｎｔのエルシンマイヤー・フラスコに、水道水１００ｍｒ、メタノ−” 　０．４　ｍｌ　（これはメタノール６．２ｇ／ｌに相当）および例１　ｂ）に より製造された固定化物懸濁液ｉＱｍｊを添加し、閉鎖し、６０℃で１２０分間 １４５　ｒ、ｐ、ｍ、で振とうする。この時間後、メタノールは実際完全に分解 している。

濾過後、回収された固定化物は新たに使用可能であシ、活性度の損失を示さない 。

例５ こうして得られた湿ったシンイドモナス・スペック（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　 ５ｐｅｃ、　）　（ＮＣＩＢ　１１６７３　）のバイオマス２．９（これは細菌 乾燥分０．２ｇに相当）を滅菌したアルギン酸ナトリウム溶液〔テクサミド（Ｔ ｅｘａｍｉｄ■５５８）、ヘンケル社（Ｆｉｒｍａ　Ｈｅｎｋｅｌ　ＧｍｂＨ） 、ジュツセルドルス酉ドイツ国）８００ｍｐと水道水４０ｍ１とを均質化するこ とにより製造〕中に均質に分配する。

ホースポンプを用いて、このホモジネートを、末端が尖端として構成されている シリコーンゴムホースを通して、滅菌された０、１モルの塩化カルシウム水溶液 ５００ｍ１（塩化カルシウム・２水和物と水道水とから製造）中に攪拌下に滴加 する。

混合物をなお時間攪拌し、得られた固定化物を濾取し、これを水道水で洗浄する 。

こうして製造されたノンイドモナス・スペック（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　５ｐ ｅｃ、　）　（ＮＣＩＢ　１１６７３　）の固定化物懸濁液を、例４に記載した 条件下に、メタノール含有廃水の浄化のために使用する。

例６ 湿ったプソイドモナス自スペック（Ｐｓｅｕｄｏコｏｎａｓｓｐｅｃ、　）（Ｎ Ｃより　１１６７５　）のバイオマス２ｇを、氷冷した０、１モルの水性トリス −（ヒドロキシメチル）−アミノメタン緩衝液２０ｍｆ（ｐＨ７，５）に懸濁す る。

これと平行に、アクリルアミド７．２ｇとＮ　、　Ｎ’−メチレン−ビスアクリ ルアミド０．４　、！９とを水に溶解し、氷冷下に水で希釈し２５ｍｊにする。

引き続き、双方の溶液を合し、これに、Ｎ、Ｎ、Ｎ’。

Ｎ′−テトラメチルエチルジアミンの１０％水溶液２．５ｍｌと５％の過硫酸カ リウム水溶液３．５ｍ７とを添加し、混合物を６龍のプレート間隔を有するサン ドイッチセル中に注ぎ込む。この混合物を２分間に窒素で洗浄し、これを水浴で ６分間冷却する。次いで、これを室温で１時間放置し、デルを目幅２　ｍｍの篩 を通して押出し、得られるペレットをそれぞれ２５０ｍ１の０．０５モルのトリ ス−ヒドロキシメチル−アミノメタン緩衝液（ｐＨ７，５）で６回洗浄し、この 緩衝液中で４℃で保存する。

こうして製造されたノンイドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｅｃ−（ＮＩ ＣＢ　１１６７５　））の固定化物懸濁液を、例１ｃに記載された条件下に、ジ クロルメタン含有水の浄化に使用する。

例７： ナトリウムＸ−カラデナン・タイプｍ４００ｍ９（製造業者：シグマ−ケミカル 社（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｐｉｃａｌ　Ｃｏｏｐ、）セントルイス、米国〕を水道 水ｉＱｍ／に溶解し、シリカゾル〔製造業者：メルク社（Ｍｅｒｃｋ　Ａ　Ｇ　 ）　、ダルムシュタット、西ｒイツ国〕５ｇおよび例１ｂによシ均質化して製造 された、湿ったシンイドモナス・スペック（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　５ｐｅｃ 　）　（ＮＣＩＢ　１１６７３　）のバイオマスｉ、ｏｇを添加する。

ホースポンプを用いて、このホモジネートを、末端が尖端として構成されている シリコーンゴムホースを通して、滅菌された０、１モルの塩化カリウム水溶液５ ００ｒｎｉに攪拌下に滴加する。

この混合物をなお１時間攪拌し、得られた固定化物を濾取し、これを水道水で洗 浄する。

こうして得られたプソイドモナス・スペック（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　５ｐｅ ｃ、　）　（ＮＩＣＢ　１１６７３　）の固定化物懸濁液を、例１Ｃに記載され た条件下で、ジクロルメタン含有水の浄化に使用する。

例８ ａ）リン酸二水素カリウム０．３８　Ｆ　、リン酸水素二カリウム０．５１　ｇ 塩化ナトリウム０．０５Ｌ硫酸マグネシウム・７水和物０．１　、ｆｉ’、微量 元素の水溶液５ｍ／（これは１リツトルあたり塩化カルシウム５３０ｍ９、硫酸 鉄、（■）・７水和物２００ｍ９、硫酸マンガン（ＩＩ）・５水和物２０ｍｆｉ ’、硫酸鋼（ＩＦ）　−５水和物４０ｍ９、硫酸亜鉛（ＩＩ）・５水和物２０ｍ ９、ホウ酸３　ｍ９、塩化コバルト（■）４ｍ９、モリブデン酸ナトリウム・２ 水和物４　ｍｇおよび濃る２ｔのエルシンマイヤー・フラスコニ、ロードコツカ ス・ロードコルス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ　ｒｈｏｄｏｃｈｏｒｕｓ　）（Ａ ＴＣＣ３３２７８）の凍結乾燥培養物を接種し、閉鎖し、回転振とう機で１４５ 　ｒ−１）１ｍ−でろ０°Ｃで４８時間振とうする。

それぞれｓｏｏｍｚの同じ無菌培養基を有する１２個の２ｔのエルシンマイヤー ・フラスコに、それぞれ５３ｍ１の前培養液を接種し、前培養と同じ方法で４８ 時間発芽させる。

引き続き、培養液を合し、実験室用分離機Ｌ（）２０５〔ウエストファリア・セ パレーター社（Ｆｉｒｍａ　ＷｅｓｔｆａｌｉａＳｅｐａｒａｔｏｒ　Ａ　（） 　／○ｅｌｄｅ　（Ｗｅｓｔｆ、）　〕中で１０−００　Ｏｒ、ｐ、ｍ、で分離 する。遠心分離した細胞物質を、培養基の付着成分の除去のために蒸留水で洗浄 し、あらためて遠心分離する。こうして、細菌乾燥分１２％の含量ヲ有スる湿っ たロードコツカス・ロードコルス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ　ｒｈｏｄｏｃｈｏ ｒｕｓ　）　（ＡＴＣＣ３３２７８）のバイオマス６．３ｇが得られる。

ｂ）こうして得られた湿ったロードコツカス・ロードコルス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃ ｃｕｓ　ｒｈｏｄｏｃｈｏｒｕｓ　）　（ＡＴＣＣ３３２７８）のバイオマス２ ｇを滅菌されたアルギン酸ナトリウム溶液２００ｍ９〔ヘンケル社（Ｆｉｒｍａ 　Ｈｅｎｋｅｌ　ＧｍｂＨ：’ｌのテクサミド（’Ｔｅｘａコｉｄ■５５８）８ ００７ｉりを水４０　ｍｌで均質化することによって製造〕で均質に分散させる 。

ホースポンプを用いて、このホモジネートを、末端が尖頭とし構成されているシ リコーンゴムホースを通して、滅菌された０、１モルの塩化カルシウム水溶液５ ０Ｄｍｌ　（塩化カルシウム・２水和物と水道水とから製造）中に攪拌下に滴加 する。

この混合物をなお１時間攪拌し、得られた固定化物を濾取し、これを水道水で洗 浄する。

Ｃ）５００ｍｌのエルシンマイヤー・フラスコニ、水道水１００ｍ１、アセトニ トリルＱ、５ｍｌおよび例８により製造された固定化物１Ｑｍｌを添加し、閉鎖 し、ＰＨ値７．２で６０℃で１４５　ｒ、ｐ、ｍ、で１８０分間振とうする。こ の時間後、反応混合物中のアセトニトリルは実際に完全に分解している。

濾過後、回収された固定化物は新たに使用可能であり、活性度の損失を示さない 。

例９ ５ｏｏｍｔのエルシンマイヤー・フラスコに、水道水１００ｍｔ、アセトアミド ０．４９および例８により製造された固定化物１０ｇを添加し、閉鎖し、３０° Ｃで１２０分間１４５　ｒ、ｐ、コ、で振とうする。この時間後、アセトアミｒ は実際に完全に分解している。

濾過後、回収された固定化物は新たに使用可能であり、活性度の損失を示さない 。

例１０ ａ）リン酸二水素カリウム０．６８Ｓ１　リン酸水素二力ＩＪウム０．５１′ｆ ！、塩化す）　’Ｊ　’）　Ｌ　Ｏ−０５ＥＩ　Ｓ１ａ酸マグネシウム・７水和 物ｏ、ｉ　ｇ、微量元素の水溶液５ｍ１（これは１ｔにつき塩化カルシウム５３ ０１’＋９、傭酸鉄（ｎ）・７水和物２００ｍ９、硫酸マンガン（Ｉ［）・５水 和物２０■、硫酸鋼（ｎ）・５水和物４０■、硫酸亜鉛（ｎ）・７水和物２０ｍ ９、ホウ酸３　ｍ９、塩化コバルトｍｌ　（ｐＨ値７．２に調節）を有する２ｔ のエルシンマイヤー・フラスコに、ロードコツカス・スペック（Ｒｈｏｄｏｃｏ ｃｃｕｓ　５ｐｅｃ、　（ＡＴＣＣ２９６９１）　）の凍結乾燥培養物を接種し 、閉鎖しプロパンの通気下に回転振とう機で１４５　ｒ−ｐ−ｍ、で３Ｄ’Ｃで ７２時間振とうする。

それぞれ５００ｍ／の同じ無菌培養基を有する１２個の２ｔのエルシンマイヤー ・フラスコに、それぞれ前培養物５Ｑｍ７を接種し、前培養と同じ方法で７２時 間発芽させる。

引き続き、培養液を合し、実験室用分離機ＬＧ２０５〔ウエストファリア・セパ レーター社（Ｆｉｒ＋ｎａＷｅｓｔｆａｌｉａ　５ｅｐａｒａｔｏｒ　Ａ　Ｇ／ ○ｅ１ｃｉｅ　（Ｗｅｓｔｆ、）　）中で、１０００ＣＩτ、ｐ、ｍ、で分離す る。遠心分離した細胞物質を、培養基の付着成分の除去のために蒸留水で洗浄し 、新たに遠心分離する。こうして、細菌乾燥分１２チの含量を有する、湿ったロ ードコツカス・スペック［：　Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ　５ｐｅｃ、（ＡＴＣＣ ２９６７１）　］のバイオマス５．８ｇが得られる。

ｂ）こうして得られた、湿ったロードコツカス・スペック（Ｒｈｏｄｏｃｏ＝ｃ ｕｓ　５ｐｅｃ、（ＡＴＣＣ２９６７１）　）のバイオマス２ｇを、滅菌された アルギン酸ナトリウム溶液２００ｍ９〔へ／ケル社（Ｆｉｒｍａ　Ｈｅｎｋｅｌ 　Ｇｍ’ｂＨ）のテクサミド（Ｔｅｘａｍｉｄ”　５５８　）　８００　”９水 ４Ｑｍｉで均質化することによシ製造〕で均質化する。ホースポンプを用いて、 このホモジネートを、末端が尖偶として構成されているシリコーンゴム・ホース を通して、滅菌された０、１モルの塩化カルシウム水溶液５００ｍ１（塩化カル シウム・２水和物と水道水とから製造）中に攪拌下に滴加する。

この混合物をなお１時間攪拌し、得られた固定化物を濾取し、これを水道水で洗 浄する。

５００７ｍのエルシンマイヤー・フラスコニ、水道水Ｉ　ＱＱｍ／、１　、２− プロパンジオ−ｈＱ、２ｍｌおよび例１０ｂによシ製造された固定化物１０．！ ９ｔ−添加し、閉鎖し、３０℃で１２０分間１４５　ｒ、ｐ、ｍ、で振とうする 。この時間後、反応混合物中の１，２−プロパンジオールは実際に完全に分解し ている。

例１１ ５００ｍ７のエルシンマイヤー・フラスコに、水道水１００ｍ７．プロピルアミ ７　Ｑ、Ｑ　１ｍｌおよび例１０ｂにより製造された固定化物１０＆を添加し、 閉鎖し、６０℃で６０分間開　４５　ｒ、ｐ、ｍ、で振とうする。この時間後、 ゾロｔルアミンは実際に完全に分解している。

濾過後に回収された固定化物は新たに使用可能であり、活性度の損失を示さない 。

例１２ ５００ｍｔのエルシンマイヤー・フラスコに、水道水１００ｍＺ、アセト７０． ２ｍｌおよび例１０ｂにより製造された固定化物１０ｇを添加し、閉鎖し、６０ ℃で６０分間に１４５　ｒ−ｐ、ｍ−で振とうする。この時間後、アセトンは実 際に完全に分解している。

国際調査報告 国際調査報告

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. １．生物学的に分解可能な脂肪族物質を含有する廃水の浄化方法において、この 廃水を、微生物を変性しないゲル状有機ポリマー中に埋包することにり固定され ている、生物学的分解能力を有する微生物と接触させることを特徴とする廃水の 浄化方法。
2. ２．好気性微生物の固定化物を使用する請求項１記載の廃水の浄化方法。
3. ３．生物学的に分解可能な物質が、場合にりハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミ ノ基、オキソ基、こトロ基、こみトリル奉、スルホネート基、スルフエート基ま たはホスフエート基にすり置換されており、おすび／または酸素原子または窒素 原子にすつて中断されている、２０個まての炭素原子を有する脂肪族炭化水素で ある請求項１または２記載の廃水の浄化方法。
4. ４．生物学的に分解可能な物質が、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、オ キソ基、こトロ基またはこトリル基にすり置換されており、おすび／または酸素 原子または窒素原子にすり中断されている、最高８個の炭素原子を有するアルカ ン、アルケンまたはシクロアルカンてある請求項３記載の廃水の浄化方法。
5. ５．微生物の固定化のために使用されるポリマーが、アルギン酸カルシウム、カ ラゲナン、またはアクリルアミドおすび／またはメタクリルアミドを主体とする ポリマーてある請求項１から４までのいずれか１項記載の廃水の浄化方法。
6. ６．生物学的に分解可能な物質が、一般式：ＣｎＸｍＨ（２ｎ＋２−ｍ） 〔式中Ｘはハロゲン原子を表わし、ｎは１または２の数を表わし、ｍは１〜４の 数を表わす〕て示されるハロゲン化炭化水素てある請求項４または５記載の廃水 の浄化方法。
7. ７．生物学的分解能力を有する微生物が、アルギン酸カルシウムを除く、微生物 を変性しないゲル状有機ポリマーに埋包することにすり固定されている請６記載 の廃水の浄化方法。
8. ８．微生物の固定化のために使用されるポリマーがカラゲナン、または、アクリ ルァミドおすび／またはメタクリルアミドを主体とするポリマーてある請求７記 載の廃水の浄化方法。
9. ９．廃水の発生者にすりルすび／または廃水の生成個所で実施される請求項１か ら８まてのいずれか１項記載の廃水の浄化方法。
10. １０．請求項１から９までのいずれか１項記載の方法を実施するための微生物固 定化物。
11. １１．請求項１から９までのいずれか１項記載の方法を実施するための装置。