JPH0245758A - 水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマトグラフイー用充填剤 - Google Patents
水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマトグラフイー用充填剤Info
- Publication number
- JPH0245758A JPH0245758A JP63197372A JP19737288A JPH0245758A JP H0245758 A JPH0245758 A JP H0245758A JP 63197372 A JP63197372 A JP 63197372A JP 19737288 A JP19737288 A JP 19737288A JP H0245758 A JPH0245758 A JP H0245758A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- silica gel
- sample
- low
- column
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims description 22
- 238000012856 packing Methods 0.000 title claims description 22
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 9
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 title abstract description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical class O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 claims abstract description 17
- 125000005372 silanol group Chemical group 0.000 claims abstract description 12
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 26
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 10
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical group [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 35
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 35
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract description 2
- 239000002861 polymer material Substances 0.000 abstract 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 24
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 24
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 18
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 14
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 8
- FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N carbamazepine Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2N(C(=O)N)C2=CC=CC=C21 FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960000623 carbamazepine Drugs 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 7
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 7
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 6
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 6
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 5
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 4
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000002597 Solanum melongena Nutrition 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 238000007613 slurry method Methods 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- BPSIOYPQMFLKFR-UHFFFAOYSA-N trimethoxy-[3-(oxiran-2-ylmethoxy)propyl]silane Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCOCC1CO1 BPSIOYPQMFLKFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 4-glycidoxy-1-methylbutyltrimethoxysilane Chemical compound 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 1
- HHBOIIOOTUCYQD-UHFFFAOYSA-N ethoxy-dimethyl-[3-(oxiran-2-ylmethoxy)propyl]silane Chemical compound CCO[Si](C)(C)CCCOCC1CO1 HHBOIIOOTUCYQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 229960002036 phenytoin Drugs 0.000 description 1
- 238000009832 plasma treatment Methods 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- DQZNLOXENNXVAD-UHFFFAOYSA-N trimethoxy-[2-(7-oxabicyclo[4.1.0]heptan-4-yl)ethyl]silane Chemical compound C1C(CC[Si](OC)(OC)OC)CCC2OC21 DQZNLOXENNXVAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUKYSRVOOIKHHB-UHFFFAOYSA-N trimethoxy-[4-(oxiran-2-ylmethoxy)butyl]silane Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCCOCC1CO1 GUKYSRVOOIKHHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、シリカゲル表面に特定の基を導入してなる変
性シリカゲルを用いた水溶性高分子物質と低分子成分と
が共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマ
トグラフィー用充填剤に関する。
性シリカゲルを用いた水溶性高分子物質と低分子成分と
が共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマ
トグラフィー用充填剤に関する。
医学、生化学、食品化学、高分子化学等の分野では、蛋
白質と共存する微1成分、例えば血清中に存在する薬物
等を逆相高速液体クロマトグラフィーによって分析する
ことが行なわれており、この場合充填剤としてはシリカ
ゲル表面のシラノール基にオクタデシル基等の疎水性ア
ルキル基を導入したものが、溶離液としては水、アルコ
ール、アセトニトリル等の極性溶媒を主体としたものが
従来より使用されている。
白質と共存する微1成分、例えば血清中に存在する薬物
等を逆相高速液体クロマトグラフィーによって分析する
ことが行なわれており、この場合充填剤としてはシリカ
ゲル表面のシラノール基にオクタデシル基等の疎水性ア
ルキル基を導入したものが、溶離液としては水、アルコ
ール、アセトニトリル等の極性溶媒を主体としたものが
従来より使用されている。
しかし、蛋白質と共存する成分を液体クロマトグラフィ
ーで分析するに際し、充填剤として上記疎水性アルキル
キ基導入シリカゲルを用いて試料を前処理をすることな
く直接分析しようとすると、シリカゲル表面に蛋白質が
吸着し、蛋白質のピークと目的成分のピークとが重なっ
て正確な分析が困難となったり、シリカゲル表面上に蛋
白質が沈着し、充填剤を劣化させたり、カラムをつめた
りする。このため、蛋白質を含む試料に対しては。
ーで分析するに際し、充填剤として上記疎水性アルキル
キ基導入シリカゲルを用いて試料を前処理をすることな
く直接分析しようとすると、シリカゲル表面に蛋白質が
吸着し、蛋白質のピークと目的成分のピークとが重なっ
て正確な分析が困難となったり、シリカゲル表面上に蛋
白質が沈着し、充填剤を劣化させたり、カラムをつめた
りする。このため、蛋白質を含む試料に対しては。
前処理として溶媒抽出操作や蛋白質の沈殿除去操作等の
除蛋白処理を施すことが不可欠であり、従って分析操作
が著しく繁雑になるものであった。
除蛋白処理を施すことが不可欠であり、従って分析操作
が著しく繁雑になるものであった。
なお、蛋白質が吸着したり沈着したりすることのない液
体グロマトグラフイー用充填剤として。
体グロマトグラフイー用充填剤として。
シリカゲルの細孔内面部に疎水基を導入すると共に、外
表面部に親水性有機基を導入した部分親水化シリカゲル
が知られている(特開昭62−158LL3号公報参照
)。上記部分親水化シリカゲルは、親水性と疎水性の両
者の性質を兼ね備えた特異な性状を有する。しかしなが
ら、この部分親水化シリカゲルは、その製造に当り、オ
クタデシル基等の疎水基を導入したシリカゲルにプラズ
マ処理を施すことによりシリカゲル外表面のシラノール
基を顕出させた後、このシラノール基に親水性有機基を
導入するという操作を要し、製造工程が複雑である。
表面部に親水性有機基を導入した部分親水化シリカゲル
が知られている(特開昭62−158LL3号公報参照
)。上記部分親水化シリカゲルは、親水性と疎水性の両
者の性質を兼ね備えた特異な性状を有する。しかしなが
ら、この部分親水化シリカゲルは、その製造に当り、オ
クタデシル基等の疎水基を導入したシリカゲルにプラズ
マ処理を施すことによりシリカゲル外表面のシラノール
基を顕出させた後、このシラノール基に親水性有機基を
導入するという操作を要し、製造工程が複雑である。
本発明は、上記事情に鑑みなされたもので、蛋白質が吸
着したり沈着したりすることがなく、従って蛋白質と共
存する成分を分析又は分離分取する場合でも試料に除蛋
白前処理を施す必要がなく、このため試料をクロマトグ
ラフィーに直接注入して目的成分を迅速、簡便かつ正確
に分析又は分離分取することを可能にすると共に、蛋白
質の沈着によって劣化することのない変性シリカゲルを
用いた水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料
の分析方法及び前処理法並びにクロマトグラフィー用充
填剤を提供することを目的とする。
着したり沈着したりすることがなく、従って蛋白質と共
存する成分を分析又は分離分取する場合でも試料に除蛋
白前処理を施す必要がなく、このため試料をクロマトグ
ラフィーに直接注入して目的成分を迅速、簡便かつ正確
に分析又は分離分取することを可能にすると共に、蛋白
質の沈着によって劣化することのない変性シリカゲルを
用いた水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料
の分析方法及び前処理法並びにクロマトグラフィー用充
填剤を提供することを目的とする。
〔課題を解決するための手段及び作用〕本発明は、上記
目的を達成するため、表面シラノール基の水素原子の一
部又は全部をけい素原子を介して下記式(1) %式%(1) (但し、Aは炭素数2〜24の疎水基、Bは親水基を示
す。) に示す基で置換してなる変性シリカゲルを充填したクロ
マトグラフィー用カラムを逆相系で用い、水溶性高分子
物質と低分子成分とを含む試料中の上記高分子物質を溶
出させた後、上記低分子成分を分a溶出して、上記高分
子物質と分離した低分子成分を検出することを特徴とす
る水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分
析方法を提供する。
目的を達成するため、表面シラノール基の水素原子の一
部又は全部をけい素原子を介して下記式(1) %式%(1) (但し、Aは炭素数2〜24の疎水基、Bは親水基を示
す。) に示す基で置換してなる変性シリカゲルを充填したクロ
マトグラフィー用カラムを逆相系で用い、水溶性高分子
物質と低分子成分とを含む試料中の上記高分子物質を溶
出させた後、上記低分子成分を分a溶出して、上記高分
子物質と分離した低分子成分を検出することを特徴とす
る水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分
析方法を提供する。
また、本発明は、表面シラノール基の水素原子の一部又
は全部をけい素原子を介して下記式(1)%式%(1) (但し、Aは炭素2〜24の疎水基、Bは親水基を示す
。) に示す基で置換してなる変性シリカゲルをクロマトグラ
フの前処理カラムに充填し、該前処理カラムに水溶性高
分子物質と低分子成分とを含む試料を通し、該カラムに
上記試料中の低分子成分を分離して保持すると共に、上
記高分子物質を溶出除去することを特徴とする水溶性高
分子物質と低分子成分とが共存する試料の前処理方法を
提供する。
は全部をけい素原子を介して下記式(1)%式%(1) (但し、Aは炭素2〜24の疎水基、Bは親水基を示す
。) に示す基で置換してなる変性シリカゲルをクロマトグラ
フの前処理カラムに充填し、該前処理カラムに水溶性高
分子物質と低分子成分とを含む試料を通し、該カラムに
上記試料中の低分子成分を分離して保持すると共に、上
記高分子物質を溶出除去することを特徴とする水溶性高
分子物質と低分子成分とが共存する試料の前処理方法を
提供する。
更に1本発明は、表面シラノール基の水素原子の一部又
は全部をけい素原子を介して下記式(2)に示す基で置
換した変性シリカゲルからなるクロマトグラフィー用充
填剤を提供する。
は全部をけい素原子を介して下記式(2)に示す基で置
換した変性シリカゲルからなるクロマトグラフィー用充
填剤を提供する。
−x−y ・・・ (2)(但
し、Xは炭素数4〜24の疎水基、Yは−CHOH−C
H2OH基を含む基を示す。)本発明において9表面シ
ラノール基の水素原子の一部又は全部をけい素原子を介
して上記(1)式又は(2)式の基で置換した変性シリ
カゲルは、(1)式及び(2)式の基が親水性部と疎水
性部とから構成されているので、疎水性部がシリカゲル
表面近くに位置し、かつ親水性部がシリカゲル表面から
遠ざかった状態で、多数の分子がシリカゲル表面に配列
している構造を有し1分子の集合としてみると、シリカ
ゲル表面に近い部分は親油性、遠い部分は親水性である
層構造が多数の分子によって構成されている。それ故、
この変性シリカゲルは親水性と疎水性の両者の性質を兼
ね備えた特異な性状を有し、特に蛋白質等の水溶性高分
子物質を吸着も沈着もさせず、従って蛋白質等の水溶性
高分子物質と共存する成分の分析、分取、前処理カラム
の充填剤としてこの変性シリカゲルを用いると、目的成
分のみがこの充填剤に保持され、水溶性高分子物質は保
持されることなく直ちに溶出する。従って、上記変性シ
リカゲルを分析カラム用充填剤として用いた場合、試料
に除蛋白前処理等の高分子物質除去処理を施す必要がな
く、蛋白質等を含む試料を直接クロマトグラフに注入し
て迅速、簡便かつ正確に目的成分を分離、分析し得ると
共に、蛋白質等の高分子物質の沈着によって劣化するこ
とがない。また前処理カラム用充填剤として用いた場合
、蛋白質等を除去して目的成分のみを容易に濃縮できる
。更に、本発明充填剤は、後述するようにシリカゲルと
特定化合物とを反応させることにより容易に製造するこ
とができる。なお、表面シラノール基の水素原子を上記
(1)式の基で置換した変性シリカゲルのうちAが炭素
数3の疎水基であるものは従来ゲル浸透クロマトグラフ
ィー用充填剤として用いられているが、この変性シリカ
ゲルを水溶性高分子物質と共存する低分子成分を分析す
るため等の逆相高速液体クロマトグラフィー用充填剤と
して用いルコトは本発明者の新知見である。また、(1
)式の基で置換した変性シリカゲルのうちAが炭素数4
〜24の疎水基であり、Bが一部 HOHCHz○H基
を含む基であるもの、即ち請求項3の充填剤は本発明者
の見い出した新規物質であり、上述した特異な性状の故
に液体クロマトグラフィーの他、薄層クロマトグラフィ
ー用等として有効に使用されるものである。
し、Xは炭素数4〜24の疎水基、Yは−CHOH−C
H2OH基を含む基を示す。)本発明において9表面シ
ラノール基の水素原子の一部又は全部をけい素原子を介
して上記(1)式又は(2)式の基で置換した変性シリ
カゲルは、(1)式及び(2)式の基が親水性部と疎水
性部とから構成されているので、疎水性部がシリカゲル
表面近くに位置し、かつ親水性部がシリカゲル表面から
遠ざかった状態で、多数の分子がシリカゲル表面に配列
している構造を有し1分子の集合としてみると、シリカ
ゲル表面に近い部分は親油性、遠い部分は親水性である
層構造が多数の分子によって構成されている。それ故、
この変性シリカゲルは親水性と疎水性の両者の性質を兼
ね備えた特異な性状を有し、特に蛋白質等の水溶性高分
子物質を吸着も沈着もさせず、従って蛋白質等の水溶性
高分子物質と共存する成分の分析、分取、前処理カラム
の充填剤としてこの変性シリカゲルを用いると、目的成
分のみがこの充填剤に保持され、水溶性高分子物質は保
持されることなく直ちに溶出する。従って、上記変性シ
リカゲルを分析カラム用充填剤として用いた場合、試料
に除蛋白前処理等の高分子物質除去処理を施す必要がな
く、蛋白質等を含む試料を直接クロマトグラフに注入し
て迅速、簡便かつ正確に目的成分を分離、分析し得ると
共に、蛋白質等の高分子物質の沈着によって劣化するこ
とがない。また前処理カラム用充填剤として用いた場合
、蛋白質等を除去して目的成分のみを容易に濃縮できる
。更に、本発明充填剤は、後述するようにシリカゲルと
特定化合物とを反応させることにより容易に製造するこ
とができる。なお、表面シラノール基の水素原子を上記
(1)式の基で置換した変性シリカゲルのうちAが炭素
数3の疎水基であるものは従来ゲル浸透クロマトグラフ
ィー用充填剤として用いられているが、この変性シリカ
ゲルを水溶性高分子物質と共存する低分子成分を分析す
るため等の逆相高速液体クロマトグラフィー用充填剤と
して用いルコトは本発明者の新知見である。また、(1
)式の基で置換した変性シリカゲルのうちAが炭素数4
〜24の疎水基であり、Bが一部 HOHCHz○H基
を含む基であるもの、即ち請求項3の充填剤は本発明者
の見い出した新規物質であり、上述した特異な性状の故
に液体クロマトグラフィーの他、薄層クロマトグラフィ
ー用等として有効に使用されるものである。
以下、本発明につき更に詳しく説明する。
本発明に用いる変性シリカゲルは、上述したように表面
シラノール基の一部又は全部をけい素原子を介して上記
(1)式又は(2)式の基で置換したものである。第1
図はこれを模型的に示したもので、1はシリカゲル、2
は細孔であり、表面層3に親水性基B、Y、その内側層
に疎水性基A。
シラノール基の一部又は全部をけい素原子を介して上記
(1)式又は(2)式の基で置換したものである。第1
図はこれを模型的に示したもので、1はシリカゲル、2
は細孔であり、表面層3に親水性基B、Y、その内側層
に疎水性基A。
Xが配列している。
また、この変性シリカゲルとしては下記式(1a)〜(
1d)に示すものを挙げることができる。
1d)に示すものを挙げることができる。
なお、上記(1a)〜(1d)式においてA。
Bは上記と同じもの ah、 R2はそれぞれ炭素数1
〜5のアルキル基又は水酸基を示す。また、(1d)式
に示すように、OH基同士が分子間でエーテル結合して
いるものも存在する。
〜5のアルキル基又は水酸基を示す。また、(1d)式
に示すように、OH基同士が分子間でエーテル結合して
いるものも存在する。
ここで、上記変性シリカゲルにおいて、疎水基A、Xと
しては例えばアルキル基、アルキレン基。
しては例えばアルキル基、アルキレン基。
ハロゲン化アルキル基等を挙げることができる。
なお、蛋白質と目的成分とが共存する試料をクロマトグ
ラフに直接注入する場合、蛋白質が移動相中の有機溶媒
によって変性し、沈殿することがあるため、これを防止
する目的で移動層中の有機溶媒含有量を所定濃度以下に
制限する必要が生じることがあり、この場合試料が溶出
しない。しかし。
ラフに直接注入する場合、蛋白質が移動相中の有機溶媒
によって変性し、沈殿することがあるため、これを防止
する目的で移動層中の有機溶媒含有量を所定濃度以下に
制限する必要が生じることがあり、この場合試料が溶出
しない。しかし。
本発明充填剤においては、疎水基A、Xの種類を選定し
、疎水基の疎水性を適宜設定することにより、親油性の
高い目的成分でも有機溶媒の含有量を高めることなく溶
出させ得、これにより広範囲の目的成分を分析すること
ができる。
、疎水基の疎水性を適宜設定することにより、親油性の
高い目的成分でも有機溶媒の含有量を高めることなく溶
出させ得、これにより広範囲の目的成分を分析すること
ができる。
また、親水基Bとしては例えば−CH,OH基を含む基
、−CHoH−CH,OH基を含む基、アミド基、ケト
ン基、エーテル基、シアノ基、アミノ基、四級アンモニ
ウム基、カルボキシル基等を挙げることができる。
、−CHoH−CH,OH基を含む基、アミド基、ケト
ン基、エーテル基、シアノ基、アミノ基、四級アンモニ
ウム基、カルボキシル基等を挙げることができる。
なお、表面シラノール基の上記(1)又は(2)式の基
による置換率は10〜100%であることが好ましい。
による置換率は10〜100%であることが好ましい。
本発明に用いる変性シリカゲルの粒子形状に制限はなく
、球状、破砕状等の適宜形状とすることができる。また
1粒径、細孔の大きさ、表面積等も適宜選定されるが、
本発明においては細孔の口径を60〜120人とするこ
とが望ましく、これにより蛋白質が細孔内に入り込み、
カラム内で保持されるのを防止すると共に、目的成分は
低分子であるので上記細孔内に自由に出入りし得、カラ
ムに保持されるものである。
、球状、破砕状等の適宜形状とすることができる。また
1粒径、細孔の大きさ、表面積等も適宜選定されるが、
本発明においては細孔の口径を60〜120人とするこ
とが望ましく、これにより蛋白質が細孔内に入り込み、
カラム内で保持されるのを防止すると共に、目的成分は
低分子であるので上記細孔内に自由に出入りし得、カラ
ムに保持されるものである。
本発明に用いる変性シリカゲルの製法に限定はないが、
シリカゲルと下記式(3)、即ちR+ (但し、(3)式においてA、Bは上記と同じもの、R
’、R’、R’はそれぞれハロゲン原子、炭素数1〜5
のアルキル基又は−OH基(Rは炭素数1〜5のアルキ
ル基である)を示すが、R4R5,R’の少なくとも1
つはハロゲン原子又は−OH基である。) で示される化合物とを反応させる二とにより容易に得る
ことができる。
シリカゲルと下記式(3)、即ちR+ (但し、(3)式においてA、Bは上記と同じもの、R
’、R’、R’はそれぞれハロゲン原子、炭素数1〜5
のアルキル基又は−OH基(Rは炭素数1〜5のアルキ
ル基である)を示すが、R4R5,R’の少なくとも1
つはハロゲン原子又は−OH基である。) で示される化合物とを反応させる二とにより容易に得る
ことができる。
なお、上記(3)式の化合物として、具体的には下記の
ものを例示することができる。但し、Meはメチル基、
Etはエチル基、nは2〜24の整数である。
ものを例示することができる。但し、Meはメチル基、
Etはエチル基、nは2〜24の整数である。
CHl
(Et○)2S i (4H@−0−CH□−C−C
ソ Q (CH,)、5i−C,H6−CN CH,S i −C,H,−CN (CH30)3S i −C,H,−CN〔発明の効果
〕 以上説明したように、本発明においては、充填剤に蛋白
質等の水溶性高分子物質が吸着も沈着もしないので、蛋
白質等の水溶性高分子物質と共存する目的成分の迅速、
簡便かつ正確な分析が可能であり、かつ濃縮も容易に行
なうことができると共に、充填剤が蛋白質等の沈着によ
って劣化することがないものである。即ち水溶性高分子
物質として蛋白質を例として説明すれば、本発明で充填
剤として用いる変性シリカゲルは蛋白質と全く相万作用
をせず、従って充填剤に対して蛋白質の吸着や沈着がな
いので、蛋白質と目的成分とを同時にこの充填剤を充填
したカラムに導入すると、目的成分はこの充填剤の疎水
基に保持されるのに対して蛋白質はそのままカラム外に
排出される。従って、蛋白質と共存する微量成分を分析
する場合、従来のように面倒な除蛋白処理を必要とせず
、本発明変性シリカゲルを充填したカラムに試料を通す
だけで、最初に蛋白質が確実に分離溶出され、微量成分
は保持されるのでこれを簡単に分析できる。また、本発
明変性シリカゲルは、このような性質を利用して前処理
カラムに目的成分のみを濃縮する場合、及び分取等にも
好適に用いられる。
ソ Q (CH,)、5i−C,H6−CN CH,S i −C,H,−CN (CH30)3S i −C,H,−CN〔発明の効果
〕 以上説明したように、本発明においては、充填剤に蛋白
質等の水溶性高分子物質が吸着も沈着もしないので、蛋
白質等の水溶性高分子物質と共存する目的成分の迅速、
簡便かつ正確な分析が可能であり、かつ濃縮も容易に行
なうことができると共に、充填剤が蛋白質等の沈着によ
って劣化することがないものである。即ち水溶性高分子
物質として蛋白質を例として説明すれば、本発明で充填
剤として用いる変性シリカゲルは蛋白質と全く相万作用
をせず、従って充填剤に対して蛋白質の吸着や沈着がな
いので、蛋白質と目的成分とを同時にこの充填剤を充填
したカラムに導入すると、目的成分はこの充填剤の疎水
基に保持されるのに対して蛋白質はそのままカラム外に
排出される。従って、蛋白質と共存する微量成分を分析
する場合、従来のように面倒な除蛋白処理を必要とせず
、本発明変性シリカゲルを充填したカラムに試料を通す
だけで、最初に蛋白質が確実に分離溶出され、微量成分
は保持されるのでこれを簡単に分析できる。また、本発
明変性シリカゲルは、このような性質を利用して前処理
カラムに目的成分のみを濃縮する場合、及び分取等にも
好適に用いられる。
以下、実施例を示し1本発明を具体的に説明するが1本
発明は下記実施例に限定されるものではない。
発明は下記実施例に限定されるものではない。
下記方法によりN001〜8の本発明充填剤を製造した
。
。
aユよ(3−グリシドキシプロビルトリメトキシシラン
によりシリル化した充填剤)細孔径約60人、平均粒径
5−の球状シリカゲルLogを減圧中120℃で2時間
乾燥した後、水0.64加えて含水した。このシリカゲ
ルを三ツロフラスコに入れ、トルエン35−100%p
−トルエンスルホン酸、アセトニトリル溶液200成、
3−グリシドキシプロビルトリメトキシシラン5mQを
加え、110℃で16時間加熱した。冷却後、ガラスフ
ィルターを用いて吸引濾過し、更にトルエン200Ia
Q、アセトン200IIIQの順で洗浄し、ガラスフィ
ルターを用いて吸引濾過した。
によりシリル化した充填剤)細孔径約60人、平均粒径
5−の球状シリカゲルLogを減圧中120℃で2時間
乾燥した後、水0.64加えて含水した。このシリカゲ
ルを三ツロフラスコに入れ、トルエン35−100%p
−トルエンスルホン酸、アセトニトリル溶液200成、
3−グリシドキシプロビルトリメトキシシラン5mQを
加え、110℃で16時間加熱した。冷却後、ガラスフ
ィルターを用いて吸引濾過し、更にトルエン200Ia
Q、アセトン200IIIQの順で洗浄し、ガラスフィ
ルターを用いて吸引濾過した。
このシリカゲルを200aQナスフラスコにとり。
101N硫酸水溶液50mQを加え、1時間加熱還流し
た。冷却後、グラスフィルター(G4)を用いて吸引濾
過し、水200mQで洗浄し、吸引濾過した1次にシリ
カゲルを再度200IIIQナスフラス:I ニド4J
、10n+MIJン酸緩衝液(pH8,0)50−を加
え、1時間加熱還流した。冷却後、グラスフィルター(
G4)を用いて吸引濾過し、水200−、メタノール1
00d、ジエチルエーテル100dの順で洗浄し、吸引
濾過した後、真空乾燥器にて60°Cで2時間乾燥し、
本発明充填剤を得た。
た。冷却後、グラスフィルター(G4)を用いて吸引濾
過し、水200mQで洗浄し、吸引濾過した1次にシリ
カゲルを再度200IIIQナスフラス:I ニド4J
、10n+MIJン酸緩衝液(pH8,0)50−を加
え、1時間加熱還流した。冷却後、グラスフィルター(
G4)を用いて吸引濾過し、水200−、メタノール1
00d、ジエチルエーテル100dの順で洗浄し、吸引
濾過した後、真空乾燥器にて60°Cで2時間乾燥し、
本発明充填剤を得た。
eユ」工(−官能性シリル化剤で3−グリコキシアルキ
ルシリル化した充填剤) シリル化剤としてジメチェルエトキシー3−グリシドキ
シプロピルシランを用い、上記No、1と同じ方法で製
造した。
ルシリル化した充填剤) シリル化剤としてジメチェルエトキシー3−グリシドキ
シプロピルシランを用い、上記No、1と同じ方法で製
造した。
eユ良工(アルキル基の異なるシリル化剤で3−グリコ
キシアルキルシリル化した充填剤)シリル化剤として4
−グリシドキシブチルトリメトキシシランを用い、上記
No、1と同じ方法で製造した。但し、シリル化剤の量
は2.611IQ。
キシアルキルシリル化した充填剤)シリル化剤として4
−グリシドキシブチルトリメトキシシランを用い、上記
No、1と同じ方法で製造した。但し、シリル化剤の量
は2.611IQ。
加水分解時間は各1時間とした。
遇5哄」1N−隻工A工(同上)
シリル化剤として4−グリシドキシ−1−メチルブチル
トリメトキシシランを用い、上記N001と同じ方法で
製造した。但し、シリル化剤の量は2.8 mQ、加水
分解時間は各1時間とした。
トリメトキシシランを用い、上記N001と同じ方法で
製造した。但し、シリル化剤の量は2.8 mQ、加水
分解時間は各1時間とした。
笑」1剤」(旦よ」−(同上)
シリル化剤として6−ゲリシドキシヘキシルトリメトキ
シシランを用い、上記No、1と同じ方法で製造した。
シシランを用い、上記No、1と同じ方法で製造した。
但し、シリル化剤の量は2.9 aQ。
加水分解時間は各1時間とした。
aユ6(エーテル結合を含まないシリル化剤でジヒドロ
キシアルキルシリル化した充填剤)シリル化剤として2
− (3,4−エポキシシクロヘキシルエチル)トリメ
トキシシランを用い、上記No、1と同じ方法で製造し
た。但し、シリル化剤の量は2.6d、加水分解時間は
各1時間とした。
キシアルキルシリル化した充填剤)シリル化剤として2
− (3,4−エポキシシクロヘキシルエチル)トリメ
トキシシランを用い、上記No、1と同じ方法で製造し
た。但し、シリル化剤の量は2.6d、加水分解時間は
各1時間とした。
Al共」1y」と11−(同上)
シリル化剤として1,2−エポキシへキシルトリメトキ
シシランを用い、上記N001と同じ方法で製造した。
シシランを用い、上記N001と同じ方法で製造した。
但し、シリル化剤の量は2.4d。
加水分解時間は各1時間とした。
j[哄J乱下二免よ」ヨ■−同上)
シリル化剤として1.2−エポキシオクチルトリメトキ
シシランを用い、上記No、1と同じ方法で製造した。
シシランを用い、上記No、1と同じ方法で製造した。
但し、シリル化剤の量は2.6d、加水分解時間は各3
時間とした。
時間とした。
次に、上記N001〜8の充填剤をそれぞれ内径4.6
園、長さ1501のステンレス製カラムに平衡スラリー
法によって充填し、充填カラムを作成すると共に、これ
ら充填カラムを用いて下記に示す牛血清アルブミンの回
収試験、ベンゼン及びナフタレンの分析試験及び血清試
料注入試験を行なった。
園、長さ1501のステンレス製カラムに平衡スラリー
法によって充填し、充填カラムを作成すると共に、これ
ら充填カラムを用いて下記に示す牛血清アルブミンの回
収試験、ベンゼン及びナフタレンの分析試験及び血清試
料注入試験を行なった。
血′アルブミンの口
各カラムに下記分析条件で牛血清アルブミンを通し、そ
の回収率を調べた。結果を第1表に示す。
の回収率を調べた。結果を第1表に示す。
分析条件;
試 料 1%血清アルブミン/100mMリン酸緩衝
液(pH6,8) 移動相 アセトニトリル:100mMリン酸緩衝液(2
0:80) 流 速 1 d / win 検出波長 295nm 第1表 上記各カラムを用い、下記分析条件でウラシル、ベンゼ
ン及びナフタレンの混合溶液の分析を行ない、各成分の
保持時間を調べた。結果を第2表に示す。
液(pH6,8) 移動相 アセトニトリル:100mMリン酸緩衝液(2
0:80) 流 速 1 d / win 検出波長 295nm 第1表 上記各カラムを用い、下記分析条件でウラシル、ベンゼ
ン及びナフタレンの混合溶液の分析を行ない、各成分の
保持時間を調べた。結果を第2表に示す。
分析条件;
移動相 アセトニトリル:水(10:90)、但し、N
o、4及びNo、8の充填剤を用いたカラムの場合はア
セトニトリル:水(30ニア0) 速 1 mQ / ff1in 流 検出波長 254nm 第2表 流 速 検出波長 試料注入量 剤を充填したカラムの場合は1o: 90、No、5.No、8の充填剤を 充填したカラムの場合は20:80) 1mQ/n+in 20n11 20越 第 3 表 カルバマゼピン10 p4< / mQを含む血清を下
記分析条件で上記N o 、 1 、 N o 、 5
、 N o 、 8の充填剤を充填したカラムに直接
注入し、カルバマゼピンの分析を行なった。得られたク
ロマトグラムを第3表の通り第2〜4図に示す。
o、4及びNo、8の充填剤を用いたカラムの場合はア
セトニトリル:水(30ニア0) 速 1 mQ / ff1in 流 検出波長 254nm 第2表 流 速 検出波長 試料注入量 剤を充填したカラムの場合は1o: 90、No、5.No、8の充填剤を 充填したカラムの場合は20:80) 1mQ/n+in 20n11 20越 第 3 表 カルバマゼピン10 p4< / mQを含む血清を下
記分析条件で上記N o 、 1 、 N o 、 5
、 N o 、 8の充填剤を充填したカラムに直接
注入し、カルバマゼピンの分析を行なった。得られたク
ロマトグラムを第3表の通り第2〜4図に示す。
分析条件;
移 動 相 アセトニトリル:100mMリン酸緩衝液
(pH6,8)(No、1の充填 フェノパルビタール40Pg/d、フェニトイン20q
/mQ及びカルバマゼピン10./mQを含む血清を下
記分析条件で上記N o 、 2の充填剤を充填したカ
ラムに直接注入し、分析を行なった。得られたクロマト
グラムを第5図に示す。
(pH6,8)(No、1の充填 フェノパルビタール40Pg/d、フェニトイン20q
/mQ及びカルバマゼピン10./mQを含む血清を下
記分析条件で上記N o 、 2の充填剤を充填したカ
ラムに直接注入し、分析を行なった。得られたクロマト
グラムを第5図に示す。
分析条件;
移 動 相 テトラヒド口フラン:アセトニトリル:1
00mMリン酸緩衝液(pH 6,8) (5: 5 : 90) 流 量 1d/min 検出波長 220nm 試料注入量 10d 次に6−グリシドキシへキシルシリル化したシリカゲル
をカラムに充填して前処理カラムとして用い、第6図に
示す装置を用いてカラムスイッチング法によって血清中
カルバマゼピンの分析を行なった。この場合、前記No
、5の充填剤を内径4.6m、長さ30閤のステンレス
製カラムに平衡スラリー法によって充填し、前処理用充
填カラムを作成した。また、まず前処理用移動相をバル
ブの点線で示す流路に流すことにより前処理カラムに試
料を濃縮した後、バルブを切り換え、分析用移動相をバ
ルブの実線で示す流路に流すことにより前処理カラム中
の試料を分析カラムに導入した。この処理装置付き高速
液体クロマトグラフによってカルバマゼピン1olLg
/raを含む血清を下記条件で分析した。得られたクロ
マトグラムを第7図に示す。
00mMリン酸緩衝液(pH 6,8) (5: 5 : 90) 流 量 1d/min 検出波長 220nm 試料注入量 10d 次に6−グリシドキシへキシルシリル化したシリカゲル
をカラムに充填して前処理カラムとして用い、第6図に
示す装置を用いてカラムスイッチング法によって血清中
カルバマゼピンの分析を行なった。この場合、前記No
、5の充填剤を内径4.6m、長さ30閤のステンレス
製カラムに平衡スラリー法によって充填し、前処理用充
填カラムを作成した。また、まず前処理用移動相をバル
ブの点線で示す流路に流すことにより前処理カラムに試
料を濃縮した後、バルブを切り換え、分析用移動相をバ
ルブの実線で示す流路に流すことにより前処理カラム中
の試料を分析カラムに導入した。この処理装置付き高速
液体クロマトグラフによってカルバマゼピン1olLg
/raを含む血清を下記条件で分析した。得られたクロ
マトグラムを第7図に示す。
この方法は、極微量成分を簡単に前処理カラムに濃縮で
きるので、血清中の極微量代謝化合物の分析等に有効で
ある。
きるので、血清中の極微量代謝化合物の分析等に有効で
ある。
前処理条件;
移 動 相 100mMリン酸緩衝液(PH6,8)流
速 1 mQ / win前処理時間 1
0m1n 試料注入量 2〇− 分析条件; 分析用カラム ODS (4,6mmφX150m5L
、)移 動 相 アセトニトリル:100n+Mリン酸
緩衝液(pH6,8)(30: 70)流
速 l mQ / win測定波長22りn+m 以上の結果より、本発明の変性シリカゲルは、蛋白質等
の水溶性高分子物質を吸着しないと共に。
速 1 mQ / win前処理時間 1
0m1n 試料注入量 2〇− 分析条件; 分析用カラム ODS (4,6mmφX150m5L
、)移 動 相 アセトニトリル:100n+Mリン酸
緩衝液(pH6,8)(30: 70)流
速 l mQ / win測定波長22りn+m 以上の結果より、本発明の変性シリカゲルは、蛋白質等
の水溶性高分子物質を吸着しないと共に。
液体クロマトグラフィー用充填剤として優れた性質を有
することが認められる。
することが認められる。
第1図は本発明に用いる変性シリカゲルを模型的に説明
する説明図、第2図乃至第5図はそれぞれ本発明分析方
法によって血清中のカルバマゼピン等を分析したクロマ
トグラム、第6図は前処理カラムを用いた分析装置を示
す概略図、第7図は本発明前処理方法によって前処理カ
ラムに血清中のカルバマゼピンを濃縮し、このカルバマ
ゼピンをODSカラムで分析したクロマトグラムである
。 出願人 財団法人 化学品検査協会 代理人 弁理士 小 島 隆 司 第2図 第5図 第6図 前処′IL用移動相
する説明図、第2図乃至第5図はそれぞれ本発明分析方
法によって血清中のカルバマゼピン等を分析したクロマ
トグラム、第6図は前処理カラムを用いた分析装置を示
す概略図、第7図は本発明前処理方法によって前処理カ
ラムに血清中のカルバマゼピンを濃縮し、このカルバマ
ゼピンをODSカラムで分析したクロマトグラムである
。 出願人 財団法人 化学品検査協会 代理人 弁理士 小 島 隆 司 第2図 第5図 第6図 前処′IL用移動相
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、表面シラノール基の水素原子の一部又は全部をけい
素原子を介して下記式(1) −A−B・・・(1) (但し、Aは炭素2〜24の疎水基、Bは親水基を示す
。) に示す基で置換してなる変性シリカゲルを充填したクロ
マトグラフィー用カラムを逆相系で用い、水溶性高分子
物質と低分子成分とを含む試料中の上記高分子物質を溶
出させた後、上記低分子成分を分離溶出して、上記高分
子物質と分離した低分子成分を検出することを特徴とす
る水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分
析方法。 2、表面シラノール基の水素原子の一部又は全部をけい
素原子を介して下記式(1) −A−B・・・(1) (但し、Aは炭素数2〜24の疎水基、Bは親水基を示
す。) に示す基で置換してなる変性シリカゲルをクロマトグラ
フの前処理カラムに充填し、該前処理カラムに水溶性高
分子物質と低分子成分とを含む試料を通し、該カラムに
上記試料中の低分子成分を分離して保持すると共に、上
記高分子物質を溶出除去することを特徴とする水溶性高
分子物質と低分子成分とが共存する試料の前処理方法。 3、表面シラノール基の水素原子の一部又は全部をけい
素原子を介して下記式(2)に示す基で置換した変性シ
リカゲルからなるクロマトグラフィー用充填剤。 −X−Y・・・(2) (但し、Xは炭素数4〜24の疎水基、Yは−CHOH
−CH_2OH基を含む基を示す。)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63197372A JP2792038B2 (ja) | 1988-08-08 | 1988-08-08 | 水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマトグラフイー用充填剤 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63197372A JP2792038B2 (ja) | 1988-08-08 | 1988-08-08 | 水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマトグラフイー用充填剤 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0245758A true JPH0245758A (ja) | 1990-02-15 |
JP2792038B2 JP2792038B2 (ja) | 1998-08-27 |
Family
ID=16373406
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP63197372A Expired - Fee Related JP2792038B2 (ja) | 1988-08-08 | 1988-08-08 | 水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマトグラフイー用充填剤 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2792038B2 (ja) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005010528A1 (ja) * | 2003-07-28 | 2005-02-03 | Reverse Proteomics Research Institute Co., Ltd. | 非特異的物質の除去方法 |
WO2005036173A1 (ja) * | 2003-10-14 | 2005-04-21 | Reverse Proteomics Research Institute Co., Ltd. | 非特異的物質の除去方法 |
JP2006312117A (ja) * | 2005-05-06 | 2006-11-16 | Canon Inc | 生理活性物質の分離用材料及びその製造方法 |
JP2009198252A (ja) * | 2008-02-20 | 2009-09-03 | Fuji Silysia Chemical Ltd | シリカゲル、クロマトグラフ装置、分離方法、及びシリカゲルの製造方法 |
JP2015193711A (ja) * | 2014-03-31 | 2015-11-05 | 信越化学工業株式会社 | 粘着剤組成物、粘着偏光板及び液晶表示装置 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS573043A (en) * | 1980-05-05 | 1982-01-08 | Varian Associates | Production of mixed phase chromatography composite |
-
1988
- 1988-08-08 JP JP63197372A patent/JP2792038B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS573043A (en) * | 1980-05-05 | 1982-01-08 | Varian Associates | Production of mixed phase chromatography composite |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005010528A1 (ja) * | 2003-07-28 | 2005-02-03 | Reverse Proteomics Research Institute Co., Ltd. | 非特異的物質の除去方法 |
WO2005036173A1 (ja) * | 2003-10-14 | 2005-04-21 | Reverse Proteomics Research Institute Co., Ltd. | 非特異的物質の除去方法 |
JPWO2005036173A1 (ja) * | 2003-10-14 | 2006-12-21 | 株式会社リバース・プロテオミクス研究所 | 非特異的物質の除去方法 |
JP4491419B2 (ja) * | 2003-10-14 | 2010-06-30 | 株式会社リバース・プロテオミクス研究所 | 非特異的物質の除去方法 |
JP2006312117A (ja) * | 2005-05-06 | 2006-11-16 | Canon Inc | 生理活性物質の分離用材料及びその製造方法 |
JP2009198252A (ja) * | 2008-02-20 | 2009-09-03 | Fuji Silysia Chemical Ltd | シリカゲル、クロマトグラフ装置、分離方法、及びシリカゲルの製造方法 |
JP2015193711A (ja) * | 2014-03-31 | 2015-11-05 | 信越化学工業株式会社 | 粘着剤組成物、粘着偏光板及び液晶表示装置 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2792038B2 (ja) | 1998-08-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Badawy et al. | A review of the modern principles and applications of solid-phase extraction techniques in chromatographic analysis | |
KR100359189B1 (ko) | 마이크로-또는세미-마이크로컬럼을갖는액체크로마토그래프 | |
US4131544A (en) | Macroencapsulated sorbent element and process for using the same | |
US7740763B2 (en) | Capillary-channeled polymeric fiber as solid phase extraction media | |
McDowall | Sample preparation for biomedical analysis | |
McDowall et al. | Liquid—solid sample preparation in drug analysis | |
Moors et al. | Analyte isolation by solid phase extraction (SPE) on silica-bonded phases: classification and recommended practices (Technical Report) | |
Walker et al. | Solid-phase extraction in clinical biochemistry | |
US5559039A (en) | Method of using liquid column packing materials | |
JP3444900B2 (ja) | 液体クロマトグラフィ及びカラム充填剤 | |
EP0228090B1 (en) | Partially hydrophilicized silica sel and process for producing the same | |
JP2782470B2 (ja) | グリコヘモグロビンの分離方法および分離装置並びに分離カラム | |
Sobańska | Emerging or underestimated silica-based stationary phases in liquid chromatography | |
JPH0245758A (ja) | 水溶性高分子物質と低分子成分とが共存する試料の分析方法及び前処理方法並びにクロマトグラフイー用充填剤 | |
JPH0338891B2 (ja) | ||
EP2090361A1 (en) | Improved chromatography resin, and methods and devices related thereto. | |
JP3377516B2 (ja) | 蛋白質と炭素鎖が結合した担体 | |
JP3995935B2 (ja) | クロマトグラフィー用充填剤 | |
CN105921116B (zh) | 具有混合作用模式的阳离子交换固相萃取材料及其制备方法和应用 | |
Fornstedt et al. | Chiral assay of atenolol present in microdialysis and plasma samples of rats using chiral CBH as stationary phase | |
Theodoridis et al. | Modern sample preparation methods in chemical analysis | |
CN113341011A (zh) | 一种用于萃取和富集PAHs的固相萃取材料及其在多环芳烃化合物检测的应用 | |
JP3628495B2 (ja) | カテコールアミンの分析方法及び分析装置 | |
JPH0461809B2 (ja) | ||
JPH0468244B2 (ja) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |