JPH02145600A - ヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法 - Google Patents
ヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法Info
- Publication number
- JPH02145600A JPH02145600A JP29818788A JP29818788A JPH02145600A JP H02145600 A JPH02145600 A JP H02145600A JP 29818788 A JP29818788 A JP 29818788A JP 29818788 A JP29818788 A JP 29818788A JP H02145600 A JPH02145600 A JP H02145600A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hyaluronic acid
- protein
- immobilized
- reaction
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 54
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 54
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 16
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims abstract description 55
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims abstract description 55
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims abstract description 55
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- ZFSLODLOARCGLH-UHFFFAOYSA-N isocyanuric acid Chemical group OC1=NC(O)=NC(O)=N1 ZFSLODLOARCGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 15
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 7
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 abstract description 5
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 abstract 2
- 150000007973 cyanuric acids Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000003009 skin protective agent Substances 0.000 abstract 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 36
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 12
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 8
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 8
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 7
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 7
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 5
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 5
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010016807 Fluid retention Diseases 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 3
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 3
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 NaOH1KOH Substances 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 229940012466 egg shell membrane Drugs 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 2
- 150000002302 glucosamines Chemical class 0.000 description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 2
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 229910014033 C-OH Inorganic materials 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910014570 C—OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical group 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007606 doctor blade method Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000003278 egg shell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229920006158 high molecular weight polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 1
- 230000003458 metachromatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920006267 polyester film Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000011814 protection agent Substances 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000001028 reflection method Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002759 woven fabric Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
- A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/57—Compounds covalently linked to a(n inert) carrier molecule, e.g. conjugates, pro-fragrances
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法に
関し、特に保湿性、粘弾性、生体適合性及び生理活性を
具備するヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法に
関する。
関し、特に保湿性、粘弾性、生体適合性及び生理活性を
具備するヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法に
関する。
本発明のヒアルロン酸固定化蛋白霊、皮膚保護剤、機能
性化粧品等に利用される。
性化粧品等に利用される。
ヒアルロン酸は、D−グルクロン酸とN−アセチル−D
−グルコサミンが交互に浩合した高分子量の多l!類で
あり、動物の組VIA牢に広く分布している。そして動
物の組織中ではこのヒアルロン酸は高い保水性により組
織水の重要な支持物質として作用し、また水和したヒア
ルロン酸は、高い粘弾性により潤滑物質としても作用し
、常に重要な役割をはたしている。
−グルコサミンが交互に浩合した高分子量の多l!類で
あり、動物の組VIA牢に広く分布している。そして動
物の組織中ではこのヒアルロン酸は高い保水性により組
織水の重要な支持物質として作用し、また水和したヒア
ルロン酸は、高い粘弾性により潤滑物質としても作用し
、常に重要な役割をはたしている。
従来、ヒアルロン酸は上述の性質により例えば化粧品の
保湿剤として使用されているが、近年ではヒアルロン酸
に対する研究がさらに進み、その薬理作用が解明される
につれて、眼科用治療薬や関節炎治療薬等としての利用
が図られつつある。
保湿剤として使用されているが、近年ではヒアルロン酸
に対する研究がさらに進み、その薬理作用が解明される
につれて、眼科用治療薬や関節炎治療薬等としての利用
が図られつつある。
さらにこのようなヒアルロン酸の性質を保ちつつ、これ
を化学的に変性してその安定性を向上させ、さらに付加
価値を与える研究も進められている。
を化学的に変性してその安定性を向上させ、さらに付加
価値を与える研究も進められている。
例えば、特開昭62−64802号公報には、ヒアルロ
ン酸中のC0OH基に各種アルコールを反応させてエス
テルとしたものは薬理作用を有し、またフィルム状、糸
状、スポンジ状等に成形して利用し得ることが報告され
ており、特開昭61−138601号公報にはヒアルロ
ン酸と他の水溶性ポリマー(コラーゲン、エラスチン、
アルブミン、グロブリン等の各種の蛋白質を含む。)を
ジビニルスルホンを用いて架橋してヒアルロン酸含有ゲ
ルを生成させ、これを医薬用剤、化粧品用剤などとして
利用し得ることが報告されている。
ン酸中のC0OH基に各種アルコールを反応させてエス
テルとしたものは薬理作用を有し、またフィルム状、糸
状、スポンジ状等に成形して利用し得ることが報告され
ており、特開昭61−138601号公報にはヒアルロ
ン酸と他の水溶性ポリマー(コラーゲン、エラスチン、
アルブミン、グロブリン等の各種の蛋白質を含む。)を
ジビニルスルホンを用いて架橋してヒアルロン酸含有ゲ
ルを生成させ、これを医薬用剤、化粧品用剤などとして
利用し得ることが報告されている。
一方、「バイオテクノロジー事典」 (昭和62年、シ
ーエムシー社刊行)中には、生体の保護材料(例えば人
工皮膚など)として乾燥豚皮、シリコーン−ナイロン−
コラーゲン複合体、コラーゲン不織布、セファデックス
(デキストランをエピクロルヒドリンで架橋させたポリ
マー)などが使用されることが記載されている。
ーエムシー社刊行)中には、生体の保護材料(例えば人
工皮膚など)として乾燥豚皮、シリコーン−ナイロン−
コラーゲン複合体、コラーゲン不織布、セファデックス
(デキストランをエピクロルヒドリンで架橋させたポリ
マー)などが使用されることが記載されている。
しかしながら、これらを用いた皮膚欠損部の保護材料は
水分透過性の調節が難しく、これを実際に使用した場合
、過剰な水分の蒸散により皮膚に脱水症状が生じたり、
また水分の蒸散の不足により保護材料の下部に患部の浸
出液がたまるなど種々の問題を生起することがあった。
水分透過性の調節が難しく、これを実際に使用した場合
、過剰な水分の蒸散により皮膚に脱水症状が生じたり、
また水分の蒸散の不足により保護材料の下部に患部の浸
出液がたまるなど種々の問題を生起することがあった。
このように上記の保護材料は生体との親和性に劣り、新
生した皮膚と一体にならないばかりか、新生した皮膚を
傷めてしまうという問題があった。
生した皮膚と一体にならないばかりか、新生した皮膚を
傷めてしまうという問題があった。
さらに保護材料の形状としては、蛋白質系物質の膜状体
ばかりではなく、繊維を織った布状体としても使用する
と通気性が向上するが、いずれの場合も同様な問題があ
り、またこの蛋白質材料を化粧品に応用する場合も、皮
膚への親和性や保水性に関する問題があり、共にこの−
ような問題のない新規な材料の出現が期待されていた。
ばかりではなく、繊維を織った布状体としても使用する
と通気性が向上するが、いずれの場合も同様な問題があ
り、またこの蛋白質材料を化粧品に応用する場合も、皮
膚への親和性や保水性に関する問題があり、共にこの−
ような問題のない新規な材料の出現が期待されていた。
本発明は上記問題を解決することを目的とし、その構成
は、第1の発明は、蛋白質に、ヒアルロン酸がシアヌー
ル酸類の残基を介して固定化されていることを特徴とし
、第2の発明は、蛋白質にヒアルロン酸を反応させるヒ
アルロン酸固定化蛋白質の゛製造方法において、pH3
以上、温度40℃以下の条件のもとに蛋白質及びヒアル
ロン酸と共にカルボジイミド類または塩化シアヌール或
いは塩化シアヌール誘導体類を共存、反応させることを
特徴とする。
は、第1の発明は、蛋白質に、ヒアルロン酸がシアヌー
ル酸類の残基を介して固定化されていることを特徴とし
、第2の発明は、蛋白質にヒアルロン酸を反応させるヒ
アルロン酸固定化蛋白質の゛製造方法において、pH3
以上、温度40℃以下の条件のもとに蛋白質及びヒアル
ロン酸と共にカルボジイミド類または塩化シアヌール或
いは塩化シアヌール誘導体類を共存、反応させることを
特徴とする。
以下、本発明の詳細な説明する。
まず、本発明に係る蛋白質としてはコラーゲン、水溶性
蛋白質、ゼラチン等の水溶性蛋白質や卵殻膜、羊膜、豚
等の皮膚など皮膜状の蛋白質を用いることができる。ま
たヒアルロン酸は前述した通り動物のm織中に広く分布
し、化学的にはD−グルクロン酸とN−アセチル−D−
グルコサミンが交互に結合した高分子量の多$、1)1
)1(である。その分子量は通常50万以上であるが、
本発明の製造方法による製品の保水性を高めるためには
分子量約100万以上のものが好ましい。
蛋白質、ゼラチン等の水溶性蛋白質や卵殻膜、羊膜、豚
等の皮膚など皮膜状の蛋白質を用いることができる。ま
たヒアルロン酸は前述した通り動物のm織中に広く分布
し、化学的にはD−グルクロン酸とN−アセチル−D−
グルコサミンが交互に結合した高分子量の多$、1)1
)1(である。その分子量は通常50万以上であるが、
本発明の製造方法による製品の保水性を高めるためには
分子量約100万以上のものが好ましい。
本発明はこれら蛋白質とヒアルロン酸とを反応させるに
際して、この両者と共に架橋剤としてのカルボジイミド
類または塩化シアヌール類を共存、反応(固定化化反応
)させることを特徴とするものである。このカルボジイ
ミド類の好ましい代表例としては 水溶性の1−エチル
−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド
塩酸塩や1−シクロへキシル−3−(2−モルホリニル
−4−エチル)−カルボジイミド−p−トルエンスルホ
ナート等がある。また塩化シアヌール類としては塩化シ
アヌール、及び塩化シアヌールのc7!基をNHCH,
C0OH基、OCHz COOH基、NH2基などで置
換した化合物がある。
際して、この両者と共に架橋剤としてのカルボジイミド
類または塩化シアヌール類を共存、反応(固定化化反応
)させることを特徴とするものである。このカルボジイ
ミド類の好ましい代表例としては 水溶性の1−エチル
−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド
塩酸塩や1−シクロへキシル−3−(2−モルホリニル
−4−エチル)−カルボジイミド−p−トルエンスルホ
ナート等がある。また塩化シアヌール類としては塩化シ
アヌール、及び塩化シアヌールのc7!基をNHCH,
C0OH基、OCHz COOH基、NH2基などで置
換した化合物がある。
蛋白質、ヒアルロン酸及び架橋剤との固定化反応はpH
3以上、温度40℃以下の条件下で行われる。実際には
ヒアルロン酸水溶液と蛍白質の水溶液或いは懸濁液の混
合液中にカルボジイミド類または塩化シアヌール類を添
加して反応させたり(1段法)、まずヒアルロン酸水溶
液あるいは蛋白質の水溶液或いは懸濁液の一方に架橋剤
を添加して反応させた後に他方を添加し、反応させる(
2段法)ことができる。
3以上、温度40℃以下の条件下で行われる。実際には
ヒアルロン酸水溶液と蛍白質の水溶液或いは懸濁液の混
合液中にカルボジイミド類または塩化シアヌール類を添
加して反応させたり(1段法)、まずヒアルロン酸水溶
液あるいは蛋白質の水溶液或いは懸濁液の一方に架橋剤
を添加して反応させた後に他方を添加し、反応させる(
2段法)ことができる。
この固定化反応に使用されるヒアルロン酸水溶液の濃度
は好ましくは2重量%以下である。2重量%以上の濃度
であると水溶液の粘度が高すぎ、反応液系の撹拌効率、
反応の進行及び反応の均一性などが低下する。また蛋白
質の水溶液或いは懸濁液の濃度は好ましくはおよそ2重
量%以下である。濃度が2重量%以上になると、反応液
系の粘度が高すぎ、反応液系の撹拌効率、反応の進行及
び反応の均一性などが低下する。さらに蛋白質が水不溶
性の場合、これを水に浸漬して水溶液や懸濁液の場合と
同様に反応を進めることができる。
は好ましくは2重量%以下である。2重量%以上の濃度
であると水溶液の粘度が高すぎ、反応液系の撹拌効率、
反応の進行及び反応の均一性などが低下する。また蛋白
質の水溶液或いは懸濁液の濃度は好ましくはおよそ2重
量%以下である。濃度が2重量%以上になると、反応液
系の粘度が高すぎ、反応液系の撹拌効率、反応の進行及
び反応の均一性などが低下する。さらに蛋白質が水不溶
性の場合、これを水に浸漬して水溶液や懸濁液の場合と
同様に反応を進めることができる。
この場合には反応率を高めるため、あらかじめ蛍白質を
ドデシル硫酸ナトリウムなどのような膨潤剤で膨潤させ
た後、これを固定化反応に付することが好ましい。
ドデシル硫酸ナトリウムなどのような膨潤剤で膨潤させ
た後、これを固定化反応に付することが好ましい。
蛍白質へのヒアルロン酸の固定化反応は固定化剤として
カルボジイミド類を用いる場合、蛋白質のNH,iに対
してヒアルロン酸中のC0OH基をカルボジイミド類固
定化剤を介してカップリングしアミド結合することに基
づいている。固定化剤として塩化シアヌールや塩化シア
ヌール誘導体を用いる場合、蛋白質のN Hを基、OH
基、SH基等の置換基に対してヒアルロン酸中のOH基
を塩化シアヌールや塩化シアヌール誘導体の残基を介し
て結合することに基づいている。そしてこれらの固定化
反応に適した条件は、pH3以上、温度40℃以下であ
る。架橋剤として塩化シアヌール類を用いた場合には、
反応の進行と共に脱塩酸反応が生じ反応系のpHが低下
するのでNaOH1KOH,Na、Co、等のアルカリ
剤でpH3以上になるよう調整しながら反応を進めるこ
とが望ましい。また大量のバッファー液中で反応させる
こともできる。他方、反応温度が40℃以上になると、
ヒアルロン酸の分解に伴う分子量の低下が起こるので好
ましくない。以上の条件以外では反応効率が低く、実質
的に固定化反応が進行しない。
カルボジイミド類を用いる場合、蛋白質のNH,iに対
してヒアルロン酸中のC0OH基をカルボジイミド類固
定化剤を介してカップリングしアミド結合することに基
づいている。固定化剤として塩化シアヌールや塩化シア
ヌール誘導体を用いる場合、蛋白質のN Hを基、OH
基、SH基等の置換基に対してヒアルロン酸中のOH基
を塩化シアヌールや塩化シアヌール誘導体の残基を介し
て結合することに基づいている。そしてこれらの固定化
反応に適した条件は、pH3以上、温度40℃以下であ
る。架橋剤として塩化シアヌール類を用いた場合には、
反応の進行と共に脱塩酸反応が生じ反応系のpHが低下
するのでNaOH1KOH,Na、Co、等のアルカリ
剤でpH3以上になるよう調整しながら反応を進めるこ
とが望ましい。また大量のバッファー液中で反応させる
こともできる。他方、反応温度が40℃以上になると、
ヒアルロン酸の分解に伴う分子量の低下が起こるので好
ましくない。以上の条件以外では反応効率が低く、実質
的に固定化反応が進行しない。
本発明の製造方法を実施する場合、塩化シアヌール類は
水に対する溶解度が小さく、かつ加水分解され易いので
、反応を均一にかつ効率的に進行させるために反応液中
にジオキサン、テトラヒドロフラン、アセトン、ジメチ
ルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の反応に対し
不活性な親木性有機溶剤を、共存させることが望ましい
。
水に対する溶解度が小さく、かつ加水分解され易いので
、反応を均一にかつ効率的に進行させるために反応液中
にジオキサン、テトラヒドロフラン、アセトン、ジメチ
ルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の反応に対し
不活性な親木性有機溶剤を、共存させることが望ましい
。
本発明により製造されたヒアルロン酸固定化蛋白質は次
の方法により精製することができる。すなわち、蛋白質
として水不溶性蛋白質を用いた場合には、反応液を塩酸
、硝酸、硫酸等の鉱酸で中和した後純水で洗浄し、その
まま湿潤状態で保存するか、または凍結状態、真空乾燥
等により乾燥した精製物として保存することができる。
の方法により精製することができる。すなわち、蛋白質
として水不溶性蛋白質を用いた場合には、反応液を塩酸
、硝酸、硫酸等の鉱酸で中和した後純水で洗浄し、その
まま湿潤状態で保存するか、または凍結状態、真空乾燥
等により乾燥した精製物として保存することができる。
この過程において膜状物、糸状体、粒状体など適宜成形
した状態のものとすることができる。また蛋白質として
水溶性蛋白質を用いた場合には、前記と同様に中和した
後、反応液を適当な方法で製膜、紡糸、微粒子化し、水
洗してヒアルロン酸固定化蛋白質の精製物とすることが
できる。例えば、上記反応液をドクターブレード法等の
方法で製膜後、メタノール等で不溶化させて膜状のヒア
ルロン酸固定化蛋白質を製造することができ、また例え
ば上記反応液をメタノール、アセトン等の不溶化溶媒中
で紡糸して繊維状のヒアルロン酸固定化蛋白質を製造す
ることができ、さらに例えば反応液を撹拌したメタノー
ル、アセトン等の不溶化溶媒中に添加して粒子状のヒア
ルロン酸固定化蛋白質を製造することができる。
した状態のものとすることができる。また蛋白質として
水溶性蛋白質を用いた場合には、前記と同様に中和した
後、反応液を適当な方法で製膜、紡糸、微粒子化し、水
洗してヒアルロン酸固定化蛋白質の精製物とすることが
できる。例えば、上記反応液をドクターブレード法等の
方法で製膜後、メタノール等で不溶化させて膜状のヒア
ルロン酸固定化蛋白質を製造することができ、また例え
ば上記反応液をメタノール、アセトン等の不溶化溶媒中
で紡糸して繊維状のヒアルロン酸固定化蛋白質を製造す
ることができ、さらに例えば反応液を撹拌したメタノー
ル、アセトン等の不溶化溶媒中に添加して粒子状のヒア
ルロン酸固定化蛋白質を製造することができる。
このようにして得られたヒアルロン酸固定化蛋白質は水
で湿潤させ、トルイジンブルーで染色するとメタクロマ
ジー現象で赤紫、ないし青色に変色することによりヒア
ルロン酸の蛋白質への固定化が確認される。また、臭化
カリウムを用いた赤外線吸収スペクトルの測定では、蛋
白質のN−H基及びヒアルロン酸のC−OH基に基づく
吸収(1520c m −’及び1060 c m−〇
が変化していることによっても確認される。さらに固定
化されたヒアルロン酸量は臭化カリウムを用いたFT−
I Rのチャートで検量線から定量することができる。
で湿潤させ、トルイジンブルーで染色するとメタクロマ
ジー現象で赤紫、ないし青色に変色することによりヒア
ルロン酸の蛋白質への固定化が確認される。また、臭化
カリウムを用いた赤外線吸収スペクトルの測定では、蛋
白質のN−H基及びヒアルロン酸のC−OH基に基づく
吸収(1520c m −’及び1060 c m−〇
が変化していることによっても確認される。さらに固定
化されたヒアルロン酸量は臭化カリウムを用いたFT−
I Rのチャートで検量線から定量することができる。
〔「機器分析の手引き」 (小川雅彌監修、1979年
、化学同人社発行)第10真に記載の方法による〕本発
明によって製造されたヒアルロン酸固定化蛍白質は保水
性及び粘弾性に優れている上、ヒアルロン酸及び蛋白質
の性質上、生体適合性にも優れている。
、化学同人社発行)第10真に記載の方法による〕本発
明によって製造されたヒアルロン酸固定化蛍白質は保水
性及び粘弾性に優れている上、ヒアルロン酸及び蛋白質
の性質上、生体適合性にも優れている。
本発明は、水溶性カルボジイミド類のようなアミド化試
薬や塩化シアヌール類等の固定化剤を用いることにより
ヒアルロン酸が蛋白質にきわめて強固に固定化されるこ
とを見出して完成したものである。固定化剤としてカル
ボジイミド類を用いた場合にはヒアルロン酸はアミド結
合によって蛋白質に強固に結合し、固定化剤として塩化
シアヌール誘導体を用いた場合は、ヒアルロン酸はシア
ヌール酸類の残基を介して強固に固定化される。
薬や塩化シアヌール類等の固定化剤を用いることにより
ヒアルロン酸が蛋白質にきわめて強固に固定化されるこ
とを見出して完成したものである。固定化剤としてカル
ボジイミド類を用いた場合にはヒアルロン酸はアミド結
合によって蛋白質に強固に結合し、固定化剤として塩化
シアヌール誘導体を用いた場合は、ヒアルロン酸はシア
ヌール酸類の残基を介して強固に固定化される。
以下、本発明をその実施例に基づいて詳細かつ具体的に
説明する。なお、実施例において使用されたヒアルロン
酸は醗酵法により製造されたもので、分子量は約150
万である。また濃度比における「%」は「重量%」を示
す。
説明する。なお、実施例において使用されたヒアルロン
酸は醗酵法により製造されたもので、分子量は約150
万である。また濃度比における「%」は「重量%」を示
す。
1)fi上(ヒアルロン酸固定化卵殻膜の製造)0.2
%ヒアルロン酸水溶液I Qmj!に、0.2モルの1
−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボ
ジイミド塩酸塩水溶液10mβ(pH4)を加え、液温
40℃で10分間処理した後、鶏卵から取り出した卵殻
膜100mgを加え、液温40℃で10分間反応させた
。
%ヒアルロン酸水溶液I Qmj!に、0.2モルの1
−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボ
ジイミド塩酸塩水溶液10mβ(pH4)を加え、液温
40℃で10分間処理した後、鶏卵から取り出した卵殻
膜100mgを加え、液温40℃で10分間反応させた
。
反応後、試料をよく水洗し、トルイジンブルーで染色し
、顕微鏡でよく観察したところ、斑点状にヒアルロン酸
が固定していることが確認された。
、顕微鏡でよく観察したところ、斑点状にヒアルロン酸
が固定していることが確認された。
試料の表面をFT−IR反射法により測定し、紐帯白質
で作成した検量線を用いてヒアルロン酸の含有量を見積
もったところ、約19%であった。
で作成した検量線を用いてヒアルロン酸の含有量を見積
もったところ、約19%であった。
尖立五l<ヒアルロン酸固定化絹蛋白質膜の製造)精選
した家蚕面を9モルの臭化リチウムに溶解させ、蒸留水
で透析して得られた液状絹蛋白質をポリエステルフィル
ム上に流延し、紐帯白質膜を成形させた。この膜を80
%メタノールで処理して不溶化した後、臭化リチウムの
希薄溶液に浸けた。
した家蚕面を9モルの臭化リチウムに溶解させ、蒸留水
で透析して得られた液状絹蛋白質をポリエステルフィル
ム上に流延し、紐帯白質膜を成形させた。この膜を80
%メタノールで処理して不溶化した後、臭化リチウムの
希薄溶液に浸けた。
0.25%ヒアルロン酸溶液39mj2に0.02モル
の塩化シアヌール/ジオキサン溶液15mj!を加え、
水酸化ナトリウムでpH10に調整した後、紐帯白質膜
を入れ液温37℃で10時間反応させた。
の塩化シアヌール/ジオキサン溶液15mj!を加え、
水酸化ナトリウムでpH10に調整した後、紐帯白質膜
を入れ液温37℃で10時間反応させた。
反応後膜を水洗し、トルイジンブルーで染色したところ
、斑点状に赤紫色に染色し、紐帯白質膜には斑点状にヒ
アルロン酸が固定化されていることが認められた。
、斑点状に赤紫色に染色し、紐帯白質膜には斑点状にヒ
アルロン酸が固定化されていることが認められた。
災施拠主(ヒアルロン酸固定化絹蛋白質微粒子の製造)
家蚕面0.5gを臭化リチウムに溶解させ、透析中に沈
澱してきた紐帯白質を含む懸濁液50m1を、0.02
モルの塩化シアヌール/ジオキサン溶?&25m*を用
いて0.25%のヒアルロン酸溶液100mffと液温
O℃で反応させたところ、反応中に紐帯白質が溶解し均
質な溶液となった。12時間反応させた後反応液を激し
く撹拌したアセトン中に入れると、微粒子状のヒアルロ
ン酸固定化絹蛋白質が得られた。このような微粒子状の
ヒアルロン酸固定化蛋白質は化粧品基材として優れた皮
膚親和性を有すると共に、無水の状態で取扱うことがで
き、流通上にも利点を有する。
澱してきた紐帯白質を含む懸濁液50m1を、0.02
モルの塩化シアヌール/ジオキサン溶?&25m*を用
いて0.25%のヒアルロン酸溶液100mffと液温
O℃で反応させたところ、反応中に紐帯白質が溶解し均
質な溶液となった。12時間反応させた後反応液を激し
く撹拌したアセトン中に入れると、微粒子状のヒアルロ
ン酸固定化絹蛋白質が得られた。このような微粒子状の
ヒアルロン酸固定化蛋白質は化粧品基材として優れた皮
膚親和性を有すると共に、無水の状態で取扱うことがで
き、流通上にも利点を有する。
なお、この条件ではヒアルロン酸並びに紐帯白質は各々
単独ではアセトンに溶解して沈澱しない。
単独ではアセトンに溶解して沈澱しない。
この試料についてFT−IHにより測定すると、微粒子
中のヒアルロン酸含有量はおよそ29%であった・ 大1)土(ヒアルロン酸固定化絹蛋白質膜の製造)0.
5%のヒアルロン酸水溶液30m1に0.02モルの塩
化シアヌール/アセトン溶液15mj2を加え、水酸化
ナトリウムでpH10に調整した後、実施例2における
場合と同様にして得られた液状の紐帯白質30mj!を
加え、緩やかに撹拌しながら温度θ℃で16時間反応さ
せた。
中のヒアルロン酸含有量はおよそ29%であった・ 大1)土(ヒアルロン酸固定化絹蛋白質膜の製造)0.
5%のヒアルロン酸水溶液30m1に0.02モルの塩
化シアヌール/アセトン溶液15mj2を加え、水酸化
ナトリウムでpH10に調整した後、実施例2における
場合と同様にして得られた液状の紐帯白質30mj!を
加え、緩やかに撹拌しながら温度θ℃で16時間反応さ
せた。
反応後、得られた粘稠な溶液をポリプロピレンフィルム
上に流延し、ヒアルロン酸固定化絹蛋白質の膜状物を形
成した。この水溶性膜を80%メタノールに入れて処理
し水不溶化させた。水不溶化処理した膜をトルイジンブ
ルーで染色したところ、赤紫色に染色し、綱膜にヒアル
ロン酸が固定化されていることが認められた。
上に流延し、ヒアルロン酸固定化絹蛋白質の膜状物を形
成した。この水溶性膜を80%メタノールに入れて処理
し水不溶化させた。水不溶化処理した膜をトルイジンブ
ルーで染色したところ、赤紫色に染色し、綱膜にヒアル
ロン酸が固定化されていることが認められた。
尖マ拠玉(ヒアルロン酸固定化絹蛋白繊維の製造)実施
例4と同様にして得られたヒアルロン酸固定化絹蛋白質
の粘稠な溶液を注射器によってアセトン中に押し出した
ところ、糸状の成形物が得られた。これをトルイジンブ
ルーで染色したところ、赤紫色に染色し、絹繊維にヒア
ルロン酸が固定化されていることが認められた。
例4と同様にして得られたヒアルロン酸固定化絹蛋白質
の粘稠な溶液を注射器によってアセトン中に押し出した
ところ、糸状の成形物が得られた。これをトルイジンブ
ルーで染色したところ、赤紫色に染色し、絹繊維にヒア
ルロン酸が固定化されていることが認められた。
この糸状物は更に延伸し、撚糸し、織布や不織布とする
ことができ、皮膚被覆材としての用途が拡大した。
ことができ、皮膚被覆材としての用途が拡大した。
大施炭工(ヒアルロン酸固定化コラーゲン繊維の製造)
0.5%のヒアルロン酸水溶液30mnに0.02モル
の塩化シアヌール/アセトン溶液15m1を加え、水酸
化カリウムでpH10に調整した後、0.5%コラーゲ
ン水溶液20 m lを加え、温度10℃で緩やかに撹
拌しながら15時間反応させた。
の塩化シアヌール/アセトン溶液15m1を加え、水酸
化カリウムでpH10に調整した後、0.5%コラーゲ
ン水溶液20 m lを加え、温度10℃で緩やかに撹
拌しながら15時間反応させた。
反応液に食塩0.5gを添加して均一にし、これを注射
器によってアセトン中に押し出したところ、糸状の成形
物が得られた。これをトルイジンブルーで染色したとこ
ろ、赤紫色に染色し、コラーゲン繊維にヒアルロン酸が
固定化されていることが認められた。
器によってアセトン中に押し出したところ、糸状の成形
物が得られた。これをトルイジンブルーで染色したとこ
ろ、赤紫色に染色し、コラーゲン繊維にヒアルロン酸が
固定化されていることが認められた。
a(ヒアルロン酸固定化羊膜の製造)
0.2%のヒアルロン酸水溶液30ml!に0.02モ
ルの塩化シアヌール/ジオキサン溶液15mI!を加え
、水酸化ナトリウムでpH10に調整した後、30mg
の羊膜を入れ、温度37℃で10時間反応させた。
ルの塩化シアヌール/ジオキサン溶液15mI!を加え
、水酸化ナトリウムでpH10に調整した後、30mg
の羊膜を入れ、温度37℃で10時間反応させた。
反応後羊膜を水洗し、これをトルイジンブルーで染色し
たところ、斑点状に赤紫色に染色し羊膜にヒアルロン酸
が固定化されていることが認められた。
たところ、斑点状に赤紫色に染色し羊膜にヒアルロン酸
が固定化されていることが認められた。
ILLL(ヒアルロン酸固定化ゼラチンの製造)ゼラチ
ン30 m gを熱水39mlに溶解した後室>=に冷
却し、塩化シアヌールの0.25%ヒアルロン酸溶液1
5m1を加え、反応液を温度O℃に冷却し、かつ水酸化
ナトリウムでpH10に調整し、30分間反応させた。
ン30 m gを熱水39mlに溶解した後室>=に冷
却し、塩化シアヌールの0.25%ヒアルロン酸溶液1
5m1を加え、反応液を温度O℃に冷却し、かつ水酸化
ナトリウムでpH10に調整し、30分間反応させた。
反応が進行するに伴い、反応液中にゲル状物が生成し沈
澱した。このゲル状物をアセトン中に入れて洗浄すると
微粒子状の反応物が得られた。これをトルイジンブルー
で染色したところ赤紫色に略均−に染色し、ゼラチンに
ヒアルロン酸が固定化されていることが認められた。
澱した。このゲル状物をアセトン中に入れて洗浄すると
微粒子状の反応物が得られた。これをトルイジンブルー
で染色したところ赤紫色に略均−に染色し、ゼラチンに
ヒアルロン酸が固定化されていることが認められた。
本発明によれば、保湿性、生体適合性に優れたヒアルロ
ン酸をきわめて強固に固定化した蛋白質を膜状体、繊維
状体あるいは粒状体として容易に製造することができ、
そのために優れた医療用材料或いは優れた化粧品用剤な
どの素材を容易にしかも安価に提供することができるの
で、本発明は当業界においてきわめて優れた発明である
。
ン酸をきわめて強固に固定化した蛋白質を膜状体、繊維
状体あるいは粒状体として容易に製造することができ、
そのために優れた医療用材料或いは優れた化粧品用剤な
どの素材を容易にしかも安価に提供することができるの
で、本発明は当業界においてきわめて優れた発明である
。
特許出願人 電気化学工業株式会社
代理人 弁理士 鈴 木 定 子
Claims (2)
- (1)蛋白質に、ヒアルロン酸がシアヌール酸類の残基
を介して固定化されていることを特徴とするヒアルロン
酸固定化蛋白質。 - (2)蛋白質にヒアルロン酸を反応させるヒアルロン酸
固定化蛋白質の製造方法において、pH3以上、温度4
0℃以下の条件のもとに蛋白質及びヒアルロン酸と共に
カルボジイミド類または塩化シアヌール或いは塩化シア
ヌール誘導体類を共存、反応させることを特徴とするヒ
アルロン酸固定化蛋白質の製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63298187A JPH0662678B2 (ja) | 1988-11-28 | 1988-11-28 | ヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63298187A JPH0662678B2 (ja) | 1988-11-28 | 1988-11-28 | ヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH02145600A true JPH02145600A (ja) | 1990-06-05 |
JPH0662678B2 JPH0662678B2 (ja) | 1994-08-17 |
Family
ID=17856343
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP63298187A Expired - Fee Related JPH0662678B2 (ja) | 1988-11-28 | 1988-11-28 | ヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0662678B2 (ja) |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5326356A (en) * | 1990-06-01 | 1994-07-05 | Fidia S.P.A. | Biocompatible perforated membranes, processes for their preparation, their use as a support in the in vitro growth of epithelial cells, the artificial skin obtained in this manner, and its use in skin grafts |
WO1998054224A1 (fr) * | 1997-05-28 | 1998-12-03 | Tapic International Co., Ltd. | Gel au collagene |
JP2010511426A (ja) * | 2006-12-04 | 2010-04-15 | アボット、カーディオバスキュラー、システムズ、インコーポレーテッド | 絹タンパク質を使用する組織の治療方法及び組成物 |
US8609126B2 (en) | 2005-04-19 | 2013-12-17 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Methods and compositions for treating post-myocardial infarction damage |
US8637069B2 (en) | 2002-06-28 | 2014-01-28 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Device and method for combining a treatment agent and a gel |
US8795652B1 (en) | 2003-04-15 | 2014-08-05 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions to treat myocardial conditions |
US8821473B2 (en) | 2003-04-15 | 2014-09-02 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions to treat myocardial conditions |
US9005672B2 (en) | 2006-11-17 | 2015-04-14 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods of modifying myocardial infarction expansion |
US9242005B1 (en) | 2006-08-21 | 2016-01-26 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Pro-healing agent formulation compositions, methods and treatments |
US9539410B2 (en) | 2005-04-19 | 2017-01-10 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions for treating post-cardial infarction damage |
US9687630B2 (en) | 2005-04-19 | 2017-06-27 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions for treating post-cardial infarction damage |
CN109912822A (zh) * | 2019-03-01 | 2019-06-21 | 南通大学 | 一种自支撑自修复主客体薄膜的制备方法 |
WO2023029190A1 (zh) * | 2021-09-05 | 2023-03-09 | 江苏中农科食品工程股份有限公司 | 一种以透明质酸为载体的植物硒蛋白产品制备方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4280954A (en) * | 1975-07-15 | 1981-07-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Crosslinked collagen-mucopolysaccharide composite materials |
JPS576362A (en) * | 1980-06-12 | 1982-01-13 | Unitika Ltd | Production of immune adsorptive body |
JPS61138601A (ja) * | 1984-12-06 | 1986-06-26 | バイオマトリツクス,インコ−ポレイテツド | 架橋ヒアルロン酸ゲル組成物 |
JPS6259124A (ja) * | 1985-05-21 | 1987-03-14 | Mitsubishi Motors Corp | 車両用動力伝達装置 |
-
1988
- 1988-11-28 JP JP63298187A patent/JPH0662678B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4280954A (en) * | 1975-07-15 | 1981-07-28 | Massachusetts Institute Of Technology | Crosslinked collagen-mucopolysaccharide composite materials |
JPS576362A (en) * | 1980-06-12 | 1982-01-13 | Unitika Ltd | Production of immune adsorptive body |
JPS61138601A (ja) * | 1984-12-06 | 1986-06-26 | バイオマトリツクス,インコ−ポレイテツド | 架橋ヒアルロン酸ゲル組成物 |
JPS6259124A (ja) * | 1985-05-21 | 1987-03-14 | Mitsubishi Motors Corp | 車両用動力伝達装置 |
Cited By (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5326356A (en) * | 1990-06-01 | 1994-07-05 | Fidia S.P.A. | Biocompatible perforated membranes, processes for their preparation, their use as a support in the in vitro growth of epithelial cells, the artificial skin obtained in this manner, and its use in skin grafts |
WO1998054224A1 (fr) * | 1997-05-28 | 1998-12-03 | Tapic International Co., Ltd. | Gel au collagene |
US6335007B1 (en) | 1997-05-28 | 2002-01-01 | Yasuhiko Shimizu | Collagen gel |
US8637069B2 (en) | 2002-06-28 | 2014-01-28 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Device and method for combining a treatment agent and a gel |
US8715265B2 (en) | 2002-06-28 | 2014-05-06 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Device and method for combining a treatment agent and a gel |
US8795652B1 (en) | 2003-04-15 | 2014-08-05 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions to treat myocardial conditions |
US8821473B2 (en) | 2003-04-15 | 2014-09-02 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions to treat myocardial conditions |
US8609126B2 (en) | 2005-04-19 | 2013-12-17 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Methods and compositions for treating post-myocardial infarction damage |
US9539410B2 (en) | 2005-04-19 | 2017-01-10 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions for treating post-cardial infarction damage |
US9687630B2 (en) | 2005-04-19 | 2017-06-27 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions for treating post-cardial infarction damage |
US9242005B1 (en) | 2006-08-21 | 2016-01-26 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Pro-healing agent formulation compositions, methods and treatments |
US9005672B2 (en) | 2006-11-17 | 2015-04-14 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods of modifying myocardial infarction expansion |
US9775930B2 (en) | 2006-11-17 | 2017-10-03 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Composition for modifying myocardial infarction expansion |
JP2010511426A (ja) * | 2006-12-04 | 2010-04-15 | アボット、カーディオバスキュラー、システムズ、インコーポレーテッド | 絹タンパク質を使用する組織の治療方法及び組成物 |
CN109912822A (zh) * | 2019-03-01 | 2019-06-21 | 南通大学 | 一种自支撑自修复主客体薄膜的制备方法 |
CN109912822B (zh) * | 2019-03-01 | 2024-05-14 | 南通大学 | 一种自支撑自修复主客体薄膜的制备方法 |
WO2023029190A1 (zh) * | 2021-09-05 | 2023-03-09 | 江苏中农科食品工程股份有限公司 | 一种以透明质酸为载体的植物硒蛋白产品制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH0662678B2 (ja) | 1994-08-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4214051B2 (ja) | エラスチン架橋体およびその製造方法 | |
RU2230752C2 (ru) | Поперечносшитые гиалуроновые кислоты и их применение в медицине | |
JP3425147B2 (ja) | ポリアニオン性多糖の非水溶性誘導体 | |
US5527893A (en) | Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides | |
JP3399526B2 (ja) | ヒアルロン酸の非水溶性誘導体 | |
US10004825B2 (en) | Collagen materials and methods for obtaining same | |
JPH02145600A (ja) | ヒアルロン酸固定化蛋白質及びその製造方法 | |
JPH0430927B2 (ja) | ||
CN109821061A (zh) | 一种以胶原纺丝和透明质酸为基材的粘附性仿生凝胶 | |
JP2008504100A (ja) | ヒアルロン酸とアルファ,ベータ−ポリアスパラギン酸ヒドラジドとのヒドロゲル及びその生物医学的及び医薬的使用 | |
JPH07102002A (ja) | 架橋ヒアルロン酸及びこれらの複合材料 | |
JP3755640B2 (ja) | 創傷被覆材 | |
JPH11228837A (ja) | 絹蛋白質/コラーゲン複合体およびその製造方法 | |
Sionkowska | 11 Natural Polymers as | |
KR101282394B1 (ko) | 콜라겐에 대한 소수성 물질의 공유 그래프팅법 | |
Sionkowska | Natural Polymers as Components of Blends for Biomedical Applications | |
Sionkowska | 11 NC atural Polymers as omponents of Blends | |
Yavuzsoy | Preservation of the collagen structure by coaxial electrospinning method | |
JPH0567300B2 (ja) | ||
CN115337455A (zh) | 一种用于皮肤及粘膜损伤修复的生物陶瓷材料及其制备方法 | |
JPS6328891B2 (ja) | ||
MXPA01004712A (en) | Cross-linked hyaluronic acids and medical uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |