JPH02145196A - マグネシウムの定量方法 - Google Patents
マグネシウムの定量方法Info
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- JPH02145196A JPH02145196A JP63299551A JP29955188A JPH02145196A JP H02145196 A JPH02145196 A JP H02145196A JP 63299551 A JP63299551 A JP 63299551A JP 29955188 A JP29955188 A JP 29955188A JP H02145196 A JPH02145196 A JP H02145196A
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- G—PHYSICS
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
(産業上の利用分野)
本発明は、微量のマグネシウムの定量方法に関するもの
である。
である。
更に詳細には、本発明は、ヒト体液中のマグネシウムの
定量方法に関するものである。
定量方法に関するものである。
一般に、マグネシウムは、動植物の細胞内に広く存在し
、成長と生命維持に不可欠なイオンである。
、成長と生命維持に不可欠なイオンである。
そして、生体内のマグネシウムはカルシウムと拮抗的に
変動し、中枢神経系や心臓の機能不全時にあるいは腎不
全、急性膵炎時などにその変動が観察されることからマ
グネシウムの定量は重要な検査項目の一つになりつつあ
る。
変動し、中枢神経系や心臓の機能不全時にあるいは腎不
全、急性膵炎時などにその変動が観察されることからマ
グネシウムの定量は重要な検査項目の一つになりつつあ
る。
本発明のマグネシウムの定量方法によれば、体液中のマ
グネシウムが短時間に正確に定量できるので、臨床検査
に大いに貢献するものである。
グネシウムが短時間に正確に定量できるので、臨床検査
に大いに貢献するものである。
(従来技術及び問題点)
従来、マグネシウムの測定方法としては、キシリジルブ
ルーを用いてキレートを生成させる比色法や、原子吸光
法などが知られているが、これらの方法のうち、前者は
特異性の面で問題を有し、後者については、特殊な装置
を必要とするという欠点を持っていた。
ルーを用いてキレートを生成させる比色法や、原子吸光
法などが知られているが、これらの方法のうち、前者は
特異性の面で問題を有し、後者については、特殊な装置
を必要とするという欠点を持っていた。
(問題点を解決するための手段)
本発明者らは、体液中のマグネシウムをすみやかに、か
つ、正確に定量するために、マグネシウムと各種酵素活
性との関係を詳細に検討した結果、イソクエン酸脱水素
酵素がその酵素活性を発現するために、マグネシウムイ
オンあるいはマンガンイオンを要求し、マグネシウムイ
オン濃度の増加に応じてイソクエン酸脱水素酵素の活性
が高まることを知り、本発明を完成するに至った。
つ、正確に定量するために、マグネシウムと各種酵素活
性との関係を詳細に検討した結果、イソクエン酸脱水素
酵素がその酵素活性を発現するために、マグネシウムイ
オンあるいはマンガンイオンを要求し、マグネシウムイ
オン濃度の増加に応じてイソクエン酸脱水素酵素の活性
が高まることを知り、本発明を完成するに至った。
本発明は、マグネシウムの定量を行うに際し、イソクエ
ン酸脱水素酵素の反応によってマグネシウム量を測定す
ることを特徴とするマグネシウムの定量方法である。
ン酸脱水素酵素の反応によってマグネシウム量を測定す
ることを特徴とするマグネシウムの定量方法である。
即ち、本発明はイソクエン酸脱水素酵素がマグネシウム
イオンの増加に応じて、活性が定量的に高まることを利
用して、マグネシウムの濃度を測定するものである。
イオンの増加に応じて、活性が定量的に高まることを利
用して、マグネシウムの濃度を測定するものである。
具体的には、NAD(P)”、イソクエン酸、イソクエ
ン酸脱水素酵素を適当な緩衝液に溶解したものに、検体
を加え、NAD (P)Hの生成による3400重にお
ける吸光度の上昇度をレートアッセイするか、あるいは
反応を一定時間後に反応停止剤で停止した後に測定する
ものである。
ン酸脱水素酵素を適当な緩衝液に溶解したものに、検体
を加え、NAD (P)Hの生成による3400重にお
ける吸光度の上昇度をレートアッセイするか、あるいは
反応を一定時間後に反応停止剤で停止した後に測定する
ものである。
反応停止剤としてはマグネシウムイオンのキレート剤お
よび/またはアデノシントリリン酸(ATP)が用いら
れる。
よび/またはアデノシントリリン酸(ATP)が用いら
れる。
また、イソクエン酸脱水素酵素はマンガンイオンによっ
ても活性化されるが、これはマグネシウムイオンをトラ
ップせず、マンガンイオンを選択的にトラップするキレ
ート剤、例えば、GEDTAを反応溶媒に共存させるこ
とによりマンガンイオンの影響を回避することができる
。
ても活性化されるが、これはマグネシウムイオンをトラ
ップせず、マンガンイオンを選択的にトラップするキレ
ート剤、例えば、GEDTAを反応溶媒に共存させるこ
とによりマンガンイオンの影響を回避することができる
。
本発明においては、マグネシウムイオンの量に応じてイ
ソクエン酸脱水素酵素の活性が高まる性質を利用し、特
異的に短時間に感度よくマグネシウムを定量するもので
ある。
ソクエン酸脱水素酵素の活性が高まる性質を利用し、特
異的に短時間に感度よくマグネシウムを定量するもので
ある。
本発明の方法によれば、微量の検体を用いてマグネシウ
ムを正確に定量することができる。
ムを正確に定量することができる。
次に本発明の実施例を示す。
実施例I
MgCJ2□6H2042,3mgを精製水10m12
に溶解しMglとして250mg/d12の標準液を調
整した。
に溶解しMglとして250mg/d12の標準液を調
整した。
さらに、この標準液を稀釈してO15,10,15,2
0、25,30,35,40,45,50mg/daの
溶液を調整した。
0、25,30,35,40,45,50mg/daの
溶液を調整した。
これらの溶液50μ2を各々、下記反応溶液’Janに
加え、25℃で340ru++の吸光度変化をレートア
ッセイにより測定した。
加え、25℃で340ru++の吸光度変化をレートア
ッセイにより測定した。
反応溶液組成
83mM Tris−HCQpH8,550mM
GEDTA 1.67mM 0L−isocitratel 、
OmM NADP” 0.25u/mQicDH(NADP)結果は第1図に
示されるようにマグネシウムが測定できた。
GEDTA 1.67mM 0L−isocitratel 、
OmM NADP” 0.25u/mQicDH(NADP)結果は第1図に
示されるようにマグネシウムが測定できた。
実施例2
MgC12,6H2042,3Bを精製水に溶解し M
g 2 +とじて、250mg/d12の標準液を調
整した。
g 2 +とじて、250mg/d12の標準液を調
整した。
さらに、この標準液を稀釈して、0.1.3.5.7.
10mg/dJ1の溶液を調整した。
10mg/dJ1の溶液を調整した。
これらの溶液50μQを各々、下記反応溶液3mMに加
え、25℃で340nmの吸光度変化をレートアッセイ
により測定した。
え、25℃で340nmの吸光度変化をレートアッセイ
により測定した。
反応溶液組成
83mM τris−HCn pH8,515
■M ATP 1.67mM DL−isocitratsl、0
鳳M NADP” 0.8u/mff1 1CDH(NADP)結果は第2
図に示されるとおり、マグネシウム濃度の測定値が得ら
れた。
■M ATP 1.67mM DL−isocitratsl、0
鳳M NADP” 0.8u/mff1 1CDH(NADP)結果は第2
図に示されるとおり、マグネシウム濃度の測定値が得ら
れた。
第1図は、実施例1におけるマグネシウム定量の検量線
を示す図で、第2図は、実施例2におけるマグネシウム
定量の検量線を示す図である。 代理人 弁理士 戸 1)親 男 第1図 マグネシウムイ3度 <mg/di) 第2図 旬 ユ2 マグネシウム、a度 (mg/dB
を示す図で、第2図は、実施例2におけるマグネシウム
定量の検量線を示す図である。 代理人 弁理士 戸 1)親 男 第1図 マグネシウムイ3度 <mg/di) 第2図 旬 ユ2 マグネシウム、a度 (mg/dB
Claims (3)
- (1)マグネシウムの定量を行うに際し、イソクエン酸
脱水素酵素の反応によってマグネシウム量を測定するこ
とを特徴とするマグネシウムの定量方法。 - (2)第1項のイソクエン酸脱水素酵素の反応時に阻害
剤として、マグネシウムイオンのキレート剤および/あ
るいはアデノシントリリン酸(ATP)を添加すること
を特徴とするマグネシウムの定量方法。 - (3)マンガンイオンのキレート剤としてグリコールエ
ーテルジアミン四酢酸(GEDTA)を添加してマグネ
シウム量を測定することを特徴とする第1項のマグネシ
ウムの定量方法。
Priority Applications (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63299551A JP2748134B2 (ja) | 1988-11-29 | 1988-11-29 | マグネシウムの定量方法 |
CA002000963A CA2000963A1 (en) | 1988-11-29 | 1989-10-18 | Method of assaying magnesium |
EP89310881A EP0371600A1 (en) | 1988-11-29 | 1989-10-23 | Method of assaying magnesium |
US07/690,420 US5108905A (en) | 1988-11-29 | 1991-04-24 | Method of assaying magnesium in human body fluid |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63299551A JP2748134B2 (ja) | 1988-11-29 | 1988-11-29 | マグネシウムの定量方法 |
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Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH02145196A true JPH02145196A (ja) | 1990-06-04 |
JP2748134B2 JP2748134B2 (ja) | 1998-05-06 |
Family
ID=17874082
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
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Country Status (4)
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US (1) | US5108905A (ja) |
EP (1) | EP0371600A1 (ja) |
JP (1) | JP2748134B2 (ja) |
CA (1) | CA2000963A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0607064A1 (en) * | 1993-01-14 | 1994-07-20 | Oriental Yeast Co., Ltd. | Assay method and reagent for magnesium in human body fluids |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5914271A (en) * | 1996-04-19 | 1999-06-22 | Actimed Laboratories, Inc. | Fertility test |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1673197A1 (de) * | 1965-07-29 | 1970-10-29 | Dresden Arzneimittel | Verfahren und Mittel zur Bestimmung der Isocitrat-Dehydrogenase-Aktivitaet |
US4657854A (en) * | 1983-05-05 | 1987-04-14 | Ivan Endre Modrovich | Assay systems based on magnesium-responsive enzymes |
JPH0673475B2 (ja) * | 1985-04-26 | 1994-09-21 | オリエンタル酵母工業株式会社 | イソクエン酸脱水素酵素の反応停止法 |
RU2054674C1 (ru) * | 1987-04-10 | 1996-02-20 | Дзе Флиндерс Юниверсити оф Саут Аустрэлиа | Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале |
-
1988
- 1988-11-29 JP JP63299551A patent/JP2748134B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-10-18 CA CA002000963A patent/CA2000963A1/en not_active Abandoned
- 1989-10-23 EP EP89310881A patent/EP0371600A1/en not_active Withdrawn
-
1991
- 1991-04-24 US US07/690,420 patent/US5108905A/en not_active Expired - Lifetime
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0607064A1 (en) * | 1993-01-14 | 1994-07-20 | Oriental Yeast Co., Ltd. | Assay method and reagent for magnesium in human body fluids |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US5108905A (en) | 1992-04-28 |
JP2748134B2 (ja) | 1998-05-06 |
EP0371600A1 (en) | 1990-06-06 |
CA2000963A1 (en) | 1990-05-29 |
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