JPH01313000A - 生体成分測定試薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 この発明は、水に難溶性の物質を高濃度に溶解（含有）
させると共に、その結晶化または析出化を防止するよう
にした生体成分測定試薬に関するものである。

更に詳しくは、水に難溶性の物質を、マルトシル化シク
ロデキストリン（以下マルトシル化ＣＤともいう）と共
に共存させるが、またはマルトシル化ＣＤの包接化合物
として生体成分測定試薬中に溶解（含有）させることに
よって溶解性を増大ざぜで、水に難溶性の物質の結晶化
または析出化を防止するようにした生体成分測定試薬に
関するものである。

〈従来の技術と発明が解決しようとする問題点〉一般に
酵素反応等の生化学的測定に用いる水系の生体成分測定
試薬中には、酵素反応基質、補酵素、阻害剤、発色物質
、色素、防腐剤等の水に難溶性の物質を種々溶解（含有
）させる必要がある。

これらの水に難溶性の物質を高濃度に溶解させる試みは
種々なされているが、完全な方法はなく、このため未だ
生体成分測定試薬として利用できない物質も存在する。

また、これらの水に難溶性の物質は、通常生体成分測定
試薬の調製時においては巧妙な方法により可溶化されて
いるが、経時的に結晶または析出化が起こり易く、−度
結晶化または析出化が起こると、当該物質の濃度の低下
を招き、精度の高い生体成分測定試薬としての機能を喪
失してその価値を失なってしまう。

このような難溶性の物質を生体成分測定試薬中に溶解さ
せ、また経時的な結晶化または析出化を防止するための
有力な方法の一つとして、従来から水に難溶性の物質と
シクロデキストリン（またはシクロデキストリン誘導体
）とを共存またはその包接化合物として含有させる方法
が公表されている（特開昭５７−７４０９９号は、特開
昭６０−１６０８９６Ｍ、特開昭６１　２６０９００号
）。

しかしながら、前記公表された方法は、シクロデキスト
リシ自体の溶解度が小さ過ぎで難溶性の物質を高濃度に
溶解させることができなかったり、シクロデキストリン
誘導体（例えば、前記特開昭６１−２６０９００号のハ
イドロキシプロピルβ−ＣＤ）が著しく高価過ぎて経済
性に乏しい等の欠点があった。

発明者等は、前記欠点を克服すべく鋭意研冗したところ
、従来のシクロデキストリン（またはシクロデキストリ
ン誘導体）に比較してマルトシル化シクロデキストリン
は、生体成分測定試薬中に溶解（含有）させる必要があ
る酵素反応基質、阻害剤、発色物質、色素、防腐剤等の
水に難溶性の物質に対して極めて良好な包接能力を有す
ると共に、溶解度が大きくしかも安価であることを知り
本発明を完成した。

〈問題点を解決するための手段〉 本願は次の（１）〜（９）の請求項から構成されている
。

（１）水に難溶性の物質とマルトシル化シクロデキスト
リンとが共存することを特徴とする生体成分測定試薬。

（２）水に難溶性の物質をマルトシル化シクロデキスト
リンの包接化合物として含有することを特徴とする生体
成分測定試薬。

（３）水に難溶性の物質とマルトシル化シクロデキスト
リン及び未修飾シクロデキストリンか共存することを特
徴とする生体成分測定試薬。

（４）水に難溶性の物質をマルトシル化シクロデキスト
リン及び未修飾シクロデキストリンの包接化合物として
含有することを特徴とする生体成分測定試薬。

（５）未修飾シクロデキストリンが、α−１β−１γ−
シクロデキストリン単独、またはこれらの混合物である
特許請求の範囲第３項、及び第４項記載の生体成分測定
試薬。

（６）水に難溶性の物質が、酵素反応の基質（合成基質
を含む）、補酵素、阻害剤、または色素である特許請求
の範囲第１〜第５項記載の生体成分測定試薬。

（７）水に難溶性の物質が、生化学的測定試薬に防腐的
作用を期待して用いる水に難溶の防腐、防菌、または防
カビ剤である特許請求の範囲第１〜第５項記載の生体成
分測定試薬。

（８）水に難溶性の物質が、γ−グルタミルパラニトロ
アニリン（γ−ＧｐＮＡ）である特許請求の範囲第１〜
第５項記載の生体成分測定試薬。

（９）水に難溶性の物質が、アデノシンである特許請求
の範囲第１〜第５項記載の生体成分測定試薬。

本願発明において、水に難溶性の物質とは、次に記載す
る比較的低分子の有機化合物をいう。

（イ）酵素反応の基質： （Ａ）チロシン、トリプトファン等の難溶性アミノ酸 （Ｂ）アデニン、ヒボキサンチン、キサンチン、尿酸、
ウラシル、チミン等の水に難溶注の核＃ｉ塩基 （Ｃ）チロキシン、トリョートチロニン、アドレナリン
、ノルアドレナリン、メラトニン等の低分子難溶性ホル
モン、テストステロン、アルドステロン、プロゲステロ
シ等のステロイド系ホルモン （ロ）補酵素： ニコチンアミド、ビオチン、葉酸、リボ酸、レチナール
、カロチン、α−トコフェロール、ビタミンに３、ユビ
キノン、ビタミンＤ等の水に難溶・注ビタミン （ハ）色素： ヒトロキノン、カテコール、ピロガロール、バニリンと
その誘導体、アンチピリン、４−二トロアニリンの酸ア
ニリド誘導体（γ−ＧＴＰ基質、その他ペブチダーセ基
質等）、ニトロフェノール及びクロロニトロフェノール
のエステル結合誘導体（リン酸エステル類：）オスファ
ターセの基質：ｐ−ニトロフェニルフォスフエイト）あ
るいはエーテル結合誘導体（オリゴ等末端あるいは槍に
結合：アミラーゼの基質、グリコシダーセの基質等）等
、フェノールフタレインリン酸、アワリジン、ツェナジ
ン、フルオレセイン、ローダミン、ナフタレン、ピレン
、アシトラキノン、アントラセン、ウシへりフェロン、
クマリシ誘導体とそれらにより標識されたハブテン に）阻害剤： シクマロール、ワルファリン、チオウラシル、２，４−
ジニトロフェノール、］ルヒチン、ｐ−クロロ安息香酸
第二水銀 （ホ）防腐剤、抗生物質： チモール、クロラムフェニコール （へ）その他二 〇−フエナントロッジ、２，２−ジピリジル、バンクブ
ロイシ等のキレート剤、トリグリセライド、コレステロ
ール等の脂質 これらの有機化合物は、一般にその溶液中で安定とぎれ
るｐＨにおいては溶解度が小ざいので、生化学的測定試
薬に必要な濃度を得られないことが多いが、このような
場合にマルトシル化シクロデキストリンを添加すると、
必要とされる充分な濃度を有し、なおかつ安定な生化学
的測定試薬を容易に得ることができる。

本願発明において、マルトシル化シクロデキストリンと
は、次の一般式で示されるシクロデキストリン誘導体を
いい、具体的にはマルトシル化α−シクロデキストリン
［ｎ−６、ｍ＝１〜２］、マルトシル化β−シクロデキ
ストリン［ｎ−７、ｍ＝：１〜２コ、マルトシル化γ−
シクロデキストリン［ｎ＝８、ｍ＝１〜２］が使用され
る。

一般式 ％式％） 但し、上式中（０５Ｈ１００５）はグルコース残基そ、
（Ｃ，。Ｈ２００５）はマルトース残基を表わし、グル
コース同志は、α−１，４結合、グルコースとマルトー
スは、α−１，６結合している。　これらのマルトシル
化ＣＤは新規な化合物Ｃはないが、生体成分測定試薬中
の安定化（水に難溶性の物質の結晶または析出化の防止
）に利用したのは本願が最初である。

本願発明を具体的に実施する場合にあいで、不純物を含
有しない純粋な各々のマルトシル化ＣＤが使用される場
合もあるが、通常はマルトシル化ＣＤの製造工程で共存
（混入）するこれら３ｔ！！のマルトシル化ＣＤの混合
物、及び未修飾のＣＤ（他の糖質を含む）を含有するマ
ルトシル化ＣＤの混合物が使用される場合が多い。この
場合において、純粋なマルトシル化ＣＤを使用する場合
よりも・未修飾のＣＤを含有するマルトシル化ＣＤを使
用した方が、マルトシル化ＣＤか未修飾のＣＤの溶解（
特にβ−〇Ｄの溶解）を助ける性質を有するので機能的
、経済的に優れていることも多い。

これらのマルトシル化ＣＤを一種類以上添加することに
より、酵素反応基質、阻害剤、発色物質、色素、防腐剤
（抗生物質）等の生化学物質でこれまで水に難溶とされ
、溶解操作に手間取ったり、あるいは高濃度の試薬溶液
として調製できなかったためにその効果を発揮させにく
かった物質を、その溶解度の数倍の濃度、あるいは数ｍ
Ｍから数１０ｒｎＭの高濃度に包接化合物として溶解さ
せることができるようになった。

水に難溶性の物質をマルトシル化ＣＤと混合した場合、
通常は包接化合物が形成されるとされるが、必すしも全
てが包接化合物の概念で説明できない場合もあり得るの
で、本願発明は、マルトシル化ＣＤと水にｔｌｔ溶性の
物質か包接化合物を形成する場合のみに限定されるもの
ではなく、例えば乳化により、安定な試薬溶液が得られ
る場合を含むものである。

く実施例１〉 γ−し一グルタミルーｐ−ニトロアニリド（γ−ＧｐＮ
Ａ）塩酸塩の溶解 γ−ＧｐＮＡは、γ−グルタミルトランスフエラーセ（
ＥＣ２，３，２，２、以下ＧＴという）活性測定の際の
基質である。γ−ＧｐＮＡを基質とする酵素活性γ−グ
ルタミルトランスフエラーセ（γ−ＧＴＰ）の本基質に
対するＫｍ（ミカエリス−メジテン定数）は、約ＴｍＭ
であることが知られでいる。このＫｍの値から、γ−Ｇ
ＴＰ活性を精度よく測定するためには、試薬中に含まれ
る基質の濃度は数ｍＭ以上が必要である。しかし、溶解
度を比較的大きくすることができるｐＨ４〜５以外のｐ
Ｈては、加水分解速度が一段と大きくなるので、前記以
外のｐＨでは試薬として保存することはできない。この
ｐＨでは、γ−ＧｐＮＡの溶解度は最小で、２ｍＭ（４
°Ｃ）未満しか溶解しないので実用に耐える試薬を調製
シ低温、保存するには、マルトシル化ＣＤを添加し”Ｃ
３８度を大きくする必要があるのである。

次の（］）〜（５）の溶液を調製し、４°Ｃに放置しで
基質γ−ＧｐＮＡの結晶が析出するが否かを観察し、γ
−ＧｐＮＡ塩酸塩を最終的に２０ｍＭ溶解するための各
ＣＤの必要最小濃度（ｍＭ）を求めた。また、ＣＤの包
接能力を評価する目的で、結晶が析出した基質溶液につ
いてはその上澄に含まれる基質の濃度を吸光光度法によ
り測定し、包接定数（Ｋ）をもとめた、結果は第１表（
巻末）の通りであった。

（１）マルトシル化α−ＣＤ［一般式（Ｉ）においてｎ
＝６．ｍ＝　１〜２］　＠Ｏ０−５０ｒｎの範囲で種々
の濃度で含み、γ−ＧｐＮＡ塩酸塩を一律２０ｍＭ含む
基質溶液を調製した。

（２）マルトシル化β−ＣＤ［一般式（Ｉ）においてｎ
＝７．ｍ＝１−２］を０−５０ｍＭの範囲で種々の；ｌ
ｌ１１度で含み、γ−ＧｐＮＡ塩酸塩を一律２０ｍＭ含
む基質溶液を調製した。

（３）マルトシル化α−ＣＤとマルトシル化β−ＣＤＩ
ｒ主成分とし、未修飾ＣＤ等を含むＣＤ調製物（前記（
１）、（２）のマルトシル誘導体の生成過程における中
間生成物、ただしオリゴ糖は含まずＣＤのみ）を、０〜
１６０ｍＭの範囲で種々の濃度で含み、γ−ＧｐＮＡ塩
酸塩を一律２０ｍＭ含む基質溶液を調製した。なお、こ
の中間生成物は、固形分としてオリゴ塘は含まずマルト
シル化ＣＤと未修飾のＣＤのみを含み、マルトシル化Ｃ
Ｄは全固形分の６２．５重量％以上（α、β：γ＝６：
３：１（重量比））ヲ含有するものである。

（４）マルトシル化ＣＤ以外のＣＤ誘導体として、前記
特開昭６１−２６０９００号公報記載のハイドロキシプ
ロビルβ−ＣＤ成分（ヘプタキス−（６−０−ハイドロ
キシプロどル）−Ｂ＝ＣＤ、以下ＨＰ−β−ＣＤという
）を０〜５０ｍＭの範囲で種々の濃度に含み、γ−Ｇｐ
ＮＡ塩酸塩を一律２０ｍＭ含む基質溶液を調製した。

（５）ＣＤ誘導体を含まない蒸留水のみにて、γ−Ｇｐ
ＮＡ塩酸塩を最終的に２０ｍＭ含む基質溶液を調製した
。

これらの（１）〜（５）の溶液は、全てｐＨ４゜５に調
節した。

第１表の結果によれば、０４°Ｃの水には、１゜８ｍＭ
しか溶解しないγ−ＧｐＮＡ塩酸塩を、８０ｍＭのマル
トシル化ＣＤを使用することにより２０ｍＭ溶解させる
ことが可能となり、■マルトシル化ＣＤ調製物でも９０
ｍＭ使用すればＴ−ＧｐＮＡ塩酸塩を２０ｍＭ溶解させ
ることが可能であることがわかる。マルトシル化ＣＤ調
製物中には、純粋なマルトシル化ＣＤは、５５〜６０％
しか含まれていなのにこのような好結果が生ずるのは、
マルトシル化ＣＤか難溶性のβ−ＣＤの溶解度を大きく
すると共に他の未修飾ＣＤＯ包橿能力ヲ増大しているも
のと考えられる。

マルトシル−ＣＤが、難溶性のβ−ＣＤの溶解度を大き
くすることは、次の＠寅からも明らかである。

β−ＣＤ０．１９（約８８ｕｍｏＩ２）は、室温てｌｏ
ｏｍＭのマルトシル−β−ＣＤの溶液８００ｕβに溶解
することができる。しかし、β−ＣＤ単独では、水８０
０ｕρに１４ｕｍｏＩ２（約２％）しか溶解しない。す
なわち、８８８８−１４＝７４ｕβは、マルトシル−β
−ＣＤにより溶解しているのである。

〈実施例２〉 本願発明に係るマルトシル化ＣＤ（α−２β−）及びマ
ルトシル化ＣＤ調製物と従来の未修飾ＣＤ（α−１β−
１γ−）及びＣＤ誘導体（ｄｉ−０−ｍｅｔｈｙ　ｌ−
β−ＣＤ　、　ｔｒｉ−０−ｍｅｔｈｙｌ−Ｂ−ＣＤ、
ｐｏｌｙ−Ｂ−ＣＤ、　ＨＰ−β−ＣＤ）との包接能力
を比較するため、各ＣＤの濃度を一定（約２５ｍＭ）に
保ち、これにγ−ＧｐＮＡｔ−律２０ｍＭとなるように
室温にて溶解し、試薬を調製した後、４℃に保存し、２
週周経過後、これらの試薬の上清の基質濃度を測定した
。これらの試薬溶液のｐＨは全て３．０（２５℃）とし
、ジメチルホルムアミド（ＤＭＡ）を２５〜３０％のが
囲で含むように調製した。

測定結果を第２表（巻末）に示す。

第２表の結果によれば、本願発明に係るマルトシル化Ｃ
Ｄ（α−１β−）は、従来包接能力が大きいとされたＨ
Ｐ−β−ＣＤ（この誘導体は、純化した１３−ＣＤにヒ
ドロキシプロピル基を化学的に導入して合成されるもの
で非常に高価である）に充分匹敵すると共に、製造コス
トが極めて安価で済むマルトシル化ＣＤ調製物でも、充
分に目的を達成することができることがわかる。

〈実施例３〉 実施例１で調製したマルトシル化α−ＣＤ、マルトシル
化Ｂ−ＣＤを用いで調製した基質溶液から、ｐＨ３，７
とｐＨ５，２について２両ＣＤの混合が、基質の可溶化
を増大させるが否かを検討した。すなわち、前記ｐＨに
調製した２０ｍＭマルトシル化α−ＣＤと２０ｍＭマル
トシル化β−ＣＤを夫々ｐＨそ変えないように混合した
。この混合液の遊Ｍ基質濃度の測定結果を第３表（巻末
）に示す。

第３表の結果によれば、マルトシル化α−ＣＤ、または
マルトシル化β−ＣＤ単独よりも両者を混合した方が、
逆順基質濃度がＱ、５ｍＭ程度大きい。すなわち、実施
例］と同様に、ＣＤ特有の包接効果は、単一のＣＤを使
用するより種類の異なる複数のＣＤを混合して使用する
場合の方が大きいことを示している。

〈実施例４〉 次の試薬を調製した。

＊試薬Ａ：８０ｍＭのグリシルグリシンを含む１００ｍ
Ｍｔ−リス緩衝液（ｐＨ８，３）＊試薬］：マルトシル
化α−ＣＤ［一般式（Ｉ）に゛おいてｎ＝６．ｍ＝１〜
２］を約２５ｍＭ、γ−ＧｐＮＡ塩酸塩を２０ｍＭ含む
基質；谷；１女 ＊試薬２：マルトシル化β−ＣＤ［一般式（Ｉ）におい
てｎ＝７．ｍ＝１〜２コを約２５ｍＭ、７−Ｇｌ）ＮＡ
塩酸塩ｕ２０ｍＭ含む基質溶液 ＊試薬３：マルトシル化α−ＣＤを主成分とし、マルト
シル化β−ＣＤ、マルトシル化γ−ＣＤを含み、その細
末修飾のα−ＣＤ、β−ＣＤ、γ−ＣＤを微量含むマル
トシル化ＣＤ調製物を平均モル濃度として、約２５ｍＭ
、γ−ＧｐＮＡ塩酸塩を２０ｍＭ含む基質溶液次に、γ
−グルタミルトランスフェラーセ活性を含む試料溶液を
用意し、この試料溶液の１容積に対して、試薬１の基質
溶液を４０の容量比で混合し、３７°Ｃにて５分間加熱
した後、前記夫々のＣＤを含む試薬】、試薬２、試薬３
を１０の容量比で夫／？添加して、同温度で反応を開始
した。

反応により生成するバラニトロアニリシを４０５ｎｍの
吸光度変化により追跡し、試料溶液中のγＧＴＰ活性を
測定した。試料溶液としては、ブタ腎臓由来の精製ＧＴ
Ｐ、血清検体、故意に溶血した血清を含む血清検体、故
意に特定の物質を添加した血清検体を用いた。

次に比較例として、γ−ＧｐＮＡ塩酸塩を従来から行な
われている下記の２方法（試薬４、試薬５）により調製
して、γ−グルタミルトランスフエラーセ活性を測定し
た。

＊試薬４：ウラウンエーテル１６％、ジメチルアセトア
ミド（ＤＭＡ）１３％を含む２０ｍＭのγ−ＧｐＮＡ塩
酸塩水溶液 ＊試薬５：ＣＤやクラウンエーテルを含まず、前記試薬
１を８０％含むように稀釈し、その中に４ｍＭのγ−Ｇ
ｐＮＡ塩酸塩を溶解した溶液 γ−グルタミルトランスフェラーゼ活性の測定は、試薬
４についでは、試薬２と同し方法で、また試薬５につい
ては、１容積の試料溶液に対して、５０の容量比で混合
した。

以上の測定結果を第４表（巻末）に示す。

この結果によれば、マルトシル化したＣＤのうち、マル
トシル化α−ＣＤは、ＣＤ等を添加しない試薬５とほぼ
同等の比活性を示し、更に共存物質、特にヘモグロビン
の影響も小さいことから、γ−ＧＴＰ活牲測定試薬の基
質Ｔ−ＧｐＮＡ溶解補助剤として優秀であるといえる。

また、試薬３のマルトシル化ＣＤと未修飾ＣＤ（Ｄ混合
物も、アーＧＴＰ活性測定試薬の基質γ−ＧｐＮＡ洛解
補助剤として優秀であるとし１える。

この混合物のＣＤは、試薬１や試薬２の精製されたマル
トシル化ＣＤではないので、著しく安価であり実用的な
価値が大きい。

これらのＣＤは、その加水分解精製物が全てグルコース
であり、生物学的に安全性が高いので、排液処理上の問
題もない。

〈実施例５〉 アデノシン脱アミン酵素（以下ＡＤ八という）の基質で
あるアデノシンの可溶化 ヒトの血清中には、ＡＤＡのイソ酵素が２種類存在する
が、活性測定上において意味を有するものは、Ｋｍが約
３ｍＭであるＡＤＡイソ酵素である。この血清中のＡＤ
Ａ活性を測定することにより、肝疾患や悪゛ｉａ瘍の有
無を診断できる可能性があり臨床上有意義な測定項目と
して簡便な測定試薬の開発が期待されでいる。しかし、
アデノシンの水溶液は、冷蔵保存下では、４ｍＭ程度し
か溶解せす、有機溶媒を全く含まない水溶液で長期間に
わｐっで高Ｊ度の基質濃度を保ち、しかも安定な試薬を
構成することが従来技術では著しく困難である。

このＡＤＡの基質５０　ｍ　Ｍは、３０％のマルトシル
化ＣＤ混合物の水溶液に溶解することができ、ＡＤＡ活
性測定用の基質溶液を容易に調製することができ、た。

マルトシル化ＣＤの溶解度は、６０％以上であるので、
理論的にもアデノシンは１１００ｒｎ程度溶解し、低温
に長期間保存しても結晶の沈澱が現われず、水溶液とし
て安定に保存できるはすである。

このようにマルトシル化ＣＤを含む水溶液中には高濃度
のアデノシンが溶解するが、従来の試薬と比較するため
に、上述した５０ｍＭアデノシン水溶液を緩衝溶液で稀
釈し、下記のようにＡＤＡ活性試薬を調製した。

＊試薬１：酵素溶液 α−ケトグルタル酸　　　　　４０ｍＭＮＡＤＰＨ０，
７ｍＭ ＧＩＤＨ４０Ｕ／ｍｐ トリスアミツメクン　　　　　１０ｍＭｐＨ８，５ 但し、ＮＡＤＰＨは、ニコチンアミドアデユワシアクレ
オチドリン酸還元型、ＧＩＤＨは、グルタメイト脱水素
酵素である。

＊試薬２：基貢溶液（実施例） アデノシン　　　　　　　　　２０ｍＭＫＨ２Ｐ○ａ　
　　　　　　　１３０ｒｎＭマルトシル化ＣＤ（混合物
）　１２％ ｐＨ７，０ ＊試薬３．基質溶液（比較例） アデノシン　　　　　　　　　２０ｍＭＫ　Ｈ２Ｐ　Ｏ
ａ　　　　　　　　　１３６　ｍＭＤＭＳＯ５％ グリセリン　　　　　　　　１０％ ｐＨ７，０ 但し、ＤＭＳＯはジメチルスルホキサイド、で、グリセ
リンと共に溶解補助剤として添加したものである。

〈測定〉 ヒト血清ＡＤＡ活・注ヲ測定するため１こ、血清１容に
対し、試薬１を５容添加して３７℃にて５分間予加温し
、内因性のアンモニアを消去した。続いて、試薬２を１
０容ン虐加して、血清ＡＤＡの作用により、基質アデノ
シンから遊離するアシモニアを試薬１に含まれた酵素に
よりＮＡＤＰＨの減少速度として測定し、血清ＡＤＡ活
性を評価した。測定の結果を第５表（巻末）ζこ示す。

第５表の結果によれば、マルトシル化ＣＤを基質の溶解
補助剤として構成した試薬により測定した血清ＡＤＡ活
性値は、有機溶媒であるＤＭＳＯを用いたものよりも、
平均して１２％程度大きな値が得られた。すなわち、Ｄ
ＭＳＯはＡＤＡの比活性を１０％程度低下させているこ
とになる。

従ってマルトシル化ＣＤを用いた試薬（こよりＡＤＡ活
性を測定すると、ＤＭＳＯを用いた場合と比較して、Ａ
ＤＡの活性を抑制せずに真の活性に近い測定ができるも
のと考えられる。

〈実施例６〉 マルトシル化ＣＤ混合物を使用して、次の難溶性の物質
を溶解することができた。

（イ）ＰＭＳＦ　（フェニルメチルスルホニルクロリド
（蛋白分解酵素阻害剤）） （ロ）　ｐ−ＭＢ　（１）−安息香酸メチル（防腐剤）
） （ハ）ＭＢＣＨＡ　（４，４−メチレンビスシクロヘキ
シルアミン（防力ど剤）） 第６表（巻末）に溶解条件を示す。

〈発明の効果〉 本願発明は以上のように構成したから、酵素反応基質、
阻害剤、発色物質、色素、防腐剤等の水に難溶性の物質
を高濃度かつ安定に溶解した生体成分測定試薬を容易に
得ることができるという効果を有する。

１　　　日４．５に・　した基　・　　　ＣＤり第２表 第３　；！ｊ　（ＩＩ（ＱｍＭ　） ′Ｊ４５表（単位Ｕ／ｒ） 第６表

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）水に難溶性の物質とマルトシル化シクロデキスト
   リンとが共存することを特徴とする生体成分測定試薬。
2. （２）水に難溶性の物質をマルトシル化シクロデキスト
   リンの包接化合物として含有することを特徴とする生体
   成分測定試薬。
3. （３）水に難溶性の物質とマルトシル化シクロデキスト
   リン及び未修飾シクロデキストリンが共存することを特
   徴とする生体成分測定試薬。
4. （４）水に難溶性の物質をマルトシル化シクロデキスト
   リン及び未修飾シクロデキストリンの包接化合物として
   含有することを特徴とする生体成分測定試薬。
5. （５）未修飾シクロデキストリンが、α−、β−、γ−
   シクロデキストリン単独、またはこれらの混合物である
   特許請求の範囲第３項、及び第４項記載の生体成分測定
   試薬。
6. （６）水に難溶性の物質が、酵素反応の基質（合成基質
   を含む）、補酵素、阻害剤、または色素である特許請求
   の範囲第１〜第５項記載の生体成分測定試薬。
7. （７）水に難溶性の物質が、生化学的測定試薬に防腐的
   作用を期待して用いる水に難溶の防腐、防菌、または防
   カビ剤である特許請求の範囲第１〜第５項記載の生体成
   分測定試薬。
8. （８）水に難溶性の物質が、γ−グルタミルパラニトロ
   アニリン（γ−ＧｐＮＡ）である特許請求の範囲第１〜
   第５項記載の生体成分測定試薬。
9. （９）水に難溶性の物質が、アデノシンである特許請求
   の範囲第１〜第５項記載の生体成分測定試薬。