JP7227406B2 - 細胞培養物を処理する方法およびシステム - Google Patents
細胞培養物を処理する方法およびシステム Download PDFInfo
- Publication number
- JP7227406B2 JP7227406B2 JP2022001359A JP2022001359A JP7227406B2 JP 7227406 B2 JP7227406 B2 JP 7227406B2 JP 2022001359 A JP2022001359 A JP 2022001359A JP 2022001359 A JP2022001359 A JP 2022001359A JP 7227406 B2 JP7227406 B2 JP 7227406B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- days
- conduit
- cell culture
- seconds
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 title claims description 167
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 118
- 238000012545 processing Methods 0.000 title description 11
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 133
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 118
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 105
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 58
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 claims description 54
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 claims description 54
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 52
- 238000004891 communication Methods 0.000 claims description 35
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 17
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 9
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 claims description 5
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 4
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 claims description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 claims description 2
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 384
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 62
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 57
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 54
- 229960000160 recombinant therapeutic protein Drugs 0.000 description 41
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 28
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 27
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 26
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 26
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 25
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 22
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 21
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 20
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 19
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 19
- 238000010977 unit operation Methods 0.000 description 18
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 17
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 17
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 15
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 14
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 14
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 14
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 14
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 14
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 12
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 11
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 11
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 11
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 10
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- -1 20 amino acids) Chemical class 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 5
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 5
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 4
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 description 3
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 2
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 2
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 2
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 2
- 238000013406 biomanufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000001465 calcium Nutrition 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M cyanocobalamin Chemical compound N#C[Co+]N([C@]1([H])[C@H](CC(N)=O)[C@]\2(CCC(=O)NC[C@H](C)OP(O)(=O)OC3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)C)C/2=C(C)\C([C@H](C/2(C)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 108010039650 imiglucerase Proteins 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 2
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 2
- 229920002463 poly(p-dioxanone) polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000622 polydioxanone Substances 0.000 description 2
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010001258 Adenoviral infections Diseases 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 101100421296 Caenorhabditis elegans set-6 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 241000867607 Chlorocebus sabaeus Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 description 1
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000987586 Homo sapiens Eosinophil peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 101000920686 Homo sapiens Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 101001018026 Homo sapiens Lysosomal alpha-glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 108010005716 Interferon beta-1a Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102100033342 Lysosomal acid glucosylceramidase Human genes 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920012266 Poly(ether sulfone) PES Polymers 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920000331 Polyhydroxybutyrate Polymers 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 206010038997 Retroviral infections Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010039185 Tenecteplase Proteins 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 1
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003697 abatacept Drugs 0.000 description 1
- 229960000446 abciximab Drugs 0.000 description 1
- 229950004283 actoxumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229950009084 adecatumumab Drugs 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229960003227 afelimomab Drugs 0.000 description 1
- 229960004470 agalsidase beta Drugs 0.000 description 1
- 108010056760 agalsidase beta Proteins 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960004539 alirocumab Drugs 0.000 description 1
- 229960003318 alteplase Drugs 0.000 description 1
- 229950009106 altumomab Drugs 0.000 description 1
- 229950001537 amatuximab Drugs 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940049197 cerezyme Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000004185 countercurrent chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 229960002104 cyanocobalamin Drugs 0.000 description 1
- 235000000639 cyanocobalamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011666 cyanocobalamin Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 108010067396 dornase alfa Proteins 0.000 description 1
- 235000012489 doughnuts Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- KUBARPMUNHKBIQ-VTHUDJRQSA-N eliglustat tartrate Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.C([C@@H](NC(=O)CCCCCCC)[C@H](O)C=1C=C2OCCOC2=CC=1)N1CCCC1.C([C@@H](NC(=O)CCCCCCC)[C@H](O)C=1C=C2OCCOC2=CC=1)N1CCCC1 KUBARPMUNHKBIQ-VTHUDJRQSA-N 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 230000009969 flowable effect Effects 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229960005390 galsulfase Drugs 0.000 description 1
- 108010089296 galsulfase Proteins 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000044890 human EPO Human genes 0.000 description 1
- 102000045921 human GAA Human genes 0.000 description 1
- 210000000688 human artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 229960002127 imiglucerase Drugs 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229960004461 interferon beta-1a Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229960002486 laronidase Drugs 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 210000000723 mammalian artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940103023 myozyme Drugs 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229960000470 omalizumab Drugs 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000005014 poly(hydroxyalkanoate) Substances 0.000 description 1
- 239000005015 poly(hydroxybutyrate) Substances 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000903 polyhydroxyalkanoate Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000012562 protein A resin Substances 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 235000008160 pyridoxine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011677 pyridoxine Substances 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 229920002379 silicone rubber Polymers 0.000 description 1
- 239000004945 silicone rubber Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 229960000216 tenecteplase Drugs 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960003989 tocilizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 108020005087 unfolded proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/04—Filters; Permeable or porous membranes or plates, e.g. dialysis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/10—Perfusion
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/18—External loop; Means for reintroduction of fermented biomass or liquid percolate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
- C12M33/14—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus with filters, sieves or membranes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
- C12M47/10—Separation or concentration of fermentation products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
- C12M47/12—Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Immunology (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本出願は、2013年9月16日付け出願の米国仮特許出願第61/878,502号に対する優先権を主張し、その全内容を参照によって本明細書に組み入れる。
る第2の導管、ならびに少なくとも1つのポンプが作動すると、流体がシステムを通じて反転可能に流通し、リザーバから第1の導管、TFFユニット、第2の導管を経由してリザーバに戻るようにシステム内に配置された少なくとも1つのポンプを含む開回路濾過システムが本明細書で提供される。細胞培養物を処理する方法であって、(a)開回路濾過システム(例えば、本明細書に記載するいずれかの開回路濾過システム)を提供する工程、(b)細胞培養物を、リザーバからTFFユニットを通じて、第1の流れの向きで第1の期間流通させる工程、(c)第1の流れの向きを反転させ、細胞培養物を、TFFユニットを通じて、第2の流れの向きで第2の期間流通させる工程、(d)第2の流れの向きを反転させ、培養物を、TFFユニットを通じて、第1の流れの向きで第3の期間流通させる工程、(e)工程(c)~(d)を少なくとも2回繰り返す工程、および(f)濾過液を収集する工程を含む、方法も提供される。
L/分~約60L/分)の速度で流通する。
退出するように構成されている。本明細書に記載するどのシステムでも、TFFユニットは、ハウジング内に配置される。
表的な市販のTFFユニットとして、Minimate(商標)TFFカプセル(Pall Corporation)、Vivaflow(登録商標)50および200システム(Sartorius)、BioCap25、E0170、E0340、およびE1020カプセル(3M)、ならびにATF4フィルタ(Refine Technology)が挙げられる。ハウジングは、例えば流体が第1の入口/出口を通過し、少なくとも1つのクロスフローフィルタを横断し、第2の入口/出口を通過できるように位置する第1の入口/出口および第2の入口/出口を含み得る。いくつかの例では、開回路濾過システムは、例えば直列および/または並列に接続された複数のTFFユニットを含み得る。例えば、2つまたはそれ以上のTFFユニットを含むシステムは、システム内で隣接して対をなすTFFユニットを流体連結する流体導管を含み得る。他の例では、システムは、流体導管により流体連結した2つまたはそれ以上のTFFユニットからなる2つまたはそれ以上のセットを含み得る。本明細書に記載するまたは当技術分野において公知のどのTFFユニットも、第1の流れの向きおよび第2の流れの向きで流体を受け入れる能力を有する。
る。例えば、本明細書に記載する方法を用いて生成した濾過液は、哺乳動物細胞またはマイクロキャリアを実質的に含まないものとすることができる。別の例では、本明細書に記載するいずれかのプロセスを用いて単離された組み換えタンパク質は、宿主哺乳動物細胞タンパク質、核酸、および/または汚染性ウイルスを実質的に含まないものとすることができる。
ミノ酸)からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドを意味する。免疫グロブリンは、例えば軽鎖免疫グロブリンの少なくとも15個のアミノ酸、および/または重鎖免疫グロブリンの少なくとも15個のアミノ酸を含み得る。免疫グロブリンは、単離された抗体(例えば、IgG、IgE、IgD、IgA、またはIgM)であり得る。免疫グロブリンは、IgGのサブクラス(例えば、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4)であり得る。免疫グロブリンは、抗体フラグメント、例えばFabフラグメント、F(ab’)2フラグメント、またはscFvフラグメントであり得る。免疫グロブリンは、二重特異性抗体または三重特異性抗体、または二量体、三量体、または多量体抗体、または二機能性抗体、Affibody(登録商標)、またはNanobody(登録商標)でもあり得る。免疫グロブリンは、少なくとも1つの免疫グロブリンドメイン(例えば、融合タンパク質)を含む工学的に作出されたタンパク質でもあり得る。免疫グロブリンの非限定的な例は、本明細書に記載されており、免疫グロブリンの追加の例は、当技術分野において公知である。
換えタンパク質を意味する。
の分画は、培養される特定の細胞、初期の播種密度、および特定の時点における細胞密度に応じて変化し得る。
なくとも1つのポンプを含む、開回路濾過システムであって、少なくとも1つのポンプが作動すると、流体は、システムを通じて反転可能に流通し、リザーバから流体導管、TFFユニット、第2の導管を経由してリザーバに戻る、開回路濾過システムが本明細書で提供される。開回路濾過システム(例えば、本明細書に記載する任意の開回路濾過システムのいずれか)を使用する工程を含む、細胞培養物を処理する方法も提供される。本明細書に記載するシステムおよび方法は、例えば、細胞培養物を処理する間に、高い細胞生存率および/または細胞生存率(%)をもたらす。本明細書で提示するシステムおよび方法に関する追加の利点を以下に記載する。
本明細書は、本明細書に記載する方法を実施するのに有用な代表的な開回路濾過システムを提示する。これらのシステムは、少なくとも1つのポンプ(システム内の)が作動すると、流体は、システムを通じて反転可能に流通し、リザーバから第1の導管、TFFユニット、第2の導管を経由してリザーバに戻るように設計される。
システム1の非限定的な例を、図1に記載する。システム1は、リザーバ2、例えばバイオリアクタ、第1の導管6、第2の導管7、ならびにハウジング11および単一のクロスフロー管状フィルタ12、第1の入口4、および第2の入口5を含むTFFユニット3を含む。単一のクロスフロー管状フィルタ12は、例えば約0.2μmのポアサイズを有し得る。第1の導管6は、リザーバ2と第1の入口4との間で流体連通している。第2の導管7は、リザーバ2と第2の入口5との間で流体連通している。流体導管6および流体導管7は、任意の種類の生体適合性チューブ、例えばシリコーンチューブであり得る。TFFユニット3は、図1に示すような単一のクロスフロー管状フィルタ12、または2つもしくはそれ以上のクロスフローフィルタを含み得る。
システム1は、濾過液貯蔵タンク10および濾過液出口13と濾過液貯蔵タンク10との間で流体連通している濾過液導管9も含む。濾過液貯蔵タンク10は、例えば冷蔵貯蔵タンクであり得る。濾過液導管9は、任意の種類の生体適合性チューブ、例えばシリコーンチューブであり得る。
アクタ、第1の導管6、第2の導管7、ならびにハウジング11および単一のクロスフロー管状フィルタ12、第1の入口4、および第2の入口5を含むTFFユニット3を含む。クロスフローフィルタ12は、例えば約0.2μmのポアサイズ、約830ファイバ/フィルタのファイバカウントを有し、IDが1mmおよび長さが30cmのファイバを含み、0.77m2の濾過面積を有し得る。第1の導管6は、リザーバ2と第1の入口4との間で流体連通している。第2の導管7は、リザーバ2と第2の入口5との間で流体連通している。流体導管6および7は、任意の種類の生体適合性チューブ、例えばシリコーンチューブであり得る。流体導管6および7は、内径(ID)が0.5インチの移送チューブであり得る。
2つのポンプ8を含むシステム1の非限定的な例を図6に示す。システム1は、リザーバ2、例えばバイオリアクタ、第1の導管6、第2の導管7、ならびにハウジング11および単一のクロスフロー管状フィルタ12、第1の入口4、および第2の入口5を含むTFFユニット3を含む。単一のクロスフロー管状フィルタ12は、約0.2μmのポアサイズを有し得る。第1の導管6は、リザーバ2と第1の入口4との間で流体連通している。第2の導管7は、リザーバ2と第2の入口5との間で流体連通している。流体導管6および7は、任意の種類の生体適合性チューブ、例えばシリコーンチューブであり得る。TFFユニット3は、図6に示すような単一のクロスフロー管状フィルタ12を含み得る、または2つもしくはそれ以上セットになったクロスフローフィルタを含み得る。
間で流体連通している濾過液導管9も含む。濾過液貯蔵タンク10は、例えば冷蔵貯蔵タンクであり得る。濾過液導管9は、任意の種類の生体適合性チューブ、例えばシリコーンチューブであり得る。
当業者は、複数のサブシステムをシステムに付加可能である認識する。2つまたはそれ以上のサブシステム19を含む代表的なシステム1を図7に示す。システム1は、図7に示すように、リザーバ2;ならびに第1および第2のサブシステム19を含み、各サブシステム19は、第1の導管6、第2の導管7、ならびにハウジング11および単一のクロスフロー管状フィルタ12、第1の入口4、および第2の入口5を含むTFFユニット3を含む。単一のクロスフロー管状フィルタ12は、約0.2μmのポアサイズを有し得る。各サブシステムでは、第1の導管6は、リザーバ2と第1の入口4との間で流体連通している。各サブシステム内の第2の導管7は、リザーバ2と第2の入口5との間で流体連通している。流体導管6および7は、任意の種類の生体適合性チューブ、例えばシリコーンチューブであり得る。TFFユニット3は、図7に示すように、単一のクロスフロー管状フィルタ12をそれぞれ含み得る、または2つもしくはそれ以上セットになったクロスフローフィルタをそれぞれ含み得る。単一のクロスフロー管状フィルタ12は、約0.2μmのポアサイズを有し得る。
リザーバ、導管、TFFユニット、ポンプ、濾過液貯蔵タンク、流量計、圧力センサ、クランプ、ポート、および生物学的製造システムで使用可能である非限定的な代表的構造を以下に記載する。
リザーバは、バイオリアクタであり得る。バイオリアクタは、例えば約1L~約10,000L(例えば、約1L~約50L、約50L~約500L、約500L~約1000L、約500L~約5000L、約500L~約10,000L、約5000L~約10,000L、約1L~約10,000L、約1L~約8,000L、約1L~約6,000L、約1L~約5,000L、約100L~約5,000L、約10L~約100L、約10L~約4,000L、約10L~約3,000L、約10L~約2,000L、または約10L~約1,000L)の容積を有し得る。本明細書に記載するバイオリアクタは、いずれも潅流バイオリアクタであり得る。代表的なバイオリアクタは、いくつかの異なる商業ベンダー(例えば、Xcellerex(Marlborough、MA)およびHolland Applied Technologies(Burr Ridge、IL))から購入可能である。
約5分間~約2日間、約5分間~約36時間、約5分間~約24時間、約5分間~約12時間)保持可能である。貯蔵タンク内の細胞培養物は、約15℃~約37℃、約20℃~約37℃、約25℃~約37℃、約30℃~約37℃、または約20℃~約30℃の温度に維持可能である。
本明細書に記載する導管は、単純なチューブ、例えば生体適合性チューブであり得る。有用なチューブの非限定的な例として、シリコーンゴム、ポリウレタン、ポリジオキサノン(PDO)、ポリヒドロキシアルカノエート、ポリヒドロキシブチレート、ポリ(グリセロールセバケート)、ポリグリコリド、ポリラクチド、ポリカプロラクトン、もしくはポリアンヒドリド、またはこれらを含むコポリマーまたは誘導体、および/または他のポリマーが挙げられる。二者択一的または付加的に、本明細書に記載する導管は、いずれもポリ塩化ビニルを含み得る。導管は、いずれも、例えば約5mm~約50mm(例えば、約10mm~約40mm、約10mm~約35mm、または約10mm~約30mm、約10mm~約20mm)の内径(ID)を有し得る。導管は、溶接可能な移送チューブであり得る。導管の追加の例、ならびに本発明のデバイスおよび方法で使用可能である、導管の特性は、当業者に周知である。
本明細書に記載するシステムもしくはサブシステム、または方法のいずれかで用いられるTFFユニットは、1つまたはそれ以上のクロスフローフィルタを含み得る。例えば、本明細書に記載するTFFユニットは、単一のクロスフローフィルタ(例えば、管状クロスフローフィルタ)を含み得る。他の例では、TFFユニットは、2つまたはそれ以上(例えば、3、4、5、または6つ)のクロスフローフィルタ(例えば、管状クロスフローフィルタ)を含み得る。TFFユニット内の2つまたはそれ以上のクロスフローフィルタは、同一であってもよく、異なってもよい(例えば、番号、種類、形状、表面積、またはポアサイズが異なる)。具体例では、TFFユニットは、2つの管状クロスフローフィルタを含み得る。TFFユニット中に存在する2つまたはそれ以上のクロスフローフィルタは、湾曲した長方形の形状であり得る。
バ/フィルタ~約1200ファイバ/フィルタ、約500ファイバ/フィルタ~約1100ファイバ/フィルタ、約500ファイバ/フィルタ~約1000ファイバ/フィルタ、約500ファイバ/フィルタ~約900ファイバ/フィルタ、約600ファイバ/フィルタ~約900ファイバ/フィルタ、約700ファイバ/フィルタ~約900ファイバ/フィルタ、または約800ファイバ/フィルタ~約900ファイバ/フィルタ)のフィルタ1つ当たりの合計ファイバ数を有し得る。いくつかの例では、クロスフローフィルタ内のファイバは、約0.05mm~約10mm(例えば、約0.1mm~約9mm、約0.1mm~約8mm、約0.1mm~約7mm、約0.1mm~約6mm、約0.1mm~約5mm、約0.1mm~約4mm、約0.1mm~約3mm、約0.1mm~約2.5mm、約0.1mm~約2.0mm、約0.1mm~約1.5mm、約0.5mm~約1.5mm、または約0.75mm~約1.25mm)の内径を有する。クロスフローフィルタ中に存在するファイバは、約0.2cm~約200cm(例えば、約0.2cm~約190cm、約0.2cm~約180cm、約0.2cm~約170cm、約0.2cm~約160cm、約0.2cm~約150cm、約0.2cm~約140cm、約0.2cm~約130cm、約0.2cm~約120cm、約0.2cm~約110cm、約0.2cm~約100cm、約0.2cm~約90cm、約0.2cm~約80cm、約0.2cm~約70cm、約0.2cm~約60cm、約0.2cm~約55cm、約0.2cm~約50cm、約1cm~約45cm、約1cm~約40cm、約1cm~約35cm、約1cm~約35cm、約1cm~約30cm、約1cm~約25cm、約1cm~約20cm、約1cm~約15cm、約1cm~約10cm、約0.1cm~約5cm、約20cm~約40cm、または約25cm~約35cm)の長さを有し得る。クロスフローフィルタは、フィルタの大部分の表面積が、システム内の流体(例えば、細胞培養物)の流れに対して並行に位置するように、任意の形状を有し得る。例えば、クロスフローフィルタは、管状形状または湾曲した長方形の形状、またはドーナッツ形状を有し得る。本明細書に記載するシステムで使用可能であるクロスフローフィルタの例として、ATF4フィルタ(Refine Technology)が挙げられる。追加のクロスフローフィルタは本明細書に記載されており、当技術分野において公知である。
)に流入できるようにする濾過液導管と流体連結し得る。いくつかの実施形態では、2つまたはそれ以上のTFFユニットが、単一のハウジング(例えば、本明細書に記載する任意のまたは当技術分野において公知の代表的種類のハウジングのいずれか)内に配置可能である。
本明細書に記載するシステムは、1つまたはそれ以上のポンプを含み得る。いくつかの例では、1つまたはそれ以上のポンプは、低乱流ポンプ(LTP)である。LTPは、流体(例えば、細胞培養物)内で相当量の剪断応力および/または流体の乱れを誘発することなく、単一の方向(例えば、第1もしくは第2の流れの向き)で流体(例えば、細胞培養物)を移動させる、または流体(例えば、細胞培養物)を、2つの方向(第1および第2の流れの向き)で反転可能に移動させることが可能なポンプである。LTPが、第1および第2の流れの向きを切り替えて、流体(例えば、細胞培養物)を流通させるのに用いられる際には、第2の流れの向きは、第1の流れの向きとほぼ逆方向ある。
mm、約5mm~約140mm、約5mm~約120mm、約5mm~約100mm、約5mm~約80mm、約5mm~約60mm、約5mm~約55mm、約5mm~約50mm、約5mm~約45mm、約5mm~約40mm、約5mm~約35mm、約5mm~約30mm、約5mm~約25mm、約5mm~約20mm、約5mm~約15mm、約5mm~約10mm、約1mm~約10mm、約10mm~約60mm、約10mm~約35mm、約10mm~約25mm、約10mm~約20mm、約20mm~約60mm、約20mm~約50mm、または約30mm~約50mm)のチューブを有し得る。蠕動ポンプ内のチューブの壁直径は、約1mm~約30mm(例えば、約1mm~約25mm、約1mm~約20mm、約1mm~約18mm、約1mm~約16mm、約1mm~約14mm、約1mm~約12mm、約1mm~約10mm、約1mm~約8mm、約1mm~約6mm、または約1mm~約5mm)であり得る。本発明のシステムおよび方法で使用可能である蠕動ポンプの例として、Watson Marlow 620、およびWatson Marlow 800ポンプが挙げられる。本明細書に記載するどの蠕動ポンプも、ツインチャンネルを有し、および/またはGORE Sta-Pureチューブ(例えば、内径が16mm、および壁が4mmのチューブ)を含み得る。
濾過液貯蔵タンクは、場合により、例えば濾過液を収納するためにシステムに含めることができる。例えば、濾過液は、約1時間~約1週間(例えば、約1時間~約6日間、約1時間~約5日間、約1時間~約4日間、約1時間~約3日間、約1時間~約2日間、約1時間~約36時間、約1時間~約24時間、約1時間~約20時間、約1時間~約16時間、約1時間~約12時間、または約1時間~約6時間)収納可能である。濾過液貯蔵タンクの内部容積は、約50mL~約50L(例えば、約50mL~約45L、約50mL~約40L、約50mL~約35L、約50mL~約30L、約50mL~約25L、約50mL~約20L、約50mL~約18L、約50mL~約16L、約50mL~約14L、約50mL~約12L、約50mL~約10L、約50mL~約9L、約50mL~約8L、約50mL~約7L、約50mL~約6L、約50mL~約5L、約50mL~約4.5L、約50mL~約4.0L、約50mL~約3.5L、約50mL~約3.0L、約50mL~約2.5L、約50mL~約2.0L、約50mL~約1.5L、約50mL~約1.0L、約100mL~約1.0L、または約500mL~約1.0L)であり得る。濾過液貯蔵タンクの内部表面は、生体適合性材料(例えば、当技術分野に
おいて公知の任意の生体適合性材料)を含み得る。濾過液貯蔵タンクは、約10℃~約35℃(例えば、約10℃~約30℃、約10℃~約25℃、約10℃~約20℃、約10℃~約15℃、または約15℃~約25℃)の温度で、濾過液を収納する能力を有する冷蔵貯蔵タンクであり得る。当業者なら理解できるように、いくつかの異なる市販貯蔵タンクが、本明細書に記載するシステムおよび方法において濾過液貯蔵タンクとして使用可能である。
本明細書に記載するシステムのいくつかの例は、1つまたはそれ以上(例えば、2、3、4、または5つ)の流量計を含み得る。例えば、1つまたはそれ以上の流量計は、システム内の1つまたはそれ以上の任意の導管内に配置可能である(例えば、第1の導管、第2の導管、隣接したTFFユニット間の1つもしくはそれ以上の導管、および/または濾過液導管)。例えば、流量計は、2つの隣接したTFFユニット間に配置可能である。いくつかの例では、流量計は、非侵襲的である。当業者は、本発明のシステムおよび方法で使用可能である多様な市販の流量計を理解する。例えば、EM-TEC BioProTT非侵襲式リアルタイム流量計、PT878超音波流量計(Rshydro)、およびSono-Trak超音波非侵襲式流量計(EMCO)が、本発明のシステムおよび方法で使用可能な市販の流量計である。
本明細書に記載するシステムは、1つまたはそれ以上の圧力センサを含み得る。例えば、1つまたはそれ以上の圧力センサは、システム内の導管のいずれか(例えば、第1の導管、第2の導管、隣接したTFFユニット間の1つもしくはそれ以上の導管、および/または濾過液導管)内に配置可能である。例えば、圧力センサは、システム内の2つの隣接したTFFユニット間に配置可能である。当業者は、本発明のシステムおよび方法で使用可能である多様な市販の圧力センサを理解する。本明細書に記載するシステムおよび方法で使用可能である圧力センサの非限定的な例として、PendoTECH PressureMAT圧力センサが挙げられる。
本明細書に記載するどのシステムも、場合により、第1または第2の導管と、第1または第2の導管それぞれをポートと流体連結させる該ポートとの間にポート導管を含むことができる。ポートは、流体(例えば、細胞培養物または洗浄溶液)をシステムに送達する、またはシステムから除去する(第1または第2の導管それぞれを通じて)のに使用可能である。クランプは、ポート導管内に配置可能である。多様な、適するクランプが、当技術分野において公知である(例えば、スクリュークランプ)。ポート導管は、導管について上記した特徴の任意の組合せを有し得る。ポートは、当技術分野において一般的に公知の任意の種類のポートであり得る。例えば、ポートは注入ポートであり得る、またはリブ付きスレッド(ribbed threading)を有し得る。
本明細書に記載するどのデバイスも、入口および出口を有する少なくとも1つ(例えば、2、3、または4つ)のマルチカラムクロマトグラフィシステム(MCCS)、ならびにTFFユニットまたは濾過液貯蔵タンクの間の濾過液導管を含む、生物学的製造システムを含み得るが、この場合、該デバイスは、濾過液が、生物学的製造システムの入口に流入し、少なくとも1つのMCCSを通過し、生物学的製造システムの出口を通じて該デバイスから退出するように構成される。MCCSは、2つもしくはそれ以上のクロマトグラフィカラム、2つもしくはそれ以上のクロマトグラフ用メンブレン、または少なくとも1つのクロマトグラフィカラムと少なくとも1つのクロマトグラフ用メンブレンとの組合せを含み得る。非限定的な例では、MCCSは、4つのクロマトグラフ用カラム、3つのク
ロマトグラフ用カラムとクロマトグラフ用メンブレン、3つのクロマトグラフ用カラム、2つのクロマトグラフ用カラム、2つのクロマトグラフ用メンブレン、および2つのクロマトグラフ用カラムと1つのクロマトグラフ用メンブレンを含み得る。クロマトグラフィカラムおよび/またはクロマトグラフ用メンブレンの組合せの追加の例が、非限定的に、MCCSで用いられるものと、当業者は想像可能である。MCCS中に存在する個々のクロマトグラフィカラムおよび/またはクロマトグラフ用メンブレンは、同一であってもよく(例えば、形状、容積、樹脂、捕捉機構、およびユニット操作が同一)、異なってもよい(例えば、形状、容積、樹脂、捕捉機構、およびユニット操作が1つまたはそれ以上異なる)。MCCS中に存在する個々のクロマトグラフィカラムおよび/またはクロマトグラフ用メンブレンでは、実施するユニット操作(例えば、捕捉、精製、ポリッシング、ウイルスの不活性化、組み換え治療用タンパク質を含む流体のイオン濃度および/もしくはpHの調整、または濾過のユニット操作)は同一であってもよく、異なってもよい(例えば、捕捉、精製、ポリッシング、ウイルスの不活性化、組み換え治療用タンパク質を含む流体のイオン濃度および/またはpHの調整、ならびに濾過等からなる群より選択されるユニット操作が異なる)。
ic binding capacity)ではなく、その静的結合容量(static
binding capacity)近傍で負荷できるようにする。連続的な循環および溶出の結果として、PCCSに流入する流体は、連続的に処理され、組み換え治療用タンパク質を含む溶出物が連続的に生成される。
いて実施可能であり、同MCCSは、生物学的製造システム内の1つまたはそれ以上のMCCS内には、少なくとも1つのリザーバ(例えば、ブレークタンク)または最大1、2、3、4、または5つのリザーバ(例えば、ブレークタンク)を含む。例えば、このユニット操作を達成するのに使用可能であるリザーバ(例えば、ブレークタンク)は、約1mL~約1L(例えば、約1mL~約800mL、約1mL~約600mL、約1mL~約500mL、約1mL~約400mL、約1mL~約350mL、約1mL~約300mL、約10mL~約250mL、約10mL~約200mL、約10mL~約150mL、および約10mL~約100mL)の容積をそれぞれ有し得る。本明細書に記載する生物学的製造システムで用いられるリザーバ(例えば、ブレークタンク)の容量は、例えば1mLと約300mLとを含めてこれらの間、例えば1mLと約280mL、約260mL、約240mL、約220mL、約200mL、約180mL、約160mL、約140mL、約120mL、約100mL、約80mL、約60mL、約40mL、約20mL、または約10mLとを含めこれらの間であり得る。生物学的製造システム内のリザーバ(例えば、ブレークタンク)は、それぞれ、少なくとも10分間(例えば、少なくとも20分間、少なくとも30分間、少なくとも1時間、少なくとも2時間、少なくとも4時間、または少なくとも6時間)組み換え治療用タンパク質を含む流体を保持することができる。他の例では、生物学的製造システム内のリザーバ(例えば、ブレークタンク)は、総時間として、例えば約5分と約6時間未満とを含めこれらの間、例えば、約5分と約5時間、約4時間、約3時間、約2時間、約1時間、または約30分とを含めこれらの間、治療用タンパク質を保持するに過ぎない。生物学的製造システム内のリザーバ(例えば、ブレークタンク)は、組み換え治療用タンパク質を含む流体の保持および冷蔵(例えば、25℃未満、15℃未満、または10未満の温度)の両方で使用可能である。リザーバは、円形シリンダー、楕円形シリンダー、またはほぼ長方形の封止されたおよび非透過性のバッグを含む任意の形状を有し得る。
治療用タンパク質を含む流体と比較して、それよりもイオン(例えば、塩)濃度が高いもしくは低い、および/またはMCCS(例えば、第1または第2のMCCS)内の少なくとも1つのクロマトグラフ用カラム、もしくは少なくとも1つのクロマトグラフ用メンブレン中に存在する樹脂に結合する組み換え治療用タンパク質と競合する薬剤の濃度が高いもしくは低い)。
本明細書に記載するシステムは、下記の利点のうちの1つまたはそれ以上(例えば、2、3、4、5、6、または7つ)を有する細胞培養物の連続濾過をもたらす:他の一方向開回路濾過システム(例えば、一方向TFFシステム)または二方向閉回路濾過システム(閉回路ATF(商標)システム)と比較したときの、細胞培養物の外部容積(リザーバの外部)の低減、交換分画(第1の導管、TFFユニット、および第2の導管内)の増加、細胞培養物の外部滞留時間(リザーバ外部)の短縮、細胞培養物濾過中の剪断応力の低下、細胞培養物の細胞生存率の改善、細胞培養物の生存細胞密度の向上、およびフィルタ汚損の減少。
交換分画=交換容積/外部容積 (式1)
外部滞留時間=外部容積/(交換速度×交換分画) (式2)
、約7を上回る、約8を上回る、約9を上回る、約10を上回る、約11を上回る、約12を上回る、約13を上回る、約14を上回る、約15を上回る、約16を上回る、約17を上回る、約18を上回る、約19を上回る、約20を上回る、約21を上回る、約22を上回る、約23を上回る、約24を上回る、約25を上回る、約50を上回る、約75を上回る、約100を上回る、約125を上回る、約150を上回る、約175を上回る、約200を上回る、約225を上回る、約250を上回る、約275を上回る、約300を上回る、約325を上回る、約350を上回る、約375を上回る、約400を上回る、約425を上回る、約450を上回る、約475を上回る、約500を上回る、約525を上回る、約550を上回る、約575を上回る、または約600を上回る)、または約5~約600(例えば、約10~約550、約10~約500、約10~約450、約10~約400、約10~約350、約10~約300、約10~約250、約10~約200、約10~約150、約10~約100、または約10~約50)のXR:PR比をもたらす。
細胞培養物を処理する方法であって、(a)開回路濾過システムを提供する工程(例えば、本明細書に記載する開回路濾過システムのいずれか)、(b)細胞培養物を、リザーバからTFFユニットを通じて、第1の流れの向きで第1の期間、流通させる工程、(c)第1の流れの向きを反転させ、細胞培養物を、TFFユニットを通じて、第2の流れの向きで第2の期間、流通させる工程、(d)第2の流れの向きを反転させ、そして培養物を、TFFユニットを通じて、第1の流れの向きで第3の期間、流通させる工程、(e)工程(c)~(d)を少なくとも2回(例えば、少なくとも3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、または100回、または100回超)繰り返す工程、および(f)濾過液を収集する工程を含む方法も提供される。これらの方法の様々な代表的な態様を以下に記載する。
本明細書に提示する方法において処理される細胞培養物は、液体培養培地中に複数の任意の種類の哺乳動物細胞を含み得る。本明細書に記載するすべての方法のいくつかの例では、哺乳動物細胞は、懸濁培養で増殖する細胞である。他の例では、哺乳動物細胞は、接着細胞(例えば、潅流バイオリアクタ内で増殖するのに、マイクロキャリア等の固体基質を必要とする細胞)である。細胞培養物中に存在し得る哺乳動物細胞の非限定的な例として、下記の細胞が挙げられる:チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞(例えば、CHO DG44細胞、CHO-K1細胞、Sp2.0、ミエローマ細胞(例えば、NS/0)、B細胞、ハイブリドーマ細胞、T細胞、ヒト胚性腎(HEK)細胞(例えば、HEK 293EおよびHEK 293F)、アフリカミドリザル腎上皮細胞(Vero)、およびMadin-Darbyイヌ(コッカー・スパニエル)腎上皮細胞(MDCK)。細胞培養物中に存在し得る追加の哺乳動物細胞は、当技術分野において公知である。
6個/mLを上回る、細胞約100.0×106個/mLを上回る、細胞約105.0×106個/mLを上回る、細胞約110.0×106個/mLを上回る、細胞約120.0×106個/mLを上回る、細胞約125.0×106個/mLを上回る、細胞約130.0×106個/mLを上回る、細胞約135.0×106個/mLを上回る、細胞約140.0×106個/mLを上回る、細胞約145.0×106個/mLを上回る、細胞約150.0×106個/mLを上回る、細胞約155.0×106個/mLを上回る、細胞約160.0×106個/mLを上回る、細胞約170.0×106個/mLを上回る、細胞約175.0×106個/mLを上回る、細胞約180.0×106個/mLを上回る、細胞約185.0×106個/mLを上回る、細胞約190.0×106個/mLを上回る、細胞約195.0×106個/mLを上回る、細胞約200.0×106個/mLを上回る、細胞約205.0×106個/mLを上回る、細胞約210.0×106個/mLを上回る、細胞約215.0×106個/mLを上回る、細胞約220.0×106個/mLを上回る、細胞約225.0×106個/mLを上回る、細胞約230.0×106個/mLを上回る、細胞約235.0×106個/mLを上回る、細胞約240.0×106個/mLを上回る、細胞約245.0×106個/mLを上回る、または約細胞250.0×106個/mLを上回る生存細胞密度を含み得る。いくつかの例では、細胞培養物は、細胞約30×106個/mL~細胞約100×106個/mL(例えば、細胞約30×106個/mL~細胞約95×106個/mL、細胞約30×106個/mL~細胞約90×106個/mL、細胞約30×106個/mL~細胞約85×106個/mL、細胞約35×106個/mL~細胞約80×106個/mL、細胞約40×106個/mL~細胞約80×106個/mL、細胞約40×106個/mL~細胞約60×106個/mL、または細胞約60×106個/mL~細胞約80×106個/mL)の生存細胞濃度を有する。いくつかの例では、細胞培養物は、細胞約110×106個/mL~細胞約250×106個/mL(例えば、細胞約110×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約190×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約180×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約170×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約160×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約150×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約140×106個/mL、細胞約110×106個/mL~細胞約130×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約190×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約180×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約170×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約160×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約150×106個/mL、細胞約120×106個/mL~細胞約140×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約190×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約180×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約170×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約160×106個/mL、細胞約130×106個/mL~細胞約150×106個/mL、細胞約140×
106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約190×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約180×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約170×106個/mL、細胞約140×106個/mL~細胞約160×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約190×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約180×106個/mL、細胞約150×106個/mL~細胞約170×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約190×106個/mL、細胞約160×106個/mL~細胞約180×106個/mL、細胞約170×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約170×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約170×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約170×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約170×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約170×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約170×106個/mL~細胞約190×106個/mL、細胞約180×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約180×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約180×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約180×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約180×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約180×106個/mL~細胞約200×106個/mL、細胞約190×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約190×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約190×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約190×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約190×106個/mL~細胞約210×106個/mL、細胞約200×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約200×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞
約200×106個/mL~細胞約230×106個/mL、細胞約200×106個/mL~細胞約220×106個/mL、細胞約210×106個/mL~細胞約250×106個/mL、細胞約210×106個/mL~細胞約240×106個/mL、細胞約220×106個/mL~細胞約240×106個/mL、または細胞約230×106個/mL~細胞約250×106個/mL)の生存細胞濃度を有する。
0L、約0.2L~約400L、約0.2L~約300L、約0.2L~約200L、約0.2L~約150L、約0.2L~約100L、約0.2L~約50L、または約0.2L~約10L)であり得る。
ルファーゼ、ルトロピンα、抗血友病因子、アガルシダーゼβ、インターフェロンβ-1a、ダルベポエチンα、テネクテプラーゼ、エタネルセプト、凝固因子IX、卵胞刺激ホルモン、イミグルセラーゼ、ドルナーゼα、エポエチンα、およびアルテプラーゼ。
Scientific、Inc.;Waltham、MA)、Ex-cell CD CHO融合培地(Sigma-Aldrich Co.;St.Louis、MO)、およびPowerCHO培地(Lonza Group,Ltd.;Basel、スイス)が挙げられる。やはり液体培養培地中に存在し得る培地成分として、化学的に定義された(CD)加水分解産物、例えばCDペプトン、CDポリペプチド(2つまたはそれ以上のアミノ酸)、およびCD増殖因子が挙げられるが、これらに限定されない。液体組織培養培地および培地成分の追加の例は、当技術分野において公知である。
本明細書に記載するどの開回路濾過システムも、提供される細胞培養物処理法で使用可能である。例えば、本明細書に記載する方法で用いられる開回路濾過システム内のバイオリアクタは、バイオリアクタ(例えば、当技術分野において公知の任意の潅流バイオリアクタ)であっても冷蔵貯蔵タンクであってもよい。本方法で用いられる開回路濾過システムは、生体適合性チューブである1つまたはそれ以上の導管(例えば、第1の導管、第2の導管、隣接したTFFユニット間の1つもしくはそれ以上の導管、および/または濾過液導管)を含み得る。いくつかの例では、開回路濾過システムは、リザーバおよび2つまたはそれ以上のサブシステム(本明細書に記載するような)を備える。
~約15L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約10L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約9L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約8L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約7L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約6L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約5L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約4L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約3L/m2/時間、約0.5L/m2/時間~約2L/m2/時間、または約0.8L/m2/時間~約1.2L/m2/時間の潅流フラックス速度をもたらす。いくつかの例では、少なくとも1つのポンプを使用すると、システム内の剪断速度は、約50s-1~約1000s-1(例えば、約50s-1~約950s-1、約50s-1~約900s-1、約50s-1~約850s-1、約50s-1~約800s-1、約50s-1~約750s-1、約50s-1~約700s-1、約50s-1~約650s-1、約50s-1~約600s-1、約50s-1~約550s-1、約50s-1~約500s-1、約50s-1~約450s-1、約50s-1~約400s-1、約50s-1~約350s-1、約50s-1~約300s-1、約50s-1~約250s-1、約50s-1~約200s-1、約50s-1~約150s-1、または約50s-1~約100s-1)となる。これらの方法で使用可能であるポンプの具体例として、16mmチューブを備えたWatson-Marlow 620蠕動ポンプ、または40mmチューブを備えたWatson-Marlow 800蠕動ポンプが挙げられる。
本明細書に記載する方法では、第1、第2、および/または第3の期間は、約20秒~約15分(例えば、約30秒~約15分、約20秒~約14分、約20秒~約13分、約20秒~約12分、約20秒~約11分、約20秒~約10分、約20秒~約9分、約20秒~約8分、約20秒~約7分、約20秒~約6分、約20秒~約5分、約20秒~約4分、約20秒~約3分、約20秒~約2分、約20秒~約115秒、約20秒~約110秒、約20秒~約105秒、約20秒~約100秒、約20秒~約95秒、約20秒~約90秒、約20秒~約85秒、約20秒~約80秒、約20秒~約75秒、約20秒~約70秒、約20秒~約65秒、約20秒~約60秒、約20秒~約55秒、約20秒~約50秒、約20秒~約45秒、約20秒~約40秒、約20秒~約35秒、約20秒~約30秒、約20秒~約25秒、約30秒~約90秒、約35秒~約85秒、約40秒~約80秒、約45秒~約75秒、約50秒~約70秒、約55秒~約65秒、約30秒~約14分、約30秒~約13分、約30秒~約12分、約30秒~約11分、約30秒~約10分、約30秒~約9分、約30秒~約8分、約30秒~約7分、約30秒~約6分、約30秒~約5分、約30秒~約4分、約30秒~約3分、約30秒~約2分、約30秒~約90秒、約30秒~約1分、約1分~約15分、約1分~約14分、約15分~約13分、約1分~約12分、約1分~約11分、約1分~約10分、約1分~約9分、約1分~約8分、約1分~約7分、約1分~約6分、約1分~約5分、約1分~約4分、約1分~約3分、約1分~約2分、または約1分~約90秒)であり得る。いくつかの例では、第1、第2、および第3の期間は、ほぼ同一である。他の例では、第1、第2、および第3の期間は、同一でない。
ザーバに戻す(例えば、約30秒~約60分間、約30秒~約50分間、約30秒~約40分間、約30秒~約30分間、約30秒~約20分間、約30秒~約15分間、約30秒~約10分間、または約30秒~約5分間)。かかる例では、第1の期間中の流れは、システム内の少なくとも1つのTFFユニット(およびその中の少なくとも1つのクロスフローフィルタ)を平衡化するのに用いられる。図8は、システム内の少なくとも1つのTFFユニットの平衡化を目的とする、第1の流れの向きでの細胞培養物の流れを示す概略図である。
秒、約5秒~約25秒、約5秒~約20秒、約5秒~約15秒、約5秒~約10秒)であり得る。
とも1つのTFFユニットの1つもしくはそれ以上のクロスフローフィルタ内のフィルタメンブレンを横切る圧力変化は、およそ、例えば約1時間~約100日の期間(例えば、約1時間~約95日の期間、約1時間~約90日の期間、約1時間~約85日の期間、約1時間~約80日の期間、約1時間~約75日の期間、約1時間~約70日の期間、約1時間~約65日の期間、約1時間~約60日の期間、約1時間~約55日の期間、約1時間~約50日の期間、約1時間~約45日の期間、約1時間~約40日の期間、約1時間~約35日の期間、約1時間~約30日の期間、約1時間~約25日の期間、約1時間~約20日の期間、約1時間~約15日の期間、約1時間~約10日の期間、約1時間~約5日の期間、約1日~約100日の期間、約1日~約90日の期間、約1日~約85日の期間、約1日~約80日の期間、約1日~約75日の期間、約1日~約70日の期間、約1日~約65日の期間、約1日~約60日の期間、約1日~約55日の期間、約1日~約50日の期間、約1日~約45日の期間、約1日~約40日の期間、約1日~約35日の期間、約1日~約30日の期間、約1日~約25日の期間、約1日~約20日の期間、約1日~約15日の期間、約1日~約10日の期間、約5日~約100日の期間、約5日~約95日の期間、約5日~約90日の期間、約5日~約85日の期間、約5日~約80日の期間、約5日~約75日の期間、約5日~約70日の期間、約5日~約65日の期間、約5日~約60日の期間、約5日~約55日の期間、約5日~約50日の期間、約5日~約45日の期間、約5日~約40日の期間、約5日~約35日の期間、約5日~約30日の期間、約5日~約25日の期間、約5日~約20日の期間、約5日~約15日の期間、約5日~約10日の期間、約10日~約100日の期間、約10日~約95日の期間、約10日~約90日の期間、約10日~約85日の期間、約10日~約80日の期間、約10日~約75日の期間、約10日~約70日の期間、約10日~約65日の期間、約10日~約60日の期間、約10日~約55日の期間、約10日~約50日の期間、約10日~約45日の期間、約10日~約40日の期間、約10日~約35日の期間、約10日~約30日の期間、約10日~約25日の期間、約10日~約20日の期間、約15日~約100日の期間、約15日~約95日の期間、約15日~約90日の期間、約15日~約85日の期間、約15日~約80日の期間、約15日~約75日の期間、約15日~約70日の期間、約15日~約65日の期間、約15日~約60日の期間、約15日~約55日の期間、約15日~約50日の期間、約15日~約45日の期間、約15日~約40日の期間、約15日~約35日の期間、約15日~約30日の期間、約15日~約25日の期間、または約15日~約20日の期間)、本方法を実施している間、実質的に同一のままである(例えば、本方法開始時のフィルタファイバを横切る、またはフィルタメンブレンを横切る初期の圧力変化の約±20%以内、約±19%以内、約±18%以内、約±17%以内、約±16%以内、約±15%以内、約±14%以内、約±13%以内、約±12%以内、約±11%以内、約±10%以内、約±9%以内、約±8%以内、約±7%以内、約±6%以内、約±5%以内、約±4%以内、約±3%以内、約±2.5%以内、約±2.0%以内、約±1.5%以内、約±1.0%以内、または約±0.5%以内)。フィルタファイバまたはフィルタメンブレンを横切る圧力変化が有意に増加すれば、それはシステムの少なくとも1つのTFFユニット内の少なくとも1つのクロスフローフィルタの汚損を示す。
いくつかの実施形態は、哺乳動物細胞が組み換えタンパク質を組織培養培地中に分泌できるようにする条件下で、リザーバ(例えば、潅流バイオリアクタ)内の細胞培養物をインキュベーションする工程をさらに含む。例えば、リザーバ中の細胞培養物は、約32℃~約39℃の温度でインキュベーション可能である。当業者は、温度は、インキュベーション中の特定の時点において(例えば、時間毎または日毎に)変更可能であると認識する。例えば、温度は、細胞培養物をリザーバ中に配置した後、約1日、2日間、3日間、4日間、5日間、6日間、7日間、8日間、9日間、10日間、11日間、12日間、14日間、15日間、16日間、17日間、18日間、19日間、または約20日間以上経過
した時点で、変更またはシフト可能である(例えば、上昇または低下))。例えば、温度は上方にシフト可能である(例えば、最大または約0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、または10.0℃の変化)。例えば、温度は、下方にシフト可能である(例えば、最大または約0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、または10℃の変化)。リザーバ内の細胞培養物をインキュベーションする工程は、最大でまたは約1%~15%のCO2(例えば、最大でもしくは約14%のCO2、12%のCO2、10%のCO2、8%のCO2、6%のCO2、5%のCO2、4%のCO2、3%のCO2、2%のCO2、または最大でもしくは約1%のCO2)を含む雰囲気中でも実施可能である。さらに、本明細書に記載するどの方法も、加湿された雰囲気(例えば、少なくとももしくは約20%、30%、40%、50%、60%、70%、85%、80%、85%、90%、または少なくとももしくは約95%の湿度、または約100%の湿度)中で、細胞培養物をインキュベーションする工程を含み得る。
本明細書に記載するどの方法も、濾過液から分泌型組み換えタンパク質(例えば、本明細書に記載する組み換えタンパク質のいずれか)を単離する工程をさらに含み得る。流体からポリペプチド(例えば、分泌型ポリペプチド)を単離するための多くの方法が、当技術分野において公知である。例えば、組み換えタンパク質を単離するための方法は、以下の1つまたはそれ以上の工程を含み得る:組み換えタンパク質を含む流体を捕捉する工程、精製する工程、ポリッシングする工程、および/または濾過する工程。当技術分野において周知のように、組み換えタンパク質を単離するのに用いられる具体的な方法は、組み換えタンパク質の生物物理学的な特性に依存する。例えば、組み換え抗体は、タンパク質A樹脂を用いて抗体を捕捉する工程を用い、ある程度精製可能である。
本発明は、下記の実施例にさらに記載されるが、特許請求の範囲に記載されている本発明の範囲を制限するものではない。
本明細書に提示する開回路濾過システムにより達成される細胞培養物処理と、ATF(商標)(Refine Technology)(閉回路流通方向切り替え型タンジェント濾過システム)により達成される細胞培養物処理とを比較するために、一連の実験を実施した。これらの実験を実施するのに用いたデバイスを、図5に一般的に示す。特に、開回路濾過システムで用いたリザーバは、Broadly-James 15Lバイオリアクタであり、第1の導管および第2の導管は、生体適合性、内径0.5インチの溶接可能な移送チューブであり、TFFユニットは、単一の管状クロスフローフィルタ(長さ30cmおよび内径1mmであり、ならびに平均ポアサイズ0.2μmm、ファイバ密度830ファイバ/フィルタ、および濾過面積0.77m2を有するポリエーテルスルホンファイバから構成される)を含み、少なくとも1つのポンプは、第1および第2の流れの向きで流体を流通させる能力を有する単一のWatson-Marlow蠕動ポンプであり、そのポンプヘッド容積は50mL~100mLであり、内径16mmおよび壁直径4mmを有するツインチャンネルGORE Sta-Pureチューブを備えた。
本発明において提供される開回路濾過システムと、Refine Technology製ATF(商標)により達成される処理工程の比較で用いられた実験パラメータの要約を表3および4にまとめる(下記)。これらの実験を実施するのに用いられた方法のさらに詳細な要約を下記に提示する。
換えながら、細胞40×106個/mLに維持した。本明細書に提示する試験対象の開回路濾過システムは、ATF4と同一のフィルタおよびハウジングを備えたが、本システム(図5に示す)および開回路システム(ATF4で用いた閉じたシステムではない)を通じて細胞培養物を反転可能に流通させるために、ポンプヘッド容積が50mL~100mLのWatson-Marlow蠕動ポンプ620Duを、培養再循環ポンプとして用いた。ATF4バイオリアクタの潅流速度を、培養20日目に、2リアクタ容積/日から1リアクタ容積/日に変更し、一方、本明細書に提示する試験対象の開回路濾過システムの潅流速度を、32日目に、2リアクタ容積/日から1リアクタ容積/日に変更し、10%のEfficient Feed B(Gibco、Invitrogen)も補給した。
本明細書に提示する試験対象の開回路濾過システムの生存細胞密度は、9日目および10日目で細胞40×106個/mLに到達したが、対応するATFシステムよりも早期に細胞40×106個/mLの細胞密度に到達した(図10)。本明細書に提示する試験対象の開回路濾過システムの生存細胞の割合(%)は、培養が細胞40×106個/mLに到達したとき約90%であったが、70%で安定化するまで3週間にわたり継続的に減少した(図11)。本明細書に提示する試験対象の開回路濾過システム内の細胞培養物のキャパシタンスは、ATFシステム内の細胞培養物と比較して上昇したが(図12)、本明細書に提示する試験対象の開回路濾過システムの細胞培養物およびATFシステムの細胞培養物に由来する平均生存細胞直径は類似した(図13)。
本明細書に提示する開回路濾過システムを用いて達成される最高の生存細胞密度を決定
するために、また場合により、決定された生存細胞密度を、ATF(商標)(Refine Technology)(閉回路流通方向切り替え型タンジェント濾過システム)を類似した条件下で用いて達成される生存細胞密度と比較するために、実験を実施した。これらの実験で用いたデバイスを、図5に一般的に示す。特に、開回路濾過システムで用いたリザーバは、Broadly-James 15Lバイオリアクタであり、第1の導管および第2の導管は、生体適合性、内径0.5インチの溶接可能な移送チューブであり、TFFユニットは、単一の管状クロスフローフィルタ(長さ30cmおよび内径1mmであり、ならびに平均ポアサイズ0.2μmm、ファイバ密度830ファイバ/フィルタ、および濾過面積0.77m2を有するポリエーテルスルホンファイバから構成された)を含み、少なくとも1つのポンプは、第1および第2の流れの向きで流体を流通させる能力を有する単一のWatson-Marlow蠕動ポンプであり、そのポンプヘッド容積は50mL~100mLであり、内径16mmおよび壁直径4mmを有するツインチャンネルGORE Sta-Pureチューブを備えた。
本発明において提供される開回路濾過システム(および、場合によりRefine Technology製ATF(商標))を用いて達成することができる最高細胞密度を決定するための実験パラメータの要約を表5に示す。これらの実験で用いられた方法のさらに詳細な要約を下記に提示する。
本発明は、その詳細な説明と共に記載されてきたが、上記説明は、説明を目的としており、本発明の範囲を制限することを意図せず、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲により定義されるものと理解されたい。他の態様、長所、および修正形態も、下記の特許請求の範囲に含まれる。
Claims (17)
- 哺乳動物細胞培養物を処理する方法であって、
(a)開回路濾過システムを提供する工程であって、該システムは:
哺乳動物細胞培養物を含む冷蔵貯蔵タンクと、
第1および第2の入口を有するタンジェントフロー濾過(TFF)ユニットと、
冷蔵貯蔵タンクとTFFユニットの第1の入口との間で流体連通している第1の導管と、
冷蔵貯蔵タンクとTFFユニットの第2の入口との間で流体連通している第2の導管と、
該システムを通じて流体を流通させるための、該システム内に配置された少なくとも1つのポンプと、
を含み、
該システムは、
流体が、少なくとも1つのポンプを経由して、該システムを通じて冷蔵貯蔵タンクから、または冷蔵貯蔵タンクに向かって、
第1と第2の導管およびTFFユニットを通じて、反転可能に流通できるように、
濾過液が、TFFユニットから収集できるように構成されている、
工程と、
(b)哺乳動物細胞培養物を、冷蔵貯蔵タンクから第1と第2の導管およびTFFユニットを通じて、第1の流れの向きで第1の期間流通させる工程と、
(c)第1の流れの向きを反転させ、哺乳動物細胞培養物を、第1と第2の導管およびTFFユニットを通じて、第2の流れの向きで第2の期間流通させる工程と、
(d)第2の流れの向きを反転させ、哺乳動物細胞培養物を、第1と第2の導管およびTFFユニットを通じて、第1の流れの向きで第3の期間流通させる工程と、
(e)工程(c)~(d)を少なくとも2回繰り返す工程と、
(f)濾過液を収集する工程と、
を含む、前記方法。 - TFFユニットは、単一のクロスフローフィルタを含む、請求項1に記載の方法。
- TFFユニットは、2つまたはそれ以上のクロスフローフィルタを含む、請求項1に記載の方法。
- システムは、第1の導管、第2の導管、またはその両方に配置された1つまたはそれ以上の追加のTFFユニットを含む、請求項1に記載の方法。
- 少なくとも1つのポンプは、第1の導管もしくは第2の導管、またはその両方に配置されている、請求項1に記載の方法。
- 少なくとも1つのポンプは、任意の2つのTFFユニットの間でシステム内に配置されている、請求項4に記載の方法。
- 少なくとも1つのポンプは、冷蔵貯蔵タンク内に配置されている、請求項1に記載の方法。
- 少なくとも1つのポンプは、低乱流ポンプ(LTP)である、請求項1および5~7のいずれか1項に記載の方法。
- システムは、第1および第2のLTPを含み、該第1のLTPは、哺乳動物細胞培養物を第1の方向で流通させ、該第2のLTPは、哺乳動物細胞培養物を第2の方向で流通させる、請求項8に記載の方法。
- システムは、単一のLTPを含み、該単一のLTPは、哺乳動物細胞培養物を第1の方向で第1の期間および第3の期間中流通させ、哺乳動物細胞培養物を第2の方向で第2の期間中流通させる、請求項8に記載の方法。
- (i)濾過液は、哺乳動物細胞を含まない;および/または
(ii)哺乳動物細胞培養物は、分泌型組み換えタンパク質を含み、濾過液は、該分泌型組み換えタンパク質を含む、
請求項1に記載の方法。 - 分泌型組み換えタンパク質は、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、増殖因子、サイトカイン、もしくは酵素、またはその組合せである、請求項11に記載の方法。
- 酵素はα-ガラクトシダーゼである、請求項12に記載の方法。
- 分泌型組み換えタンパク質を濾過液から単離する工程をさらに含む、請求項11に記載の方法。
- 単離する工程は、1つまたはそれ以上のマルチカラムクロマトグラフィシステム(MCCS)を通じて単離する工程を含む、一体化した連続的なプロセスを用いて実行される、請求項14に記載の方法。
- 単離した組み換えタンパク質を、薬学的に許容される賦形剤またはバッファーと混合することにより、治療用原薬を処方する工程をさらに含む、請求項14に記載の方法。
- 哺乳動物細胞培養物もしくは濾過液、またはその両方は、滅菌状態にある、請求項1に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023017253A JP2023058588A (ja) | 2013-09-16 | 2023-02-08 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361878502P | 2013-09-16 | 2013-09-16 | |
US61/878,502 | 2013-09-16 | ||
JP2020073759A JP7008746B2 (ja) | 2013-09-16 | 2020-04-17 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020073759A Division JP7008746B2 (ja) | 2013-09-16 | 2020-04-17 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023017253A Division JP2023058588A (ja) | 2013-09-16 | 2023-02-08 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2022050549A JP2022050549A (ja) | 2022-03-30 |
JP7227406B2 true JP7227406B2 (ja) | 2023-02-21 |
Family
ID=51660627
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016542875A Active JP6925127B2 (ja) | 2013-09-16 | 2014-09-16 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
JP2020073759A Active JP7008746B2 (ja) | 2013-09-16 | 2020-04-17 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
JP2022001359A Active JP7227406B2 (ja) | 2013-09-16 | 2022-01-07 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
JP2023017253A Pending JP2023058588A (ja) | 2013-09-16 | 2023-02-08 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016542875A Active JP6925127B2 (ja) | 2013-09-16 | 2014-09-16 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
JP2020073759A Active JP7008746B2 (ja) | 2013-09-16 | 2020-04-17 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023017253A Pending JP2023058588A (ja) | 2013-09-16 | 2023-02-08 | 細胞培養物を処理する方法およびシステム |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20150158907A1 (ja) |
EP (1) | EP3047013B1 (ja) |
JP (4) | JP6925127B2 (ja) |
KR (3) | KR102369211B1 (ja) |
CN (2) | CN105722967B (ja) |
AU (3) | AU2014318420B2 (ja) |
BR (2) | BR122021001466B1 (ja) |
CA (1) | CA2924332C (ja) |
CY (1) | CY1124684T1 (ja) |
DK (1) | DK3047013T3 (ja) |
EA (2) | EA031652B1 (ja) |
ES (1) | ES2891728T3 (ja) |
HK (1) | HK1222672A1 (ja) |
HU (1) | HUE055888T2 (ja) |
IL (1) | IL244552B (ja) |
MX (2) | MX2016003440A (ja) |
SG (2) | SG10201803601SA (ja) |
WO (1) | WO2015039115A1 (ja) |
Families Citing this family (48)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2014218715B2 (en) | 2013-02-22 | 2019-12-12 | Genzyme Corporation | Microcarrier perfusion culturing methods and uses thereof |
CA2901950A1 (en) | 2013-02-22 | 2014-08-28 | Genzyme Corporation | Microcarrier perfusion culturing methods and uses thereof |
CA3140009C (en) * | 2014-05-13 | 2023-09-05 | Amgen Inc. | Process control systems and methods for use with filters and filtration processes |
TWI743024B (zh) | 2014-06-06 | 2021-10-21 | 美商健臻公司 | 灌注培養方法及其用途 |
TWI776235B (zh) | 2014-06-09 | 2022-09-01 | 美商健臻公司 | 種子罐培養法(seed train processes)及其用途 |
SG11201703265XA (en) * | 2014-10-24 | 2017-05-30 | Genzyme Corp | Integrated continuous isolation of fluid streams from sterile process vessels |
IL253071B2 (en) | 2014-12-22 | 2024-04-01 | Genzyme Corp | Methods for growing mammalian cells |
JP6457338B2 (ja) * | 2015-05-28 | 2019-01-23 | 株式会社日立製作所 | 液体還流容器、細胞濃縮装置及び細胞濃縮システム |
WO2017117218A1 (en) | 2015-12-30 | 2017-07-06 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods related to biologics |
ITUB20160272A1 (it) * | 2016-01-22 | 2017-07-22 | Univ Degli Studi Di Palermo | Bioreattore a perfusione autosufficiente monouso per crescite cellulari 3D |
US20200289987A1 (en) * | 2016-03-14 | 2020-09-17 | Pendotech | Processing System for Multiple Tangential Flow Filtration Stations in Bioprocessing Applications |
SG11201809051YA (en) * | 2016-04-15 | 2018-11-29 | Boehringer Ingelheim Int | Cell retention device and method |
EP3487981B1 (en) | 2016-07-19 | 2022-06-08 | The Automation Partnership (Cambridge) Limited | Liquid filtration and pump system |
US11560539B2 (en) | 2016-07-19 | 2023-01-24 | The Automation Partnership (Cambridge) Limited | Reversible liquid filtration system |
CN106047707B (zh) * | 2016-08-03 | 2018-11-13 | 广州赛泊泰生物技术有限公司 | 贴壁/悬浮型细胞培养单元、装置、***及方法 |
TWI675696B (zh) * | 2017-06-01 | 2019-11-01 | 美商Emd密理博公司 | 用於灌注應用之切向流過濾裝置 |
CN111212899B (zh) | 2017-10-16 | 2024-07-02 | 里珍纳龙药品有限公司 | 灌注生物反应器及相关使用方法 |
CN111417713B (zh) | 2017-11-22 | 2024-04-26 | 康宁股份有限公司 | 灌注生物反应器***及灌注细胞培养方法 |
US11932842B2 (en) | 2018-02-09 | 2024-03-19 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Bioprocessing apparatus |
US11414639B2 (en) | 2018-02-09 | 2022-08-16 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Bioprocessing vessel |
US11371007B2 (en) * | 2018-02-09 | 2022-06-28 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | System and method for fluid flow management in a bioprocessing system |
US11920119B2 (en) | 2018-02-09 | 2024-03-05 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Systems and methods for bioprocessing |
SG11202007439TA (en) * | 2018-02-09 | 2020-09-29 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Systems and methods for bioprocessing |
CN110241012B (zh) * | 2018-03-09 | 2022-11-01 | 嘉和生物药业有限公司 | 一种生物大分子上游分阶段截留的生产方法、生产模块及在生产中的应用 |
AU2019262624B2 (en) | 2018-05-04 | 2024-08-01 | Genzyme Corporation | Perfusion bioreactor with filtration systems |
WO2019229764A1 (en) * | 2018-06-01 | 2019-12-05 | Gennova Biopharmaceuticals Limited | Process for production of recombinant tnk-tpa by packed-bed perfusion system |
WO2020043550A1 (en) * | 2018-08-29 | 2020-03-05 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | System for filtration and associated method thereof |
MA53557A (fr) * | 2018-09-06 | 2021-09-15 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Procédés de culture cellulaire continue |
CN112703047A (zh) * | 2018-09-21 | 2021-04-23 | 思拓凡瑞典有限公司 | 灌注生物处理***和其操作方法 |
WO2020088180A1 (en) * | 2018-11-02 | 2020-05-07 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co., Ltd. | Cell culture process by intensified perfusion with continuous harvest and without cell bleeding |
US10647954B1 (en) | 2018-11-15 | 2020-05-12 | Flaskworks, Llc | Dendritic cell generating apparatus and method |
SG11202109015TA (en) * | 2019-04-01 | 2021-09-29 | Boehringer Ingelheim Int | Integrated and continuous recombinant protein manufacturing |
CN114072217A (zh) * | 2019-06-28 | 2022-02-18 | 信达生物制药(苏州)有限公司 | 组合式层析装置、无缝连接层析方法和生物制剂的纯化方法 |
US11566217B2 (en) * | 2019-08-13 | 2023-01-31 | Flaskworks, Llc | Duty cycle for cell culture systems |
IL292337A (en) | 2019-10-21 | 2022-06-01 | Flaskworks Llc | Cell culture systems and methods |
EP3878542A1 (en) * | 2020-03-11 | 2021-09-15 | Bayer AG | Filter membranes as antifoam level safeguards |
KR102230957B1 (ko) * | 2020-05-18 | 2021-03-23 | 경북대학교 산학협력단 | Ev 여과장치 |
US20220119759A1 (en) * | 2020-10-19 | 2022-04-21 | Emd Millipore Corporation | Cascade Tangential Flow Filtration Systems for Perfusion of Cell Culture |
US11357727B1 (en) | 2021-01-22 | 2022-06-14 | Pacira Pharmaceuticals, Inc. | Manufacturing of bupivacaine multivesicular liposomes |
US11278494B1 (en) | 2021-01-22 | 2022-03-22 | Pacira Pharmaceuticals, Inc. | Manufacturing of bupivacaine multivesicular liposomes |
US11033495B1 (en) | 2021-01-22 | 2021-06-15 | Pacira Pharmaceuticals, Inc. | Manufacturing of bupivacaine multivesicular liposomes |
CN112831416A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-05-25 | 上海睿钰生物科技有限公司 | 一种体外生命维持灌流培养***及其控制方法 |
EP4313356A2 (en) | 2021-04-16 | 2024-02-07 | Repligen Corporation | Filtration system and method |
WO2022229381A1 (en) * | 2021-04-29 | 2022-11-03 | Univercells Technologies Sa | Systems and methods for the continuous production and purification of biologics |
WO2023287707A1 (en) | 2021-07-15 | 2023-01-19 | Just-Evotec Biologics, Inc. | Bidirectional tangential flow filtration (tff) perfusion system |
EP4174164A1 (en) * | 2021-10-21 | 2023-05-03 | Alit Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | Biological filtration systems and controlling methods thereof |
EP4268943A1 (en) | 2022-04-27 | 2023-11-01 | Levitronix GmbH | A device for tangential flow filtration of a fluid |
WO2024092004A1 (en) * | 2022-10-26 | 2024-05-02 | National Resilience, Inc. | Bioreactor systems and methods of operating same |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070167612A1 (en) | 2005-12-06 | 2007-07-19 | Hua Zhou Joe X | Polishing steps used in multi-step protein purification processes |
US20090166290A1 (en) | 2006-03-28 | 2009-07-02 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Automated low volume crossflow filtration |
JP2009543565A (ja) | 2006-07-14 | 2009-12-10 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー.ブイ. | 細胞を培養する改善された方法 |
JP2010011792A (ja) | 2008-07-03 | 2010-01-21 | Hitachi Plant Technologies Ltd | 生体細胞の分離方法及び培養装置 |
US20110111486A1 (en) | 2004-01-12 | 2011-05-12 | Mayfair Technology Limited Liability Company d/b/a/ PendoTECH | Bioreactor systems and disposable bioreactor |
WO2012128703A1 (en) | 2011-03-18 | 2012-09-27 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Flexible bag for cultivation of cells |
WO2013124326A1 (de) | 2012-02-20 | 2013-08-29 | Bayer Technology Services Gmbh | Einweg abscheider zur rückhaltung und rückführung von zellen |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS60804A (ja) * | 1983-06-20 | 1985-01-05 | Poritetsukusu:Kk | ウルトラフイルタ装置 |
JPS6188872A (ja) * | 1984-10-09 | 1986-05-07 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 高濃度連続培養方法及び装置 |
US6022742A (en) * | 1986-11-26 | 2000-02-08 | Kopf; Henry B. | Culture device and method |
US4885087A (en) * | 1986-11-26 | 1989-12-05 | Kopf Henry B | Apparatus for mass transfer involving biological/pharmaceutical media |
US5030346A (en) * | 1988-01-15 | 1991-07-09 | Henry Filters, Inc. | Pump for filtration system |
US5401650A (en) * | 1990-10-24 | 1995-03-28 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Cloning and expression of biologically active α-galactosidase A |
JPH0531335A (ja) * | 1991-07-30 | 1993-02-09 | Toto Ltd | 分離膜洗浄方法 |
US6544424B1 (en) | 1999-12-03 | 2003-04-08 | Refined Technology Company | Fluid filtration system |
BRPI0312436A2 (pt) * | 2002-06-19 | 2016-06-28 | Northwest Biotherapeutics Inc | dispositivo de filtragem de fluxo tangencial e métodos para enriquecimento em leucócito |
KR101050585B1 (ko) * | 2004-03-05 | 2011-07-19 | 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. | 연속식 살포 및 교호 접선 흐름에 의한 세포 배양 방법 |
FR2925923B1 (fr) * | 2007-12-28 | 2009-12-18 | Michelin Soc Tech | Procede et dispositif de fabrication d'un cable a deux couches du type gomme in situ |
US9446354B2 (en) * | 2010-08-25 | 2016-09-20 | Repligen Corporation | Device, system and process for modification or concentration of cell-depleted fluid |
CA2861270C (en) * | 2012-01-18 | 2021-08-03 | Bayer Healthcare Llc | Perfusion bioreactor systems comprising a cell aggregate trap and methods of operating the same |
CN104640973A (zh) * | 2012-09-27 | 2015-05-20 | 通用电气健康护理生物科学股份公司 | 切向流动灌注*** |
-
2014
- 2014-09-16 JP JP2016542875A patent/JP6925127B2/ja active Active
- 2014-09-16 SG SG10201803601SA patent/SG10201803601SA/en unknown
- 2014-09-16 ES ES14780959T patent/ES2891728T3/es active Active
- 2014-09-16 CA CA2924332A patent/CA2924332C/en active Active
- 2014-09-16 BR BR122021001466-3A patent/BR122021001466B1/pt active IP Right Grant
- 2014-09-16 EP EP14780959.4A patent/EP3047013B1/en active Active
- 2014-09-16 DK DK14780959.4T patent/DK3047013T3/da active
- 2014-09-16 CN CN201480062402.2A patent/CN105722967B/zh active Active
- 2014-09-16 KR KR1020167009570A patent/KR102369211B1/ko active IP Right Grant
- 2014-09-16 MX MX2016003440A patent/MX2016003440A/es unknown
- 2014-09-16 AU AU2014318420A patent/AU2014318420B2/en active Active
- 2014-09-16 HU HUE14780959A patent/HUE055888T2/hu unknown
- 2014-09-16 BR BR112016005545-4A patent/BR112016005545B1/pt active IP Right Grant
- 2014-09-16 EA EA201690602A patent/EA031652B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-09-16 EA EA201892084A patent/EA035665B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-09-16 WO PCT/US2014/055897 patent/WO2015039115A1/en active Application Filing
- 2014-09-16 KR KR1020237033339A patent/KR20230142653A/ko active Search and Examination
- 2014-09-16 KR KR1020227006373A patent/KR20220031937A/ko not_active IP Right Cessation
- 2014-09-16 SG SG11201601899TA patent/SG11201601899TA/en unknown
- 2014-09-16 CN CN202110234907.4A patent/CN113444620B/zh active Active
-
2015
- 2015-02-20 US US14/627,674 patent/US20150158907A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-03-13 IL IL244552A patent/IL244552B/en active IP Right Grant
- 2016-03-16 MX MX2021007792A patent/MX2021007792A/es unknown
- 2016-09-13 HK HK16110802.9A patent/HK1222672A1/zh unknown
-
2020
- 2020-04-16 AU AU2020202568A patent/AU2020202568B2/en active Active
- 2020-04-17 JP JP2020073759A patent/JP7008746B2/ja active Active
-
2021
- 2021-05-14 US US17/321,128 patent/US20210269477A1/en active Pending
- 2021-10-13 CY CY20211100884T patent/CY1124684T1/el unknown
-
2022
- 2022-01-07 JP JP2022001359A patent/JP7227406B2/ja active Active
- 2022-08-25 AU AU2022221495A patent/AU2022221495A1/en active Pending
-
2023
- 2023-02-08 JP JP2023017253A patent/JP2023058588A/ja active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110111486A1 (en) | 2004-01-12 | 2011-05-12 | Mayfair Technology Limited Liability Company d/b/a/ PendoTECH | Bioreactor systems and disposable bioreactor |
US20070167612A1 (en) | 2005-12-06 | 2007-07-19 | Hua Zhou Joe X | Polishing steps used in multi-step protein purification processes |
US20090166290A1 (en) | 2006-03-28 | 2009-07-02 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Automated low volume crossflow filtration |
JP2009543565A (ja) | 2006-07-14 | 2009-12-10 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー.ブイ. | 細胞を培養する改善された方法 |
JP2010011792A (ja) | 2008-07-03 | 2010-01-21 | Hitachi Plant Technologies Ltd | 生体細胞の分離方法及び培養装置 |
WO2012128703A1 (en) | 2011-03-18 | 2012-09-27 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Flexible bag for cultivation of cells |
WO2013124326A1 (de) | 2012-02-20 | 2013-08-29 | Bayer Technology Services Gmbh | Einweg abscheider zur rückhaltung und rückführung von zellen |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Conversion of Bioreactors to Continuous Perfusion Using Hollow Fiber Cell Separators,Practical Aspects,Spectrum Laboratories, Inc,1989年,p.1-29,URL: www.spectrumlabs.com/lit/CPAG.pdf,URL: http://jp.spectrumlabs.com/lit/Bioreactors.pdf(日本語版) |
Katharina Blaschczok et al.,Chemie Ingenieur Technik,2012年11月19日,Vol.85, No.1-2,p.144-152 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7227406B2 (ja) | 細胞培養物を処理する方法およびシステム | |
US20200377850A1 (en) | Seed train processes and uses thereof | |
US11912739B2 (en) | Sterile chromatography and manufacturing processes | |
JP2024050754A (ja) | 哺乳類細胞の培養方法 | |
CA3034092A1 (en) | Methods of processing a fluid including a recombinant therapeutic protein and use thereof | |
RU2786997C2 (ru) | Процессы культивирования в системе посевных ферментеров и способы их применения | |
CN113242907A (zh) | 动物细胞、动物细胞的制造方法及靶蛋白的制造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220107 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220107 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230110 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230209 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7227406 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |