JP7031892B2 - 粒子状ターゲットの単離及び処理のための方法及び装置 - Google Patents
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Description
先端オリフィスと、処理液を含む内部キャビティとを有するキャピラリー、
前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
前記キャピラリーから液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ液を吸引することができる吐出/吸引要素、
を少なくとも備える装置を用いて、好ましくは基板上に配置された、粒子状ターゲットを単離及び処理する方法を提供することであって、
前記方法は、以下の工程を含む:
a.前記基板上に、単離及び処理すべき粒子状ターゲットを配置する工程;
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記粒子状ターゲットに近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程;
c.前記吐出/吸引要素を用いて、前記粒子状ターゲットを前記処理液中に実質的に封入するように、好ましくは前記キャピラリーの内部キャビティから、十分な量の処理液を吐出する工程;
d.前記処理液に封入された粒子状ターゲットを、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程;
e.前記処理液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記粒子状ターゲットを処理する工程。
先端オリフィスと、細胞溶解緩衝液を含む内部キャビティとを有するキャピラリー、
前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
前記キャピラリーから液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ液を吸引することができる吐出/吸引要素、
を少なくとも備える装置を用いて、好ましくは基板上に配置された、ターゲット細胞を単離及び溶解させる方法を提供することであって、
前記方法は、以下の工程を含む:
a.基板上に、単離及び溶解すべきターゲット細胞を配置する工程;
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記ターゲット細胞に近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程;
c.前記吐出/吸引要素を用いて、ターゲット細胞を前記細胞溶解緩衝液中に実質的に封入するように、好ましくは前記キャピラリーの内部キャビティから、十分な量の細胞溶解緩衝液を吐出する工程;
d.前記吐出/吸引要素を用いて、前記細胞溶解緩衝液中に封入されたターゲット細胞を、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程;
e.前記細胞溶解緩衝液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記ターゲット細胞を溶解させる工程、及び、任意で
f.前記細胞溶解緩衝液を中和するように、前記キャピラリーの内部キャビティに中和液を導入するか、又は、前記細胞溶解緩衝液を中和するように、好ましくは中和液を含むレシピエントに前記ターゲット細胞溶解物を吐出する工程。
先端オリフィスと、タンパク質分解緩衝液(proteolytic buffer)を含む内部キャビティとを有するキャピラリー、
前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
前記キャピラリーから前記タンパク質分解緩衝液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ前記タンパク質分解緩衝液を吸引することができる吐出/吸引要素、
を少なくとも備える装置を用いて、好ましくは基板上に配置された、ターゲット細胞を単離及びタンパク質分解処理する(proteolytically treating)方法を提供することであって、
前記方法は、以下の工程を含む:
a.基板上に、単離及びタンパク質分解処理すべきターゲット細胞を配置する工程;
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記ターゲット細胞に近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程;
c.前記吐出/吸引要素を用いて、前記ターゲット細胞を前記タンパク質分解緩衝液中に実質的に封入するように、好ましくは前記キャピラリーの内部キャビティから、十分な量のタンパク質分解緩衝液を吐出する工程;
d.前記吐出/吸引要素を用いて、前記タンパク質分解緩衝液中に封入されたターゲット細胞を、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程;
e.前記タンパク質分解緩衝液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記ターゲット細胞をタンパク質分解処理する工程、及び、任意で
f.前記タンパク質分解緩衝液を中和するように、前記キャピラリーの内部キャビティに中和液を導入するか、又は、前記タンパク質分解緩衝液を中和するように、好ましくは中和液を含むレシピエントに前記タンパク質分解処理したターゲット細胞を吐出する工程。
a.先端オリフィスと、処理液を含むように構成された内部キャビティとを有するキャピラリー、
b.前記キャピラリーの先端オリフィスを、前記粒子状ターゲットに近接させて位置決め可能に構成された位置決め要素、
c.前記キャピラリーから処理液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ処理液を吸引するように構成された吐出/吸引要素。
a.先端オリフィスと、細胞溶解緩衝液を含むように構成された内部キャビティとを有するキャピラリー、
b.前記キャピラリーの先端オリフィスを、前記細胞に近接させて位置決め可能に構成された位置決め要素、
c.前記キャピラリーから前記細胞溶解緩衝液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ前記細胞溶解緩衝液を吸引するように構成された吐出/吸引要素。
a.先端オリフィスと、タンパク質分解緩衝液を含むように構成された内部キャビティとを有するキャピラリー、
b.前記キャピラリーの先端オリフィスを、前記細胞に近接させて位置決め可能に構成された位置決め要素、
c. 前記キャピラリーから前記タンパク質分解緩衝液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ前記タンパク質分解緩衝液を吸引するように構成された吐出/吸引要素。
先端オリフィスと、処理液を含む内部キャビティとを有するキャピラリー、
前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
前記キャピラリーから液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ液を吸引することができる吐出/吸引要素、
を少なくとも備える装置を用いて、配置された粒子状ターゲット、特に単一粒子状ターゲットを単離及び処理する方法を提供することであって、
前記方法は、以下の工程を含む:
a.単離及び処理すべき粒子状ターゲットを配置する工程;
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記粒子状ターゲットに近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程;
c.前記吐出/吸引要素を用いて、前記粒子状ターゲットを前記処理液中に封入するように、ある量の処理液を吐出する工程;
d.前記処理液に封入された粒子状ターゲットを、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程;
e.前記処理液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記粒子状ターゲットを処理する工程、及び、任意で
f.前記処理液を中和するように、前記キャピラリーの内部キャビティに中和液を導入するか、又は、前記処理液を中和するように、好ましくは中和液を含むレシピエントに前記粒子状ターゲットを吐出する工程。
先端オリフィスと、処理液を含む内部キャビティと、統合モニタリングエリアとを有するキャピラリー、
キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
キャピラリーから液体を吐出するとともに、キャピラリーへ液体を吸引することができる吐出/吸引要素、
キャピラリーの統合モニタリングエリアを介して、キャピラリーの内部キャビティ内での粒子状ターゲットの処理をモニタリングすることができるモニタリング要素、
を少なくとも備える装置を用いて、粒子状ターゲット、特に、細胞等の単一粒子状ターゲットを単離及び処理する方法を提供することであって、前記方法は、以下の工程を含む:
a.単離及び処理すべき粒子状ターゲットを配置する工程;
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記粒子状ターゲットに近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程;
c.前記吐出/吸引要素を用いて、前記粒子状ターゲットを前記処理液中に封入するように、ある量の処理液を吐出する工程;
d.前記処理液に封入された前記粒子状ターゲットを、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程;
e.前記処理液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記粒子状ターゲットを処理する工程、
f.前記モニタリング要素を用いて、前記キャピラリーの内部キャビティ内での前記粒子状ターゲットの処理が完了したかどうかを決定する工程、及び、そうであれば、任意で、
f.前記処理液を中和するように、前記キャピラリーの内部キャビティに中和液を導入するか、又は、前記処理液を中和するように、好ましくは中和液を含むレシピエントに前記粒子状ターゲットを吐出する工程。
2 粒子状ターゲット
3 キャピラリー
4 内部キャビティ
Claims (12)
- 先端オリフィスと、処理液を含む内部キャビティとを有するキャピラリー、
前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
前記キャピラリーから処理液を吐出し、前記キャピラリーへ処理液を吸引することができる吐出/吸引要素、
を少なくとも備えた装置を用いて、粒子状ターゲットを単離及び処理する方法であって、
a.単離及び処理すべき粒子状ターゲットを配置する工程、
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記粒子状ターゲットに近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程、
c.吐出される前記処理液の体積を10~500nlの範囲として、前記粒子状ターゲットを処理液中に封入するように、前記処理液を吐出する工程、
d.前記処理液中に封入された前記粒子状ターゲットを、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程、
e. 前記処理液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記粒子状ターゲットを処理する工程
を含み、
前記粒子状ターゲットが、単一細胞又はその凝集体であることを特徴とする方法。 - 細胞を単離及び処理する方法であって、前記処理液が増殖培養液でない、請求項1に記載の方法。
- 粒子状ターゲットを単離及び処理する方法であって、前記処理液が、細胞溶解緩衝液、又はタンパク質分解処理緩衝液である、請求項1又は2に記載の方法。
- 粒子状ターゲットを単離及び処理する方法であって、前記キャピラリーのオリフィスは、前記キャピラリーのオリフィスが前記粒子状ターゲットの少なくとも20μm以内の位置にくるように位置決めされ、及び/又は、前記粒子状ターゲットの大きさは、100nm~100μmであり、及び/又は、前記先端オリフィスの直径が、1μm~1000μmの範囲である、請求項1~3のいずれかに記載の方法。
- 粒子状ターゲットを単離及び処理する方法であって、前記粒子状ターゲットは、顕微鏡スライド、CTCフィルター或はろ過膜、又は、細胞培養培地を含む細胞培養容器の底板上に配置される、請求項1~4のいずれかに記載の粒子状ターゲットを単離及び処理する方法。
- 先端オリフィスと、細胞溶解緩衝液を含む内部キャビティとを有するキャピラリー、
前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
前記キャピラリーから液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ液を吸引することができる吐出/吸引要素、
を少なくとも備えた装置を用いて、ターゲット細胞を単離及び溶解させる方法であって、
a.単離及び溶解すべきターゲット細胞を配置する工程、
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記ターゲット細胞に近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程、
c.前記吐出/吸引要素を用いて、吐出される前記細胞溶解緩衝液の体積を10~500nlの範囲として、前記ターゲット細胞を前記細胞溶解緩衝液中に封入するように、前記細胞溶解緩衝液を吐出する工程、
d.前記吐出/吸引要素を用いて、前記細胞溶解緩衝液中に封入された前記ターゲット細胞を、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程、
e.前記細胞溶解緩衝液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記ターゲット細胞を溶解させる工程
を含み、又は、
前記a~eの工程に加えて、
f.前記細胞溶解緩衝液を中和するように、前記キャピラリーの内部キャビティに中和液を導入するか、又は、前記細胞溶解緩衝液を中和するように、中和液を含むレシピエントに前記ターゲット細胞溶解物を吐出する工程を含み、
前記ターゲット細胞が、単一細胞又はその凝集体であることを特徴とする方法。 - 先端オリフィスと、タンパク質分解緩衝液を含む内部キャビティとを有するキャピラリー、
前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決め可能な位置決め要素、
前記キャピラリーから前記タンパク質分解緩衝液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ前記タンパク質分解緩衝液を吸引することができる吐出/吸引要素、
を少なくとも備えた装置を用いて、ターゲット細胞を単離及びタンパク質分解処理する方法であって、
a.単離及びタンパク質分解処理すべきターゲット細胞を配置する工程、
b.前記位置決め要素を用いて、前記キャピラリーの先端オリフィスが前記ターゲット細胞に近接するように、前記キャピラリーの先端オリフィスを位置決めする工程、
c.前記吐出/吸引要素を用いて、吐出される前記タンパク質分解緩衝液の体積を10~500nlの範囲として、前記ターゲット細胞を前記タンパク質分解緩衝液中に実質的に封入するように、前記タンパク質分解緩衝液を吐出する工程、
d.前記吐出/吸引要素を用いて、前記タンパク質分解緩衝液中に封入された前記ターゲット細胞を、前記キャピラリーの内部キャビティに吸引する工程、
e.前記タンパク質分解緩衝液を含む前記キャピラリーの内部キャビティ内で、前記ターゲット細胞をタンパク質分解処理する工程
を含み、又は、
前記a~eの工程に加えて、
f.前記タンパク質分解緩衝液を中和するように、前記キャピラリーの内部キャビティに中和液を導入するか、又は、前記タンパク質分解緩衝液を中和するように、中和液を含むレシピエントに前記タンパク質分解処理したターゲット細胞を吐出する工程を含み、
前記ターゲット細胞が、単一細胞又はその凝集体であることを特徴とする方法。 - 請求項1~7のいずれかに記載の方法であって粒子状ターゲットを単離及び処理する方法に用いられる装置であって、
a.先端オリフィスと、処理液が入るように構成された内部キャビティとを有するキャピラリー、
b.前記キャピラリーの先端オリフィスを、前記粒子状ターゲットに近接させて位置決め可能に構成された位置決め要素、
c.前記キャピラリーから10~500nlの処理液を吐出するとともに、前記キャピラリーへ処理液を吸引するように構成された吐出/吸引要素、
を少なくとも備え、
前記粒子状ターゲットが、単一細胞又はその凝集体であることを特徴とする装置。 - 前記キャピラリーは、前記キャピラリーの内部キャビティ内での粒子状ターゲットの処理のモニタリングを可能にするための統合モニタリングエリアをさらに備え、及び/又は、前記装置は、前記統合モニタリングエリアを介して、前記キャピラリーの内部キャビティ内での粒子状ターゲットの処理をモニタリングするように構成されたモニタリング要素をさらに備える、請求項8に記載の装置。
- i)前記モニタリング要素から、前記キャピラリーの内部キャビティ内での前記粒子状ターゲットの処理の進行を示す情報を受けとるように、及び、
ii)前記モニタリング要素から前記処理の完了を示す情報を受け取ると、前記吐出/吸引要素を制御することによって、前記キャピラリーから前記粒子状ターゲットを吐出するように構成された制御要素をさらに備える、請求項9に記載の装置。 - 超音波パルス又はレーザーパルス又は機械的作用により、基板から前記粒子状ターゲットを放出するように構成された放出要素をさらに備える、請求項8~10のいずれかに記載の装置。
- 少なくとも、前記キャピラリーの先端オリフィスは、さらに、ポリシロキサン層或は疎水性層、及び/又は親水性層で被覆される、請求項8~11のいずれかに記載の装置。
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