JP6963312B2 - 超強力ビンカアルカロイド:付加された分子の複雑さがチューブリンの二量体−二量体界面を更に破壊する - Google Patents
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Description
関連出願の相互参照
この出願は、参照によってその開示内容をここに援用する2016年5月31日に提出された米国特許出願第62/343,490号に対する優先権を主張する。
支援された研究又は開発
本発明は、米国国立衛生研究所(National Institutes of Health)により授与されたCA115526及びCA042056の下に政府の支援を受けて行われた。政府は本発明に一定の権利を有する。
本発明はビンカ抗癌薬及びそれらの使用を企図する。更に詳細には、本発明は、マイクロチューブリン構築の抑制及び癌細胞増殖のインビトロ抑制においてビンブラスチンに比べて約100倍高い効力を示す20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物の誘導体に関する。
最初はニチニチソウ植物[Vinca rosea Linn.、現在Cantharanthus roseus (L.) G. Don]から単離されたビンカアルカロイドは、インドリンを含有する5環系に結合したインドールを含有する4環系を含むインドール-インドリン二量体化合物のファミリーである。当該天然アルカロイドの2種、すなわちビンブラスチン及びビンクリスチンは、白血病、リンパ腫及び精巣癌の治療に重要な臨床薬である。半合成ビンカアルカロイド、ビンデシン(デアセチルビンブラスチンカルボキサミド)は、肺癌及び急性白血病の治療に使用され、メラノーマ、及び乳癌の治療に使われることは少ない[Goodman & Gilman’s The Pharmaceutical Basis of Therapeutics, Hardman et al. Eds., 9th ed., McGraw-Hill, 1257-1260, 1996]。
これらの3種のビンカアルカロイドはそれぞれ20’-ヒドロキシル基を含み、それを介してそれぞれ化学的に変化させて新しい置換基を導入することができる。本明細書で企図する化合物は、これらの20’-ヒドロキシビンカアルカロイドの誘導体とみなすことができ、本明細書では便宜上20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物と総称する。これらの3種の化合物の構造式を以下に示す。
スキーム1
ビンブラスチンのC20’部位及びそのヒドロキシル置換基が重要であることが分かったが、C20'置換基効果の前調査は、ひと握りのアルコールアシル化反応、C20’ヒドロキシル基の除去、及び特殊セットの超酸媒介官能化に限定されていた[Borman et al., In The Alkaloids; Brossi, A., Suffness, M., Eds.; Academic: San Diego, 1990, 37, 133-144]。さらなる研究によりC20’における体系的変更が可能になり、C20’アジド(5)又はその還元型アミン(6)の組み入れはビンブラスチンより100倍効力が低い化合物を与えるが、アミン(6)のC20’尿素(7)への変換はビンブラスチンと等しい細胞成長抑制活性を有する化合物を与えることが最初に実証された(上表)。[(a) Leggans et al., Org. Lett. 2012, 14, 1428;及び(b) Barker et al., J. Am. Chem. Soc. 2012, 134, 13588]。
ビンブラスチンの標的はチューブリンα/β二量体-二量体界面であり、ここでその結合が、反復ヘッドトゥーテールチューブリン結合に由来する微小管構築を不安定化する[レビュー:(a) Timasheff et al., Cellular Pharmacol. 1993, 1, S27; (b) Jordan et al., Nat. Rev. Cancer 2004, 4, 253;及びGigant et al., Nature 2005, 435, 519]。ビンブラスチンによるタンパク質-タンパク質相互作用のこの破壊は、候補としての該標的の考察又はレビューにおいて、おそらく標的同定が現代の関心に先行したので見落とされることが多いが、小分子と共に取り組むのにやりがいのある生物学的標的である。[(a) Arkin et al., Nat. Rev. Drug Discovery 2004, 3, 301; (b) Wells et al., Nature 2007, 450, 1001; (c) Yin,et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2005, 44, 4130; d) Meireles et al., Med. Chem. 2011, 11, 248; e) Boger et al., Chem. Int. Ed. 2003, 42, 4138]。
ビンブラスチン上の新しく付加された直鎖状の堅いC20’尿素置換基は伸長して、ビンブラスチン結合部位に隣接する狭小チャネルを作り出し、チューブリンの二量体-二量体界面によって画定されるタンパク質-タンパク質相互作用のこの隣接領域を横切って結合し、更にチューブリンα/βヘッドトゥーテール二量体-二量体相互作用を破壊し、結合部位の遠位側の全タンパク質-タンパク質界面接触溶媒に広がることが示唆される。既に複雑な天然物に付加された構造要素(付加された分子の複雑さ)による標的タンパク質-タンパク質相互作用のこのさらなる破壊が、該分子の機能特性を実質的に改善するための独特かつ合理的な手法となり、タンパク質-タンパク質相互作用を標的にする他の天然物の特性を改善する一般的手法となる可能性がある。
本発明は、20’位にて尿素基で置換され、20’位の炭素原子に直接結合している尿素基の近位窒素原子が二級であり、かつ尿素基の遠位窒素がイソインドリンの環原子である20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物(本明細書では20'-尿素と呼ぶこともある)、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン又はビンデシン等を企図する。これらの近位及び遠位窒素を、20’位近傍の原子及び近位尿素窒素を介して20’炭素原子に結合している尿素誘導体を示す企図化合物の下記部分構造で図解する。遠位尿素窒素はイソインドリン環構造の一部として示されている。
本明細書では、ビンブラスチンより驚くべく100倍高い効力を示す、この後者系列の化合物の発見を報告する。該化合物は、ビンブラスチン感受性腫瘍細胞株(例えば、HCT116)に対して50〜75pMのIC50を示した。これはビンビラスチンに比べて100倍の上昇に相当する。臨床的に観察されたPgp過剰発現の理由でビンブラスチンに非感受性の耐性腫瘍細胞株に対してさえナノモル濃度未満の活性を示した(HCT116/VM46、IC50=830〜880pM)。これはビンブラスチンに対して700倍の上昇に相当する。
一態様では、本発明は、下記構造式Aの20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体を企図する。
W、X、Y及びZの1つが窒素であるのが好ましい。従って、好ましい6員芳香族R基は2個の環窒素原子を含む。例示R基は、以下に示す構造式の1つ以上を有する。
特に好ましいビンブラスチン誘導体(本明細書ではC20’-置換ビンブラスチン尿素と呼ぶこともある)は、構造が下記構造式Bに相当し、
企図発明の別の態様は、癌性細胞の成長の抑制方法である。この態様によれば、白血病細胞又は癌細胞等の癌性細胞が、癌性細胞増殖抑制量の構造式Aの20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物、例えば構造式Bの化合物、又はどちらかの式の化合物の医薬的に許容される塩と接触する。当該接触は典型的に複数回行なわれる。当該接触はインビボ又はインビトロで行なうことができる。
本発明及び関連請求項の文脈では、下記用語は下記意味を有する。
本明細書では、冠詞「a」及び「an」を用いて、該冠詞の文法上の目的語の1つ又は1つより多く(すなわち、少なくとも1つ)を指す。例として、「an element」は、1つの要素又は1つより多くの要素を意味する。
本明細書では、炭素と水素のみを含有する直鎖及び分岐鎖脂肪族基並びに脂環式基を含む非芳香族基の略語として単語「ヒドロカルビル」を用いる。従って、アルキル、アルケニル及びアルキニル基が企図され、フェニル及びナフチル基等の芳香族炭化水素も厳密に言えばヒドロカルビル基であるが、後述するように、本明細書ではこれらをアリール基と呼ぶ。
特定の脂肪族ヒドロカルビル置換基を意図する場合、当該基を列挙する;すなわち、C1-C4アルキル、メチル又はヘキセニル。例示ヒドロカルビル基は、1〜約6個の炭素原子、好ましくは1〜約4個の炭素原子の鎖を含有する。
特に好ましいヒドロカルビル基はアルキル基である。結果として、一般化したが、更に好ましい置換基は、本明細書で列挙する置換基のいずれでも記述語「ヒドロカルビル」を「アルキル」に置き換えて記載することができる。
アルキル基の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシル等が挙げられる。適切なアルケニル基の例としては、エテニル(ビニル)、2-プロペニル、3-プロペニル、1,4-ペンタジエニル、1,4-ブタジエニル、1-ブテニル、2-ブテニル、3-ブテニル、ヘキセニル、ヘキサジエニル等が挙げられる。アルキニル基の例としては、エチニル、2-プロピニル、3-プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、3-ブチニル等が挙げられる。
当業者は理解するように、C1アルケニル基のような存在し得ない置換基は単語「ヒドロカルビル」によって包含される意図ではないが、2個以上の炭素原子を有する該置換基は意図される。
単独又は組み合わせた用語「シクロヒドロカルビル」又は「炭素環式」は、3〜約8個の炭素原子、好ましくは約3〜約6個の炭素原子を含有し、かつ環式であるヒドロカルビル基を意味する。該シクロヒドロカルビル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘプチニル等が挙げられる。
天然物の特性改善への手法は典型的に半合成修飾、多岐にわたる全合成[Wilson et al., J. Org. Chem. 2006, 71, 8329]、又は後期官能化を介してそれらの構造を単純化又は編集する努力を必要とする[レビュー:(a) Szpilman et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2010, 49, 9592;及び(b) Hong, J. Chem. Eur. J. 2014, 20, 10204]。該努力は、包埋ファルマコフォアを特定するか、キーとなる官能基を除去若しくは導入して標的結合親和性を高めるか、物理化学的性質を改善するか、安定化修飾を組み入れるか、又は配座制約を導入することを目指すことが多い。ここで行なったように分子の複雑さをコア構造に付加することは、仮にあるとしても、まれにしか考えられない。
当該不本意は、部分的に、より精巧な化合物合成を伴い得る認知された追加課題に起因し得る。合成的に誘導される超強力誘導体は、後述する20’-置換ビンブラスチンによって例証される。これらの超強力20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体は、天然物より約100倍活性が高く、典型的に、発明者及び共同研究者が導入した方法論に基づいて、商業的に入手可能で比較的安価な材料(カタランチン、$16/g;及びビンドリン、$36/g)から3工程の化学合成によって到達できる20’-ヒドロキシ-ビンカ類似体に相当する。これらは、古典的な天然物誘導体化、後期官能化、又は生合成法によっては現在到達できない。
従って、一態様では、本発明は、下記構造式Aの20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物を企図する。
6員環R置換基中に2個の環窒素があろうと1個の環窒素しかなかろうと、別のW、X、Y、ZはCR4であり、R4はヒドリド(H)又は電子供与性置換基である。例示R4電子供与性置換基は、C1-C4ヒドロカルビル、アミノ、モノC1-C4ヒドロカルビルアミノ、ジC1-C4ヒドロカルビルアミノ及びC1-C4ヒドロカルビルオキシ基の1つ以上から成る群より選択される。
1又は2個の環窒素含有置換基Rを更に詳細に調査するとき、まず第一に留意すべきは1個の窒素が6員芳香環の2位にあることである。第2の窒素が存在するとき、それは環内の1位以外のいずれの他の位置でもあり得る。R基環は、その1位で、置換基Rをイソインドリンに連結するアミノ官能基のカルボニル基に結合している。イソインドリン基の窒素原子は、ビンカ化合物の20’位に結合している尿素基の遠位窒素である。企図R置換基は、下記構造式の1つ以上の構造式を有する。
上記構造式Aの企図化合物は、10’位にフッ素原子(F)又は当該位置(Rb)にヒドリド基を有し得る。10’-F置換20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物の調製については、発明者らの米国特許第8,940,754号に教示されており、これらの教示内容は参照によって組み込まれる。当該特許は、広範に、10-フルオロカタランチン(以前に示された化合物2の10-フッ素化誘導体)の反応を教示し、ビンドリン(3)と反応させて適切なビンブラスチン誘導体の合成を始める。
企図20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物は、少なくとも血液学的癌細胞、例えば白血病又はリンパ腫細胞、並びに癌、肉腫、メラノーマ、神経腫等の細胞の増殖(成長)を抑制するのに役立つ薬物(医薬組成物)の製造に使用することもできる。企図化合物、又は企図化合物を含有する薬物若しくは医薬組成物は、当該癌性細胞を、インビトロで、又はそれを必要とする対象においてのようにインビボで接触させることによって、親ビンカアルカロイド化合物と同様に、当該成長を抑制する。インビボで使用するときには、インビトロにおけるように医薬的使用を意図しない組成物に存在し得るものに比べて、医薬的に許容される希釈剤と総称される医薬的に許容される塩、緩衝液等が存在する。
本発明の化合物は、それ単独で使用するため、又は医薬的に許容される塩として提供可能である。企図化合物はアミンである。親ビンブラスチンは5.4及び7.4というpKa値が報告されており、一方でビンクリスチンは6.04及び7.67というpKa値が報告されている[The Merck Index, 13th ed. Merck & Co., Whitehouse Station, NJ, 2001, pages 1778-1779]。両化合物はそれらの硫酸塩として市販されている。ビンデシンは、6.04及び7.67のpka値を有すると報告されている[The Merck Index, 12th ed., Merck and Co., Whitehouse Station, NJ, 1996, page 1704]。ビンデシン もそれらの硫酸塩として市販されている。
場合によっては、本発明の化合物の単離、精製又は分割における補助剤として塩を使用することもできる。このような使用では、使用する酸及び調製される塩は医薬的に許容される必要はない。
下記データから明らかなように、企図化合物は、ピコモルからナノモル量でのインビトロアッセイ研究において活性である。インビトロアッセイ等のアッセイに使用するとき、企図化合物は、アッセイすべき細胞と接触するために約0.05nM〜約100nM、好ましくは約1nM〜約50nMの濃度を与えるのに十分な量で組成物中に存在する。
更に通常は、本明細書で企図する20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物のような抗悪性腫瘍薬は、レシピエントの体表面積(bsa)1平方メートル当たりの質量で非経口インビボ投与される。成人では、この量は典型的に約1〜約20mg/m2 bsaであり、子供に対しては成人量の約半分であり、量は、最大量が白血球減少症を引き起こさないように選択される。体重が約10kg以下の子供は、典型的に約0.05mg/kgで投与される。
企図組成物は典型的に、それを必要とする対象に、1カ月以内に複数回、例えば、毎週インビボ投与され、数カ月乃至数年の期間にわたって投与することができる。更に通常は、企図化合物は治療クールにわたって複数回投与される。
慣用手段では、企図20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物は、同一の疾患状態の治療のためには親20’-ヒドロキシ-ビンカアルカロイドと同じか又は少ない量で同じ間隔で投与される。企図20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物は、最初の治療クールとして利用することができ、最初又はその後の治療クール後に再発がある場合、特に多剤耐性が示されるか又は疑われる(指摘される)場合に投与されるのが好ましい。
該固体剤形では、通常、指示投与経路に適した1種以上のアジュバントと本発明の化合物を混ぜ合わせる。経口投与の場合、化合物をラクトース、スクロース、デンプン粉末、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸及び硫酸のナトリウム塩及びカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、及び/又はポリビニルアルコールと混合してから、便利な投与のために錠剤化又はカプセル化することができる。該カプセル剤又は錠剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物の分散系で提供できるように制御放出製剤を含有し得る。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合、剤形は、クエン酸ナトリウム、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素マグネシウム又は炭酸水素カルシウム等の緩衝剤を含むこともできる。錠剤及び丸剤は、更に腸溶コーティングを用いて調製可能である。
従って、注射用製剤、例えば、無菌の注射用水性若しくは油性溶液又は懸濁液は、適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤を用いて公知技術に従って調合可能である。無菌注射用製剤は、例えば、1,3-ブタンジオール中の溶液のように、無毒の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒中の無菌注射用溶液又は懸濁液でもあり得る。利用可能な許容されるビヒクル及び溶媒には、水、リンゲル液、及び等張性塩化ナトリウム溶液、リン酸緩衝食塩水がある。
他の液体医薬組成物としては、例えば、非経口投与に適した溶液がある。非経口投与に適した液体組成物の例は、20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物の無菌水溶液又は水、エタノール、若しくはプロピレングリコールを含む溶媒中の活性成分の無菌溶液である。一部の態様では、企図20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物を乾燥粉末として提供し、これを使用前に注射用塩化ナトリウム等の適切な液体媒体に溶かすことになる。
更に、通常は溶媒又は懸濁媒体として無菌固定油を利用する。この目的では、合成モノグリセリド又はジグリセリドを含め、いずれのブランドの固定油をも利用可能である。更に、オレイン酸等の脂肪酸には注射用組成物の調製に用途がある。ジメチルアセトアミド、界面活性剤、例えばイオン性及び非イオン性洗浄剤等、ポリエチレングリコールを使用することができる。上述したもののような溶媒と湿潤剤の混合物も有用である。
無菌溶液は、所望の溶媒系に活性成分を溶かしてから、結果として生じる溶液をメンブランフィルターに通してそれを滅菌するか、或いは、予め滅菌した溶媒に無菌条件下で無菌化合物を溶かすことによって調製可能である。
インビトロアッセイを企図する場合、アッセイすべきサンプル、例えば細胞及び組織を使用することができる。これらのインビトロ組成物は典型的に水、塩化ナトリウム又は塩化カリウム、並びに周知なように、行うべきアッセイに応じて、所望のpH値、例えばpH4.0〜8.5、好ましくはpH約7.2〜7.4に緩衝している1種以上の緩衝塩、例えば酢酸塩及びリン酸塩、ヘペス[N-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-N′-(2-エタンスルホン酸)等、金属イオンキレーター、例えばEDTAを含有する。
好ましくは、医薬組成物は単位剤形である。該剤形においては、適切な量の活性化合物を含有する単位用量に組成物を分ける。単位剤形は、パッケージ化製剤であってよく、パッケージは、例えば、バイアル又はアンプル中に、別々の量の製剤を含有する。
別の好ましい実施形態では、企図20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導化合物は、1種以上の他の抗悪性腫瘍化合物と共に投与される。該共同療法は技術上周知であり、シスプラチン、5-フルオロウラシル等の他の薬物が同時投与される。当該同時投与は、通常は2種以上の活性薬が協調して作用できるように時間を調整される各化合物の物理的に別々の投与である。
出発点として役立つ初期研究で2種のC20’-置換ビンブラスチン尿素8及び9を調製した。これらの第1はピロリジン尿素8であり、ビンブラスチンに比べて改善された細胞成長抑制を示した。従って、ヒドロアジド化生成物5の還元によって得られる20’-アミノビンブラスチン(6)とクロロギ酸p-ニトロフェニルとの反応(1.5当量の4-NO2PhOCOCl、10当量のEt3N、THF、23℃、4時間)又はトリホスゲンとの反応(0.4当量、2.4当量のi-Pr2NEt、CH2Cl2、0℃、15分)後の二級アミン(R2NH)による処理によって一連の官能化又は置換ピロリジンをC20’-尿素に組み入れて生成物C20’-尿素を良い収率で得た(下記スキーム2参照)。トリホスゲンを用いる後者の生成物は、最初に報告された条件の改善を表し[Leggans et al., J. Med. Chem. 2013, 56, 628]、残留p-ニトロフェノールを反応生成物から除去するという精製の課題を回避した。両セットの条件は、同一の中間体C20’-イソシアナートを生成し、これが、添加された二級アミンと反応して生成物尿素をもたらす。
初期の研究[Leggans et al., J. Med. Chem. 2013, 56, 628]では、尿素の電子に富む性質が、それらの対応するカルバマート又はアミドカウンターパートに比べて増強されたそれらの活性の原因の一部であるということが確立された。結果として、ピロリジン尿素8を体系的に探索して、ピロリジン(10〜21)のβ置換基又はその構造の体系的変化(22〜27)が、ピロリジンの塩基性自体へのそれらの影響と同様に、チューブリンへのその結合及び細胞成長抑制特性に影響し得るかどうかを確証した。ほとんど全ての該置換ピロリジン尿素は、ピロリジン尿素8自体より効力が弱く、大多数が置換基立体化学(R対S)についてほとんど優先度を示さず、置換基の電子特性と細胞成長抑制活性へのその影響との直接的関係はないようだった(下表1)。これらの一般化に対する例外は、(R)-3-メトキシピロリジンを有する14、並びに3-フルオロピロリジン尿素の2つの異性体(17及び18)の挙動である。
これらの後者の知見と同様に興味深いことに、これらの化合物だけが、置換基を持たない8の活性に近づくか(14)又はわずかに勝ることである(17及び18)。結果として、生産的役割を置換基に帰するよりはむしろ、大多数が親化合物8の特性から減じ、いくつかの化合物(14、17及び18)が良好な置換を構成すると思われる。
表1
表2
最後に、イソインドリン9中の縮合ベンゼンの縮合ピリジンとの交換(28及び29)は許容されるのみならず、この変更は細胞成長抑制効力のさらなる小さな増強をもたらした。22、9、28及び29は全てビンブラスチン感受性腫瘍細胞株において400〜600pMというIC50で細胞成長抑制活性を示し、ビンブラスチン耐性腫瘍細胞株(HCT116/VM46)に対するそれらの活性は現在、ビンブラスチンが互角の感受性のHCT116細胞株に対して示す活性(IC50=6.8nM)に匹敵することは特に注目すべきである。
表3
表4
化合物58、60及び61は、ビンブラスチン感受性腫瘍細胞株(L1210及びHCT116)に対して50〜75pMのIC50を示し、ビンブラスチンに比べて100倍の上昇に相当し、ビンブラスチン耐性腫瘍細胞株に対してナノモル未満の活性を示し(HCT116/VM46、IC50=830〜880pM)、ビンブラスチンに比べて700倍の上昇に相当する。それらは、置換基のないC20’尿素9よりも10倍強力でもある。
それらの例外的効力のため、2つのヘテロ環式アミド(55及び60)を、腫瘍への選択的送達のためにこの超強力活性を必要とする標的モダリティ(例えば、抗体、葉酸塩)との共有結合を可能にすることになるアリールアミンで更に官能化した(表5)。いずれの場合にも、アニリン誘導体は親類似体の活性を維持するか(69及び70対60)又はその効力を更に更に改善さえした(68対55)。明らかに、活性へのわずかな影響を持つ多様な機会は、放出された遊離薬物負荷量(payload)が例外的に強力なままである腫瘍標的複合体の調製のための部位にも該誘導体の適切な官能化にも利用可能である。
以前は3H-ビンブラスチンの競合的置換を用いて、ビンブラスチンC20’-尿素の選択メンバーのチューブリン結合を評価していた[Leggans et al., J. Med. Chem. 2013, 56, 628;及びBarker et al., ACS Med. Chem. Lett. 2013, 4, 985]。このアッセイは、DE-81フィルターディスクを通してコインキュベーション溶媒を濾過し、溶液からチューブリン及びその結合リガンドを捕捉する必要がある[(a) Owellen et al., Biochem. Pharmacol. 1977, 26, 1213;及び(b) Bhattacharyya et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1976, 73, 2375]。しかしながら、このアッセイは、3H-ビンブラスチンの使用に伴うコストのためにもアッセイを定量的に再現するという技術的難関のためにも理想的でない。これは、DE-81濾紙の製造が今や中断されているという事実のため更に複雑である。
チューブリンをBODIPY-ビンブラスチン及び代表的範囲の競合リガンド、例えばビンブラスチン、10’-フルオロビンブラスチン(71、10倍改善された機能活性を有する以前に報告されたビンブラスチン類似体[Gotoh et al., ACS Med. Chem. Lett. 2011, 2, 948])、本明細書で報告する強力な化合物28、及び3つの超強力なC20’-尿素類似体(58、60及び61)等とインキュベートした。試験した濃度では、ビンブラスチンは、チューブリンに結合したBODIPY-ビンブラスチンの31%に取って代わった(表5)。10’-フルオロビンブラスチン及びビンブラスチンよりほぼ10倍強力な28は、より高いチューブリン親和性を示し、BODIPY-ビンブラスチンの48〜49%に取って代わった。注目すべきことに、ビンブラスチンよりそれぞれ100倍強力な3つの超強力ビンブラスチン(58、60及び61)は、BODIPY-ビンブラスチンの100%に取って代わった。これは、これらの超強力なC20’尿素は、チューブリンに対してビンブラスチン、10’-フルオロビンブラスチン及び28よりずっと強い結合親和性を有することを意味している。
表6
他の特徴の影響又は作用の認識されない第2の機構の導入さえ除外できないが、標的チューブリン結合親和性による機能的細胞成長抑制活性のこの直接相関及び効果の相対的大きさは、強力及び超強力なC20’尿素の特性が、排他的ではないにせよ、チューブリンへの標的効果に主に由来することを示唆している。
チューブリン結合複合体のX線共結晶構造に描写されたビンブラスチンC20'中心周囲のチューブリン結合部位の立体的制約に基づく初期の予測とは対照的に[Gigant et al., Nature 2005, 435, 519]、本明細書で詳述するものような大きいC20'尿素誘導体は適応し、細胞ベースの増殖アッセイで超強力な機能活性及び顕著なチューブリン結合親和性を示すものがある。これは、称されているビンブラスチン結合部位内に該置換基用の部屋があるかどうかを含めたいくつかの重要な疑問を提起した。
ビンブラスチン-チューブリンX線構造の検査は、C20’アルコールが、埋め込まれたC20’部位からタンパク質の反対面につながる狭小チャネルに向かって伸長し、これがチューブリンの二量体-二量体界面によって画定されるタンパク質-タンパク質相互作用の続きとなることを明らかにする。ビンブラスチン結合X線構造に見られるタンパク質を調整しなくても、9のモデル化C20’イソインドリン基は、β-チューブリン内の重要なペプチドループの後方に伸長し、これがこの狭小チャネルへのビンブラスチン結合部位の上部となり、チューブリンのタンパク質-タンパク質界面に沿って続き、おそらく二量体チューブリン-チューブリン相互作用のさらなる破壊の原因となる。βチューブリンタンパク質上のペプチドループは、リガンド結合用の深くて大きい疎水性ポケットを作り出すC20’を含むビンブラスチンベルバナミンサブユニットの上側を覆う。ビンブラスチン結合X線構造に見られるタンパク質を調整しなくても、モデル化9のイソインドリン基は、ループペプチドの後方でチューブリンタンパク質-タンパク質界面に沿って続くチャネル中に伸長する。イソインドリン上のアリールアミド置換基、例えば50、55〜67に見られる置換基は、チューブリン二量体タンパク質-タンパク質界面に沿って伸長し続ける。
更に挑発的に、超強力類似体の活性(IC50 50〜75pM)は、それらの細胞機能活性が比較的多数の細胞内チューブリン結合部位の化学量論的占有率に由来する可能性が低いか又はその可能性さえあることを示唆している。むしろ、それらの効力は、有糸***中にチューブリンの動態及び構築を破壊するために候補結合部位の化学量論未満又は触媒的占有率で十分であることを示唆している。これらの超強力ビンブラスチンが提起する疑問は、化学量論未満の結合部位占有率が非生産的配座で重合するマイクロチューブリンを捕捉するのに十分であるか、又は該化合物が触媒的に働いてマイクロチューブリンを活発に解体するかどうかである。
一般手順
全ての市販試薬は、特に指定のない限り、更に精製せずに使用した。全ての反応は、特に指定のない限り、オーブン乾燥(200℃)したガラス器具内及び無水Arの不活性雰囲気下で行なった。カラムクロマトグラフィーはシリカゲル60を用いて行なった。TLCはEMDミリポア(Millipore)シリカゲル(250μm) F254ガラスプレートで行ない、UVでスポットを可視化した。PTLCはEMDミリポアシリカゲル(250及び500μm) F254ガラスプレートで行なった。
旋光度はRudolph Research Analytical Autopol III自動旋光計でナトリウムD線(λ=589nm)を用いて室温(23℃)で行ない、以下のように報告する:[α]D 23、濃度(c=g/100mL)、及び溶媒。
1H NMRは、Bruker 500MHz及び600MHz分光計で記録した。化学シフトは残存CHCl3の内部標準からのppmで報告する(1Hについてはδ 7.26)。プロトンの化学データは以下のように報告する:化学シフト(δ)、多重度(ovlp=重なり、br=ブロード、s=一重線、d=二重線、t=三重線、q=四重線、m=多重線)、結合定数、及び積分。
Agilent ESI-TOF/MSで、内部高分解能較正標準としてAgilent ESI-L低濃度チューニングミックスを用いて高分解能質量スペクトルを得た。各試験化合物の純度(>95%)は、Agilent 1100 LC/MS機器でZORBAX SB-C8カラム(3.5mm、4.6mm×50mm、0.75mL/分の流速で220及び254nmにて検出)を用いて10〜98%のアセトニトリル/水/0.1%ギ酸のグラジエントにより決定した。
無水CH2Cl2(3mL)中の20’-アミノビンブラスチン(6、60mg、0.074mmol)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(i-Pr2NEt、23μL、0.18mmol)の溶液を0℃に冷却し、無水CH2Cl2(2mL)中のトリホスゲン(8.7mg、0.030mmol)の溶液で処理した。反応混合物を15分間撹拌した後、混合物を注射器に取り、個々の遊離塩基二級アミン(6に対して2当量)を含有するバイアル(6個まで)に分配した。中間体ビンブラスチン20’-イソシアナートを含有する各バイアルを次にi-Pr2NEt(6に対して2当量)で処理した。反応を一晩進行させた(約18時間)後、混合物をEtOAc(10×反応容積)で希釈した。希釈反応物をNaHCO3飽和水溶液及びNaCl飽和水溶液で抽出した。
有機層をNa2SO4上で乾燥させた。生成物をPTLCで95:5:3 EtOAc:MeOH:NEt3移動相を用いて単離した。注記:尿素形成に用いる直前に、2-Boc-N-(アシル)-5-アミノイソインドリンをCH2Cl2中40%のトリフルオロ酢酸(TFA)で処理して脱保護した。20分間の反応後、窒素流で溶媒を除去し、残渣を高真空下で更に乾燥させた。脱保護イソインドリンを更に精製せずに使用し、余分に5当量のi-Pr2NEtを尿素形成反応に添加して残留TFAを中和した。
収率:26.1mg(62%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.52 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.23 - 7.04 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.4, 4.6 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.00 (t, J = 14.2 Hz, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 6H), 3.72 (s, 1H), 3.69 - 3.51 (m, 4H), 3.49 - 3.24 (m, 4H), 3.24 - 3.09 (m, 2H), 2.98 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.88 - 2.75 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.44 (q, J = 10.2 Hz, 1H), 2.36 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.25 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 2.17 (dt, J = 15.1, 8.3 Hz, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 2H), 1.71 - 1.58 (m, 2H), 1.49 - 1.39 (m, 2H), 1.39 - 1.29 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.83 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.80 - 0.71 (m, 1H)。HRESI-TOF m/z 836.4230 (C47H57N5O9 + H+, 必要とした値836.4229)。[α]D 23 +27 (c 0.7, CHCl3).
収率:5.5mg(53%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.80 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.20 - 7.07 (m, 3H), 6.61 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.4, 4.5 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.96 - 3.83 (m, 2H), 3.83 - 3.76 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.68 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.56 - 3.50 (m, 1H), 3.37 (dd, J = 16.2, 5.1 Hz, 2H), 3.33 - 3.10 (m, 6H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.60 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.30 (s, 6H), 2.24 - 2.14 (m, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.85 - 1.71 (m, 4H), 1.49 - 1.40 (m, 1H), 1.38 - 1.21 (m, 3H), 0.85 - 0.72 (m, 7H).HRESI-TOF m/z 950.5385 (C53H71N7O9 + H+, 必要とした値950.5386)。[α]D 23 -3 (c 0.2, CHCl3).
収率:5.6mg, (54%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.81 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.19 - 7.07 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.90 - 5.82 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.98 - 3.84 (m, 3H), 3.82 - 3.79 (m, 6H), 3.78 - 3.75 (m, 1H), 3.74 (s, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.50 - 3.42 (m, 1H), 3.37 (dd, J = 16.3, 4.9 Hz, 2H), 3.33 - 3.12 (m, 6H), 2.83 (d, J = 16.0 Hz, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.67 (s, 1H), 2.59 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.49 - 2.38 (m, 2H), 2.32 (s, 6H), 2.18 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.76 (m, 3H), 1.71 - 1.64 (m, 2H), 1.39 - 1.27 (m, 3H), 0.84 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 950.5351 (C53H71N7O9 + H+, 必要とした値950.5386)。[α]D 23 +2 (c 0.2, CHCl3).
収率:5.4mg(35%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.77 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.19 - 7.06 (m, 3H), 6.65 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.86 (dd, J = 10.0, 4.4 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.31 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.29 (s, 1H), 3.94 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 3.87 - 3.81 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.70 - 3.62 (m, 1H), 3.59 - 3.53 (m, 5H), 3.46 - 3.35 (m, 3H), 3.31 (td, J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 3.26 - 3.17 (m, 3H), 3.13 - 3.05 (m, 2H), 2.81 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.44 (q, J = 9.2 Hz, 1H), 2.32 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.24 - 2.16 (m, 1H), 2.14 - 2.05 (m, 7H), 1.85 - 1.76 (m, 3H), 1.57 - 1.51 (m, 2H), 1.47 - 1.35 (m, 4H), 1.16 - 1.11 (m, 1H), 0.85 - 0.81 (m, 4H), 0.78 (t, J = 6.9 Hz, 3H)。HRESI-TOF m/z 923.4909 (C51H66N6O10 + H+, 必要とした値923.4913)。[α]D 23 -3 (c 0.3, CHCl3).
収率:5.4mg(35%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.77 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.23 - 7.05 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.86 (dd, J = 10.1, 4.2 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.31 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.31 (s, 1H), 3.90 (t, J = 13.2 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 5H), 3.55 (s, 3H), 3.41 - 3.28 (m, 4H), 3.22 (s, 3H), 3.14 - 3.02 (m, 2H), 2.81 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.44 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 2.28 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.24 - 2.17 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.04 - 2.01 (m, 2H), 1.85 - 1.76 (m, 2H), 1.57 - 1.52 (m, 2H), 1.47 - 1.39 (m, 3H), 1.38 - 1.34 (m, 1H), 0.84 - 0.80 (m, 4H), 0.77 (t, J = 6.8 Hz, 3H)。HRESI-TOF m/z 923.4907 (C51H66N6O10 + H+, 必要とした値923.4913)。[α]D 23 -54 (c 0.3, CHCl3).
収率:6.9mg(43%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.23 - 7.04 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.86 (dd, J = 9.5, 3.7 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.01 (s, 1H), 3.96 - 3.91 (m, 1H), 3.84 - 3.77 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.66 - 3.52 (m, 8H), 3.40 - 3.37 (m, 1H), 3.37 - 3.34 (m, 1H), 3.33 - 3.28 (m, 5H), 3.24 - 3.12 (m, 3H), 2.83 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.64 - 2.54 (m, 1H), 2.52 - 2.34 (m, 2H), 2.29 - 2.14 (m, 2H), 2.14 - 2.06 (m, 5H), 1.91 - 1.73 (m, 4H), 1.39 - 1.30 (m, 2H), 1.29 - 1.22 (m, 1H), 0.87 - 0.70 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 937.5067 (C52H68N6O10 + H+, 必要とした値937.5069)。[α]D 23 +5 (c 0.3, CHCl3).
収率:6.8mg(43%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.24 - 7.01 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.86 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.95 - 3.88 (m, 1H), 3.83 - 3.77 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.70 - 3.66 (m, 1H), 3.63 - 3.50 (m, 7H), 3.45 - 3.33 (m, 6H), 3.31 - 3.27 (m, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 3H), 2.83 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.63 - 2.54 (m, 1H), 2.51 - 2.33 (m, 2H), 2.27 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 2.05 (m, 5H), 1.91 - 1.74 (m, 3H), 1.48 - 1.29 (m, 3H), 1.28 - 1.22 (m, 1H), 0.90 - 0.66 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 937.5064 (C52H68N6O10 + H+, 必要とした値937.5069)。[α]D 23 +9 (c 0.3, CHCl3).
収率:6.7mg(61%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.81 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.21 - 7.06 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.2, 4.1 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.38 - 5.21 (m, 2H), 4.27 (s, 1H), 3.96 - 3.84 (m, 2H), 3.80 (d, J = 1.5 Hz, 8H), 3.76 - 3.69 (m, 2H), 3.68 - 3.62 (m, 1H), 3.62 - 3.56 (m, 4H), 3.41 - 3.33 (m, 2H), 3.30 (td, J = 10.1, 9.6, 4.8 Hz, 1H), 3.25 - 3.11 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.60 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.44 (td, J = 10.1, 6.5 Hz, 1H), 2.38 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.22 - 2.14 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.69 (m, 4H), 1.46 - 1.40 (m, 1H), 1.37 - 1.31 (m, 1H), 1.28 - 1.25 (m, 1H), 0.84 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 925.4841 (C51H65FN6O9 + H+, 必要とした値925.4870)。[α]D 23 -0.9 (c 0.2, CHCl3).
収率:6.8mg, (62%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.80 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.20 - 7.07 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.3, 4.2 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.39 - 5.17 (m, 2H), 4.30 (s, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.81 - 3.72 (m, 10H), 3.71 - 3.61 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.30 (dq, J = 9.3, 4.4 Hz, 1H), 3.26 - 3.10 (m, 4H), 2.82 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.59 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 2.44 (td, J = 10.4, 6.7 Hz, 1H), 2.37 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.24 - 2.16 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.70 (m, 4H), 1.43 (dt, J = 13.7, 7.5 Hz, 1H), 1.34 (dd, J = 14.5, 7.4 Hz, 1H), 1.27 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 0.85 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 925.4843 (C51H65FN6O9 + H+, 必要とした値925.4870)。[α]D 23 +1.8 (c 0.5, CHCl3).
収率:5.3mg(52%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.78 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.19 - 7.06 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.3, 4.3 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.29 (s, 1H), 3.93 (dd, J = 10.0, 7.4 Hz, 1H), 3.89 - 3.82 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.77 - 3.73 (m, 2H), 3.73 - 3.61 (m, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.38 (dd, J = 16.1, 4.1 Hz, 2H), 3.33 - 3.27 (m, 1H), 3.25 - 3.06 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.60 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.49 - 2.31 (m, 4H), 2.24 - 2.14 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 3H), 1.70 (dt, J = 15.4, 7.1 Hz, 1H), 1.54 - 1.48 (m, 1H), 1.39 - 1.31 (m, 1H), 1.25 - 1.19 (m, 1H), 0.87 - 0.72 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 932.4887 (C52H65N7O9 + H+, 必要とした値932.4916)。[α]D 23 -0.7 (c 0.2, CHCl3).
収率:5.9mg(58%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.78 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.20 - 7.07 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.86 (dd, J = 10.6, 4.3 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.31 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.00 (dd, J = 10.0, 7.8 Hz, 1H), 3.90 - 3.82 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 3.77 - 3.73 (m, 2H), 3.71 - 3.61 (m, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.38 (d, J = 11.9 Hz, 2H), 3.33 - 3.27 (m, 1H), 3.25 - 3.05 (m, 5H), 2.82 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.61 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 2.49 - 2.40 (m, 2H), 2.38 - 2.29 (m, 2H), 2.22 - 2.13 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.86 - 1.76 (m, 3H), 1.72 - 1.64 (m, 1H), 1.56 - 1.50 (m, 1H), 1.40 - 1.32 (m, 1H), 1.22 (dd, J = 14.5, 5.6 Hz, 1H), 0.85 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 932.4892 (C52H65N7O9 + H+, 必要とした値932.4916)。[α]D 23 +3 (c 0.4, CHCl3).
収率:10.1mg(85%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.49 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.20 - 7.03 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.94 - 5.74 (m, 3H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.40 - 4.25 (m, 4H), 4.24 (s, 1H), 3.90 (d, J = 14.0 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 15.8, 5.1 Hz, 2H), 3.32 - 3.27 (m, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.60 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.49 - 2.35 (m, 2H), 2.28 - 2.13 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.90 - 1.75 (m, 3H), 1.72 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 1.39 - 1.21 (m, 4H), 0.84 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 905.4807 (C51H64N6O9 + H+, 必要とした値905.4807)。[α]D 23 -0.5 (c 0.3, CHCl3).
収率:17.5mg(65%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.20 - 7.03 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.85 (ddd, J = 10.2, 5.0, 1.6 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (dt, J = 10.1, 2.0 Hz, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.01 - 3.84 (m, 2H), 3.81 - 3.78 (m, 6H), 3.73 (s, 1H), 3.62 - 3.54 (m, 5H), 3.54 - 3.47 (m, 2H), 3.40 - 3.34 (m, 2H), 3.32 - 3.22 (m, 3H), 3.19 - 3.10 (m, 2H), 2.83 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.58 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.90 (dd, J = 13.9, 7.4 Hz, 1H), 1.83 (td, J = 11.2, 6.0 Hz, 3H), 1.79 - 1.72 (m, 3H), 1.66 - 1.59 (m, 3H), 1.55 (dt, J = 7.6, 3.8 Hz, 2H), 1.37 - 1.26 (m, 4H), 0.81 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.75 (t, J = 7.4 Hz, 4H)。HRESI-TOF m/z 935.5267 (C53H70N6O9 + H+, 必要とした値935.5277)。[α]D 23 +0.7 (c 0.4, CHCl3).
収率:4.9mg(49%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.19 - 7.07 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.5, 4.4 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.37 (s, 1H), 3.89 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 3.85 - 3.75 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.55 - 3.49 (m, 3H), 3.40 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.21 (m, 3H), 3.20 - 3.11 (m, 2H), 2.83 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.66 (s, 1H), 2.59 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.50 - 2.35 (m, 2H), 2.25 - 2.13 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.92 (dd, J = 13.7, 7.5 Hz, 1H), 1.87 - 1.73 (m, 5H), 1.72 - 1.59 (m, 6H), 1.38 - 1.24 (m, 6H), 0.81 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.76 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。HRESI-TOF m/z 949.5416 (C54H72N6O9 + H+, 必要とした値949.5439)。[α]D 23 +6 (c 0.2, CHCl3).
収率:10.7mg(87%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.18 - 7.07 (m, 3H), 6.61 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 10.4, 4.5 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.88 - 3.78 (m, 8H), 3.73 (s, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.40 - 3.24 (m, 5H), 3.19 - 3.11 (m, 2H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.58 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.48 - 2.35 (m, 2H), 2.25 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.17 (dt, J = 15.0, 8.3 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 (d, J = 7.3 Hz, 4H), 1.87 - 1.73 (m, 4H), 1.68 (d, J = 14.6 Hz, 2H), 1.46 (d, J = 7.4 Hz, 4H), 1.39 - 1.24 (m, 5H), 0.81 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.78 - 0.72 (m, 4H)。HRESI-TOF m/z 933.5119 (C53H68N6O9 + H+, 必要とした値933.5120)。[α]D 23 +2 (c 0.4, CHCl3).
収率:11.6mg(90%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.49 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.17 - 7.07 (m, 7H), 6.62 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.5, 4.6 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.54 (s, 1H), 3.89 - 3.78 (m, 8H), 3.74 (s, 1H), 3.72 - 3.65 (m, 4H), 3.52 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.0, 3.9 Hz, 2H), 3.32 - 3.22 (m, 3H), 3.14 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 3.10 - 2.99 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.29 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 4H), 1.35 - 1.25 (m, 4H), 0.82 - 0.77 (m, 4H), 0.75 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。HRESI-TOF m/z 983.5278 (C57H70N6O9 + H+, 必要とした値983.5277)。[α]D 23 -0.6 (c 0.4, CHCl3).
収率:10.4mg(52%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.80 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.17 - 7.04 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.4, 4.4 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.05 - 4.82 (m, 4H), 4.43 (s, 1H), 3.96 (t, J = 13.7 Hz, 1H), 3.90 - 3.83 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.42 - 3.34 (m, 2H), 3.34 - 3.27 (m, 1H), 3.25 - 3.12 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.50 - 2.43 (m, 1H), 2.40 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.27 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.23 - 2.15 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 4H), 1.50 - 1.40 (m, 1H), 1.39 - 1.26 (m, 3H), 0.84 - 0.76 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 956.4915 (C54H65N7O9 + H+, 必要とした値956.4916)。[α]D 23 -8 (c 0.4, CHCl3).
収率:11.0mg(55%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.49 (dd, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.67 - 7.60 (m, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 1H), 7.20 (dd, J = 7.7, 4.9 Hz, 1H), 7.17 - 7.02 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.92 - 5.78 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 5.01 - 4.84 (m, 4H), 4.45 (s, 1H), 3.99 (t, J = 13.7 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 3.30 (td, J = 9.6, 4.4 Hz, 1H), 3.27 - 3.12 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.66 - 2.62 (m, 1H), 2.48 - 2.38 (m, 2H), 2.28 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.85 - 1.78 (m, 4H), 1.45 (dq, J = 14.0, 6.7 Hz, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 3H), 0.83 - 0.78 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 956.4915 (C54H65N7O9 + H+, 必要とした値956.4916)。[α]D 23 -6 (c 0.4, CHCl3).
収率:10.4mg(59%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.91 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.56 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.25 - 7.06 (m, 5H), 6.71 (s, 1H), 6.20 (s, 1H), 5.93 (dd, J = 10.1, 4.4 Hz, 1H), 5.56 (s, 1H), 5.37 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 5.01 - 4.84 (m, 4H), 4.48 (s, 1H), 4.03 (t, J = 13.4 Hz, 1H), 3.95 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.82 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.51 - 3.42 (m, 2H), 3.42 - 3.19 (m, 5H), 2.90 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.71 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.57 - 2.46 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.38 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.32 - 2.23 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.99 - 1.83 (m, 4H), 1.61 - 1.47 (m, 1H), 1.48 - 1.30 (m, 3H), 0.95 - 0.81 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 969.5119 (C56H68N6O9 + H+, 必要とした値969.5120)。[α]D 23 -0.7 (c 0.4, CHCl3).
収率:7.4mg(63%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.16 - 7.05 (m, 3H), 7.04 - 6.91 (m, 2H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 9.9, 3.8 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.95 - 4.74 (m, 4H), 4.40 (s, 1H), 3.95 (t, J = 13.9 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.42 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.28 (m, 1H), 3.28 - 3.11 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.28 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.76 (m, 4H), 1.38 - 1.20 (m, 4H), 0.84 - 0.76 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 973.4869 (C55H65FN6O9 + H+, 必要とした値973.4870)。[α]D 23 -3 (c 0.4, CHCl3).
収率:9.7mg, (53%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.24 (s, 2H), 7.16 - 7.04 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.2, 4.4 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.94 - 4.77 (m, 4H), 4.40 (s, 1H), 3.95 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.34 - 3.26 (m, 1H), 3.25 - 3.11 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.50 - 2.36 (m, 2H), 2.28 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.23 - 2.15 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.88 - 1.73 (m, 4H), 1.50 - 1.34 (m, 2H), 0.84 - 0.76 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 989.4572 (C55H65ClN6O9 + H+, 必要とした値989.4574)。[α]D 23 -0.7 (c 0.2, CHCl3).
収率:6.9mg(56%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.50 - 7.45 (m, 2H), 7.40 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.16 - 7.04 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 11.0, 4.6 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.33 - 5.26 (m, 1H), 4.95 - 4.72 (m, 4H), 4.40 (s, 1H), 3.95 (t, J = 13.9 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.32 - 3.27 (m, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.50 - 2.34 (m, 2H), 2.27 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.88 - 1.75 (m, 4H), 1.37 - 1.25 (m, 4H), 0.83 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1033.4069 (C55H65BrN6O9 + H+, 必要とした値1033.4069)。[α]D 23 -2 (c 0.3, CHCl3).
収率:10.2mg(55%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.80 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.16 - 7.11 (m, 1H), 7.11 - 7.04 (m, 2H), 6.64 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.0, 3.8 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.02 - 4.80 (m, 4H), 4.43 (s, 1H), 4.02 - 3.91 (m, 1H), 3.86 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.38 (dd, J = 15.8, 4.9 Hz, 2H), 3.30 (td, J = 8.7, 7.7, 3.8 Hz, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 4H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.49 - 2.37 (m, 2H), 2.28 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 4H), 1.49 - 1.39 (m, 1H), 1.39 - 1.26 (m, 3H), 0.84 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 0.80 (t, J = 7.4 Hz, 6H)。HRESI-TOF m/z 1023.4837 (C56H65F3N6O9 + H+, 必要とした値1023.4838)。[α]D 23 +0.8 (c 0.2, CHCl3).
収率:3.8mg(37%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.24 - 7.02 (m, 4H), 6.90 - 6.78 (m, 2H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 9.8, 4.0 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 4.95 - 4.74 (m, 3H), 4.39 (s, 1H), 4.02 - 3.87 (m, 1H), 3.85 - 3.70 (m, 11H), 3.68 - 3.56 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.22 (m, 3H), 3.22 - 3.12 (m, 2H), 2.82 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.68 - 2.60 (m, 2H), 2.49 - 2.37 (m, 2H), 2.29 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.91 - 1.73 (m, 3H), 1.64 (d, J = 12.5 Hz, 4H), 1.49 - 1.40 (m, 1H), 1.39 - 1.26 (m, 4H), 0.83 - 0.73 (m, 6H)。HRESI-TOF m/z 985.5068 (C56H68N6O10 + H+, 必要とした値985.5075), [α]D 23 +1 (c 0.2, CHCl3).
収率:9.6mg(82%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 1H), 7.20 - 7.02 (m, 4H), 6.69 - 6.57 (m, 3H), 6.11 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 10.3, 4.5 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.85 - 4.67 (m, 4H), 4.37 (s, 1H), 3.94 (t, J = 13.8 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.50 (s, 3H), 3.43 - 3.33 (m, 2H), 3.34 - 3.21 (m, 3H), 3.21 - 3.10 (m, 2H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.49 - 2.34 (m, 2H), 2.33 - 2.23 (m, 1H), 2.18 (ddd, J = 14.7, 9.3, 7.3 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.38 - 1.16 (m, 4H), 0.79 (q, J = 7.4 Hz, 7H)。HRESI-TOF m/z 970.5072 (C55H67N7O9 + H+, 必要とした値970.5073)。[α]D 23 -2 (c 0.3, CHCl3).
収率:7.8mg(65%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.85 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.18 - 7.04 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 6.58 - 6.50 (m, 2H), 6.11 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 10.1, 3.9 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.98 - 4.64 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 3.94 (t, J = 13.2 Hz, 1H), 3.86 - 3.77 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.41 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.13 (m, 5H), 2.87 - 2.77 (m, 4H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.50 - 2.35 (m, 2H), 2.29 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.90 - 1.73 (m, 4H), 1.36 - 1.24 (m, 3H), 0.85 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 984.5231 (C56H68N7O9 + H+, 必要とした値984.5229)。[α]D 23 +3 (c 0.3, CHCl3).
収率:8.2mg(68%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.85 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.18 - 7.11 (m, 2H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 6.73 - 6.61 (m, 3H), 6.11 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 10.2, 3.9 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.93 - 4.71 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 3.94 (t, J = 13.6 Hz, 1H), 3.86 - 3.77 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.0, 4.9 Hz, 2H), 3.33 - 3.12 (m, 5H), 2.93 (s, 6H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.48 - 2.36 (m, 2H), 2.30 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.91 - 1.71 (m, 4H), 1.58 - 1.51 (m, 1H), 1.37 - 1.23 (m, 3H), 0.85 - 0.73 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 998.5386 (C57H71N7O9 + H+, 必要とした値998.5386)。[α]D 23 +2 (c 0.3, CHCl3).
CH2Cl2(0.5mL)中の36(16mg、0.016mmol)及びプロピオンアルデヒド(1.3μL、0.017mmol)の溶液をナトリウムトリアセトキシボロヒドリド(4.4mg、0.021mmol)で処理した。2時間の撹拌後、反応混合物をシリカゲルPTLCプレート上に直接装填し、95:5:3のEtOAc/MeOH/Et3Nで展開させた。精製生成物を白色固体として単離した:11.5mg, 69%。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21 - 6.94 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 6.54 (s, 2H), 6.22 - 6.01 (m, 1H), 5.84 (dd, J = 10.4, 4.6 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.91 - 4.52 (m, 4H), 4.37 (s, 1H), 4.02 - 3.88 (m, 1H), 3.89 - 3.76 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.31 - 3.11 (m, 5H), 3.11 - 3.01 (m, 2H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.50 - 2.36 (m, 2H), 2.29 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.71 - 1.53 (m, 4H), 1.37 - 1.22 (m, 3H), 1.03 - 0.90 (m, 3H), 0.86 - 0.71 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1012.5542 (C58H73N7O9 + H+, 必要とした値1012.5542)。[α]D 23 -0.5 (c 0.5, CHCl3).
化合物36(16mg、0.016mmol)をAc2O(800μL)及び触媒的HOAc(4μL)で処理した。反応を1時間進行させてからNaHCO3飽和水溶液をゆっくり加えてクエンチした。水溶液をCH2Cl2で抽出し、有機層を混ぜ合わせてNa2SO4上で乾燥させた。生成物をPTLC(SiO2、95:5:3 EtOAc:MeOH:NEt3移動相)で精製した。生成物を白色固体として単離した:7.5mg, (46%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 7.18 - 7.00 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 10.6, 4.6 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.94 - 4.76 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 4.00 - 3.90 (m, 1H), 3.91 - 3.85 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.41 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.10 (m, 6H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.63 (d, J = 14.6 Hz, 1H), 2.48 - 2.36 (m, 2H), 2.28 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 4H), 1.48 - 1.39 (m, 1H), 1.36 - 1.25 (m, 3H), 0.84 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1012.5177 (C57H69N7O10 + H+, 必要とした値1012.5178)。[α]D 23 -0.9 (c 0.5, CHCl3).
CH2Cl2(250μL)中の36(0.7mg、0.007mmol)及びi-Pr2NEt(1.5μL、0.0086mmol)の溶液をCH2Cl2(250μL)中のプロピオニルクロリド(0.80mg、0.0086mmol)の溶液で処理した。反応を一晩進行させた後、混合物をPTLC上に直接装填し、95:5:3のEtOAc:MeOH:NEt3で展開させた。生成物を白色固体として単離した:6.1mg(83%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.20 - 7.04 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.94 - 5.77 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.34 - 5.23 (m, 1H), 5.00 - 4.70 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.87 - 3.79 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 15.7, 5.1 Hz, 2H), 3.33 - 3.04 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.59 (m, 1H), 2.52 - 2.34 (m, 4H), 2.28 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.92 - 1.71 (m, 4H), 1.38 - 1.28 (m, 2H), 1.28 - 1.22 (m, 5H), 0.96 - 0.85 (m, 1H), 0.83 - 0.75 (m, 6H)。HRESI-TOF m/z 1026.5330 (C58H71N7O10 + H+, 必要とした値1026.5335)。[α]D 23 -3 (c 0.3, CHCl3).
収率:7.9mg(54%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.25 - 7.20 (m, 1H), 7.20 - 7.05 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.94 - 5.80 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.98 - 4.70 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 4.02 - 3.88 (m, 1H), 3.86 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.14 (m, 4H), 3.10 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.58 (m, 1H), 2.53 - 2.34 (m, 2H), 2.28 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.93 - 1.71 (m, 4H), 1.54 - 1.42 (m, 2H), 1.36 - 1.26 (m, 3H), 1.07 (dt, J = 6.7, 3.5 Hz, 2H), 0.90 - 0.73 (m, 10H)。HRESI-TOF m/z 1038.5331 (C59H71N7O10 + H+, 必要とした値1038.5335)。[α]D 23 -1 (c 0.3, CHCl3).
CH2Cl2(250μL)中の36(0.7mg、0.007mmol)及びi-Pr2NEt(1.5μL、0.0086mmol)の溶液をCH2Cl2(250μL)中のイソブチリルクロリド(0.92mg、0.0086mmol)の溶液で処理した。反応を一晩進行させた後、混合物をPTLCプレート上に直接装填し、95:5:3のEtOAc:MeOH:NEt3で展開させた。生成物を白色固体として単離した:5.5mg(74%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.26 - 7.16 (m, 3H), 7.16 - 7.03 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 9.0, 3.9 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.94 - 4.76 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 4.00 - 3.89 (m, 1H), 3.84 - 3.78 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.1, 5.2 Hz, 2H), 3.31 - 3.14 (m, 4H), 3.09 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.59 (m, 1H), 2.55 - 2.35 (m, 3H), 2.28 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.22 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 4H), 1.37 - 1.28 (m, 2H), 1.27 - 1.22 (m, 8H), 0.86 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1040.5489 (C59H73N7O10 + H+, 必要とした値1040.5491)。[α]D 23 -3 (c 0.2, CHCl3).
CH2Cl2(250μL)中の36(0.7mg、0.007mmol)及びi-Pr2NEt(1.5μL、0.0086mmol)の溶液をCH2Cl2(250μL)中のトリメチルアセチルクロリド(1.0mg、0.0086mmol)の溶液で処理した。反応を一晩進行させた後、混合物をPTLCプレート上に直接装填し、95:5:3のEtOAc:MeOH:NEt3で展開させた。生成物を白色固体として単離した:5.5mg(73%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.26 - 7.22 (m, 3H), 7.21 - 7.04 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.92 - 5.80 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.95 - 4.70 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 4.01 - 3.87 (m, 1H), 3.84 - 3.78 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 17.0, 5.3 Hz, 2H), 3.33 - 3.04 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.59 (m, 1H), 2.54 - 2.36 (m, 2H), 2.28 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.69 (m, 4H), 1.34 - 1.28 (m, 12H), 0.84 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1054.5647 (C60H75N7O10 + H+, 必要とした値1054.5648)。[α]D 23 -6 (c 0.2, CHCl3).
CH2Cl2(250μL)中の36(0.7mg、0.007mmol)及びi-Pr2NEt(1.5μL、0.0086mmol)の溶液をCH2Cl2(250μL)中のn-ヘキサノイルクロリド(1.2mg、0.0086mmol)の溶液で処理した。反応を一晩進行させた後、混合物をPTLCプレート上に直接装填し、95:5:3のEtOAc:MeOH:NEt3で展開させた。生成物を白色固体として単離した:5.0mg(66%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.01 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.47 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.19 - 6.99 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.95 - 4.67 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 3.94 (t, J = 13.3 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 11.3 Hz, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.0, 4.7 Hz, 2H), 3.33 - 3.12 (m, 4H), 3.09 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.50 - 2.24 (m, 4H), 2.18 (dt, J = 14.3, 7.3 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.88 - 1.67 (m, 5H), 1.50 - 1.27 (m, 8H), 0.90 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 0.79 (t, J = 6.9 Hz, 7H)。HRESI-TOF m/z 1068.5801 (C60H75N7O10 + H+, 必要とした値1068.5804)。[α]D 23 -12 (c 0.2, CHCl3).
CH2Cl2(250μL)中の36(0.7mg、0.007mmol)及びi-Pr2NEt(1.5μL、0.0086mmol)の溶液をCH2Cl2(250μL)中のアクリロイルクロリド(0.78mg、0.0086mmol)の溶液で処理した。反応を一晩進行させた後、混合物をPTLCプレート上に直接装填し、95:5:3のEtOAc:MeOH:NEt3で展開させた。生成物を白色固体として単離した:5.2mg(71%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 1H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 7.25 - 7.04 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 6.42 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 6.24 (dd, J = 16.8, 10.3 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 9.7, 3.8 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.96 - 4.74 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 4.01 - 3.89 (m, 1H), 3.89 - 3.76 (m, 8H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.0, 5.3 Hz, 2H), 3.33 - 3.12 (m, 5H), 3.08 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.59 (m, 1H), 2.50 - 2.35 (m, 2H), 2.28 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.90 - 1.70 (m, 4H), 1.37 - 1.28 (m, 2H), 0.83 - 0.76 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1024.5173 (C60H75N7O10 + H+, 必要とした値1024.5178)。[α]D 23 -14 (c 0.2, CHCl3).
収率:10.2mg(69%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 7.23 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.20 - 7.04 (m, 3H), 7.03 - 6.93 (m, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.94 (dt, J = 15.1, 1.7 Hz, 1H), 5.89 - 5.80 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.96 - 4.69 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 4.00 - 3.88 (m, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.42 - 3.32 (m, 2H), 3.32 - 3.09 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.64 - 2.55 (m, 1H), 2.51 - 2.35 (m, 2H), 2.34 - 2.23 (m, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.90 (dd, J = 7.0, 1.7 Hz, 3H), 1.87 - 1.72 (m, 4H), 1.49 - 1.41 (m, 1H), 1.37 - 1.26 (m, 3H), 0.83 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1038.5342 (C59H71N7O10 + H+, 必要とした値1038.5335)。[α]D 23 +17 (c 0.5, CHCl3).
収率:11.3mg(76%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.26 - 7.18 (m, 2H), 7.18 - 7.03 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.92 - 5.78 (m, 1H), 5.75 - 5.64 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (dt, J = 10.1, 2.0 Hz, 1H), 4.92 - 4.75 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 4.00 - 3.89 (m, 1H), 3.85 - 3.78 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.11 (m, 5H), 2.82 (dt, J = 16.1, 2.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.65 - 2.59 (m, 1H), 2.50 - 2.35 (m, 2H), 2.32 - 2.24 (m, 1H), 2.21 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.20 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 (s, 3H), 1.87 - 1.74 (m, 4H), 1.52 - 1.43 (m, 1H), 1.37 - 1.25 (m, 3H), 0.84 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1052.5490 (C60H73N7O10 + H+, 必要とした値1052.5491)。[α]D 23 +9 (c 0.5, CHCl3).
収率:9.4mg(60%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.74 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.58 - 7.50 (m, 2H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.43 - 7.32 (m, 4H), 7.26 - 7.23 (m, 1H), 7.20 - 7.03 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.57 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.8, 5.1 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (dt, J = 10.1, 2.1 Hz, 1H), 4.97 - 4.72 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 3.94 (d, J = 23.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.76 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.09 (m, 5H), 2.82 (dt, J = 16.1, 2.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.64 - 2.57 (m, 1H), 2.51 - 2.36 (m, 2H), 2.33 - 2.23 (m, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.90 - 1.71 (m, 4H), 1.50 - 1.40 (m, 1H), 1.35 - 1.24 (m, 3H), 0.85 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1000.5495 (C64H73N7O10 + H+, 必要とした値1000.5491)。[α]D 23 +13 (c 0.4, CHCl3).
CH2Cl2(0.5mL)中の36(16mg、0.016mmol)の溶液をベンゾイルクロリド(2μL、0.018mmol)及びEt3N(2.5μL、0.018mmol)で処理した。反応を1時間進行させた後、混合物をPTLCプレート(SiO2)上に直接装填し、95:5:3のEtOAc:MeOH:NEt3で展開させた。精製生成物を白色固体として単離した:9.2mg(54%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.91 - 7.83 (m, 3H), 7.81 (s, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 1H), 7.52 - 7.46 (m, 3H), 7.41 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.16 - 7.03 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 9.2, 3.8 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.01 - 4.79 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 4.02 - 3.91 (m, 1H), 3.91 - 3.85 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.12 (m, 5H), 2.82 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.62 (s, 1H), 2.50 - 2.36 (m, 2H), 2.30 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.92 - 1.75 (m, 4H), 1.39 - 1.23 (m, 3H), 0.88 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1074.5334 (C62H71N7O10 + H+, 必要とした値1074.5335)。[α]D 23 -0.3 (c 0.4, CHCl3).
収率:7.0mg(43%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 8.04 - 7.82 (m, 5H), 7.77 - 7.68 (m, 2H), 7.68 - 7.59 (m, 2H), 7.55 - 7.37 (m, 5H), 7.31 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.22 - 7.03 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.92 - 5.77 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.02 - 4.74 (m, 4H), 4.42 (s, 1H), 4.05 - 3.88 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.43 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.08 (m, 5H), 2.83 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.50 - 2.37 (m, 2H), 2.30 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.91 - 1.70 (m, 4H), 1.51 - 1.43 (m, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 3H), 0.85 - 0.77 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1150.5638 (C68H75N7O10 + H+, 必要とした値1150.5648)。[α]D 23 +0.8 (c 0.3, CHCl3).
収率:10.5mg(64%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 8.08 - 7.85 (m, 4H), 7.79 (s, 1H), 7.54 - 7.37 (m, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 3H), 7.20 - 7.03 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.93 - 5.75 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.35 - 5.19 (m, 1H), 4.99 - 4.70 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 1H), 3.90 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.3, 5.2 Hz, 2H), 3.33 - 3.05 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.53 - 2.35 (m, 2H), 2.35 - 2.25 (m, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.96 - 1.68 (m, 4H), 1.52 - 1.41 (m, 1H), 1.35 - 1.22 (m, 3H), 0.89 - 0.72 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1158.5155 (C63H70F3N7O11 + H+, 必要とした値1158.5158)。[α]D 23 +6 (c 0.5, CHCl3).
収率:10.3mg(65%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.91 - 7.73 (m, 4H), 7.48 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.35 - 7.32 (m, 2H), 7.29 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.20 - 7.01 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.90 - 5.79 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.33 - 5.25 (m, 1H), 4.97 - 4.76 (m, 4H), 4.40 (s, 1H), 4.04 - 3.89 (m, 1H), 3.87 - 3.76 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.06 (m, 5H), 2.97 (hept, J = 6.9 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.57 (m, 1H), 2.51 - 2.35 (m, 2H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.93 - 1.70 (m, 4H), 1.46 (s, 1H), 1.37 - 1.25 (m, 9H), 0.87 - 0.73 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1116.5804 (C65H77N7O10 + H+, 必要とした値1116.5804)。[α]D 23 +21 (c 0.5, CHCl3).
収率:7.6mg(62%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21 - 7.00 (m, 3H), 6.81 (s, 2H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.93 - 5.76 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.82 (q, J = 12.1 Hz, 4H), 4.39 (s, 1H), 3.97 - 3.89 (m, 1H), 3.87 (s, 6H), 3.81 (d, J = 7.2 Hz, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.14 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.68 - 2.60 (m, 2H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.30 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 2.20 (dq, J = 15.0, 8.2, 7.7 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.87 - 1.76 (m, 3H), 1.30 (ddd, J = 26.4, 12.7, 6.3 Hz, 4H), 0.79 (t, J = 7.3 Hz, 7H)。HRESI-TOF m/z 1015.5178 (C57H70N6O11 + H+, 必要とした値1015.5175)。[α]D 23 -3 (c 0.4, CHCl3).
収率:8.6mg(76%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.07 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 8.64 - 8.57 (m, 1H), 8.29 (dt, J = 7.9, 1.1 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.91 (td, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 2H), 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.03 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.84 (dd, J = 10.2, 4.8 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.76 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 3.96 (t, J = 13.6 Hz, 1H), 3.90 - 3.77 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43 - 3.33 (m, 2H), 3.34 - 3.08 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.59 (m, 1H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.34 - 2.25 (m, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.91 - 1.70 (m, 4H), 1.54 - 1.44 (m, 1H), 1.41 - 1.26 (m, 3H), 0.86 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1075.5281 (C61H70N8O10 + H+, 必要とした値1075.5287)。[α]D 23 -7 (c 0.3, CHCl3).
収率:5.5mg(49%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 9.09 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.77 (dd, J = 4.9, 1.6 Hz, 1H), 8.21 (dt, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.53 - 7.38 (m, 3H), 7.31 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.19 - 7.01 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.4, 4.8 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.79 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 4.06 - 3.91 (m, 1H), 3.90 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.4, 5.3 Hz, 2H), 3.33 - 3.07 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.58 (m, 1H), 2.50 - 2.34 (m, 2H), 2.35 - 2.25 (m, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.97 - 1.71 (m, 4H), 1.51 - 1.44 (m, 1H), 1.37 - 1.25 (m, 3H), 0.86 - 0.73 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1075.5287 (C61H70N8O10 + H+, 必要とした値1075.5287)。[α]D 23 -3 (c 0.2, CHCl3).
収率:7.2mg(64%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.81 (s, 1H), 8.80 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.71 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.19 - 7.03 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.90 - 5.78 (m, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.75 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 4.03 - 3.87 (m, 1H), 3.87 - 3.76 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.45 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.06 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.59 (m, 1H), 2.52 - 2.35 (m, 2H), 2.29 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.97 - 1.73 (m, 4H), 1.51 - 1.44 (m, 1H), 1.37 - 1.26 (m, 3H), 0.85 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1075.5287 (C61H70N8O10 + H+, 必要とした値1075.5287)。[α]D 23 -1 (c 0.2, CHCl3).
収率:18.1mg(93%), 淡黄色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.91 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 9.30 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 9.04 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.21 (dd, J = 5.1, 1.4 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.03 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.5, 4.8 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.00 - 4.80 (m, 4H), 4.42 (s, 1H), 3.96 (t, J = 13.5 Hz, 1H), 3.91 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.44 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.12 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.64 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 2.50 - 2.35 (m, 2H), 2.30 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.92 - 1.73 (m, 4H), 1.52 - 1.43 (m, 1H), 1.38 - 1.20 (m, 3H), 0.86 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1076.5238 (C60H69N9O10 + H+, 必要とした値1076.5240)。[α]D 23 -14 (c 0.8, CHCl3).
収率:15.5mg(80%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 9.23 (s, 2H), 8.44 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.46 (dd, J = 16.6, 8.1 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.15 - 7.05 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.91 - 5.80 (m, 1H), 5.46 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.97 - 4.78 (m, 4H), 4.42 (s, 1H), 3.96 (t, J = 13.7 Hz, 1H), 3.87 - 3.76 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.32 - 3.11 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.62 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.48 - 2.36 (m, 2H), 2.28 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 2.22 - 2.14 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.71 (m, 4H), 1.50 - 1.42 (m, 1H), 1.37 - 1.24 (m, 3H), 0.89 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1076.5241 (C60H69N9O10 + H+, 必要とした値1076.5240)。[α]D 23 -24 (c 0.7, CHCl3).
収率:6.7mg(59%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 9.70 (s, 1H), 9.51 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.81 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.58 (dd, J = 2.5, 1.5 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 1H), 7.33 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.10 (dq, J = 16.1, 7.9 Hz, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.4, 4.8 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.98 - 4.79 (m, 4H), 4.42 (s, 1H), 4.03 - 3.91 (m, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.37 (dd, J = 16.3, 5.7 Hz, 2H), 3.34 - 3.12 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.58 (m, 1H), 2.51 - 2.35 (m, 2H), 2.35 - 2.25 (m, 1H), 2.24 - 2.13 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.90 - 1.71 (m, 4H), 1.52 - 1.44 (m, 1H), 1.33 (dd, J = 14.5, 7.2 Hz, 3H), 0.82 - 0.79 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1076.5242 (C60H69N9O10 + H+, 必要とした値1076.5240)。[α]D 23 -10 (c 0.3, CHCl3).
収率:8.2mg(36%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 10.14 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 9.34 (dd, J = 5.0, 1.7 Hz, 1H), 8.42 (dd, J = 8.4, 1.7 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.74 (dd, J = 8.4, 5.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.20 - 7.01 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (ddd, J = 10.3, 5.0, 1.6 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (dt, J = 9.8, 2.0 Hz, 1H), 4.99 - 4.79 (m, 4H), 4.42 (s, 1H), 3.97 (t, J = 14.1 Hz, 1H), 3.92 - 3.86 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.34 - 3.06 (m, 5H), 2.83 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.30 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 5H), 1.38 - 1.27 (m, 3H), 0.85 - 0.71 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1076.5248 (C60H69N9O10 + H+, 必要とした値1076.5240)。[α]D 23 -10 (c 0.3, CHCl3).
収率:6.6mg(29%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 9.66 (s, 1H), 9.37 (dd, J = 5.3, 1.2 Hz, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.00 - 7.89 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.57 - 7.43 (m, 2H), 7.30 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.01 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.85 (ddd, J = 10.2, 5.0, 1.6 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.94 - 4.78 (m, 4H), 4.42 (s, 1H), 4.04 - 3.90 (m, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 3.32 - 3.22 (m, 3H), 3.16 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.05 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.63 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.51 - 2.37 (m, 2H), 2.29 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.90 - 1.71 (m, 4H), 1.51 - 1.42 (m, 1H), 1.36 - 1.27 (m, 3H), 0.85 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1076.5242 (C60H69N9O10 + H+, 必要とした値1076.5240)。[α]D 23 -4 (c 0.3, CHCl3).
収率:9.7mg(43%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.84 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.04 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (ddd, J = 10.2, 5.0, 1.6 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (dt, J = 10.1, 2.0 Hz, 1H), 5.02 - 4.76 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 3.96 (t, J = 13.5 Hz, 1H), 3.91 - 3.84 (m, 0H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.41 - 3.34 (m, 2H), 3.34 - 3.26 (m, 1H), 3.27 - 3.20 (m, 2H), 3.17 (d, J = 12.1 Hz, 2H), 2.82 (dt, J = 16.2, 2.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.49 - 2.36 (m, 2H), 2.29 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 2H), 1.50 - 1.41 (m, 1H), 1.37 - 1.24 (m, 2H), 0.83 - 0.73 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1065.5077 (C59H68N8O11 + H+, 必要とした値1065.5080)。[α]D 23 -6 (c 0.4, CHCl3).
収率:5.4mg(49%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.81 (s, 1H), 8.04 - 7.94 (m, 3H), 7.85 (s, 1H), 7.82 - 7.74 (m, 1H), 7.48 - 7.38 (m, 2H), 7.31 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.22 - 7.05 (m, 3H), 6.71 - 6.52 (m, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.89 - 5.83 (m, 1H), 5.50 - 5.40 (m, 1H), 5.30 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.94 - 4.79 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 3.99 - 3.89 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 7H), 3.76 (s, 1H), 3.72 - 3.51 (m, 5H), 3.43 - 3.25 (m, 4H), 3.10 (q, J = 7.1, 6.4 Hz, 1H), 2.83 (d, J = 18.5 Hz, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.67 - 2.62 (m, 1H), 2.58 - 2.36 (m, 3H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.91 - 1.71 (m, 4H), 1.51 - 1.44 (m, 1H), 1.38 - 1.25 (m, 3H), 0.92 - 0.74 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1065.5085 (C59H68N8O11 + H+, 必要とした値1065.5080)。[α]D 23 -10 (c 0.3, CHCl3).
収率:10.4mg(47%), 白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 7.99 (s, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.18 - 7.04 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (ddd, J = 10.2, 5.0, 1.6 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.29 (dt, J = 10.2, 2.0 Hz, 1H), 4.98 - 4.80 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 3.95 (t, J = 13.7 Hz, 1H), 3.92 - 3.85 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 3.33 - 3.13 (m, 5H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.64 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 2.48 - 2.38 (m, 2H), 2.30 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.22 - 2.15 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.86 - 1.74 (m, 5H), 1.37 - 1.26 (m, 3H), 0.85 - 0.77 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1065.5100 (C59H68N8O11 + H+, 必要とした値1065.5080)。[α]D 23 -6 (c 0.4, CHCl3).
収率:6.3mg(56%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.89 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.58 - 7.46 (m, 2H), 7.37 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 7.8 Hz, 3H), 6.72 (s, 1H), 6.68 - 6.62 (m, 1H), 6.20 (s, 1H), 6.02 - 5.88 (m, 1H), 5.62 - 5.46 (m, 1H), 5.38 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 5.02 - 4.85 (m, 4H), 4.47 (s, 1H), 4.10 - 3.99 (m, 1H), 3.95 - 3.85 (m, 7H), 3.84 (s, 1H), 3.68 - 3.55 (m, 3H), 3.51 - 3.15 (m, 7H), 2.91 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.74 - 2.69 (m, 1H), 2.59 - 2.47 (m, 2H), 2.42 - 2.36 (m, 1H), 2.31 - 2.22 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.97 - 1.82 (m, 4H), 1.59 - 1.52 (m, 1H), 1.46 - 1.32 (m, 3H), 1.02 - 0.82 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1064.5133 (C60H69N7O11 + H+, 必要とした値1064.5128)。[α]D 23 -4 (c 0.3, CHCl3).
収率:7.1mg(64%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.81 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.67 - 7.54 (m, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 2H), 7.38 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.21 - 7.05 (m, 3H), 6.73 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.95 - 5.79 (m, 1H), 5.53 - 5.40 (m, 1H), 5.30 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.93 - 4.75 (m, 4H), 4.39 (s, 1H), 4.00 - 3.90 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.06 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.61 (m, 1H), 2.51 - 2.36 (m, 2H), 2.33 - 2.26 (m, 1H), 2.23 - 2.15 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.49 - 1.44 (m, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 3H), 0.92 - 0.75 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1064.5128 (C60H69N7O11 + H+, 必要とした値1064.5128)。[α]D 23 -6 (c 0.3, CHCl3).
収率:7.6mg(54%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.83 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.90 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.94 - 7.81 (m, 2H), 7.48 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.18 - 7.02 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.4, 4.7 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 5.04 (s, 2H), 4.88 (p, J = 13.7 Hz, 4H), 4.41 (s, 1H), 3.96 (t, J = 13.7 Hz, 1H), 3.86 - 3.78 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.14 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.62 (s, 1H), 2.43 (dd, J = 22.3, 11.1 Hz, 2H), 2.29 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 2.19 (dt, J = 14.9, 7.7 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.43 - 1.24 (m, 4H), 0.80 (t, J = 7.3 Hz, 7H)。HRESI-TOF m/z 1091.5345 (C60H70N10O10 + H+, 必要とした値1091.5349)。[α]D 23 -7 (c 0.4, CHCl3).
収率:8.8mg(58%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 9.53 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.56 - 7.43 (m, 2H), 7.30 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.02 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 10.4, 4.7 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.00 - 4.81 (m, 4H), 4.78 (s, 2H), 4.41 (s, 1H), 3.96 (t, J = 13.7 Hz, 1H), 3.88 - 3.77 (m, 7H), 3.75 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 3.34 - 3.12 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.52 - 2.35 (m, 2H), 2.29 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.24 - 2.13 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.90 - 1.72 (m, 4H), 1.43 - 1.24 (m, 4H), 0.83 - 0.76 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1091.5345 (C60H70N10O10 + H+, 必要とした値1091.5349)。[α]D 23 -15 (c 0.4, CHCl3).
収率:10.1mg(48%), 白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.91 - 9.74 (m, 2H), 8.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.04 - 7.95 (m, 2H), 7.91 (s, 1H), 7.56 - 7.43 (m, 2H), 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 - 7.00 (m, 4H), 6.64 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.90 - 5.78 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.29 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.98 - 4.77 (m, 4H), 4.41 (s, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.96 (t, J = 13.6 Hz, 1H), 3.89 - 3.76 (m, 7H), 3.74 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.46 - 3.33 (m, 2H), 3.33 - 3.13 (m, 5H), 2.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.65 - 2.60 (m, 1H), 2.50 - 2.36 (m, 2H), 2.29 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.19 (dt, J = 15.0, 8.2 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 4H), 1.48 (s, 1H), 1.37 - 1.25 (m, 3H), 0.84 - 0.76 (m, 7H)。HRESI-TOF m/z 1090.5378 (C47H57N5O9 + H+, 必要とした値1090.5396)。[α]D 23 -5 (c 0.8, CHCl3).
化合物を培養内のL1210(ATCC番号CCL-219、マウスリンパ性白血病)細胞、HCT116(ATCC番号CCL-247、ヒト結腸直腸癌)細胞、及びHCT116/VM46(HCT116のビンブラスチン耐性株)細胞のそれらの細胞成長抑制について試験した。細胞集団(血球計数器で測定した場合に>1×106個の細胞/mL)を10%ウシ胎仔血清(FBS, Gibco)を含有する適量のダルベッコ変法イーグル培地(DMEM, Gibco)で30000個の細胞/mLの最終濃度に希釈した。
96ウェルプレート(Corning Costar)の各ウェルに、100μLの細胞培養液をマルチチャネルピペットで添加した。培養を5%のCO2及び95%の加湿空気の雰囲気内で24時間37℃でインキュベートした。試験化合物を以下のようにプレートに添加した:試験物質をDMSOで1mM濃度に希釈し、別々の96ウェルプレートで10倍段階希釈を行なった。各ウェルの細胞に新鮮な培養液(100μL)を加えて1ウェル当たり200μLの培地とした後、2μLの各試験薬を添加した。0〜1000nM又は0〜10000nMの間の6つの濃度で二度繰り返して化合物を試験した(n=2〜18回)。添加後、培養を更に72時間インキュベートした。
ホスファターゼアッセイを用いて以下のようにIC50値を確証した:各細胞中の培地を除去し、100μLのホスファターゼ溶液(30mLの0.1M NaOAc中100mgのホスファターゼ基質、pH 5.5、0.1% Triton X-100緩衝液)を各ウェルに加えた。プレートを5分間(L1210)又は15分間(HCT116及びHCT116/VM46)37℃でインキュベートした。所与のインキュベーション時間後、50μLの0.1N NaOHを各ウェルに加え、96ウェルプレートリーダーを用いて405nmでの吸収を測定した。吸収は生細胞数に正比例するので、IC50値を計算した。報告値は、4〜36の測定値の平均(SD±10%)を表す。
PEM中1mg/mLのチューブリン100μL及びDMSO中72μMのBODIPY-VBL 25μLを850μLの緩衝液(PEM+1mM GTP)に添加した。溶液を37℃で15分間インキュベートした後、DMSO中720μMの競合リガンド25μLを加えた。溶液を更に60分間37℃でインキュベートした後、各インキュベーションの100μLのアリコートを(プレートリーダー内で37℃に温めた)96ウェルプレートのウェルに移した。BODIPY-ビンブラスチン蛍光強度を37℃で測定した(Ex 480nm、Em 514nm、カットオフ495nm)。競合リガンドの非存在下のBODIPY-VBL(コントロール1)(チューブリン結合による最大FI増大)及びチューブリン非存在下のBODIPY-VBL(コントロール2)(チューブリン結合によるFI増大なし)でコントロール測定を行なった。式(コントロール2のFI−実験FI)/(コントロール2のFI−コントロール1のFI)×100によってBODIPY-VBL置換%を計算した。PEM:80mM PIPES-K pH 6.8、2mM MgSO4、0.5mM EGTA pH 6.8。
2-Boc-5-アミノイソイドリン(50mg、0.21mmol)をMeOH中のNaOMeの溶液(4mL、0.26M、1.05mmol)に加えた。この溶液を次にMeOH(2mL)中のパラホルムアルデヒド(9.5mg、0.32mmol)の溶液と混ぜ合わせた。溶液を室温で一晩(約18時間)撹拌した後、NaBH4(8mg、0.21mmol)を加えて反応混合物を還流させながら5時間加熱した。室温に冷ました後、NH4Cl飽和水溶液(1mL)を加えて反応をクエンチしてから、水(約20mL)で希釈し、CH2Cl2で抽出した。有機抽出物をNa2SO4上で乾燥させた。溶媒の除去後、生成物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2、15〜45%のEtOAc/ヘキサンのグラジエント)で精製した。収率:25.6mg(52%)、淡黄色油、回転異性体の混合物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.04及び6.09 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.73 - 6.45 (m, 2H), 4.72 - 4.47 (m, 4H), 3.52 (s, 1H), 1.50 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 148.0, 138.5, 123.6, 123.3, 113.6, 113.5, 107.1, 107.0, 79.7, 52.6, 52.3, 52.0, 51.6, 31.9, 31.8, 28.71, 28.67。HRESI-TOF m/z 249.1597 (C14H20N2O2 + H+, 必要とした値249.1597).
MeOH(1mL)とHOAc(1mL)中の2-Boc-5-アミノイソイドリン(50mg、0.21mmol)及びパラホルムアルデヒド(64mg、2.1mmol)の溶液をNaCNBH3(72mg、1.05mmol)で処理した。反応を6時間進行させた後、混合物を水(約20mL)で希釈した。濃NaOH水溶液を加えてpH値を約12に調整した後、溶液をCH2Cl2で抽出した。有機抽出物を混ぜ合わせてNa2SO4上で乾燥させた。溶媒の除去後、生成物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2、20%EtOAc/ヘキサン)で精製した。収率:35.6mg(65%)、淡黄色油、回転異性体の混合物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.13及び7.08 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.82 - 6.46 (m, 2H), 4.77 - 4.45 (m, 4H), 3.06 - 2.85 (m, 6H), 1.51 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 154.2, 154.1, 150.0, 138.0, 137.6, 122.7, 122.4, 111.9, 106.1, 79.0, 52.2, 51.8, 51.3, 51.0, 40.6, 28.1。HRESI-TOF m/z 263.1755 (C15H22N2O2 + H+, 必要とした値263.1754).
DMF(1mL)中の2-Boc-5-アミノイソインドリン(20mg、0.085mmol)及びカルボン酸(0.102mmol)の溶液を1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスファート(HATU;39mg、0.102mmol)及びi-Pr2NEt(17μL、0.102mmol)で処理した。反応を一晩(約18時間)進行させた後、溶液をEtOAc(約20mL)で希釈した。希釈反応物をNaHCO3飽和水溶液で2回及びNaCl飽和水溶液で1回抽出した。有機層をNa2SO4上で乾燥させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー(SiO2)でEtOAc/ヘキサンの溶媒グラジエントを用いて精製した。
収率:20.1mg(78%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.75 - 7.55 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 - 7.22 (m, 1H), 7.17及び7.14 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.05 - 6.92 (m, 1H), 5.97及び5.95 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.79 - 4.40 (m, 4H), 1.90 (dd, J = 6.9, 1.7 Hz, 3H), 1.51 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 164.2, 154.7, 141.8, 137.7, 125.5, 123.2, 123.0, 119.4, 114.5, 79.9, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 28.7, 18.0。HRESI-TOF m/z 303.1702 (C17H22N2O3 + H+, 必要とした値303.1703).
収率:22.7mg(85%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.76 - 7.57 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.33 - 7.21 (m, 1H), 7.18及び7.15 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 5.79 - 5.67 (m, 1H), 4.76 - 4.51 (m, 4H), 2.24 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 1.92 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 1.53 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 165.2, 154.7, 137.8, 123.1, 122.9, 119.2, 118.7, 114.3, 79.9, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 28.7, 27.6, 20.1。HRESI-TOF m/z 317.1859 (C18H24N2O3 + H+, 必要とした値317.1860).
収率:24.8mg(91%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.95 (s, 1H), 7.78 - 7.70 (m, 2H), 7.55 - 7.28 (m, 6H), 7.22 - 7.10 (m, 1H), 6.61及び6.59 (s, 1H), 4.73 - 4.50 (m, 4H), 1.52 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 164.3, 154.7, 142.5, 137.7, 134.7, 130.1, 129.0, 128.1, 123.2, 121.0, 119.5, 114.6, 79.9, 52.2, 52.1, 51.9, 28.7。HRESI-TOF m/z 340.1657 (C19H21N3O3 + H+, 必要とした値340.1656).
収率:23.2mg(90%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.76 (s, 1H), 7.68 - 7.52 (m, 1H), 7.38 - 7.21 (m, 1H), 7.21 - 7.07 (m, 1H), 4.79 - 4.46 (m, 4H), 1.52 (s, 10H), 1.09 (p, J = 4.2 Hz, 2H), 0.85 (dq, J = 7.3, 4.0 Hz, 2H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 172.2, 154.7, 137.8, 123.1, 123.0, 119.1, 114.4, 79.9, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 28.7, 15.8, 8.1。HRESI-TOF m/z 303.1703 (C17H22N2O3 + H+, 必要とした値303.1703).
収率:32.4mg(90%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.15 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.73 - 7.64 (m, 1H), 7.54 - 7.31 (m, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 2H), 7.20 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.62 (s, 4H), 1.51 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 164.8, 154.6, 151.8, 137.3, 133.4, 129.2, 123.3, 123.2, 120.9, 119.9, 115.1, 80.0 , 52.5, 52.2, 51.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 423.1525 (C21H21F3N2O4 + H+, 必要とした値423.1526).
収率:27.5mg(85%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.00 (s, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 2H), 7.77 - 7.62 (m, 1H), 7.49 - 7.33 (m, 1H), 7.34 - 7.29 (m, 2H), 7.25 - 7.15 (m, 1H), 4.76 - 4.49 (m, 4H), 2.96 (hept, J = 6.9 Hz, 1H), 1.52 (s, 9H), 1.27 (d, J = 6.9 Hz, 6H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 165.9, 154.6, 153.4, 137.7, 132.5, 127.3, 127.0, 123.2, 123.1, 119.7, 119.6, 114.9, 114.8, 79.9, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 34.3, 28.7, 28.6, 23.8 , 23.86。HRESI-TOF m/z 381.2171 (C23H28N2O3 + H+, 必要とした値381.2173).
収率:32.1mg(91%)、白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.04 - 7.85 (m, 3H), 7.81 - 7.72 (m, 1H), 7.71 - 7.67 (m, 2H), 7.66 - 7.58 (m, 2H), 7.52 - 7.44 (m, 2H), 7.44 - 7.38 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 4.81 - 4.55 (m, 4H), 1.53 (s, 9H)。13C NMR (126 MHz, CDCl3) δ 165.6, 154.7, 144.9, 140.0, 137.5, 133.6, 129.1, 128.3, 127.7, 127.6, 127.4, 119.7, 114.9, 79.9, 52.5, 52.3, 52.2, 51.9, 28.7 。HRESI-TOF m/z 415.2015 (C26H26N2O3 + H+, 必要とした値415.2016).
収率:25.4mg(88%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 10.05 (s, 1H), 8.74 - 8.45 (m, 1H), 8.29 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.91 (td, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.87及び7.83 (s, 1H), 7.64 - 7.44 (m, 2H), 7.24 (dd, J = 26.7, 8.1 Hz, 1H), 4.78 - 4.57 (m, 4H), 1.52 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 162.1, 154.6, 149.8, 148.1, 138.6, 138.2, 137.9, 137.3, 133.3, 133.0, 126.6, 123.3, 123.1, 122.5, 119.2, 119.1, 114.2, 114.0, 79.9, 79.8, 52.5, 52.3, 52.2, 51.9, 28.7。HRESI-TOF m/z 340.1657 (C19H21N3O3 + H+, 必要とした値340.1656).
収率:27.0mg(94%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.09 (s, 1H), 8.74 (dt, J = 4.8, 2.4 Hz, 1H), 8.51 - 8.33 (m, 1H), 8.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.78 - 7.61 (m, 1H), 7.53 - 7.33 (m, 2H), 7.25 - 7.17 (m, 1H), 4.69 - 4.56 (m, 4H), 1.51 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 164.2, 154.6, 152.61, 152.59, 148.12, 148.09, 138.60, 138.58, 138.2.138.13, 137.16, 137.14, 135.5, 134.05, 134.03, 133.67, 133.64, 130.84, 130.81, 123.7, 123.4, 123.2, 120.1, 120.1, 115.3, 115.1, 80.00, 79.98, 52.5, 52.18, 52.14, 51.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 340.1655 (C19H21N3O3 + H+, 必要とした値340.1656).
収率:24.1mg(84%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.82 - 8.69 (m, 2H), 8.37 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 7.83 - 7.60 (m, 3H), 7.54 - 7.32 (m, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 1H), 4.69 - 4.55 (m, 4H), 1.51 (d, J = 1.5 Hz, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 164.0, 154.6, 150.8, 142.13, 142.10 , 138.7, 138.2, 137.0, 136.9, 134.3, 133.9, 123.4, 123.2, 121.1, 120.0, 119.9, 115.2, 115.1, 80.1, 80.0, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 340.1656 (C19H21N3O3 + H+, 必要とした値340.1656).
収率:24.8mg(86%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.69 (s, 1H), 9.51 (s, 1H), 8.81 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.63 - 8.53 (m, 1H), 7.90 - 7.75 (m, 1H), 7.63 - 7.42 (m, 1H), 7.28 - 7.22 (m, 1H), 4.76 - 4.60 (m, 4H), 1.52 (d, J = 2.2 Hz, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 160.8, 154.6, 147.7, 144.8, 144.4, 142.5, 138.7, 138.3, 136.79, 136.76, 133.9, 133.6, 123.5, 123.3, 119.3, 114.4, 114.3, 79.9, 79.9, 52.5, 52.2, 52.1, 51.9, 28.7。HRESI-TOF m/z 341.1606 (C18H20N4O3 + H+, 必要とした値341.1608).
収率:23.7mg(82%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 10.13 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.94 - 7.72 (m, 2H), 7.55 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 1H), 4.75 - 4.60 (m, 4H), 1.52 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 160.2, 154.6, 153.2, 136.7, 134.1, 128.4, 126.0, 123.5, 123.3, 119.4, 114.6, 114.3, 79.9, 52.5, 52.3, 52.2, 51.9, 28.7。HRESI-TOF m/z 341.1607 (C18H20N4O3 + H+, 必要とした値341.1608).
収率:21.5mg(62%)、白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.71 (s, 1H), 9.53 - 9.13 (m, 2H), 8.05 (s, 1H), 7.75及び7.67 (s, 1H), 7.53及び7.44 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 4.84 - 4.42 (m, 4H), 1.50 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 162.1, 154.7, 138.6, 138.1, 136.8, 134.6, 134.2, 123.5, 123.3, 120.4, 120.3, 115.5, 115.4, 80.2, 52.5, 52.2, 51.8, 28.7 。HRESI-TOF m/z 341.1607 (C18H20N4O3 + H+, 必要とした値341.1608).
収率:26.2mg(91%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.92 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 9.07 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.25 (dd, J = 5.0, 1.4 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.67 - 7.45 (m, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.75 - 4.65 (m, 4H), 1.54 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 160.2, 159.6, 157.6, 156.4, 154.6, 136.5, 123.4, 119.4, 118.8, 114.4, 80.0, 52.3, 52.0, 28.7。HRESI-TOF m/z 341.1607 (C18H20N4O3 + H+, 必要とした値341.1608).
収率:25.0mg(87%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.35 (s, 1H), 9.30 (s, 2H), 8.70 - 8.55 (m, 1H), 7.75 - 7.60 (m, 1H), 4.51 - 7.39 (m, 1H), 7.25 - 7.16 (m, 1H), 4.76 - 4.51 (m, 4H), 1.51 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 161.8, 160.2, 156.0, 154.7, 138.2, 136.7, 128.7, 123.5, 123.3, 115.3, 80.1, 52.5, 52.2, 51.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 341.1608 (C18H20N4O3 + H+, 必要とした値341.1608).
収率:17.3mg(62%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, アセトン-d6) δ 9.61 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.86 - 7.69 (m, 2H), 7.62 (dt, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 7.26 (dd, J = 11.4, 8.2 Hz, 1H), 4.70 - 4.38 (m, 4H), 1.45 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, アセトン-d6) δ 155.8, 154.7, 153.7, 146.7, 138.6, 131.0, 123.9, 120.6, 115.5, 79.6, 53.0, 52.8 52.6, 52.4, 38.7, 28.7。HRESI-TOF m/z 352.1266 (C17H19N3O4 + Na+, 必要とした値352.1268)
収率:17.0mg(61%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.75 - 7.60 (m, 1H), 7.51 - 7.31 (m, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 1H), 4.74 - 4.56 (m, 4H), 1.51 (d, J = 1.2 Hz, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 154.7, 154.6, 151.5, 145.5, 138.8, 138.4, 136.28, 136.25, 134.3, 134.0, 131.4, 123.5, 123.3, 119.7, 119.6, 114.9, 114.8, 80.01, 79.98, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 330.1449 (C17H19N3O4 + H+, 必要とした値330.1449).
収率:26.8mg(95%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, アセトン-d6) δ 9.75 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.05 - 7.81 (m, 2H), 7.76 (dt, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 10.9, 8.2 Hz, 1H), 4.87 - 4.54 (m, 4H), 1.59 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, アセトン-d6) δ 155.9, 154.8, 153.8, 146.8, 138.6, 131.1, 123.9, 120.6, 115.6, 79.7, 53.0, 52.8, 52.7, 52.4, 38.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 352.1270 (C17H19N3O4 + Na+, 必要とした値352.1268).
収率:25.6mg(94%)、無色油、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.14 (s, 1H), 7.77 - 7.63 (m, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.49 - 7.31 (m, 1H), 7.25 - 7.17 (m, 2H), 6.62 - 6.50 (m, 1H), 4.79 - 4.51 (m, 4H), 1.51 (d, J = 1.8 Hz, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 154.6, 147.8, 144.4, 138.6, 138.2, 136.93, 136.90, 133.6, 133.2, 123.3, 123.2, 119.40, 119.35, 115.5, 114.6, 114.5, 112.8, 79.90, 79.87, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 329.1494 (C18H20N2O4 + H+, 必要とした値329.1496).
収率:26.0mg(92%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 7.89 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.71 - 7.53 (m, 1H), 7.47 - 7.45 (m, 1H), 7.45 - 7.27 (m, 1H), 7.17 (dd, J = 14.0, 8.2 Hz, 1H), 4.65 - 4.58 (m, 4H), 1.51 (d, J = 1.7 Hz, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 161.0, 154.7, 145.39, 145.37, 144.1, 138.5, 138.0, 137.3, 137.2, 133.5, 133.2, 123.2, 123.10, 123.06, 119.9, 119.8, 115.1, 115.0, 108.6, 79.98, 79.95, 52.5, 52.2, 52.1, 51.8, 28.7。HRESI-TOF m/z 329.1498 (C18H20N2O4 + H+, 必要とした値329.1496).
収率:31.8mg(98%)、白色固体、回転異性体の混合物。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.80 (s, 1H), 8.07 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.00 (t, J = 3.2 Hz, 1H), 7.85及び7.81 (s, 1H), 7.60 - 7.42 (m, 1H), 7.22 (dd, J = 26.9, 8.3 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.5, 2.7 Hz, 1H), 4.70 - 4.60 (m, 4H), 4.10 (s, 2H), 1.52 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 162.7, 154.7, 145.4, 140.3, 138.5, 137.8, 135.0, 132.7, 123.7, 123.2, 123.0, 121.4, 118.99, 118.95, 114.0, 113.8, 79.8, 52.6, 52.3, 52.2, 51.9, 28.7。HRESI-TOF m/z 355.1766 (C19H22N4O3 + H+, 必要とした値355.1765).
生成物は反応溶液から白色固体として沈殿する。冷EtOAcですすぎながら濾過により生成物を単離した。フラッシュクロマトグラフィーによるさらなる精製は必要なかった。収率:54.6mg(94%)、白色固体。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.58 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.18 - 7.97 (m, 1H), 7.82 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.59 - 7.45 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.85 - 4.53 (m, 4H), 1.59 (s, 9H), 1.52 (s, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 161.0, 154.7, 151.6, 150.8, 142.6, 139.0, 137.1, 132.9, 123.4, 123.2, 119.3, 114.4, 114.2, 82.9, 79.9, 52.5, 52.3, 52.2, 51.9, 28.4。HRESI-TOF m/z 456.2240 (C23H29N5O5 + H+, 必要とした値456.2241).
収率:56.2mg(95%)、白色固体。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.53 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.90 - 7.69 (m, 1H), 7.62 - 7.37 (m, 1H), 7.25 - 7.18 (m, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.74 - 4.57 (m, 4H), 1.52 (d, J = 2.1 Hz, 9H)。13C NMR (151 MHz, CDCl3) δ 161.4, 154.7, 152.5, 141.4, 138.6, 138.2, 137.0, 136.0, 133.7, 133.6, 133.2, 123.3, 123.2, 119.2, 114.3, 114.2, 79.9, 52.5, 52.23, 52.15, 51.9, 28.7。HRESI-TOF m/z 356.1717 (C18H21N5O3 + H+, 必要とした値356.1717).
前述の説明及び例は、理解を助ける意図であり、限定と解釈すべきでない。本発明の精神及び範囲内の更に他の変形形態が可能であり、当業者にはそれらが容易に思い浮かぶであろう。
Claims (20)
- W、X、Y及びZの1つが、窒素である、請求項1に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩。
- Wが、窒素である、請求項2に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩。
- Xが、窒素である、請求項2に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩。
- Yが、窒素である、請求項2に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩。
- Zが、窒素である、請求項2に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩。
- Rbが、Hである、請求項1に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩。
- ビンブラスチンの誘導体である、請求項1に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩。
- R4が、アミノである、請求項10に記載の20’-置換ビンブラスチン又はその医薬的に許容可能な塩。
- 生理学的に許容可能な担体に溶解又は分散した癌性細胞増殖抑制量の請求項1に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩を含むことを特徴とする医薬組成物。
- a) W、X、Y及びZの1つが、窒素であり、
b) R4が、アミノであり、かつ
c) Rbが、Hである、
請求項13に記載の医薬組成物。 - 癌性細胞の成長を抑制するための医薬の製造における、請求項1に記載の20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩の使用であって、前記癌性細胞を、前記20’-ヒドロキシ-ビンカ誘導体又はその医薬的に許容可能な塩と接触させることを特徴とする使用。
- 前記癌性細胞を複数回接触させる、請求項15に記載の使用。
- 前記癌性細胞をインビトロで接触させる、請求項15に記載の使用。
- 前記接触させる癌性細胞が、白血病細胞である、請求項15に記載の使用。
- 前記接触させる癌性細胞が、癌細胞である、請求項15に記載の使用。
- 前記接触させる癌細胞が、ビンブラスチンに耐性である、請求項19に記載の使用。
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