JP6778285B2 - ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 - Google Patents
ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6778285B2 JP6778285B2 JP2019002319A JP2019002319A JP6778285B2 JP 6778285 B2 JP6778285 B2 JP 6778285B2 JP 2019002319 A JP2019002319 A JP 2019002319A JP 2019002319 A JP2019002319 A JP 2019002319A JP 6778285 B2 JP6778285 B2 JP 6778285B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- alkyl
- alkenyl
- substrate
- heteroatom
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 44
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 27
- 208000015439 Lysosomal storage disease Diseases 0.000 title description 21
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 226
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 148
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 148
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 145
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 130
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 125
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 108
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 102
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 90
- 125000003358 C2-C20 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 54
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 claims description 45
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 35
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 32
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 32
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 31
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 31
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 21
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 21
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 claims description 17
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 15
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 15
- 125000004450 alkenylene group Chemical group 0.000 claims description 14
- 125000006835 (C6-C20) arylene group Chemical group 0.000 claims description 7
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000001951 carbamoylamino group Chemical group C(N)(=O)N* 0.000 claims description 7
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 7
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 2
- GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N aldehydo-D-galactose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N 0.000 claims 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 143
- 239000000047 product Substances 0.000 description 100
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 57
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 42
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 37
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 31
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 30
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 29
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 3,4,5,6-tetrahydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 17
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 16
- GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 15
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 13
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 12
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 12
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 12
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 102000004547 Glucosylceramidase Human genes 0.000 description 11
- 108010017544 Glucosylceramidase Proteins 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 10
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 10
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 10
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 10
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 10
- 208000015872 Gaucher disease Diseases 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 9
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 7
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 0 CC(C*)C(C(CO*)NC(*)=O)O Chemical compound CC(C*)C(C(CO*)NC(*)=O)O 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000010055 Globoid Cell Leukodystrophy Diseases 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000028226 Krabbe disease Diseases 0.000 description 6
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 6
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 102100028496 Galactocerebrosidase Human genes 0.000 description 5
- 101710156684 Galactocerebrosidase Proteins 0.000 description 5
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 5
- 238000002820 assay format Methods 0.000 description 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 5
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 5
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 5
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 5
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N (-)-D-erythro-Sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCC=CC(O)C(N)CO WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- -1 C 5 amide Chemical class 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100033448 Lysosomal alpha-glucosidase Human genes 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- SXXHYAMKYMNIHI-UHFFFAOYSA-N fluoroimino(sulfanylidene)methane Chemical compound FN=C=S SXXHYAMKYMNIHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N sphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 241000605059 Bacteroidetes Species 0.000 description 3
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 3
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000007837 multiplex assay Methods 0.000 description 3
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002542 parent ion scan Methods 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 3
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 3
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 125000003774 valeryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 125000003837 (C1-C20) alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- PKYCWFICOKSIHZ-UHFFFAOYSA-N 1-(3,7-dihydroxyphenoxazin-10-yl)ethanone Chemical compound OC1=CC=C2N(C(=O)C)C3=CC=C(O)C=C3OC2=C1 PKYCWFICOKSIHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 2
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 2
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 2
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 2
- 208000032007 Glycogen storage disease due to acid maltase deficiency Diseases 0.000 description 2
- 206010053185 Glycogen storage disease type II Diseases 0.000 description 2
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 241000162682 Heterogen Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N Taurocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 125000006193 alkinyl group Chemical group 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N alpha-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N 0.000 description 2
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N beta-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 125000000600 disaccharide group Chemical group 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 2
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 2
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 2
- 201000004502 glycogen storage disease II Diseases 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 2
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Chemical compound [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N taurocholic acid Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@H](O)C1 WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M (4z)-1-(3-methylbutyl)-4-[[1-(3-methylbutyl)quinolin-1-ium-4-yl]methylidene]quinoline;iodide Chemical compound [I-].C12=CC=CC=C2N(CCC(C)C)C=CC1=CC1=CC=[N+](CCC(C)C)C2=CC=CC=C12 QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRDABNWSWOHGMS-UHFFFAOYSA-N AEBSF hydrochloride Chemical compound Cl.NCCC1=CC=C(S(F)(=O)=O)C=C1 WRDABNWSWOHGMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000032170 Congenital Abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-IVMDWMLBSA-N D-allopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-JDJSBBGDSA-N D-allulose Chemical compound OCC1(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O LKDRXBCSQODPBY-JDJSBBGDSA-N 0.000 description 1
- PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N D-glucono-1,5-lactone Chemical compound OC[C@H]1OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024720 Fabry Disease Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 208000001019 Inborn Errors Metabolism Diseases 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VSOAQEOCSA-N L-altropyranose Chemical compound OC[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VSOAQEOCSA-N 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108700020962 Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 102000011971 Sphingomyelin Phosphodiesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010061312 Sphingomyelin Phosphodiesterase Proteins 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] n-[(z)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]carbamate Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C/C(O)C(CO)NC(=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 125000000188 beta-D-glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 230000008238 biochemical pathway Effects 0.000 description 1
- 230000009287 biochemical signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000007698 birth defect Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003518 caustics Substances 0.000 description 1
- 239000011797 cavity material Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 1
- 150000001784 cerebrosides Chemical class 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000002641 enzyme replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001924 fatty-acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N fluorescamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(=O)OC1(C1=O)OC=C1C1=CC=CC=C1 ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 150000002305 glucosylceramides Chemical class 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 description 1
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 description 1
- 125000002951 idosyl group Chemical class C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 208000016245 inborn errors of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 238000007373 indentation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000015978 inherited metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- BJHIKXHVCXFQLS-PQLUHFTBSA-N keto-D-tagatose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(=O)CO BJHIKXHVCXFQLS-PQLUHFTBSA-N 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- CIPMKIHUGVGQTG-VFFZMTJFSA-N leupeptin hemisulfate Chemical compound OS(O)(=O)=O.CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N.CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N CIPMKIHUGVGQTG-VFFZMTJFSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002668 lysine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000009251 neurologic dysfunction Effects 0.000 description 1
- 208000015015 neurological dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000382 optic material Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002541 precursor ion scan Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- HHJTWTPUPVQKNA-PIIMIWFASA-N psychosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HHJTWTPUPVQKNA-PIIMIWFASA-N 0.000 description 1
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013024 sodium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011775 sodium fluoride Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N sulfuryl dichloride Chemical class ClS(Cl)(=O)=O YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- LEONUFNNVUYDNQ-UHFFFAOYSA-N vanadium atom Chemical compound [V] LEONUFNNVUYDNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C233/00—Carboxylic acid amides
- C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
- C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
- C07C233/17—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
- C07C233/18—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
- C07H15/10—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical containing unsaturated carbon-to-carbon bonds
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
本出願は、2013年3月15日出願の米国特許仮出願第61/789,985号に依存し、優先権を主張するものであり、その内容全体を参照により本明細書に組み込む。
分野
ゴーシェ病の人々は、これらの脂肪性物質を分解するのに必要な酵素であるグルコセレブロシダーゼを作らない。そして、これらの脂肪性物質は肝臓、脾臓および骨髄の細胞に蓄積する。三つ目の例示はポンペ病であり、グリコーゲンと呼ばれる特定の糖を分解するのに必要な酵素酸性α-グルコシダーゼの欠乏に起因するライソゾーム病である。酵素酸性α-グルコシダーゼを欠損すると、グリコーゲンが体内の様々な組織および器官に蓄積する。
任意に、R2はC13アルキルである。
5N、17O、18O、31Pまたは34Sからなる群より選択される。
はまた、糖部分Aと基質の残りの構造との間のスペーサーとして機能することで、標的の酵素が柔軟に接近できるようにする。リンカーアームB1は、物質の極性、およびゆえにそれらの溶解特性を制御するように設計され得る。場合によって、リンカーアームB1はヒドロフェノール構造を有し得る。従って、一般式Iの基質は、純メタノールまたは純エタノールなどの溶媒において少なくとも部分的に親水性となるように設定され得る。脂肪酸部分は、全体として一般的に基質に水溶解度を付与するために十分に親水性となるよう調製される。このように、基質は水性緩衝液系に可溶性であり得る。しかしながら、当技術分野で知られているように、基質物質の水溶解度を向上させるために、界面活性剤または他のそのような薬剤が薬剤混合物中に含まれ得ることが理解される。
従って、異なるA基を有する基質と異なる生成物の組成物とを組み合わせることにより、サンプル中に存在する特定の酵素の迅速な同定が容易に達成される。
))はC7アミド基に結合したメチレンのB1および長さが1〜20炭素のアルケニルを含有する置換基を含む。クラッベ病を検出するために、例示的な糖部分はβ-D-ガラクトースであり、そして例示的な脂肪酸部分はC5アミドに結合したメチレンのB1および長さが1〜20
炭素のアルケニルを含有する置換基を含む。
適切な固形担体は、種々の物理的形態を有することができ、これは例えば膜;カラム;ビーズなどの中空、固形、半固形、細孔または空洞を含む粒子;ゲル;光ファイバー物質を含む繊維;マトリクスおよびサンプル容器を含み得る。サンプル容器の限定されない例示は、サンプルウエル、管、キャピラリー、バイアルおよびサンプルの保持が可能なあらゆる他のベッセル、グローブまたはインデンテーションを含む。サンプル容器は、マイクロプレート、スライド、マイクロ流体装置などの多試料プラットフォームを含み得る。多くの適切な粒子が当技術分野で知られており、そして例示として、Luminex(登録商標)タイプのコード化粒子、コード化光ファイバー粒子、磁気粒子、およびガラス粒子を含む。基質および/またはその酵素切断生成物の固形担体との共有結合性相互作用は、いくつかのアッセイフォーマットで実施される洗浄工程中に基質および/または生成物を保持し、従って、酵素活性の強くかつ正確なシグナルを生じるのに有用である。
式IIに従って合成されるさらなる化合物を、表1に表す。
[表1]
表1
[表2]
表2
*は、NHS脂肪酸がHからDへの置換を含むことを示す。
**は、スフィンゴシンが末端のHからDへの置換を含むことを示す。
化合物1および7の基質を、それぞれ酸性β-グルコセレブロシダーゼ(ABG)およびガラクトセレブロシド-β-ガラクトシダーゼ(GALC)の存在を検出するのに使用する。血液を、同意した成人から静脈穿刺により得て、そして濾紙上にブロットする。それぞれのサンプルについて、3 mm径のディスクを乾燥血液の部分からパンチし、96穴マイクロタイタープレートのウエルに入れる。次に、血液ディスクを最終濃度500 μmol/Lの基質および10 μmol/Lの対応する内部標準を含むアッセイ溶液で直接インキュベーションする。アッセイ溶液に、最終濃度0.5 mol/Lの酢酸ナトリウム緩衝液をタウロコール酸と共に添加する。血液ディスクを含むアッセイ混合液を、15〜24時間、セ氏37℃で、恒温エア振とう機で軌道振とう(150 rpm)しながらインキュベーションする。インキュベーション時間の後、一定の分液の純メタノールをそれぞれの管またはウエルに添加して、酵素反応を停止させる。質量分析器に入れる前に、インキュベーション反応混合液を純メタノールで希釈する。質量分析のために、エレクトロスプレー源をポジティブモードに操作し、そしてイオンを親イオンスキャンモードで検出する。酵素生成物の量は、ブランクを差し引いた内部標準に対する生成物のイオン存在比から算出する。
別の実施形態において、式Iの基質での反応の生成物を免疫測定法によって定量する。濾紙上にスポットした血液を緩衝液中に戻し、活性成分を遊離させる。1つまたは一連の基質を反応容器に添加し、そして反応を一晩(〜14時間)進行させる。反応を、6倍容量のグリシン/NaOH pH 10.4を添加して停止させる。それぞれの反応のサンプルを高結合照射マイクロタイタープレートのウエルに添加し、そして反応生成物がプレートのウエルに十分に結合させるように一晩インキュベーションする。類似の緩衝液/サンプル中の生成物の標準曲線もまた、定量の基準として役立てるためにプレートに添加する。プレートの表面への結合が完了した後、ウエルをリン酸緩衝生理食塩水(PBS)で、噴出ボトル、プレート洗浄機またはあらゆる他の自動もしくは非自動プレート洗浄システムを使用して2回洗浄する。続いて、タンパク質結合のためのすべてのさらなる部分を、例示として、PBS中の3%ウシ血清アルブミンまたは当技術分野で知られるあらゆる他の合成もしくは天然のブロッキング剤を含むブロッキング剤の添加によりブロックする。ブロッキング剤を、2時間室温でインキュベーションする。ウエルを3回PBSで洗浄する。次に、1次抗体をウエルに添加して、残った基質または生成物を認識および結合させる。抗体を、ウエル内で少なくとも2時間インキュベーションする。プレートを4回洗浄して、非結合抗体を除去する。1次抗体が標識されている場合、プレートを検出に使用する。任意に、標識化2次抗体をプレートウエル内に入れ、そしてさらに2時間インキュベーションした後、4回洗浄し、そして蛍光または光学式プレートリーダーなどによる適切な方法によって検出してもよい。
別の実施形態において、式IIIの基質による反応の生成物を免疫測定法によって定量する。濾紙上にスポットした血液を緩衝液中に戻し、活性成分を遊離させる。コード化粒子に固定された1つまたは一連の基質を反応容器、好ましくはマイクロプレートウエルに添加し、そして反応を一晩(〜14時間)進行させる。類似の緩衝液/サンプル中の酵素の標準曲線もまた、定量の基準として役立てるためにコード化粒子の別々のセットに添加する。反応を、6倍容量のグリシン/NaOH pH 10.4を添加して停止させる。次に、1次抗体をウエルに添加して、残った基質または生成物を認識および結合させる。抗体を、少なくとも30分間インキュベーションする。1次抗体が標識されている場合、すぐに検出ができる。任意に、標識化2次抗体をプレートウエル内に入れ、そしてさらに30分間インキュベーションしてもよい。検出を、フローサイトメーターにより行う。
式Iの例示的な実施形態のB2における活性末端アミノ基あるいは式IIもしくはIIIのR1またはR2基は、多くの標識方法に従う。代表的な実施例において、末端アミンを特にフルオロイソチオシアネート(FITC)で標識する。基質の誘導体化を、FITC分子をB2基の末端アミンに付加することにより実施する。類似の修飾は、存在するのであれば末端炭素上ではないアミン基で実施され得る。精製/凍結乾燥した基質を、0.1 M重炭酸ナトリウム緩衝液、pH9.0中に5 mg/mlの濃度で再溶解する。基質と反応する直前に、5 mgのFITC染料を0.5 mlのDMSOに暗下で溶解する。穏やかに攪拌しながら、0.1 mlの染色溶液を基質溶液に添加し、そして暗下で室温にて1時間インキュベーションする。遊離の反応しなかった染料を、リン酸緩衝生理食塩水で事前に平衡化した10×300 mm Sephadex Gカラムでゲル濾過することで除去する。最終生成物の濃度は、質量分析または当技術分野において知られる他の方法により測定する。さらに使用するまで-20℃で保存するために標識化基質を任意に濃縮および分液化する。
サンプル中の標識化生成物の量は、そのピークの領域を既知の濃度の標識化生成物からなる外部標準のそれと比較することによって測定する。反応における生成物の濃度は容易に測定され、そしてグルコセレブロシダーゼの活性は、単位反応時間で生成物モル数を割算して測定する。
本開示は以下の実施形態を含む。
[1]
以下の式を有する酵素の分析のための基質であって:
Aはグリコシド結合によってOに結合した単糖類または二糖類であり;
B1は、C 1 -C 20 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル、C 2 -C 20 アルケニル;ヘテロ原
子含有C 2 -C 20 アルケニル、置換または非置換C 6 -C 20 アリールからなる群より選択され;
B2は、C 2 -C 7 アミド;C 2 -C 7 ウレタン;C 2 -C 7 エステル、C 2 -C 7 ウレイド;C 2 -C 7 カルバマ
ート;C 2 -C 7 カルボニル;C 1 -C 7 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 7 アルキル;N、OまたはSを
含む置換基を有するC 1 -C 7 アルキル;C 2 -C 7 アルケニル;ヘテロ原子含有C 2 -C 7 アルケニル
;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 7 アルケニルからなる群より選択され;
B3は、N、OまたはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルキル;C 1 -C 20 アルキル;ヘテロ原
子含有C 1 -C 20 アルキル;C 4 -C 20 エーテル;C 1 -C 20 エステル、C 1 -C 20 アルケニル;ヘテロ原
子含有C 1 -C 20 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニル;C 1 -C 20
アルキニル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 2
0 アルキニル;C 6 -C 20 アリール;およびN、OまたはSから選択されるヘテロ原子を含有する
C 6 -C 20 複素環からなる群より選択される、前記基質。
[2]
Aがアルドヘキソースまたはケトヘキソースである、[1]に記載の基質。
[3]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースである、[1]に記載の基質。
[4]
B1がメチレンである、[1]〜[3]のいずれか1項に記載の基質。
[5]
B2がC 2 -C 7 アミドである、[1]〜[3]のいずれか1項に記載の基質。
[6]
B3がN、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニルである、[1]〜[3]のいずれか1項に記載の基質。
[7]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースであり;
B1がC 1 -C 2 アルキルまたはC 6 アリールであり;
B2がC 2 -C 7 アミドである、
[1]に記載の基質。
[8]
B3がN、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニルである、[7]に記載の基質。
[9]
以下を含む[1]〜[3]のいずれか1項に記載の基質であって、
式中、
Aはアルドヘキソースまたはケトヘキソースであり、
R 1 はC 1 -C 6 アルキルまたはC 2 -C 20 アルケニルであり;
R 2 はC 1 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルキル、C 1 -C 20 ア
ルケニル、またはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルケニルである、前記基
質。
[10]
[9]に記載の化合物であって、
式中、
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースであり、
R 1 がC 4 -C 6 アルキルであり;
R 2 がC 13 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルキル、C 13 -C 20
アルケニル、またはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルケニルである、前記
化合物。
[11]
R 2 がC 13 アルキルである、[10]に記載の化合物。
[12]
以下を含む酵素の分析のための基質であって、
式中、
Aはグリコシド結合によってOに結合した単糖類または二糖類であり;
B1は:C 1 -C 20 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル、C 2 -C 20 アルケニル;ヘテロ原
子含有C 2 -C 20 アルケニル;および置換または非置換C 6 -C 20 アリールからなる群より選択さ
れ;
R 1 'は置換もしくは非置換のCまたはNであり;
R 2 'は置換もしくは非置換のC、置換もしくは非置換のN、OまたはSであり;
R 3 'は置換もしくは非置換のC、NまたはOであり;
R 4 'はなしであるか、置換もしくは非置換C 1 -C 2 、OまたはSであり;
R 1 は:C 1 -C 6 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 7 アルキル:N、OまたはSを含む置換基を有
するC 1 -C 7 アルキル;C 2 -C 7 アルケニル;ヘテロ原子含有C 2 -C 7 アルケニル;N、OまたはSを
含む置換基を有するC 2 -C 7 アルケニルであり;
R 5 'はなしであるか、置換もしくは非置換C 1 -C 2 、OまたはSであり;
R 6 'はC 1 -C 20 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル;N、OまたはSを含む置換基を有
するC 1 -C 20 アルキル;C 4 -C 20 エーテル;C 1 -C 20 エステル;C 1 -C 20 アルケニル;ヘテロ原子
含有C 1 -C 20 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニル;C 6 -C 20 ア
リール;およびN、OまたはSから選択されるヘテロ原子を含有するC 6 -C 20 複素環である、
前記基質。
[13]
Aがアルドヘキソースまたはケトヘキソースである、[13]に記載の基質。
[14]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースである、[14]に記載の基質。
[15]
以下:
[式中、
R 2 'は置換もしくは非置換のC、または置換もしくは非置換のNである];
[式中、
R 2 ''はHまたはメチル基であり、
R 2 '''がHまたはメチル基である];
ならびに
[式中、
R 3 'は置換または非置換のCであり;
R 4 'はなしであるか、置換もしくは非置換C 1 -C 2 、OまたはSである」
からなる群より選択される、[12]〜[14]のいずれか1項に記載の基質。
[16]
以下:
[式中、
Aはアルドヘキソースまたはケトヘキソースであり;
R 1 はC 1 -C 6 アルキルまたはC 2 -C 20 アルケニルであり;
R 2 はC 1 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルキル、C 1 -C 20 ア
ルケニル、またはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルケニルである]
を含む[12]〜[14]のいずれか1項に記載の基質。
[17]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースであり、
R 1 がC 4 -C 6 アルキルであり;
R 2 がC 13 -C 20 アルキルである、
[16]に記載の基質。
[18]
以下:
[式中、
R 2 'は置換もしくは非置換のC、または置換もしくは非置換のNであり;
R 6 'はC 1 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル;N、OまたはSを含む置換基を有
するC 1 -C 20 アルキル;C 4 -C 20 エーテル;C 1 -C 20 エステル;C 1 -C 20 アルケニル;ヘテロ原子
含有C 1 -C 20 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニル;C 6 -C 20 ア
リール;およびN、OまたはSから選択されるヘテロ原子を含有するC 6 -C 20 複素環である]
;
[式中、
R 2 'は置換もしくは非置換のC、または置換もしくは非置換のNであり;
R 2 はC 13 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基
を有するC 13 -C 20 アルキル、C 13 -C 20 アルケニル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルケニル;ま
たはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルケニルである];
ならびに
[式中、
R 2 はC 13 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基
を有するC 13 -C 20 アルキル、C 13 -
C 20 アルケニル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルケニル;ま
たはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルケニルである]
からなる群より選択される、[12]〜[14]のいずれか1項に記載の基質。
[19]
からなる酵素の分析のための基質。
[20]
からなる酵素の分析のための基質。
[21]
以下を含む酵素の分析のための基質であって
式中、nが0、1、2、3、4または5である、前記基質。
[22]
Aがアルドヘキソースまたはケトヘキソースである、[21]に記載の基質。
[23]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースである、[21]に記載の基質。
[24]
以下の式を有する分子であって:
式中、
B1は、C 1 -C 20 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル、C 2 -C 20 アルケニル;ヘテロ原
子含有C 2 -C 20 アルケニル、置換または非置換C 6 -C 20 アリールからなる群より選択され;
B2は、C 2 -C 7 ウレタン;C 2 -C 7 アミド、C 2 -C 7 エステル、C 2 -C 7 ウレイド;C 2 -C 7 カルバマ
ート;C 2 -C 7 カルボニル;C 1 -C 7 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 7 アルキル;N、OまたはSを
含む置換基を有するC 1 -C 7 アルキル;C 2 -C 7 アルケニル;ヘテロ原子含有C 2 -C 7 アルケニル
;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 7 アルケニルからなる群より選択され;
B3は、C 1 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル;N、OまたはSを含む置換基を
有するC 1 -C 20 アルキル;C 4 -C 20 エーテル;C 1 -C 20 エステル;C 1 -C 20 アルケニル;ヘテロ原
子含有C 1 -C 20 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニル;C 1 -C 20
アルキニル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 2
0 アルキニル;C 6 -C 20 アリール;およびN、OまたはSから選択されるヘテロ原子を含有する
C 6 -C 20 複素環からなる群より選択される、前記分子。
[25]
元素の、安定な2番目に多い同位体を含む、[24]に記載の分子。
[26]
前記の安定な2番目に多い同位体が、それぞれ、 2 H、 13 C、 15 N、 17 O、 18 O、 31 Pまたは 3
4 Sからなる群より選択される、[25]に記載の分子。
[27]
前記B2に、元素の安定な2番目に多い同位体を含む、[24]に記載の分子。
[28]
前記B3に、元素の安定な2番目に多い同位体を含む、[24]に記載の分子。
[29]
B1がメチレンである、[24]〜[28]のいずれか1項に記載の分子。
[30]
B2がC 2 -C 7 アミドである、[24]〜[28]のいずれか1項に記載の分子。
[31]
B3がN、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニルである、[24]〜[28]のいずれか1項に記載の分子。
[32]
B1がC 1 -C 2 アルキルであり;
B2がC 2 -C 7 アミドであり、
B3がヒドロキシルとして存在するOを含む置換基を含むC 13 -C 20 アルケニルである、
[24]〜[28]のいずれか1項に記載の分子。
[33]
を含む、[24]〜[28]のいずれか1項に記載の分子。
[34]
標的の酵素を含むサンプルを[1]〜[3]、[12]〜[14]または[19]〜[23]のいずれか1項に記載の基質と、標的の酵素が基質に作用して酵素生成物を生じることが可能な条件下で接触させるステップと;
前記酵素生成物を検出するステップ
とを含む、in vitroでの酵素活性を検出するための方法。
[35]
前記標的の酵素が酸性β-グルコセレブロシダーゼであり、
前記基質が[1]に記載の基質であり、
式中、
B2がC 2 -C 7 アミドであり、
B3がN、OまたはSを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルケニルである、
[34]に記載の方法。
[36]
前記標的の酵素が酸性ガラクトセレブロシドβ-ガラクトシダーゼであり、
式中、
B2がC 2 -C 7 アミドであり、
B3がヒドロキシルとして存在するOを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルケニルである、
[34]に記載の方法。
[37]
前記の検出ステップが質量分析による、[34]に記載の方法。
[38]
前記サンプルを内部標準に接触させるステップをさらに含み、前記内部標準は[24]〜[28]のいずれか1項に記載の構造を有する、[34]に記載の方法。
[39]
前記内部標準が 2 Hを含む、[38]に記載の方法。
[40]
ライソゾーム病の被験者を診断するステップをさらに含む、[38]に記載の方法。
[41]
標的の酵素を含むサンプルを前記基質と、標的の酵素が前記基質に作用して酵素生成物
を生じることが可能な条件下で接触させるステップと;
前記酵素生成物を検出するステップ
とを含む方法によって酵素活性を検出するための基質であって、
前記基質は以下を含み、
式中、
Aはグリコシド結合によってOと結合した単糖類または二糖類であり;
B1は、C 1 -C 20 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル、C 2 -C 20 アルケニル;ヘテロ原
子含有C 2 -C 20 アルケニル;および置換または非置換C 6 -C 20 アリールからなる群より選択さ
れ;
R 1 'は置換もしくは非置換のCまたはNであり;
R 2 'は置換もしくは非置換のC、置換もしくは非置換のN、OまたはSであり;
R 3 'は置換もしくは非置換のC、NまたはOであり;
R 4 'はなしであるか、置換もしくは非置換C 1 -C 2 、OまたはSであり;
R 1 は、C 1 -C 6 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 7 アルキル:N、OまたはSを含む置換基を有
するC 1 -C 7 アルキル;C 2 -C 7 アルケニル;ヘテロ原子含有C 2 -C 7 アルケニル;N、OまたはSを
含む置換基を有するC 2 -C 7 アルケニルであり;
R 5 'はなしであるか、置換もしくは非置換C 1 -C 2 、OまたはSであり;
R 6 'はC 1 -C 20 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル;N、OまたはSを含む置換基を有
するC 1 -C 20 アルキル;C 4 -C 20 エーテル;C 1 -C 20 エステル;C 1 -C 20 アルケニル;ヘテロ原子
含有C 1 -C 20 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニル;C 6 -C 20 ア
リール;およびN、OまたはSから選択されるヘテロ原子を含有するC 6 -C 20 複素環である、
前記基質。
[42]
Aがアルドヘキソースまたはケトヘキソースである、[41]に記載の基質。
[43]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースである、[41]に記載の基質。
[44]
以下:
[式中、
R 2 'は置換もしくは非置換のC、または置換もしくは非置換のNである];
[式中、
R 2 ''はHまたはメチルであり、
R 2 '''はHまたはメチルである];
ならびに
[式中、
R 3 'は置換または非置換のCであり;
R 4 'はなしであるか、置換もしくは非置換C 1 -C 2 、OまたはSである]
からなる群より選択される[41]〜[43]のいずれか1項に記載の基質。
[45]
以下:
[式中、
Aはアルドヘキソースまたはケトヘキソースであり;
R 1 はC 1 -C 6 アルキルまたはC 2 -C 20 アルケニルであり;
R 2 はC 1 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルキル、C 1 -C 20 ア
ルケニル、またはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルケニルである]
を含む[41]〜[43]のいずれか1項に記載の基質。
[46]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースであり、
R 1 がC 4 -C 6 アルキルであり;
R 2 がC 13 -C 20 アルキルである、
[45]に記載の基質。
[47]
以下:
[式中、
R 2 'は置換もしくは非置換のC、または置換もしくは非置換のNであり;
R 6 'がC 1 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル;N、OまたはSを含む置換基を有
するC 1 -C 20 アルキル;C 4 -C 20 エーテル;C 1 -C 20 エステル;C 1 -C 20 アルケニル;ヘテロ原子
含有C 1 -C 20 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニル;C 6 -C 20 ア
リール;およびN、OまたはSから選択されるヘテロ原子を含有するC 6 -C 20 複素環である]
;
[式中、
R 2 'は置換もしくは非置換のC、または置換もしくは非置換のNであり;
R 2 はC 13 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基
を有するC 13 -C 20 アルキル、C 13 -C 20 アルケニル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルケニル;ま
たはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルケニルである];
ならびに
[式中、
R 2 はC 13 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルキル、N、OもしくはSを含む置換基
を有するC 13 -C 20 アルキル、C 13 -C 20 アルケニル、ヘテロ原子含有C 13 -C 20 アルケニル;ま
たはN、OもしくはSを含む置換基を有するC 13 -C 20 アルケニルである]
からなる群より選択される[41]〜[43]のいずれか1項に記載の基質。
[48]
からなる、[41]〜[43]のいずれか1項に記載の基質。
[49]
からなる、[41]〜[43]のいずれか1項に記載の基質。
[50]
からなり、
式中、nは0、1、2、3、4または5である、[41]〜[43]のいずれか1項に記載の基質。
[51]
Aがアルドヘキソースまたはケトヘキソースである、[50]に記載の基質。
[52]
AがD-グルコースまたはD-ガラクトースである、[50]に記載の基質。
[53]
実質的に本明細書に記載される基質。
[54]
実質的に本明細書に記載される内部標準。
Claims (7)
- 請求項1に記載の組成物であって、
式中、
AがD-ガラクトースであり、
R1がC4アルキルであり;
R2がC13-C20アルキル、N、OもしくはSを含む置換基を有するC13-C20アルキル、C13-C20アルケニル、またはN、OもしくはSを含む置換基を有するC13-C20アルケニルである、
前記組成物。 - R2がC13アルキルである、請求項2に記載の組成物。
- 血液を含むサンプルを請求項1〜3のいずれか一項に記載の基質と接触させるステップであって、前記接触は、標的の酵素が前記基質に作用して酵素生成物を生じることが可能な条件下で行われる、前記ステップと;
前記酵素生成物を検出するステップ
とを含む、
in vitroでの酵素活性を検出するための方法。 - 前記サンプルを、下記式で表される構造を有する内部標準分子と接触させることをさらに含む、請求項4または5に記載の方法
(式中、
B1は、C 1 -C 20 アルキレン;ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキレン、C 2 -C 20 アルケニレン;ヘテロ原子含有C 2 -C 20 アルケニレン、置換または非置換C 6 -C 20 アリーレンからなる群より選択され;
B2は、C 2 -C 7 ウレタン;C 2 -C 3 アミド、C 5 アミド、C 7 アミド、C 2 -C 7 エステル、C 2 -C 7 ウレイド;C 2 -C 7 カルバマート;C 2 -C 7 カルボニル;C 1 -C 7 アルキル;ヘテロ原子含有C 1 -C 7 アルキル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 1 -C 7 アルキル;C 2 -C 7 アルケニル;ヘテロ原子含有C 2 -C 7 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 7 アルケニルからなる群より選択され;
B3は、C 1 -C 20 アルキル、ヘテロ原子含有C 1 -C 20 アルキル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 1 -C 20 アルキル;C 4 -C 20 エーテル;C 1 -C 20 エステル;C 2 -C 20 アルケニル;ヘテロ原子含有C 2 -C 20 アルケニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルケニル;C 2 -C 20 アルキニル;ヘテロ原子含有C 2 -C 20 アルキニル;N、OまたはSを含む置換基を有するC 2 -C 20 アルキニル;C 6 -C 20 アリール;およびN、OまたはSから選択されるヘテロ原子を含有するC 6 -C 20 複素環からなる群より選択される)。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361789985P | 2013-03-15 | 2013-03-15 | |
US61/789,985 | 2013-03-15 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016503343A Division JP6466907B2 (ja) | 2013-03-15 | 2014-03-17 | ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019088294A JP2019088294A (ja) | 2019-06-13 |
JP6778285B2 true JP6778285B2 (ja) | 2020-10-28 |
Family
ID=51529841
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016503343A Active JP6466907B2 (ja) | 2013-03-15 | 2014-03-17 | ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 |
JP2019002319A Active JP6778285B2 (ja) | 2013-03-15 | 2019-01-10 | ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016503343A Active JP6466907B2 (ja) | 2013-03-15 | 2014-03-17 | ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US20140274798A1 (ja) |
EP (1) | EP2971052A4 (ja) |
JP (2) | JP6466907B2 (ja) |
CN (2) | CN105247068A (ja) |
AU (4) | AU2014233084B2 (ja) |
CA (1) | CA2906839A1 (ja) |
TW (2) | TW201525142A (ja) |
WO (1) | WO2014145418A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3234174B1 (en) * | 2014-12-18 | 2022-09-07 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Enzymatic activity assays for glucocerebrosidase |
DE112017002818T5 (de) * | 2016-06-29 | 2019-02-21 | Hitachi High-Technologies Corporation | Verbindung zur Verwendung bei einer enzymatischen Reaktion und Massenspektrometrieverfahren |
CN111269280B (zh) * | 2020-03-27 | 2021-07-13 | 江苏豪思睦可生物科技有限公司 | 用于检测溶酶体贮积症相关酶的化合物、对应内标和试剂盒 |
JP7441475B2 (ja) * | 2020-07-21 | 2024-03-01 | 国立大学法人 東京大学 | 重水素化標識化合物およびその製造方法 |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3671455A (en) * | 1971-05-06 | 1972-06-20 | Atomic Energy Commission | Nitriles as scintillation solvents and solutes |
US4968785A (en) | 1988-05-17 | 1990-11-06 | Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien | Substituted glycoside compositions |
US5138043A (en) | 1989-12-07 | 1992-08-11 | Union Carbide Chemicals & Plastics Technology Corporation | Alkoxylated alkyl glucoside ether quaternaries useful in personal care |
IT1261984B (it) | 1993-06-22 | 1996-06-11 | Avantgarde Spa | Uso di esteri della l-carnitina o di acil l- carnitine con idrossiacidi per produrre composizioni farmaceutiche per il trattamento di affezioni cutanee. |
JPH08145948A (ja) | 1994-11-16 | 1996-06-07 | Sumitomo Chem Co Ltd | 還元性オリゴ糖の質量分析法 |
FR2767134B1 (fr) | 1997-08-08 | 1999-09-24 | Ceca Sa | N-(dialkylamino)alkyl glycosylamines et derives, procedes de preparation,composition les contenant et utilisations, notamment dans le domaine de la cosmetique. |
JP3345401B2 (ja) | 1998-08-25 | 2002-11-18 | ユニバーシティ オブ ワシントン | 複合した混合物中のタンパク質またはタンパク質機能の迅速定量分析 |
IT1306129B1 (it) | 1999-04-13 | 2001-05-30 | Sigma Tau Ind Farmaceuti | Esteri della l-carnitina o di alcanoil l-carnitine utilizzabili comelipidi cationici per l'immissione intracellulare di composti |
US20020042536A1 (en) | 1999-10-08 | 2002-04-11 | Prasad S. Raje | Preparation of amino-protected lysine derivatives |
US6764855B2 (en) | 2000-04-10 | 2004-07-20 | Mcw Research Foundation | Fluorescent hplc assay for 20-hete and other p-450 metabolites of arachidonic acid |
EP1592779A4 (en) | 2003-02-05 | 2007-12-12 | Ge Healthcare Bio Sciences | NUCLEOTIDES BRANDED BY TERMINAL PHOSPHATES, HAVING NEW LINKS |
US7662936B2 (en) | 2004-04-07 | 2010-02-16 | Genentech, Inc. | Mass spectrometry of antibody conjugates |
JP5226311B2 (ja) * | 2004-08-27 | 2013-07-03 | アルバート アインシュタイン カレッジ オブ メディシン オブ イエシバ ユニバーシティ | 免疫及び自己免疫の調節因子としてのセラミド誘導体 |
EP1932888A4 (en) | 2005-07-28 | 2010-01-13 | Shinichiro Isobe | BIOMOLECULE MARKING DYE, MARKING KIT AND METHOD FOR DETECTION OF BIOMOLECULE |
JP4364197B2 (ja) | 2005-12-27 | 2009-11-11 | 日本リライアンス株式会社 | 交流電源装置およびその装置におけるアーク抑制方法 |
WO2007106816A2 (en) | 2006-03-13 | 2007-09-20 | Perkinelmer Las, Inc. | Substrates and internal standards for mass spectroscopy detection |
US20080248512A1 (en) * | 2006-09-12 | 2008-10-09 | Genzyme Corporation | Methods for detection of lysosomal storage disease |
CA2686997A1 (en) | 2007-05-11 | 2008-11-20 | Mpex Pharmaceuticals, Inc. | Quaternary alkyl ammonium bacterial efflux pump inhibitors and therapeutic uses thereof |
EP2215243A2 (en) * | 2007-10-31 | 2010-08-11 | GEVO, Inc. | Methods for the economical production of biofuel precursor that is also a biofuel from biomass |
CN102014929A (zh) | 2008-03-13 | 2011-04-13 | 珀金埃尔默健康科学有限公司 | 用于多种检测体系的酶底物 |
EP2323652A2 (en) * | 2008-08-06 | 2011-05-25 | Summit Corporation Plc | Treatment of lysosomal storage disorders and other proteostatic diseases |
-
2014
- 2014-03-17 TW TW103110050A patent/TW201525142A/zh unknown
- 2014-03-17 US US14/215,885 patent/US20140274798A1/en not_active Abandoned
- 2014-03-17 JP JP2016503343A patent/JP6466907B2/ja active Active
- 2014-03-17 AU AU2014233084A patent/AU2014233084B2/en active Active
- 2014-03-17 WO PCT/US2014/030183 patent/WO2014145418A1/en active Application Filing
- 2014-03-17 EP EP14764939.6A patent/EP2971052A4/en active Pending
- 2014-03-17 CN CN201480027876.3A patent/CN105247068A/zh active Pending
- 2014-03-17 CN CN202110228427.7A patent/CN113004351A/zh active Pending
- 2014-03-17 CA CA2906839A patent/CA2906839A1/en active Pending
- 2014-03-17 TW TW110106148A patent/TWI773147B/zh active
-
2016
- 2016-06-21 US US15/188,239 patent/US11155851B2/en active Active
-
2019
- 2019-01-10 JP JP2019002319A patent/JP6778285B2/ja active Active
- 2019-11-22 AU AU2019268208A patent/AU2019268208A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-09-27 US US17/485,813 patent/US20220010354A1/en active Pending
- 2021-10-19 AU AU2021254547A patent/AU2021254547B2/en active Active
-
2023
- 2023-10-06 AU AU2023241355A patent/AU2023241355A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TW201525142A (zh) | 2015-07-01 |
AU2023241355A1 (en) | 2023-10-26 |
TWI773147B (zh) | 2022-08-01 |
US20140274798A1 (en) | 2014-09-18 |
AU2019268208A1 (en) | 2019-12-12 |
JP2016522677A (ja) | 2016-08-04 |
EP2971052A4 (en) | 2016-11-02 |
AU2021254547B2 (en) | 2023-08-31 |
AU2021254547A1 (en) | 2021-11-18 |
CA2906839A1 (en) | 2014-09-18 |
EP2971052A1 (en) | 2016-01-20 |
WO2014145418A1 (en) | 2014-09-18 |
TW202122370A (zh) | 2021-06-16 |
JP6466907B2 (ja) | 2019-02-06 |
AU2014233084A1 (en) | 2015-10-08 |
US11155851B2 (en) | 2021-10-26 |
US20220010354A1 (en) | 2022-01-13 |
CN105247068A (zh) | 2016-01-13 |
US20160298169A1 (en) | 2016-10-13 |
CN113004351A (zh) | 2021-06-22 |
AU2014233084B2 (en) | 2019-09-19 |
JP2019088294A (ja) | 2019-06-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6778285B2 (ja) | ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 | |
US8476414B2 (en) | Substrates and internal standards for mass spectrometry detection | |
US8791246B2 (en) | Enzymatic substrates for multiple detection systems | |
US20080227092A1 (en) | Solid-Phase Oligosaccharide Tagging: a Technique for Manipulation of Immobilized Carbohydrates | |
JP7361650B2 (ja) | リソソーム蓄積障害の試験に関連する方法 | |
JP2016522677A5 (ja) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190207 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190207 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200121 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200420 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200923 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20201009 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6778285 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |