JP6541236B2 - インスリン様成長因子1受容体特異的抗体及びそれらの使用 - Google Patents
インスリン様成長因子1受容体特異的抗体及びそれらの使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6541236B2 JP6541236B2 JP2016555678A JP2016555678A JP6541236B2 JP 6541236 B2 JP6541236 B2 JP 6541236B2 JP 2016555678 A JP2016555678 A JP 2016555678A JP 2016555678 A JP2016555678 A JP 2016555678A JP 6541236 B2 JP6541236 B2 JP 6541236B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- igf1r
- antibody
- fragment
- isolated
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/0002—General or multifunctional contrast agents, e.g. chelated agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0058—Antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
- C07K16/464—Igs containing CDR-residues from one specie grafted between FR-residues from another
- C07K16/465—Igs containing CDR-residues from one specie grafted between FR-residues from another with additional modified FR-residues
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57492—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds localized on the membrane of tumor or cancer cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/22—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from camelids, e.g. camel, llama or dromedary
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/35—Valency
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/64—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a combination of variable region and constant region components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- G01N2333/71—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for growth factors; for growth regulators
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- G01N2333/72—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for hormones
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2570/00—Omics, e.g. proteomics, glycomics or lipidomics; Methods of analysis focusing on the entire complement of classes of biological molecules or subsets thereof, i.e. focusing on proteomes, glycomes or lipidomes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/28—Neurological disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Oncology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
GRTIDNYAの相補性決定領域(CDR)1配列(配列番号1)、
IDWGDGGX(式中、XはA又はTである)のCDR2配列(配列番号2)、及び
AMARQSRVNLDVARYDYのCDR3配列(配列番号3)
を含み、インスリン様成長因子1受容体(IGF1R)に特異的に結合する単離又は精製抗体又はその断片をさらに提供する。一実施形態において、単離又は精製抗体又はその断片は、IDWGDGGAのCDR2配列を含む。
X1VX2LX3ESGGGLVQX4GGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWX5RQAPGKX6X7EX8VX9TIDWGDGGX10RYANSVKGRFTISRDNX11KX12TX13YLQMNX14LX15X16EDTAVYX17CAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTX18VTVSS(配列番号4)(式中、X1はE又はQであり、X2はK又はQであり、X3はV又はEであり、X4はA又はPであり、X5はV又はSであり、X6はD又はGであり、X7はL又はRであり、X8はF又はWであり、X9はA又はSであり、X10はA又はTであり、X11はA又はSであり、X12はG又はNであり、X13はM又はLであり、X14はN又はRであり、X15はE又はRであり、X16はP又はAであり、X17はS又はYであり、X18はQ又はLである)、
又はそれと実質的に同一の配列でありうる。より具体的で非限定的な例において、単離又は精製抗体は、
本明細書においてIGF1R−5と呼ばれる、QVKLEESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVATIDWGDGGARYANSVKGRFTISRDNAKGTMYLQMNNLEPEDTAVYSCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTQVTVSS(配列番号5)、
本明細書においてIGF1R−5_H1と呼ばれる、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWVRQAPGKGLEWVSTIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号6)、
本明細書においてIGF1R−5_H2と呼ばれる、QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWVRQAPGKGLEWVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号7)、
本明細書においてIGF1R−5_H3と呼ばれる、QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKGLEFVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号8)、
本明細書においてIGF1R−5_H5と呼ばれる、QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKGTMYLQMNSLRAEDTAVYSCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号9)、及び
本明細書においてIGF1R−5_H6と呼ばれる、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVSTIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号10)、
又はそれと実質的に同一の配列からなる群から選択される配列を含みうる。
a)組織試料を、検出可能な試剤に連結された本明細書に記載の1つ又は複数の単離又は精製抗体又はその断片と接触させるステップ、及び
b)組織試料において、IGF1Rに結合した抗体又はその断片に連結された検出可能な試剤を検出するステップ
を含む。
a)検出可能な試剤に連結された本明細書に記載の1つ又は複数の単離又は精製抗体又はその断片を、対象に投与するステップ、及び
b)IGF1Rに結合した抗体又はその断片に連結された検出可能な試剤を検出するステップ
を含む。
a)血液脳関門を通過する、目的の分子に連結された本明細書に記載の1つ又は複数の単離又は精製抗体又はその断片を、対象に投与するステップ
を含み、
1つ又は複数の抗体又はその断片は、BBBを通過させて目的の分子をフェリーする。前述の方法において、目的の分子は、約1kD〜約200kDaの範囲の分子量を有することがあり、目的の分子は、検出可能な試剤、治療剤、薬物、ペプチド、成長因子、サイトカイン、受容体トラップ、化合物、炭水化物部分、酵素、抗体若しくはその断片、DNAベース分子、ウイルスベクター、若しくは細胞毒性剤;検出可能な試剤、治療剤、薬物、ペプチド、酵素、抗体若しくはその断片、DNAベース分子、ウイルスベクター、若しくは細胞毒性剤が充填された1つ若しくは複数のリポソーム;又は1つ若しくは複数のナノ粒子、ナノワイヤ、ナノチューブ、若しくは量子ドットでありうる。上述の方法において、投与は、静脈内(iv)、皮下(sc)、又は筋肉内(im)でありうる。
a)対象から脳脊髄液(CSF)を回収するステップ、及び
b)標的化プロテオミクス方法を使用して、CSFにおける1つ又は複数の単離又は精製抗体又は断片に連結されたカーゴ分子の量を定量するステップ
を含む。
GRTIDNYAの相補性決定領域(CDR)1配列(配列番号1)、
IDWGDGGX(式中、XはA又はTである)のCDR2配列(配列番号2)、及び
AMARQSRVNLDVARYDYのCDR3配列(配列番号3)
を含み、インスリン様成長因子1受容体(IGF1R)に特異的に結合する単離又は精製抗体又はその断片をさらに提供する。一実施形態において、単離又は精製抗体又はその断片は、IDWGDGGAのCDR2配列を含む。
X1VX2LX3ESGGGLVQX4GGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWX5RQAPGKX6X7EX8VX9TIDWGDGGX10RYANSVKGRFTISRDNX11KX12TX13YLQMNX14LX15X16EDTAVYX17CAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTX18VTVSS(配列番号4)(式中、X1はE又はQであり、X2はK又はQであり、X3はV又はEであり、X4はA又はPであり、X5はV又はSであり、X6はD又はGであり、X7はL又はRであり、X8はF又はWであり、X9はA又はSであり、X10はA又はTであり、X11はA又はSであり、X12はG又はNであり、X13はM又はLであり、X14はN又はRであり、X15はE又はRであり、X16はP又はAであり、X17はS又はYであり、X18はQ又はLである)、
又はそれと実質的に同一の配列でありうる。代わりに、単離又は精製抗体は、
本明細書においてIGF1R−5と呼ばれる、QVKLEESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVATIDWGDGGARYANSVKGRFTISRDNAKGTMYLQMNNLEPEDTAVYSCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTQVTVSS(配列番号5)、
本明細書においてIGF1R−5_H1と呼ばれる、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWVRQAPGKGLEWVSTIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号6)、
本明細書においてIGF1R−5_H2と呼ばれる、QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWVRQAPGKGLEWVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号7)、
本明細書においてIGF1R−5_H3と呼ばれる、QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKGLEFVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号8)、
本明細書においてIGF1R−5_H5と呼ばれる、QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKGTMYLQMNSLRAEDTAVYSCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号9)、及び
本明細書においてIGF1R−5_H6と呼ばれる、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVSTIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号10)、
又はそれと実質的に同一の配列からなる群から選択される配列を含みうる。
光学イメージング;
ポジトロン放出断層撮影(PET)、検出可能な試剤は、同位体、たとえば11C、13N、15O、18F、64Cu、62Cu、124I、76Br、82Rb及び68Gaであり、18Fが最も臨床的に利用されている;
単光子放出コンピュータ断層撮影(SPECT)、検出可能な試剤は、放射性トレーサー、たとえば、具体的な用途に応じて、99mTc、111In、123I、201Tl、133Xeである。
磁気共鳴画像法(MRI)、検出可能な試剤は、たとえば、これに限定されないが、ガドリニウム、酸化鉄ナノ粒子及び炭素被覆鉄コバルトナノ粒子でありえ、そのことにより、プラークの検出についてMRIの感度を高める。
造影超音波検査(CEUS:Contrast−Enhanced Ultrasonography)又は超音波、検出可能な試剤は、少なくとも1つの音響的に活性で気体が充満したマイクロバブルである。超音波は、ヒト疾患のスクリーニング及び早期検出のために広範に用いられている技術である。それは、MRI又はシンチグラフィーよりも安価であり、放射線を伴わないので、分子的画像診断法、たとえば放射性核種イメージングよりも安全である。
a)対象から脳脊髄液(CSF)を回収するステップ、及び
b)標的化プロテオミクス方法を使用して、CSFにおける1つ又は複数の抗体又はその断片に連結されたカーゴ分子の量を定量するステップ
を含む。
IGF1Rの細胞外ドメインの933アミノ酸長の組換え断片(図1に灰色のボックスで示す、配列番号14のアミノ酸1〜933もまた参照のこと)を調製した。断片は、N末端30アミノ酸シグナルペプチド、全長アルファサブユニット、フューリン切断部位(RKRR、配列番号15、アルファ及びベータサブユニットを分離)を、ベータサブユニットの細胞外部分の大部分とともに含んでいた(図1及び図2)。
5’−CGGGATCCGCCACCATGAAGTCTGGCTCCGGAG−3’(フォワード、配列番号16)
5’−GCTCTAGATCAGAAGTTTTCATATCCTGTTTTGG−3’(リバース、配列番号17)
を使用してPCRにより増幅し、Puc19のSmaI部位内にサブクローニングした。次に、IGF1R933配列を、pCDN4/myc−His(Invitrogen)内にサブクローニングしpIGF1R933−Hisを作製したが、これは、以前に記述されたとおり、His−タグ化外部ドメインの発現を可能にする(Samaniら2004)。
IGF1Rの細胞外ドメインを標的とするVHHを単離するため、ラマを、実施例1で得られた組換えIGF1R933−His断片で免疫化した。
実施例2においてPBMCから単離されたRNAに基づいて、過免疫化ラマVHHライブラリーを構築した。
MJ1:5’−GCCCAGCCGGCCATGGCCSMKGTGCAGCTGGTGGAKTCTGGGGGA−3’(配列番号18)
MJ2:5’−GCCCAGCCGGCCATGGCCCAGGTAAAGCTGGAGGAGTCTGGGGGA−3’(配列番号19)
MJ3:5’−GCCCAGCCGGCCATGGCCCAGGCTCAGGTACAGCTGGTGGAGTCT−3’(配列番号20)、
及び2つのアンチセンスCH2特異的プライマー、
CH2:5’−CGCCATCAAGGTACCAGTTGA−3’(配列番号21)
CH2b3:5’−GGGGTACCTGTCATCCACGGACCAGCTGA−3’(配列番号22)
の等モルミックスによりcDNAを増幅した。
QVKLEESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVATIDWGDGGARYANSVKGRFTISRDNAKGTMYLQMNNLEPEDTAVYSCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTQVTVSS(配列番号5)
治療剤のためのBBB担体として適用されたときのラマ由来IGF1R−5の潜在的免疫原性を回避するため、ラクダ科動物由来sdAbを、VHHにおける「ラクダ科動物」残基の変異により「ヒト化」した。ヒト化のため、CDR残基の同定にKabatナンバリング(Kabatら、1991)を使用したことに留意すべきである。
実施例3において同定されたIGF1R−5及び実施例4において構築されたヒト化バージョン(合わせて本明細書において「VHHコンストラクト」と呼ばれる)を、タンパク質発現及び精製のための発現プラスミド内にサブクローニングした。
5’−TATGAAGACACCAGGCCCAGGTAAAGCTGGAGGAGTCT−3’(フォワード、配列番号25)
5’−TTGTTCGGATCCTGAGGAGACGGTGACCTG−3’(リバース、配列番号26)
実施例5において発現させ精製した抗IGF1R VHH IGF1R−5コンストラクトを、サイズ排除クロマトグラフィー、表面プラズモン共鳴解析、及び融解温度解析を使用して特徴づけた。IGF1R−5 VHHのエピトープマッピングもまた実施した。
ff=([θ]T−[θ]U)/([θ]F−[θ]U)……式I
式中、[θ]Tは、任意の温度のモル楕円率であり、[θ]Fは、30℃で完全にフォールドしたタンパク質のモル楕円率であり、[θ]Uは、90℃での未フォールドタンパク質のモル楕円率である。融解温度(Tm)は、グラフソフトウェアGraphPad Prism(Windows用バージョン4.02)を使用して、非線形回帰曲線フィッティング(ボルツマンシグモイド方程式(Boltzman sigmoidal equation))により、アンフォールディング曲線(フォールド率(ff)対温度)の中点として得られた。VHHの融解温度(Tm)を、変性への急激な遷移に相当する観察された変性曲線と一致する二状態系を仮定して楕円率データに基づいて決定した(図2D)。Tm値は、フォールド率(ff)対温度のシグモイド変性曲線の中点でとった。結果を図3Bに示す。すべてのヒト化VHHの融解温度が、IGF1R−5 VHHと比較して改善していた(より高かった)ことから、生物物理学的特性が改善されたことが示唆される。
IGF1R−5が細胞内に内部移行するかどうかを決定するため、svARBEC細胞をCy5−5標識化IGF1R−5とインキュベートした。
マウス抗体結晶性断片(Fc、mFc2b)と融合したIGF1R−5 VHHを含むコンストラクトを調製し、発現させ、単離した。C末端コンストラクト(IGF1R−5−mFc)及びN末端IGF1R−5マウスFc融合コンストラクト(mFc−IGF1R−5)の両方を作製した。それらの配列を図5A〜図5Bに示し、分子の概略図を図5Cに示す。融合タンパク質(約80kDa)はまた、図5A〜図5Bの配列に示されていないN末端シグナルペプチド(MEFGLSWVFLVAILKGVQC、配列番号40)を含んでいた。なぜならそれは、分泌後に切断されるからである。
IGF1R−5−mFc(実施例8)が脳内へと、具体的には脳脊髄液(CSF)中へと透過可能かどうかを決定するとともに、CSF及び血漿におけるその存在を定量するために、インビボアッセイを実施した。
アルブミン比=1nLの解析された血漿当たりの強度/1nLの解析されたCSF当たりの強度
1500以下の比が、血液汚染と考えられた。
実施例8のIGF1R−5 VHH及びコンストラクトが血液脳関門を通過するかどうかを評価するため、下に述べるインビトロアッセイを使用した。実験を要約するフローチャートを図6Aに示す。
IGF1R−5がインビボで血液脳関門(BBB)を通過し、それ自体ではBBBを通過できない分子を、BBBを通過させて「フェリー」できるかどうかを決定するため、神経ペプチドガラニンを、IGF1R−5 VHH又はマウスFcのC若しくはN末端のいずれかに融合されたIGF1R−5に化学的にコンジュゲートし、全身投与した。ガラニンは、脳組織において発現するGalR1及びGalR2に結合することにより鎮痛をもたらす向神経活性ペプチドである。末梢的に与えられた場合、ガラニンは鎮痛効果を有さない。なぜなら、それ自体はBBBを通過できないからである(Robertsonら、2011)。
IGF1R−5−Gal、mFc−IGF1R−5−Gal、及びIGF1R−5−mFc−Gal(実施例11)が血液脳関門を通過するかどうかを評価するため、インビボアッセイを、国際特許公開第2011/127580号に以前に記載のとおり利用した。
末梢投与後にCSFにおいて検出された高レベルのIGF1R−5mFcが、少なくとも部分的に実質細胞外空間に由来すること、言い換えれば、無傷コンストラクトがBBBを横断したことを確認するため、ラット脳におけるIGF1R−5−mFcの免疫検出を実施した。
安全性の観点から、本発明の抗体が、受容体媒介性トランスサイトーシスを介した薬物の送達のために受容体に結合するときに、その受容体の生理機能、すなわち、その天然リガンドであるIGF−1により誘導されるシグナル伝達を妨げないと示すことが重要である。この観点から、IGF1R−5 VHH又はIGF1R−5−mFcが、IGF1R又は関連インスリン受容体(IR)を介してそれらの天然リガンドにより誘導される生理的シグナル伝達を妨げないと実証することが重要である。
本明細書において、また本願全体を通じて参照されたすべての特許、特許出願及び公開が、ここに参照により組み込まれる。
Abbott NJ (2013) Blood-brain barrierstructure and function and the challenges for CNS drug delivery. J InheritMetab Dis. 36(3):437-49.
Abbott, N. J. Evidence for bulk flowof brain interstitial fluid: significance for physiology and pathology,Neurochem. Int. 2004, 45, 545-552.
Abulrob A, Sprong H, Van Bergen enHenegouwen P, Stanimirovic D (2005) The blood-brain barrier transmigratingsingle domain antibody: mechanisms of transport and antigenic epitopes in humanbrain endothelial cells. J Neurochem. 95(4):1201-14.
Arbabi-Ghahroudi, M. Desmyter A,Wyns L, Hamers R., and Muyldermans S (1997) Selection and identificationof single domain antibody fragments from camel heavy-chain antibodies, FEBSLett 414, 521-526
Arbabi-Ghahroudi M., To R., GaudetteN., Hirama T., Ding W., MacKenzie R., and Tanha J. (2009a) Protein Eng. Des.Sel. 22, 59-66.
Arbabi-Ghahroudi M., MacKenzie R., andTanha J. (2009b) Methods Mol. Biol. 525, 187-216.
Bell A., Wang Z.J., Arbabi-GhahroudiM., Chang T.A., Durocher Y., Trojahn U., Baardsnes J., Jaramillo M.L., Li S.,Baral T.N., O'Connor-McCourt M., Mackenzie R., and Zhang J. (2010) Cancer Lett.289, 81-90.
Broussau S., Jabbour N., LachapelleG., Durocher Y., Tom R., Transfiguracion J., Gilbert R. and Massie B. (2008)Mol Ther 16, 500-507.
Chothia C., and Lesk A.M. (1987) J.Mol. Biol. 196, 901-917.
Davies J., and L. Riechmann, Affinityimprovement of single antibody VH domains: residues in all three hypervariableregions affect antigen binding. Immunotechnology 2 (1996) 169-179
De Kruif, J., and Logtenberg, T. (1996)J. Biol. Chem. 271, 7630-7634.
De Lange, E. C.; Danhof, M.Considerations in the use of cerebrospinal fluid pharmacokinetics to predictbrain target concentrations in the clinical setting: implications of thebarriers between blood and brain, Clin. Pharmacokinet. 2002, 41, 691-703.
Demeule M.; Currie J. C.; Bertrand Y.;Che C.; Nguyen T.; Regina A.; Gabathuler R.; Castaigne J. P.; Beliveau R.Involvement of the low-density lipoprotein receptor-related protein in thetranscytosis of the brain delivery vector angiopep-2, J. Neurochem. 2008, 106,1534-1544.
Dumoulin, M., Conrath, K., VanMeirhaighe, A., Meersman, F., Heremans, K., Frenken, L.G., Muyldermans, S.,Wyns, L., and Matagne, A. (2002) Protein Sci 11, 500-515.
Durocher, Y., S. Perret, et al. (2002). "High-leveland high-throughput recombinant protein production by transient transfection ofsuspension-growing human 293-EBNA1 cells." Nucleic Acids Res 30(2): E9.
Doyle, P.J., Arbabi-Ghahroudi, M.,Gaudette, N., Furzer, G., Savard, M.E., Gleddie, S., McLean, M.D., MacKenzie,C.R., and Hall, J.C. (2008) Mol. Immunol. 45, 3703-3713.
Eisenberg, D., Schwarz, E., Komaromy,M., and Wall, R. (1984) J. Mol. Biol. 179, 125-142
Erdlenbruch B, Alipour M, Fricker G,Miller DS, Kugler W, Eibl H, Lakomek M (2003) Alkylglycerol opening of theblood-brain barrier to small and large fluorescence markers in normal and C6glioma-bearing rats and isolated rat brain capillaries. Br J Pharmacol.140(7):1201-10.
Fenner, L., Widmer, A.F., Goy, G.,Rudin, S., and Frei, R. (2008) J. Clin. Microbiol. 46, 328-330.
Fluttert, M., Dalm, S., and Oitzl,M.S. (2000) Lab Anim 34, 372-378.
Gaillet, B., Gilbert, R., Broussau,S., Pilotte, A., Malenfant, F., Mullick, A., Garnier, A., and Massie, B. (2010)Biotechnol Bioeng 106, 203-215.
Gan Y, Jing Z, Stetler RA, Cao G(2013) Gene delivery with viral vectors for cerebrovascular diseases. FrontBiosci (Elite Ed). 5:188-203. Review.
Garberg, P.; Ball, M.; Borg, N.;Cecchelli, R.; Fenart, L.; Hurst, R. D.; Lindmark, T.; Mabondzo, A.; Nilsson, J.E.; Raub, T. J.; Stanimirovic, D.; Terasaki, T.; Oberg, J. O.; Osterberg, T. Invitro models for the blood-brain barrier, Toxicol. In Vitro 2005, 19, 299-334.
Gergov, M.; Ojanpera, I.; Vuori, E.Simultaneous screening for 238 drugs in blood by liquid chromatography-ionspray tandem mass spectrometry with multiple-reaction monitoring, J.Chromatogr. B Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. 2003, 795, 41-53.
Gaillet B, Gilbert R, AmzianiR, Guilbault C, Gadoury C, Caron AW, Mullick A, Garnier A, Massie B (2007)High-level recombinant protein production in CHO cells using an adenoviralvector and the cumate gene-switch. Biotechnol Prog. Jan-23(1):200-9Gottesman et al., Ann. Rev. Biochem.,62, 385-427 (1993)
Groothuis D. R.; Vavra M. W.;Schlageter K. E.; Kang E. W.; Itskovich A. C.; Hertzler S.; Allen C. V.; LiptonH. L. Efflux of drugs and solutes from brain: the interactive roles ofdiffusional transcapillary transport, bulk flow and capillary transporters, J.Cereb. Blood Flow Metab. 2007, 27, 43-56.
Hamers-Casterman, C., Atarhouch, T.,Muyldermans, S., Robinson, G., Hamers, C., Songa, E.B., Bendahman, N., andHamers, R. (1993) Nature 363, 446-448.
Haqqani AS, Caram-Salas N, Ding W,Brunette E, Delaney CE, Baumann E, Boileau E, Stanimirovic D (2012) Multiplexedevaluation of serum and CSF pharmacokinetics of brain-targeting single-domainantibodies using a NanoLC-SRM-ILIS method. Mol Pharm. 2013 May 6;10(5):1542-56.
Hargreaves KM, Troullos ES, Dionne RA, Schmidt EA,Schafer SC, Joris JL (1988) Bradykinin is increased during acute and chronicinflammation: therapeutic implications. Clin Pharmacol Ther.44(6):613-21.
Huang YL, Saljo A, Suneson A, HanssonHA (1995) A new approach for multiple sampling of cisternal cerebrospinal fluidin rodents with minimal trauma and inflammation. J Neurosci Methods.63(1-2):13-22.
Hussack G., Hirama T., Ding W.,MacKenzie R., and Tanha J. (2011) PLoS ONE 6, e28218.
Hussack G, Arbabi-Ghahroudi M, vanFaassen H, Songer JG, Ng KK, MacKenzie R, Tanha J (2011b) Neutralization ofClostridium difficile toxin A with single-domain antibodies targeting the cellreceptor binding domain. J Biol Chem. 286(11): 8961-76.
Iqbal U., Trojahn U., Albaghdadi H.,Zhang J., O’Connor M., Stanimirovic D., Tomanek B., Sutherland G., and AbulrobA. (2010) Br. J. Pharmacol. 160, 1016-1028.
Jespers, L., Schon, O., Famm, K., andWinter, G. (2004) Nat. Biotechnol. 22, 1161-1165.
Kabat EA, Wu TT. Identical V regionamino acid sequences and segments of sequences in antibodies of different specificities.Relative contributions of VH and VL genes, minigenes, andcomplementarity-determining regions to binding of antibody-combining sites. J Immunol. 1991;147:1709-19.
Kim, D.Y., Kandalaft, H., Ding, W.,Ryan, S., van Fassen, H., Hirama, T., Foote, S.J., MacKenzie, R., and Tanha, J. (2012)PEDS advance access August 30, 2012, 1-9.
Kornhuber ME, KornhuberJ, Cimniak U (1986) A method for repeated CSF sampling in the freely movingrat. JNeurosci Methods. 17(1):63-8.
Lefranc, M.-P. et al.,(2003) Dev.Comp. Immunol.,27, 55-77.
Li S, Zheng W, Kuolee R, Hirama T,Henry M, Makvandi-Nejad S, Fjallman T, Chen W, Zhang J. Pentabody-mediatedantigen delivery induces antigen-specific mucosal immune response. Mol Immunol2009;46:1718-26.
Lin, J. H. CSF as a surrogate forassessing CNS exposure: an industrial perspective, Curr. Drug Metab 2008, 9,46-59.
Merritt, E.A., and Hol, W.G. (1995)Curr. Opin. Struct. Biol. 5, 165-171.
Muruganandam A, Tanha J, Narang S,Stanimirovic D (2001) Selection of phage-displayed llama single-domainantibodies that transmigrate across human blood-brain barrier endothelium.FASEB J. 2002 Feb;16(2):240-2.
Musher, D.M., Manhas, A., Jain, P.,Nuila, F., Waqar, A., Logan, N., Marino, B., Graviss, E.A. (2007) J. Clin.Microbiol. 45, 2737-2739.
Nhan T, Burgess A, Cho EE, StefanovicB, Lilge L, Hynynen K.(2013) Drug delivery to the brain by focused ultrasoundinduced blood-brain barrier disruption: Quantitative evaluation of enhancedpermeability of cerebral vasculature using two-photon microscopy. J ControlRelease.172(1):274-280.
Nicaise M, Valeio-Lepiniec M, MinardP, Desmadril M. (2004) Affinity transfer by CDR grafting on a nonimmunoglobulinscaffold. Protein Sci. 13(7): 1882-1891.
Nielsen, U.B., Adams, G.P., Weiner,L.M., and Marks, J.D. (2000) Cancer Res. 60, 6434-6440.
Nuttall, S.D., Krishnan, U.V.,Doughty, L., Pearson, K., Ryan, M.T., Hoogenraad, N.J., Hattarki, M.,Carmichael, J.A., Irving, R.A., and Hudson, P.J. (2003) Eur. J. Biochem. 270,3543-3554.
Pardridge, W. M.; Buciak, J. L.;Friden, P. M. Selective transport of an anti-transferrin receptor antibodythrough the blood-brain barrier in vivo, J. Pharmacol. Exp. Ther. 1991, 259,66-70.
Pardridge, W.M., Adv. Drug DeliveryReviews, 15, 5-36 (1995)
Pardridge, W. M. Drug and genedelivery to the brain: the vascular route, Neuron. 2002, 36, 555-558.
Planche, T., Aghaizu, A., Holliman,R., Riley, P., Poloniecki, J., Breathnach, A., and Krishna, S. (2008) LancetInfect. Dis. 8, 777-784.
Preston E, Slinn J, Vinokourov I,Stanimirovic D. (2008) Graded reversible opening of the rat blood-brain barrierby intracarotid infusion of sodium caprate. J Neurosci Methods. 168(2):443-9.
Ridgway, J.B., Presta, L.G., and Carter,P. (1996) Protein Eng. 9, 617-621.
Robertson CR, Flynn SP, White HS,Bulaj G (2011) Anticonvulsant neuropeptides as drug leads for neurologicaldiseases. Nat Prod Rep. 28(4):741-62.
Russmann, H., Panthel, K., Bader,R.C., Schmitt, C., and Schaumann, R. (2007) Eur. J. Clin. Microbiol. Infect.Dis. 26, 115-119.
Samani, A.A., Chevet, E.,Fallavollita, L., Galipeau, J., and Brodt, P. (2004) Cancer Research 64,3380-3385.
Samuels B.L., J. Clin. Pharmacol. Ther., 54,421-429 (1993)
Shen, D. D.; Artru, A. A.; Adkison, K.K. Principles and applicability of CSF sampling for the assessment of CNS drugdelivery and pharmacodynamics, Adv. Drug Deliv. Rev. 2004, 56, 1825-1857.
Sloan, L.M., Duresko, B.J., Gustafson,D.R., and Rosenblatt, J.E. (2008) J. Clin. Microbiol. 46, 1996-2001.
Sumbria RK, Zhou QH, Hui EK, Lu JZ,Boado RJ, Pardridge WM.(2013) Pharmacokinetics and brain uptake of an IgG-TNFdecoy receptor fusion protein following intravenous, intraperitoneal, andsubcutaneous administration in mice. Mol Pharm. 10(4):1425-31.
Tanha, J., Muruganandam, A., andStanimirovic, D. (2003) Methods Mol. Med. 89, 435-449.
To, R., Hirama, T., Arbabi-Ghahroudi,M., MacKenzie, R., Wang, P., Xu, P., Ni, F., and Tanha, J. (2005) J. Biol.Chem. 280, 41395-41403.
Turgeon, D.K., Novicki, T.J., Quick,J., Carlson, L., Miller, P., Ulness, B., Cent, A., Ashley, R., Larson, A.,Coyle, M., Limaye, A.P., Cookson, B.T., and Fritsche, T.R. (2003) J. Clin.Microbiol. 41, 667-670.
Watanabe, T., Acta Oncol., 34, 235-241(1995)
Xiao G, Gan LS.(2013)Receptor-mediated endocytosis and brain delivery of therapeutic biologics. IntJ Cell Biol. doi: 10.1155/2013/703545. Epub 2013 Jun 11.Yaksh TL, Rudy TA(1976) Chronic catheterization of the spinal subarachnoid space. PhysiolBehav.17(6):1031-6.
Yu, Y. J.; Zhang, Y.; Kenrick, M.;Hoyte, K.; Luk, W.; Lu, Y.; Atwal, J.; Elliott, J. M.; Prabhu, S.; Watts, R.J.; Dennis, M. S. Boosting brain uptake of a therapeutic antibody by reducingits affinity for a transcytosis target, Sci. Transl. Med. 2011, 3, 84ra44.
Zhang, J., Li, Q., Nguyen, T.-D.,Tremblay, T.-L., Stone, E., To, R., Kelly, J., and MacKenzie, C.R. (2004a) J.Mol. Biol. 341, 161-169.
Zhang, J., Tanha, J., Hirama, T.,Khiew, N.H., To, R., Tong-Sevinc, H., Stone, E., Brisson, J.R., and MacKenzie,C.R. (2004b) J. Mol. Biol. 335, 49-56.
Zhu et al., Immunology and CellBiology (2010) 88:667-675.
European Patent No. 519596
European Patent No. 626390
US Patent No. 5693761
US Patent No. 5766886
US Patent No. 5821123
US Patent No. 5859205
US Patent No. 5869619
US Patent No. 6054297
US Patent No. 6180370
WO 02/057445
WO 2011/127580
WO 95/04069
WO/2004/076670
WO2003/046560
Claims (16)
- GRTIDNYAの相補性決定領域(CDR)1配列(配列番号1)、
IDWGDGGX(式中、XはA又はTである)のCDR2配列(配列番号2)、及び
AMARQSRVNLDVARYDYのCDR3配列(配列番号3)
を含み、インスリン様成長因子1受容体(IGF1R)に特異的に結合する単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。 - 配列
X1VX2LX3ESGGGLVQX4GGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWX5RQAPGKX6X7EX8VX9TIDWGDGGX10RYANSVKGRFTISRDNX11KX12TX13YLQMNX14LX15X16EDTAVYX17CAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTX18VTVSS(配列番号4)(式中、X1はE又はQであり、X2はK又はQであり、X3はV又はEであり、X4はA又はPであり、X5はV又はSであり、X6はD又はGであり、X7はL又はRであり、X8はF又はWであり、X9はA又はSであり、X10はA又はTであり、X11はA又はSであり、X12はG又はNであり、X13はM又はLであり、X14はN又はRであり、X15はE又はRであり、X16はP又はAであり、X17はS又はYであり、X18はQ又はLである)
を含む、請求項1に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。 - QVKLEESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVATIDWGDGGARYANSVKGRFTISRDNAKGTMYLQMNNLEPEDTAVYSCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTQVTVSS(配列番号5);
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWVRQAPGKGLEWVSTIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号6);
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWVRQAPGKGLEWVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号7);
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKGLEFVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTMYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号8);
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVATIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKGTMYLQMNSLRAEDTAVYSCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号9);及び
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRTIDNYAMAWSRQAPGKDREFVSTIDWGDGGTRYANSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAMARQSRVNLDVARYDYWGQGTLVTVSS(配列番号10)
からなる群から選択される配列を含む、請求項1又は2に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。 - 前記抗体がラクダ科動物由来である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。
- 多価ディスプレイ形式である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。
- Fc断片に連結されている、請求項5に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。
- 表面に固定化されている、請求項1〜6のいずれか一項に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。
- カーゴ分子に連結されている、請求項1〜6のいずれか一項に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。
- 前記カーゴ分子が、約1kD〜約200kDaの範囲の分子量を有する、請求項8に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。
- 前記カーゴ分子が、検出可能な試剤、治療剤、薬物、ペプチド、成長因子、サイトカイン、受容体トラップ、化合物、炭水化物部分、酵素、抗体若しくはその断片、DNAベース分子、ウイルスベクター、若しくは細胞毒性剤;検出可能な試剤、治療剤、薬物、ペプチド、酵素、抗体若しくはその断片、DNAベース分子、ウイルスベクター、若しくは細胞毒性剤が充填された1つ若しくは複数のリポソーム若しくはナノ担体;又は1つ若しくは複数のナノ粒子、ナノワイヤ、ナノチューブ、若しくは量子ドットである、請求項8又は9に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片。
- 1つ又は複数の、請求項1〜10のいずれか一項に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片及び薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤を含む組成物。
- 請求項1〜6のいずれか一項に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片をコードする核酸分子。
- 請求項12に記載の核酸分子を含むベクター。
- a)組織試料を、検出可能な試剤に連結された1つ又は複数の、請求項1〜6のいずれか一項に記載の単離又は精製単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片と接触させるステップ、及び
b)前記組織試料において、IGF1Rに結合した前記単一ドメイン抗体又はその抗原結合性断片に連結された前記検出可能な試剤を検出するステップ
を含む、IGF1Rを検出するインビトロ方法。 - 前記試料が、ヒト又は動物対象からの血清試料、血管組織試料、腫瘍組織試料、又は脳組織試料である、請求項14に記載の方法。
- 前記検出するステップ(ステップb))が、光学イメージング、免疫組織化学、分子画像診断、ELISA、イメージング質量分析、又は他の好適な方法を使用して実施される、請求項14又は15に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461948831P | 2014-03-06 | 2014-03-06 | |
US61/948,831 | 2014-03-06 | ||
PCT/CA2014/000862 WO2015131258A1 (en) | 2014-03-06 | 2014-12-04 | Insulin-like growth factor 1 receptor -specific antibodies and uses thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017513461A JP2017513461A (ja) | 2017-06-01 |
JP6541236B2 true JP6541236B2 (ja) | 2019-07-10 |
Family
ID=54054288
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016555678A Active JP6541236B2 (ja) | 2014-03-06 | 2014-12-04 | インスリン様成長因子1受容体特異的抗体及びそれらの使用 |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10100117B2 (ja) |
EP (1) | EP3114140B1 (ja) |
JP (1) | JP6541236B2 (ja) |
KR (1) | KR102355309B1 (ja) |
CN (1) | CN106536555B (ja) |
AU (1) | AU2014385801B2 (ja) |
BR (1) | BR112016020643B1 (ja) |
CA (1) | CA2941654C (ja) |
CL (1) | CL2016002245A1 (ja) |
DK (1) | DK3114140T3 (ja) |
EA (1) | EA035517B1 (ja) |
IL (1) | IL247607B (ja) |
MX (1) | MX2016011557A (ja) |
NZ (1) | NZ724869A (ja) |
PE (1) | PE20161245A1 (ja) |
UA (1) | UA120047C2 (ja) |
WO (1) | WO2015131258A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201606212B (ja) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
UA120048C2 (uk) * | 2014-03-06 | 2019-09-25 | Нешнл Рісеч Каунсіл Оф Канада | Антигензв'язуючий фрагмент антитіла, який специфічно зв'язується з рецептором інсуліноподібного фактора росту 1 (igf1r) |
MX2016011561A (es) | 2014-03-06 | 2017-04-13 | Nat Res Council Canada | Anticuerpos especificos para el receptor del factor de crecimiento similar a insulina 1 y usos de los mismos. |
EP3114140B1 (en) | 2014-03-06 | 2019-02-27 | National Research Council of Canada | Insulin-like growth factor 1 receptor -specific antibodies and uses thereof |
WO2018007950A1 (en) * | 2016-07-06 | 2018-01-11 | National Research Council Of Canada | Humanized antibodies transmigrating the blood-brain barrier and uses thereof |
AU2018212860A1 (en) * | 2017-01-30 | 2019-08-15 | National Research Council Of Canada | Blood-brain barrier transmigrating compounds and uses thereof |
BR112020001970A2 (pt) | 2017-08-02 | 2020-08-04 | Stressmarq Biosciences Inc. | anticorpo que se liga à alfa-sinucleína ativa |
WO2019117684A1 (ko) * | 2017-12-14 | 2019-06-20 | 에이비엘바이오 주식회사 | a-syn/IGF1R에 대한 이중 특이 항체 및 그 용도 |
US20210253715A1 (en) * | 2018-04-24 | 2021-08-19 | National Research Council Of Canada | Blood-brain barrier transmigrating therapeutic compounds and uses thereof |
BR112021013559A2 (pt) * | 2019-01-09 | 2021-09-21 | Vect-Horus | Moléculas de ligação a receptor de transferrina, conjugados das mesmas e seus usos |
EP3985022A4 (en) * | 2019-06-14 | 2023-08-02 | ABL Bio, Inc. | BISPECIFIC ANTIBODIES AGAINST A-SYN/IGF1R AND ITS USE |
TWI766512B (zh) | 2020-01-02 | 2022-06-01 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 用於判定腦中的治療性抗體量之方法 |
Family Cites Families (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
DE69233482T2 (de) | 1991-05-17 | 2006-01-12 | Merck & Co., Inc. | Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen |
WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
US5766886A (en) | 1991-12-13 | 1998-06-16 | Xoma Corporation | Modified antibody variable domains |
US5869619A (en) | 1991-12-13 | 1999-02-09 | Xoma Corporation | Modified antibody variable domains |
DE69434520T3 (de) | 1993-07-30 | 2009-10-15 | Affymax, Inc., Palo Alto | Biotinylierung von proteinen |
WO2001007084A1 (en) * | 1999-07-23 | 2001-02-01 | Regents Of The University Of California | Anti-growth factor receptor avidin fusion proteins as universal vectors for drug delivery |
CA2441903C (en) * | 2000-05-26 | 2012-07-31 | National Research Council Of Canada | Single-domain brain-targeting antibody fragments derived from llama antibodies |
AU2001268855A1 (en) * | 2000-05-26 | 2001-12-03 | National Research Council Of Canada | Single-domain antigen-binding antibody fragments derived from llama antibodies |
EP1456651B1 (en) | 2001-11-30 | 2008-05-07 | National Research Council Of Canada | Self-assembly molecules |
US7388079B2 (en) * | 2002-11-27 | 2008-06-17 | The Regents Of The University Of California | Delivery of pharmaceutical agents via the human insulin receptor |
US20050142141A1 (en) * | 2002-11-27 | 2005-06-30 | Pardridge William M. | Delivery of enzymes to the brain |
EP1452601A1 (en) | 2003-02-28 | 2004-09-01 | Roche Diagnostics GmbH | Enhanced expression of fusion polypeptides with a biotinylation tag |
WO2007000328A1 (en) * | 2005-06-27 | 2007-01-04 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P Angeletti Spa | Antibodies that bind to an epitope on insulin-like growth factor 1 receptor and uses thereof |
JP5269597B2 (ja) | 2005-09-27 | 2013-08-21 | ナショナル リサーチ カウンシル オブ カナダ | 血液―脳隔壁エピトープとその利用 |
CA2624781A1 (en) * | 2005-10-11 | 2007-04-19 | Ablynx N.V. | Nanobodies tm and polypeptides against egfr and igf-ir |
US20090252681A1 (en) * | 2005-10-11 | 2009-10-08 | Ablynx N.V. | Nanobodies and Polypeptides Against EGFR and IGF-IR |
CA2653444A1 (en) | 2006-06-07 | 2007-12-13 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Blood-brain barrier targeting antibodies |
US7981417B2 (en) | 2006-06-07 | 2011-07-19 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Blood-brain barrier targeting anti-bodies |
CA2661042C (en) | 2006-08-18 | 2012-12-11 | Armagen Technologies, Inc. | Agents for blood-brain barrier delivery |
JP2010538012A (ja) | 2007-08-28 | 2010-12-09 | バイオジェン アイデック マサチューセッツ インコーポレイテッド | Igf−1rの複数のエピトープに結合する組成物 |
US8444976B2 (en) * | 2008-07-02 | 2013-05-21 | Argen-X B.V. | Antigen binding polypeptides |
HUE044865T2 (hu) * | 2009-10-09 | 2019-11-28 | Armagen Inc | Eljárások és készítmények a központi idegrendszerben iduronát-2-szulfatáz-aktivitás növelésére |
US8444982B2 (en) | 2009-12-04 | 2013-05-21 | The University Of Hong Kong | Anti-IGF-IR antibodies and uses thereof |
WO2011127580A1 (en) | 2010-04-14 | 2011-10-20 | National Research Council Of Canada | Compositions and methods for brain delivery of analgesic peptides |
ES2550040T3 (es) * | 2010-05-27 | 2015-11-04 | Janssen Biotech, Inc. | Péptidos de unión al receptor del factor 1 de crecimiento similar a la insulina |
EP3208282A1 (en) | 2010-11-30 | 2017-08-23 | F. Hoffmann-La Roche AG | Low affinity anti transferrin receptor and their use to transfer therapeutic scfv across the blood brain barrier |
WO2013106577A2 (en) * | 2012-01-10 | 2013-07-18 | Biogen Idec Ma Inc. | Enhancement of transport of therapeutic molecules across the blood brain barrier |
MX2016011561A (es) | 2014-03-06 | 2017-04-13 | Nat Res Council Canada | Anticuerpos especificos para el receptor del factor de crecimiento similar a insulina 1 y usos de los mismos. |
UA120048C2 (uk) | 2014-03-06 | 2019-09-25 | Нешнл Рісеч Каунсіл Оф Канада | Антигензв'язуючий фрагмент антитіла, який специфічно зв'язується з рецептором інсуліноподібного фактора росту 1 (igf1r) |
EP3114140B1 (en) | 2014-03-06 | 2019-02-27 | National Research Council of Canada | Insulin-like growth factor 1 receptor -specific antibodies and uses thereof |
-
2014
- 2014-12-04 EP EP14884539.9A patent/EP3114140B1/en active Active
- 2014-12-04 WO PCT/CA2014/000862 patent/WO2015131258A1/en active Application Filing
- 2014-12-04 DK DK14884539.9T patent/DK3114140T3/da active
- 2014-12-04 CA CA2941654A patent/CA2941654C/en active Active
- 2014-12-04 AU AU2014385801A patent/AU2014385801B2/en active Active
- 2014-12-04 JP JP2016555678A patent/JP6541236B2/ja active Active
- 2014-12-04 EA EA201691782A patent/EA035517B1/ru unknown
- 2014-12-04 MX MX2016011557A patent/MX2016011557A/es active IP Right Grant
- 2014-12-04 UA UAA201610008A patent/UA120047C2/uk unknown
- 2014-12-04 KR KR1020167027256A patent/KR102355309B1/ko active IP Right Grant
- 2014-12-04 PE PE2016001574A patent/PE20161245A1/es unknown
- 2014-12-04 CN CN201480078382.8A patent/CN106536555B/zh active Active
- 2014-12-04 NZ NZ724869A patent/NZ724869A/en unknown
- 2014-12-04 US US15/123,735 patent/US10100117B2/en active Active
- 2014-12-04 BR BR112016020643-6A patent/BR112016020643B1/pt active IP Right Grant
-
2016
- 2016-09-04 IL IL247607A patent/IL247607B/en active IP Right Grant
- 2016-09-06 CL CL2016002245A patent/CL2016002245A1/es unknown
- 2016-09-07 ZA ZA2016/06212A patent/ZA201606212B/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
PE20161245A1 (es) | 2016-11-25 |
AU2014385801B2 (en) | 2020-11-12 |
UA120047C2 (uk) | 2019-09-25 |
JP2017513461A (ja) | 2017-06-01 |
EA201691782A1 (ru) | 2017-01-30 |
ZA201606212B (en) | 2019-01-30 |
EP3114140A1 (en) | 2017-01-11 |
CA2941654A1 (en) | 2015-09-11 |
EP3114140A4 (en) | 2017-10-25 |
DK3114140T3 (da) | 2019-06-03 |
IL247607A0 (en) | 2016-11-30 |
CL2016002245A1 (es) | 2017-04-07 |
US20170015748A1 (en) | 2017-01-19 |
BR112016020643B1 (pt) | 2023-05-02 |
EA035517B1 (ru) | 2020-06-29 |
EP3114140B1 (en) | 2019-02-27 |
MX2016011557A (es) | 2017-04-13 |
IL247607B (en) | 2020-03-31 |
CN106536555B (zh) | 2019-10-18 |
NZ724869A (en) | 2022-07-01 |
US10100117B2 (en) | 2018-10-16 |
KR102355309B1 (ko) | 2022-01-24 |
CA2941654C (en) | 2023-08-08 |
KR20160130436A (ko) | 2016-11-11 |
WO2015131258A1 (en) | 2015-09-11 |
AU2014385801A1 (en) | 2016-10-20 |
BR112016020643A2 (pt) | 2018-01-23 |
CN106536555A (zh) | 2017-03-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6541236B2 (ja) | インスリン様成長因子1受容体特異的抗体及びそれらの使用 | |
JP6541237B2 (ja) | インスリン様成長因子1受容体特異的抗体及びそれらの使用 | |
JP6541235B2 (ja) | インスリン様成長因子1受容体特異的抗体及びそれらの使用 | |
KR102406610B1 (ko) | 혈액-뇌 장벽을 통과이동하는 인간화 항체 및 그의 용도 | |
BR112016020613B1 (pt) | Anticorpos específicos para receptor de fator de crescimento semelhante à insulina tipo 1 e uso dos mesmos | |
BR112016020628B1 (pt) | Anticorpos específicos para receptor de fator de crescimento semelhante à insulina tipo 1 e uso dos mesmos | |
STANIMIROVIC et al. | Patent 2942152 Summary |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20171121 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20180919 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180925 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181225 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190514 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190607 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6541236 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |