JP6357292B2 - Cnksr1を阻害するための方法及び組成物 - Google Patents
Cnksr1を阻害するための方法及び組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6357292B2 JP6357292B2 JP2015548050A JP2015548050A JP6357292B2 JP 6357292 B2 JP6357292 B2 JP 6357292B2 JP 2015548050 A JP2015548050 A JP 2015548050A JP 2015548050 A JP2015548050 A JP 2015548050A JP 6357292 B2 JP6357292 B2 JP 6357292B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- cancer
- alkyl
- acid
- available
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 0 *CC(c1c2cccc1)=NN(Cc1nc(-c3cc(*)c(*)cc3)c[s]1)C2=O Chemical compound *CC(c1c2cccc1)=NN(Cc1nc(-c3cc(*)c(*)cc3)c[s]1)C2=O 0.000 description 15
- CBYNSGZDMJEKHV-SREVYHEPSA-N CC/C(/SC)=N/CC Chemical compound CC/C(/SC)=N/CC CBYNSGZDMJEKHV-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- DCFOPGAGBKGJMG-AATRIKPKSA-N CCOC(/C=C/c(c(O)c(cc1N)OC)c1SC)=O Chemical compound CCOC(/C=C/c(c(O)c(cc1N)OC)c1SC)=O DCFOPGAGBKGJMG-AATRIKPKSA-N 0.000 description 1
- MJJCZWPYKMGQHU-UHFFFAOYSA-N CN(C(C(N1)=O)=O)C1=O Chemical compound CN(C(C(N1)=O)=O)C1=O MJJCZWPYKMGQHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAMPDACRJWTXEV-UHFFFAOYSA-N COC(c(cccc1)c1C#N)=O Chemical compound COC(c(cccc1)c1C#N)=O RAMPDACRJWTXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BNYLGFINMVZZGA-UHFFFAOYSA-N CS(c1ccc[s]1)(=O)=O Chemical compound CS(c1ccc[s]1)(=O)=O BNYLGFINMVZZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JAUYVHBGPOORII-NSCUHMNNSA-N CSc(c(/C=C/C(O)=O)c(c(O)c1)O)c1N Chemical compound CSc(c(/C=C/C(O)=O)c(c(O)c1)O)c1N JAUYVHBGPOORII-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- GDFFNHXELCQKJZ-UHFFFAOYSA-N Cc(cc1)ccc1-c1c[s]c(CN(C(c2c3cccc2)=O)N=C3NS(c2ccc[s]2)(=O)=O)n1 Chemical compound Cc(cc1)ccc1-c1c[s]c(CN(C(c2c3cccc2)=O)N=C3NS(c2ccc[s]2)(=O)=O)n1 GDFFNHXELCQKJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUBSMBJKUKVEMK-UHFFFAOYSA-N NC(c1ccccc11)=NNC1=O Chemical compound NC(c1ccccc11)=NNC1=O IUBSMBJKUKVEMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VNNLHYZDXIBHKZ-UHFFFAOYSA-N O=S(c1ccc[s]1)(Cl)=O Chemical compound O=S(c1ccc[s]1)(Cl)=O VNNLHYZDXIBHKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEURPORQXPQZMX-UHFFFAOYSA-N OC1Oc(cc(cc2OCC(O)=O)OCC(O)=O)c2C(c2ccccc2)=C1 Chemical compound OC1Oc(cc(cc2OCC(O)=O)OCC(O)=O)c2C(c2ccccc2)=C1 VEURPORQXPQZMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
Description
本出願は、2013年12月14日に出願された、Methods and Compositions for Inhibiting CNKSR1と題する米国特許仮出願第61/737,658号に対する優先権を主張する。
米国政府は、テキサス州CPRITのHigh Impact Grant『KRAS the elephant in the room of cancer chemotherapy』第RP100686号に従う、本発明に対する一定の権利を有しうる。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある(国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む)。
(先行技術文献)
(特許文献)
(特許文献1) 国際公開第2003/076436号
(特許文献2) 国際公開第2003/084473号
(特許文献3) 国際公開第2005/000862号
(特許文献4) 国際公開第2005/005421号
(特許文献5) 国際公開第2005/090461号
(特許文献6) 国際公開第2005/097758号
(特許文献7) 国際公開第2006/046914号
(特許文献8) 国際公開第2007/039173号
(特許文献9) 国際公開第2008/083158号
(特許文献10) 国際公開第2009/129267号
(特許文献11) 国際公開第2010/085968号
(特許文献12) 国際公開第2011/032169号
(特許文献13) 国際公開第2014/093988号
(特許文献14) 国際公開第2016/172191号
(特許文献15) 米国特許第4,939,140号明細書
(特許文献16) 米国特許第4,251,528号明細書
(特許文献17) 米国特許第6,924,284号明細書
(特許文献18) 米国特許出願公開第2011/0144066号明細書
(特許文献19) 米国特許第6,066,311号明細書
(特許文献20) 米国特許出願公開第2012/0189670号明細書
(非特許文献)
(非特許文献1) ANWAR et al."Reactions of some 5−aryl−2−thiono−1,3,4−thiadia−zoles"January 1,1981,Romanian Journal of Chemistry 26(8):1127−1134
(非特許文献2) BANKER et al."Modern Pharmaceutics"1979,Marcel Dekker,Inc.,New York(TOC).
(非特許文献3) CARPTEN et al."A Transforming Mutation in the Pleckstrin Homology Domain of AKT1 in Cancer"July 26,2007,Nature 448(7152):439−444
(非特許文献4) CASTILLO et al."Preferential Inhibition of Akt and Killing of Akt−dependent Cancer Cells by Rationally Designed Phosphatidylinositol Ether Lipid Analogues"April 15,2004,Cancer Res.64(8):2782−92
(非特許文献5) CATLEY et al."Alkyl Phospholipids Perifosine Induces Myeloid Hyperplasia in a Murin Myeloma Model"July 2007,Exp.Hematol.35(7):1038−1046(abstract)
(非特許文献6) Chemical Abstract Database compound(CAS RN 1022250−16−3)entering date May 25,2008
(非特許文献7) Chemical Abstract Database compound(CAS RN 1022557−01−2)entering date May 26,2008
(非特許文献8) Chemical Abstract Database: compound(CAS RN 477482−99−8),entering date December 12,2002
(非特許文献9) Chemical Abstract Database: compound (CAS RN 477483−04−8),entering date December 12,2002
(非特許文献10) Chemical Abstract Database: compound(CAS RN 919458−54−1),entering date February 6,2007
(非特許文献11) Database Pubchem(Online)NCBI: September 11,2005 Database accession no. CID3800302
(非特許文献12) Database Pubchem(Online)NCBI: September 7,2005 Database accession no.CID3268165
(非特許文献13) Database Pubchem(Online)NCBI; February 29,2008 Database accession no.CID24283805
(非特許文献14) European Search Report and Written Opinion dated February 2,2012 for EP 11181871
(非特許文献15) FELDMAN et al."Novel Small Molecule Inhibitors of 3’−phosphoinositide−dependent Kinsase1(PDK−1)"September 30,2004,Eur.J.Cancer Supp.2(249):77
(非特許文献16) FENGL "Enteric Coating" October 22, 2002, Enerex.ca 5 pages
(非特許文献17) GILLS et al."Spectrum of Activity and Molecular Correlates of Response to Phosphatidylinositol Ether Lipid Analogues, Novel Lipid−based Inhibitors of Akt"March 2006,Mol.Cancer Ther.5(3):713−722
(非特許文献18) GIRANDA et al."Novel ATP−competitive AKT Inhibitors Slow the Progression of Tumors in vivo"September 30,2004,Eur.J.Cancer Supp.2(246):76−77
(非特許文献19) GOODMAN et al."The Pharmaceutical Basis of Therapeutics,6th ed." 1980,MacMillan Publishing Co.,New York(TOC).
(非特許文献20) HUMPHREYS et al."Toxicity and antileukemic effectiveness of pyridine derivatives and 1,3,4−thiadiazole derivatives in mice.Relationship to nicotinamide antagonism"1962,Cancer Res.22:483−550
(非特許文献21) International Search Report and Written Opinion dated June 3,2014 for PCT/US2013/75505
(非特許文献22) International Search Report and Written Opinion dated May 26,2011 for PCT/US2010/048813
(非特許文献23) International Search Report and Written Opinion dated October 19,2009 for PCT/US2009/040575
(非特許文献24) International Search Report dated December 15,2009 for PCT/US2009/040575
(非特許文献25) International Search Report dated July 29,2016 for PCT/US2016/028414
(非特許文献26) KIM et al."Targeting the Phosphatidylinositol−3 Kinase/Akt Pathway for the Treatment of Cancer"December 2005,Curr.Opin.Investig.Drugs 6(12):1250−1258
(非特許文献27) KOMANDER et al."Structural Insights into the Regulation of Pdk1 by Phosphoinositides and Inositol Phosphates" 2004,EMBO J.23(20):3918−3928
(非特許文献28) KUMAR et al."AKT Crystal Structure and AKT−specific Inhibitors"November 2005,Oncogene 24(50):7493−7501
(非特許文献29) LI "Recent Progress in the Discovery of Akt Inhibitors as Anticancer Agents"2007,Expert Opin.Ther.Patents 17:1077−1130
(非特許文献30) MAHADEVAN et al. "Discovery of a novel class of AKT pleckstrin homology domain inhibitors" September 2008, Mol. Cancer Ther. 7(9):2621−2632
(非特許文献31) MAHIEU et al. "Synthesis of new thiosulfonates and disulfides from sulfonyl chlorides and thiols" January 1, 1986, Synthetic Communications 16(13):1709−1722
(非特許文献32) MEUILLET et al."In Vivo Molecular Pharmacology and Antitumor Activity of the Targeted Akt Inhibitor PX−316"2004,Oncol.Res.14(10):513−527(abstract)
(非特許文献33) MEUILLET et al."Specific Inhibition of the Akt2 Pleckstrin Homology domain by D−3−deoxy−phosphatidyl−myo−inositol Analogues"April 2003,Mol.Cancer.Ther.2(4):390−399
(非特許文献34) MILBURN et al."Binding of Phosphatidylinositol 3,4,5−trisphosphate to the Pleckstrin Homology Domain of Protein Kinase B Induces a Conformational Change"2003,Biochem.J.375:531−538
(非特許文献35) MIYAHARA et al."Antitumor activity of 2−Acylamino−1,3,4−thiadiazoles and related compounds"1982,Chem.Pharm.Bul.30(12):4402−4406
(非特許文献36) MOSES,et al.,"In vitro and in vivo activity of novel small−molecule inhibitors targeting the pleckstrin homology domain of protein kinase B/AKT"June 15,2009,Cancer Research 69(12):5073−5081
(非特許文献37) Office Action issued in Australian Application No.2009236256,mailed May 2,2013
(非特許文献38) Office Action issued in Australian Application No.2009236256,mailed June 11,2014
(非特許文献39) Office Action issued in European Application No.11181871.2,mailed July 10,2013
(非特許文献40) Office Action issued in European Application No.11181871.2,mailed September 25,2014
(非特許文献41) Office Action issued in U.S.Application No.12/937,898,mailed August 30,2012
(非特許文献42) Office Action issued in U.S.Application No.12/937,898,mailed June 18,2012
(非特許文献43) Office Action issued in U.S.Application No.13/789,209 dated June 25,2014
(非特許文献44) PENG et al."Dwarfism,Impaired Skin Development,Skeletal Muscle Atrophy,Delayed Bone Development,and Impeded Adipogenesis in Mice Lacking Akt1 and Akt2"June 1,2003,Genes Dev.17(11):1352−1365
(非特許文献45) POWELL et al."Bile Acid Hydrophobicity is Correlated with Induction of Apoptosis and/or Growth Arrest in HCT116 Cells"2001,Biochem J.356:481−486
(非特許文献46) RUNGE et al."Uber einige unsymmetrishce heterocyclische Disulfide,II"July 1,1963,J.Fuer Praktische Chemie 21(1−2):39−49(cited in German/ no translation available)
(非特許文献47) SASSIVER et al."2−Sulfanilamido−5−methoxy−,1,3,4−thiadiazole and related compounds"1966,J.Med.Chem.9(4):541−545
(非特許文献48) STEIN et al."Discovery and structure of activity relationships of sulfonamide ETA−selective antagonists"1995,J.Med.Chem.38:1344−1354
(非特許文献49) Supplementary European Search Report and Written Opinion dated September 17,2012 for EP 10816289
(非特許文献50) Supplementary European Search Report and Written Opinion dated April 14,2016 for EP13863280
(非特許文献51) THOMAS et al."High−resolution Structure of Pleckstrin Homology Domain of Protein Kinase B/akt Bound to Phosphatidylinositol(3,4,5)−trisphosphate"July 2002,Curr.Biol.12(14):1256−1262
Rは、−C1−C4アルキル、−NO2、−NH2、−NHSO2CH3、−C1−C5シクロアルキル、もしくは−CF3であり、
R2はHであり、もしくはRとR2とがそれらに結合する炭素を伴う二環式部位を形成するために
R1は、−C(O)、−C(O)O(C1−C4アルキル)、−C(O)OH、−C1−C4アルキル−OH、−CH(OH)(CH2)nNH2、−CH(OH)、−C(OH)CNO2、−(CH2)nNO2、−CHO、−C(O)NHR3、
nは、1、2、3、もしくは4であり、
R3は、−C1−C4アルキル、−C1−C2アルキル−C(O)NH2、−S(O)2CH3であり、かつ、
RがMeの場合はR1が−C(O)OCH2CH3ではない。
R4は−Hもしくは−C1−C4アルキルであり、
R5は、−C1−C4アルキル−OH、−C2−C6アルケニル−OH、−C1−C4アルキル−C(O)−C1−C4アルキル、−C2−C6アルケニル−C(O)−C1−C4アルキル、−C1−C4アルキル−C(O)−C3−C5シクロアルキル、−−C2−C6アルケニル−C(O)−C3−C5シクロアルキル、
R8はC1−C4アルキルもしくは−C3−C5シクロアルキルであり、かつ
R7はHもしくは
R9は−Hもしくは−C1−C4アルキルであり、
R10は、−C(O)OC1−C4アルキル、−C(O)OH、
R11はHもしくはC1−C4アルキルであり、
R12はC1−C4アルキルである。
本組成物及び方法が開示される前に、本発明は、開示される特定の工程、組成物、または技法に限定されないことが理解されるべきである。工程、組成物、または技法は変化しうるためである。本開示において用いられる用語は、特定のバージョンまたは実施形態を開示する目的のみのためであって、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることになる本発明の範囲を限定することを意図しないこともまた、理解されるべきである。別に定義されない限り、本明細書で用いられる全ての専門及び化学的用語は、当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本発明の実施形態の実践または試験においては、本明細書で開示されるのと類似したまたは同等のあらゆる方法及び材料が用いられうるが、好まれる方法、装置、及び材料がここでは開示される。本明細書で言及される全ての刊行物は、その全体が本参照により組み込まれる。本明細書におけるいかなるものも、先の発明によって本発明がそのような開示に先行する権利を有さないと認めたものと解釈されるべきではない。
式中、
W及びXは、それぞれ独立に、炭素原子及び窒素原子から選択され、
Yは炭素原子であり、
Zは、メチレン、酸素原子、及び硫黄原子から選択され、
XとYと間の結合次数は、単結合または二重結合から選択され、
R1は、ヒドロキシ、チオール、任意で置換されたアミン類、任意で置換されたエーテル類、任意で置換されたスルファン類、Yとともにケトンを形成する酸素原子、Yとともにイミンを形成する任意で置換された窒素原子、及びYとともにチオンを形成する硫黄原子から選択され、
R2は、ヒドロキシ、チオール、任意で置換されたアミン類、任意で置換されたエーテル類、任意で置換されたスルファン類、1から3個の炭素原子を有する任意で置換されたアルキル鎖、任意で置換されたスルホンイミド酸類、任意で置換されたスルホンイミデートから選択され、かつ
R3は、酢酸、アセテート、酢酸アルキル、及び4−p−トリルチアゾール−2−イルから選択され、
さらにその化合物は、
式中、
W及びXは、それぞれ独立に、炭素原子及び窒素原子から選択され、
Yは炭素原子であり、
Zは、メチレン、及び硫黄原子から選択され、
XとYと間の結合次数は、単結合または二重結合から選択され、
R1は、ヒドロキシ、及びYとともにケトンを形成する酸素原子から選択され、
R2は、任意で置換された炭素原子、及び任意で置換されたスルホンイミデートから選択され、かつ
R3は、アセテート、及び4−p−トリルチアゾール−2−イルから選択され、
さらにその化合物は、
Rは、−C1−C4アルキル、−NO2、−NH2、−NHSO2CH3、−C1−C5シクロアルキル、もしくは−CF3であり、
R2はHである、もしくはRとR2とがそれらに結合する炭素を伴う二環式部位を形成するために
R1は、−C(O)、−C(O)O(C1−C4アルキル)、−C(O)OH、−CH2OH、−CH(OH)(CH2)nNH2、−CH(OH)、−C(OH)CNO2、−(CH2)nNO2、−CHO、−C(O)NHR3、
R3は、−C1−C4アルキル、−C1−C2アルキル−C(O)NH2、−S(O)2CH3であり、かつ、
RがMeの場合はR1が−C(O)OCH2CH3ではない(化合物7)。
式中、
R4は、ヒドロキシ、チオール、任意で置換されたアミン類、及び任意で置換されたエーテルから選択され、
R5は、ヒドロキシ、チオール、任意で置換されたアミン類、任意で置換されたエーテル類、任意で置換されたスルファン類、1から3個の炭素原子を有する任意で置換されたアルキル鎖、任意で置換されたスルホンイミド酸類、任意で置換されたスルホンイミデートから選択され、かつ
R3は、酢酸、アセテート、酢酸アルキル、及び4−p−トリルチアゾール−2−イルから選択される。
R4は−Hもしくは−C1−C4アルキルであり、
R5は、−C1−C4アルキル−OH、−C2−C6アルケニル−OH、−C1−C4アルキル−C(O)−C1−C4アルキル、−C2−C6アルケニル−C(O)−C1−C4アルキル、−C1−C4アルキル−C(O)−C3−C5シクロアルキル、−−C2−C6アルケニル−C(O)−C3−C5シクロアルキル、
R8はC1−C4アルキルもしくは−C3−C5シクロアルキルであり、かつ
R7はHもしくは
式中、
R4は、ヒドロキシ、チオール、任意で置換されたアミン類、及び任意で置換されたエーテルから選択され、
R5は、ヒドロキシ、チオール、任意で置換されたアミン類、任意で置換されたエーテル類、任意で置換されたスルファン類、1から3個の炭素原子を有する任意で置換されたアルキル鎖、任意で置換されたスルホンイミド酸類、任意で置換されたスルホンイミデートから選択され、かつ
R6は、酢酸、アセテート、酢酸アルキル、チアゾール−2−イル、及び4−p−トリルチアゾール−2−イルから選択される。1つの好まれる実施形態においては、R4は、ヒドロキシ、及び任意で置換されたエーテルから選択され、R5は1から3個の炭素原子を有する置換されたアルキル鎖であり、かつR6はチアゾール−2−イルである。
R9は−Hもしくは−C1−C4アルキル−CH3であり、
R10は、−C(O)OC1−C4アルキル[エチル]、−C(O)OH、
R11はHもしくはC1−C4アルキルであり、
R12はC1−C4アルキルである。
アイソジェニック変異型KRAS株に対する化合物のスクリーニング(図2)。
MiaPaCa−2及びM27は、マイコプラズマ確認がなされ、10%FBSを有するDMEM中で維持された。最適化は、社内において、社内の最適化法を使用して行われた。それから、ゲノムワイドのsiRNAライブラリー(Dharmacon)を用いて並列スクリーニングが行われた。
プレートが最善の細胞密度に最適化され、それはmLあたり20,000細胞と分かった。96ウェルGreinerプレートから蓋を取り除き、逆さまにした。次に、mLあたり20,000細胞の懸濁液20μLが、小さな液滴を形成しながら、96ウェルプレートの蓋上の円の中心へと直接加えられた。培養液100μLが対応するウェル中に加えられて液滴の温度を維持するのに用いられ、液滴を乱すことなく注意深く蓋をひっくり返してプレート上へと戻した。それからプレートをインキュベーターに3日間入れ、重力により細胞を液滴の底へと移動させた。3日後、培養液400μlがSCIVAX96ウェルプレートの対応するウェルに加えられた。Greiner96ウェルプレートの蓋を取り除いてSCIVAXプレート上に乗せ、液滴が培養液に接触するようにし、インキュベーターへ戻した。1時間後、スフェロイドを乱さずに注意深く対応するウェルから培養液200μLを取り除き、画像化した。
HEK293T細胞をCNKと野生型またはG12D変異型KRASのいずれかとで共トランスフェクションした。トランスフェクションから24時間後、細胞をカバーガラス上に播種し、さらに24時間成長させ、それから一晩血清を欠乏させた。細胞を4(w/v)パラホルムアルデヒドpH8.0で20分かけて室温にて固定させた。PBS(pH8.0)で6−7回濯いだ後、カバーガラスを封入剤(pH7.5−8.0、PBS中0.1%p−フェニレンジアミン/75%グリセロール)を用いてスライドグラス上にマウントした。Leica SP5共焦点顕微鏡システムを用いて、63X油浸対物レンズ(開口数NA=1.4)、ライン走査速度600Hz、画像サイズ1024x1024ピクセルで、共焦点レーザー走査顕微鏡法が行われた。GFPは488nmに調節されたアルゴン可視光レーザーで励起し、mRFPは543nmに調節されたクリプトンレーザーで励起した。GFP及びRFP蛍光放出は、それぞれ510/10nm及び595/10nmバンド選択により、光電子倍増管を用いて収集された。
TCSPC(時間相関単一光子計数法)のための内蔵型光電子倍増管(PMT)検出器を有するLeica TCP SP5倒立型高解像度共焦点顕微鏡システムを用いて、FLIM実験を行った。調節可能なフェムト秒(fs)チタンサファイアレーザーを用いて、80MHzの繰り返し速度及び80fsより小さいパルス幅(Spectral Physics、Mai Tai BB)で、試料を励起した。二光子励起に用いられた波長は930nmで、525±25nm干渉フィルタにより蛍光を検出した。油浸対物レンズ(開口数NA=1.4)を用いて、ライン走査速度400Hz、画像サイズ512x512ピクセルで、画像を獲得した。FLIM解析に対しては、ピクセル数を256x256へと減少させた。TCSPC用のBecker&Hickl SPC830データ及び画像獲得カードを用いて、FLIMデータを収集した。蛍光減衰をBecker and HicklのSPCImageソフトウェアを用いで単一指数減衰モデルに当てはめ、GFP蛍光寿命を疑似彩色マップに表示させた。
全ての相互作用解析は、Biacore T100 Control Software v3.2、及びBIAevaluation v4.1解析ソフトウェア(Biacore)を用いて行われた。PHドメインHis融合タンパク質(CNK1及びAKT1)を発現させ、10,000応答単位またはそれより低いレベルでNTAチップ上に固定させた。濃度範囲50μMから0.010μMの小分子分析物を、高流速(30μL/分)で注入した。全ての試料及びランニング緩衝液におけるDMSO濃度は、1−5%(v/v)(30μL/分)であった。全ての試料及びランニング緩衝液におけるDMSO濃度は、1−5%(v/v)であった。
細胞を、氷冷PBSと、50mmol/L HEPES(pH7.5)、50mmol/L NaCl、0.2mmol/L NaF、0.2mmol/Lオルトバナジウム酸ナトリウム、1mmol/Lフェニルメチルスルホニルフロリド、20μg/mLアプロチニン、20μg/mLロイペプチン、1%NP40、及び0.25%デオキシコール酸ナトリウムを含有する溶解バッファーとを用いて、2回洗った。タンパク質濃度をビシンコニン酸分析(Pierce Biotechnology)により決定し、細胞溶解タンパク質50μgを、0.25mol/L Tris(pH6.8)、35%グリセロール、8%SDS、及び10%2−メルカプトエタノールを含有する変性バッファーを用いて5分間煮て、10%アクリルアミド/ビスアクリルアミドゲル上にロードし、電気泳動により150Vにて40分かけて分離した。タンパク質を電気泳動によりニトロセルロース膜に転写し、137mmol/L NaCl、2.7mmol/L KCl、897mmol/L CaCl2、491mmol/L MgCl2、3.4mmol/L Na2HPO4、593mmol/L KH2PO4、及び5%ウシ血清アルブミンのブロッキングバッファーと共に予め放置しておき、それから、抗リン酸化Thr308−Akt、Ser473Akt、抗CRaf Ser338 Mapk Thr202/Tyr204、p70 S6K Thr389、または抗Akt.(Cell Signaling 1:1000)、抗CNKSR1(Signal Transduction labs)抗ラミンA/C、及び抗β−アクチンと共に一晩放置した(検出には、Santa Cruz Biotechnology 1:2000 ロバ抗ウサキIgGペルオキシダーゼ共役型二次抗体(GE Healthcare)を使用した)。活性Ra1A及びRa1Bの測定には、Ra1及びRa1B活性化キットを使用した(Biorad)。Kodak X−Omat Blue MLフィルム(Eastman Kodak)上でRenaissance化学発光システムを使用して、バンド密度を測定した。
Claims (35)
- 式IAの化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩であって、
Rが、−C1−C4アルキル、−NO2、−NH2、−NHSO2CH3、−C 3 −C5シクロアルキル、もしくは−CF3であり、
R2がHであり、またはR及びR2が
R1が、−C(O)O(C1−C4アルキル)、−C(O)OH、−C1−C4アルキル−OH、−CH(OH)(CH2)nNH2、−CH 2 (OH)、−CH(OH)CH 2 NO 2 、−(CH2)nNO2、−CHO、−C(O)NHR3、
nは、1、2、3、もしくは4であり、
R3は、−C1−C4アルキル、−C1−C2アルキル−C(O)NH2、もしくは−S(O)2CH3であり、
RがNO 2 、CF 3 、およびMeから選択される場合はR1が−C(O)OCH2CH3ではない、
化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩。 - 請求項1記載の化合物において、R1が−C(O)O(C1−C4アルキル)である、化合物。
- 請求項1記載の化合物において、R1が−−C1−C4アルキル−OHである、化合物。
- 請求項1記載の化合物において、R1が−C(O)NHR3である、化合物。
- 請求項1記載の化合物において、Rがメチルである、化合物。
- 請求項1記載の化合物において、Rが−C 3 −C5シクロアルキルである、化合物。
- 請求項10記載の化合物において、R 4 がメチルである、化合物。
- 請求項10記載の化合物において、R 5 が−C2−C6アルケニル−OHもしくは−C2−C6アルケニル−C(O)−C1−C4アルキルである、化合物。
- 請求項14記載の化合物において、R 8 がシクロプロピルもしくはシクロブチルである、化合物。
- 請求項10記載の化合物において、R 7 がHである、化合物。
- 請求項20記載の化合物において、R 9 がメチルである、化合物。
- 請求項20記載の化合物において、R 10 が−C(O)OC1−C4アルキルである、
化合物。 - 請求項22記載の化合物において、C 1 −C 4 アルキルがエチルである、化合物。
- 請求項28記載の化合物において、R13がメチルである、化合物。
- 請求項28記載の化合物において、R14がO−メチルである、化合物。
- 癌を治療するための組成物であって、有効量の請求項1〜31記載の化合物を有する、組成物。
- 請求項32記載の組成物において、前記癌が、副腎皮質癌腫、肛門癌、膀胱癌、脳腫瘍、乳癌、カルチノイド腫瘍、胃腸癌、原発腫瘍が不明の癌腫、子宮頸癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、肝外胆管癌、ユーイング腫瘍(PNET)、頭蓋外胚細胞腫瘍、眼の癌、眼内黒色腫、胆嚢癌、胃癌(胃)、胚細胞腫瘍、性腺外腫瘍、妊娠性絨毛腫瘍、頭頸部癌、下咽頭癌、島細胞癌腫、腎臓癌、喉頭癌、白血病、成人急性リンパ芽球性白血病、小児急性リンパ芽球性白血病、舌及び口腔癌、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、AIDS関連リンパ腫、中枢神経系(原発)リンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、ホジキン病、成人リンパ腫、ホジキン病、小児リンパ腫、非ホジキン病、成人リンパ腫、非ホジキン病、小児、悪性中皮腫、黒色腫、メルケル細胞癌腫、原発腫瘍不明の転移性扁平頸部癌、多発性骨髄腫及び他の形質細胞腫瘍、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性障害、上咽頭癌、神経芽細胞種、口腔癌、中咽頭癌、骨肉腫、上皮性卵巣癌、卵巣胚細胞腫瘍、膵臓癌、外分泌系膵臓癌、島細胞癌腫、副鼻腔及び鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、脳下垂体癌、形質細胞腫瘍、前立腺癌、横紋筋肉腫、小児、直腸癌、腎細胞癌、腎盂尿管癌、移行上皮癌、唾液腺癌、セザリー症候群、皮膚癌、皮膚癌、皮膚T細胞リンパ腫、皮膚癌、カポジ肉腫、皮膚癌、黒色腫、小腸癌、軟部肉腫、成人軟部肉腫、小児、胃癌、精巣癌、胸腺腫、悪性、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、肉腫、稀な小児癌、膣癌、外陰癌、ウィルムス腫瘍、並びにこれらの組み合わせから選択されるものである、組成物。
- CNKSR1を阻害するための組成物であって、有効量の請求項1〜31記載の化合物を有する、組成物。
- 請求項10記載の化合物において、R 5 が−C 1 −C 4 アルキル−OHまたは−C 1 −C 4 アルキル−C(O)−C 1 −C 4 アルキルである、化合物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261737658P | 2012-12-14 | 2012-12-14 | |
US61/737,658 | 2012-12-14 | ||
PCT/US2013/075505 WO2014093988A2 (en) | 2012-12-14 | 2013-12-16 | Methods and compositions for inhibiting cnksr1 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016508969A JP2016508969A (ja) | 2016-03-24 |
JP2016508969A5 JP2016508969A5 (ja) | 2017-02-23 |
JP6357292B2 true JP6357292B2 (ja) | 2018-07-11 |
Family
ID=50935099
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015548050A Active JP6357292B2 (ja) | 2012-12-14 | 2013-12-16 | Cnksr1を阻害するための方法及び組成物 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9340532B2 (ja) |
EP (1) | EP2931280B1 (ja) |
JP (1) | JP6357292B2 (ja) |
AU (1) | AU2013358876B2 (ja) |
CA (1) | CA2895162C (ja) |
MX (1) | MX2015007608A (ja) |
WO (1) | WO2014093988A2 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9340532B2 (en) | 2012-12-14 | 2016-05-17 | Phusis Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for inhibiting CNKSR1 |
WO2016172191A1 (en) * | 2015-04-20 | 2016-10-27 | Phusis Therapeutics, Inc. | Compounds, compositions and methods for inhibiting cnksr1 |
US20190367457A1 (en) | 2016-12-30 | 2019-12-05 | Mitobridge, Inc. | Oxopyridine derivatives useful as aminocarboxymuconate semialdehyde decarboxylase (acmsd) inhibitors |
CN110698411B (zh) * | 2018-07-09 | 2023-05-09 | 四川大学 | 一类4-(胺烷基)酞嗪-1-酮类化合物、其制备方法和用途 |
WO2022187804A1 (en) * | 2021-03-02 | 2022-09-09 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Benzoxazolone inhibitors of inflammasomes |
Family Cites Families (35)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA775563A (en) | 1968-01-09 | Frank W. Horner Limited | Hypoglycemic thiadiazoles | |
GB828963A (en) | 1956-08-03 | 1960-02-24 | Rhone Poulenc Sa | Pharmaceutical compositions containing 2-p-aminobenzenesulphonamido-5-t-butyl-1, 3, 4-thiadiazole |
US3821222A (en) | 1971-11-22 | 1974-06-28 | Chevron Res | Hydrocarbyl sulfenylmercapto pyrimidines |
US4017489A (en) | 1975-07-10 | 1977-04-12 | The Goodyear Tire & Rubber Company | Process of preparing unsymmetrical disulfides |
DE2556011A1 (de) | 1975-12-12 | 1977-06-23 | Merck Patent Gmbh | Disulfide |
IE47592B1 (en) * | 1977-12-29 | 1984-05-02 | Ici Ltd | Enzyme inhibitory phthalazin-4-ylacetic acid derivatives, pharmaceutical compositions thereof,and process for their manufacture |
GB2152497B (en) | 1983-11-28 | 1987-08-05 | Otsuka Kagaku Kk | Process for the preparation of azetidinone derivatives |
FR2573077B1 (fr) | 1984-11-13 | 1987-02-13 | Sanofi Sa | Nouveaux derives thiosulfonates, leur procede de preparation ainsi que les compositions pharmaceutiques les contenant |
US4939140A (en) * | 1985-11-07 | 1990-07-03 | Pfizer Inc. | Heterocyclic oxophthalazinyl acetic acids |
US4990523A (en) | 1989-06-19 | 1991-02-05 | A. H. Robins Company, Incorporated | Treatment of chronic inflammatory joint disease with arylsulfonamides |
GB9507415D0 (en) * | 1994-06-08 | 1995-05-31 | Zylepsis Ltd | Production and uses of caffeic acid and derivatives thereof |
US6139875A (en) | 1998-09-29 | 2000-10-31 | Eastman Chemical Company | Aqueous enteric coating composition and low gastric permeability enteric coating |
FR2815032B1 (fr) | 2000-10-10 | 2003-08-08 | Pf Medicament | Nouveaux derives d'aminophenyle piperazine ou d'amino phenyle piperide inhibiteurs de proteines prenyl transferase ainsi que leurs preparations |
EP1379250A2 (en) | 2001-04-10 | 2004-01-14 | Merck & Co., Inc. | A method of treating cancer |
WO2003015785A1 (en) * | 2001-08-15 | 2003-02-27 | Icos Corporation | 2h-phthalazin-1-ones and methods for use thereof |
GB0205693D0 (en) | 2002-03-09 | 2002-04-24 | Astrazeneca Ab | Chemical compounds |
WO2003084473A2 (en) | 2002-04-08 | 2003-10-16 | Merck & Co., Inc. | Method of treating cancer |
GB0215823D0 (en) * | 2002-07-09 | 2002-08-14 | Astrazeneca Ab | Quinazoline derivatives |
US20040102360A1 (en) | 2002-10-30 | 2004-05-27 | Barnett Stanley F. | Combination therapy |
JP4787155B2 (ja) | 2003-06-24 | 2011-10-05 | イシス イノベーション リミテッド | タンパク質のジスルフィド結合形成およびグリコシル化の方法とそれに用いられる試薬 |
WO2005005421A1 (en) | 2003-07-08 | 2005-01-20 | Novartis Ag | Benzenesulfonylamino compounds and pharmaceutical compositions containing these compounds |
CA2559579A1 (en) | 2004-03-19 | 2005-09-29 | The Tapemark Company | Thermoplastic films and methods for making |
EP1730124A4 (en) | 2004-03-26 | 2009-04-01 | Amphora Discovery Corp | Certain compounds based on triazole, compositions and applications thereof |
SE0402635D0 (sv) | 2004-10-29 | 2004-10-29 | Astrazeneca Ab | Chemical compounds |
DE102005011822A1 (de) * | 2005-03-15 | 2006-09-21 | Merck Patent Gmbh | Phthalazinone |
AU2006299087A1 (en) | 2005-10-06 | 2007-04-12 | Sanofi-Aventis | Cyclic N-[1 ,3,4]-thiadiazol-2-yl-benzene sulfonamides, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals |
WO2007106391A1 (en) | 2006-03-10 | 2007-09-20 | Lymphosign Inc. | Compounds for modulating cell proliferation, compositions and methods related thereto |
NZ571182A (en) | 2006-04-04 | 2010-09-30 | Univ California | Pyrazolo[3,4-d]pyrimidines |
WO2008083158A2 (en) | 2006-12-26 | 2008-07-10 | Femmepharma Holding Company, Inc. | Topical administration of danazol |
WO2009129267A2 (en) | 2008-04-14 | 2009-10-22 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Small molecule inhibitors of the pleckstrin homology domain and methods for using same |
WO2010085968A1 (en) * | 2008-12-30 | 2010-08-05 | European Molecular Biology Laboratory (Embl) | Toluidine sulfonamides and their use as hif-inhibitors |
WO2010118063A2 (en) * | 2009-04-06 | 2010-10-14 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutic compositions and related methods of use |
US20120189670A1 (en) * | 2009-09-14 | 2012-07-26 | Kirkpatrick D Lynn | Pharmaceutical compositions and formulations including inhibitors of the pleckstrin homology domain and methods for using same |
MX2013011450A (es) * | 2011-04-05 | 2014-02-03 | Vertex Pharma | Compuestos de aminopirazina utiles como inhibidores de la cinasa ataxia telangiectasia mutada y rad3 relacionados (atr). |
US9340532B2 (en) | 2012-12-14 | 2016-05-17 | Phusis Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for inhibiting CNKSR1 |
-
2013
- 2013-12-16 US US14/649,349 patent/US9340532B2/en active Active
- 2013-12-16 AU AU2013358876A patent/AU2013358876B2/en active Active
- 2013-12-16 EP EP13863280.7A patent/EP2931280B1/en active Active
- 2013-12-16 CA CA2895162A patent/CA2895162C/en active Active
- 2013-12-16 MX MX2015007608A patent/MX2015007608A/es active IP Right Grant
- 2013-12-16 JP JP2015548050A patent/JP6357292B2/ja active Active
- 2013-12-16 WO PCT/US2013/075505 patent/WO2014093988A2/en active Application Filing
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2895162C (en) | 2021-03-09 |
EP2931280B1 (en) | 2018-02-14 |
MX2015007608A (es) | 2016-04-13 |
WO2014093988A2 (en) | 2014-06-19 |
US9340532B2 (en) | 2016-05-17 |
AU2013358876A1 (en) | 2014-06-19 |
EP2931280A2 (en) | 2015-10-21 |
JP2016508969A (ja) | 2016-03-24 |
EP2931280A4 (en) | 2016-06-01 |
WO2014093988A3 (en) | 2014-08-07 |
US20150307482A1 (en) | 2015-10-29 |
CA2895162A1 (en) | 2014-06-19 |
AU2013358876B2 (en) | 2018-05-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Li et al. | Discovery of N 1-(4-((7-cyclopentyl-6-(dimethylcarbamoyl)-7 H-pyrrolo [2, 3-d] pyrimidin-2-yl) amino) phenyl)-N 8-hydroxyoctanediamide as a novel inhibitor targeting cyclin-dependent kinase 4/9 (CDK4/9) and histone deacetlyase1 (HDAC1) against malignant cancer | |
US20240043390A1 (en) | Compositions and methods for treating cancer | |
US20230115366A1 (en) | Compositions and methods for treating cancer | |
TWI631950B (zh) | 藉二氫吡𠯤并吡𠯤治療癌症 | |
ES2677874T3 (es) | Tratamiento del cáncer con inhibidores de la cinasa TOR | |
JP6357292B2 (ja) | Cnksr1を阻害するための方法及び組成物 | |
ES2678250T3 (es) | Tratamiento del cáncer con inhibidores de quinasa TOR | |
US10391092B2 (en) | Methods for treating cancer using dihydropyrazino-pyrazine compound combination therapy | |
JP2018529742A (ja) | Ezh2阻害剤を用いた髄芽腫の処置方法 | |
TWI750539B (zh) | 新穎藥物組成物及其用途 | |
IL297486A (en) | gper-targeted chimeras of protein degradation | |
CA2983260C (en) | Sulfonamide compounds, compositions and methods for inhibiting cnksr1 | |
TW202116301A (zh) | 藥物組合及其用途 | |
EP3064582A1 (en) | RESISTANT MUTANT 90 kDA HEAT SHOCK PROTEIN | |
US20230048888A1 (en) | Use of triazolotriazine derivative in treatment of diseases | |
US20220071955A1 (en) | Methods of Treatment, Prevention and Diagnosis | |
JP2023513016A (ja) | Nek2阻害剤としてのアミノピリミジニルアミノベンゾニトリル誘導体 | |
TW201217341A (en) | Receptor-type kinase modulator and methods of treating polycystic kidney disease |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161214 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20161214 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20171117 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20171205 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20180302 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180507 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180529 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180616 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6357292 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |