JP6163619B1 - 腸内細菌叢のバランスを改善するための組成物及び方法 - Google Patents
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Abstract
Description
[1]ヒト及び/又は動物の腸内細菌叢のバランスを改善するための組成物であって、キチンオリゴ糖及びガラクトオリゴ糖を含有することを特徴とする組成物。
[2]更に、ラフィノース及びラクチュロースを含有する上記[1]記載の組成物。
[3]前記キチンオリゴ糖が天然キチンの分解物の形態で含まれる上記[1]又は[2]記載の組成物。
[4]前記キチンオリゴ糖が、天然キチンの分解物の形態で含まれており、単糖類(N−アセチルグルコサミン)の含有量が固形分当たり30〜50質量%、2糖類(N−アセチルキトビオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、3糖類(N−アセチルキトトリオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、4糖類(N−アセチルキトテトラオース)の含有量が固形分当たり5〜25質量%、5糖類(N−アセチルキトペンタオース)の含有量が固形分当たり1〜26質量%、6糖類(N−アセチルキトヘキサオース)の含有量が固形分当たり0.1〜10質量%であって、全キチンオリゴ糖の含有量が固形分当たり30〜100質量%である上記[1]〜[3]のいずれか1つに記載の組成物。
[5]更に、ゲル化剤及び酸味料を含有し、ゼリー状である上記[1]〜[4]のいずれか1つに記載の組成物。
[6]便通の改善のために用いられる上記[1]〜[5]のいずれか1つに記載の組成物。
[7]キチンオリゴ糖及びガラクトオリゴ糖をヒト及び/又は動物に投与して、前記ヒト及び/又は動物の腸内細菌叢のバランスを改善することを特徴とする方法(医療行為を除く)。
[8]更に、ラフィノース及びラクチュロースを投与する上記[7]記載の方法。
[9]前記キチンオリゴ糖が天然キチンの分解物の形態で含まれる上記[7]又は[8]記載の方法。
[10]前記キチンオリゴ糖が、天然キチンの分解物の形態で含まれており、単糖類(N−アセチルグルコサミン)の含有量が固形分当たり30〜50質量%、2糖類(N−アセチルキトビオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、3糖類(N−アセチルキトトリオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、4糖類(N−アセチルキトテトラオース)の含有量が固形分当たり5〜25質量%、5糖類(N−アセチルキトペンタオース)の含有量が固形分当たり1〜26質量%、6糖類(N−アセチルキトヘキサオース)の含有量が固形分当たり0.1〜10質量%であって、全キチンオリゴ糖の含有量が固形分当たり30〜100質量%である上記[7]〜[9]のいずれか1つに記載の方法。
[11]前記キチンオリゴ糖、前記ガラクトオリゴ糖、前記ラフィノース、及び前記ラクチュロースを、それらを含有し、更に、ゲル化剤及び酸味料を含有するゼリーの形態で投与する上記[7]〜[10]のいずれか1つに記載の方法。
[12]前記ヒト及び/又は動物の便通の改善する上記[7]〜[11]のいずれか1つに記載の方法。
表1に示すオリゴ糖の各配合について、ヒト糞便中の細菌叢に与える影響を調べた。具体的には、培地に各オリゴ糖を添加して糞便を嫌気液体培養し、その培養後の糞便中の細菌叢について16SrRNA配列データを利用した菌叢解析を行った。
ヒト糞便を排便後直ちに嫌気条件下に氷冷し、24時間以内のものを糞便試料として使用した。
培養後、3200rpm、30分間の遠心により沈殿物を回収した。その糞便サンプルからDNA抽出キット「NucleoSpin Soil」(MACHERY-NAGEL社)を使用してゲノムDNAを抽出し、DNA精製キット「AMPure XP」(ベックマン コールター社)を使用して精製処理を実施した。
(94℃,60秒)→「(98℃,10秒)→(50℃,15秒)→(68℃,15秒)」×28サイクル→(4℃,保持)→終了
(94℃,60秒)→「(98℃,10秒)→(50℃,15秒)→(68℃,15秒)」×8サイクル→(4℃,保持)→終了
オリゴ糖の配合ごとに4検体分の上記検体インデックス付16SrRNA増幅産物を混合したうえ、高速シークエンス解析装置「MiSeqシステム」(Illumina社)によるシークエンス解析に供して、それぞれの検体について、およそ90万〜230万リード(250塩基長)分の配列データを取得した。
上記配列データを菌叢解析パイプライン(解析エンジン:QIIME (Caporaso J. G., et al., Nat. Methods(2010) 7:335))に供し、各検体の細菌叢を解析した。
表5に示す配合で、1包あたりの内容量20gのスティック包装入りオリゴ糖含有ゼリーを調製した。
製造例1で調製したスティック包装入りオリゴ糖含有ゼリーを、日頃から便秘や便秘気味であると訴える人に供して、30日間自由に使用してもらい、30日後に便秘の改善の状況についてアンケートを実施した。結果を表6に示す。
製造例1で調製したオリゴ糖含有ゼリーを、40代1人、50代1人、60代2人、70代1人の計5人の人に、1日1包30日間摂取してもらい、摂取前後の糞便を採取して、その糞便中の細菌叢について16SrRNA配列データを利用した菌叢解析を行った。
試験例3で被験者となった40代1人と60代A1人の人には、試験例3の試験終了後にも、日常の生活において製造例1で調製したオリゴ糖含有ゼリーを断続的に摂取してもらい、試験例3の試験終了からおよそ1年後に、更に本試験を行った。
配列番号1:16SrRNA(v3−v4領域)のPCR増幅のためのフォワードプライマー;341Fprimer(5’-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAGCCTACGGGNGGCWGCAG-3’)
配列番号2:16SrRNA(v3−v4領域)のPCR増幅のためのリバースプライマー;806Rprimer(5'-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAGGGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’)
Claims (10)
- ヒト及び/又は動物の腸内細菌叢のバランスを改善するための組成物であって、キチンオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、ラフィノース、及びラクチュロースを含有することを特徴とする組成物。
- 前記キチンオリゴ糖が天然キチンの分解物の形態で含まれる請求項1記載の組成物。
- 前記キチンオリゴ糖が、天然キチンの分解物の形態で含まれており、単糖類(N−アセチルグルコサミン)の含有量が固形分当たり30〜50質量%、2糖類(N−アセチルキトビオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、3糖類(N−アセチルキトトリオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、4糖類(N−アセチルキトテトラオース)の含有量が固形分当たり5〜25質量%、5糖類(N−アセチルキトペンタオース)の含有量が固形分当たり1〜26質量%、6糖類(N−アセチルキトヘキサオース)の含有量が固形分当たり0.1〜10質量%であって、全キチンオリゴ糖の含有量が固形分当たり30〜100質量%である請求項1又は2記載の組成物。
- 更に、ゲル化剤及び酸味料を含有し、ゼリー状である請求項1〜3のいずれか1つに記載の組成物。
- 便通の改善のために用いられる請求項1〜4のいずれか1つに記載の組成物。
- キチンオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、ラフィノース、及びラクチュロースをヒト及び/又は動物に投与して、前記ヒト及び/又は動物の腸内細菌叢のバランスを改善することを特徴とする方法(医療行為を除く)。
- 前記キチンオリゴ糖が天然キチンの分解物の形態で含まれる請求項6記載の方法。
- 前記キチンオリゴ糖が、天然キチンの分解物の形態で含まれており、単糖類(N−アセチルグルコサミン)の含有量が固形分当たり30〜50質量%、2糖類(N−アセチルキトビオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、3糖類(N−アセチルキトトリオース)の含有量が固形分当たり10〜30質量%、4糖類(N−アセチルキトテトラオース)の含有量が固形分当たり5〜25質量%、5糖類(N−アセチルキトペンタオース)の含有量が固形分当たり1〜26質量%、6糖類(N−アセチルキトヘキサオース)の含有量が固形分当たり0.1〜10質量%であって、全キチンオリゴ糖の含有量が固形分当たり30〜100質量%である請求項6又は7記載の方法。
- 前記キチンオリゴ糖、前記ガラクトオリゴ糖、前記ラフィノース、及び前記ラクチュロースを、それらを含有し、更に、ゲル化剤及び酸味料を含有するゼリーの形態で投与する請求項6〜8のいずれか1つに記載の方法。
- 前記ヒト及び/又は動物の便通の改善する請求項6〜9のいずれか1つに記載の方法。
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