JP5881519B2 - 血液分析装置、血液分析方法、及びコンピュータプログラム - Google Patents
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Description
図1は、本実施の形態に係る血液分析装置の外観を示す斜視図である。本実施の形態に係る血液分析装置1は、血液検体に含まれる白血球、赤血球、血小板等を検出し、各血球を計数する多項目血球分析装置である。図1に示すように、血液分析装置1は、測定ユニット2と、測定ユニット2の前面側に配置された検体搬送ユニット4と、測定ユニット2及び検体搬送ユニット4を制御可能な情報処理ユニット5とを備えている。
測定ユニットの構成について説明する。図2は、測定ユニットの構成を示すブロック図である。図2に示すように、測定ユニット2は、検体である血液を検体容器(採血管)Tから吸引する検体吸引部21と、検体吸引部21により吸引した血液から測定に用いられる測定試料を調製する試料調製部22と、試料調製部22により調製された測定試料から血球を検出する検出部23とを有している。また、測定ユニット2は、検体搬送ユニット4のラック搬送部43によって搬送されたサンプルラックLに収容された検体容器Tを測定ユニット2の内部に取り込むための取込口(図1参照)と、サンプルラックLから検体容器Tを測定ユニット2の内部に取り込み、検体吸引部21による吸引位置まで検体容器Tを搬送する検体容器搬送部25とをさらに有している。
R1−R2−(CH2CH2O)n−H (V)
(式中、R1は炭素数9〜25のアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基であり、R2は−O−、−COO−又は
で示されるものが挙げられる。
で示される化合物及びその塩が挙げられる。具体的なサルコシン誘導体としては、N−ラウロイルサルコシン酸ナトリウム、ラウロイルメチルβ−アラニンナトリウム、ラウロイルサルコシンなどが挙げられ、特にN−ラウロイルサルコシン酸ナトリウムが好ましい。
で示される化合物及びその塩が挙げられる。具体的なコール酸誘導体としては、CHAPS(3−[(3−コールアミドプロピル)ジメチルアンモニオ]−1−プロパンスルホネート)、CHAPSO([(3−コールアミドプロピル)ジメチルアンモニオ]−2−ヒドロキシ−1−プロパンスルホネート)などが挙げられる。
で示される化合物が挙げられる。具体的なメチルグルカンアミドとしては、MEGA8(オクタノイル−N−メチルグルカミド)、MEGA9(ノナノイル−N−メチルグルカミド)、MEGA10(デカノイル−N−メチルグルカミド)などが挙げられる。
次に、情報処理ユニット5の構成について説明する。情報処理ユニット5は、コンピュータにより構成されている。図4は、情報処理ユニット5の構成を示すブロック図である。情報処理ユニット5は、コンピュータ5aによって実現される。図4に示すように、コンピュータ5aは、本体51と、画像表示部52と、入力部53とを備えている。本体51は、CPU51a、ROM51b、RAM51c、ハードディスク51d、読出装置51e、入出力インタフェース51f、通信インタフェース51g、及び画像出力インタフェース51hを備えており、CPU51a、ROM51b、RAM51c、ハードディスク51d、読出装置51e、入出力インタフェース51f、通信インタフェース51g、及び画像出力インタフェース51hは、バス51jによって接続されている。
以下、本実施の形態に係る血液分析装置1の動作について説明する。血液分析装置1は、以下に示すような検体分析動作を実行する。図5は、血液分析装置1による検体分析動作の手順を示すフローチャートである。
まず、第1測定工程について説明する。血液分析装置1は、第1測定工程では、全血検体(17μL)と第1試薬(1mL)と第2試薬(20μL)とを混合して第1測定試料を作成し、この第1測定試料を光学検出器Dにてフローサイトメトリー法によって測定する。ここで第1試薬としては、上述のストマトライザー4DLを使用し、第2試薬としては、上述のストマトライザー4DSを用いる。
次に、第1データ処理について説明する。図7は、本実施の形態に係る血液分析装置の第1データ処理の手順を示すフローチャートである。血液分析装置1の情報処理ユニット5は、測定ユニット2から第1測定データを受信する(ステップS151)。CPU51aによって実行されるコンピュータプログラム54aはイベントドリブン型のプログラムであり、第1測定データを受信するイベントが発生すると、ステップS152の処理が呼び出される。
次に、第2測定工程について説明する。この第2測定工程は、第1測定工程と時間的に一部重複して実行される。血液分析装置1は、第2測定工程では、全血検体(17.0μL)と第3試薬(1000μL)と第4試薬(20μL)とを混合して第2測定試料を作成し、この第2測定試料を光学検出器Dにてフローサイトメトリー法によって測定する。
<第3試薬>
MOPS 2.09g/L
ポリオキシエチレン(20)オレイルエーテル 1.25g/L
N−ラウロイルサルコシン酸ナトリウム 0.268g/L
EDTA−2K 0.5g/L
上記各成分を混合しさらにNaOHを添加してpHを7.3に調製した。第3試薬の浸透圧は37mOsm/Kg、電気伝導度は0.745mS/cmであった。
<第4試薬>
NK−321
50mg/L
エチレングリコールに溶解されたNK−321(50mg/L)を第4試薬とした。
次に、第2データ処理について説明する。図10は、本実施の形態に係る血液分析装置の第2データ処理の手順を示すフローチャートである。血液分析装置1の情報処理ユニット5は、測定ユニット2から第1測定データを受信し(ステップS301)、また第2測定データを受信する(ステップS302)。CPU51aによって実行されるコンピュータプログラム54aはイベントドリブン型のプログラムであり、第1測定データ及び第2測定データを受信するイベントが発生すると、ステップS303の処理が呼び出される。
なお、試料調製部22における、血液検体と第1試薬と第2試薬との混合及び血液検体と第3試薬と第4試薬との混合の際のそれぞれの反応温度及び反応時間は、血液検体中の血球の損傷及び染色の状態により適宜設定すればよく、特に制限されない。具体的には、反応温度が高いときは反応時間を短くし、反応温度が低いときは反応時間を長くするように調整することができる。より具体的には、血液検体と試薬の混合は、20℃〜45℃の温度において、3〜40秒間行うことが好ましい。
2 測定ユニット
22 試料調製部
221a,221b,222a,222b,223 試薬容器
23 検出部
231 フローセル
237 半導体レーザ
243 フォトダイオード
246 フォトダイオード
248 アバランシェフォトダイオード
5 情報処理ユニット
5a コンピュータ
51 本体
51a CPU
51b ROM
51c RAM
51d ハードディスク
51h 画像出力インタフェース
52 画像表示部
54a コンピュータプログラム
MC1,MC2 混合チャンバ
H ヒータ
D 光学検出器
R1 分析結果画面
Claims (18)
- 血液検体から第1血液検体と第2血液検体とを分注する分注部と、
前記分注部によって分注された第1血液検体と、核酸を染める第1蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含む第1溶血剤とを混合して第1測定試料を調製し、前記分注部によって分注された第2血液検体と、核酸を染める第2蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含まず他の界面活性剤を含む第2溶血剤とを混合して第2測定試料を調製する試料調製部と、
前記試料調製部によって調製された第1測定試料及び第2測定試料のそれぞれに光を照射する光源と、
前記光源により光が前記第1測定試料に照射されたときに生じる蛍光及び散乱光を受光して、受光された蛍光に関する第1蛍光信号及び受光された散乱光に関する第1散乱光信号を出力し、前記光源により光が前記第2測定試料に照射されたときに生じる蛍光及び散乱光を受光して、受光された蛍光に関する第2蛍光信号及び受光された散乱光に関する第2散乱光信号を出力する受光部と、
前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号、並びに前記第2蛍光信号及び前記第2散乱光信号に基づいて、前記血液検体から異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球を区別して検出する情報処理部と、
前記情報処理部による検出結果に基づく出力を行う出力部と、
を備える、
血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号に基づいて、前記血液検体から、異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球のいずれかである細胞を検出し、前記血液検体から前記細胞を検出した場合に、前記第2蛍光信号及び前記第2散乱光信号に基づいて、前記血液検体から、異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球を区別して検出するように構成されている、
請求項1に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記血液検体から、異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球のいずれかである細胞を検出した場合に、血液検体から第2血液検体を分注し、第2測定試料を調製するように前記分注部及び前記試料調製部を制御するように構成されている、
請求項2に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号に基づいて、前記血液検体に含まれる白血球を複数の種類に分類すると共に、前記血液検体から、異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球のいずれかである細胞を検出するように構成されている、
請求項2又は3に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号に基づき、所定範囲の蛍光強度及び散乱光強度を示す細胞を、異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球のいずれかである細胞として検出するように構成されている、
請求項2乃至4の何れか1項に記載の血液分析装置。 - 前記所定範囲の蛍光強度は、正常リンパ球から得られる蛍光強度よりも大きい、
請求項5に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記所定範囲の蛍光強度及び散乱光強度を示す細胞の数を反映した値を取得し、取得した値と所定の閾値とを比較することにより、前記所定範囲の蛍光強度及び散乱光強度を示す細胞を検出するように構成されている、
請求項5又は6に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第2蛍光信号に基づき、所定範囲の蛍光強度を示す細胞を、異常リンパ球として検出するように構成されている、
請求項2乃至7の何れか1項に記載の血液分析装置。 - 前記所定範囲の蛍光強度は、正常リンパ球から得られる蛍光強度よりも大きい、
請求項8に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記所定範囲の蛍光強度を示す細胞の数を反映した値を取得し、取得した値と所定の閾値とを比較することにより、前記所定範囲の蛍光強度を示す細胞を検出するように構成されている、
請求項8又は9に記載の血液分析装置。 - 前記受光部は、前記光源により光が前記第2測定試料に照射されたときに生じる前方散乱光及び側方散乱光を受光して、受光された前方散乱光に関する前方散乱光信号及び受光された側方散乱光に関する側方散乱光信号を含む前記第2散乱光信号を出力するように構成されており、
前記情報処理部は、前記前方散乱光信号及び前記側方散乱光信号に基づき、所定範囲の前方散乱光強度及び側方散乱光強度を示す細胞を、芽球として検出するように構成されている、
請求項2乃至10の何れか1項に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第2蛍光信号及び前記第2散乱光信号に基づいて、前記血液検体から異常リンパ球及び芽球が検出されなかった場合に、前記血液検体から異型リンパ球を検出するように構成されている、
請求項2乃至11の何れか1項に記載の血液分析装置。 - 血液検体から第1血液検体と第2血液検体とを分注する分注部と、
前記分注部によって分注された第1血液検体と、核酸を染める第1蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含む第1溶血剤とを混合して第1測定試料を調製し、前記分注部によって分注された第2血液検体と、核酸を染める第2蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含まず他の界面活性剤を含む第2溶血剤とを混合して第2測定試料を調製する試料調製部と、
前記試料調製部によって調製された第1測定試料及び第2測定試料のそれぞれに光を照射する光源と、
前記光源により光が前記第1測定試料に照射されたときに生じる蛍光及び散乱光を受光して、受光された蛍光に関する第1蛍光信号及び受光された散乱光に関する第1散乱光信号を出力し、前記光源により光が前記第2測定試料に照射されたときに生じる蛍光及び散乱光を受光して、受光された蛍光に関する第2蛍光信号及び受光された散乱光に関する第2散乱光信号を出力する受光部と、
前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号、並びに前記第2蛍光信号及び前記第2散乱光信号に基づいて、前記血液検体から反応性の異常単核球及び腫瘍性の異常単核球を区別して検出する情報処理部と、
前記情報処理部による検出結果に基づく出力を行う出力部と、
を備える、
血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号に基づいて、前記血液検体から異常単核球を検出し、前記血液検体から前記異常単核球を検出した場合に、前記第2蛍光信号及び前記第2散乱光信号に基づいて、前記血液検体から反応性の異常単核球及び腫瘍性の異常単核球を区別して検出するように構成されている、
請求項13に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号に基づいて、前記血液検体に含まれる白血球を複数の種類に分類すると共に、前記血液検体から異常単核球を検出するように構成されている、
請求項14に記載の血液分析装置。 - 前記情報処理部は、前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号に基づき、所定範囲の蛍光強度及び散乱光強度を示す細胞を、異常単核球として検出するように構成されている、
請求項14又は15に記載の血液分析装置。 - 血液検体から第1血液検体と第2血液検体とを分注するステップと、
分注された第1血液検体と、核酸を染める第1蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含む第1溶血剤とを混合して第1測定試料を調製するステップと、
調製された第1測定試料に光を照射するステップと、
光が前記第1測定試料に照射されたときに生じる蛍光及び散乱光を受光して、受光された蛍光に関する第1蛍光信号及び受光された散乱光に関する第1散乱光信号を取得するステップと、
分注された第2血液検体と、核酸を染める第2蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含まず他の界面活性剤を含む第2溶血剤とを混合して第2測定試料を調製するステップと、
調製された第2測定試料に光を照射するステップと、
光が前記第2測定試料に照射されたときに生じる蛍光及び散乱光を受光して、受光された蛍光に関する第2蛍光信号及び受光された散乱光に関する第2散乱光信号を取得するステップと、
前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号並びに前記第2蛍光信号及び前記第2散乱光信号に基づいて、前記血液検体から異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球を区別して検出するステップと、
検出結果に基づく出力を行うステップと、
を有する、
血液分析方法。 - 通信部と、出力部とを備えるコンピュータに、
血液検体から分注された第1血液検体と、核酸を染める第1蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含む第1溶血剤とを混合して調製された第1測定試料に光を照射したときに生じる蛍光及び散乱光に関する第1蛍光信号及び第1散乱光信号を、前記通信部に受信させるステップと、
血液検体から分注された第2血液検体と、核酸を染める第2蛍光色素と、カチオン性界面活性剤を含まず他の界面活性剤を含む第2溶血剤とを混合して調製された第2測定試料に光を照射したときに生じる蛍光及び散乱光に関する第2蛍光信号及び第2散乱光信号を、前記通信部に受信させるステップと、
前記通信部により受信された前記第1蛍光信号及び前記第1散乱光信号、並びに前記第2蛍光信号及び前記第2散乱光信号に基づいて、前記血液検体から異型リンパ球、異常リンパ球、及び芽球を区別して検出するステップと、
検出結果に基づく情報を、前記出力部に出力させるステップと、
を実行させるためのコンピュータプログラム。
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