JP5670858B2

JP5670858B2 - Glycerophosphoinositol derivatives as modulators of cytosolic phospholipases

Info

Publication number: JP5670858B2
Application number: JP2011226740A
Authority: JP
Inventors: コルダ，ダニエラ; ダル　トソ，ロベルト; トソ，ロベルトダル; ボンベント，ジョバンナ; マルコロンゴ，ガブリエレ; ダル　モンテ　レンツォ; モンテレンツォダル
Original assignee: イ．エルレ．ビ．イスティトゥトディリチェルケビオテクノロジケソチエタペルアツィオニ
Priority date: 2011-10-14
Filing date: 2011-10-14
Publication date: 2015-02-18
Anticipated expiration: 2020-11-07
Also published as: JP2012041357A

Description

本発明は、アラキドン酸の放出を抑制するための治療用薬剤の製造のためにグリセロホスホイノシトールを使用すること、グリセロホスホイノシトール構造を有する新規な誘導体およびその製造方法に関する。ホスホリパーゼは、膜のリン脂質の加水分解を触媒し、含まれる化学結合のタイプに従って、ホスホリパーゼA1、A2、B、C、Dに分類される酵素である。 The present invention relates to the use of glycerophosphoinositol for the manufacture of a therapeutic agent for inhibiting the release of arachidonic acid, a novel derivative having a glycerophosphoinositol structure and a process for producing the same. Phospholipase is an enzyme that catalyzes the hydrolysis of membrane phospholipids and is classified into phospholipases A1, A2, B, C, D according to the type of chemical bonds involved.

哺乳動物においては、リン脂質のsn2エステル結合からのアラキドン酸の動態化は、サイトゾルのホスホリパーゼA2(cPLA2)の活性化、次いで多数の作用物質（ホルモン、神経伝達物質、ニューロペプチドおよび成長因子を含む）により誘発される受容体の活性化によるところが大きい。 In mammals, arachidonic acid mobilization from the phospholipid sn2 ester bond activates cytosolic phospholipase A2 (cPLA2), followed by numerous agents (hormones, neurotransmitters, neuropeptides and growth factors). It is largely due to receptor activation induced by

作用物質-受容体相互作用によるPLA2の活性化のメカニズムについて考えると、G-タンパク質が、２つの別個のメカニズムによって、受容体が誘発する活性化を仲介すると提案されてきた：(i) PLA2との直接相互作用（百日咳毒素での処理はその酵素活性を低下させることがよく知られているので）；または(ii) ホスホリパーゼC(PLC)活性化、リン酸化およびマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ(MAPK)によるPLA2の活性化によって間接的に仲介される。 Considering the mechanism of PLA2 activation by agonist-receptor interactions, it has been proposed that G-proteins mediate receptor-induced activation by two distinct mechanisms: (i) PLA2 and Direct interaction (since treatment with pertussis toxin is well known to reduce its enzymatic activity); or (ii) phospholipase C (PLC) activation, phosphorylation and mitogen activated protein kinase (MAPK) Is indirectly mediated by activation of PLA2.

ホスホリパーゼA2の２つのイソ型が哺乳動物において同定されており、それは、14kDaの分泌性形態および85kDaのサイトゾル形態(cPLA2)であり、これらは、アミノ酸配列の相同性を分かたず、触媒および調節のメカニズムが異なる。サイトゾルのホスホリパーゼA2は、休止細胞、例えば血小板および白血球のサイトゾル中にある：リポ多糖、トロンビンまたはサイトカイン（例えばインターロイキン1β）、腫瘍壊死因子α、しかしまた、ニューロペプチド、例えばタキキニン、ブラジキニンまたは、神経伝達物質、例えばプリン、特にATPおよび、セロトニン、アドレナリンおよびムスカリン作用物質は、酵素を活性化し、細胞内カルシウム濃度の増加および、タンパク質キナーゼCによる酵素の急速なリン酸化ならびに、引き続いて、それがリン脂質基質に結合する原形質膜への移動をもたらす。これらの仲介物はまた、酵素の新たな合成を引き起こす（E.アルマンディ-ブルゲルマイスター(Armandi-Burgermeister)、U.タイブズ(Tibes)、B.M.カイザー(Kaiser)、W.G.フリーベ(Friebe)、W.V.ショイアー(Sheuer)、「サイトゾルのホスホリパーゼA2の阻害剤による、サイトカイン合成の抑制、インテグリン発現およびコニック炎症(Suppression of Cytockine synthesis, integrin expression and chonic inflammation by inhibitors of cytosolic phospholipase A2)」、Europ. J. Pharmacol.、326(1997)、237-250）。 Two isoforms of phospholipase A2 have been identified in mammals, a secreted form of 14 kDa and a cytosolic form of 85 kDa (cPLA2), which do not share amino acid sequence homology, catalysis and regulation The mechanism of is different. Cytosolic phospholipase A2 is found in the cytosol of resting cells, such as platelets and leukocytes: lipopolysaccharide, thrombin or cytokines (eg interleukin 1β), tumor necrosis factor α, but also neuropeptides such as tachykinin, bradykinin or Neurotransmitters such as purines, especially ATP and serotonin, adrenaline and muscarinic agents, activate the enzyme, increase intracellular calcium concentration and rapidly phosphorylate the enzyme by protein kinase C and subsequently Results in translocation to the plasma membrane that binds to the phospholipid substrate. These mediators also cause new synthesis of enzymes (E. Armandi-Burgermeister, U. Tibes, BM Kaiser, WG Friebe, WV Shorer) (Sheuer), “Suppression of Cytockine synthesis, integrin expression and chonic inflammation by inhibitors of cytosolic phospholipase A2”, inhibitors of cytosolic phospholipase A2, Europ. J. Pharmacol. ., 326 (1997), 237-250).

Gタンパク質、PKC、cPLA2系の緊密な相互変調および、脂質およびリゾ脂質(lysolipid)の仲介物の製造におけるcPLA2の関与（細胞内シグナリングにおけるグリセロホスホイノシトール-4-ホスフェート(Glycerophosphoinositol-4-phosphate in intracellular signaling)、C.P.ベリー(Berrie)、M.ファラスカ(Falasca)、A.カルベリ(Carvelli)、C.イウリシ(Iurisci)およびD.コルダ(Corda)、生物影響性脂質(Bioactive Lipids)、バンデルボック(Vanderbock)YY/編、プレナムパブリシングコーポレーション(Plenum Publisching Corporation)、ニューヨーク、1998年）は、PLA2を潜在的に重要な薬理学的標的にする。 Close intermodulation of G protein, PKC, cPLA2 system and involvement of cPLA2 in the production of lipid and lysolipid mediators (Glycerophosphoinositol-4-phosphate in intracellular signaling, CP, Berrie, M. Falasca, A. Carvelli, C. Iurisci and D. Corda, Bioactive Lipids, Vanderbock ) YY / ed., Plenum Publisching Corporation, New York, 1998) makes PLA2 a potentially important pharmacological target.

本出願人はここで、アラキドン酸の放出に付随して生じる物質、すなわちL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトール(GPI)がオータコイドであり、さらには、そのカリウム塩、カルシウム塩および亜鉛塩および他の新規な誘導体ならびに化学的な半合成によって得られ、後に記載する一般式(I)を有する類似体が、PLA2のインビトロ(in vitro)での活性化の調節によってアラキドン酸の放出に潜在的抑制効果を及ぼし、以下に記載するPLA2の活性化によって仲介される病変の治療のために有効に使用できることを独創的に見出した。 The applicant here is that the substance that accompanies the release of arachidonic acid, i.e. L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol (GPI), is an otachoid, and also its potassium, calcium and Zinc salts and other novel derivatives and analogs obtained by chemical semi-synthesis and having the general formula (I) described later have been shown to be able to produce arachidonic acid by modulating the in vitro activation of PLA2. It has been uniquely found that it has a potential inhibitory effect on release and can be used effectively for the treatment of lesions mediated by PLA2 activation as described below.

本発明の目的は、2、3、4、5、6または1’および2’位が任意的にO-置換された、グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールの誘導体および類似体であり、以下の一般式：

によることを特徴とし、ここで、R’1、R’2、R2、R3、R4、R5、R6は、互いに同じまたは異なり、HまたはC(O)AまたはBであることができ、ここで、A、B、X、YおよびMの意味は、以下に詳述する。 The object of the present invention is derivatives and analogues of glycero-phospho-D-myo-inositol, optionally O-substituted at the 2, 3, 4, 5, 6 or 1 ′ and 2 ′ positions, General formula of:

Where R′1, R′2, R2, R3, R4, R5, R6 are the same or different from each other and can be H or C (O) A or B, where The meanings of A, B, X, Y and M are described in detail below.

本発明はまた、L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトール(GPI)およびその塩、特に式(I)に従う新規な誘導体とのアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属塩、特にカルシウムおよび亜鉛塩を、PLA2の活性化または過剰活性化(over activation)により仲介される病変の治療のための薬剤の製造のために使用することに関する。 The present invention also relates to L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol (GPI) and its salts, in particular alkali metal or alkaline earth metal salts with novel derivatives according to formula (I), in particular calcium and zinc salts For the manufacture of a medicament for the treatment of lesions mediated by PLA2 activation or over activation.

本発明はさらに、PLA2の活性化または過剰刺激により仲介される病変、特に敗血症性ショックおよび、ウィルスおよび細菌性の感染、呼吸器の病変、例えば急性肺損傷（新生児の病変を含む）、慢性閉塞性気管支病（喘息を含む）；皮膚科の病変、例えば乾癬、脂漏性皮膚炎、アトピー性皮膚炎および、より一般的には、皮膚の不反応性(dis-reactivity)（また、UV損傷後の酸化的ストレスを含む）；また細菌感染による歯肉組織への損傷；腸虚血；関節の病変、例えば関節炎および関節症（慢性関節リウマチを含む）；眼科の病変、頭痛、血管再造形に関連する心臓血管の病変、腎臓の病変および、特定の受容体および成長因子、例えばEGF、NGFの活性化またはタキキニン、たとえばNK受容体の活性化またはプリン（例えばATP）、例えばP2Yの活性化またはニューロペプチド、例えばボンベシンまたはPLA2を活性化するGタンパク質と結合した他の受容体の活性化によって仲介されるPLA2酵素の過剰刺激に関連する任意の病変；腫瘍の病変、例えば前立腺および腎臓の癌、またはともかくPLA2の活性化に依存する痛みおよび痛覚異常(iperalgesia)、中枢神経系および末梢神経系の病変および、スフィンゴミエリンサイクルに依存する病変（遺伝形態、例えばヘルマンスキー-パドラック症候群およびニーマン-ピック症候群を含む）；血管と神経系との間の関門、例えば神経および血液脳関門の神経周膜に対する損傷に関連する病変、例えばニューロン浮腫、発作、大脳浮腫および出血、TIA（一過性脳虚血）；アルツハイマー病または行動疾患、例えば精神***病；非代謝性病変、例えば糖尿病；膵臓炎、食物摂取疾患に関連する病変、例えば過食症、食欲不振、悪液質(cachessia)、肥満、うつ病の治療のための適当な賦形剤と関連して、活性成分として少なくとも１種の式(I)の誘導体を含む薬剤組成物に関する。 The present invention further provides lesions mediated by PLA2 activation or overstimulation, particularly septic shock and viral and bacterial infections, respiratory lesions such as acute lung injury (including neonatal lesions), chronic obstruction Bronchial disease (including asthma); dermatological lesions such as psoriasis, seborrheic dermatitis, atopic dermatitis, and more commonly skin dis-reactivity (also UV damage) Later oxidative stress); also damage to gingival tissue due to bacterial infection; intestinal ischemia; joint lesions such as arthritis and arthropathy (including rheumatoid arthritis); ophthalmic lesions, headache, vascular remodeling Associated cardiovascular lesions, kidney lesions and activation of specific receptors and growth factors such as EGF, NGF or tachykinins such as NK receptors or purines (such as ATP) such as P2Y Is any lesion associated with hyperstimulation of PLA2 enzyme mediated by activation of neuropeptides such as bombesin or other receptors coupled with G protein that activates PLA2; tumor lesions such as prostate and kidney cancer Pain and ipalgesia dependent on PLA2 activation, or anyway, lesions of the central and peripheral nervous system, and lesions dependent on the sphingomyelin cycle (genetic forms such as Hermannsky-Padlac syndrome and Niemann-Pick Including lesions); lesions associated with damage to the peripheries of the barrier between the blood vessels and the nervous system, such as the nerve and blood brain barrier, such as neuronal edema, stroke, cerebral edema and hemorrhage, TIA (transient cerebral imagination) Blood); Alzheimer's disease or behavioral disease such as schizophrenia; non-metabolic lesions such as diabetes; pancreatitis, In connection with suitable excipients for the treatment of lesions associated with food intake diseases such as bulimia, anorexia, cachessia, obesity, depression (at least one formula ( It relates to a pharmaceutical composition comprising the derivative of I).

その後のアラキドン酸およびその代謝産物の放出の抑制を伴う、ホスホリパーゼA2、特にそのサイトゾルのイソ型(cPLA2)の過剰刺激を負に調節することができる剤としての、式(I)に従うグリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールの誘導体および類似体の特徴および利点は、以下の部分で詳細に説明される。 Glycero-according to formula (I) as an agent that can negatively regulate overstimulation of phospholipase A2, particularly its cytosolic isoform (cPLA2), with subsequent inhibition of the release of arachidonic acid and its metabolites The features and advantages of derivatives and analogs of phospho-D-myo-inositol are described in detail in the following sections.

本発明は、一般式(I)

に従う化合物、その鏡像体、ジアステレオマー、ラセミ体、その混合物、その水和物又は溶媒和物に関し、ここで、 The present invention relates to general formula (I)

With respect to the compound according to, its enantiomers, diastereomers, racemates, mixtures thereof, hydrates or solvates thereof,

I) R’、R2’、R2、R3、R4、R5、R6は互いに同じかまたは異なることができ、 I) R ', R2', R2, R3, R4, R5, R6 can be the same or different from each other;

a) Hまたは
基C(O)A、モノカルボン酸のアシル残基またはジカルボン酸のヘミアシル残基であり、ここでAは、飽和もしくは１〜４個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であることができ；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、-COOHの中から選択される１個以上の基で置換されていることができ、これらの-COOHは、任意的に中和されて、-COOM塩を形成する（Mはポイント(II)で記載したのと同じ意味を有する）か；または a) H or a group C (O) A, an acyl residue of a monocarboxylic acid or a hemiacyl residue of a dicarboxylic acid, wherein A is a saturated or unsaturated straight chain having 1 to 4 double bonds. Can be a chain or branched alkyl group, or a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group, or an aryl, arylalkyl or heterocyclic group having one or more heteroatoms; these groups are optionally , Keto, hydroxy, acylamide, halogen, mercapto, alkylthio or alkyldithio, can be substituted with one or more groups selected from -COOH, these -COOH being optionally neutralized Form a -COOM salt (M has the same meaning as described for point (II)); or

- 基Bであり、ここでBは、飽和もしくは１〜６個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基；または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アルキルアリールもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であり；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、-COOHの中から選択される１個以上の基で置換されており、これらの-COOHは、任意的に中和されて、-COOM塩を形成する（Mはポイント(II)で記載したのと同じ意味を有する）； The group B, where B is a saturated or unsaturated, linear or branched alkyl group having 1 to 6 double bonds; or a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group or aryl , alkylaryl or heterocyclic group having one or more heteroatoms; these groups optionally are selected keto, hydroxy, acylamido, halogen, mercapto, alkylthio or alkyldithio, from among -COOH Substituted with one or more groups, these -COOH are optionally neutralized to form -COOM salts (M has the same meaning as described for point (II));

(II) Mは、薬理学的に許容できる無機元素のカチオンであるか、または価数n+を有する薬理学的に許容できる有機塩基のカチオンである（ここでnは、以下のポイント(III)で記載した意味を有する）； (II) M is a pharmacologically acceptable cation of an inorganic element or a pharmacologically acceptable cation of an organic base having the valence n + (where n is the following point (III) Has the meaning described in the above);

(III) nは、１または２または３に等しい； (III) n is equal to 1 or 2 or 3;

(IV) XおよびYは互いに同じかまたは異なり、OまたはSであり；
ここで、YがSであるとき、式(I)の化合物はまた、それぞれの非中和化合物を包含する。
より詳細には：
Aの説明：
i) Aがアルキル基であるとき、好ましくは飽和であるかまたは１不飽和であり、好ましくは１〜８個の炭素原子、好ましくは２〜６個の炭素原子を有する。 (IV) X and Y are the same or different from each other and are O or S;
Here, when Y is S, the compounds of formula (I) also include the respective non-neutralized compounds.
More details:
A description :
i) When A is an alkyl group, it is preferably saturated or monounsaturated and preferably has 1 to 8 carbon atoms, preferably 2 to 6 carbon atoms.

ii) Aが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、好ましくは５〜30個の炭素原子、より好ましくは６〜24個の炭素原子を有する。 ii) When A is a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group , it preferably has 5 to 30 carbon atoms, more preferably 6 to 24 carbon atoms.

Aがアリール、アルキルアリールもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、好ましくは４〜15個の炭素原子、より好ましくは４〜８個の炭素原子を有する。ヘテロ原子は、１〜５個、好ましくは１〜３個である。ヘテロ原子は、N、OまたはSであり、好ましくはNである。これらのヘテロ原子Nは任意的に中和されて、薬理学的に許容できる有機酸もしくは無機酸との塩を形成することができる。 When A is aryl, alkylaryl or a heterocyclic group having one or more heteroatoms, it preferably has 4 to 15 carbon atoms, more preferably 4 to 8 carbon atoms. The number of heteroatoms is 1-5, preferably 1-3. The heteroatom is N, O or S, preferably N. These heteroatoms N can optionally be neutralized to form salts with pharmacologically acceptable organic or inorganic acids.

Bの説明：
i) Bがアルキルであるとき、好ましくは飽和であるかまたは１不飽和である。好ましくは１〜８個の炭素原子、より好ましくは２〜６個の炭素原子を有する。 B description :
i) When B is alkyl, it is preferably saturated or monounsaturated. Preferably it has 1 to 8 carbon atoms, more preferably 2 to 6 carbon atoms.

ii) Bが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、好ましくは５〜30個の炭素原子、より好ましくは６〜24個の炭素原子を有する。 ii) When B is a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group , it preferably has 5 to 30 carbon atoms, more preferably 6 to 24 carbon atoms.

Bがアリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、好ましくは５〜15個の炭素原子、より好ましくは５〜８個の炭素原子を有する。ヘテロ原子は、好ましくは１〜５個、より好ましくは１〜３個である。ヘテロ原子は、N、OまたはSであり、好ましくはNである。これらのヘテロ原子Nは任意的に中和されて、薬理学的に許容できる有機酸もしくは無機酸との塩を形成することができる。 When B is aryl, arylalkyl or a heterocyclic group having one or more heteroatoms, it preferably has 5 to 15 carbon atoms, more preferably 5 to 8 carbon atoms. The number of heteroatoms is preferably 1 to 5, more preferably 1 to 3. The heteroatom is N, O or S, preferably N. These heteroatoms N can optionally be neutralized to form salts with pharmacologically acceptable organic or inorganic acids.

Mの説明：
i) Mが薬理学的に許容できる無機元素のカチオンであるとき、好ましくは、ナトリウム、リチウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、鉄、セレン、クロム、銅の中から選択される。 M description :
i) When M is a pharmacologically acceptable cation of an inorganic element, it is preferably selected from sodium, lithium, potassium, magnesium, calcium, zinc, iron, selenium, chromium and copper.

ii) Mが薬理学的に許容できる有機塩基のカチオンであるとき、好ましくはモノ-、ジ-、トリ-もしくはテトラ-アルキルアンモニウム、より好ましくはN-(2-ヒドロキシエチル)-ジメチルアンモニウム、コリンもしくはアミノ酸、好ましくはリシンもしくはアルギニンのカチオンまたは、モノ-、ジ-、トリ-もしくはテトラ-ペプチドのカチオン、好ましくはカルノシンまたは、キサンチン塩基のカチオン、好ましくはカフェインである。 ii) when M is a cation of a pharmaceutically acceptable organic base, preferably mono-, di-, tri- or tetra-alkylammonium, more preferably N- (2-hydroxyethyl) -dimethylammonium, choline Or a cation of an amino acid, preferably lysine or arginine, or a cation of mono-, di-, tri- or tetra-peptide, preferably carnosine or a cation of xanthine base, preferably caffeine.

アシルアミノという語は、好ましくはアセチルアミノ基を意味する。 The term acylamino preferably means an acetylamino group.

アルコキシという語は、好ましくはメトキシ-、エトキシ-またはアリルオキシ基を意味する。
ハロゲンという語は、好ましくは塩化物、フッ化物、臭化物またはヨウ化物を意味する。 The term alkoxy preferably denotes a methoxy-, ethoxy- or allyloxy group.
The term halogen preferably means chloride, fluoride, bromide or iodide.

アリールアルキル基という語は、好ましくはC7〜C9-アリールアルキル基、より好ましくはベンジル基を意味する。
アリール基という語は、好ましくはC6〜C12-アリール、好ましくはフェニルを意味する。 The term arylalkyl group preferably means a C7-C9-arylalkyl group, more preferably a benzyl group.
The term aryl group preferably means C6-C12-aryl, preferably phenyl.

複素環式基という語は好ましくは、５-または６員環の、飽和、不飽和もしくは芳香族の複素環式基を意味する。
シクロアルキルまたはシクロアルキレン基という語は好ましくは、好ましくは５〜30個の炭素原子、より好ましくは６〜24個の炭素原子を有する単環もしくは多環を意味する。 The term heterocyclic group preferably means a 5- or 6-membered, saturated, unsaturated or aromatic heterocyclic group.
The term cycloalkyl or cycloalkylene group preferably means a monocyclic or polycyclic ring having preferably 5 to 30 carbon atoms, more preferably 6 to 24 carbon atoms.

XおよびYは互いに同じかまたは異なり、OまたはSであり、好ましくは互いに同じであり、好ましくはOに等しい。 X and Y are the same or different from each other and are O or S, preferably the same as each other, preferably equal to O.

本発明のさらなる目的は、式(I)の化合物および関連する非塩化生成物を、cPLA2の活性化もしくは過剰刺激によって仲介される病変、特に先に挙げた病変に関しての治療のために使用することである。 A further object of the present invention is the use of compounds of formula (I) and related non-chlorinated products for the treatment of lesions mediated by cPLA2 activation or overstimulation, in particular the previously mentioned lesions. It is.

本発明の化合物の製造
本発明の化合物の製造は、好ましくは（これに限定されることはないが）、L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトール(GPI)から出発して行われる；硫黄原子を含むGPIの同族体、グリセロホスホチオイノシトールは、以下の実施例に記載された方法に従って、市販の入手可能な中間体から出発して製造されるか、または文献に報告された簡単な方法に従って製造される。GPIは、カリウム塩の形態で市販の製品として入手可能な公知の物質である。室温で水性溶液のGPIは、中性付近のpH値でのみ安定である。異なるpH値では、分子は加水分解反応に供され、分解する。本明細書に記載された、GPIの新規な塩の以下の製造方法は、GPIの構造の安定性を維持するのに有効であると示された。 Preparation of the compounds of the invention The preparation of the compounds of the invention is preferably carried out starting with (but not limited to) L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol (GPI). A homologue of GPI containing a sulfur atom, glycerophosphothioinositol, can be prepared starting from commercially available intermediates according to the methods described in the examples below or as reported in the literature Manufactured according to various methods. GPI is a known substance available as a commercial product in the form of potassium salt. At room temperature, the GPI of an aqueous solution is stable only at near neutral pH values. At different pH values, the molecule is subjected to a hydrolysis reaction and decomposes. The following method for preparing a novel salt of GPI described herein has been shown to be effective in maintaining the structural stability of GPI.

本明細書に記載された以下の新規なGPIの塩は、主としてカリウム塩から出発して製造されたが、それにもかかわらず、本明細書に記載された以下の方法は、工業的な機会に必要とされる場合にはいつでも異なる塩から出発する任意の新規な誘導体の製造のために適当である。 The following novel GPI salts described herein were prepared primarily starting from potassium salts, but nevertheless the following methods described herein are for industrial opportunities. It is suitable for the preparation of any novel derivatives starting from different salts whenever required.

新規なL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトール塩(GPI)の一般的製造方法
方法I
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトール(GPI)の無機塩および有機塩の一般的製造方法は、米国特許第5,306,840号に従い、簡単には以下のとおりである：水または、水と有機溶媒との混合物中に出発塩を可溶化させること、次いで、４℃の温度でH+形態として生じるカチオン交換樹脂のカラムに施用すること。溶出するGPI酸形態の溶液を集め、０〜４℃に保持した後、生物学的に許容できる有機もしくは無機のカチオンの塩基でモル対モル中和して、関連する塩を与える。この溶液は、次の処方の操作のためのものとして使用することができるかまたは、凍結乾燥もしくはスプレードライヤーにより減圧下で乾燥して、純粋で乾燥したGPIの塩を固体として得ることができる。 General method for the preparation of novel L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol salt (GPI) Method I
A general method for preparing inorganic and organic salts of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol (GPI), according to US Pat. No. 5,306,840, is simply as follows: water or water and Solubilizing the starting salt in a mixture with an organic solvent and then applying it to a column of cation exchange resin which occurs in the H + form at a temperature of 4 ° C. The eluting GPI acid form solution is collected and held at 0-4 ° C. and then molar to molar neutralization with a biologically acceptable organic or inorganic cation base to give the relevant salt. This solution can be used for subsequent formulation operations or can be dried under reduced pressure by lyophilization or spray dryer to give pure and dry salt of GPI as a solid.

L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトール(GPI)の-OH基のアルキルもしくはアシル誘導体の一般的製造方法は、一般に米国特許第5,306,840号に従い製造されたGPI塩、一般にカリウム塩もしくは４級アンモニウム、好ましくはtert-ブチルアンモニウムとの塩から出発して、純有機溶媒または有機溶媒の混合物または有機溶媒と水との混合物中で、10〜500mg/ml、好ましくは50〜200mg/mlの濃度にて行われる。有機溶媒の中で、以下のものが好ましい：アセトン、2-ブタノン、メチルイソブチルケトン、ジメチルスルホキシド、スルホラン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセチルアミド、n-メチル-2-ピロリドン、ピリジン、テトラヒドロフラン、メチルテトラヒドロフラン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、tert-ブチルメチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、1,1,1-トリクロロエタン、メタノール、エタノール、2-プロパノール、ブタノール。反応は、-30℃〜＋120℃、好ましくは＋５〜＋40℃の温度で、15分間〜48時間、好ましくは１時間〜15時間かけて行われる。 A general method for preparing alkyl or acyl derivatives of the -OH group of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol (GPI) is generally the GPI salt prepared according to US Pat. No. 5,306,840, generally potassium salt or 4 Starting from a salt with a quaternary ammonium, preferably tert-butylammonium, in a pure organic solvent or a mixture of organic solvents or a mixture of organic solvent and water, 10 to 500 mg / ml, preferably 50 to 200 mg / ml Done in concentration. Of the organic solvents, the following are preferred: acetone, 2-butanone, methyl isobutyl ketone, dimethyl sulfoxide, sulfolane, dimethylformamide, dimethylacetylamide, n-methyl-2-pyrrolidone, pyridine, tetrahydrofuran, methyltetrahydrofuran, acetonitrile , Dimethoxyethane, diethyl ether, tert-butyl methyl ether, ethyl acetate, chloroform, dichloromethane, 1,1,1-trichloroethane, methanol, ethanol, 2-propanol, butanol. The reaction is carried out at a temperature of −30 ° C. to + 120 ° C., preferably +5 to + 40 ° C., for 15 minutes to 48 hours, preferably 1 hour to 15 hours.

詳細な説明のポイントIで定義した、-C(O)A基、モノカルボン酸のアシル基またはジカルボン酸のヘミアシル基を挿入するために、PGIは、上記酸の活性化した誘導体、好ましくは塩化物、臭化物、混合無水物、環状無水物、活性化したエステル、例えばp-ニトロフェニルエステル、スクシンイミジルエステル、アシルイミダゾール、O-アシルイソ尿素と、好ましくは（限定されないが）有機もしくは無機塩基の存在下で反応する。これらの塩基は好ましくは、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属、好ましくはリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カリウムの炭酸塩、重炭酸塩、酸化物、水酸化物、水素化物およびアルコラート、またはトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、テトラメチルアンモニウムヒドロキシド、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド、ピリジンまたはピコリンである。 In order to insert the -C (O) A group, monocarboxylic acid acyl group or dicarboxylic acid hemiacyl group as defined in point I of the detailed description, PGI is an activated derivative of the above acid, preferably chloride. Products, bromides, mixed anhydrides, cyclic anhydrides, activated esters such as p-nitrophenyl esters, succinimidyl esters, acyl imidazoles, O-acylisoureas and preferably (but not limited to) organic or inorganic bases Reacts in the presence. These bases are preferably alkali metals or alkaline earth metals, preferably lithium, sodium, potassium, magnesium, potassium carbonate, bicarbonate, oxide, hydroxide, hydride and alcoholate, or trimethylamine, triethylamine , Tributylamine, tetramethylammonium hydroxide, tetrabutylammonium hydroxide, pyridine or picoline.

詳細な説明のポイントIで定義したB基を挿入するために、GPIは、式Z-B[ここで、Zはハロゲン（好ましくは塩化物、臭化物もしくはヨウ化物である）またはアルキルスルホネート基、好ましくはメタンスルホネート、ベンゼンスルホネート、p-トルエンスルホネートまたはトリフルオロメタンスルホネートである]の活性化された誘導体と反応する。GPIとZ-Bとの反応は、好ましくは（限定されないが）無機もしくは有機塩基の存在下で行われる。これらの塩基は好ましくは、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属、好ましくはリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カリウムの炭酸塩、重炭酸塩、酸化物、水酸化物、ヨウ化物およびアルコラート、またはトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、テトラメチルアンモニウムヒドロキシド、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド、ピリジンまたはピコリンである。 In order to insert the B group defined in point I of the detailed description, the GPI has the formula ZB, where Z is a halogen (preferably chloride, bromide or iodide) or an alkyl sulfonate group, preferably methane. It reacts with an activated derivative of sulfonate, benzenesulfonate, p-toluenesulfonate or trifluoromethanesulfonate. The reaction between GPI and Z-B is preferably carried out in the presence of (but not limited to) an inorganic or organic base. These bases are preferably alkali metals or alkaline earth metals, preferably lithium, sodium, potassium, magnesium, potassium carbonate, bicarbonate, oxide, hydroxide, iodide and alcoholate, or trimethylamine, triethylamine , Tributylamine, tetramethylammonium hydroxide, tetrabutylammonium hydroxide, pyridine or picoline.

同様のやり方で、S原子を含むGPIの同族体：グリセロホスホチオイノシトールのアルキルまたはアシル誘導体が製造される。 In a similar manner, homologs of GPI containing the S atom: alkyl or acyl derivatives of glycerophosphothioinositol are prepared.

実施例１
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのマグネシウム塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃で集め、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃に冷却し、窒素流を流し、0.292gの水酸化マグネシウムで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 Example 1
Production of magnesium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is collected at 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml of distilled water, the eluate is cooled to 4 ° C., a stream of nitrogen is passed and neutralized with 0.292 g of magnesium hydroxide. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は98％である。
生成物であるL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのマグネシウム塩の化学的-物理的特性は： The reaction yield is 98%.
The chemical-physical properties of the magnesium salt of the product L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol are:

概観：白色粉末
分子式： (C₉H₁₈O₁₁P)₂Mg
分子量： 690.71
元素分析： C=31.3%；H=5.25%；O=50.96%；P=8.97％、Mg=3.52％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのガラスに施用した； Overview: White powder molecular formula: (C ₉ H ₁₈ O ₁₁ P) ₂ Mg
Molecular weight: 690.71
Elemental analysis: C = 31.3%; H = 5.25%; O = 50.96%; P = 8.97%, Mg = 3.52%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel glass;

展開溶媒Aクロロホルム／メタノール／水 3：3：1
展開溶媒Bアセトニトリル／水 3：1、塩基性KMnO₄を噴霧
- GPI標準に従って、分解生成物は観察されない。 Developing solvent A chloroform / methanol / water 3: 3: 1
Developing solvent B Acetonitrile / water 3: 1, sprayed with basic KMnO ₄
-No degradation products are observed according to GPI standards.

実施例２
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのカルシウム塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、0.370gの水酸化カルシウムで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 Example 2
Production of calcium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml of distilled water and the eluate is collected at 4 ° C., flushed with a stream of nitrogen and neutralized with 0.370 g of calcium hydroxide. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は98％である。 The reaction yield is 98%.

生成物であるL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのマグネシウム塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the magnesium salt of the product L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol are:

概観：白色粉末
分子式： (C₉H₁₈O₁₁P)₂Ca
分子量： 706.48
元素分析： C=30.6%；H=5.14%；O=49.82%；P=8.77％、Ca=5.67％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのガラスに施用した； Overview: White powder molecular formula: (C ₉ H ₁₈ O ₁₁ P) ₂ Ca
Molecular weight: 706.48
Elemental analysis: C = 30.6%; H = 5.14%; O = 49.82%; P = 8.77%, Ca = 5.67%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel glass;

実施例３
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールの亜鉛塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、0.54gの炭酸亜鉛塩基で中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 Example 3
Production of zinc salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml distilled water, the eluate collected at 4 ° C., flushed with a stream of nitrogen and neutralized with 0.54 g zinc carbonate base. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は99％である。 The reaction yield is 99%.

生成物であるL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールの亜鉛塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the product zinc salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol are:

概観：白色粉末
分子式： (C₉H₁₈O₁₁P)₂Zn
分子量： 731.78
元素分析： C=29.54%；H=4.96%；O=48.1%；P=8.47％、Zn=8.93％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのプレートに施用した； Overview: White powder molecular formula: (C ₉ H ₁₈ O ₁₁ P) ₂ Zn
Molecular weight: 731.78
Elemental analysis: C = 29.54%; H = 4.96%; O = 48.1%; P = 8.47%, Zn = 8.93%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel plate;

実施例４
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのナトリウム塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、0.53gの炭酸ナトリウム塩基で中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 Example 4
Preparation of sodium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml of distilled water, the eluate collected at 4 ° C., flushed with a stream of nitrogen and neutralized with 0.53 g of sodium carbonate base. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は98％である。 The reaction yield is 98%.

生成物であるL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのナトリウム塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the product L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol sodium salt are:

概観：白色粉末
分子式： C₉H₁₈O₁₁PNa
分子量： 356.2
元素分析： C=30.35%；H=5.09%；O=49.41%；P=8.70％、Na=6.45％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのプレートに施用した； Overview: White powder molecular formula: C ₉ H ₁₈ O ₁₁ PNa
Molecular weight: 356.2
Elemental analysis: C = 30.35%; H = 5.09%; O = 49.41%; P = 8.70%, Na = 6.45%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel plate;

実施例５
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのコリン塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、2.69gのコリンのメタノール溶液45％で中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 Example 5
Production of choline salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml of distilled water and the eluate is collected at 4 ° C., flushed with a stream of nitrogen and neutralized with 2.69 g of choline in methanol 45%. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は98％である。 The reaction yield is 98%.

生成物であるL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのコリン塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the choline salt of the product L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol are:

概観：粉末
式： C₉H₁₈O₁₁P・C₅H₁₄NO
分子式： C₁₄H₃₂NO₁₂P
分子量： 437.37
元素分析： C=38.45%；H=7.38%；N=3.20%；O=43.90%；P=7.08％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのプレートに施用した； Overview: Powder formula: C ₉ H ₁₈ O ₁₁ P / C ₅ H ₁₄ NO
Molecular formula: C ₁₄ H ₃₂ NO ₁₂ P
Molecular weight: 437.37
Elemental analysis: C = 38.45%; H = 7.38%; N = 3.20%; O = 43.90%; P = 7.08%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel plate;

実施例６
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのリシン塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、1.46gのリシンで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 Example 6
Production of lysine salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml distilled water, the eluate collected at 4 ° C., flushed with nitrogen and neutralized with 1.46 g lysine. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は99％である。 The reaction yield is 99%.

生成物であるL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのリシン塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the product lysine salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol are:

概観：粉末
式： C₉H₁₉O₁₁P・C₆H₁₄N₂O₂
分子式： C₁₅H₃₃N₂O₁₃P
分子量： 480.40
元素分析： C=37.50%；H=6.92%；N=5.83%；O=43.30%；P=6.45％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのプレートに施用した； Overview: Powder formula: C ₉ H ₁₉ O ₁₁ P / C ₆ H ₁₄ N ₂ O ₂
Molecular formula: C ₁₅ H ₃₃ N ₂ O ₁₃ P
Molecular weight: 480.40
Elemental analysis: C = 37.50%; H = 6.92%; N = 5.83%; O = 43.30%; P = 6.45%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel plate;

実施例７
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのアルギニン塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、1.74gのアルギニンで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 Example 7
Production of arginine salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml of distilled water, the eluate collected at 4 ° C., flushed with a stream of nitrogen and neutralized with 1.74 g of arginine. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は98％である。 The reaction yield is 98%.

生成物であるL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのアルギニン塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the product L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol arginine salt are:

概観：粉末
式： C₉H₁₉O₁₁P・C₆H₁₄N₄O₂
分子式： C₁₅H₃₃N₄O₁₃P
分子量： 508.42
元素分析： C=35.44%；H=6.54%；N=11.02%；O=40.91%；P=6.09％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのプレートに施用した； Overview: Powder formula: C ₉ H ₁₉ O ₁₁ P / C ₆ H ₁₄ N ₄ O ₂
Molecular formula: C ₁₅ H ₃₃ N ₄ O ₁₃ P
Molecular weight: 508.42
Elemental analysis: C = 35.44%; H = 6.54%; N = 11.02%; O = 40.91%; P = 6.09%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel plate;

実施例８
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのテトラブチルアンモニウム塩の製造
3.7gのGPIカリウム塩（10ミリモル）を35mlの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを15mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、テトラブチルアンモニウムヒドロキシドの1M水性溶液10mlで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、凍結乾燥する。 Example 8
Preparation of tetrabutylammonium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
3.7 g GPI potassium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml distilled water. The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 15 ml of distilled water, the eluate collected at 4 ° C., flushed with nitrogen and neutralized with 10 ml of a 1M aqueous solution of tetrabutylammonium hydroxide. The resulting solution is filtered, frozen and lyophilized.

反応収率は97％である。 The reaction yield is 97%.

L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのテトラブチルアンモニウム塩は以下の特性を示す：
概観：粉末
式： C₉H₁₈O₁₁P・C₁₆H₃₆N
分子式： C₂₅H₅₄NO₁₁P
分子量： 575.69
元素分析： C=52.16%；H=9.46%；N=2.43%；O=30.57%；P=5.38％
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶、DMFに≧10mg/ml
水への溶解性：＞10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのプレートに施用した； The tetrabutylammonium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol exhibits the following properties:
Overview: Powder formula: C ₉ H ₁₈ O ₁₁ P / C ₁₆ H ₃₆ N
Molecular formula: C ₂₅ H ₅₄ NO ₁₁ P
Molecular weight: 575.69
Elemental analysis: C = 52.16%; H = 9.46%; N = 2.43%; O = 30.57%; P = 5.38%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents, ≧ 10 mg / ml in DMF
Solubility in water:> 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel plate;

実施例９
過アセチル化されたL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのカリウム塩の製造
5.76gのGPIテトラブチルアンモニウム塩（10ミリモル）を35mlの無水DMFに溶かす。混合物を攪拌下で４℃に冷却する。15mlの無水ピリジンおよび10mlの無水酢酸を、攪拌下で30分間かけてゆっくりと滴下して加える。混合物を室温にし、攪拌下で48時間無水条件に保持する。次に、混合物を真空下で乾燥する。残渣を10mlのエタノールおよび100mgのKClに懸濁させた後、30mlのジエチルエーテルを添加することによって沈殿させる。得られた残渣を30mlの水および20gの氷に懸濁させ、30mlのテトラヒドロフランで３回抽出する。上層を集め、乾燥する。得られた残渣を30mlのエタノールに溶かし、K+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂15mlを含むカラムで溶出させる。溶出物を真空下で蒸発させた後、高真空下で乾燥する。 Example 9
Production of potassium salt of peracetylated L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
5.76 g GPI tetrabutylammonium salt (10 mmol) is dissolved in 35 ml anhydrous DMF. The mixture is cooled to 4 ° C. with stirring. 15 ml of anhydrous pyridine and 10 ml of acetic anhydride are slowly added dropwise over 30 minutes with stirring. The mixture is brought to room temperature and kept under anhydrous conditions for 48 hours under stirring. The mixture is then dried under vacuum. The residue is suspended in 10 ml of ethanol and 100 mg of KCl and then precipitated by adding 30 ml of diethyl ether. The residue obtained is suspended in 30 ml of water and 20 g of ice and extracted three times with 30 ml of tetrahydrofuran. Collect the top layer and dry. The resulting residue is dissolved in 30 ml of ethanol and eluted with a column containing 15 ml of cation exchange sulfone resin produced in K + form. The eluate is evaporated under vacuum and then dried under high vacuum.

反応収率90％。 Reaction yield 90%.

生成物である過アセチル化されたL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのカリウム塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the product potassium salt of peracetylated L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol are:

概観：粉末
分子式： C₂₃H₃₂O₁₈PK
分子量： 666.58
元素分析： C=41.44%；H=4.84%； O=43.21%；P=4.65％；K=5.87%
有機溶媒への溶解性： DMFおよびエタノールに≧10mg/ml Overview: Powder molecular formula: C ₂₃ H ₃₂ O ₁₈ PK
Molecular weight: 666.58
Elemental analysis: C = 41.44%; H = 4.84%; O = 43.21%; P = 4.65%; K = 5.87%
Solubility in organic solvents: ≧ 10mg / ml in DMF and ethanol

実施例10
グリセロチオ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのカリウム塩[-S-P-]
K.クビアク(Kubiak)らの「ACS シンポジウムシリーズ(ACS SYMPOSIUM SERIES)」718、ページ180により記載されたようにして得られるジアシルグリセロチオホスホリル-イノシトールから出発して化合物を製造する。 Example 10
Potassium salt of glycerothio-phospho-D-myo-inositol [-SP-]
The compounds are prepared starting from diacylglycerothiophosphoryl-inositol obtained as described by “ACS SYMPOSIUM SERIES” 718, page 180, K. Kubiak et al.

1.0gのジアシルグリセロチオホスホリル-イノシトールを、窒素雰囲気下で10mlの無水メタノールに懸濁させる。50mgのカリウムtert-ブトキシドを添加し、混合物を撹拌下で20℃に３時間維持する。26.7mgの酢酸を添加し、混合物を乾燥する。残渣を10mlの冷水に溶かし、10mlのジエチルエーテルで抽出する。次に有機相を捨てる。 1.0 g of diacylglycerothiophosphoryl-inositol is suspended in 10 ml of anhydrous methanol under a nitrogen atmosphere. 50 mg potassium tert-butoxide is added and the mixture is maintained at 20 ° C. for 3 hours under stirring. 26.7 mg of acetic acid is added and the mixture is dried. The residue is dissolved in 10 ml cold water and extracted with 10 ml diethyl ether. The organic phase is then discarded.

溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、H+形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂5mlを含むカラムに施用する。次に、カラムを5mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、pH7.0まで0.1MのKOHで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 The solution is cooled to 4 ° C. and applied to a column containing 5 ml of cation exchange sulfone resin produced in H + form, thermostatted to 4 ° C. The column is then eluted with 5 ml of distilled water and the eluate is collected at 4 ° C., flushed with a stream of nitrogen and neutralized with 0.1 M KOH to pH 7.0. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は95％である。 The reaction yield is 95%.

生成物であるグリセロチオ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのカリウム塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the potassium salt of the product glycerothio-phospho-D-myo-inositol are:

概観：粉末
分子式： C₉H₁₈O₁₀PSK
分子量： 388.38
元素分析： C=27.84%；H=4.67%； S=8.25%；O=41.20%；P=7.98％；K=10.07%
有機溶媒への溶解性：有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性： ≧10mg/ml
TLC ： 100mcgをシリカゲルのプレートに施用した； Overview: Powder molecular formula: C ₉ H ₁₈ O ₁₀ PSK
Molecular weight: 388.38
Elemental analysis: C = 27.84%; H = 4.67%; S = 8.25%; O = 41.20%; P = 7.98%; K = 10.07%
Solubility in organic solvents: Slightly soluble in organic solvents Solubility in water: ≧ 10mg / ml
TLC: 100mcg applied to silica gel plate;

展開溶媒Aクロロホルム／メタノール／水 3：3：1
展開溶媒Bアセトニトリル／水 3：1、塩基性KMnO₄を噴霧
- Rf=0.38。 Developing solvent A chloroform / methanol / water 3: 3: 1
Developing solvent B Acetonitrile / water 3: 1, sprayed with basic KMnO ₄
-Rf = 0.38.

実施例11
グリセロチオ-ホスホチオ-D-ミオ-イノシトールのカリウム塩[-P=S]
T.G.メイヤー(Mayer)ら、Eur. J. Org. Chem. (1998)、ページ291-298により記載された2,3,4,5,6-ペンタ-O-メトキシメチル-D-ミオ-イノシトールから出発して合成を行う。 Example 11
Potassium salt of glycerothio-phosphothio-D-myo-inositol [-P = S]
From 2,3,4,5,6-penta-O-methoxymethyl-D-myo-inositol described by TG Mayer et al., Eur. J. Org. Chem. (1998), pages 291-298. Start and synthesize.

400mgの2,3,4,5,6-ペンタ-O-メトキシメチル-D-ミオ-イノシトール（1ミリモル）を50mlのテトラヒドロフラン／ジクロロメタン1：4に溶かし、混合物を-15℃に冷却する。
70mgのイミダゾールおよび220mgのトリエチルアミンを添加した後、無水ジクロロメタン5ml中150mgの三塩化リンの溶液をゆっくりと滴下して添加する。 400 mg 2,3,4,5,6-penta-O-methoxymethyl-D-myo-inositol (1 mmol) is dissolved in 50 ml tetrahydrofuran / dichloromethane 1: 4 and the mixture is cooled to -15 ° C.
After the addition of 70 mg imidazole and 220 mg triethylamine, a solution of 150 mg phosphorus trichloride in 5 ml anhydrous dichloromethane is slowly added dropwise.

得られた混合物を撹拌下に２時間維持した後、室温に加熱し、10mlの重炭酸トリエチルアンモニウムを添加し、１時間撹拌する。相分離後、下層を集め、5mlの冷水で２回洗浄し、蒸発させ、高真空下で乾燥する。 The resulting mixture is maintained under stirring for 2 hours, then heated to room temperature, 10 ml of triethylammonium bicarbonate is added and stirred for 1 hour. After phase separation, the lower layer is collected, washed twice with 5 ml of cold water, evaporated and dried under high vacuum.

残渣を20mlの無水ピリジンに懸濁させた後、200mgの5,5-ジメチル-2-オキソ-2-クロロ-1,2,3-ジオキソホスホリナンおよび132.2mgのD-α,β-イソプロピリデングリセロールを添加し、次いで混合物を、不活性雰囲気下で室温にて30分間撹拌する。混合物を蒸発乾固させる。残渣を50mlの四塩化炭素に懸濁させ、100mgの硫黄を添加し、室温にて30分間撹拌した後、高真空下で乾燥する。残渣を20mlの無水メタノールに可溶化し、100mgのp-トルエンスルホン酸を添加する。混合物を40℃に２時間加熱した後、室温に冷却し、2mlの水を30分間撹拌下で添加する。混合物を重炭酸アンモニウムで中和し、乾燥する。残渣を、展開溶媒としてクロロホルム／メタノール／水35：25：7の混合物を用いて、シリカゲルのカラムでの分離用クロマトグラフィーによって精製する。生成物を含む画分を集め、真空下で乾燥する。 The residue was suspended in 20 ml of anhydrous pyridine and then 200 mg of 5,5-dimethyl-2-oxo-2-chloro-1,2,3-dioxophosphorinane and 132.2 mg of D-α, β-isopropylene. Ridenglycerol is added and the mixture is then stirred for 30 minutes at room temperature under an inert atmosphere. The mixture is evaporated to dryness. The residue is suspended in 50 ml of carbon tetrachloride, 100 mg of sulfur is added, stirred for 30 minutes at room temperature and then dried under high vacuum. The residue is solubilized in 20 ml anhydrous methanol and 100 mg p-toluenesulfonic acid is added. The mixture is heated to 40 ° C. for 2 hours, then cooled to room temperature and 2 ml of water is added with stirring for 30 minutes. The mixture is neutralized with ammonium bicarbonate and dried. The residue is purified by preparative chromatography on a column of silica gel using a chloroform / methanol / water 35: 25: 7 mixture as developing solvent. The fractions containing the product are collected and dried under vacuum.

残渣を5mlの水に溶かし；溶液を４℃に冷却し、４℃にてH+形態で生じるカチオン交換の5mlのスルホン樹脂のカラムを通して溶出する。カラムを、5mlの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、pH7.0までKOH0.1Mで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。 The residue is dissolved in 5 ml of water; the solution is cooled to 4 ° C. and eluted through a column of cation-exchanged 5 ml sulfone resin produced in H + form at 4 ° C. The column is eluted with 5 ml of distilled water, the eluate is collected at 4 ° C., flushed with a stream of nitrogen and neutralized with KOH 0.1 M until pH 7.0. The resulting solution is filtered, frozen and vacuum dried.

反応収率は65％である。 The reaction yield is 65%.

生成物であるグリセロチオ-ホスホチオ-D-ミオ-イノシトールのカリウム塩の化学的-物理的特性は： The chemical-physical properties of the product potassium salt of glycerothio-phosphothio-D-myo-inositol are:

展開溶媒Aクロロホルム／メタノール／水 3：3：1
展開溶媒Bアセトニトリル／水 3：1、塩基性KMnO₄を噴霧
- Rf=0.35。 Developing solvent A chloroform / methanol / water 3: 3: 1
Developing solvent B Acetonitrile / water 3: 1, sprayed with basic KMnO ₄
-Rf = 0.35.

生物活性
実施例に従い化合物をコード化し、以下のように番号付けした。
例化学名
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのカルシウム塩
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールの亜鉛塩
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのナトリウム塩
４° L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのカリウム塩
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのコリン塩
L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールのリシン塩 The compounds were encoded according to the biological activity examples and numbered as follows:
Example chemical name
Calcium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
Zinc salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
Sodium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol 4 ° Potassium salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
Choline salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol
Lysine salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol

化合物を、細胞系でインビトロ(in vitro)試験し、マウスにおいて物質PおよびそのペプチドP6-11を用いて誘発した炎症モデルでインビボ(in vivo)試験した。 The compounds were tested in vitro in cell lines and in vivo in an inflammation model induced with substance P and its peptide P6-11 in mice.

略語、試薬および物質
ホルモン：ギブコ(Gibco)（グランドアイランド(Grand Island)、NY）（6H-サイロトロピン、インスリン、トランスフェリン、コルチソル、ソマトスタチン、グリシル-L-イスチジル-L-リシンアセテート）
ペニシリン：ギブコ(Gibco)（グランドアイランド(Grand Island)、NY）
クーンズ(Coon’s)F-12 ハム(Ham)に従って変性された培地：ギブコ(Gibco)（グランドアイランド(Grand Island)、NY）
ストレプトマイシン：ギブコ(Gibco)（グランドアイランド(Grand Island)、NY） Abbreviations, reagents and substances
Hormones : Gibco (Grand Island, NY) (6H-Thyrotropin, Insulin, Transferrin, Cortisol, Somatostatin, Glycyl-L-Istidyl-L-Lysine Acetate)
Penicillin : Gibco (Grand Island, NY)
Medium modified according to Coon's F-12 Ham: Gibco (Grand Island, NY)
Streptomycin : Gibco (Grand Island, NY)

NaF、AlCl ₃：フルカケム(Fluka Chem)AG(CH)
5,6,8,11,12,14,15-³H(N)アラキドン酸：デュポン(Du Pont)-NEN（ボストン(Boston)、MA）
BSA ウシ血清アルブミン：シグマ(Sigma)A-3311
エバンスブルー(Evan’s Blue)：シグマ(Sigma)E-2129
ホルムアミド：シグマ(Sigma)F-7503
エチルエーテル：フルカケム(Fluka Chem)AG(CH)
PTFE 0.45μmフィルター：コスター(Costar)130662 NaF, AlCl ₃ : Fluka Chem AG (CH)
5,6,8,11,12,14,15- ³ H (N) arachidonic acid: Du Pont (Du Pont) -NEN (Boston (Boston), MA)
BSA Bovine Serum Albumin : Sigma A-3311
Evan's Blue : Sigma E-2129
Formamide : Sigma F-7503
Ethyl ether : Fluka Chem AG (CH)
PTFE 0.45μm filter : Costar 130662

サブスタンスP、SP：クリナルファ(Clinalfa)(IT)
SP カルボキシ末端ペプチド SP6-11：シグマ(Sigma)S-0772
プロテインキナーゼC、PKC
ホスホリパーゼA2、PLA2
ホスホリパーゼC、PLC
マイトジェン活性化PK、MAPK Substance P, SP : Clinalfa (IT)
SP carboxy terminal peptide SP6-11 : Sigma S-0772
Protein kinase C, PKC
Phospholipase A2, PLA2
Phospholipase C, PLC
Mitogen-activated PK, MAPK

L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールオータコイドの効果の評価は、種々の細胞系においてcPLA2により誘発されるアラキドン酸の放出について、実施例３、実施例４および実施例4aをコード化した。 Evaluation of the effect of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol otachoid encodes Example 3, Example 4 and Example 4a for the release of arachidonic acid induced by cPLA2 in various cell lines did.

実験モデル
細胞培養
FRTL5、培養で増殖させたラット甲状腺からの上皮細胞の細胞系。簡単には、細胞は、ハム(Ham)に従って変性され、5％ウシ血清、20mMのグルタミンおよび６種のホルモンの混合物（6H-サイロトロピン、インスリン、トランスフェリン、コルチソル、ソマトスタチン、グリシル-L-イスチジル-L-リシンアセテート）を補ったたクーンズ(Coon’s)F-12培地で、37℃にて、３〜４日毎に交換された5%CO₂、95％空気媒体の加湿大気中で培養された。 Experimental model
Cell culture
FRTL5, epithelial cell line from rat thyroid grown in culture. Briefly, the cells are denatured according to Ham and mixed with 5% bovine serum, 20 mM glutamine and 6 hormones (6H-Thyrotropin, Insulin, Transferrin, Cortisol, Somatostatin, Glycyl-L-Istidyl- Cultured in Coon's F-12 medium supplemented with L-lysine acetate) at 37 ° C. in a humidified atmosphere of 5% CO ₂ , 95% air medium changed every 3-4 days.

スイス(Swiss)3T3繊維芽細胞
培養物は、種々の刺激を用いて刺激されてアラキドン酸を放出する：
cPLA2-依存性メカニズム、例えばATP、マストパラン(mastoparan)、ボンベシン；
cPLA2-非依存性メカニズム、例えばCa2+イオン透過担体、イオノマイシン(ionomicin)。 Swiss 3T3 fibroblast cultures are stimulated with various stimuli to release arachidonic acid:
cPLA2-dependent mechanisms such as ATP, mastoparan, bombesin;
cPLA2-independent mechanisms such as Ca2 + ion permeation carriers, ionomicin.

試験
アラキドン酸の放出
細胞は最初に、種々の濃度の化合物と共に、60分間の試験下でインキュベートされるか、または所定濃度100μMで種々の時間間隔で（15〜180分間）インキュベートされ、遊離の脂肪酸の不在下、pH7.4で、10mMのHepesおよび0.2％のBSAを添加されたHBSS（ハンクスの均衡塩類溶液、Ca²⁺およびMg²⁺イオンの存在下）で２回洗浄され、記載された緩衝液中の100μMのATPで37℃にて10分間刺激される。上清を、測定のためにシンチレーションキュベットに集めた。結果は、[3H]-アラキドン酸の全放出量の百分率として表される。 Testing Release of arachidonic acid Cells are first incubated with various concentrations of compound under 60 minutes of testing or at a predetermined concentration of 100 μM at various time intervals (15-180 minutes). Washed twice with HBSS (in the presence of Hanks' balanced salt solution, Ca ²⁺ and Mg ²⁺ ions) at pH 7.4, supplemented with 10 mM Hepes and 0.2% BSA, in the absence of free fatty acids Stimulate for 10 minutes at 37 ° C. with 100 μM ATP in the described buffer. The supernatant was collected in a scintillation cuvette for measurement. The results are expressed as a percentage of the total released amount of [3H] -arachidonic acid.

結果
実施例4aとしてコード化された評価下の化合物は、時間および濃度依存性の方法で、試験を行ったすべての細胞系において、cPLA2の活性化によって誘発されたアラキドン酸の放出を減らすことが示された（表１、２、３、４、５）。 Results The compound under evaluation encoded as Example 4a is able to reduce arachidonic acid release induced by cPLA2 activation in all cell lines tested in a time and concentration dependent manner. (Tables 1, 2, 3, 4, 5).

実施例３および実施例４としてコード化された化合物は、より効力の高い効果を示す（表６）。
それに対して、化合物実施例4aは、cPLA2に関係のない刺激、例えばカルシウムイオン透過担体によって誘発されるアラキドン酸の放出の減少を引き起こさない（表７）。 The compounds encoded as Example 3 and Example 4 show a more potent effect (Table 6).
In contrast, Compound Example 4a does not cause irritation unrelated to cPLA2, such as a decrease in the release of arachidonic acid induced by a calcium ion permeable carrier (Table 7).

報告したデータはみな、実施例4aの化合物ならびに実施例３および実施例４の化合物が、サイトゾルのcPLA2の活性化の経路、言い換えればアラキドン酸の動態化に関連する主な経路の負の調節によって特異的に仲介されるメカニズムに従ってアラキドン酸の放出を制限することができることを示す。 All reported data show that the compound of Example 4a and the compounds of Example 3 and Example 4 are negatively regulated in the pathway of cytosolic cPLA2 activation, in other words the main pathway associated with arachidonic acid kinetics. We show that the release of arachidonic acid can be limited according to a mechanism mediated specifically by.

表１： ATPで刺激されたFRTL5細胞における実施例4aの化合物の存在下でのアラキドン酸の放出の抑制の時間-経過Table 1: Time-course of inhibition of arachidonic acid release in the presence of the compound of Example 4a in ATP-stimulated FRTL5 cells

プレロードした(preloaded)細胞を、異なる時間間隔で実施例4aの化合物100μMと共にインキュベートした後、ATP（100μM）で10分間刺激する。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±SEとして表される。対照細胞の刺激は一般に、対応する時間間隔における基本値の４〜５倍であった。 Preloaded cells are incubated with 100 μM of the compound of Example 4a at different time intervals and then stimulated with ATP (100 μM) for 10 minutes. Results are expressed as the mean ± SE of 2 points in 3 separate experiments. Control cell stimulation was generally 4-5 times the baseline value in the corresponding time interval.

表２：実施例4aの化合物は、ATPで刺激したFRTL5細胞からアラキドン酸の放出の抑制を誘発するTable 2: Compound of Example 4a induces inhibition of arachidonic acid release from ATL-stimulated FRTL5 cells

プレロードした細胞を、種々の濃度の実施例4aと共に60分間プレインキュベートした後、100μMのATPで10分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±SEとして表される。 Preloaded cells were preincubated with various concentrations of Example 4a for 60 minutes and then stimulated with 100 μM ATP for 10 minutes. Results are expressed as the mean ± SE of 2 points in 3 separate experiments.

表３：実施例4aの化合物は、ATPで刺激したスイス(Swiss)3T3繊維芽細胞から[Table 3: The compound of Example 4a is obtained from Swiss 3T3 fibroblasts stimulated with ATP [ ^3Three H]-アラキドン酸の放出を抑制するSuppresses release of H] -arachidonic acid

表４：実施例4aの化合物は、スイス(Swiss)3T3繊維芽細胞において、マストパラン-依存性の[Table 4: The compound of Example 4a is a mastparan-dependent [Swiss 3T3 fibroblast] ^3Three H]-アラキドン酸放出を減らすReduces H] -arachidonic acid release

プレロードした放射能活性に標識した細胞を、種々の濃度の実施例4aと共に60分間プレインキュベートした後、100μMのマストパランで10分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±SEとして表される。 Preloaded radioactivity-labeled cells were preincubated with various concentrations of Example 4a for 60 minutes and then stimulated with 100 μM mastparan for 10 minutes. Results are expressed as the mean ± SE of 2 points in 3 separate experiments.

表５：実施例4aの化合物は、スイス(Swiss)3T3繊維芽細胞において、ボンベシン-依存性の[Table 5: The compound of Example 4a is bombesin-dependent [Swiss 3T3 fibroblasts] ^3Three H]-アラキドン酸放出を減らすReduces H] -arachidonic acid release

プレロードした細胞を、種々の濃度の実施例4aと共に60分間プレインキュベートした後、ボンベシンで10分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±SEとして表される。 Preloaded cells were preincubated with various concentrations of Example 4a for 60 minutes and then stimulated with bombesin for 10 minutes. Results are expressed as the mean ± SE of 2 points in 3 separate experiments.

表６：実施例4aの化合物は、FRTL5細胞においてイオノマイシンによって誘発される[Table 6: The compound of Example 4a is induced by ionomycin in FRTL5 cells [ ^3Three H]-アラキドン酸の放出を抑制しないDoes not inhibit H] -arachidonic acid release

プレロードした細胞を、種々の濃度の実施例4aと共に60分間プレインキュベートした後、10μMのイオノマイシンで30分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±SEとして表される。
サブスタンスPに対してサブスタンスPのペプチドP6-11により誘発される局所的炎症への保護活性の評価
実験モデル
明／暗サイクルで、制約なしに給餌して標準条件で飼育した約20〜22gのメスのBalb/cマウスを、エチルエーテル飽和雰囲気に暴露することによって麻酔する。次に動物を各10匹の４群に分ける。 The preloaded cells were preincubated with various concentrations of Example 4a for 60 minutes and then stimulated with 10 μM ionomycin for 30 minutes. Results are expressed as the mean ± SE of 2 points in 3 separate experiments.
Evaluation of substance P protective activity against local inflammation induced by peptide P6-11 against substance P
In an experimental model light / dark cycle, approximately 20-22 g female Balb / c mice fed unconstrained and fed under standard conditions are anesthetized by exposure to an ethyl ether saturated atmosphere. The animals are then divided into 4 groups of 10 animals each.

サブスタンスP（１ピコモル／３μl）またはそのペプチド断片P6-11（１ピコモル／３μl）の左耳の耳介への皮下注射によって、毛細血管透過を引き起こし；対照は、塩類溶液の注射を受ける（マッツァリ(Mazzari)ら、Eur. J. Pharm. 1996）。 Subcutaneous injection of substance P (1 picomole / 3 μl) or its peptide fragment P6-11 (1 picomole / 3 μl) into the left ear pinna causes capillary penetration; the control receives saline injection (Mazzari (Mazzari) et al., Eur. J. Pharm. 1996).

マウスの耳介での血漿の管外遊出。
マウスは、サブスタンスPまたはP6-11ペプチドの後直ちにエバンスブルー(Evan’s Blue)（100mg/kg）の静脈内注射を受け、２時間後に殺された。次に、2mlのホルムアミド中での注射した耳介の均質化（ポリトロン(Polytron)ホモジナイザー）により染料を抽出した。次に、均質化した組織を50℃で２時間インキュベートした。サリア(Saria)とランベルグ(Lunberg)の方法(1983)に従って、620nm(A620)でのエバンスブルーの光学密度として、血漿の管外遊出を測定した。 Extravasation of plasma in the mouse pinna.
Mice received an intravenous injection of Evan's Blue (100 mg / kg) immediately after substance P or P6-11 peptide and were killed 2 hours later. The dye was then extracted by homogenization of the injected pinna (Polytron homogenizer) in 2 ml of formamide. The homogenized tissue was then incubated at 50 ° C. for 2 hours. Plasma extravasation was measured as the optical density of Evans Blue at 620 nm (A620) according to the method of Saria and Lunberg (1983).

化合物の可溶化および投与
実施例に記載された化合物を0.9%塩類溶液に可溶化し、毛細血管透過の30分前に0.5〜5mg/kgの範囲の投与量で、静脈内注射により投与した。 Compound Solubilization and Administration The compounds described in the examples were solubilized in 0.9% saline and administered by intravenous injection at doses ranging from 0.5 to 5 mg / kg 30 minutes prior to capillary permeation.

結果
サブスタンスPにより誘発された管外遊出は、肥満細胞および脈管内皮細胞の両方の二重の活性化メカニズムによるものであり、一方、サブスタンスP断片-ペプチドP6-11は、NKI受容体との相互作用による内皮細胞への効果のみによる管外遊出を引き起こす（「サブスタンスP、ブラジキニンおよび関連ペプチドのヒスタミン放出活性におけるN-末端アルギニンの役割(Role of the N-terminal arginine in the histamine releasing activity of substance P, bradikinin and related peptides)」；デビラー(Deviller)P.、ドラピュー(Drapeau)G.、レノウックス(Renoux)M.、レゴリ(Regoli)D.、Europ. J. Pharmacol. 168(1989)：53-60）。 Results Extravasation induced by substance P is due to a dual activation mechanism of both mast cells and vascular endothelial cells, whereas substance P fragment-peptide P6-11 interacts with the NKI receptor. Causes extravasation only by the effect on endothelial cells due to the interaction (“Role of the N-terminal arginine in the histamine releasing activity of substance” P, bradikinin and related peptides); Deviller P., Drapeau G., Renoux M., Regoli D., Europ. J. Pharmacol. 168 (1989): 53- 60).

試験した化合物はすべて、ペプチドP6-11により誘発される毛細血管透過性を有意に減らすが、SPにより誘発される透過性に有意に影響を与えない（表９）。 All tested compounds significantly reduce the capillary permeability induced by peptide P6-11, but do not significantly affect the permeability induced by SP (Table 9).

特に、実施例5aのGPIのカリウム塩は、サブスタンスP断片P6-11により誘発される管外遊出を制限する。 In particular, the potassium salt of GPI of Example 5a limits extravasation induced by substance P fragment P6-11.

表７：実施例4aおよび６とコード化された化合物は、P6-11により誘発される管外遊出を制限するTable 7: Compounds encoded as Examples 4a and 6 limit extravasation induced by P6-11

スチューデント-ニューマン-ケウルス試験(Student -Newman- Keuls Test) *p＜0.05対群１；・p＜0.05対群２；p＜0.05対群６。 Student-Newman-Keuls Test * p <0.05 vs. group 1; p <0.05 vs. group 2; p <0.05 vs. group 6.

表８：P6-11により誘発される管外遊出への、実施例4aとコード化された化合物の投与量依存性効果Table 8: Dose-dependent effects of compound encoded with Example 4a on extravasation induced by P6-11

スチューデント-ニューマン-ケウルス試験(Student -Newman- Keuls Test) *p＜0.05 Student-Newman-Keuls Test * p <0.05

表９：サブスタンスPにより誘発される管外遊出に対する、L-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールカリウム塩（実施例4a）およびL-α-グリセロ-ホスホ-D-ミオ-イノシトールカルシウム塩（実施例２）Table 9: L-α-Glycero-phospho-D-myo-inositol potassium salt (Example 4a) and L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol calcium salt against substance P-induced extravasation (Example 2)

報告した証拠は、本発明の化合物が、サブスタンスPの末端ペプチド、P6-11によって誘発される血漿タンパク質管外遊出を制限することを示す。ペプチドP6-11は、NK1と称されるニューロキン(neurokin)受容体によって仲介される特定のメカニズムに従って、上皮を通してタンパク質管外遊出を誘発する。NK1、NK2およびNK3受容体はそれぞれ、内因性リガンドSP、NKAおよびNKBのシグナルを仲介し、そのすべてが、ペプチドP6-11に存在するSPの末端部分を認識することを思い出さねばならない。 Reported evidence indicates that the compounds of the present invention limit plasma protein extravasation induced by the terminal peptide of substance P, P6-11. Peptide P6-11 induces protein extravasation through the epithelium according to a specific mechanism mediated by a neurokin receptor called NK1. Recall that the NK1, NK2 and NK3 receptors mediate the signals of the endogenous ligands SP, NKA and NKB, respectively, all of which recognize the terminal portion of SP present in peptide P6-11.

終わりに、試験した本発明の化合物は、cPLA2を負に調節することができ、よってアラキドン酸代謝に関連する事象のカスケードを制限することができる。本発明の化合物はさらに、種々の刺激、例えばATPによって誘発される、cPLA2の活性化ならびに、変えられた関門透過性の状況で、例えば末梢神経系の脈管-神経周膜および中枢神経系の血液脳関門で存在するアラキドン酸濃度の増加を制限することができる。 Finally, the tested compounds of the invention can negatively regulate cPLA2, thus limiting the cascade of events associated with arachidonic acid metabolism. The compounds of the present invention may further be used in various stimuli, such as ATP-induced activation of cPLA2, and in altered barrier permeability situations, such as in the peripheral nervous system vasculature-periperum and central nervous system. It can limit the increase in arachidonic acid concentration present at the blood-brain barrier.

本発明の化合物はまた、ボンベシン受容体により仲介されるcPLA2の活性化を調節し、これは、食物摂取の不調節に関連し、かくして、そのような悪液質メカニズムにより仲介される病変、例えば過食症、食欲不振、肥満および悪液質の治療のために有用に使用することができる。 The compounds of the present invention also modulate cPLA2 activation mediated by bombesin receptors, which is associated with dysregulation of food intake and thus pathologies mediated by such cachexia mechanisms, such as It can be usefully used for the treatment of bulimia, anorexia, obesity and cachexia.

本発明の化合物はさらに、インビボ(in vivo)モデルのNK-1受容体の刺激を調節することができる。
かくして本発明の化合物は、先に挙げたようなcPLA2の活性化または過剰刺激によって仲介される病変の治療のための有効な治療手段であり得る。 The compounds of the invention can further modulate NK-1 receptor stimulation in an in vivo model.
Thus, the compounds of the present invention may be effective therapeutic means for the treatment of lesions mediated by cPLA2 activation or overstimulation as listed above.

投与の量、タイミングおよび方法は、病変もしくは変調のタイプ、段階、重症さおよび概観の明確さまたは、ヒトもしくは獣医師の健康管理における来たるべき適用のタイプ、段階、重症さおよび概観の明確さに従って選択され、各治療サイクルについて0.1〜100mg/kgで3〜90日間に含まれる。挙げられたすべての病変について、全身、非経口、経口および直腸の投与が示されるが、また局所、経皮および、活性物質の最高の利用可能性を達成するような任意の場合が示される。経口のためには、処方物は錠剤、糖衣錠およびカプセルとして投与することができるが、また粉末および溶液／懸濁液（噴霧を含む）として投与することができる。 The amount, timing and method of administration should be clear of the type, stage, severity and overview of the lesion or modulation, or the type, stage, severity and overview of the upcoming application in human or veterinary health care. And is included in 3-90 days at 0.1-100 mg / kg for each treatment cycle. For all the lesions listed, systemic, parenteral, oral and rectal administration is indicated, but also any topical, transdermal and any case that achieves the highest availability of the active substance. For oral use, the formulations can be administered as tablets, dragees and capsules, but can also be administered as powders and solutions / suspensions (including sprays).

局所治療のためには、結膜嚢への投与のための目薬と共に、皮膚および粘膜使用（歯肉粘膜を含む）に親和性であるゲル、クリームおよび溶液が好ましい。
注射可能な形態は、製薬上の使用のために、かつ静脈内、筋肉内および皮下投与のために適合性の溶媒と共に処方される。 For topical treatment, gels, creams and solutions that are compatible with skin and mucosal use (including gingival mucosa) are preferred along with eye drops for administration to the conjunctival sac.
Injectable forms are formulated with compatible solvents for pharmaceutical use and for intravenous, intramuscular and subcutaneous administration.

人間および獣医学における非反応状態に関連する変調の予防またはコアジュバント(coadiuvant)治療のための経口摂取のための補給剤と同じ活性化合物を、適当な濃度で処方することができる。 The same active compounds as supplements for oral ingestion for the prevention of modulation or coadiuvant treatment associated with unresponsive conditions in human and veterinary medicine can be formulated in suitable concentrations.

以下は、医薬および化粧品用調製物の例であり、これは説明する目的のみを有し、限定する目的を有していない。 The following are examples of pharmaceutical and cosmetic preparations, which are for illustrative purposes only and have no limiting purpose.

例A - 錠剤
活性主剤実施例６ 100mg
賦形剤
微晶質セルロース 160mg
デンプン 28mg
ラクトース 100mg
ステアリン酸 6.0mg Example A-Tablets Active active agent Example 6 100 mg
Excipient Microcrystalline cellulose 160mg
Starch 28mg
Lactose 100mg
Stearic acid 6.0mg

例B - 注射用処方物
バイアル１
活性主剤凍結乾燥した実施例４ 50mg Example B-Injectable formulation
Vial 1
Active agent Freeze-dried Example 4 50 mg

バイアル２
賦形剤
２塩基性リン酸ナトリウム12H₂O 12mg
１塩基性リン酸ナトリウム2 H₂O 1mg
塩化ナトリウム 32mg
注射用の水で 4mlにする。 Vial 2
Excipient
Dibasic sodium phosphate 12H ₂ O 12mg
1 basic sodium phosphate 2 H ₂ O 1mg
Sodium chloride 32mg
Make up to 4 ml with water for injection.

例C - 局所施用のためのW/Oクリーム
%mg
活性主剤実施例７ 2
賦形剤
Twin 60 0.5
Polwax 2.5
セチルステアリルアルコール 2
カルボマー 0.5
TEA 0.5
グリセリン 3
防腐剤 1
水で 100mgにする。 Example C-W / O cream for topical application
% mg
Active main agent Example 7 2
Excipient
Twin 60 0.5
Polwax 2.5
Cetylstearyl alcohol 2
Carbomer 0.5
TEA 0.5
Glycerin 3
Preservative 1
Bring to 100 mg with water.

［１］一般式（Ｉ）:

の化合物、その鏡像体、ジアステレオマー、ラセミ体、その混合物、その水和物又は溶媒和物：
式中、
I) R’、R2’、R2、R3、R4、R5、R6は互いに同じかまたは異なることができ、
a) Hまたは
基C(O)A、モノカルボン酸のアシル残基またはジカルボン酸のヘミアシル残基であり、ここでAは、飽和もしくは１〜４個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であることができ；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、-COOHの中から選択される１個以上の基で置換されており、これらの-COOHは、任意的に塩化されて、-COOM塩を形成する（Mはポイント(II)で記載したのと同じ意味を有する）か；または
- 基Bであり、ここでBは、飽和もしくは１〜６個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基；または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アルキルアリールもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であり；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、-COOHの中から選択される１個以上の基で置換されており、これらの-COOHは、任意的に中和されて、-COOM塩を形成する（Mはポイント(II)で記載したのと同じ意味を有する）：
(II) Mは、薬理学的に許容できる無機元素のカチオンであるか、または価数n+を有する薬理学的に許容できる有機塩基のカチオンである（ここでnは、以下のポイント(III)で記載したのと同じ意味を有する）；
(III) nは、１または２または３である；
(IV) XおよびYは互いに同じかまたは異なり、OまたはSであり；
ここで、YがSであるとき、式(I)の化合物はまた、それぞれの非中和化合物を包含する。 [1] General formula (I):

A compound thereof, its enantiomer, diastereomer, racemate, mixture thereof, hydrate or solvate thereof:
Where
I) R ′, R2 ′, R2, R3, R4, R5, R6 can be the same or different from each other;
a) H or a group C (O) A, an acyl residue of a monocarboxylic acid or a hemiacyl residue of a dicarboxylic acid, wherein A is a saturated or unsaturated straight chain having 1 to 4 double bonds. Can be a chain or branched alkyl group, or a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group, or an aryl, arylalkyl or heterocyclic group having one or more heteroatoms; these groups are optionally , Keto, hydroxy, acylamide, halogen, mercapto, alkylthio or alkyldithio, substituted with one or more groups selected from —COOH, these —COOH being optionally salified to —COOM Forms a salt (M has the same meaning as described for point (II)); or
The group B, where B is a saturated or unsaturated, linear or branched alkyl group having 1 to 6 double bonds; or a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group or aryl Alkylaryl or a heterocyclic group having one or more heteroatoms; these groups are optionally selected from keto, hydroxy, acylamide, halogen, mercapto, alkylthio or alkyldithio, —COOH Substituted with one or more groups, these -COOH are optionally neutralized to form -COOM salts (M has the same meaning as described for point (II)):
(II) M is a pharmacologically acceptable cation of an inorganic element or a pharmacologically acceptable cation of an organic base having the valence n + (where n is the following point (III) Have the same meaning as described above);
(III) n is 1 or 2 or 3;
(IV) X and Y are the same or different from each other and are O or S;
Here, when Y is S, the compounds of formula (I) also include the respective non-neutralized compounds.

［２］式中、Mが、
a) 生物学的に許容できる無機カチオンまたは
b) 価数n+を有する生物学的に許容できる有機カチオンであり、ここでnは１または２または３を意味する、
［１］に記載の化合物。 [2] In the formula, M is
a) a biologically acceptable inorganic cation or
b) a biologically acceptable organic cation having the valence n +, where n means 1 or 2 or 3.
The compound according to [1].

［３］
a) Aが、好ましくは飽和もしくは１不飽和のアルキル基であるとき、１〜８個の炭素原子、好ましくは２〜６個の炭素原子を有する；
b) Aが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、５〜30個の炭素原子、好ましくは６〜24個の炭素原子を有する；
c) Aがアリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、４〜15個の炭素原子、好ましくは４〜８個の炭素原子を有し、かつN、OおよびSの中から選択され、好ましくはNである１〜５個のヘテロ原子、好ましくは１〜３個のヘテロ原子を有する；
d) Bがアルキルであるとき、１〜８個の炭素原子、より好ましくは２〜６個の炭素原子を有し、飽和であるかまたは１不飽和である；
e) Bが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、５〜30個の炭素原子、好ましくは６〜24個の炭素原子を有する；
f) Bがアリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、５〜15個の炭素原子、好ましくは５〜８個の炭素原子を有し、かつN、OおよびSの中から選択され、好ましくはNである１〜５個のヘテロ原子、好ましくは１〜３個のヘテロ原子を有する、
［１］に記載の化合物。 [3]
a) when A is preferably a saturated or monounsaturated alkyl group, it has 1 to 8 carbon atoms, preferably 2 to 6 carbon atoms;
b) When A is a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group, it has 5 to 30 carbon atoms, preferably 6 to 24 carbon atoms;
c) When A is aryl, arylalkyl or a heterocyclic group having one or more heteroatoms, it has 4 to 15 carbon atoms, preferably 4 to 8 carbon atoms, and N, O And 1-5 heteroatoms, preferably 1-3, selected from among S and S;
d) When B is alkyl, it has 1 to 8 carbon atoms, more preferably 2 to 6 carbon atoms, and is saturated or unsaturated.
e) When B is a monocyclic or polycyclic alkyl or alkenyl group, it has 5 to 30 carbon atoms, preferably 6 to 24 carbon atoms;
f) When B is aryl, arylalkyl or a heterocyclic group having one or more heteroatoms, it has 5 to 15 carbon atoms, preferably 5 to 8 carbon atoms, and N, O And having 1 to 5 heteroatoms, preferably 1 to 3 heteroatoms, preferably selected from N and
The compound according to [1].

［４］式中、Mが、
a) クロム、セレン、銅、アルカリ金属元素、アルカリ土類金属、ZnおよびFeの中から選択される生物学的に許容できる無機カチオン；
b) 好ましくは、モノ-、ジ-、トリ-もしくはテトラ-アルキルアンモニウム、好ましくはN-(2-ヒドロキシエチル)-ジメチルアンモニウム、コリンカチオンもしくはアミノ酸カチオン、好ましくはリシンもしくはアルギニンまたは、モノ-、ジ-、トリ-およびテトラ-ペプチドまたは、キサンチン塩基のカチオン、好ましくはカフェインの中から選択される、生物学的に許容できる有機塩基のカチオンである、［２］に記載の化合物。 [4] In the formula, M is
a) a biologically acceptable inorganic cation selected from chromium, selenium, copper, alkali metal elements, alkaline earth metals, Zn and Fe;
b) Preferably mono-, di-, tri- or tetra-alkylammonium, preferably N- (2-hydroxyethyl) -dimethylammonium, choline cation or amino acid cation, preferably lysine or arginine or mono-, di- The compound according to [2], which is a biologically acceptable organic base cation selected from among-, tri- and tetra-peptides or cations of xanthine bases, preferably caffeine.

［５］cPLA2の活性化もしくは過剰刺激によって仲介される病変の治療のための、［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物。 [5] The compound according to any one of [1] to [4], for the treatment of a lesion mediated by cPLA2 activation or overstimulation.

［６］［１］〜［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩化されていない誘導体の、cPLA2の活性化もしくは過剰刺激によって仲介される病変の治療のための薬剤組成物の製造のための使用。 [6] For the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment of lesions mediated by cPLA2 activation or overstimulation of the compound according to any one of [1] to [4] or an unsalted derivative thereof Use of.

［７］成長因子EGFもしくはNGFおよび／またはNK-1受容体および／または、cPLA2を活性化するGタンパク質と結合される受容体、例えばATP受容体および／またはボンベシン受容体の過剰刺激に関連する病変の治療のための、［６］に記載の使用。 [7] Related to overstimulation of growth factor EGF or NGF and / or NK-1 receptor and / or a receptor coupled with G protein that activates cPLA2, such as ATP receptor and / or bombesin receptor Use according to [6] for the treatment of lesions.

［８］心臓性および敗血症性のショックならびに、ウィルスもしくは細菌の感染の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [8] Use according to [6] or [7] for the treatment of cardiac and septic shock and viral or bacterial infection.

［９］呼吸器の病変、例えば急性肺損傷（新生児病変を含む）、慢性閉塞性気管支病（喘息を含む）の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [9] The use according to [6] or [7] for the treatment of respiratory lesions such as acute lung injury (including neonatal lesions) and chronic obstructive bronchial disease (including asthma).

［１０］皮膚科の病変、例えば乾癬、脂漏性皮膚炎、アトピー性皮膚炎および、より一般的には、皮膚の不反応性（また、UV損傷後の酸化的ストレスを含む）ならびに、眼の病変、例えば緑内障および結膜炎の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [10] Dermatological lesions such as psoriasis, seborrheic dermatitis, atopic dermatitis and more generally skin unresponsiveness (also including oxidative stress after UV damage) and eye Use of [6] or [7] for the treatment of lesions such as glaucoma and conjunctivitis.

［１１］腫瘍の病変、例えば前立腺および腎臓の癌の治療または、cPLA2の活性化に依存する病変の治療および、腎臓の病変の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [11] Use of [6] or [7] for the treatment of tumor lesions, for example, prostate and kidney cancer, or for treatment of lesions dependent on cPLA2 activation, and for treatment of kidney lesions.

［１２］細菌感染による歯肉組織の変調および、腸の虚血における粘膜損傷の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [12] Use according to [6] or [7] for the modulation of gingival tissue by bacterial infection and treatment of mucosal damage in intestinal ischemia.

［１３］関節の病変、例えば慢性関節リュウマチを含む関節炎および関節症の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [13] Use according to [6] or [7] for the treatment of joint lesions such as arthritis and arthropathy including rheumatoid arthritis.

［１４］偏頭痛および頭痛、痛みおよび痛覚過敏の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [14] Use of [6] or [7] for the treatment of migraine and headache, pain and hyperalgesia.

［１５］心臓疾患および、血管再造形に関連する心臓血管の疾病の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [15] The use according to [6] or [7] for the treatment of heart diseases and cardiovascular diseases associated with vascular remodeling.

［１６］炎症に関連する末梢神経系の病変の治療、毒素の非代謝による神経障害の治療ならびに、中枢神経系、例えばアルツハイマー病、行動変調、例えば精神***病うつ病、医原性損傷により引き起こされる病変または毒性剤、例えばコカインにより引き起こされる病変および皮膚の疾患またはスフィンゴミエリンサイクルに関連する変調（遺伝的形態、例えばヘルマンスキー-パドラック症候群およびニーマン-ピック症候群を含む）の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [16] Treatment of peripheral nervous system lesions associated with inflammation, treatment of neuropathy due to non-metabolism of toxins, as well as central nervous systems such as Alzheimer's disease, behavioral modulation such as schizophrenia depression, iatrogenic damage For the treatment of lesions or toxic agents such as those caused by ***e and skin diseases or modulations associated with the sphingomyelin cycle (including hereditary forms such as Hermannsky-Padlac syndrome and Niemann-Pick syndrome) [ 6] or use according to [7].

［１７］血管と神経系との間の関門、例えば神経の神経周膜に対する損傷に関連する病変および、血液脳関門の損傷に関連する病変、例えばニューロン浮腫、発作、大脳浮腫および出血、TIA（一過性脳虚血）の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [17] Barriers between blood vessels and nervous system, such as lesions associated with damage to nerve perineurium and lesions associated with blood brain barrier damage such as neuronal edema, stroke, cerebral edema and bleeding, TIA ( Use according to [6] or [7] for treatment of (transient cerebral ischemia).

［１８］食物摂取疾患に関連する病変、例えば過食症、食欲不振、悪液質、肥満の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [18] The use according to [6] or [7] for the treatment of lesions associated with food intake disorders, such as bulimia, anorexia, cachexia, obesity.

［１９］非代謝的病変、例えば糖尿病および膵臓炎の治療のための、［６］又は［７］に記載の使用。 [19] Use of [6] or [7] for the treatment of non-metabolic lesions such as diabetes and pancreatitis.

［２０］製薬上許容できる賦形剤とともに、活性主剤として少なくとも１種の［１］〜［４］のいずれかに記載の誘導体を含む組成物。 [20] A composition comprising at least one derivative according to any one of [1] to [4] as an active main ingredient together with a pharmaceutically acceptable excipient.

［２１］経口投与、非経口投与、直腸投与、舌下、静脈内、筋肉内、皮下、局所、皮内、経皮の投与に適する、［２０］に記載の組成物。 [21] The composition according to [20], which is suitable for oral administration, parenteral administration, rectal administration, sublingual, intravenous, intramuscular, subcutaneous, topical, intradermal, and transdermal administration.

［２２］局所経路が皮膚または眼内である、［２１］に記載の組成物。 [22] The composition of [21], wherein the topical route is the skin or intraocular.

［２３］投与の経口形態が、粉末、錠剤、丸薬、カプセル、玉、液体懸濁物または、凍結乾燥出発物質に基づく処方物、例えば乾燥シロップである、［２１］に記載の組成物。 [23] The composition of [21], wherein the oral form of administration is a powder, tablet, pill, capsule, ball, liquid suspension, or a formulation based on a lyophilized starting material, such as a dried syrup.

［２４］非経口投与の形態が、凍結乾燥化合物から出発する即座注射用処方物である、［２１］に記載の組成物。 [24] The composition of [21], wherein the parenteral dosage form is an immediate injection formulation starting from a lyophilized compound.

［２５］局所投与の形態が、クリーム、軟膏、ゲル、凍結乾燥粉末、溶液または噴霧形態である、［２１］に記載の組成物。 [25] The composition according to [21], wherein the form for topical administration is cream, ointment, gel, lyophilized powder, solution or spray form.

［２６］薬剤が獣医用途である、［６］〜［２０］のいずれかに記載の使用。 [26] The use according to any one of [6] to [20], wherein the drug is for veterinary use.

［２７］前記治療が、病変もしくは変調のタイプ、段階、重症さおよび発現の区切に依存して、かつヒトまたは獣医用途に依存して、治療の各サイクルにつき0.1〜100mg/kgで3〜90日間を包含する活性主剤の投与量を含む、［６］〜［２０］または［２６］のいずれかに記載の使用。 [27] The treatment depends on the type or stage of the lesion or modulation, stage, severity and expression demarcation, and depending on the human or veterinary application, 3 to 90 at 0.1 to 100 mg / kg for each cycle of treatment. The use according to any one of [6] to [20] or [26], which comprises a dose of an active agent including a day.

Claims

アルツハイマー病を除くcPLA2の活性化又は過剰刺激によって仲介される炎症の治療用の、皮膚、眼内、結膜嚢又は粘膜を介して投与される医薬組成物の製造における、Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのＭ塩｛式中、該Ｍは、薬理学的に許容される無機元素のカチオンであるか、又は価ｎ^＋（ここで、ｎは１、２又は３である。）をもつ薬理学的に許容される有機塩基のカチオンである。｝の使用。 L-α-glycero-phospho in the manufacture of a pharmaceutical composition administered via the skin, intraocular, conjunctival sac or mucosa for the treatment of inflammation mediated by cPLA2 activation or hyperstimulation except Alzheimer's disease M salt of -D-myo-inositol {wherein M is a pharmacologically acceptable cation of an inorganic element or a valence n ⁺ (where n is 1, 2 or 3). ) Which is a pharmacologically acceptable cation of an organic base. }Use of.

製薬上許容できる賦形剤とともに、活性成分として、Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのＭ塩｛式中、該Ｍは、薬理学的に許容される無機元素のカチオンであるか、又は価ｎ^＋（ここで、ｎは１、２又は３である。）をもつ薬理学的に許容される有機塩基のカチオンである。｝を含む、アルツハイマー病を除くcPLA2の活性化又は過剰刺激によって仲介される炎症の治療用の、皮膚、眼内、結膜嚢又は粘膜を介して投与される医薬組成物。 M salt of L-α-glycero-phospho-D-myo-inositol as an active ingredient together with a pharmaceutically acceptable excipient {wherein M is a cation of an inorganic element that is pharmacologically acceptable Or a pharmacologically acceptable cation of an organic base having the valence n ⁺ (where n is 1, 2 or 3). The pharmaceutical composition administered through the skin, intraocular, conjunctival sac or mucosa for the treatment of inflammation mediated by cPLA2 activation or overstimulation excluding Alzheimer's disease .