JPS6310799A - Prodrug compound, production thereof and long-acting drug containing same - Google Patents

Abstract

NEW MATERIAL:The compound of formula I (A is residue of pharmaceutical compound containing >NH or -NH2 group in the molecule; R is residue of steroid compound; m is 1-5; n is 0 or 1) and its salt. EXAMPLE:[ 1aS-(1aalpha,8beta,8aalpha,8balpha) ]-6-amino-8-carbamoyloxymethyl-N'-[N-(cholest- 5-ene-3beta-oxycarbonyl)glycyl]-1,1a,2,8,8a,8b-hexahydro-8a-methoxy-5- methylaziridi no[2',3':3,4]pyrrolo[1,2-a]indole-4,7-dione. USE:Antitumor agent. PREPARATION:The compound of formula II or its reactive derivative at the carboxyl group or their salt is made to react with the compound of formula A-H or its salt.

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ この発明は医薬品の新規なプロドラッグ化合物、その製
造法およびそれを含有する持続性製剤に関するものであ
る。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Industrial Field of Application] This invention relates to a novel prodrug compound for pharmaceuticals, a method for producing the same, and a long-acting preparation containing the same.

［従来の技−＄１ 生体内における薬物の徐放化を目的として種々の分子内
修飾を行なったいわゆるプロドラッグが検討きれており
、例えば抗１１瘍剤である５−フルオロウラシル と、コレステロールとをスペーサー を介して結合したプロドラッグ が合成きれ、これをリボソームに取り込ませることによ
り、緩衝液中で粗化合物である５−フルオロウラシルに
除々に変換できることが知られている（日本薬学会第１
０５年会講演要旨集（１９８５年）、演題Ｎｏ、５％Ｊ
１−２４、題名：コレステロールをキャリアーとする５
−ＦＵプロドラッグの合成とその脂質分散系製剤への応
用）。[Conventional techniques - $1 So-called prodrugs with various intramolecular modifications have been studied for the purpose of sustained release of drugs in vivo. For example, 5-fluorouracil, an anti-inflammatory agent, and cholesterol It is known that by synthesizing a prodrug bound via a spacer and incorporating it into ribosomes, it can be gradually converted into the crude compound 5-fluorouracil in a buffer solution (Pharmaceutical Society of Japan Vol.
2005 Meeting Lecture Abstracts (1985), Presentation No., 5%J
1-24, Title: 5 using cholesterol as a carrier
-Synthesis of FU prodrug and its application to lipid dispersion formulations).

また、抗腫瘍剤であるマイトマイシンＣについても上記
と同様にスペーサー［−ＣＯ−］を介してコレステロー
ルと結合したマイトマイシンＣ誘導体であるコレステリ
ルオキシカルボニルマイトマイシンＣ の合成が試みられている［ケミカル・アンド・ファーマ
シューテイカル・ブレチン（Ｃｈｅｗ。Regarding mitomycin C, an antitumor agent, attempts have also been made to synthesize cholesteryloxycarbonylmitomycin C, a mitomycin C derivative bound to cholesterol via a spacer [-CO-], in the same manner as above [Chemical & Co., Ltd. Pharmaceutical Bulletin (Chew.

Ｐｈａｒｍ、　　Ｂｕｌｌ、　）　３１　　（１１）　
　４０８３−４０９０　（１９８３）コ。Pharm, Bull, ) 31 (11)
4083-4090 (1983) Ko.

［発明が解決しようとする問題点］ 上記のマイトマイシンＣの誘導体では、化学的および酸
素的加水分解に対するマイトマイシンＣとコレステロー
ルの結合の安定性のために親化合物であるマイトマイシ
ンＣにほとんど変換できないという問題点があった。[Problems to be Solved by the Invention] The above-mentioned mitomycin C derivatives have the problem that they can hardly be converted into the parent compound mitomycin C due to the stability of the bond between mitomycin C and cholesterol against chemical and oxygen hydrolysis. There was a point.

［問題点を解決するための手段］ この発明の発明者らは上記のような問題点を克服する目
的で鋭意研究した結果、マイトマイシンＣをステロイド
化合物と種々の新規なスペーサーを介して結合させた誘
導体を合成することにより、このプロドラッグを生体に
投与した場合に血中で親化合物であるマイトマイシンＣ
に徐々に変換され、さらにこのプロドラッグをリボソー
ムに取り込ませたリボソーム製剤とすることにより、リ
ボソーム中へのその誘導体の取り込みがマイトマイシン
Ｃへの変換速度を減少し、その結果、マイトマイシンＣ
の血中濃度を長時間に亘って持続できる上、粗化合物自
体を投与した場合に比べて毒性も軽減できることを見出
した。[Means for Solving the Problems] As a result of intensive research aimed at overcoming the above-mentioned problems, the inventors of the present invention combined mitomycin C with a steroid compound via various novel spacers. By synthesizing the derivative, when this prodrug is administered to a living body, the parent compound mitomycin C is released in the blood.
By creating a ribosomal formulation in which this prodrug is incorporated into ribosomes, the incorporation of the derivative into ribosomes reduces the conversion rate to mitomycin C, and as a result, mitomycin C
It has been found that the blood concentration of the compound can be maintained for a long period of time, and toxicity can also be reduced compared to when the crude compound itself is administered.

さらに、本発明者らは、この技術を式：で示される４−
ホルミル−６，９−ジヒドロキシ−１４−才キサー１．
１１−ジアザテトラシクロ−２，７１０，１２ ［７，４，１，０，０］テトラゾカー２．４゜６−ドリ
エンー８−イルメチルカルバメート（以下、ＦＲ９００
４８２物質という）、および式：で示されるビス（２−
クロロエチル）アミン（以下、ナイトロジェンマスター
ドという）等に適用しても同様の効果が得られることを
見出し、さらに式 で示される１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン（
以下、シタラビンという）に適用した結果、上記した効
果に加えて、抗ｍ瘍効果が著しく向上することを見出し
てこの発明を完成した。Furthermore, the present inventors applied this technique to 4-
Formyl-6,9-dihydroxy-14-year-old xar 1.
11-Diazatetracyclo-2,710,12[7,4,1,0,0]tetrazocar 2.4゜6-drien-8-ylmethylcarbamate (hereinafter referred to as FR900
482 substance), and bis(2-
It was discovered that a similar effect can be obtained by applying it to chloroethyl)amine (hereinafter referred to as nitrogen mustard), and furthermore, it was found that a similar effect can be obtained by applying it to 1-β-D-arabinofuranosylcytosine (
As a result of applying the present invention to cytarabine (hereinafter referred to as cytarabine), the present invention was completed based on the discovery that, in addition to the above-mentioned effects, the anti-malignant tumor effect was significantly improved.

この発明のプロドラッグ化合物は新規であり、一般式 ％式％：］ （式中、Ａは分子中に基）ＮＨまたは−ＮＨ２を有する
医薬化合物の残基、Ｒはステロイド化合物の残基、ｍは
１〜５の整数、ｎは０または１をそれぞれ意味する） で示ξれる。The prodrug compounds of this invention are novel and have the general formula % formula %: ] (wherein A is a group in the molecule) NH or -NH2, a residue of a pharmaceutical compound, R is a residue of a steroid compound, m is an integer from 1 to 5, and n means 0 or 1, respectively).

プロドラッグ化合物［１］において、Ａで表わされる「
分子中に基■ＮＨを有する医薬化合物の残基ｊにおける
医薬化合物としては、例えばマイトマイシンＣ，ナイト
ロジェンマスタード、Ｒ９００４８２物質等の抗腫瘍剤
が挙げられる。また１分子中に基−ＮＨ２を有する医薬
化合物の残基」における医薬化合物としては、例えばシ
タラビン、アミノプテリン、アザシチジン、ドキソルビ
シン、ダウノルビシン等が挙げられる。これらの医薬化
合物の残基とは、医薬品化合物の分子中の基〉■または
−ＮＨ２から水素原子を除いた残基を意味する。In the prodrug compound [1], “
Examples of the pharmaceutical compound in the residue j of the pharmaceutical compound having a group NH in the molecule include antitumor agents such as mitomycin C, nitrogen mustard, and substance R900482. Examples of the pharmaceutical compound "residue of a pharmaceutical compound having -NH2 group in one molecule" include cytarabine, aminopterin, azacytidine, doxorubicin, daunorubicin, and the like. The term "residue of these pharmaceutical compounds" means a residue obtained by removing a hydrogen atom from the group >> or -NH2 in the molecule of the pharmaceutical compound.

また、ステロイド化合物の残基としては、コレステロー
ル、フレスタノール、ラノステロール、エルゴステロー
ル、リドフール酸等のステロイド化合物の３位のヒドロ
キシ基から水素原子を除いた基が挙げられる。Further, examples of the residue of the steroid compound include a group obtained by removing a hydrogen atom from the hydroxyl group at the 3-position of a steroid compound such as cholesterol, furestanol, lanosterol, ergosterol, and lidofolic acid.

この発明のプロドラッグ化合物［１］およびその塩類は
下記の１法により製造することができる。The prodrug compound [1] of this invention and its salts can be produced by one of the following methods.

Ａ−Ｈ もしくはそのカルボキシ基 における反応性誘導体また はそれらの塩類 Ａ−ＣＯ（ＣＨ２）ｒｎ（ＮＨＣＯ）ｎ−Ｒ［Ｉコ またはその塩類 （式中、Ａ、Ｒ，ｍおよびｎはそれぞれ前記と同し意味
） すなわち、プロドラッグ化合物［１］およびその塩類は
化合物［Ｉ［］もしくはそのカルボキシ基における反応
性誘導体またはそれらの塩類に化合物［ｍコまたはその
塩類を作用させることによって製造することができる。A-H or a reactive derivative thereof at the carboxy group or a salt thereof A-CO(CH2)rn(NHCO)n-R[I or a salt thereof (wherein A, R, m and n are each as defined above) In other words, the prodrug compound [1] and its salts can be produced by reacting the compound [I] or its reactive derivative at the carboxy group or its salt with the compound [I] or its salt. .

化合物［ｒｌ、［１］および［ＩＩ［］の好適な塩とし
ては、例えば酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタン
スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホ
ン酸塩等の有機酸塩または塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸
塩、燐酸塩等の無機酸塩のような酸付加塩：ナトリウム
塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等の金
属塩；アンモニウム塩；トリメチルアミン塩、トリエチ
ルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩等の有機アミン
塩等が挙げられる。Suitable salts of compounds [rl, [1] and [II[] include organic acid salts such as acetate, maleate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, toluenesulfonate, etc. Acid addition salts such as inorganic acid salts such as hydrochlorides, hydrobromides, sulfates, phosphates; metal salts such as sodium, potassium, calcium, and magnesium salts; ammonium salts; trimethylamine salts, triethylamine salts , organic amine salts such as dicyclohexylamine salts, and the like.

化合物［１［］のカルボキシ基における好適な反応性誘
導体としては、酸ハロゲン化物、酸無水物、活性化アミ
ド、活性化エステル等が挙げられる。Suitable reactive derivatives of the carboxy group of compound [1[] include acid halides, acid anhydrides, activated amides, activated esters, and the like.

その好適な例としては、酸塩化物、酸アジド、ジアルキ
ル燐酸、フェニル燐酸、ハロゲン化燐酸等の置換された
燐酸、ピバリン酸、ペンタン酸、等の脂肪族カルボン酸
、または安息香酸等の芳香族：リルポン酸のような酸と
の混合酸無水物；対称酸無水物；イミダゾール、４−置
換イミダゾール、ジメチルピラゾール、トリアゾールま
たはテトラゾールとの活性化アミド；シアノメチルエス
テル、メトキシメチルエステル等の活性化エステル、Ｎ
、Ｎ−ジメデルヒドロキシアミン、１−ヒドロキシ−２
−（ＩＨ）−ピリドン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒドロキシ−６−
クロロ−ＩＨ−ベンゾトリアゾール等のＮ−ヒドロキシ
化合物とのエステル等が挙げられる。これらの反応性誘
導体は使用すべき化合物［１１］の種類に応じてそれら
の中から任意に選択することができる。Suitable examples include acid chlorides, acid azides, substituted phosphoric acids such as dialkyl phosphoric acids, phenyl phosphoric acids, and halogenated phosphoric acids; aliphatic carboxylic acids such as pivalic acid and pentanoic acid; and aromatic carboxylic acids such as benzoic acid. : mixed acid anhydrides with acids such as riluponic acid; symmetrical acid anhydrides; activated amides with imidazole, 4-substituted imidazole, dimethylpyrazole, triazole or tetrazole; activated esters such as cyanomethyl ester, methoxymethyl ester, etc. , N
, N-dimedylhydroxyamine, 1-hydroxy-2
-(IH)-pyridone, N-hydroxysuccinimide, N-hydroxyphthalimide, 1-hydroxy-6-
Examples include esters with N-hydroxy compounds such as chloro-IH-benzotriazole. These reactive derivatives can be arbitrarily selected from them depending on the type of compound [11] to be used.

反応は通常、水、メタノール、エタノール、アセトン、
ジオキサン、アセトニトリル、クロロホルト、塩化メチ
レン、塩化エチレン、テトラヒトし１フラン、酢酸エチ
ル、　Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、ピリジンのよう
な慣用の溶媒中で行なわれるが、反応に悪影響を及ぼさ
ない溶媒であれば、その他のいかなる溶媒中でも行なう
ことができる。これらの慣用の溶媒は水と混合して使用
してもよい。The reaction usually involves water, methanol, ethanol, acetone,
The reaction is carried out in a conventional solvent such as dioxane, acetonitrile, chloroform, methylene chloride, ethylene chloride, tetrahydrofuran, ethyl acetate, N,N-dimethylformamide, pyridine, but any solvent that does not adversely affect the reaction may be used. , or any other solvent. These conventional solvents may be used in combination with water.

化合物［Ｉ［］を遊離酸の形または塩の形で反応に使用
する場合、Ｎ、Ｎ’　−ジシクロへキシルカルボジイミ
ド；Ｎ−シクロへキシル−Ｎ′　−モルホリノエチルカ
ルボジイミド −Ｎ’−（４−ジエチルアミノシクロヘキシル）カルボ
ジイミド、　Ｎ．Ｎ’　−ジエチルカルボジイミド ；Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミンプロピル）
カルボジイミド；１−エチル−３−（　３−ジメチル）
カルボジイミド塩酸塩、Ｎ．Ｎ−カルボニルビス（２−
メチルイミダゾール）；亜燐酸トリアルキル：ポリ燐酸
エチル；オキシ塩化燐（塩化ホスホリル）；塩化チオニ
ル、塩化オキザリル；２−エチル−７−ヒトロキシベン
ズイソオキナゾリウム塩；１−（１）−クロロベンゼン
スル；１菟ニルオキシ）−６−クロロ−ＩＨ−ベンゾト
リアゾール；ジメチルホルムアミドと塩化チオニル、ホ
スゲン、オキシ塩化燐等との反応によって生成するいわ
ゆるビルスマイヤー試薬等のような慣用の縮合剤の存在
下に反応を行なうのが好ましい。When compound [I[] is used in the reaction in the form of free acid or salt, N,N'-dicyclohexylcarbodiimide;N-cyclohexyl-N'-morpholinoethylcarbodiimide-N'-(4- diethylaminocyclohexyl)carbodiimide, N. N'-diethylcarbodiimide;N-ethyl-N'-(3-dimethylaminepropyl)
Carbodiimide; 1-ethyl-3-(3-dimethyl)
Carbodiimide hydrochloride, N. N-carbonylbis(2-
Methylimidazole); trialkyl phosphite: polyethyl phosphate; phosphorus oxychloride (phosphoryl chloride); thionyl chloride, oxalyl chloride; 2-ethyl-7-hydroxybenzisooquinazolium salt; 1-(1)-chlorobenzene sulfate ;1)-6-chloro-IH-benzotriazole; produced by the reaction of dimethylformamide with thionyl chloride, phosgene, phosphorus oxychloride, etc. in the presence of a conventional condensing agent such as the so-called Vilsmeier reagent, etc. It is preferable to do this.

この反応はまた、アルカリ金属炭酸水素塩、トリ（低級
）アルキルアミン（例えば、トリメチルアミン、トリエ
チルアミン等）、ピリジン、Ｎ−（低級）アルキルモル
ホリン、Ｎ、Ｎ−ジ（低級）アルキルベンジルアミン等
のような無機塩基または有機塩基の存在下に行なっても
よい０反応温度は特に限定きれず、通常は冷却下または
常温で反応が行なわれる。This reaction also applies to alkali metal bicarbonates, tri(lower)alkylamines (e.g., trimethylamine, triethylamine, etc.), pyridine, N-(lower)alkylmorpholines, N,N-di(lower)alkylbenzylamines, etc. The reaction temperature, which may be carried out in the presence of an inorganic or organic base, is not particularly limited, and the reaction is usually carried out under cooling or at room temperature.

目的化合物ＣＩ］ならびに原料化合物［１］および［１
１１１に分子内の不斉炭素原子、二重結合等に基づく１
個以上の光学異性体や幾可異性体のような立体異性体が
含まれる場合、化合物［Ｉ］　、［Ｉ［］および［１＋
１］のそのような異性体ならびにそれらの混合物はすべ
てこの発明の範囲内に包含きれるものとする。target compound CI] and starting compounds [1] and [1
1 based on asymmetric carbon atoms, double bonds, etc. in the molecule in 111
When stereoisomers such as optical isomers or geometric isomers are included, the compounds [I], [I[] and [1+
1] as well as mixtures thereof are intended to be included within the scope of this invention.

この発明のプロドラッグ化合物［１］およびその塩類は
、血液中でマイトマイシンＣ，ＦＲ９００４８２物質、
ナイトロジェンマスタードあるいはシタラビン等の親化
合物にそれぞれ変換され、これらの親化合物はいずれも
抗腫瘍作用を有し、各種の癌（例えば、胃癌、肺癌、肺
腺癌、肝癌、直腸癌、膵臓癌、乳癌、子宮癌等）、白血
病（例えばリンパ性白血病、骨髄性白血病等）等の治療
に有用である。The prodrug compound [1] of this invention and its salts are present in the blood as mitomycin C, FR900482 substance,
These parent compounds are converted into parent compounds such as nitrogen mustard or cytarabine, which have antitumor effects and are effective against various cancers (e.g., gastric cancer, lung cancer, lung adenocarcinoma, liver cancer, rectal cancer, pancreatic cancer, etc.). It is useful in the treatment of breast cancer, uterine cancer, etc.), leukemia (eg lymphocytic leukemia, myeloid leukemia, etc.), and the like.

この発明のプロドラッグ化合物［１１は常法により、可
溶化製剤、エマルジョン製剤、リボソーム製剤等とした
後、例えば注射投与（例えば静脈注射、筋肉的注射、腫
瘍内注射等）、経口投与、直１１＆５投与等により生体
内に投与される。そして、血液中で徐々に親化合物（例
えばマイトマイシンＣ％ＦＲ９００４８２物質、ナイト
ロジェンマスタードあるいはシタラビン等）に変換きれ
、粗化合物自体を投与した場合に比べて、長時置載化合
物の血中濃度を持続し、その上抗腫瘍効果を向上し、毒
性をも軽減することができる。なお、上記の各種製剤の
中でも特にリボソーム製剤とした場合に最も血中濃度を
持Ｒ−ａせることができる。The prodrug compound [11] of the present invention is prepared by a conventional method into a solubilized preparation, an emulsion preparation, a ribosome preparation, etc., and then administered by injection (e.g., intravenous injection, intramuscular injection, intratumoral injection, etc.), oral administration, or direct administration. It is administered into the living body by administration, etc. Then, it is gradually converted into the parent compound (for example, mitomycin C%FR900482 substance, nitrogen mustard, or cytarabine) in the blood, and the blood concentration of the compound is maintained for a long time compared to when the crude compound itself is administered. Moreover, it can improve the antitumor effect and reduce toxicity. Furthermore, among the various preparations mentioned above, especially when used as a ribosome preparation, the blood concentration of R-a can be maintained the highest.

リボソーム製剤を製造する場合に膜材として使用される
リン脂質には、ホスファチジルコリン、ホスファチジル
エタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホス
ファチジルセリン、スフィンゴミエリン等の卵黄、大豆
その他動物組織に由来するもの、これらの混合物である
卵黄レシチンまたは大豆レシチンまたはジパルミトイル
レシチン、ジステアロイルレシチン等の合成レシチンが
挙げられる。これらのリン脂質には通常の添加物、例え
ばコレステロール類、ジセチルホスフエートあるいはα
−トフフェロールなどをｉ宜添加してもよい。Phospholipids used as membrane materials when manufacturing ribosome preparations include those derived from egg yolk, soybeans, and other animal tissues, such as phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylinositol, phosphatidylserine, and sphingomyelin, and mixtures thereof. Examples include synthetic lecithins such as egg yolk lecithin, soybean lecithin, dipalmitoyl lecithin, and distearoyl lecithin. These phospholipids are supplemented with the usual additives such as cholesterol, dicetyl phosphate or alpha
- Tofuferol and the like may be added as appropriate.

リボソーム製剤は公知の方法により製造することができ
る。すなわち、プロドラッグ化合物［！コまたはその塩
類とリン脂質をクロロホルム、メタノール、エタノール
等の適当な溶媒に溶解し、これを適当な容器に入れ溶媒
を減圧下に留去し、次に界面活性剤（例えばコール酸ナ
トリウム等）および水溶液（例えばリン酸緩衝生理食塩
水等）を６加し、振盪、可溶化した後、界面活性剤除去
装置を用いてこの溶液から界面活性剤を除去して製造す
ることができる。Ribosome preparations can be produced by known methods. That is, the prodrug compound [! Dissolve Co or its salts and phospholipids in a suitable solvent such as chloroform, methanol, or ethanol, place this in a suitable container, and remove the solvent under reduced pressure. It can be produced by adding an aqueous solution (for example, phosphate buffered saline, etc.), shaking and solubilizing it, and then removing the surfactant from this solution using a surfactant removal device.

また、リン脂質をクロロホルム、エタノール等の有機溶
媒に溶解し、これを適当な容器に入れ、溶媒を減圧下に
留去し、リン脂質の薄膜を容器内面に形成させた後に、
プロドラッグ化合物［１１またはその塩類の水溶液を入
れ、振盪するかあるいは超音波処理して製造することも
できる。In addition, after dissolving phospholipids in an organic solvent such as chloroform or ethanol, placing the solution in a suitable container, and distilling off the solvent under reduced pressure to form a thin film of phospholipids on the inner surface of the container,
It can also be produced by adding an aqueous solution of the prodrug compound [11 or a salt thereof, followed by shaking or ultrasonication.

さらにエーテル注入法などの慣用の方法によっても製造
することができ、リボソーム製剤の製造法は特に限定き
れない。Furthermore, they can be produced by conventional methods such as ether injection, and the method for producing ribosome preparations is not particularly limited.

この発明のプロドラッグ化合物［１］およびその塩類は
通常１　ｍｇ＝　１０００ｍｇの単位投与量で１日１〜
４回投与されるが、投与量は親化合物の種類、患者の年
齢、体重、症状、投与方法、他の抗Ｉｌｉ瘍剤との併用
等により適宜増減諮れる。また、注射投与の場合には、
上記投与量を例えば週１〜２回あるいは１〜３週間以上
の量線で投与してもよい。The prodrug compound [1] of this invention and its salts are usually administered at a unit dosage of 1 mg = 1000 mg once a day.
Although the drug is administered 4 times, the dose may be increased or decreased as appropriate depending on the type of parent compound, patient's age, weight, symptoms, administration method, co-administration with other anti-Ilium agents, etc. In addition, in the case of injection administration,
The above dosages may be administered, for example, once or twice a week or over a period of 1 to 3 weeks.

［発明の効果］ 以下、本発明の効果を試験例により説明する。[Effect of the invention] The effects of the present invention will be explained below using test examples.

ヒ合　への　１試　１ 卵黄レシチン８４μｍｏｌｅ、卵黄スフ、インゴミエリ
ン３６μｍｏｌｅおよび後記の実施例１あるいは実施例
２で得られたマイトマイシンＣプロドラッグをそれぞれ
６μｍｏｌｅ含有するクロロホルム溶液を丸底フラスコ
に分取し、クロロホルムを留去した。これ（こ−１−ル
酸ナトリウム２５８ｍｇおよびｐＨ７，４リン酸惺衝生
理食塩水（以下ＰＢＳという）４．８誠を添加後以盪し
紫色の澄明な液を得た０次いでリボプレツブ（界面活性
剤除去装置、商標、ダイアノーム社製）を用いて、この
液からコール酸ナトリウムを除去して、マイトマイシン
Ｃプロドラッグを含有ｒるリボソーム懸、濁液を得た。1 Trial 1 A chloroform solution containing 84 μmole of egg yolk lecithin, 36 μmole of egg yolk soup, 36 μmole of ingomyelin, and 6 μmole each of the mitomycin C prodrug obtained in Example 1 or Example 2 described later was dispensed into a round bottom flask. , chloroform was distilled off. After adding 258 mg of sodium chlorate and 4.8 mg of pH 7.4 phosphate-strengthened saline (hereinafter referred to as PBS), it was further shaken to obtain a purple clear liquid. Sodium cholate was removed from this solution using a drug removal device (trademark, manufactured by Dianorm) to obtain a ribosome suspension containing mitomycin C prodrug.

一方卵黄しシチン７０μｍｏｌｅ、卵黄スフィンゴミ工
り７３０　ＩＩ　ｍｏｌｅおよびＦＲ９００４８２物質
のプロドラッグ（実施例６）５μｍｏｌｅを含有するク
ロロホルム溶液を丸底フラスコに分取し、以下上記の方
法と同様にして、ＦＲ９００４８２物質のプロドラッグ
含有リボソーム懸濁液を得た。On the other hand, a chloroform solution containing 70 μmole of egg yolk cytin, 730 II mole of egg yolk sphingomylic acid, and 5 μmole of the prodrug of FR900482 substance (Example 6) was dispensed into a round bottom flask, and the FR900482 substance was prepared in the same manner as described above. A prodrug-containing ribosome suspension was obtained.

上記２種類のマイトマイシンＣプロドラッグ含有リボソ
ーム懸濁液はＰＢＳでそれぞれ２．５倍に希釈した。ま
たＦＲ９００４８２物質プロドラッグ含有リボソーム懸
濁液は、ＦＲ９００４８２物質プロドラッグ濃度が０．
５μｍｏｌｅ／−となるようにＰＢＳで希釈し、ｍ１ｌ
ｌａｘ−ＧＶ　（商標、ミリボアー社製）フィルター（
０，２２μ）で濾過した。The above two types of mitomycin C prodrug-containing ribosome suspensions were each diluted 2.5 times with PBS. Further, the ribosome suspension containing the FR900482 substance prodrug has a FR900482 substance prodrug concentration of 0.
Dilute with PBS to 5μmole/-, ml
lax-GV (trademark, manufactured by Millibore) filter (
0.22μ).

マウス、ラットおよびヒトの各血清（４，５１＋１１１
．３７°Ｃ）に上記のリボソーム懸濁液および各プロド
ラッグのエタノール溶液０．５１１１１１を添加後、経
時的にサンプリングし、サンプル中のプロドラッグ濃度
を高速液体クロマトグラフィーにより定量した。Mouse, rat and human serum (4,51+111
．． After adding the above ribosome suspension and 0.511111 of an ethanol solution of each prodrug to the solution at 37°C, samples were taken over time, and the prodrug concentration in the sample was determined by high performance liquid chromatography.

種々の血清中におけるそれぞれのプロドラッグから親化
合物への変換半減期（ｔに）を各時点のそれぞれのプロ
ドラッグの残存量より算出した。The conversion half-life (t) of each prodrug to the parent compound in various serums was calculated from the remaining amount of each prodrug at each time point.

区！呈１ 表１に種々の血清中におけるそれぞれのプロドラッグか
ら親化合物への変換半減期（ｔに）を示す。Ward! Exhibit 1 Table 1 shows the conversion half-life (in t) of each prodrug to the parent compound in various sera.

酉−１ 上記の試験結果から、この発明のプロドラッグがｉｎ　
ｖｉｔｒｏの血液中で親化合物に変換されること、およ
びリボソーム中への各々のプロドラッグの取り込みがそ
の変換半減期を長くしていることがわかる。Rooster-1 From the above test results, it is clear that the prodrug of this invention
It can be seen that it is converted to the parent compound in vitro blood and that the incorporation of each prodrug into ribosomes increases its conversion half-life.

化合物への　換試験２ 卵黄レシチン７０μｍｏｌｅｓ卵黄スフィンゴミエリン
３０μｍｏｌ＠および後記の実施例８で得られたシタラ
ビンプロドラッグ（実施例８）３０μｍｏｌｅを含有す
るクロロホルム−メタノール混液（８：２ｖ／ｖ　）を
丸底フラスコに分取し、溶媒を留去した。これにコール
酸ナトリウム５３．８ｍｇおよびＰＢＳ５、Ｑｍｌ！を
添加後援とうし無色の澄明な液を得た。Conversion test 2 to compound A chloroform-methanol mixture (8:2 v/v) containing 70 μmoles of egg yolk lecithin, 30 μmol of egg yolk sphingomyelin, and 30 μmol of the cytarabine prodrug (Example 8) obtained in Example 8 below was added to a round bottom. The mixture was fractionated into a flask, and the solvent was distilled off. Add to this 53.8 mg of sodium cholate and 5 PBS, Qml! A colorless and clear liquid was obtained after adding the turmeric.

次いでリボプレツブを用いて、コール酸ナトリウムを除
去しシタラビンプロドラッグを含有するリボソーム懸濁
液を得た。リボソーム懸Ａｒ＆は、薬物濃度が５μｍｏ
　ｌｅ　／　ｍＱとなるようにＰＢＳで希釈し、０．２
．０．１および０．０８μのポリカーボネートメンプラ
ンにュークリポア社製）で順次濾過し、続いてｍ１ｌｌ
ｅｘ−ＧＶフィルター（０，２２μ）で濾過した。The sodium cholate was then removed using riboprebs to obtain a ribosome suspension containing the cytarabine prodrug. Ribosome-suspended Ar& has a drug concentration of 5 μmo
Dilute with PBS to give le/mQ, 0.2
．． 0.1 and 0.08μ polycarbonate membranes (manufactured by Euclepore), followed by ml
Filtered through ex-GV filter (0.22μ).

ラットの血清（４，０ｍＱ、３７℃）に上記のリボソー
ム懸濁液およびシタラビンプロドラッグのエタノール溶
液０．０８ｍＱを添加後、経時的にサンプリングし、サ
ンプル中のシタラビンプロドラッグ濃度を高速液体クロ
マトグラフィーにより定量した。After adding 0.08 mQ of the above ribosome suspension and cytarabine prodrug ethanol solution to rat serum (4.0 mQ, 37°C), samples were taken over time, and the cytarabine prodrug concentration in the sample was measured by high performance liquid chromatography. It was quantified by

親化合物への変換の半減期＜を号）を各時点のシタラビ
ンプロドラッグの残存量より算出した。The half-life of conversion to the parent compound (< ) was calculated from the remaining amount of cytarabine prodrug at each time point.

区！亙り 表２にプロドラッグから親化合物への変換半減期（を号
）を示す。Ward! Table 2 shows the conversion half-life (numbered) from the prodrug to the parent compound.

上記の試験結果から、この発明のプロドラッグがｉｎ　
ｖｉｔｒｏの血液中で親化合物に変換されること、およ
びリボソーム中へのプロドラッグの取り込みがその変換
半減期を長くしていることがわかる。From the above test results, it is clear that the prodrug of this invention
It can be seen that it is converted to the parent compound in vitro blood and that the incorporation of the prodrug into ribosomes increases its conversion half-life.

盈ＪＩ（１１ 卵黄レシチン１２６μｍｏｌｅ、卵黄スフィンゴミエリ
ン５４μｍｏｌｅおよびマイトマイシンＣプロドラッグ
（実施例１）２４μｍｏｌｅを含有するクロロホルムｌ
ｄ液１４．３ｆｆｌＱを丸底フラスコに分取し、１時間
クロロホルムを留去した。これにコール酸ナトリウム１
９４ｍｇおよびＰｕｓ　６　ｍｌＬを添加後振盪し、以
下上記と同様の方法により、フィトマイシンＣプロドラ
ッグ含有リボソーム懸濁液を得た。Chloroform l containing 126 μmole of egg yolk lecithin, 54 μmole of egg yolk sphingomyelin and 24 μmole of mitomycin C prodrug (Example 1)
14.3 fflQ of liquid d was fractionated into a round bottom flask, and chloroform was distilled off for 1 hour. In this, sodium cholate 1
After adding 94 mg and 6 ml of Pus, the mixture was shaken, and a ribosome suspension containing phytomycin C prodrug was obtained in the same manner as described above.

寿られたリボソーム懸濁液をマイトマイシンＣプロドラ
ッグ濃度が３．０μａ＋ｏｌｅ／−となるようにＰＢ５
で希釈し、ポリカーボネートメンプラン（０，１μ）に
より濾過した。ＳＤ系雌雄性ラット７退動、体重的３０
０ｇ、１群４匹）にマイトマイシンＣのＰＢＳ溶液およ
び上記の方法で調製したマイトマイシンＣプロドラッグ
含有すポソーム！！濁液１．０ＩＩＩＱ（両者ともマイ
トマイシンＣとして３．０μｍｏ　ｌｅ金含有をそれぞ
れ静脈注射し、経時的に鎖骨上静脈より採血した。血中
のマイトマイシンＣの濃度は、遠心分離した血漿を除タ
ンパク後、高速液体クロマトグラフィーにより測定した
。また、血中マイトマイシンＣプロドラッグの濃度は、
血液を凍結乾燥後エタノールで抽出し、高速液体クロマ
トグラフィーにより測定した。The suspended ribosome suspension was diluted with PB5 so that the mitomycin C prodrug concentration was 3.0 μa + ole/−.
and filtered through polycarbonate membrane (0.1μ). SD male and female rats 7 withdrawal, weight 30
0 g, 4 animals per group) containing a PBS solution of mitomycin C and a mitomycin C prodrug prepared by the above method! ! A cloudy solution 1.0IIIQ (both containing 3.0 μmole gold as mitomycin C) was injected intravenously, and blood was collected from the supraclavicular vein over time. The concentration of mitomycin C in the blood was determined by centrifuged plasma after protein removal. , measured by high-performance liquid chromatography.In addition, the concentration of mitomycin C prodrug in blood was
Blood was lyophilized, extracted with ethanol, and measured using high performance liquid chromatography.

区竺亙１ 表３にマイトマイシンＣおよびマイトマイシンＣプロド
ラッグ（実施例１）の血中濃度をラット４匹の平均値上
標準偏差として示す。Table 3 shows the blood concentrations of mitomycin C and mitomycin C prodrug (Example 1) as the average value above the standard deviation of 4 rats.

上記の試験結果からプロドラッグを含有するリボソーム
懸濁液は親化合物（マイトマイシンＣ）の１１：Ｉ中濃
度を長時間持続することがわかる。The above test results show that the ribosomal suspension containing the prodrug maintains the 11:I medium concentration of the parent compound (mitomycin C) for a long time.

吸排試験２ Ｌ：記の吸排試験１で調製したマイトマイシンＣプロド
ラッグ（実施例１）含有リボソーム懸濁液をマイトマイ
シンＣプロドラッグ濃度が２．５μｍｏｌｅ／　ｍＱと
なるようにＰＢＳで希釈し、ポリカーボネートメンプラ
ン（０，１μ）により濾過した０次にＩＣＲ系雌性マウ
ス（８退動、体重的２５ｇ、１群３匹）にマイトマイシ
ンＣのＰＢＳ溶液およびマイトマイシンＣブ【」ドラッ
グ含有リボソーム懸濁液０．２ｒＭｉをそれぞれ静脈注
射し、一定時間経過後、エーテル麻酔下に心臓より採血
した。血中のマイトマイシンＣの１ｆｆｉＪ＆およびマ
イトマイシンＣプロドラッグの濃度を吸排試験１の場合
と同様にして測定した。Suction and Expulsion Test 2 L: The mitomycin C prodrug (Example 1)-containing ribosome suspension prepared in Suction and Exhaust Test 1 was diluted with PBS so that the mitomycin C prodrug concentration was 2.5 μmole/mQ. A PBS solution of mitomycin C and a drug-containing ribosomal suspension containing mitomycin C were added to ICR female mice (8 incubations, weight 25 g, 3 mice per group) filtered through Plan (0.1μ). 2rMi was injected intravenously, and after a certain period of time, blood was collected from the heart under ether anesthesia. The concentrations of 1ffiJ& of mitomycin C and mitomycin C prodrug in the blood were measured in the same manner as in Suction and Expulsion Test 1.

枚に及逮 表４にマイトマイシンＣおよびマイトマイシンＣプロド
ラッグ（実施例１）の血中濃度をマウス３匹の平均値上
標準偏差として示す。Table 4 shows the blood concentrations of mitomycin C and mitomycin C prodrug (Example 1) as the average value and standard deviation of three mice.

−上記の試験結果からプロドラッグを含有するリボソー
ム懸濁液は親化合物（マイトマイシンＣ）の血中濃度を
長時間持続することがわかる。- The above test results show that the ribosome suspension containing the prodrug maintains the blood concentration of the parent compound (mitomycin C) for a long time.

父匪輩勇Ｊ マイトマイシンＣプロドラッグ（実施例１）４μｍｏｌ
ｅ　、バナセート８００（商標、日本油脂株式会社製）
　４０ｍｇ、卵黄レシチン１４ｍｇおよび）ＩｃＯ−６
０＜商標、日光ケミカルズ株式会社製）８ｍｇをそれぞ
れ含イ１するクロロホルム溶液を丸底フラスコに合し、
クロロホルムを留去した。これにＰＢ５１ｍＱをｌ添加
し、ソニケーターによりマイトマイシンＣプロドラッグ
のエマ元ジョン製剤を得た。一方マイトマインンＣプロ
ドラッグ（実施例１）４μｍｏｌｅＪ’ＪよびＨＣＯ−
６０２４ｍｇ含有のそれぞれのクロロホルム溶液を丸底
フラスコに合し、クロロホルムを留去した。残渣をＰＢ
Ｓ　１−に分散ル、激しく攪拌して澄明な溶液を得た。Isamu Chichiyoshi J Mitomycin C prodrug (Example 1) 4 μmol
e, Vanasate 800 (trademark, manufactured by NOF Corporation)
40mg, egg yolk lecithin 14mg and) IcO-6
0<Trademark, manufactured by Nikko Chemicals Co., Ltd.) A chloroform solution containing 8 mg each of 1 was combined in a round bottom flask,
Chloroform was distilled off. To this was added 1 PB51mQ, and an emulsion preparation of mitomycin C prodrug was obtained using a sonicator. On the other hand, mitomain C prodrug (Example 1) 4 μmole J'J and HCO-
Each chloroform solution containing 6024 mg was combined in a round bottom flask, and the chloroform was distilled off. PB the residue
Disperse in S1- and stir vigorously to obtain a clear solution.

このようにして得た２種類の製剤をそれぞれＱ４ｍｌ（
薬物をそれぞれ４１　ｍｏｌｅ／　ｍ！１含有）吸排試
験２の場合と同様にしてマウスに静脈注射し、血中のマ
イトマイシンＣの濃度およびマイトマイシンＣプロドラ
ッグの濃度を測定した。Q4ml of each of the two types of preparations obtained in this way (
41 mole/m of each drug! 1) In the same manner as in Inhalation and Exhaust Test 2, mice were intravenously injected, and the concentration of mitomycin C and mitomycin C prodrug in the blood were measured.

Ａ隻囚り 表５に２種類のマイトマイシンＣプロドラッグ（実施例
１）含有製剤をマウスに静脈注射した時のマイトマイシ
ンＣおよびマイトマイシンＣプロドラッグの血中濃度を
マウス３匹の平均値上標準偏差として示す。Table 5 shows the blood concentrations of mitomycin C and mitomycin C prodrug when mice were intravenously injected with preparations containing two types of mitomycin C prodrugs (Example 1), and the standard deviation above the average value of 3 mice. Shown as

底−互 上記の試験結果から、プロドラッグをエマルジョン製剤
あるいは可溶化製剤にしたものは粗化合物（マイトマイ
シンＣ）の血中濃度を長時間持続することがわかる。The above test results show that emulsion or solubilized prodrugs maintain the blood concentration of the crude compound (mitomycin C) for a long time.

麩」す１１工 卵黄レシチン１４７μｍｏｌａｓ　卵黄スフィンコミニ
リン６３μｍｏｌｅおよびシタラビンプロドラッグ（実
施例８）４２μｍｏｌｅを含有するクロロホルム−メタ
ノール混液（８：　２　ｖ／ｖ、　１２ｍ１　）を丸底
フラスコに分取し、３７”Ｃで１０分間溶媒を留去した
。A chloroform-methanol mixture (8:2 v/v, 12 ml) containing 147 μmoles of egg yolk lecithin, 63 μmoles of egg yolk sphincominilin, and 42 μmoles of cytarabine prodrug (Example 8) was dispensed into a round-bottomed flask. The solvent was evaporated at C for 10 minutes.

これにコール酸ナトリウム２６２．５μｌ１１ｏ　Ｌａ
およびＰＢＳ７ｍ１１を雁加後振盪し、以下前記忽」２
脱土にΣの一！ユに記載し４た方法と同様にして、シタ
ラビンプロドラッグの含量が５μｍｏｌｅ／ｍであるリ
ボソーム懸遡液を得た。Add 262.5μl of sodium cholate to this.
Then shake 7ml of PBS and shake as described above.
The best way to get rid of the soil! A ribosome suspension solution having a cytarabine prodrug content of 5 μmole/m was obtained in the same manner as described in Section 4.

ＳＤ系雄性ラット（７通論、体重約２５０ｇ、１群４匹
）にシタラビンの水溶液および上記の方法で調製したシ
タラビンプロドラッグ含有リボソーム懸濁液１．ｏｆｆ
ｌＱ（両者とも４５μｍｏｌｅ／ｍ１１含有）をそれぞ
れ静脈注射し、経時的に頚部静脈より採血した。An aqueous solution of cytarabine and a ribosome suspension containing a cytarabine prodrug prepared by the above method were administered to SD male rats (7 rats, body weight approximately 250 g, 4 rats per group).1. off
1Q (both containing 45 μmole/ml) was injected intravenously, and blood was collected from the jugular vein over time.

血中のシタラビンおよびシタラビンプロドラッグの濃度
はそれぞれ高速液体クロマトグラフィーにより測定した
。The concentrations of cytarabine and cytarabine prodrug in blood were each measured by high performance liquid chromatography.

バｊＩＩ米 表６にシタラビンおよびシタラビンプロドラッグ（実施
例８）の血中濃度をラット４匹の平均値±標準偏差とし
て示す。Table 6 shows the blood concentrations of cytarabine and cytarabine prodrug (Example 8) as the mean value ± standard deviation of 4 rats.

ｊ二足の試験結果からプロドラッグを含有するリボソー
ム懸濁液は親化合物（シタラビン）の血中濃度を長時間
持続することがわかる。The results of the two-leg test show that the ribosomal suspension containing the prodrug maintains the blood concentration of the parent compound (cytarabine) for a long time.

毒性試験 卵黄レシチン１冫６８ リン５４μｍｏｌｅおよびマイトマイシンＣプロドラッ
グ（実施例１）をそれぞれ３．７５、２４、３７，５μ
ｍｏｌｅ含有するクロロホルム溶液を丸底フラスコに合
し、クロロホルムを留去し、以下上記の方法と同様にし
てマイトマイシンＣプロドラッグ含有リボソーム懸濁液
を得た．このリボソーム懸濁液をマイトマイシンＣプロ
ドラッグの濃度がそれぞれ０、１５、０，９６、１．５
ＱｍｇｉイトマイシンＣ相当／　ｍＱとなるようにＰＢ
Ｓで希釈し、ポリカーボネート・メンプラン（０１μ）
により濾過した。Toxicity test Egg yolk lecithin 1 68 phosphorus 54 μmole and mitomycin C prodrug (Example 1) at 3.75, 24, 37, 5 μm, respectively
The chloroform solution containing mole was combined in a round bottom flask, the chloroform was distilled off, and a ribosome suspension containing mitomycin C prodrug was obtained in the same manner as above. This ribosome suspension was prepared at concentrations of mitomycin C prodrug of 0, 15, 0.96, and 1.5, respectively.
Qmgi equivalent to tomycin C/PB to be mQ
Diluted with S, polycarbonate membrane run (01μ)
It was filtered by

ＩＣＲ系雄性マウス（６週齢）に、マイトマイシンＣ　
ＰＢＳ溶液（投与量：１．０および６．４ｍｇ／ｋｇ／
日）および上記のマイトマイシンＣプロドラッグ含有リ
ボソーム懸濁液（投与量：マイトマイシンＣとして１．
０、６，４、１　０ｍｇ／　ｋｇ　／日）をそれぞれマ
ウスに１日目、３日目および５日目の計３回静脈注射に
より投与し、投与１日目から１５日目までの体重を測定
した。Mitomycin C was administered to ICR male mice (6 weeks old).
PBS solution (dose: 1.0 and 6.4 mg/kg/
) and the above mitomycin C prodrug-containing ribosomal suspension (dosage: 1.5 as mitomycin C).
0, 6, 4, 10 mg/kg/day) were administered to mice by intravenous injection three times on the 1st, 3rd, and 5th days, and the body weights were measured from the 1st day to the 15th day of administration. It was measured.

人狭塁３ 表７にそれぞれの製剤を静脈注射投与したときのマウス
の体重変化を５匹の平均値上標準偏差として示す。Human Narrow Base 3 Table 7 shows the changes in body weight of mice when each preparation was administered by intravenous injection as the average value and standard deviation of five mice.

嚢−１− プロドラッグを含有するリボソーム懸濁液は親化合物の
水溶液と比べ毒性の低いことがわかる。It can be seen that the ribosomal suspension containing the capsule-1 prodrug is less toxic than the aqueous solution of the parent compound.

仄１Ｊ口１（１１ 卵黄レシチン２４５μｍｏｌｅ，卵黄スフィンゴミエリ
ン１０５μｍｏｌｅおよびシタラビンプロドラッグ（実
施例８）をそれぞれ８７，５、２６２．　５μｍｏｌｅ
を含有するクロロホルヘーメタノール溶液（８：２ｖ／
ｖ　）を丸底フラスコにとり、以下上記と同様の方法に
よりシタラビンプロドラッグ濃度が１０および２０μｍ
ｏ　ｌｅ　／　ｍＱであるリボソーム懸濁液を得た。245 μmole of egg yolk lecithin, 105 μmole of egg yolk sphingomyelin and 87.5 μmole of cytarabine prodrug (Example 8), respectively.
Chlorophorhe methanol solution containing (8:2v/
v) in a round-bottomed flask, and the same method as above was used to adjust the cytarabine prodrug concentration to 10 and 20 μm.
A ribosome suspension of ole/mQ was obtained.

マウス白血病細胞Ｌ　１２１０　（　１０５個）をＢＤ
Ｆ系雌性マウス（７週令）に腹腔内移植した．移植後２
４時時間化、シタラビン水溶液（投与量：　ｔｏｏｏお
よび３０００μｍｏｌｅ／　ｋｇ　）、上記のシタラビ
ンプロドラフグ含有リボソーム懸濁液（投与量＝１００
および３００μｍｏｌｅ／　ｋｇ　）、および下記の構
造式で表わされる公知のシタラビンプロドラッグ化合物
である　Ｎ４−ビヘノイルー１−β−アラビノフラノシ
ルントシン（以下ＢＨＡＣという）水溶液（投与量：１
００および３００μｍｏｌｅ／　ｋｇ　）をそれぞれマ
ウス体重２０息あたり０．　２ｍｊｌおよびＱ，３ｍ１
１（シタラビンプロドラ７グ３００μｍｏｌｅ／　ｋｇ
投与の場合）の割合で静脈注射投与した。投与後のマウ
スの生死を調べた７ＢＨＡＣ ○ Ｉ 試験結果 表８にそれぞれの製剤を投与したときのマウスを示す。Mouse leukemia cells L1210 (105 cells) were transferred to BD
It was intraperitoneally transplanted into F-strain female mice (7 weeks old). After transplant 2
4 hours, cytarabine aqueous solution (dose: too and 3000 μmole/kg), and the above cytarabine prodrug-containing ribosomal suspension (dose = 100 μmole/kg).
and 300 μmole/kg), and an aqueous solution (dose: 1
00 and 300 μmole/kg) per 20 breaths of mouse body weight, respectively. 2mjl and Q, 3m1
1 (Cytarabine Prodrug 7g 300 μmole/kg
Administered by intravenous injection at a rate of Table 8 shows the results of the 7BHAC ○ I test to determine whether the mice were alive or dead after administration.

茗−１ この発明のプロドラッグを含有するリボソーム懸濁液は
、その親化合物の水溶液およびＢＨＡＣ水溶液と比べ抗
腫瘍効果の優れていることがわかる。Meat-1 It can be seen that the ribosome suspension containing the prodrug of this invention has superior antitumor effects compared to the aqueous solution of its parent compound and the aqueous BHAC solution.

抗腫瘍性試験２ 卵黄レンチン２４５μｍｏｌｅ、卵黄スフィンゴミエリ
ン１０５μｍｏｌｅおよびシタラビンプロドラッグ（実
施例８）をそれぞれ８７．５および１５７．５μｍｏｌ
ｅを含有するクロロホルム−メタノール溶液（３：ｌｖ
／ｖ）を丸底フラスコにとり、以下前記抗腫瘍性試験１
の場合と同様にしてシタラビンプロドラッグ濃度が１０
および１８μｍｏｌｅ／ｍＡであるリボソーム懸濁液を
得た。Antitumor Test 2 245 μmol of egg yolk lentin, 105 μmole of egg yolk sphingomyelin, and 87.5 and 157.5 μmol of cytarabine prodrug (Example 8), respectively.
Chloroform-methanol solution (3:lv) containing e.
/v) in a round-bottomed flask, and carry out the following antitumor test 1.
In the same way as in the case of cytarabine prodrug concentration is 10
and a ribosome suspension of 18 μmole/mA was obtained.

ヒト肺腺癌Ａ３４９の切片をＢＤＦ　１系雌性マウス（
８適冷）に腎被膜下移植した。Sections of human lung adenocarcinoma A349 were isolated from BDF 1 female mice (
The kidney was transplanted under the kidney capsule at 8 days (appropriate cooling).

移植後１．５および９日目に、シタラビン水溶液（投与
量１０００μｍｏｌｅ／　ｋｇ　）および上記のシタラ
ビンプロドラッグ含有リボソーム懸、濁液（投与ｒｌ：
　：　ｔｏｏおよび１８０μｍｏｌｅ／　ｋｇ　）をマ
ウス体重２０ｇあたり０２ｍＱ静脈注射投与した。On days 1.5 and 9 after transplantation, aqueous cytarabine solution (dose 1000 μmole/kg) and the above cytarabine prodrug-containing ribosome suspension, suspension (dose rl:
: too and 180 μmole/kg) was administered intravenously at a dose of 02 mQ per 20 g of mouse body weight.

投与後１４日目における腫瘍体積を測定し、成長抑制率
を求めた。（この試験において各製剤の抗腫瘍効果を明
確にみるために、１７−アリル−１゜１４−ジヒドロキ
シ−１２−［２−（４−ヒドロキン−３−メトキンシク
ロヘキシル）−１−メチルビニル］−２３，２５−ジメ
トキシ−１３，１９，２Ｌ　２７−テトラメチル−１１
，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３、１
、０’°９コオクタコスー１８−エンー２　、３．１０
．１６−チトラオンを免疫抑制物質として、移植後１．
２．５．７．９および１２日目に各３２ｍｇ／驕を皮下
投与した。） 試験結果 表９にそれぞれの製剤を静脈注射投与した時の移植後１
４日目における腫瘍体積および腫瘍の成長抑制率を示す
。The tumor volume was measured on the 14th day after administration, and the growth inhibition rate was determined. (In this test, in order to clearly see the antitumor effect of each preparation, 23,25-dimethoxy-13,19,2L 27-tetramethyl-11
,28-dioxa-4-azatricyclo[22,3,1
,0'°9octacosu18-en-2 ,3.10
．． 1. After transplantation using 16-titraone as an immunosuppressant.
On days 2.5, 7.9 and 12, 32 mg/dose was administered subcutaneously. ) Test results Table 9 shows the results after transplantation when each formulation was administered by intravenous injection.
The tumor volume and tumor growth inhibition rate on day 4 are shown.

表−」− この発明のプロドラッグを含有するリボソーム懸濁液は
、その親化合物の水溶液と比べ抗腫瘍効果の優れている
ことがわかる。Table 1: It can be seen that the ribosome suspension containing the prodrug of the present invention has superior antitumor effects compared to the aqueous solution of its parent compound.

［実施例コ 以下、製造例および実施例により、この発明をさらに詳
細に説明する。[Example] The present invention will be explained in more detail with reference to production examples and examples.

製造例１ グリシン（１，５０ｇ）の水（１００ｍ１１　）懸濁液
中にトリエチルアミン（４，０４ｇ）を加える。得られ
る透明な溶液にジオキサン（２００ｍ１１　）およびク
ロロ義酸コレステロール（８，９８ｇ）を０℃で加え、
その混合物を３時間攪拌する０反応混合物を減圧下で濃
縮し、残渣にＩＮ塩酸（２３ｍｍ　）およびクロロホル
ム（ＬＯＯｍｌ＋　）を加える。有機層を分離し、水で
洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を留去し！結
晶を得、次いでエタノールで洗浄したのし濾取して白色
結晶のＮ−（コレスト−５−エン−３β−オキジカルボ
ニル）グリシン（６，６４Ｋ）を得る。Production Example 1 Triethylamine (4.04 g) is added to a suspension of glycine (1.50 g) in water (100 ml). Dioxane (200ml) and cholesterol chloroformate (8.98g) were added to the resulting clear solution at 0°C.
The mixture is stirred for 3 hours. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure and IN hydrochloric acid (23 mm) and chloroform (LOO ml+) are added to the residue. Separate the organic layer, wash with water and dry over magnesium sulfate. Distill the solvent away! Crystals are obtained, then washed with ethanol and collected by filtration to obtain white crystals of N-(cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl)glycine (6,64K).

融点：　１７５−１７７℃（分解） ＩＲ（ス九−ル）　：　　３３２０．　１７５０．　１
６６５．　１５７０　　ｃｍ−’製造例２ Ｎ−（フレスト−５−エン−３β−オキジカルレボニル
）グリシン（２，９２ｇ　）をジオキサン（４０ａＱ　
）とクロロホルム（６戚）の混合液に溶解した液にＮ−
ヒドロキシスクシンイミド（０，６９ｇ）とジシクロへ
キシルカルボジイミド（１，２３６ｇ　）を０°Ｃで連
続的に加え、反応混合物を１６時間冷蔵庫中に放置する
。Melting point: 175-177°C (decomposition) IR (Skyl): 3320. 1750. 1
665. 1570 cm-' Production Example 2 N-(frest-5-ene-3β-oxycarlevonyl)glycine (2,92 g) was mixed with dioxane (40 aQ
) and chloroform (6 relatives).
Hydroxysuccinimide (0,69 g) and dicyclohexylcarbodiimide (1,236 g) are added sequentially at 0° C. and the reaction mixture is left in the refrigerator for 16 hours.

得られる沈殿物を濾取し、濾液を減圧下で濃縮してＮ−
（コレスト−５−エン−３β−オキジカルボニル）グリ
シンのスクシンイミドエステル（３，２３ｇ）を得る。The resulting precipitate was collected by filtration, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to give N-
Succinimide ester of (cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl)glycine (3.23 g) is obtained.

融点：　１５９−１６４℃ ＩＲ（クロロホルム）　　：　　３４４０．　１８２０
．　１７８５．　１７４０゜１７２０　Ｃｍ−１ １章週１ β−アラニン（５６ｍｇ）および炭酸水素ナトリウム（
８４ｍｇ）の水（ｔｏｍｌｌ）溶液にテトラヒドロフラ
ン（２０ａＱ　）およびクロロ義酸コレステロール（４
４９ｍｇ）を０°Ｃで加え混合物を１時間攪拌する。反
応混合物を減圧下で濃縮し、残渣に０．ＩＮ塩酸（１０
ａＱ　）およびクロロホルム（４０ｍ１　）を加える。Melting point: 159-164°C IR (chloroform): 3440. 1820
．． 1785. 1740°1720 Cm-1 Chapter 1 Week 1 β-Alanine (56 mg) and Sodium Bicarbonate (
Tetrahydrofuran (20 aQ ) and cholesterol chloroformate (4
49 mg) at 0°C and the mixture was stirred for 1 hour. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure to give a residue of 0. IN hydrochloric acid (10
aQ ) and chloroform (40 ml).

有機層を分離し、水で洗浄し、硫酸マグネジ・クムで乾
燥する。溶媒を留去して粗生成物を得、これをクロロホ
ルムに溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィ−（
４０ｇ）に付す。クロロホルム、およびメタノールの混
合液で溶出して白色粉末ｃｙ＞Ｎ−（フレスト−５−エ
ン−３β−オキジカルボニル）−β−アラニン（１ａ７
ｍｇ）を得る。The organic layer is separated, washed with water, and dried over magnesi cum sulfate. The solvent was distilled off to obtain a crude product, which was dissolved in chloroform and subjected to silica gel column chromatography (
40g). Elution with a mixture of chloroform and methanol yielded a white powder cy>N-(frest-5-en-3β-oxydicarbonyl)-β-alanine (1a7
mg).

融点：　１２７−１３０℃ ＩＲ＜’）口ｏｓルム）　　’　　３４５０．　１７０
５　　ｃｍ−’製造例４ ６−アミノ−ｎ−カプロン酸（１３１ｍｇ）および炭酸
水素ナトリウム（８４ｍｇ）のテトラヒドロフラン（ｌ
ｏｍＱ　）と水（ｌＱｍＱ　）の混液にテトラヒドロフ
ラン（１０賊）とクロロ義酸コレステロール（４４９ｍ
ｇ）を０°Ｃで加え、以下製造例３と同様にして、白色
粉末のＮ−（コレスト−５−エン−３β−オキジカルボ
ニル （１２６ｍｇ）を得る。Melting point: 127-130°C IR<')'3450. 170
5 cm-' Production Example 4 6-Amino-n-caproic acid (131 mg) and sodium hydrogen carbonate (84 mg) in tetrahydrofuran (l
Tetrahydrofuran (10 ml) and cholesterol chloroformate (449 ml) were added to a mixture of omQ ) and water (lQmQ ).
g) was added at 0°C, and the procedure was repeated in the same manner as in Production Example 3 to obtain N-(cholest-5-en-3β-oxydicarbonyl) (126 mg) as a white powder.

ＬＲ　　（’７００）Ａム）　　：　　３４４０．　　
１７００　　ｃｍ−’実施例１ マイトマイシンＣ　（　１．ＯＯｇ　）のＮ．Ｎ−ジメ
チルホルムアミド（　ｚｏｍＱ）溶液にトリエチルアミ
ン（０．３３ｇ）およびＮ−（コレスト−５−エン−３
β−オキジカルボニル）グリシンのスクシンイミドエス
テル（１７５ｇ）を室温で加え、反応混合物を４時間室
温で攪拌する．溶媒を留去し、残渣にクロロホルムおよ
び水を加える．有機層を分離し、水で洗浄し、硫酸マグ
ネシウムで乾燥する。LR ('700) Am): 3440.
1700 cm-'Example 1 Mitomycin C (1.OOg) N. Triethylamine (0.33 g) and N-(cholest-5-ene-3) were added to N-dimethylformamide (zomQ) solution.
Succinimide ester of β-oxydicarbonyl)glycine (175 g) is added at room temperature and the reaction mixture is stirred at room temperature for 4 hours. Distill the solvent off, and add chloroform and water to the residue. Separate the organic layer, wash with water and dry over magnesium sulfate.

溶媒を留去し粗生成物を得、これをクロロホルムに溶解
しシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０ｇ）に付
す．クロロホルムで溶出して暗紫色粉末の［　ｌａｓ　
　（　ｌａａ　、８β．８ａａ　、８ｂａ　）　］　−
　６　−アミノ−８−カルバモイルオキシメチル−［Ｎ
−（コレスト−５−エン−３β−オキジカルボニル）グ
リシル］　　１　、１ａ．　２　、　８　、８ａ，８ｂ
　−　ヘキサヒどロー８ａ−メトキシ−５−メチルアジ
リジノ［　２’　、３’　　：　３．４コビロロ［１．
２−ａコインドール−４．７−ジオン（１．７４ｇ）を
得る。The solvent was distilled off to obtain a crude product, which was dissolved in chloroform and subjected to silica gel column chromatography (50 g). Elute with chloroform to form a dark purple powder [las
(laa, 8β.8aa, 8ba) ] −
6-amino-8-carbamoyloxymethyl-[N
-(Cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl)glycyl] 1 , 1a. 2, 8, 8a, 8b
- Hexahydro8a-methoxy-5-methylaziridino [2', 3': 3.4 Cobyro [1.
2-a Coindole-4,7-dione (1.74 g) is obtained.

融点＝２５０°Ｃ２５ ０ｇｓｓ　：　８０４　（Ｍ”） 実凡例２ コレスト−５−エン−３β−オキシ酢酸［オーストラリ
アン・ジャーナル・才プ・ケミストリー（Ａｕｓｔ、　
Ｊ、　Ｃｈｅｍ、＞　２４．１４３−１５１　（１９７
１）に従って製造コ（６６７ｍｇ　）のクロロホルム（
１ａｍｕ　）溶液にＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１
７２ｍｇ）およびＮ、Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジ
イミド（３２４ｍｇ）をＯ″Ｃで加え、混合物を室温で
一晩攪拌する。沈殿物を濾去し、濾液を減圧下でａ縮し
、コレスト−５−エン−３β−オキシ酢酸のスクシンイ
ミドエステルを得る。マイトマイシンＣ（５０２ｍｇ）
のＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍ１１　）溶液
に、上記の活性エステル、トリエチルアミン（１５２ｍ
ｇ）および４−ジメチルアミノピリジン（２０＋ｎｇ）
を加える。反応混合物を６０℃で一晩攪拌し、減圧下で
濃縮する。残渣にクロロホルムおよび水を加える。有機
層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を留去
し粗生成物を得、これお少量のクロロホルムに溶解し、
シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付す、クロロホ
ルムで溶出して暗紫色粉末の［１ａＳ−（ｌａα、８β
、８ａα。Melting point = 250°C250gss: 804 (M”) Legend 2 Cholest-5-ene-3β-oxyacetic acid [Australian Journal of Chemistry,
J, Chem, > 24.143-151 (197
1) of chloroform (667 mg)
N-hydroxysuccinimide (1 amu) solution
72 mg) and N,N'-dicyclohexylcarbodiimide (324 mg) are added at O''C and the mixture is stirred at room temperature overnight. The precipitate is filtered off and the filtrate is condensed under reduced pressure to give Cholest-5 Obtain the succinimide ester of -ene-3β-oxyacetic acid. Mitomycin C (502 mg)
To a solution of N,N-dimethylformamide (10ml) was added the above active ester and triethylamine (152ml).
g) and 4-dimethylaminopyridine (20+ng)
Add. The reaction mixture is stirred at 60° C. overnight and concentrated under reduced pressure. Add chloroform and water to the residue. Separate the organic layer and dry with magnesium sulfate. The solvent was distilled off to obtain a crude product, which was dissolved in a small amount of chloroform,
Subjected to silica gel column chromatography and eluted with chloroform, a dark purple powder [1aS-(laα,8β
, 8aα.

８ｂα）］−］６−アミノー８−カルバモイルオキシメ
チルＮ−（コレスト−５−エン−３β−オキンアピチル
）　−１，１ａ、　２　、８．８ａ、８ｂ　−ヘキサヒ
ドロ−８８−メトキン−５−メチルアジリジノ［２’。8bα)]-]6-amino-8-carbamoyloxymethyl N-(cholest-5-ene-3β-oquinapityl)-1,1a,2,8.8a,8b-hexahydro-88-methquin-5-methylaziridino[2 '.

３′　：　３．４］ピロロ［１，２−ａコインドール−
４，７−ジオン（６９５ｍｇ　）を得る。3': 3.4] Pirolo [1,2-a Coin Dole-
4,7-dione (695 mg) is obtained.

融点：　１４５−１５０℃（分解）。Melting point: 145-150°C (decomposed).

ＩＲ（スジシール）　　：　　３４３０．　３３２０．
　３２００．　１７１０．　１６５０゜１６００、１５
５０　ｃＴｎ−１ 実施例３ 実施例２と同様にして実施例２のコレステロールの３位
のα異性体である［　１ａＳ　−（ｌａα、８β。IR (striped seal): 3430. 3320.
3200. 1710. 1650°1600, 15
50 cTn-1 Example 3 In the same manner as in Example 2, the α isomer at position 3 of cholesterol in Example 2 [1aS-(laα, 8β).

８ａα、８ｂα）コー６−アミノー８−カルバモイルオ
キンメチルーＮ−（コレスト−５−エン−３α−オキシ
アセｆＬ　）　−１，１ａ、　２　、８．８ａ、８ｂ　
−ヘキサヒドロ−８８−メトキシ−５−メチルアジリジ
ノ［２’　、３′　：３．４］ピロロ［１，２−ａコイ
ンドール−４，７−ジオンを得る。8aα, 8bα) co-6-amino-8-carbamoyl oxinemethyl-N-(cholest-5-ene-3α-oxyacefL) -1,1a, 2, 8.8a, 8b
-hexahydro-88-methoxy-5-methylaziridino[2',3':3.4]pyrrolo[1,2-acoindole-4,7-dione is obtained.

融点：　１１ｇ−１２０℃ ＩＲ（スジョール）　　：　　３４２０．　３３２０．
　３２００．　１７００．　１６００゜１５５０　ｃｍ
−１ 実施例４ Ｎ−（フレスト−５−エン−３β−オキジカルレボニル
）−β−アラニン（５６ｍｇ　）のテトラヒドロフラン
（１ａｍｕ　）およびクロロホルム（ｓｍＱ）混合液に
マイトマイシンＣ（３７ｍｇ）、トリエチルアミン（１
３ｍｇ）および１−エチル−３−（３−ジメチル）−カ
ルボジイミド塩酸塩（２４ｍｇ）を加える。Melting point: 11g-120°C IR (Sujoor): 3420. 3320.
3200. 1700. 1600°1550 cm
-1 Example 4 Mitomycin C (37 mg) and triethylamine (1
3 mg) and 1-ethyl-3-(3-dimethyl)-carbodiimide hydrochloride (24 mg).

反応混合物を室温で一晩攪拌し、減圧下で濃縮する。残
渣にクロロホルムおよび水を加える。有機層を分離し、
硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒をロムし粗生成物を
得、これを少量のクロロホルムに溶解し、シリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーに付す。クロロホルムおよびメ
タノールのｌ昆液で溶出して暗紫色粉末の［１ａＳ−（
ｌａα、８β。The reaction mixture is stirred at room temperature overnight and concentrated under reduced pressure. Add chloroform and water to the residue. Separate the organic layer;
Dry with magnesium sulfate. The solvent was removed to obtain a crude product, which was dissolved in a small amount of chloroform and subjected to silica gel column chromatography. [1aS-(
laα, 8β.

Ｂａａ　、８ｂａ　）　］　　］６−アミノー８−カル
バモイルオキンメチルーＮ’［Ｎ−（コレスト−５−エ
ン−３β−オキジカルボニル）−β−アラニル］−１，
１ａ、　２　、８．８ａ、８ｂ　−ヘキサヒト０−８ａ
−メトキン−５−メチルアジリジノ［２’　、３′　：
　３，４］ピロロ［１，２−ａコインドール−４，７−
ジオン（２２ｍｇ）を得る。Baa, 8ba)]]6-amino-8-carbamoyl oxinemethyl-N'[N-(cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl)-β-alanyl]-1,
1a, 2, 8.8a, 8b - hexahyto 0-8a
-Methquin-5-methylaziridino [2', 3':
3,4] pyrrolo[1,2-a coindole-4,7-
Dione (22 mg) is obtained.

ＩＲ（クロロホルム）　　：　　３５００．　３４４０
．　３３８０．　１６９５．　１６００゜１５６５　ｃ
ｍ−１ 害Ｊ１乳互 Ｎ−（コレスト−５−エン−３β−オキジカルボニル）
−６−アミノ−ｎ−カプリン酸（６３ｍｇ　）のテトラ
ヒドロフラン（２０ｍＭ　）およびクロロホルム（５ｍ
ｉ）混合液にマイトマイシンＣＣ３７ｍｇ）、トリエチ
ルアミン（１３ｍｇ）および１−エチル−３−（３−ジ
メチル）−力ルポジイミド塩酸塩（２４ｍｇ）を加え、
以下実施例４と同様にして、暗紫色粉末の［１ａＳ　−
（ｌａα、８β、８ａα、８ｂα）ツー６−アミノ−８
−カルバモイルオキシメチル−［Ｎ−（コレスト−５−
エン−３β−オキジカルボニル １ａ．２．８．８ａ．８ｂ−ヘｐサヒドロー８ｇーメト
キシ−５−メチルアジリジノ［　２’　、３’　　：　
３．４コビロロ［１．２−ミコインドール−４．７−ジ
オン（３１ｍｇ）を得る。IR (chloroform): 3500. 3440
．． 3380. 1695. 1600°1565c
m-1 Harm J1 milk-mutant N-(cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl)
-6-Amino-n-capric acid (63 mg) in tetrahydrofuran (20 mM) and chloroform (5 m
i) Add mitomycin CC (37 mg), triethylamine (13 mg) and 1-ethyl-3-(3-dimethyl)-lupodiimide hydrochloride (24 mg) to the mixture,
Hereinafter, in the same manner as in Example 4, a dark purple powder [1aS -
(laα, 8β, 8aα, 8bα) two-6-amino-8
-carbamoyloxymethyl-[N-(cholesto-5-
En-3β-oxydicarbonyl 1a. 2.8.8a. 8b-hepsahydro 8g-methoxy-5-methylaziridino [2', 3':
3.4coviloro[1,2-mycoindole-4,7-dione (31 mg) is obtained.

ＩＲ　　（クロロホルム）　　：　　３５００．　　３
４４０，　　３３７０．　　１７００．　　１６００。IR (chloroform): 3500. 3
440, 3370. 1700. 1600.

１５６０　ｃｍ−１ 実施例６ ４−ホルミル−６，９−ジヒドロキシ−１４−オキサ−
１，１１−ジアザテトラシクロ［７，４，１゜０２°７
．　Ｏｔｏ、　１２　］］テトラゾカー２．４．６−ド
リエンー８イルメチルカルバメート（３２ｍｇ）をＮ、
Ｎ−ンメメチホルムアミド（１，０ｍ［）に溶解する。1560 cm-1 Example 6 4-formyl-6,9-dihydroxy-14-oxa-
1,11-diazatetracyclo[7,4,1°02°7
．． Oto, 12 ]]tetrazocar 2.4.6-drien-8yl methyl carbamate (32 mg) with N,
Dissolve in N-methyformamide (1.0 m[).

この溶液にトリエチルアミン（１４ｓ　）およびＮ−（
コレスト−５−エン−３β−オキジカルボニル）グリシ
ンのスクシンイミドエステル（６０ｍｇ）を加える。混
合物を常温で６時間攪拌し、減圧下で溶媒を留去する。Triethylamine (14s) and N-(
Succinimide ester of cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl)glycine (60 mg) is added. The mixture was stirred at room temperature for 6 hours and the solvent was distilled off under reduced pressure.

残渣をＦ［クロマトグラフィーに付し、クロロホルムと
メタノールの混液で溶出して、１１−［Ｎ−（コレスト
−５−エン−３β−オキジカルボニル ミル−６、９−ジヒドロキシ−１４−才キサ−１．１１
−ジアザテトラシクロ［７．４．１．Ｏ２°７．　０１
０°１２コテトラデカ−２．４．６−ドリエンー８−イ
ルメチルカルバメートのＣ−９位の２つの異性体（９−
α−ＯＨ異性体３１ｍ匹および９−β−ＯＨ異性体１５
＋ｎｇ）を得る。The residue was subjected to F[chromatography and eluted with a mixture of chloroform and methanol to give 11-[N-(cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl-6,9-dihydroxy-14-oxa- 1.11
-Diazatetracyclo[7.4.1. O2°7. 01
0°12Cotetradeca-2.Two isomers at the C-9 position of 4.6-drien-8-ylmethylcarbamate (9-
31 m α-OH isomers and 15 9-β-OH isomers
+ng).

融点：　１６８−１７０℃（公序）。（９−α−ＯＨ異
性体と９−β−ＯＲ異性体の混合物） ９−α−ＯＨ異性体 ＩＲ　　（クロロホルム）　　：　　３３４０．　　２
９５０．　　１６９５．　　１５８６。Melting point: 168-170°C (public order). (Mixture of 9-α-OH isomer and 9-β-OR isomer) 9-α-OH isomer IR (chloroform): 3340. 2
950. 1695. 1586.

１３５５　ｃｍ−’ ＳＩＭＳ　：　７９１　［Ｍ＋Ｈ］”、　８１３　［Ｍ
＋Ｎａｌ”９−β−ＯＨ異性体 ＩＲ　　（クロロホルム）　　：　　３３４０．　　２
９４５．　　１６９５．　　１５８３。1355 cm-' SIMS: 791 [M+H]", 813 [M
+Nal”9-β-OH isomer IR (chloroform): 3340.2
945. 1695. 1583.

１３５０　Ｃｆｌｌ−１ ＳＩＭＳ　　：　　７９１　　［Ｍ＋Ｈ］”、　　８２
９　　［Ｍ＋Ｋ］”実施例７ ビス（２−クロロエチル）アミン塩酸塩（１．３４７ｇ
）の２５％水酸化ナトリウム水溶液（　１ｏｏｍｉ　）
にジクロルメタン（１００躯）を加えて振豐する．有機
層を分取し炭酸カリウムで乾燥し、濾過する。減圧下に
ジクロルメタンを留去し、油状物質としてビス（２−ク
ロロエチル）アミン（０．　５２ｇ　）　ヲ得る．Ｎ−
（フレスト−５−エン−３β−オキジカルボニル）グリ
シン（　１６０．　８ｍｇ）の乾燥テトラヒドロフラン
（　５ＱｍＱ　）溶液に０℃で窒素ガスを吹きこみなが
ら上記で得たビス（２−クロロエチル）アミン（　８５
．　２ｍｇ　）およびジシクロへキンルカルボジイミド
（６１．９ｍｇ）を加え、６時間攪拌する。冷蔵庫中で
一夜（１７時間）放置した後、濾過し、減圧下に溶媒を
留去する．残渣をクロロホルム−メタノール（５０：１
）混液に溶解し、調製層クロマトグラフィー（ＰＬＣ）
に付す．クロロホルム−メタノール（５０：１）の混液
で展開して、目的とする部分をかきとり、クロロホルム
−メタノール（４．１）の混液で抽出し、濾過した後減
圧下に溶媒を留去してＮ−［　Ｎ−（コレスト−５−エ
ン−３β−オキジカルボニル）グリジルコ−ビス（２−
クロロエチル）アミン（１１０ｍｇ）を得る。1350 Cfl-1 SIMS: 791 [M+H]”, 82
9 [M+K]”Example 7 Bis(2-chloroethyl)amine hydrochloride (1.347g
) in 25% aqueous sodium hydroxide solution (1oomi)
Add dichloromethane (100 units) to the solution and shake. The organic layer is separated, dried over potassium carbonate, and filtered. Dichloromethane was distilled off under reduced pressure to obtain bis(2-chloroethyl)amine (0.52 g) as an oily substance. N-
Bis(2-chloroethyl)amine (85
．． 2 mg) and dicyclohequinlecarbodiimide (61.9 mg) and stirred for 6 hours. After standing in the refrigerator overnight (17 hours), filter and evaporate the solvent under reduced pressure. The residue was dissolved in chloroform-methanol (50:1
) Dissolved in a mixed solution and preparative layer chromatography (PLC)
Attach to. Developed with a mixture of chloroform-methanol (50:1), scraped off the desired part, extracted with a mixture of chloroform-methanol (4.1), filtered, and then distilled off the solvent under reduced pressure to obtain N- [N-(cholest-5-ene-3β-oxydicarbonyl)glyzylco-bis(2-
chloroethyl)amine (110 mg) is obtained.

融点　ｊ　　９８−１００　℃ 蕊星！１ Ｎ−（コレスト−５−エン）−３β−オキジカルボニル
）グリシン（２．７４ｇ）およびトリエチルアミン（０
．　７８ｍＱ　）のテトラヒドロフラン（　４０ｍＱ　
）溶液にクロロ義酸エチル（０．６１ｇ）を−１５°Ｃ
で滴下し、その反応混合物を一１５°Ｃで２０分間攪拌
する。Melting point J 98-100 ℃ Star! 1 N-(cholest-5-ene)-3β-oxydicarbonyl)glycine (2.74 g) and triethylamine (0
．． 78mQ) of tetrahydrofuran (40mQ)
) Add ethyl chloroformate (0.61 g) to the solution at -15°C.
and the reaction mixture was stirred at -15°C for 20 minutes.

その反応混合物に１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシト
シン（１．３７ｇ）のジメチルホルムアミド（　３０ｍ
匹　）溶液を一１５℃から一１０℃で滴下する．滴下後
、混合物を５℃で１時間次いで室温で３０分間攪拌する
。反応混合物を減圧下に濃縮する。1-β-D-arabinofuranosylcytosine (1.37 g) was added to the reaction mixture in dimethylformamide (30 m
) Add the solution dropwise at -15°C to -10°C. After addition, the mixture is stirred for 1 hour at 5° C. and then for 30 minutes at room temperature. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure.

残渣をメタノールで洗浄し、乾燥して粗生成物を得、シ
リカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製してＮ’
−（Ｎ−（コレスト−５−エン−３β−オキシカルボニ
ル）グリシル］ー１ーβ−Ｄ−アラビノフラノシルシト
シン（１．８ｇ）を白色粉末として得る。The residue was washed with methanol and dried to obtain the crude product, which was purified by silica gel column chromatography to obtain N'
-(N-(Cholest-5-ene-3β-oxycarbonyl)glycyl]-1-β-D-arabinofuranosylcytosine (1.8 g) is obtained as a white powder.

融点：　１５９−１６１℃（分解） ＩＲ　　（スジコール）　　：　　３３３０．　　２８
５０，　　１６９０，　　１６４０。Melting point: 159-161°C (decomposition) IR (sudicol): 3330. 28
50, 1690, 1640.

１５７０　ａｍ−１1570 am-1

Claims (11)

【特許請求の範囲】[Claims] （１）一般式 Ａ−ＣＯ（ＣＨ＿２）＿ｍ（ＮＨＣＯ）＿ｎ−Ｒ（式中
、Ａは分子中に基■ＮＨまたは−ＮＨ＿２を有する医薬
化合物の残基、Ｒはステロイド化合物の残基、ｍは１〜
５の整数、ｎは０または１をそれぞれ意味する） で示されるプロドラッグ化合物およびその塩類。(1) General formula A-CO(CH_2)_m(NHCO)_n-R (wherein A is the residue of a pharmaceutical compound having a group NH or -NH_2 in the molecule, R is the residue of a steroid compound, m is 1~
(an integer of 5, n means 0 or 1, respectively) and salts thereof. （２）ステロイド化合物がコレステロールである特許請
求の範囲第１項に記載のプロドラッグ化合物およびその
塩類。(2) The prodrug compound and its salts according to claim 1, wherein the steroid compound is cholesterol. （３）Ａが分子中に基■ＮＨを有する医薬化合物の残基
である特許請求の範囲第１項または第２項に記載のプロ
ドラッグ化合物およびその塩類。(3) The prodrug compound and its salts according to claim 1 or 2, wherein A is a residue of a pharmaceutical compound having a group NH in the molecule. （４）医薬化合物がマイトマイシンＣである特許請求の
範囲第３項に記載のプロドラッグ化合物およびその塩類
。(4) The prodrug compound and its salts according to claim 3, wherein the pharmaceutical compound is mitomycin C. （５）医薬化合物がナイトロジェンマスタードである特
許請求の範囲第３項に記載のプロド ラッグ化合物およびその塩類。(5) The prodrug compound and its salts according to claim 3, wherein the pharmaceutical compound is nitrogen mustard. （６）医薬化合物がＦＲ９００４８２物質である特許請
求の範囲第３項に記載のプロドラッグ化合物およびその
塩類。(6) The prodrug compound and its salts according to claim 3, wherein the pharmaceutical compound is a FR900482 substance. （７）Ａが分子中に基−ＮＨ＿２を有する医薬化合物の
残基である特許請求の範囲第１項または第２項に記載の
プロドラッグ化合物およびその塩類。(7) The prodrug compound and its salts according to claim 1 or 2, wherein A is a residue of a pharmaceutical compound having a group -NH_2 in the molecule. （８）医薬化合物がシタラビンである特許請求の範囲第
７項に記載のプロドラッグ化合物およびその塩類。(8) The prodrug compound and its salts according to claim 7, wherein the pharmaceutical compound is cytarabine. （９）一般式 ＨＯＯＣ（ＣＨ＿２）＿ｍ（ＮＨＣＯ）＿ｎ−Ｒ（式中
、Ｒはステロイド化合物の残基、ｍは１〜５の整数、ｎ
は０または１をそれぞれ意味する） で示される化合物もしくはそのカルボキシ基における反
応性誘導体またはその塩類に、一般式 Ａ−Ｈ （式中、Ａは分子中に基■ＮＨまたは−ＮＨ＿２を有す
る医薬化合物の残基を意味する） で示される化合物またはその塩類を作用させることを特
徴とする 一般式 Ａ−ＣＯ（ＣＨ＿２）＿ｍ（ＮＨＣＯ）＿ｎ−Ｒ（式中
、Ａ、Ｒ、ｍおよびｎはそれぞれ前記と同じ意味） で示されるプロドラッグ化合物またはその塩類の製造法
。(9) General formula HOOC(CH_2)_m(NHCO)_n-R (wherein R is the residue of the steroid compound, m is an integer from 1 to 5, n
means 0 or 1, respectively) or its reactive derivative at the carboxy group or its salt; A-CO(CH_2)_m(NHCO)_n-R (wherein A, R, m and n are each (same meaning as above) A method for producing a prodrug compound or a salt thereof. （１０）一般式 Ａ−ＣＯ（ＣＨ＿２）＿ｍ（ＮＨＣＯ）＿ｎ−Ｒ（式中
、Ａは分子中に基■ＮＨまたは−ＮＨ＿２を有する医薬
化合物の残基、Ｒはステロイド化合物の残基、ｍは１〜
５の整数、ｎは０または１をそれぞれ意味する） で示されるプロドラッグ化合物またはその塩類を含有す
る持続性製剤。(10) General formula A-CO(CH_2)_m(NHCO)_n-R (wherein A is the residue of a pharmaceutical compound having a group NH or -NH_2 in the molecule, R is the residue of a steroid compound, m is 1~
(an integer of 5, n means 0 or 1, respectively) A long-acting preparation containing a prodrug compound or a salt thereof. （１１）割型がリボソームである特許請求の範囲第１０
項に記載の持続性製剤。(11) Claim 10 in which the split mold is a ribosome
Long-acting preparations as described in Section.