JP5620629B2 - Fat metabolism improving agent obtained from hanging bonsai, medicine or food containing the fat metabolism improving agent, and novel megastigman and flavonoid compound obtained from hanging bonsai - Google Patents

Description

本発明は、ベンケイソウ科（Ｃｒａｓｓｕｌａｃｅａｅ）植物である垂盆草、その抽出物もしくは抽出エキス、又はこれらから得られるメガスチグマン化合物又はフラボノイド化合物を含有する脂肪代謝改善剤、及びその脂肪代謝改善剤を含有する医薬や食品に関する。本発明は、さらに、垂盆草、その抽出物又は抽出エキスから得られる新規メガスチグマン化合物及びフラボノイド化合物に関するものである。   The present invention contains a drought bonsai plant, a extract of the same, or an extract thereof, or a fat metabolism improving agent containing a megastigman compound or a flavonoid compound obtained therefrom, and a fat metabolism improving agent thereof. It relates to medicine and food. The present invention further relates to a novel Megastigman compound and a flavonoid compound obtained from bonsai grass, its extract or extract.

垂盆草（学名：Ｓｅｄｕｍ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ Ｂｇｅ．）は、多年生多肉質草本で、高さは１０〜２０ｃｍ、茎は淡紅色で、枝は細く、斜めに伸び、ほふくし、花序に近いところにまた根が生じやすい。中国の遼寧、河北、河南、山東、山西、陜西、四川、浙江、江蘇、安徽、江西、湖北、広西、雲南、貴州省などに分布し、その山間部の山肌の傾斜面もしくは岩石上に自生している。垂盆草は和名をツルマンネングサと称し、またその全草は漢薬“石指甲（セキシコウ）”と称され、「清熱する、腫れを消す、解毒する、の効能がある」等とされている（非特許文献１）。しかしながら従来は、垂盆草に関する詳細な含有成分の探索等の科学的研究はあまり実施されていなかった。このような背景のもと、本発明者らは垂盆草含有成分の解明研究を行い、これまでに種々のメガスチグマン化合物、フラボノイド化合物及びその他の化合物を垂盆草より単離した（非特許文献２〜５）。
上海科学技術出版社編、中薬大辞典、小学館、１９８５、ｐｐ．１４２７−１４２８ Ｙｏｓｈｉｋａｗａ Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ． Ｎａｔ． Ｐｒｏｄ．，７０，５７５−５８３（２００７） Ｍｏｒｉｋａｗａ Ｔ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．，５５，４３５−４４１（２００７） Ｚｈａｎｇ Ｙ．，ｅｔ ａｌ．，Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，７１，１５６５−１５７６（２００７） Ｎｉｎｏｍｉｙａ Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．，５５，１１８５−１１９１（２００７） Perennial bonsai (scientific name: Sedum sarmentosum Bge.) Is a perennial fleshy herb with a height of 10-20 cm, stems are light red, branches are thin, slanted, stretched, blown, close to inflorescence Is likely to occur. It is distributed in Liaoning, Hebei, Henan, Shandong, Shanxi, Shaanxi, Sichuan, Zhejiang, Jiangsu, Anhui, Jiangxi, Hubei, Guangxi, Yunnan, Guizhou Province, etc. doing. The bonsai is called Tsurumanengusa, and the whole plant is called the herbal medicine “Sekikou”, which is said to have the effect of “refreshing heat, eliminating swelling, detoxifying”, etc. (Non-Patent Document 1). However, until now, scientific studies such as searching for detailed components related to bonsai have not been carried out. Under these circumstances, the present inventors have conducted research on elucidation of the components containing bonsai, and so far, various megastigman compounds, flavonoid compounds and other compounds have been isolated from bonsai (non-patent literature). 2-5).
Edited by Shanghai Science and Technology Publishers, Chugyaku Dictionary, Shogakukan, 1985, pp. 1427-1428 Yoshikawa M. et al. , Et al. , J .; Nat. Prod. , 70, 575-583 (2007) Morikawa T. , Et al. , Chem. Pharm. Bull. , 55, 435-441 (2007) Zhang Y. , Et al. , Heterocycles, 71, 1565-1576 (2007). Ninomiya K.K. , Et al. , Chem. Pharm. Bull. , 55,1185-1191 (2007)

本発明は、垂盆草に関する詳細な含有成分の探索、及びその薬剤としての作用についての研究に基づいてなされたもので、垂盆草より得られ、脂肪代謝改善作用を有する薬剤（脂肪代謝改善剤）を提供することを目的とする。本発明は、又、この脂肪代謝改善剤を含有するヒト又は動物用医薬、及び、この脂肪代謝改善剤を含有する食品を提供することを目的とする。本発明は、さらに、垂盆草より得ることができる新規メガスチグマン及びフラボノイド化合物を提供することを目的とする。   The present invention was made on the basis of the search for detailed contents of the bonsai and research on its action as a drug. The drug obtained from the bonsai and has an action of improving fat metabolism (improvement of fat metabolism) The purpose is to provide an agent. Another object of the present invention is to provide a human or veterinary drug containing the fat metabolism improving agent and a food containing the fat metabolism improving agent. It is another object of the present invention to provide a novel Megastigman and flavonoid compound that can be obtained from the hanging bonsai.

本発明者は、垂盆草の全草や、垂盆草を水や低級脂肪族アルコール等により抽出して得られた抽出液、又は当該抽出液を濃縮して得られる抽出エキスについて、脂肪代謝改善剤としての活性評価の指標として、ヒト肝がん由来細胞であるＨｅｐＧ２細胞を用いた細胞内脂肪代謝促進作用を検討した。その結果、垂盆草の全草、その抽出液、抽出エキスが、脂肪代謝改善作用を示すことを見出し、以下に示す態様の発明を完成した。   The present inventor is concerned with fat metabolism for whole plant of bonsai, extract obtained by extracting bonsai with water or lower aliphatic alcohol, or extract obtained by concentrating the extract. As an index of activity evaluation as an improving agent, the effect of promoting intracellular fat metabolism using HepG2 cells, which are cells derived from human liver cancer, was examined. As a result, it was found that the whole botanical bonsai, its extract, and extract showed an effect of improving fat metabolism, and the invention of the embodiment shown below was completed.

即ち、本発明は、その第１の態様として、垂盆草の全草、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により垂盆草を抽出して得られる抽出液、又は前記抽出液を濃縮して得られる抽出エキス、を有効成分として含むことを特徴とする脂肪代謝改善剤（請求項１）を提供する。   That is, the first aspect of the present invention is, as a first aspect thereof, an extract obtained by extracting a bonsai from the whole bonsai, water, a lower aliphatic alcohol or a hydrated product of a lower aliphatic alcohol, or the extraction An agent for improving fat metabolism comprising an extract obtained by concentrating a liquid as an active ingredient is provided.

本発明者は、さらに、前記の抽出液又は抽出エキスを分離、精製し、含有成分の詳細な探索等を行うとともに、この分離、精製により得られた化合物について、ヒト肝がん由来細胞であるＨｅｐＧ２細胞を用いた細胞内脂肪代謝促進作用を検討したところ、いくつかの化合物がこの脂肪代謝改善作用を示すことを見出し、以下に示す態様の発明を完成した。   The inventor further isolates and purifies the extract or extract and conducts a detailed search for the components contained therein, and the compound obtained by the separation and purification is a human liver cancer-derived cell. When the intracellular fat metabolism promoting action using HepG2 cells was examined, it was found that several compounds showed this fat metabolism improving action, and the invention of the embodiment shown below was completed.

即ち本発明は、その第２の態様として、
下記の構造式（１）で表わされるメガスチグマン化合物： That is, the present invention provides the second aspect as
Megastigman compound represented by the following structural formula (1):

下記の構造式（３）で表わされるメガスチグマン化合物：

Megastigman compound represented by the following structural formula (3):

下記の構造式（４）で表わされるメガスチグマン化合物：

Megastigman compound represented by the following structural formula (4):

下記の構造式（７）で表わされるフラボノイド化合物：

Flavonoid compounds represented by the following structural formula (7):

、及び下記の構造式（９）で表わされるフラボノイド化合物：

And a flavonoid compound represented by the following structural formula (9):

からなる群の中から選ばれる化合物を有効成分として含むことを特徴とする脂肪代謝改善剤（請求項２）を提供する。

A fat metabolism improving agent comprising a compound selected from the group consisting of as an active ingredient (Claim 2).

前記の第１の態様及び第２の態様の脂肪代謝改善剤は、脂肪代謝改善作用を有するため、これを含有させることにより、脂肪代謝改善作用を有する医薬や健康食品等を得ることができる。即ち、本発明は、その第３の態様として、前記の第１の態様及び第２の態様の脂肪代謝改善剤を含有することを特徴とするヒト又は動物用の医薬（請求項３）を提供する。又、その第４の態様として、前記の第１の態様及び第２の態様の脂肪代謝改善剤を含有することを特徴とする食品（請求項４）を提供する。   Since the fat metabolism-improving agent of the first and second aspects has a fat metabolism-improving action, by containing it, a medicament or health food having a fat-metabolism-improving action can be obtained. That is, the present invention provides, as a third aspect thereof, a human or animal pharmaceutical comprising the fat metabolism improving agent of the first aspect and the second aspect described above (Claim 3). To do. Moreover, as a fourth aspect thereof, there is provided a food product (claim 4) characterized by containing the fat metabolism improving agent of the first aspect and the second aspect.

本発明者は、さらに又、前記の抽出液又は抽出エキスを分離、精製して得られた含有成分の中に、いくつかの新規なメガスチグマン化合物及びフラボノイド化合物が含まれていることを見いだした。これらの新規化合物には、前記構造式（１）、（３）、（４）、（７）又は（９）で表わされる化合物が含まれ、又残余の化合物もその構造の類似性から、脂肪代謝改善作用を有するものと推測される。   Furthermore, the present inventor has found that some novel Megastigman compounds and flavonoid compounds are contained in the components obtained by separating and purifying the extract or extract. These novel compounds include the compounds represented by the structural formulas (1), (3), (4), (7) or (9), and the remaining compounds are fatty acids due to their structural similarity. It is presumed to have an effect of improving metabolism.

即ち、本発明は、その第５の態様として、
構造式（１）で表わされるメガスチグマン化合物（請求項５）、
下記の構造式（２）で表わされるメガスチグマン化合物（請求項６）： That is, the present invention as the fifth aspect,
Megastigman compound represented by Structural Formula (1) (Claim 5),
Megastigman compound represented by the following structural formula (2) (Claim 6):

構造式（３）で表わされるメガスチグマン化合物（請求項７）、
構造式（４）で表わされるメガスチグマン化合物（請求項８）、
下記の構造式（５）で表わされるメガスチグマン化合物（請求項９）： Megastigman compound represented by Structural Formula (3) (Claim 7),
Megastigman compound represented by Structural Formula (4) (Claim 8),
Megastigman compound represented by the following structural formula (5) (Claim 9):

下記の構造式（６）で表わされるメガスチグマン化合物（請求項１０）：

Megastigman compound represented by the following structural formula (6) (claim 10):

構造式（７）で表わされるフラボノイド化合物（請求項１１）、
下記の構造式（８）で表わされるフラボノイド化合物（請求項１２）： A flavonoid compound represented by the structural formula (7) (claim 11),
A flavonoid compound represented by the following structural formula (8) (claim 12):

及び、構造式（９）で表わされるフラボノイド化合物（請求項１３）を提供する。 And the flavonoid compound represented by Structural formula (9) (Claim 13) is provided.

本発明の第１の態様、即ち、垂盆草の全草、その水、低級脂肪族アルコールもしくはその含水物により抽出して得られる抽出液または当該抽出液を濃縮して得られる抽出エキスを有効成分として含有する脂肪代謝改善剤、又は、第２の態様、即ち、構造式（１）、（３）もしくは（４）で表されるメガスチグマン化合物、又は構造式（７）もしくは（９）で表されるフラボノイド化合物を有効成分として含有する脂肪代謝改善剤は、ヒト肝がん由来細胞であるＨｅｐＧ２細胞を用いた細胞内脂肪代謝促進作用を示し、脂肪代謝改善剤としての優れた活性を有する。この脂肪代謝改善剤を含有させた医薬や食品（本発明の第３の態様、第４の態様）は、優れた脂肪代謝改善効果を示す医薬又は食品である。さらに、本発明の第５の態様の新規なメガスチグマン化合物及びフラボノイド化合物は、前記のような脂肪代謝改善作用を有するものであり、脂肪代謝改善剤として使用することができる。   The first aspect of the present invention, that is, an extract obtained by extraction with whole botanical grass, its water, a lower aliphatic alcohol or its hydrate, or an extract obtained by concentrating the extract is effective. Fat metabolism improving agent contained as a component, or the second embodiment, that is, a Megastigman compound represented by Structural Formula (1), (3) or (4), or a Structural Formula (7) or (9) The fat metabolism-improving agent containing the flavonoid compound as an active ingredient exhibits an action to promote intracellular fat metabolism using HepG2 cells, which are cells derived from human liver cancer, and has excellent activity as a fat metabolism-improving agent. The medicine or food containing the fat metabolism improving agent (the third aspect or the fourth aspect of the present invention) is a medicine or food showing an excellent effect of improving fat metabolism. Furthermore, the novel Megastigman compound and flavonoid compound of the fifth aspect of the present invention have the fat metabolism improving action as described above, and can be used as a fat metabolism improving agent.

次に、本発明を実施するための最良の形態につき説明するが、本発明の範囲はこの実施の形態のみに限定されるものではない。   Next, although the best mode for carrying out the present invention will be described, the scope of the present invention is not limited only to this embodiment.

本発明の第１の態様の脂肪代謝改善剤としては、垂盆草の全草を用いたものを例示することができる。垂盆草の全草を用いる場合は、垂盆草の全草をそのまま用いることができるし、又は、粉砕、破砕、切断、すりつぶしなどによる形状変化を行ったもの、もしくは、乾燥などの調製を実施したものを用いることもできる。   Examples of the fat metabolism improving agent according to the first aspect of the present invention include those using whole botanical plants. When using the whole bonsai grass, the whole bonsai grass can be used as it is, or the shape of the bonsai grass has been changed by crushing, crushing, cutting, grinding, etc. What was implemented can also be used.

本発明の第１の態様の脂肪代謝改善剤としては、又、垂盆草を、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により抽出して得られる抽出液、又はその抽出エキスを用いたものも例示することができる。   As the fat metabolism improving agent of the first aspect of the present invention, an extract obtained by extracting bonbon grass with water, a lower aliphatic alcohol or a hydrated product of a lower aliphatic alcohol, or an extract thereof, What was used can also be illustrated.

この抽出液は、垂盆草の全草をそのまま、水、低級脂肪族アルコール及び低級脂肪族アルコールの含水物より選ばれる抽出溶媒により、抽出して得ることもできるが、垂盆草の全草を、粉砕、破砕、切断、すりつぶしなどによる形状変化を行ったものを用いて抽出する方法が、抽出効率の面で好ましい。   This extract can also be obtained by extracting the whole bonsai grass with an extraction solvent selected from water, a lower aliphatic alcohol and a lower aliphatic alcohol hydrate, A method of extracting the material using a material whose shape has been changed by crushing, crushing, cutting, grinding or the like is preferable in terms of extraction efficiency.

抽出溶媒として用いられるアルコールとしては、炭素数１〜４の低級アルコール類が挙げられ、具体的には、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｎブタノール、イソブタノール、ｔ−ブタノール又はこれらの混液が挙げられる。抽出溶媒としては、好ましくはこれらのアルコール、又はこれらのアルコールに３０容量％までの水を含有する含水アルコールが用いられる。前記のアルコールの中でもメタノール又はエタノールが好ましい。これらの抽出溶媒は、抽出材料に対して、１〜５０倍（重量）程度、好ましくは１０〜３０倍程度用いられる。   Examples of the alcohol used as the extraction solvent include lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, specifically, methanol, ethanol, propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, t-butanol, or a mixed solution thereof. It is done. As the extraction solvent, these alcohols or hydrous alcohols containing up to 30% by volume of water in these alcohols are preferably used. Of the above alcohols, methanol or ethanol is preferred. These extraction solvents are used in an amount of about 1 to 50 times (weight), preferably about 10 to 30 times the extraction material.

抽出温度は、室温〜溶媒の沸点の間で任意に設定できるが、例えば５０℃〜抽出溶媒の沸点の温度で、振盪下もしくは非振盪下または還流下に、前記の抽出材料、即ち、垂盆草の全草、又は、それを粉砕、破砕、切断、すりつぶしなどによる形状変化を行ったもの等を、前記の抽出溶媒に浸漬することによって行うのが適当である。   The extraction temperature can be arbitrarily set between room temperature and the boiling point of the solvent. For example, at the temperature of 50 ° C. to the boiling point of the extraction solvent, the above-described extraction material, that is, the hanging basin, can be shaken or non-shaken or refluxed. It is appropriate to immerse the whole grass of the grass or the one whose shape has been changed by crushing, crushing, cutting, mashing, etc. in the extraction solvent.

好ましい抽出時間は、抽出温度や抽出の際の振盪の有無等により変動し、特に限定されない。例えば、抽出材料を振盪下に浸漬する場合には、３０分間〜１０時間程度行うのが適当であり、非振盪下に浸漬する場合には、１時間〜２０日間程度行うのが適当である。又、抽出溶媒の還流下に抽出するときは、３０分間〜数時間加熱還流するのが好ましい。なお、５０℃より低い温度で浸漬して抽出することも可能であるが、その場合には、前記の時間よりも長時間浸漬するのが好ましい。抽出操作は、同一材料について１回だけ行ってもよいが、複数回、例えば２〜５回程度繰り返すのが好ましい。   The preferred extraction time varies depending on the extraction temperature and the presence or absence of shaking during extraction, and is not particularly limited. For example, when the extraction material is immersed under shaking, it is appropriate to carry out for about 30 minutes to 10 hours, and when it is immersed under non-shaking, it is appropriate to carry out for about 1 hour to 20 days. Moreover, when extracting under reflux of an extraction solvent, it is preferable to heat to reflux for 30 minutes to several hours. In addition, although it is possible to extract by immersing at a temperature lower than 50 ° C., it is preferable to immerse for a longer time than the above time. The extraction operation may be performed only once for the same material, but is preferably repeated a plurality of times, for example, about 2 to 5 times.

前記の抽出工程により得られた抽出液には垂盆草の含有成分が溶出されている。本発明の脂肪代謝改善剤には、このようにして得られた抽出液をそのまま加えてもよいが、前記抽出液を濃縮して抽出エキスにして脂肪代謝改善剤としてもよい。濃縮は、低温で減圧下に行うのが好ましい。なお、濃縮する前に濾過して濾液を濃縮してもよい。抽出エキスは、濃縮したままの状態で脂肪代謝改善剤として用いることができるが、また、濃縮は乾固するまで行ってもよく、粉末状又は凍結乾燥品等として用いてもよい。濃縮する方法、粉末状及び凍結乾燥品とする方法は、当該分野での公知の方法を用いることができる。   In the extract obtained by the extraction process, the components contained in the bonsai are eluted. The extract obtained in this manner may be added as it is to the fat metabolism improving agent of the present invention, but the extract may be concentrated to obtain an extract extract as a fat metabolism improving agent. Concentration is preferably carried out at a low temperature and under reduced pressure. The filtrate may be concentrated by filtration before concentration. The extract can be used as a fat metabolism-improving agent in a concentrated state, but the concentration may be performed until dryness, or may be used as a powder or lyophilized product. As a method of concentrating, a method of forming a powder and a lyophilized product, a method known in the art can be used.

このようにして得られる抽出液又は抽出エキスを、精製処理に付し、含有される各成分に分離することができる。そして、分離された成分中には、脂肪代謝改善作用を有する化合物が含まれており、これらも脂肪代謝改善剤として用いることができる（本発明の第２の態様）。   The extract or extract thus obtained can be subjected to a purification treatment and separated into each component contained. The separated component contains a compound having an action of improving fat metabolism, and these can also be used as an agent for improving fat metabolism (second aspect of the present invention).

精製処理は、例えば、クロマトグラフ法、イオン交換樹脂を使用する溶離法、溶媒による分配抽出等を単独、又は組み合わせて採用することができる。クロマトグラフ法としては、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、遠心液体クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等を挙げることができ、これらのいずれか、又はそれらを組み合わせで行う方法が挙げられる。この際の担体、溶出溶媒等の精製条件は、各種クロマトグラフィーに対応して適宣選択することができる。   As the purification treatment, for example, a chromatographic method, an elution method using an ion exchange resin, partition extraction with a solvent, or the like can be employed alone or in combination. Examples of chromatographic methods include normal phase chromatography, reverse phase chromatography, thin layer chromatography, centrifugal liquid chromatography, high performance liquid chromatography, and the like, and any one of these or a combination thereof may be used. Can be mentioned. In this case, purification conditions such as a carrier and an elution solvent can be appropriately selected according to various chromatographies.

抽出液又は抽出エキスを、精製処理に付し、各成分に分離することにより、前記の構造式（１）〜（９）のいずれかで表される新規化合物を得ることができ、それぞれ以下に示すように命名した。   A novel compound represented by any one of the structural formulas (1) to (9) can be obtained by subjecting the extract or extract to a purification treatment and separating it into each component. Named as shown.

構造式（１）の化合物：セダモシドＫ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｋ）
構造式（２）の化合物：セダモシドＬ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｌ）
構造式（３）の化合物：セダモシドＭ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｍ）
構造式（４）の化合物：セダモシドＮ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｎ）
構造式（５）の化合物：セダモシドＯ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｏ）
構造式（６）の化合物：セダモシドＪ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｊ）
構造式（７）の化合物：サルメノシドＶ（Ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ Ｖ）
構造式（８）の化合物：サルメノシドＶＩ（Ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ ＶＩ）
構造式（９）の化合物：サルメノシドＶＩＩ（Ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ ＶＩＩ） Compound of structural formula (1): Sedamoside K
Compound of structural formula (2): Sedamoside L
Compound of structural formula (3): Sedamoside M
Compound of structural formula (4): Sedamoside N
Compound of structural formula (5): Sedamoside O
Compound of structural formula (6): Sedamoside J
Compound of structural formula (7): Salmenoside V
Compound of structural formula (8): Salmenoside VI
Compound of structural formula (9): Salmenoside VII

前記のように、垂盆草の全草、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により垂盆草を抽出して得られる抽出液、前記抽出液を濃縮して得られる抽出エキス、及び、前記構造式（１）、（３）又は（４）で表わされる新規メガスチグマン化合物、構造式（７）又は（９）で表わされる新規フラボノイド化合物は、脂肪代謝改善剤としての活性評価の指標として実施したヒト肝がん由来細胞であるＨｅｐＧ２細胞を用いた細胞内脂肪代謝促進作用試験において、活性が見出された。   As described above, whole extract of bonsai, water, an extract obtained by extracting bonsai with a hydrated product of lower aliphatic alcohol or lower aliphatic alcohol, an extract obtained by concentrating the extract And the novel Megastigman compound represented by the structural formula (1), (3) or (4) and the novel flavonoid compound represented by the structural formula (7) or (9) Activity was found in an intracellular fat metabolism promoting action test using HepG2 cells, which are human liver cancer-derived cells, carried out as an index.

この脂肪代謝改善試験は、ヒト肝がん由来細胞であるＨｅｐＧ２細胞を用い、高濃度グルコースを含む培地にて培養し細胞内に脂肪を蓄積させた後、低濃度グルコース含有培地へ交換するとともに被検サンプルを添加し、培養後の細胞内トリグリセリド残存量を脂肪代謝の指標として評価したものである。これにより、肝細胞における脂肪代謝促進作用の高い検体は、肝臓における脂肪代謝を改善すると判断される。従って、垂盆草の全草、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により垂盆草を抽出して得られる抽出液、前記抽出液を濃縮して得られる抽出エキス、及び、前記構造式（１）、（３）又は（４）で表わされる新規メガスチグマン化合物、構造式（７）又は（９）で表わされる新規フラボノイド化合物は、脂肪代謝改善剤として用いることができる。   In this fat metabolism improvement test, HepG2 cells, which are cells derived from human liver cancer, were cultured in a medium containing high-concentration glucose, and fat was accumulated in the cells. A test sample was added, and the residual amount of intracellular triglyceride after culture was evaluated as an index of fat metabolism. Thereby, it is determined that a specimen having a high fat metabolism promoting action in hepatocytes improves fat metabolism in the liver. Therefore, whole bonsai grass, water, an extract obtained by extracting the bonsai bonsai with water containing a lower aliphatic alcohol or a lower aliphatic alcohol, an extract obtained by concentrating the extract, and The novel Megastigman compound represented by the structural formula (1), (3) or (4) and the novel flavonoid compound represented by the structural formula (7) or (9) can be used as a fat metabolism improving agent.

さらに、この本発明の脂肪代謝改善剤は、医薬や食品に適用することができ、この脂肪代謝改善剤を含有させることにより優れた脂肪代謝改善効果を有する医薬や食品を製造することができる。   Furthermore, the fat metabolism improving agent of the present invention can be applied to medicines and foods, and by containing the fat metabolism improving agent, a medicine or food having an excellent effect of improving fat metabolism can be produced.

例えば、垂盆草の全草、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により垂盆草を抽出して得られる抽出液、前記抽出液を濃縮して得られる抽出エキス、前記構造式（１）、（３）もしくは（４）で表わされる新規メガスチグマン化合物、又は構造式（７）もしくは（９）で表わされる新規フラボノイド化合物を、そのままの状態で又は適当な媒体で希釈して、医薬品等の製造分野における公知の方法により、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤又は液剤等の種々の形態にして、医薬品として使用することができる。   For example, whole bonsai grass, water, extract obtained by extracting bonsai with lower aliphatic alcohol or water containing lower aliphatic alcohol, extract obtained by concentrating the extract, structure The novel Megastigman compound represented by the formula (1), (3) or (4) or the novel flavonoid compound represented by the structural formula (7) or (9) is diluted as it is or with an appropriate medium, It can be used as a medicine in various forms such as powders, granules, tablets, capsules or liquids by known methods in the field of production of medicines and the like.

これらの形態においては、適当な媒体を添加してもよい。適当な媒体としては、医薬的に許容される賦形剤、例えば結合剤（例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガント又はポリビニルピロリドン）、充填剤（例えば乳糖、砂糖、トウモロコシ澱粉、リン酸カルシウム、ソルビトール又はグリシン）、錠剤用滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール又はシリカ）、崩壊剤（例えば馬鈴薯澱粉）又は湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）等が挙げられる。   In these forms, an appropriate medium may be added. Suitable vehicles include pharmaceutically acceptable excipients such as binders (eg syrup, gum arabic, gelatin, sorbitol, tragacanth or polyvinylpyrrolidone), fillers (eg lactose, sugar, corn starch, calcium phosphate, sorbitol). Or glycine), a lubricant for tablets (for example, magnesium stearate, talc, polyethylene glycol or silica), a disintegrant (for example, potato starch) or a wetting agent (for example, sodium lauryl sulfate).

錠剤とする場合は、通常の製薬における周知の方法でコートしてもよい。液体製剤とする場合は、例えば水性又は油性の懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップ又はエリキシルの形態であってもよい。又、使用前に水や他の適切な賦形剤と混合する乾燥製品として提供してもよい。   In the case of a tablet, it may be coated by a well-known method in ordinary pharmaceuticals. In the case of a liquid preparation, it may be in the form of, for example, an aqueous or oily suspension, solution, emulsion, syrup or elixir. It may also be provided as a dry product that is mixed with water or other suitable excipients prior to use.

こうした液体製剤は、通常の添加剤、例えば、ソルビトール、シロップ、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン水添加食用脂等の懸濁化剤、レシチン、ソルビタンモノオレエート、アラビアゴム等の乳化剤（食用脂を含んでもよい）、アーモンド油、分画ココヤシ油又はグリセリン、プロピレングリコールやエチレングリコールのような油性エステル等の非水性賦形剤、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル又はソルビン酸等の保存剤、を含んでもよく、さらに所望により着色剤又は香料等を含んでもよい。   These liquid preparations contain usual additives such as suspending agents such as sorbitol, syrup, methylcellulose, glucose syrup, gelatin water-added edible fat, and emulsifiers such as lecithin, sorbitan monooleate and gum arabic (including edible fat). ), Non-aqueous excipients such as almond oil, fractionated coconut oil or glycerin, oily esters such as propylene glycol and ethylene glycol, preservatives such as methyl or propyl p-hydroxybenzoate or sorbic acid It may also include a colorant or a fragrance, if desired.

垂盆草の全草、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により垂盆草を抽出して得られる抽出液、前記抽出液を濃縮して得られる抽出エキス、前記構造式（１）、（３）もしくは（４）で表わされる新規メガスチグマン化合物、又は構造式（７）もしくは（９）で表わされる新規フラボノイド化合物は、それぞれ単独で、又は混合物として食品に含有させ、食品に脂肪代謝改善効果を与えることができる。ここで言う食品には健康食品も含まれる。   Whole bonsai grass, water, extract obtained by extracting bonsai with lower aliphatic alcohol or water containing lower aliphatic alcohol, extract obtained by concentrating the extract, structural formula ( The novel Megastigman compound represented by 1), (3) or (4), or the novel flavonoid compound represented by Structural Formula (7) or (9) is contained in a food either alone or as a mixture. Metabolic improvement effect can be given. The foods mentioned here include health foods.

ここで健康食品とは、通常の食品よりも積極的な意味で、保健、健康維持・増進等を目的とした食品を意味する。食品又は健康食品の形態としては、例えば、液体又は半固形、固形の製品、具体的には散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤又は液剤等のほか、クッキー、せんべい、ゼリー、ようかん、ヨーグルト、まんじゅう等の菓子類、清涼飲料、お茶類、栄養飲料、スープ等の形態が挙げられる。これらの食品の製造工程において、あるいは最終製品に、前記の抽出物、抽出エキス、及び／又は化合物を混合又は塗布、噴霧などにより添加して、健康食品とすることができる。   Here, the health food means a food that is more active than a normal food and is intended for health, health maintenance and promotion. Examples of the form of food or health food include liquids, semi-solids, solid products, specifically powders, granules, tablets, capsules or liquids, cookies, rice crackers, jelly, yokan, yogurt, manju And other forms of confectionery, soft drinks, teas, nutritional drinks, soups and the like. In the production process of these foods, or in the final product, the aforementioned extract, extract extract and / or compound can be added by mixing, coating, spraying, or the like to obtain a health food.

本発明の医薬又は食品における、前記抽出液、抽出エキス、前記構造式（１）、（３）もしくは（４）で表わされる新規メガスチグマン化合物、又は構造式（７）もしくは（９）で表わされる新規フラボノイド化合物の使用量は、濃縮、精製の程度、活性の強さ等、使用目的、対象疾患や自覚症状の程度、使用者の体重、年齢等によって適宣調整される。例えば、医薬として成人について使用する場合は、１回の投与毎に、抽出液又は抽出エキスでは、１ｍｇ〜２０ｇ程度の範囲で使用し、この範囲内で精製度や水分含量等に応じて調整することが適当な場合が多い。又、前記化合物を使用する場合は、１ｍｇ〜１ｇ程度が適当な場合が多い。   In the pharmaceutical or food of the present invention, the extract, the extract, the novel Megastigman compound represented by the structural formula (1), (3) or (4), or the novel represented by the structural formula (7) or (9) The amount of flavonoid compound used is appropriately adjusted according to the degree of concentration, purification, strength of activity, purpose of use, degree of target disease or subjective symptom, weight of the user, age, and the like. For example, when used for adults as a medicine, for each administration, the extract or extract is used in the range of about 1 mg to 20 g, and adjusted within this range according to the degree of purification, water content, etc. Is often appropriate. Moreover, when using the said compound, 1 mg-about 1g are suitable in many cases.

又、健康食品として使用する場合は、食品の味や外観に悪影響を及ぼさない量、例えば、対象となる食品１ｋｇに対して、前記の抽出液又は抽出エキス、前記構造式（１）、（３）もしくは（４）で表わされる新規メガスチグマン化合物、又は構造式（７）もしくは（９）で表わされる新規フラボノイド化合物を、１ｍｇ〜２０ｇ程度の範囲で添加することが適当な場合が多い。   In addition, when used as a health food, the extract or extract, the structural formulas (1) and (3) are used in an amount that does not adversely affect the taste and appearance of the food, for example, 1 kg of the target food. ) Or (4) or a new flavonoid compound represented by structural formula (7) or (9) is often added in the range of about 1 mg to 20 g.

なお、前記構造式（２）、（５）もしくは（６）で表わされる新規メガスチグマン化合物、又は構造式（８）で表わされる新規フラボノイド化合物も、その構造の類似性から、前記構造式（１）、（３）もしくは（４）で表わされる新規メガスチグマン化合物、又は構造式（７）もしくは（９）で表わされる新規フラボノイド化合物と同様に、脂肪代謝改善効果を有し、脂肪代謝改善剤として用いることができ、又、ヒトや動物の医薬品や、健康食品等の食品に添加して、脂肪代謝改善効果を有する医薬品や食品を製造することができると考えられる。   The novel Megastigman compound represented by the structural formula (2), (5) or (6), or the novel flavonoid compound represented by the structural formula (8) also has the structural formula (1). Similar to the novel Megastigman compound represented by (3) or (4) or the novel flavonoid compound represented by Structural Formula (7) or (9), it has an effect of improving fat metabolism and is used as a fat metabolism improving agent. It is also considered that pharmaceuticals and foods having an effect of improving fat metabolism can be produced by adding to human and animal pharmaceuticals and foods such as health foods.

以下、実施例により、本発明をさらに具体的に説明するが、実施例は本発明の範囲を限定するものではない。なお、以下の実施例では、特に記載がない限り、以下の各種溶媒、濾紙、クロマトグラフィー用担体及びＨＰＬＣカラムを用いた。   EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples. However, the examples do not limit the scope of the present invention. In the following examples, the following various solvents, filter paper, chromatography carrier and HPLC column were used unless otherwise specified.

［溶媒］
メタノール：ナカライテスク社製、一級
クロロホルム：ナカライテスク社製、一級
ＨＰＬＣ用メタノール：関東化学社製、特級
ＨＰＬＣ用アセトニトリル：関東化学社製、特級 [solvent]
Methanol: Nacalai Tesque, first grade Chloroform: Nacalai Tesque, first grade Methanol for HPLC: Kanto Chemical Co., special grade Acetonitrile for HPLC: Kanto Chemical Co., special grade

［濾紙］ アドバンテック社製：Ｎｏ．２ [Filter paper] Advantech: No. 2

［クロマトグラフィー用担体］
順相シリカゲルカラムクロマトグラフ用担体：富士シリシア社製、ＢＷ−２００、１５０〜３００メッシュ
逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフ用担体：富士シリシア社製、Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ ＯＤＳ１０２０Ｔ、１００〜２００メッシュ
多孔質ポリマーカラムクロマトグラフ用担体：日本練水社製、ダイアイオンＨＰ−２０及びファルマシア社製、セファデックスＬＨ−２０ [Chromatographic carrier]
Normal phase silica gel column chromatography carrier: Fuji Silysia, BW-200, 150 to 300 mesh Reverse phase ODS column chromatography carrier: Fuji Silysia, Chromatorex ODS1020T, 100 to 200 mesh For porous polymer column chromatography Carrier: Nippon Nersui, Diaion HP-20 and Pharmacia, Sephadex LH-20

［ＨＰＬＣカラム］
ＹＭＣ社製、ＹＭＣ Ｐａｃｋ−ＯＤＳ−Ａ、２０ｍｍ（ｉ．ｄ．）×２５０ｍｍ [HPLC column]
YMC, YMC Pack-ODS-A, 20 mm (id) x 250 mm

実施例１ 垂盆草全草の熱水抽出エキスの調製
新鮮な垂盆草の全草８００ｋｇを粉砕し、これに約１０倍量の水（８０００Ｌ）を加え、加熱還流下１時間抽出した。抽出後、ひだ折り濾紙で濾過した後、ロータリーエバポレーターを用いて減圧下に、抽出液より溶媒を留去して、垂盆草（ツルマンネングサ）の熱水抽出エキス１０ｋｇ（乾燥原料からの収率１．２５％）を得た。 Example 1 Preparation of hot water extract of whole bonsai grass 800 kg whole fresh bonsai grass was pulverized, and about 10 times as much water (8000 L) was added thereto, followed by extraction under heating and reflux for 1 hour. After extraction, after filtering with a fold-fold filter paper, the solvent is distilled off from the extract under reduced pressure using a rotary evaporator, and 10 kg of hot water extract of vine bonsai (yield from dry raw material) 1.25%) was obtained.

実施例２ 熱水抽出エキスの分離及び精製
前記の熱水抽出エキス（１９５０ｇ）に約１０倍量のメタノール（２０Ｌ）を加え、加熱還流下３時間抽出した。抽出後、ひだ折り濾紙で濾過した後、抽出残渣に再度メタノール（５０Ｌ）を加え、３時間加熱還流し、同様に濾過作業を行った。合計３回の抽出を行い、その抽出液をあわせ、ロータリーエバポレーターを用いて、減圧下に溶媒を留去して、垂盆草のメタノール可溶性画分８８７．５ｇ（原料からの収率０．５７％）を得た。 Example 2 Separation and Purification of Hot Water Extract Extract About 10 times the amount of methanol (20 L) was added to the hot water extract extract (1950 g), and the mixture was extracted with heating under reflux for 3 hours. After extraction, the mixture was filtered with a fold-fold filter paper, methanol (50 L) was added again to the extraction residue, and the mixture was heated to reflux for 3 hours, and similarly filtered. Extraction was performed a total of three times, the extracts were combined, the solvent was distilled off under reduced pressure using a rotary evaporator, and 887.5 g of methanol-soluble fraction of drooping bonsai (yield from raw material 0.57 %).

実施例３ メタノール可溶性画分の調製
前記メタノール可溶性画分（３９８．６ｇ）を、多孔質ポリマーカラムカラムクロマトグラフィー（ダイアイオンＨＰ−２０：４．０ｋｇ，移動相：水→メタノール）で順次溶出し、水溶出部（３０５．０ｇ）及びメタノール溶出部（９３．６ｇ）を得た。 Example 3 Preparation of methanol-soluble fraction The methanol-soluble fraction (398.6 g) was sequentially eluted by porous polymer column chromatography (Diaion HP-20: 4.0 kg, mobile phase: water → methanol). Water elution part (305.0 g) and methanol elution part (93.6 g) were obtained.

実施例４ メタノール溶出部の分離及び精製
前記メタノール溶出部（７２．０ｇ）を、順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（２．０ｋｇ、移動相：クロロホルム／メタノール／水（１０／３／０．５、下層→７／３／１,下層）→メタノール）で順次溶出し、溶出画分１（１２．１ｇ）、２（１９．２ｇ）、３（１０．４ｇ）、４（８．７ｇ）、５（１６．３ｇ）を得た。 Example 4 Separation and Purification of Methanol Elution Part The methanol elution part (72.0 g) was subjected to normal phase silica gel column chromatography (2.0 kg, mobile phase: chloroform / methanol / water (10/3 / 0.5, lower layer). → 7/3/1, lower layer) → methanol), and elution fractions 1 (12.1 g), 2 (19.2 g), 3 (10.4 g), 4 (8.7 g), 5 ( 16.3 g) was obtained.

実施例５
このうち、溶出画分１（１２．１ｇ）について、逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィー（３００ｇ，移動相：メタノール／水（５／９５→１０／９０→２０／８０→３０／７０→５０／５０→７０／３０）→メタノール）、多孔質ポリマーカラムカラムクロマトグラフィー（セファデックスＬＨ−２０：１５０ｇ，移動相：クロロホルム／メタノール（５０／５０））及びＨＰＬＣ（移動相：メタノール／水（４２／５８））にて分離、精製し、セダモシドＭ（ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｍ，２１．３ｍｇ，０．００００４％）を得た。 Example 5
Among these, for the eluted fraction 1 (12.1 g), reverse phase ODS column chromatography (300 g, mobile phase: methanol / water (5/95 → 10/90 → 20/80 → 30/70 → 50/50 → 70/30) → methanol), porous polymer column chromatography (Sephadex LH-20: 150 g, mobile phase: chloroform / methanol (50/50)) and HPLC (mobile phase: methanol / water (42/58) ) To obtain sedamoside M (21.3 mg, 0.00004%).

実施例６
溶出画分２（１９．２ｇ）について、逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィー（６００ｇ，移動相：メタノール／水（２０／８０→３０／７０→４０／６０→７０／３０）→メタノール）、順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００ｇ，移動相：クロロホルム→クロロホルム／メタノール（５０／１→２０／１→１０／１）→クロロホルム／メタノール／水（２０／３／１，下層）→メタノール）もしくは多孔質ポリマーカラムカラムクロマトグラフィー（セファデックスＬＨ−２０：１５０ｇ，移動相：クロロホルム／メタノール（５０／５０））、及びＨＰＬＣ（移動相：メタノール／水（３２／６８又は４０／６０）又はアセトニトリル／メタノール／水（１０／８／８２又は２０／８／７２））にて分離、精製し、化合物セダモシドＫ（ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｋ，２５．４ｍｇ，０．００００５％）、セダモシドＬ（ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｌ，１２．３ｍｇ，０．００００２％）、セダモシドＭ（ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｍ，３２．９ｍｇ，０．００００６％）、セダモシドＮ（ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｎ，９．２ｍｇ，０．００００２％）、セダモシドＯ（ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｏ，８．１ｍｇ，０．００００２％）及びセダモシドＪ（ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｊ，２．５ｍｇ，０．００００１％）を得た。 Example 6
For elution fraction 2 (19.2 g), reverse phase ODS column chromatography (600 g, mobile phase: methanol / water (20/80 → 30/70 → 40/60 → 70/30) → methanol), normal phase silica gel Column chromatography (100 g, mobile phase: chloroform → chloroform / methanol (50/1 → 20/1 → 10/1) → chloroform / methanol / water (20/3/1, lower layer) → methanol) or porous polymer column Column chromatography (Sephadex LH-20: 150 g, mobile phase: chloroform / methanol (50/50)) and HPLC (mobile phase: methanol / water (32/68 or 40/60) or acetonitrile / methanol / water ( 10/8/82 or 20/8/72)) Sedumoside K (sedumoside K, 25.4 mg, 0.00005%), Sedamoside L (sedumoside L, 12.3 mg, 0.00002%), Sedamoside M (sedumoside M, 32.9 mg, 0.00006%), Sedamoside N (Sedumoside N, 9.2 mg, 0.00002%), sedamoside O (sedumoside O, 8.1 mg, 0.00002%) and sedamoside J (sedumoside J, 2.5 mg, 0.00001%) were obtained.

実施例７
溶出画分３（１０．４ｇ）について、逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィー（２４０ｇ，移動相：メタノール／水（１０／９０→２０／８０→３０／７０→４０／６０）→メタノール）、多孔質ポリマーカラムカラムクロマトグラフィー（セファデックスＬＨ−２０：１５０ｇ，移動相：クロロホルム／メタノール（５０／５０））及びＨＰＬＣ（移動相：メタノール／水（４０／６０））にて分離、精製し、サルメノシドＶ（ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ Ｖ，１６．４ｍｇ，０．００００３％）、サルメノシドＶＩ（ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ ＶＩ，２７．７ｍｇ，０．００００５％）及びサルメノシドＶＩＩ（ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ ＶＩＩ，１２．８ｍｇ，０．００００２％）を得た。 Example 7
For elution fraction 3 (10.4 g), reverse phase ODS column chromatography (240 g, mobile phase: methanol / water (10/90 → 20/80 → 30/70 → 40/60) → methanol), porous polymer Separation and purification by column column chromatography (Sephadex LH-20: 150 g, mobile phase: chloroform / methanol (50/50)) and HPLC (mobile phase: methanol / water (40/60)), salmenoside V ( salmenoside V, 16.4 mg, 0.00003%), salmenoside VI (sarmenoside VI, 27.7 mg, 0.00005%) and salmenoside VII (sarmenoside VII, 12.8 mg, 0.00002%) were obtained.

実施例８
溶出画分４（８．７ｇ）について、逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィー（２４０ｇ，移動相：メタノール／水（１０／９０→２０／８０→３０／７０→４０／６０→５０／５０）→メタノール）、多孔質ポリマーカラムカラムクロマトグラフィー（セファデックスＬＨ−２０：１５０ｇ，移動相：クロロホルム／メタノール（５０／５０））及びＨＰＬＣ（移動相：メタノール／水（３５／６５））にて分離、精製し、サルメノシドＶＩ（ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ ＶＩ，２１．２ｍｇ，０．００００４％）を得た。 Example 8
For elution fraction 4 (8.7 g), reverse phase ODS column chromatography (240 g, mobile phase: methanol / water (10/90 → 20/80 → 30/70 → 40/60 → 50/50) → methanol) Separation and purification by porous polymer column chromatography (Sephadex LH-20: 150 g, mobile phase: chloroform / methanol (50/50)) and HPLC (mobile phase: methanol / water (35/65)) Salmenoside VI (sarmenoside VI, 21.2 mg, 0.00004%) was obtained.

前記の実施例で得られた構造式（１）〜（９）で示される化合物についての、質量分析、赤外吸収スペクトル、核磁気共鳴スペクトル等の測定により得られた結果を以下に示す。なお、以下の^１Ｈ−ＮＭＲ及び^１３Ｃ−ＮＭＲによる構造解析に用いたナンバリングは、次式に基づいている。 The results obtained by measuring mass spectrometry, infrared absorption spectrum, nuclear magnetic resonance spectrum, etc. of the compounds represented by the structural formulas (1) to (9) obtained in the above examples are shown below. In addition, the numbering used for the structural analysis by the following ¹ H-NMR and ¹³ C-NMR is based on the following formula.

［構造式（１）〜（６）の化合物について］ [Compounds of structural formulas (1) to (6)]

［構造式（７）〜（９）の化合物について］ [Regarding Compounds of Structural Formulas (7) to (9)]

セダモシドＫ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｋ：構造式（１）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２５： ＋４０．０°（ｃ＝１．３５，ＭｅＯＨ）
・紫外吸収スペクトル［ＭｅＯＨ，ｎｍ，（ｌｏｇ ε）］：２４１（４．０６）
・円二色性スペクトル（ＭｅＯＨ，ｎｍ，Δε）：２４２（＋２．９２），２８３（０．０２），３１９（＋０．３７）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ＥＩ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_１９Ｈ_３０Ｏ_８ （Ｍ^＋） ： ３８６．１９４０
実測値 ： ３８６．１９３６
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３３８９，１６５３，１０７６，１０３６
・質量分析ＥＩ−ＭＳ： ｍ／ｚ ３８６ （Ｍ^＋，３），３６８（６），２０６（８６），１９０（９２），１７８（１３），１４８（１００）
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ
0.95,1.06(3H each, both s,11,12−H₃),1.43,1.95(1H each, both m,7β,7α−H),1.61(1H,ddd,J=4.0,13.1,13.4Hz,8α−H),2.15(1H,m,8β−H),2.19,2.25(1H each, both d, J=15.6Hz,2α,2β−H),2.23(1H,m,6−H),2.37(1H,d,J=13.9Hz,13α−H),2.70(1H,dd,J=2.1,13.9Hz,13β−H),3.22(1H,dd,J=7.7,9.2Hz,2'−H),3.25(1H,m,5'−H),3.26(1H,dd,J=8.6,8.6Hz,4'−H),3.36(1H,m,3'−H),3.39,3.78(1H each, both d, J=10.7Hz,10−H₂),[3.65(1H,dd,J=5.5,11.4Hz),3.83(1H,dd,J=1.8,11.4Hz),6'−H₂],4.25(1H,d,J=7.6Hz,1'−H),5.83(1H,br s,4−H)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ_Ｃ
35.8(C−1),51.6(C−2),202.5(C−3),125.5(C−4),165.7(C−5),49.3(C−6),24.5(C−7),35.2(C−8),74.5(C−9),74.5(C−10),24.3(C−11),28.9(C−12),46.1(C−13),104.9(C−1'),75.2(C−2'),78.0(C−3'),71.6(C−4'),77.9(C−5'),62.7(C−6') Measured values and properties of sedamoside K (Sedumoside K: compound of structural formula (1)): amorphous powder, optical rotation: [α] _D ²⁵ : + 40.0 ° (c = 1.35, MeOH)
UV absorption spectrum [MeOH, nm, (log ε)]: 241 (4.06)
Circular dichroism spectrum (MeOH, nm, Δε): 242 (+2.92), 283 (0.02), 319 (+0.37)
High-resolution mass spectrometry (High-resolution EI-MS):
Theoretical value C ₁₉ H ₃₀ O ₈ (M ⁺ ): 386.1940
Actual value: 386.1936
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3389, 1653, 1076, 1036
Mass spectrometry EI-MS: m / z 386 (M ⁺ , 3), 368 (6), 206 (86), 190 (92), 178 (13), 148 (100)
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, CD ₃ OD): δ
0.95,1.06 (3H each, both s, 11,12−H ₃ ), 1.43,1.95 (1H each, both m, 7β, 7α−H), 1.61 (1H, ddd, J = 4.0,13.1,13.4Hz, 8α-H), 2.15 (1H, m, 8β-H), 2.19, 2.25 (1H each, both d, J = 15.6Hz, 2α, 2β-H), 2.23 (1H, m, 6-H), 2.37 (1H, d, J = 13.9Hz, 13α-H), 2.70 (1H, dd, J = 2.1,13.9Hz, 13β-H), 3.22 (1H, dd, J = 7.7,9.2Hz, 2'-H ), 3.25 (1H, m, 5'-H), 3.26 (1H, dd, J = 8.6,8.6Hz, 4'-H), 3.36 (1H, m, 3'-H), 3.39, 3.78 (1H each, both d, J = 10.7Hz, 10−H ₂ ), [3.65 (1H, dd, J = 5.5,11.4Hz), 3.83 (1H, dd, J = 1.8,11.4Hz), 6′−H ₂ ], 4.25 (1H, d, J = 7.6Hz, 1'-H), 5.83 (1H, br s, 4-H)
¹³ C-NMR (125 MHz, CD ₃ OD): δ _C
35.8 (C-1), 51.6 (C-2), 202.5 (C-3), 125.5 (C-4), 165.7 (C-5), 49.3 (C-6), 24.5 (C-7), 35.2 (C-8), 74.5 (C-9), 74.5 (C-10), 24.3 (C-11), 28.9 (C-12), 46.1 (C-13), 104.9 (C-1 '), 75.2 (C-2 '), 78.0 (C-3'), 71.6 (C-4 '), 77.9 (C-5'), 62.7 (C-6 ')

セダモシドＬ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｌ：構造式（２）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２５： ＋３９．６°（ｃ＝１．９０，ＭｅＯＨ）
・紫外吸収スペクトル［ＭｅＯＨ，ｎｍ，（ｌｏｇ ε）］：２４１（４．１０）
・円二色性スペクトル（ＭｅＯＨ，ｎｍ，Δε）：２３９（＋２．３５），２７８（０．０５），３２１（＋０．４２）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ＥＩ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_１９Ｈ_３０Ｏ_８ （Ｍ^＋） ： ３８６．１９４０
実測値 ： ３８６．１９３４
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３３８９，１６５３，１０７６，１０３７
・質量分析ＥＩ−ＭＳ： ｍ／ｚ ３８６ （Ｍ^＋，１），３６８（９），２０６（８５），１９０（１００），１７８（１２），１４８（４）
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ
0.98,1.07(3H each, both s,11,12−H₃),1.78,1.89(1H each, both m,7β,7α−H),1.74,1.81(1H each, both m,8α,8β−H),2.19,2.26(1H each, both d, J=15.6Hz,2α,2β−H),2.19(1H,m,6−H),2.48(1H,d,J=14.6Hz,13α−H),2.54(1H,dd,J=1.9,14.6Hz,13β−H),3.23(1H,dd,J=7.7,9.2Hz,2'−H),3.28(2H,m,4',5'−H),3.36(1H,m,3'−H),3.40,3.83(1H each, both d, J=10.1Hz,10−H₂),[3.65(1H,dd,J=5.5,11.9Hz),3.87(1H,dd,J=1.8,11.9Hz),6'−H₂],4.29(1H,d,J=7.7Hz,1'−H),5.83(1H,br s,4−H)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ_Ｃ
35.7(C−1),51.3(C−2),202.5(C−3),125.6(C−4),167.1(C−5),50.0(C−6),23.7(C−7),34.1(C−8),74.6(C−9),79.0(C−10),24.6(C−11),28.9(C−12),46.1(C−13),105.0(C−1'),75.2(C−2'),77.9(C−3'),71.6(C−4'),78.0(C−5'),62.7(C−6') Measured values and properties of sedamoside L (Sedumoside L: compound of structural formula (2)): Amorphous powder, optical rotation: [α] _D ²⁵ : + 39.6 ° (c = 1.90, MeOH)
UV absorption spectrum [MeOH, nm, (log ε)]: 241 (4.10)
Circular dichroism spectrum (MeOH, nm, Δε): 239 (+2.35), 278 (0.05), 321 (+0.42)
High-resolution mass spectrometry (High-resolution EI-MS):
Theoretical value C ₁₉ H ₃₀ O ₈ (M ⁺ ): 386.1940
Actual value: 386.1934
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3389, 1653, 1076, 1037
Mass spectrometry EI-MS: m / z 386 (M ⁺ , 1), 368 (9), 206 (85), 190 (100), 178 (12), 148 (4)
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, CD ₃ OD): δ
0.98,1.07 (3H each, both s, 11,12−H ₃ ), 1.78,1.89 (1H each, both m, 7β, 7α−H), 1.74,1.81 (1H each, both m, 8α, 8β−H ), 2.19, 2.26 (1H each, both d, J = 15.6Hz, 2α, 2β-H), 2.19 (1H, m, 6-H), 2.48 (1H, d, J = 14.6Hz, 13α-H) , 2.54 (1H, dd, J = 1.9,14.6Hz, 13β-H), 3.23 (1H, dd, J = 7.7,9.2Hz, 2'-H), 3.28 (2H, m, 4 ', 5'- H), 3.36 (1H, m , 3'-H), 3.40,3.83 (1H each, both d, J = 10.1Hz, 10-H 2), [3.65 (1H, dd, J = 5.5,11.9Hz) , 3.87 (1H, dd, J = 1.8,11.9Hz), 6'-H 2], 4.29 (1H, d, J = 7.7Hz, 1'-H), 5.83 (1H, br s, 4-H)
¹³ C-NMR (125 MHz, CD ₃ OD): δ _C
35.7 (C-1), 51.3 (C-2), 202.5 (C-3), 125.6 (C-4), 167.1 (C-5), 50.0 (C-6), 23.7 (C-7), 34.1 (C-8), 74.6 (C-9), 79.0 (C-10), 24.6 (C-11), 28.9 (C-12), 46.1 (C-13), 105.0 (C-1 '), 75.2 (C-2 '), 77.9 (C-3'), 71.6 (C-4 '), 78.0 (C-5'), 62.7 (C-6 ')

セダモシドＭ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｍ：構造式（３）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２７： ６３．７°（ｃ＝１．００，ＭｅＯＨ）
・紫外吸収スペクトル［ＭｅＯＨ，ｎｍ，（ｌｏｇ ε）］：２９０（４．１２）
・円二色性スペクトル（ＭｅＯＨ，ｎｍ，Δε）：２８３（２．６３）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_１９Ｈ_２８Ｏ_７Ｎａ （Ｍ＋Ｎａ）^＋ ： ３９１．１７３３
実測値 ： ３９１．１７３８
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３６４９，１６５３，１５７６，１０７６
・質量分析
ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ３９１ （Ｍ＋Ｎａ）^＋
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ
0.88,1.15(3H each, both s,11,12−H₃),1.45,2.05(1H each, both m,7β,7α−H),2.17(1H,dd,J=0.9,16.2Hz,2β−H),2.30,2.40(1H each. both m,8β,8α−H),2.44(1H,d,J=16.2Hz,2α−H),2.50(1H,m,6−H),3.23(1H,m,2'−H),3.26(1H,m,5'−H),3.28(1H,m,4'−H),3.36(1H,m,3'−H),[3.66(1H,dd,J=5.5,11.9Hz),3.86(1H,dd,J=2.1,11.9Hz),6'−H₂],4.22,4.43(1H each, both d,J=14.7Hz,10−H₂),4.29(1H,d,J=7.7Hz,1'−H),5.79(1H,br s,4−H),6.45(1H,s,13−H)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ_Ｃ
37.3(C−1),54.7(C−2),202.8(C−3),123.8(C−4),159.7(C−5),46.9(C−6),23.4(C−7),28.2(C−8),151.8(C−9),72.7(C−10),20.3(C−11),29.0(C−12),126.5(C−13),104.0(C−1'),75.1(C−2'),78.1(C−3'),71.6(C−4'),78.0(C−5'),62.8(C−6') Measured values and properties of sedamoside M (Sedumoside M: compound of structural formula (3)): amorphous powder, optical rotation: [α] _D ²⁷ : 63.7 ° (c = 1.00, MeOH)
UV absorption spectrum [MeOH, nm, (log ε)]: 290 (4.12)
Circular dichroism spectrum (MeOH, nm, Δε): 283 (2.63)
-High-resolution mass spectrometry (High-resolution positive-ion FAB-MS):
Theoretical value C ₁₉ H ₂₈ O ₇ Na (M + Na) ⁺ : 391.1733
Actual value: 391.1738
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3649, 1653, 1576, 1076
-Mass spectrometry positive-ion FAB-MS: m / z 391 (M + Na) ⁺
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, CD ₃ OD): δ
0.88, 1.15 (3H each, both s, 11, 12−H ₃ ), 1.45, 2.05 (1H each, both m, 7β, 7α−H), 2.17 (1H, dd, J = 0.9, 16.2Hz, 2β− H), 2.30, 2.40 (1H each.both m, 8β, 8α-H), 2.44 (1H, d, J = 16.2Hz, 2α-H), 2.50 (1H, m, 6-H), 3.23 (1H , m, 2'-H), 3.26 (1H, m, 5'-H), 3.28 (1H, m, 4'-H), 3.36 (1H, m, 3'-H), [3.66 (1H, dd, J = 5.5,11.9Hz), 3.86 (1H, dd, J = 2.1,11.9Hz), 6'−H ₂ ], 4.22,4.43 (1H each, both d, J = 14.7Hz, 10−H ₂ ), 4.29 (1H, d, J = 7.7Hz, 1'-H), 5.79 (1H, br s, 4-H), 6.45 (1H, s, 13-H)
¹³ C-NMR (125 MHz, CD ₃ OD): δ _C
37.3 (C-1), 54.7 (C-2), 202.8 (C-3), 123.8 (C-4), 159.7 (C-5), 46.9 (C-6), 23.4 (C-7), 28.2 (C-8), 151.8 (C-9), 72.7 (C-10), 20.3 (C-11), 29.0 (C-12), 126.5 (C-13), 104.0 (C-1 '), 75.1 (C-2 '), 78.1 (C-3'), 71.6 (C-4 '), 78.0 (C-5'), 62.8 (C-6 ')

セダモシドＮ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｎ：構造式（４）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２５： ２７．６°（ｃ＝０．７０，ＭｅＯＨ）
・円二色性スペクトル（ＭｅＯＨ，ｎｍ，Δε）：２８２（０．７６），３１７（＋０．０２）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ＥＩ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_１９Ｈ_３２Ｏ_８ （Ｍ^＋） ： ３８８．２０９７
実測値 ： ３８８．２０９９
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３３８９，１７０８，１０７６，１０３５
・質量分析ＥＩ−ＭＳ： ｍ／ｚ ３８８ （Ｍ^＋，４），２２６（４５），２０８（９６），１９５（６０），１５１（１００）
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ
0.97,1.05(3H each, both s,11,12−H₃),1.10(3H,s,13−H₃),1.64,1.71(1H each, both m,8α,8β−H),1.77(2H,m,7−H₂),1.80(1H,m,6−H),1.88,2.43(1H each, both d, J=17.4Hz,2α,2β−H),2.09,2.83(1H each, both d, J=17.7Hz,4α,4β−H),3.23(1H,dd,J=7.7,9.2Hz,2'−H),3.27(2H,m,4',5'−H),3.35(1H,dd,J=9.2,9.2Hz,3'−H),3.48,4.04(1H each, both d, J=10.5Hz,10−H₂),[3.65(1H,dd,J=5.8,11.9Hz),3.86(1H,dd,J=1.5,11.9Hz),6'−H₂],4.22(1H,d,J=7.7Hz,1'−H)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ_Ｃ
34.7(C−1),48.8(C−2),217.3(C−3),46.8(C−4),48.8(C−5),56.9(C−6),26.7(C−7),34.7(C−8),84.8(C−9),75.3(C−10),28.3(C−11),30.4(C−12),29.5(C−13),105.0(C−1'),75.1(C−2'),78.0(C−3'),71.7(C−4'),78.1(C−5'),62.8(C−6') Measured values and properties of sedamoside N (Sedumoside N: compound of structural formula (4)): amorphous powder, optical rotation: [α] _D ²⁵ : 27.6 ° (c = 0.70, MeOH)
Circular dichroism spectrum (MeOH, nm, Δε): 282 (0.76), 317 (+0.02)
High-resolution mass spectrometry (High-resolution EI-MS):
Theoretical value C ₁₉ H ₃₂ O ₈ (M ⁺ ): 388.2097
Actual value: 388.2099
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3389, 1708, 1076, 1035
Mass spectrometry EI-MS: m / z 388 (M ⁺ , 4), 226 (45), 208 (96), 195 (60), 151 (100)
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, CD ₃ OD): δ
0.97, 1.05 (3H each, both s, 11, 12-H ₃ ), 1.10 (3H, s, 13-H ₃ ), 1.64, 1.71 (1H each, both m, 8α, 8β-H), 1.77 (2H , m, 7−H ₂ ), 1.80 (1H, m, 6−H), 1.88, 2.43 (1H each, both d, J = 17.4Hz, 2α, 2β−H), 2.09, 2.83 (1H each, both d, J = 17.7Hz, 4α, 4β-H), 3.23 (1H, dd, J = 7.7,9.2Hz, 2'-H), 3.27 (2H, m, 4 ', 5'-H), 3.35 ( 1H, dd, J = 9.2,9.2Hz, 3'−H), 3.48,4.04 (1H each, both d, J = 10.5Hz, 10−H ₂ ), [3.65 (1H, dd, J = 5.8,11.9 Hz), 3.86 (1H, dd , J = 1.5,11.9Hz), 6'-H 2], 4.22 (1H, d, J = 7.7Hz, 1'-H)
¹³ C-NMR (125 MHz, CD ₃ OD): δ _C
34.7 (C-1), 48.8 (C-2), 217.3 (C-3), 46.8 (C-4), 48.8 (C-5), 56.9 (C-6), 26.7 (C-7), 34.7 (C-8), 84.8 (C-9), 75.3 (C-10), 28.3 (C-11), 30.4 (C-12), 29.5 (C-13), 105.0 (C-1 '), 75.1 (C-2 '), 78.0 (C-3'), 71.7 (C-4 '), 78.1 (C-5'), 62.8 (C-6 ')

セダモシドＯ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｏ：構造式（５）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２５： ３６．９°（ｃ＝０．４１，ＭｅＯＨ）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ＥＩ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_１９Ｈ_３２Ｏ_８ （Ｍ^＋） ： ３８８．２０９７
実測値 ： ３８８．２１０２
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３３８９，１３８５，１０７５，１０４５
・質量分析ＥＩ−ＭＳ： ｍ／ｚ ３８８ （Ｍ^＋，１），３７０（２），２２６（２１），２０９（１００），１９１（７７）
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ
0.96,0.97(3H each, both s,11,12−H₃),1.21(3H,s,13−H₃),1.29(1H,dd,J=5.8,12.8Hz,2α−H),1.59(ddd, J=8.0,12.5,14.1Hz,8α−H),1.66(1H,dd,J=8.6,10.4Hz,6−H),1.74(1H,dd,J=7.7,14.1Hz,8β−H),1.81,2.01(1H each, both m,7α,7β−H),1.87(1H,dd,J=12.8,12.8Hz,2β−H),3.22(1H,dd,J=7.7,9.2Hz,2'−H),3.28(2H,m,4',5'−H),3.37(1H,dd,J=9.2,9.2Hz,3'−H),3.76,4.19(1H each, both d, J=11.0Hz,10−H₂),3.77(1H,ddd,J=0.4,5.8,12.8Hz,3−H),[3.66(1H,ddd,J=1.2,4.3,11.9Hz),3.87(1H,dd,J=1.8,11.9Hz),6'−H₂],4.33(1H,d,J=7.7Hz,1'−H),4.69(1H,d,J=4.0Hz,4−H)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ_Ｃ
35.4(C−1),36.5(C−2),67.7(C−3),83.5(C−4),50.1(C−5),55.4(C−6),28.3(C−7),34.4(C−8),97.4(C−9),71.3(C−10),28.6(C−11),30.5(C−12),20.7(C−13),104.8(C−1'),75.3(C−2'),78.1(C−3'),71.8(C−4'),78.1(C−5'),62.9(C−6') Measured values and properties of sedamoside O (Sedumoside O: compound of structural formula (5)): amorphous powder, optical rotation: [α] _D ²⁵ : 36.9 ° (c = 0.41, MeOH)
High-resolution mass spectrometry (High-resolution EI-MS):
Theoretical value C ₁₉ H ₃₂ O ₈ (M ⁺ ): 388.2097
Actual value: 388.2102
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3389, 1385, 1075, 1045
Mass spectrometry EI-MS: m / z 388 (M ⁺ , 1), 370 (2), 226 (21), 209 (100), 191 (77)
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, CD ₃ OD): δ
0.96,0.97 (3H each, both s, 11,12−H ₃ ), 1.21 (3H, s, 13−H ₃ ), 1.29 (1H, dd, J = 5.8,12.8Hz, 2α−H), 1.59 ( ddd, J = 8.0,12.5,14.1Hz, 8α-H), 1.66 (1H, dd, J = 8.6,10.4Hz, 6-H), 1.74 (1H, dd, J = 7.7,14.1Hz, 8β-H) ), 1.81, 2.01 (1H each, both m, 7α, 7β-H), 1.87 (1H, dd, J = 12.8,12.8Hz, 2β-H), 3.22 (1H, dd, J = 7.7,9.2Hz, 2'-H), 3.28 (2H, m, 4 ', 5'-H), 3.37 (1H, dd, J = 9.2,9.2Hz, 3'-H), 3.76,4.19 (1H each, both d, J = 11.0Hz, 10−H ₂ ), 3.77 (1H, ddd, J = 0.4,5.8,12.8Hz, 3-H), [3.66 (1H, ddd, J = 1.2,4.3,11.9Hz), 3.87 ( 1H, dd, J = 1.8,11.9Hz) , 6'-H 2], 4.33 (1H, d, J = 7.7Hz, 1'-H), 4.69 (1H, d, J = 4.0Hz, 4-H )
¹³ C-NMR (125 MHz, CD ₃ OD): δ _C
35.4 (C-1), 36.5 (C-2), 67.7 (C-3), 83.5 (C-4), 50.1 (C-5), 55.4 (C-6), 28.3 (C-7), 34.4 (C-8), 97.4 (C-9), 71.3 (C-10), 28.6 (C-11), 30.5 (C-12), 20.7 (C-13), 104.8 (C-1 '), 75.3 (C-2 '), 78.1 (C-3'), 71.8 (C-4 '), 78.1 (C-5'), 62.9 (C-6 ')

セダモシドＪ（Ｓｅｄｕｍｏｓｉｄｅ Ｊ：構造式（６）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２１： ＋２２．９°（ｃ＝０．０６，ＭｅＯＨ）
・円二色性スペクトル（ＭｅＯＨ，ｎｍ，Δε）：２９０（＋０．０５）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_２５Ｈ_４４Ｏ_１１Ｎａ （Ｍ＋Ｎａ）^＋ ： ５４３．２７８１
実測値 ： ５４３．２７８６
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３３８９，１７０６，１０６７，１０４７
・質量分析
ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ５４３ （Ｍ＋Ｎａ）^＋
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ
0.77,1.07(3H each, both s,11,12−H₃),1.09(3H,d,J=6.1Hz,13−H₃),1.14(1H,m,6−H),1.20(3H,d,J=6.1Hz,10−H₃),1.20,1.64(1H each, both m,7−H₂),1.26(3H,d,J=6.1Hz,6''−H₃),1.65,1.72(1H each, both m,8−H₂),1.96(1H,dd,J=2.5,13.2Hz,2β−H),2,19(1H,dd,J=12.2,12.2Hz,4α−H),2.22(1H,ddd,J=2.5,4.9,12.2Hz,4β−H),2,39(1H,d,J=13.2Hz,2α−H),3.14(1H,dd,J=7.3,8.6Hz,2'−H),3.23(1H,dd,J=8.5,8.5Hz,4'−H),3.32(1H,m,3'−H),3.36(1H,m,4''−H),3.38(1H,m,5'−H),[3.57(1H,dd,J=6.1,11.0Hz),3.97(1H,dd,J=2.5,11.0Hz),6''−H₂],3.64(1H,m,5''−H),3.66(1H,m,3''−H),3.79(1H,m,9−H),3.81(1H,m,2''−H),4.30(1H,d,J=7.3Hz,1'−H), 4.74(1H,br s,1''−H)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ_Ｃ
40.5(C−1),57.2(C−2),214.6(C−3),50.9(C−4),37.7(C−5),53.7(C−6),26.0(C−7),40.4(C−8),76.5(C−9),20.1(C−10),21.3(C−11),30.4(C−12),21.6(C−13),102.5(C−1'),75.2(C−2'),78.2(C−3'),72.0(C−4'),76.9(C−5'),68.6(C−6'),102.4(C−1''),72.3(C−2''),72.5(C−3''),74.0(C−4''),69.8(C−5''),18.2(C−6'') Measured values and properties of sedamoside J (Sedumoside J: compound of structural formula (6)): Amorphous powder, optical rotation: [α] _D ²¹ : + 22.9 ° (c = 0.06, MeOH)
Circular dichroism spectrum (MeOH, nm, Δε): 290 (+0.05)
-High-resolution mass spectrometry (High-resolution positive-ion FAB-MS):
Theoretical value C ₂₅ H ₄₄ O ₁₁ Na (M + Na) ⁺ : 543.2781
Actual measurement value: 5433.2786
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3389, 1706, 1067, 1047
-Mass spectrometry positive-ion FAB-MS: m / z 543 (M + Na) ⁺
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, CD ₃ OD): δ
0.77,1.07 (3H each, both s, 11,12−H ₃ ), 1.09 (3H, d, J = 6.1Hz, 13−H ₃ ), 1.14 (1H, m, 6−H), 1.20 (3H, d, J = 6.1Hz, 10−H ₃ ), 1.20,1.64 (1H each, both m, 7−H ₂ ), 1.26 (3H, d, J = 6.1Hz, 6``−H <sub>3</sub> ), 1.65, 1.72 (1H each, both m, 8−H <sub>2</sub> ), 1.96 (1H, dd, J = 2.5,13.2Hz, 2β−H), 2,19 (1H, dd, J = 12.2,12.2Hz, 4α−H ), 2.22 (1H, ddd, J = 2.5, 4.9, 12.2Hz, 4β-H), 2,39 (1H, d, J = 13.2Hz, 2α-H), 3.14 (1H, dd, J = 7.3, 8.6Hz, 2'-H), 3.23 (1H, dd, J = 8.5,8.5Hz, 4'-H), 3.32 (1H, m, 3'-H), 3.36 (1H, m, 4``- H), 3.38 (1H, m, 5'-H), (3.57 (1H, dd, J = 6.1, 11.0Hz), 3.97 (1H, dd, J = 2.5, 11.0Hz), 6``-H <sub>2</sub> ], 3.64 (1H, m, 5``-H), 3.66 (1H, m, 3 ''-H), 3.79 (1H, m, 9-H), 3.81 (1H, m, 2 ''-H) ), 4.30 (1H, d, J = 7.3Hz, 1'-H), 4.74 (1H, br s, 1``-H)
<sup>13</sup> C-NMR (125 MHz, CD <sub>3</sub> OD): δ <sub>C</sub>
40.5 (C-1), 57.2 (C-2), 214.6 (C-3), 50.9 (C-4), 37.7 (C-5), 53.7 (C-6), 26.0 (C-7), 40.4 (C-8), 76.5 (C-9), 20.1 (C-10), 21.3 (C-11), 30.4 (C-12), 21.6 (C-13), 102.5 (C-1 '), 75.2 (C-2 '), 78.2 (C-3'), 72.0 (C-4 '), 76.9 (C-5'), 68.6 (C-6 '), 102.4 (C-1''), 72.3 ( C-2``), 72.5 (C-3 ''), 74.0 (C-4 ''), 69.8 (C-5 ''), 18.2 (C-6 '')

サルメノシドＶ（Ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ Ｖ：構造式（７）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形黄色粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２６： ＋３０．２°（ｃ＝０．７８，ＭｅＯＨ）
・紫外吸収スペクトル［ＭｅＯＨ，ｎｍ，（ｌｏｇ ε）］：２５５（４．２９），３５５（４．１３）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_３０Ｈ_３４Ｏ_１８Ｎａ （Ｍ＋Ｎａ）^＋ ： ７０５．１６４３
実測値 ： ７０５．１６４０
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３３８９，１７１８，１６５３，１６０３，１５５８，１４５６，１０７５
・質量分析
ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ７０５ （Ｍ＋Ｎａ）^＋
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ
1.74(3H,s,6''−OAc),3.87(3H,s,3'−OCH₃),5.08(1H,d, J=7.5Hz,1'''−H),5.45(1H,d,J=7.6Hz,1''−H),6.48,6.84(1H each, both br s,6,8−H),6.93(1H,d,J=8.4Hz,5'−H),7.59(1H,dd,J=2.4,8.4Hz,6'−H),7.86(1H,d,J=2.4Hz,2'−H),12.57(1H,br s,5−OH)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ_Ｃ
156.8(C−2),133.2(C−3),177.4(C−4),160.1(C−5),99.3(C−6),162.8(C−7),94.6(C−8),155.9(C−9),105.5(C−10),120.7(C−1'),113.2(C−2'),146.8(C−3'),149.6(C−4'),115.1(C−5'),122.4(C−6'),100.9(C−1''),74.1(C−2''),76.3(C−3''),69.7(C−4''),73.8(C−5''),62.5(C−6''),99.8(C−1'''),73.0(C−2'''),76.0(C−3'''),69.5(C−4'''),77.1(C−5'''),60.5(C−6'''),55.6(OCH₃),20.0,169.8(OAc) Measured values and properties of salmenoside V (Sarmenoside V: compound of structural formula (7)) and properties: amorphous yellow powder, optical rotation: [α] _D ²⁶ : + 30.2 ° (c = 0.78, MeOH)
UV absorption spectrum [MeOH, nm, (log ε)]: 255 (4.29), 355 (4.13)
-High-resolution mass spectrometry (High-resolution positive-ion FAB-MS):
Theoretical value C ₃₀ H ₃₄ O ₁₈ Na (M + Na) ⁺ : 705.1643
Actual measurement value: 705.1640
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3389, 1718, 1653, 1603, 1558, 1456, 1075
-Mass spectrometry positive-ion FAB-MS: m / z 705 (M + Na) ⁺
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, DMSO-d ₆ ): δ
1.74 (3H, s, 6``-OAc), 3.87 (3H, s, 3'-OCH <sub>3</sub> ), 5.08 (1H, d, J = 7.5Hz, 1 '''-H), 5.45 (1H, d , J = 7.6Hz, 1``-H), 6.48,6.84 (1H each, both br s, 6,8-H), 6.93 (1H, d, J = 8.4Hz, 5'-H), 7.59 ( 1H, dd, J = 2.4,8.4Hz, 6'-H), 7.86 (1H, d, J = 2.4Hz, 2'-H), 12.57 (1H, br s, 5-OH)
¹³ C-NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ): δ _C
156.8 (C-2), 133.2 (C-3), 177.4 (C-4), 160.1 (C-5), 99.3 (C-6), 162.8 (C-7), 94.6 (C-8), 155.9 (C-9), 105.5 (C-10), 120.7 (C-1 '), 113.2 (C-2'), 146.8 (C-3 '), 149.6 (C-4'), 115.1 (C-5 '), 122.4 (C-6'), 100.9 (C-1 ''), 74.1 (C-2 ''), 76.3 (C-3 ''), 69.7 (C-4 ''), 73.8 (C -5 ''), 62.5 (C-6 ''), 99.8 (C-1 '''), 73.0 (C-2'''), 76.0 (C-3 '''), 69.5 (C-4 '''), 77.1 (C-5'''), 60.5 (C-6 '''), 55.6 (OCH ₃ ), 20.0,169.8 (OAc)

サルメノシドＶＩ（Ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ ＶＩ：構造式（８）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形黄色粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２７： ＋１４０．３°（ｃ＝１．１５，ＭｅＯＨ）
・紫外吸収スペクトル［ＭｅＯＨ，ｎｍ，（ｌｏｇ ε）］：２５８（４．０８），２７４（４．０８），３４４（３．９４）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_２８Ｈ_３２Ｏ_１７Ｎａ （Ｍ＋Ｎａ）^＋ ： ６６３．１５３７
実測値 ： ６６３．１５４２
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３３８９，１６５３，１６０９，１５４１，１４５８，１０５９
・質量分析
ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ６６３ （Ｍ＋Ｎａ）^＋
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ
1.13(3H,d,J=6.2Hz,6'''−H₃),3.85(3H,s,3'−OCH₃),5.51(1H,d,J=1.4Hz,1'''−H),5.57(1H,d,J=7.6Hz,1''−H),6.62(1H,br s,6−H),6.94(1H,d,J=8.3Hz,5'−H),7.64(1H,dd,J=2.1,8.3Hz,6'−H),7.99(1H,d,J=2.1Hz,2'−H),12.03(1H,br s,5−OH)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ_Ｃ
156.6(C−2),132.9(C−3),177.8(C−4),152.0(C−5),98.7(C−6),150.4(C−7),126.9(C−8),144.4(C−9),105.4(C−10),121.1(C−1'),113.4(C−2'),146.8(C−3'),149.4(C−4'),115.1(C−5'),122.4(C−6'),100.6(C−1''),74.2(C−2'''),76.3(C−3''),69.8(C−4''),77.3(C−5''),60.5(C−6''),99.1(C−1'''),69.7(C−2'''),69.9(C−3'''),71.6(C−4'''),69.7(C−5'''),17.8(C−6'''),55.5(OCH₃) Measured values and properties of salmenoside VI (Sarmenoside VI: compound of structural formula (8)) and properties: amorphous yellow powder, optical rotation: [α] _D ²⁷ : + 140.3 ° (c = 1.15, MeOH)
UV absorption spectrum [MeOH, nm, (log ε)]: 258 (4.08), 274 (4.08), 344 (3.94)
-High-resolution mass spectrometry (High-resolution positive-ion FAB-MS):
Theoretical value C ₂₈ H ₃₂ O ₁₇ Na (M + Na) ⁺ : 6633.1537
Actual value: 663.1542
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3389, 1653, 1609, 1541, 1458, 1059
-Mass spectrometry positive-ion FAB-MS: m / z 663 (M + Na) ⁺
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, DMSO-d ₆ ): δ
1.13 (3H, d, J = 6.2Hz, 6 '''- H 3), 3.85 (3H, s, 3'-OCH 3), 5.51 (1H, d, J = 1.4Hz, 1''' - H ), 5.57 (1H, d, J = 7.6Hz, 1``-H), 6.62 (1H, br s, 6-H), 6.94 (1H, d, J = 8.3Hz, 5'-H), 7.64 (1H, dd, J = 2.1,8.3Hz, 6'-H), 7.99 (1H, d, J = 2.1Hz, 2'-H), 12.03 (1H, br s, 5-OH)
¹³ C-NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ): δ _C
156.6 (C-2), 132.9 (C-3), 177.8 (C-4), 152.0 (C-5), 98.7 (C-6), 150.4 (C-7), 126.9 (C-8), 144.4 (C-9), 105.4 (C-10), 121.1 (C-1 '), 113.4 (C-2'), 146.8 (C-3 '), 149.4 (C-4'), 115.1 (C-5 '), 122.4 (C-6'), 100.6 (C-1 ''), 74.2 (C-2 '''), 76.3 (C-3''), 69.8 (C-4''), 77.3 ( C-5 ''), 60.5 (C-6 ''), 99.1 (C-1 '''), 69.7 (C-2'''), 69.9 (C-3 '''), 71.6 (C- 4 '''), 69.7 ( C-5'''), 17.8 (C-6 '''), 55.5 (OCH 3)

サルメノシドＶＩＩ（Ｓａｒｍｅｎｏｓｉｄｅ ＶＩＩ：構造式（９）の化合物）の物性測定値
・性状： 不定形黄色粉末
・旋光度：［α］_Ｄ ^２７： −９．０°（ｃ＝０．５４，ＭｅＯＨ）
・紫外吸収スペクトル［ＭｅＯＨ，ｎｍ，（ｌｏｇ ε）］：２５７（４．２２），３５８（４．０５）
・高分解能質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ）：
理論値 Ｃ_３１Ｈ_３６Ｏ_１９Ｎａ （Ｍ＋Ｎａ）^＋ ： ７３５．１７４８
実測値 ： ７３５．１７５２
・赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^１）： ３４２０，１７２０，１６５３，１６０１，１５５９，１４５６，１０７１
・質量分析
ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ７３５ （Ｍ＋Ｎａ）^＋
・核磁気共鳴スペクトル：
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ
1.74(3H,s,OAc),3.87.3.87(3H each, both s,8,3'−OCH₃),5.08(1H,d,J=7.6Hz,1'''−H),5.45(1H,d,J=7.6Hz,1''−H),6.68(1H,br s,6−H),6.96(1H,d,J=8.3Hz,5'−H),7.60(1H,dd,J=2.0,8.3Hz,6'−H),7.90(1H,d,J=2.0Hz,2'−H),12.28(1H,br s,5−OH)
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ_Ｃ
156.5(C−2),133.1(C−3),177.6(C−4),155.6(C−5),98.5(C−6),156.0(C−7),128.9(C−8),147.9(C−9),105.1(C−10),120.8(C−1'),113.1(C−2'),146.8(C−3'),149.8(C−4'),115.3(C−5'),122.2(C−6'),101.1(C−1''),74.1(C−2''),76.5(C−3''),69.7(C−4''),73.8(C−5''),62.6(C−6''),100.2(C−1'''),73.0(C−2'''),76.0(C−3'''),69.5(C−4'''),77.1(C−5'''),60.5(C−6'''),55.4,61.2(OCH₃),20.0,169.7(OAc) Measured values and properties of salmenoside VII (Sarmenoside VII: compound of structural formula (9)) and properties: amorphous yellow powder, optical rotation: [α] _D ²⁷ : −9.0 ° (c = 0.54, MeOH)
UV absorption spectrum [MeOH, nm, (log ε)]: 257 (4.22), 358 (4.05)
-High-resolution mass spectrometry (High-resolution positive-ion FAB-MS):
Theoretical value C ₃₁ H ₃₆ O ₁₉ Na (M + Na) ⁺ : 735.1748
Actual value: 735.1752.
Infrared absorption spectrum (KBr, cm ¹ ): 3420, 1720, 1653, 1601, 1559, 1456, 1071
-Mass spectrometry positive-ion FAB-MS: m / z 735 (M + Na) ⁺
・ Nuclear magnetic resonance spectrum:
¹ H-NMR (500 MHz, DMSO-d ₆ ): δ
1.74 (3H, s, OAc), 3.87.3.87 (3H each, both s, 8,3'-OCH ₃ ), 5.08 (1H, d, J = 7.6Hz, 1 '''-H), 5.45 (1H , d, J = 7.6Hz, 1``-H), 6.68 (1H, br s, 6-H), 6.96 (1H, d, J = 8.3Hz, 5'-H), 7.60 (1H, dd, J = 2.0, 8.3Hz, 6'-H), 7.90 (1H, d, J = 2.0Hz, 2'-H), 12.28 (1H, br s, 5-OH)
¹³ C-NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ): δ _C
156.5 (C-2), 133.1 (C-3), 177.6 (C-4), 155.6 (C-5), 98.5 (C-6), 156.0 (C-7), 128.9 (C-8), 147.9 (C-9), 105.1 (C-10), 120.8 (C-1 '), 113.1 (C-2'), 146.8 (C-3 '), 149.8 (C-4'), 115.3 (C-5 '), 122.2 (C-6'), 101.1 (C-1 ''), 74.1 (C-2 ''), 76.5 (C-3 ''), 69.7 (C-4 ''), 73.8 (C -5 ''), 62.6 (C-6 ''), 100.2 (C-1 '''), 73.0 (C-2'''), 76.0 (C-3 '''), 69.5 (C-4 '''), 77.1 (C-5'''), 60.5 (C-6 '''), 55.4,61.2 (OCH ₃ ), 20.0,169.7 (OAc)

実施例９ ＨｅｐＧ２細胞を用いた脂肪代謝促進作用試験
実施例３で得られたメタノール溶出部、水溶出部、実施例５で得られたセダモシドＭ（構造式（３）の化合物）、実施例６で得られたセダモシドＫ（構造式（１）の化合物）、セダモシドＮ（構造式（４）の化合物）、実施例７で得られたサルメノシドＶ（構造式（７）の化合物）、サルメノシドＶＩＩ（構造式（９）の化合物）について、脂肪代謝改善作用の指標として、ＨｅｐＧ２細胞を用いた細胞内脂肪代謝促進作用試験を実施した。試験方法を以下に示す。 Example 9 Fat Metabolism Promoting Action Test Using HepG2 Cells Methanol elution part, water elution part obtained in Example 3, sedamoside M (compound of structural formula (3)) obtained in Example 5, Example 6 Sedamoside K (compound of structural formula (1)), sedamoside N (compound of structural formula (4)), salmenoside V (compound of structural formula (7)) obtained in Example 7, salmenoside VII ( With respect to the compound of structural formula (9), an intracellular fat metabolism promoting action test using HepG2 cells was performed as an index of fat metabolism improving action. The test method is shown below.

大日本住友製薬社より購入したヒト肝がん由来ＨｅｐＧ２細胞を用いた。培地はｍｉｎｉｍｕｍ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｍｅｄｉｕｍ Ｅａｇｌｅ（ＭＥＭ，シグマ−アルドリッチ社）に１０％（ｖ／ｖ）ｆａｔａｌ ｃａｌｆ ｓｅｒｕｍ（ＦＣＳ）及び１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬペニシリンＧ、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン及び０．１ｍＭ非必須アミノ酸（インビトロジェン社）を添加して使用した。細胞の培養は、７５ｃｍ^２培養フラスコ（ファルコン社）中で行い、５％ＣＯ_２雰囲気下３７℃にて行った。継代操作は，培養した細胞をダルベッコＰＢＳ（−）（日水製薬社）で洗浄した後、０．０２％（ｗ／ｖ）トリプシン（ディフコ社）及び０．０５％（ｗ／ｖ）ＥＤＴＡ・２Ｎａ（同人化学社）を含むＰＢＳ（−）により剥離して、定法に従い行った。 Human liver cancer-derived HepG2 cells purchased from Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. were used. Medium is medium essential medium Eagle (MEM, Sigma-Aldrich) 10% (v / v) fatal calf serum (FCS) and 100 units / mL penicillin G, 100 μg / mL streptomycin and 0.1 mM non-essential amino acids (Invitrogen) Was used. The cells were cultured in a 75 cm ² culture flask (Falcon) at 37 ° C. in a 5% CO ₂ atmosphere. In subculture, the cultured cells were washed with Dulbecco's PBS (-) (Nissui Pharmaceutical), then 0.02% (w / v) trypsin (Difco) and 0.05% (w / v) EDTA. -It peeled by PBS (-) containing 2Na (Doujin Chemical Co., Ltd.), and performed according to a conventional method.

ＨｅｐＧ２細胞を１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ（２００μＬ／ｗｅｌｌ）の細胞密度で４８穴培養プレート（住友ベークライト社）に播種して実験を行った。培養１日後、被験サンプルを含む高濃度グルコース（４５００ｍｇ／Ｌ）含有ＤＭＥＭ（２００μＬ／ｗｅｌｌ）に培地交換して計６日間（２日に１回培地を交換）培養した。高濃度グルコース含有ＤＭＥＭによる培養終了後、被験サンプルを添加した低濃度グルコース（１０００ｍｇ／Ｌ）含有ＤＭＥＭ（２００μＬ／ｗｅｌｌ）に培地交換して、さらに２０時間培養した。 HepG2 cells were seeded in a 48-well culture plate (Sumitomo Bakelite) at a cell density of 10 ⁵ cells / well (200 μL / well). After 1 day of culture, the medium was replaced with high-concentration glucose (4500 mg / L) -containing DMEM (200 μL / well) containing the test sample, and cultured for a total of 6 days (medium was changed once every 2 days). After completion of the culture with high-concentration glucose-containing DMEM, the medium was changed to low-concentration glucose (1000 mg / L) -containing DMEM (200 μL / well) to which the test sample was added, and the culture was further continued for 20 hours.

培養期間終了後、培養上清を除去、次いで蒸留水（１００μＬ／ｗｅｌｌ）を加え、超音波破砕機にて細胞を破砕した後、培養プレートを遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０ｍｉｎ，ｒ．ｔ．）に付し細胞破砕液を得た。得られた細胞破砕液の中性脂肪濃度及びタンパク質濃度は、それぞれ市販キットであるトリグリセリドＥテストワコー（和光純薬工業社）及びＢＣＡｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｐｉｅｒｃｅ社）を使用して定量した。尚、定量結果については、タンパク質あたりの中性脂肪量（下表のＴＧ／Ｐｒｏｔｅｉｎ）で算出し、対照群に対する相対値（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）として表した。   After completion of the culture period, the culture supernatant was removed, distilled water (100 μL / well) was added, the cells were disrupted with an ultrasonic disrupter, and the culture plate was centrifuged (3000 rpm, 10 min, rt). A cell disruption solution was obtained. The triglyceride E test Wako (Wako Pure Chemical Industries) and BCAprotein assay kit (Pierce), which are commercially available kits, were used to quantify the neutral fat concentration and protein concentration of the obtained cell lysate, respectively. In addition, about the quantitative result, it calculated by the amount of triglycerides per protein (TG / Protein of the following table), and expressed as a relative value (% of control) with respect to a control group.

前記表１及び表２中の値は、平均値±標準誤差（Ｎ＝４）で表記し、末尾の符号「＊」および「＊＊」は、Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定で検定した対照との有意差：ｐが０．０５および０．０１未満であったことを表す。   The values in Table 1 and Table 2 are expressed as mean ± standard error (N = 4), and the signs “*” and “**” at the end are significant with respect to the control tested by Dunnett's multiple comparison test. Difference: p represents 0.05 and less than 0.01.

表１及び表２の結果より、垂盆草の全草の熱水抽出エキスのメタノール可溶性画分を、多孔質ポリマーカラム（ダイアイオンＨＰ−２０）を通じて調製したメタノール溶出部及び水溶出部、及び構造式（１）、（３）、（４）、（７）及び（９）で表される化合物は、ＨｅｐＧ２細胞を用いた脂肪代謝促進作用試験において有意な脂肪代謝改善作用あるいは脂肪代謝改善傾向を有することがわかる。また、脂肪代謝促進作用試験において有意な脂肪代謝改善作用あるいは脂肪代謝改善傾向を有した化合物に構造類似の、構造式（２）、（５）及び（６）で表されるメガスチグマン化合物、構造式（８）で表されるフラボノイド化合物についても、同様の作用を有すると推定される。   From the results of Tables 1 and 2, the methanol-soluble fraction of the hot water extract of whole bonsai was prepared through a porous polymer column (Diaion HP-20), a methanol elution part, a water elution part, and Compounds represented by the structural formulas (1), (3), (4), (7) and (9) are significantly improved in fat metabolism or have a tendency to improve fat metabolism in fat metabolism promoting action tests using HepG2 cells. It can be seen that In addition, Megastigman compounds represented by structural formulas (2), (5) and (6), which are structurally similar to compounds having a significant fat metabolism improving action or fat metabolism improving tendency in the fat metabolism promoting action test, structural formula The flavonoid compound represented by (8) is also presumed to have the same action.

とりわけ、構造式（１）のセダモシドＫ及び構造式（３）のセダモシドＬは、市販抗高脂血症薬であるＰＰＡＲ−γアゴニストのクロフィブレートよりも強力な脂肪代謝改善効果を有することが判明した。   In particular, sedamoside K of the structural formula (1) and sedamoside L of the structural formula (3) have a stronger effect of improving fat metabolism than the PPAR-γ agonist clofibrate, which is a commercially available antihyperlipidemic drug. found.

Claims (4)

垂盆草の全草、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により垂盆草を抽出して得られる抽出液、又は前記抽出液を濃縮して得られる抽出エキスに含まれる化合物であって、
下記の構造式（１）で表わされるメガスチグマン化合物：

下記の構造式（３）で表わされるメガスチグマン化合物：

下記の構造式（４）で表わされるメガスチグマン化合物：

下記の構造式（７）で表わされるフラボノイド化合物：

、及び下記の構造式（９）で表わされるフラボノイド化合物：

からなる群の中から選ばれる化合物を有効成分として含むことを特徴とする脂肪代謝改善剤。 A compound contained in an extract obtained by extracting a bonsai from whole botanical, water, a lower aliphatic alcohol or a hydrated lower alcohol, or an extract obtained by concentrating the extract Because
Megastigman compound represented by the following structural formula (1):

Megastigman compound represented by the following structural formula (3):

Megastigman compound represented by the following structural formula (4):

Flavonoid compounds represented by the following structural formula (7):

And a flavonoid compound represented by the following structural formula (9):

A fat metabolism-improving agent comprising a compound selected from the group consisting of as an active ingredient. 請求項１に記載の脂肪代謝改善剤を含有し、前記構造式（１）、（３）、（４）、（７）及び（９）からなる群の中から選ばれる構造式で表される化合物を、１回の投与量中に０．００１〜１ｇ含有することを特徴とするヒト又は動物用の医薬。 It contains the fat metabolism improving agent according to claim 1 and is represented by a structural formula selected from the group consisting of the structural formulas (1), (3), (4), (7) and (9). A pharmaceutical for humans or animals containing 0.001 to 1 g of the compound in one dose. 請求項１に記載の脂肪代謝改善剤を含有し、前記構造式（１）、（３）、（４）、（７）及び（９）からなる群の中から選ばれる構造式で表される化合物を、０．０００１〜２．０質量％含有することを特徴とする食品。 It contains the fat metabolism improving agent according to claim 1 and is represented by a structural formula selected from the group consisting of the structural formulas (1), (3), (4), (7) and (9). A food comprising 0.0001 to 2.0% by mass of a compound. 垂盆草の全草、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により垂盆草を抽出して得られる抽出液、又は前記抽出液を濃縮して得られる抽出エキスに含まれる化合物であって、
下記の構造式（１）：

で表されるメガスチグマン化合物、
下記の構造式（２）：

で表されるメガスチグマン化合物、
下記の構造式（３）：

で表されるメガスチグマン化合物、
下記の構造式（４）：

で表されるメガスチグマン化合物、
下記の構造式（５）：

で表されるメガスチグマン化合物、
下記の構造式（７）：

で表されるフラボノイド化合物、
下記の構造式（８）：

で表されるフラボノイド化合物、又は
下記の構造式（９）：

で表されるフラボノイド化合物。 A compound contained in an extract obtained by extracting a bonsai from whole botanical, water, a lower aliphatic alcohol or a hydrated lower alcohol, or an extract obtained by concentrating the extract Because
The following structural formula (1):

Megastigman compound represented by
The following structural formula (2):

Megastigman compound represented by
The following structural formula (3):

Megastigman compound represented by
The following structural formula (4):

Megastigman compound represented by
The following structural formula (5):

Megastigman compound represented by
The following structural formula (7):

A flavonoid compound represented by
The following structural formula (8):

Or a structural formula (9) below:

A flavonoid compound represented by: