JP5517946B2 - 抗新生物活性を有するナンキョクコメススキ(DeschampsiaantarcticaDesv.)の新規抽出物 - Google Patents
抗新生物活性を有するナンキョクコメススキ(DeschampsiaantarcticaDesv.)の新規抽出物 Download PDFInfo
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Description
天然で生育された植物の抽出物とストレス誘導を行わずにin vitroで生育された植物の抽出物との吸収ピークの比較
ロバート島のカッパーマイン半島(南緯62°22’、西経59°43’)からナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)材料を採取し、プラスチックバッグに入れて運んだ。殺菌剤(ベノミルおよびカプタン)ならびに次亜塩素酸ナトリウムを用いて材料を殺菌した。in vitroで植物材料を微細繁殖させた。ムラシゲ・スク−グ(MS)培地に基づいて培養培地を調製した。1mg/lのBAPホルモン(N6ベンジルアミノプリン)さらには35mg/lのサッカロースおよび9g/lの寒天を5.7の最終pHで添加した。16/8時間(明/暗)の光周期および2000μmol・m−2・s−1の光子流量を用いて22℃の生育チャンバー内にin vitro生育植物を保持した。
in vitro植物中でのポリフェノールの誘導
前の実施例に示されるように、フラボノイドは、in vitroで生育された植物中には実質的に不在であった。この実施例では、種々のストレス条件によりナンキョクコメススキ(Deschampisa antarctica)植物中でフラボノイド産生を誘導可能であることを示す。
50日後、in vitroで繁殖されたナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)植物を寒天から完全に取り出し、根からすべての寒天を除去した。
寒天中で生育された幼植物に、生育に用いたのと同じジャー中で45μW/cm2および70μW/cm2の強度でUV光を2時間照射した。次に、幼植物を寒天から取り出し、そしてサンプルの地上部を切り離し、5mlのメタノールで浸軟させ、10分間超音波処理し、さらに1000rpmで15分間遠心分離した。抽出されたサンプルを濃縮し、凍結乾燥させ、そして−20℃で貯蔵した。
in vitroで栽培されたナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)植物とは異なり、自然条件で栽培された植物は、その全発育段階にわたりポリフェノールの連続的誘導を示した。0.5Mの濃度(海水の濃度)を有する食塩溶液の一定のリスクおよび南極大陸の自然放射条件に植物を曝露する。
水性抽出物の分画
ナンキョクコメススキ(Deschampia antarctica)の水性抽出物をHPCL分析により分析した。図7は、HPLC分析のクロマトグラムを示している。クロマトグラムは、ナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)水性抽出物の主成分を示す。2つの主ピーク(10.6667分の保持時間を有するピーク1および12.0167分の保持時間を有するピーク2)は、注入サンプルの全量の80%(w/w)を占める。
悪性細胞増殖のin vitro阻害
全抽出物の分画
全植物抽出物をペーパークロマトグラフィーにより化合物に分画した。移動相として15%氷酢酸を用いてサンプルをWhatman No.3ペーパー上に接種した。さまざまな化合物をUV光下で可視化した。メタノール中に浸漬することにより、B1、B2、およびB3と呼ばれる異なる画分をペーパーから回収し、次に、ロトエバポレーターで濃縮した。スライドクロマトグラフィーを行って各画分中の単離化合物を可視化した。
HPLC−質量分析により提供された結果によれば(上記の実施例3)、さまざまなグリコシル化度およびC−C結合を介するグリコシドの置換を有するルテオリン(オリエンチン化合物)は、多く存在しかつ生物活性を引き起こす分子であると推測することができる。このタイプの構造は、活性化合物の安定性を増大させる。さらに、これらの化合物は、in vivoで生育された南極地方のコメススキ属(Deschampsia)の植物または4℃に72時間付された植物の抽出物中には存在したが、13℃でin vitroで生産された植物中には存在しない(データは示していない)。このことから、これら化合物は、低温または植物が野生で受ける他のタイプのストレスで誘導可能であることが示唆される。
500mgのナンキョクコメススキ(Despchampsia antarcica)抽出物を含む経口投与用速溶性錠剤の調製
本発明者らは、ここで、癌性および腫瘍性の疾患に罹患しているかまたは罹患しやすい患者に対して予防および治癒の目的でナンキョクコメススキ(Deschampsia antarcica)抽出物を経口投与するための組成物を提供する。それぞれ以下の定性的組成および定量的組成を呈する錠剤である:
ナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)抽出物500mg、D−グルコース(D-glucosa)一水和物597.6mg、クロスカルメロースナトリウム35.2mg、微結晶性セルロース160.0mg、無水クエン酸35.2mg、顆粒状ソルビトール160.0mg、アスパルテーム28.8mg、サッカリンナトリウム14.4mg、ジベヘン酸グリセロール16.0mg、ステアリン酸マグネシウム6.4mg、オレンジ香料46.4mgを次のように調製する:滑沢剤(ステアリン酸マグネシウムおよびジベヘン酸グリセロール)を除くすべての成分を完全な均一物が得られるまでタンブラーにより混合し、ステアリン酸マグネシウムおよびジベヘン酸グリセロールを添加し、再度、均一になるまで混合を行い、次に、直径20mmおよび高さ4.5の大きさの単位重量1.6gを呈する錠剤を得るべく、得られた混合物を錠剤化に付す。こうして調製された錠剤は、30秒間で口内で崩壊する。
7.5gのナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)抽出物を含む速溶性錠剤の調製
100gに対して以下の定性的組成および定量的組成を呈する錠剤である:
成分量:ナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)抽出物7.5g、噴霧乾燥マンニトール71.0g、微結晶性セルロース15.0g、クロスカルメロースナトリウム3.0g、グリシルリチン酸アンモニウム0.3g、アスパルテーム1.0g、L−メントール0.2g、ミント香料1.0g、ステアリン酸マグネシウム1.0gを次のように調製する:ステアリン酸マグネシウムを除くすべての成分を完全な均一物が得られるまでタンブラーにより混合し、ステアリン酸マグネシウムを添加し、再度、均一になるまで混合を行い、次に、混合物を錠剤化に付す。こうして調製された錠剤は、20秒間で口内で崩壊する。
ナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)抽出物を含有するペレット剤の調製
900gのナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)抽出物、800gの微結晶性セルロース、12gのコロイド二酸化ケイ素、684gの塩化ナトリウム、および36gの塩化カリウムを混合した。混合物を流動化ロートグラニュレーターに移し、40gの35%ジメチルポリシロキサンエマルジョンと2000mlのイオン交換水との混合物をその上にスプレーした。ペレット化用液体のスプレー速度を50ml/分に設定した。スプレー空気の圧力は2.5barであった。ローターの速度をペレット化の最初の15分間で450rev/分に設定し、その後、600rev/分に保持した。流動化空気の体積速度をペレット化の最初の15分間で60m3/時に保持し、その後、90m3/時に保持した。流動化空気の温度をペレット化の最初の部分で25℃に設定し、乾燥手順に対しては40℃に設定した。乾燥ペレットを1.6mmの篩に通した。
Claims (18)
- ナンキョクコメススキ(Deschampsia antarctica)植物から調製される抗新生物抽出物の精製された主成分のうちの1つまたは該成分の組み合わせを含み、前記主成分が、イソスウェルチアジャポニン((7−O−メチルオリエンチン)2”−O−β−アラビノピラノシド)およびオリエンチン2”−β−アラビノピラノシドである、抗新生物用組成物。
- 植物がin vitroで生育され、植物組織のポリフェノール含量を増加させる物理的または化学的プロセスで処理される、請求項1に記載の組成物。
- 物理的プロセスがUV照射である、請求項2に記載の組成物。
- 植物に対して、45〜75μW/UV照射cm 2 を2時間行なう、請求項3に記載の組成物。
- 化学的プロセスが塩溶液中でのインキュベーションである、請求項2に記載の組成物。
- 塩溶液が2〜4M NaClである、請求項5に記載の組成物。
- 植物を前記溶液に30分間浸漬する、請求項6に記載の組成物。
- 患者における癌細胞の増殖を防止するための、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
- 患者における癌細胞の生長の増殖を防止するための、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
- 患者に経口投与する、請求項8または9に記載の組成物。
- 細胞が大腸癌細胞である、請求項8または9に記載の組成物。
- 細胞が肝臓癌細胞である、請求項8または9に記載の組成物。
- 前記組成物が錠剤であり、該錠剤が500mgの前記抽出物を含む、請求項1〜12のいずれか一項に記載の組成物。
- 錠剤が、500mgの前記抽出物、D−グルコース一水和物597.6mg、クロスカルメロースナトリウム35.2mg、微結晶性セルロース160.0mg、無水クエン酸35.2mg、顆粒化ソルビトール160.0mg、アスパルテーム28.8mg、サッカリンナトリウム14.4mg、ジベヘン酸グリセロール16.0mg、ステアリン酸マグネシウム6.4mg、およびオレンジ香料46.4mgを含む、請求項13に記載の組成物。
- 組成物が錠剤であり、該錠剤が7.5gの前記抽出物を含む、請求項1〜12のいずれか一項に記載の組成物。
- 錠剤が、7.5gの前記抽出物、噴霧乾燥マンニトール71.0g、微結晶性セルロース15.0g、クロスカルメロースナトリウム3.0g、グリシルリチン酸アンモニウム0.3g、アスパルテーム1.0g、L−メントール0.2g、ミント香料1.0g、およびステアリン酸マグネシウム1.0gを含む、請求項15に記載の組成物。
- 組成物がペレット剤であり、該ペレット剤が900gの前記抽出物を含む、請求項1〜12のいずれか一項に記載の組成物。
- ペレット剤が、900gの前記抽出物、800gの微結晶性セルロース、12gのコロイド状二酸化ケイ素、684gの塩化ナトリウムおよび36gの塩化カリウムを含む、請求項17に記載の組成物。
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