JP5119554B2 - チオール化合物の同時連続分析方法およびそれに使用する同時連続分析装置 - Google Patents
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山口政俊,能田均:ぶんせき、291(3), 204 (1999) Y. Ohkura, M. Kai, H. Nohta: J. Chromatogr. B., 659, 85 (1994) M.Yamaguchi, J. Ishida: "Modern derivatizationmethods for separation sciences", T. Toyo'oka(Ed.), p. 99 (1999), (John Wiley and Sons Ltd. New York) K.Fukushima, N. Usui, Y. Santa, K. Imai: J. Pharm. Biomed. Anal., 30, 1655(2003) S. Uchiyama,et al.: Anal. Chem., 73, 2165 (2001) K. Gyimesi-Forras, et al.: J. Chromatogr.A, 1083, 80 (2005) T. Yoshitake, et al.: Biomed. Chromatogr., 20, 267 (2006) K. Abe,et al.: BUNSEKI KAGAKU, 44, 555 (1995) K.Matsumoto, et al.: J. Chromatogr. B, 773, 135 (2002) M. Yoshitake, et al.: Anal. Chem., 78, 920 (2005) H.Yoshida, et al.: BUNSEKI KAGAKU, 55(4), 213-221(2006)
HPLC 条件
分離カラム:XBridgeTMC18(内径 3.0 mm × 長さ 15 cm、粒径5 μm、Waters社製)
還元カラム:XBridgeTMC18(内径 2.1 mm × 長さ 3 cm、粒径5 μm、Waters社製)にインジェクターより注入したトリ-n-ブチルホスフィンを保持させたもの
移動相:10 mM トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタンおよび 5 mM EDTA・2Na を溶解した 35% (v/v) メタノール (0.4 mL/min)
誘導体化液:50 μM NPM(アセトニトリルで調製)(流速 0.4 mL/min)
蛍光検出:励起波長 345 nm、エキシマー蛍光 485 nm
Claims (12)
- 高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による試料中のチオール化合物の同時連続分析方法であって、
上記チオール化合物を酸化型チオール類と第1還元型チオール類とに分離する分離工程と;
上記分離酸化型チオール類を還元剤によって還元して第2還元型チオール類に変換し、
上記第1および第2還元型チオール類を蛍光誘導体化試薬によって誘導体化する誘導体化工程および、
上記分離工程で分離した酸化型チオール類を還元しないで、第1還元型チオール類のみを誘導体化する誘導体化工程と;
からなる上記同時連続分析方法によって上記試料中の酸化型チオール類と還元型チオール類とを連続して分析することを特徴とするチオール化合物の同時連続分析方法。 - 請求項1に記載のチオール化合物の同時連続分析方法において、前記還元剤がホスフィン類であることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析方法。
- 請求項2に記載のチオール化合物の同時連続分析方法において、前記ホスフィン類がトリアルキルホスフィン類、トリシクロアルキルホスフィン類、トリアリールホスフィン類またはトリ(アルキルおよび/またはシクロアルキルおよび/またはアリール)ホスフィン類であることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析方法。
- 請求項1ないし3のいずれか1項に記載のチオール化合物の同時連続分析方法において、前記蛍光誘導体化試薬が、ピレン類、アントラセン類、アクリジン類、クマリン類、シアニン類、ダンシル類、フルオレセイン類、ローダミン類、インダセン類、オキソキノキサリン類またはベンゾキサジアゾール類であることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析方法。
- 試料中のチオール類を酸化型チオール類と還元型チオール類に同時連続分析するための高速液体クロマトグラフィー(HPLC)によるチオール化合物の同時連続分析装置であって、
上記試料中のチオール類を酸化型チオール類と第1還元型チオール類とに分離する分離部と;
上記分離酸化型チオール類を第2還元型チオール類に還元する還元部と;
上記第1および第2還元型チオール類を蛍光誘導体化試薬を用いてそれぞれ誘導体化する誘導体化部と;
蛍光測定部と;
上記分離部と上記蛍光誘導体化部とを結合し、上記還元部を含む第1流路と;
上記分離部と上記蛍光誘導体化部とを結合し、上記還元部を含まない第2流路と;
からなることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析装置。 - 請求項5に記載の同時連続分析装置において、上記第1流路に上記還元部を構成する還元カラムが設けられていることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析装置。
- 請求項6に記載のチオール化合物の同時連続分析装置において、前記還元カラムに還元剤が充填されていることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析装置。
- 請求項7に記載のチオール化合物の同時連続分析装置において、前記還元剤がホスフィン類であることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析装置。
- 請求項7または8に記載のチオール化合物の同時連続分析装置において、前記ホスフィン類がトリアルキルホスフィン類、トリシクロアルキルホスフィン類、トリアリールホスフィン類またはトリ(アルキルおよび/またはシクロアルキルおよび/またはアリール)ホスフィン類であることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析装置。
- 請求項5に記載のチオール化合物の同時連続分析装置において、前記蛍光誘導体化試薬が、ピレン類、アントラセン類、アクリジン類、クマリン類、シアニン類、ダンシル類、フルオレセイン類、ローダミン類、インダセン類、オキソキノキサリン類またはベンゾキサジアゾール類であることを特徴とするチオール化合物の同時連続分析装置。
- 請求項5ないし10のいずれか1項に記載のチオール化合物の同時連続分析装置を用いたチオール化合物の同時連続分析方法の実施において、上記分離部で分離した酸化型チオール類および第1還元型チオール類を含む試料を第1流路に送液し、該第1流路に設けた上記還元部で上記分離酸化型チオール類を第2還元型チオール類に変換した後、上記第1および第2還元型チオール類を上記蛍光誘導体化部に送液し蛍光誘導体化試薬で誘導体化して上記蛍光測定部で測定することからなるチオール化合物の同時連続分析方法。
- 請求項11に記載のチオール化合物の同時連続分析方法において、上記分離部で分離した酸化型チオール類および第1還元型チオール類を第2流路に流して還元せずに誘導体化して蛍光測定することによって第1還元型チオール類のみを測定することを特徴とするチオール化合物の同時連続分析方法。
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