JP4948509B2 - 放射線照射によって抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシン、その製造方法及びその使用方法 - Google Patents
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Description
また、本発明の他の目的は、前記分子構造が変形されることにより生理的活性が増加したセリシンの製造方法を提供する。
本発明のまた他の目的は、前記分子構造が変形されることにより生理的活性が増加したセリシンの使用方法を提供する。
本発明による前記分子構造が変形したセリシンは、その作用、対象製品(食品、化粧品、医薬品)、投与対象、投与ルートなどにより差異はあるが、例えば、一般成人(体重60kg当たり)に、一日につき約0.01mg〜100gの範囲で投与することができる。他の動物の場合も、体重60kg当たりに換算した量を投与することができる。
本実施例で使用されるセリシンは、まゆから分離した天然セリシンである。
先ず、10gのまゆに5%(w/v)濃度の炭酸ナトリウム水溶液500mlを加えて溶解させた後、1時間加熱し、ろ過紙によってろ過して溶解したセリシンを分離した。次いで、熱水を利用して残渣を数回洗浄することによって、残留セリシンと炭酸ナトリウムとを分離した。分離した溶液を透析して炭酸ナトリウムを除去した後、凍結乾燥してセリシンの粉末を得た。
ガンマ線の総吸収線量が10kGyになるように照射したことの他は、実施例1と同様にして分子構造が変形したセリシン溶液を製造した。
ガンマ線の総吸収線量が50kGyになるように照射したことの他は、実施例1と同様にして分子構造が変形したセリシン溶液を製造した。
ガンマ線の総吸収線量が100kGyになるように照射したことの他は、実施例1と同様にして分子構造が変形されたセリシン溶液を製造した。
ガンマ線の総吸収線量が150kGyになるように照射したことの他は、実施例1と同様にして分子構造が変形されたセリシン溶液を製造した。
ガンマ線の総吸収線量が200kGyになるように照射したことの他は、実施例1と同様にして分子構造が変形されたセリシン溶液を製造した。
前記実施例1〜実施例6で製造したガンマ線が照射されたシルクセリシン溶液を、4℃下で保存しながら実験に使用した。
ガンマ線の照射によるシルクセリシンの構造変形を確認するために、前記シルクセリシン溶液を2mg/mlの濃度に溶解させた後、ガンマ線照射して紫外線分光光度計(UV−1601PC,Shimadzu C.,Tokyo,Japan)を利用して180〜500nmの範囲でUV−VISスペクトル分析した。その結果を図1に示した。このときの対照群としてはガンマ線非照射区を使用した。
円偏光二色性スペクトル(circular dichroism spectra;以下、CDスペクトルとする)は、150−Wキセノンランプが装着されたJasco J−715分光偏光計(spectropolarimeter;Japan Spectroscopic)を利用して測定した。
3回反復によって該当領域を分析して平均を得て、PBSに対して測定された値を差し引きして計算した。このときのCDスペクトルの単位は、残余楕円率(residue ellipticity)(degree cm2/dmol)で表示した。
ガンマ線を照射したセリシンの分子量をゲル浸透クロマトグラフィ(GPC)−高圧液体クロマトグラフィ(HPLC)を利用して測定した。
HPLCシステムは、Waters Allience HPLC system(Mo.2690,MA,USA)にPLアクア・ゲル−OHカラム(300×7.5mm,8μm;Polymer Laboratories,Ltd,UK)を使用した。
前記実施例1乃至実施例6で製造したセリシン試料の電子供与能の測定は、Blois法に準じてシルクセリシンのDPPH(2.2−diphenyl−1−picryl−hydrazil)に対する水素供与効果によって測定した。
ガンマ線照射によるシルクセリシンの美白活性能力を確認するために、前記実施例1〜実施例6によって製造したセリシンのチロシナーゼ阻害効果を測定した。
実施例4において製造した放射線が照射されたセリシンを包含する機能性食品を下記のように製造した。
小麦粉100重量部に対して放射線が照射されたセリシン2.5重量部を添加・混合した後、前記混合物を使用してパン、ケーキ、クッキー、クラッカー及び麺類など健康増進用機能性食品を製造した。
スープ及び肉汁100重量部に対して放射線が照射されたセリシン2.5重量部をそれぞれ添加して健康増進用スープと肉汁を製造した。
グラウンドビーフ100重量部に対して放射線が照射されたセリシン10重量部を添加して健康増進用グラウンドビーフを製造した。
牛乳100重量部に対して放射線が照射されたセリシン7.5重量部を添加し、前記牛乳を使用してバター及びアイスクリーム類など多様な乳製品を製造した。
玄米、麦、もちごめ、ハトムギを公知の方法によってアルファ化させて乾燥させた後、粒度60メッシュの粉砕機によって、それぞれ玄米30重量%、ハトムギ15重量%、麦20重量%及びもちごめ35重量%の比率に配合して穀物類の粉末を製造した。
また、黒豆、黒ごま、エゴマも公知の方法によって煮た後、乾燥させたものを配合し、粒度60メッシュの粉砕機によって粉末を製造した。
次いで、放射線が照射されたセリシンを真空濃縮器によって減圧・濃縮し、噴霧、熱風乾燥機で乾燥させて得た乾燥物を、粒度60メッシュの粉砕機によって粉砕して乾燥粉末を得た。
種実類(エゴマ7重量部、黒豆8重量部、黒ごま7重量部)
放射線が照射されたセリシンの乾燥粉末(3重量部)
マンネンタケ(0.5重量部)
ジオウ(地黄)(0.5重量部)
通常の健康飲料の製造方法によって、下記の成分を配・混合した後、略1時間の間、85℃で攪拌・加熱した後、作製された溶液をろ取して滅菌された2リットル容器に収納した後、シール・滅菌させて健康飲料を製造した。
前記の配合組成比は、比較的嗜好飲料に適合する成分を次の好ましい実施例に従って配合組成することができるが、需要の階層、需要の国、使用用途など、地域的、民族的嗜好度によってその配合の比率を任意に変更して作製することもできる。
放射線が照射されたセリシン 1000mg
クエン酸 1000mg
オリゴ糖 100g
梅の実の濃縮液 2g
タウリン 1g
ここに、精製水を加えた全量 900mlにする。
放射線が照射されたセリシン5gをトマトまたはニンジンジュース1000mlに加えて健康増進用野菜ジュースを製造した。
放射線が照射されたセリシン1gをリンゴまたはブドウジュース1000mlに加えて健康増進用果物ジュースを製造した。
調理用調味料100重量部に対して放射線が照射されたセリシン45重量部を添加し、前記調理用調味料を使用して機能性調理用調味料を製造した。
実施例4において製造した放射線が照射されたセリシンを有効成分として含有する美白及び抗酸化用機能性化粧品である、乳化剤型の化粧品及び可溶化剤型の化粧品を下記のように製造した。
下記表1に記載の組成によって乳化剤型の化粧品を製造した。製造方法は下記の通りである。
1)1〜9の原料を混合した混合物を65〜70℃で加熱した。
2)10の原料を前記1)工程での混合物に投入した。
3)11〜13の原料混合物を65〜70℃で加熱、完全に溶解させた。
4)前記3)の工程中、前記2)工程での混合物を徐々に添加して8000rpmで2〜3分間乳化させた。
5)14の原料を少量の水に溶解させた後、前記4)工程での混合物に添加して2分間さらに乳化させた。
6)15〜17の原料をそれぞれ秤量した後、前記5)工程での混合物に入れて30秒間さらに乳化させた。
7)前記6)工程での混合物を乳化させた後、脱気過程を経て25〜35℃で冷却させることによって乳化剤型の化粧品を製造した。
下記表2に記載の組成によって可溶化剤型の化粧品を製造した。製造方法は下記の通りである。
1)2〜6の原料を1の精製水に入れてミキサによって混合・溶解させた。
2)8〜11の原料を7のアルコールに入れて完全に溶解させた。
3)前記2)工程での混合物を前記1)工程での混合物に徐々に添加しながら可溶化させた。
実施例4において製造した放射線が照射されたセリシンを有効成分とする薬学的製剤を下記のように製造した。
放射線が照射されたセリシン 2g
乳糖 1g
前記の成分を混合、気密包に充填して散剤を製造した。
放射線が照射されたセリシン 100mg
とうもろこし澱粉 100mg
乳糖 100mg
ステアリン酸マグネシウム 2mg
前記の成分を混合した後、通常の錠剤製造方法によって打錠して錠剤を製造した。
放射線が照射されたセリシン 100mg
とうもろこし澱粉 100mg
乳糖 100mg
ステアリン酸マグネシウム 2mg
前記の成分を混合した後、通常のカプセル剤製造方法によってゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。
放射線が照射されたセリシン 1g
乳糖 1.5g
グリセリン 1g
キシリトール 0.5g
前記の成分を混合した後、通常の方法によって1丸剤当り4gの丸剤を製造した。
放射線が照射されたセリシン 150mg
大豆の抽出物 50mg
ブドウ糖 200mg
とうもろこし澱粉 600mg
前記の成分を混合した後、30%のエタノール100mgを添加して60℃で乾燥して顆粒を造成した後、薬包に充填した。
Claims (14)
- 分子量6kDa以下の粉末形態のセリシンに10〜200kGy吸収線量のガンマ線を照射することによって分子構造が変形して、前記ガンマ線を照射していない分子量6kDa以下のセリシンに比べて、分子量が増加し、抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシン。
- 前記分子構造の変形が、α−ヘリックスの2次構造の減少を含む請求項1に記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシン。
- 前記分子構造の変形が、β−sheet、β−turn及びランダムコイルからなる群から選択された1種以上の2次構造の増加を含む請求項1又は2に記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシン。
- 前記分子構造の変形が、α−ヘリックスの2次構造の減少及びβ−sheet、β−turn、及びランダムコイルからなる群から選択された1種以上の2次構造の増加であることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1つに記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシン。
- 前記セリシンの分子量が、2kDa〜1000kDaである請求項1〜4のいずれか1つに記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシン。
- 分子量6kDa以下の粉末形態のセリシンに10〜200kGy吸収線量のガンマ線を照射することによって分子構造を変形させる工程を含む、前記ガンマ線を照射していない分子量6kDa以下のセリシンに比べて、分子量が増加し、抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシンの製造方法。
- 前記ガンマ線が照射されるセリシンは、まゆから分離されたものであるか、または、合成されたものである請求項6に記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシンの製造方法。
- 前記分子構造の変形が、α−ヘリックスの2次構造の減少を含む請求項6又は7に記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシンの製造方法。
- 前記分子構造の変形が、β−sheet、β−turn及びランダムコイルからなる群から選択される1種以上の2次構造の増加を含む請求項6〜8のいずれか1つに記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシンの製造方法。
- 前記分子構造の変形が、α−ヘリックスの2次構造の減少及びβ−sheet、β−turn及びランダムコイルからなる群から選択される1種以上の2次構造の増加である請求項6〜9のいずれか1つに記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシンの製造方法。
- 前記セリシンの分子量が、2kDa〜1000kDaである請求項6〜10のいずれか1つに記載の抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とが増加したセリシンの製造方法。
- 請求項1〜5のいずれか1つに記載のセリシンを、抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とを向上させる用途の食品の素材として使用する方法。
- 請求項1〜5のいずれか1つに記載のセリシンを、抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とを向上させる用途の化粧品の素材として使用する方法。
- 請求項1〜5のいずれか1つに記載のセリシンを、抗酸化能とチロシナーゼ阻害能とを向上させる用途の医薬品の素材として使用する方法。
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