JP4914890B2 - S−アデノシル−l−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法及び経口摂取用組成物 - Google Patents
S−アデノシル−l−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法及び経口摂取用組成物 Download PDFInfo
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Description
1.S−アデノシル−L−メチオニン生産能を有する酵母を用い、S−アデノシル−L−メチオニンを含有する乾燥酵母を製造する方法において、酵母の菌体培養液より分離した酵母菌体濃縮物を、(1)鉱酸添加によりpHを1〜5に調整する処理、及び(2)40℃〜85℃に加熱する処理の少なくともいずれか一方の処理を行った後に、乾燥させることを特徴とする、S−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
2.S−アデノシル−L−メチオニン生産能を有する酵母として、サッカロマイセス属に属する酵母を用いる、上記項1のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
3.サッカロマイセス属に属する酵母がサッカロマイセス・セレビジエである、上記項2のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
4.(1)鉱酸添加処理で使用する鉱酸が硫酸である、上記項1のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
5.(1)鉱酸添加処理を行う場合において、pHを1〜4に調整する、上記項1のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
6.(2)加熱処理を行う場合において、40℃〜80℃に加熱する、上記項1のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
7.(1)鉱酸添加処理及び(2)加熱処理の両方を行う、上記項1のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
8.凍結乾燥法又は噴霧乾燥法により乾燥する、上記項1のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
9.上記項1〜8の何れかの方法によって製造されたS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母を成型してなる経口摂取用組成物。
菌体内のSAMe含量を高めるには、好気的に培養することが好ましい。従って、培養槽は、通気可能で必要に応じ攪拌できるものが好ましく、例えば、機械的攪拌培養槽、エアーリフト式培養槽及び気泡塔型培養槽等を利用することができる。
培養槽への炭素源、窒素源、各種無機塩類、各種添加剤等の培養成分の供給は、一括又は個別に連続的若しくは間欠的に行う。例えば、蔗糖、エタノール等の基質は他の培地成分との混合物として培養槽に供給してもよく、また他の培地成分とは別に独立して培養槽に供給してもよい。培養液のpH制御は、酸、アルカリ溶液によって行われる。アルカリとしては窒素源として使用されるアンモニア、尿素、又は非窒素系塩基、例えば、苛性ソーダ、苛性カリ等を用いてpH制御するのが望ましい。酸としては無機酸、例えば、リン酸、硫酸、硝酸、又は有機酸が用いられる。無機塩類であるリン酸塩、カリウム塩、ナトリウム塩、硝酸塩等を用いてpH制御することもできる。
加熱時間は、加熱温度によっても変わるので一概には決められないが、30〜600秒が好ましく、30〜60秒がより好ましい。30秒以上加熱処理することにより、SAMe分解酵素の失活や殺菌等を行うことができる。また、鉱酸根の浸透が促進されるので、添加する鉱酸量を節減することができる。一方、加熱時間を600秒以下とすることによりSAMeの分解による含量の低下を回避することができる。
なお、加熱処理は、常圧、加圧何れの方法でも実施できる。加熱処理を行うこと、或いは鉱酸添加を行うことで、相対的により高いSAMe含量の乾燥酵母菌体を得ることができる。
(a)酵母菌体の培養
前述した公知の培養法〔Shiozaki S.,et all,J.Biotechnology,4,345-354(1986)(非特許文献8)〕に従って、丸菱バイオエンジニアリング社製の30Lジャー培養槽を用いて酵母菌体の培養を行った。培地成分は、炭素源としてスクロース 10質量%、酵母エキス 1質量%、窒素源として尿素 1.8質量%、L−メチオニン 1質量%、L−グリシルグリシン 0.2質量%、KH2PO4 0.4質量%、MgSO4・7H2O 0.01質量%、ビオチン 2μg/mL、混合ミネラル 0.2質量%(混合ミネラル組成は以下のとおり、CaCl2・2H2O 2.0質量%、MnSO4・5H2O 0.05質量%、FeSO4・7H2O 0.05質量%、ZnSO4・7H2O 0.1質量%、CuSO4・5H2O 0.001質量%、CoCl2・6H2O 0.001質量%、H3BO3 0.001質量%、Na2MoO4 0.001質量%、KI 0.001質量%)含有培地にサッカロマイセス属に属する酵母サッカロマイセス・セレビジエIFO2346を接種し、培養温度27〜29℃、150rpmの攪拌速度にて好気的に通気しながら6日間培養した。また、培養途中に不足となったエタノール、MgSO4・7H2Oを逐次添加することによりSAMe含有量を高めた。その結果、菌体濃度3.5質量%,SAMe含量205mg/g−乾燥酵母の酵母菌体培養液18Lを得た。
(b)酵母菌体の集菌
上記の酵母菌体培養液18Lを連続ロータリー型遠心分離器(日立HIMAC CENTRIFUGE CR10B2)で処理し、乾物換算で18質量%に相当する菌濃度の液状の酵母菌体濃縮物3.49kgを得た。
(c)酵母菌体濃縮物への鉱酸添加
上記の酵母菌体濃縮物3.49kgに95質量%硫酸を224g添加することにより、pH1の酵母菌体濃縮物3.71kgを得た。
(d)乾燥酵母の製造
上記のpH1の酵母菌体濃縮物3.71kgを微粒子化装置としてロータリーアトマイザ(回転円盤)を有するスプレードライヤ(NIPRO社製)を用いて、乾燥室の入口温度195〜205℃、出口温度80〜90℃、通液速度38g/分の条件にて噴霧乾燥し、粉末乾燥酵母570gを得た。得られた粉末乾燥酵母中のSAMe含量は174mg/g−乾燥酵母であった。
なお、粉末乾燥酵母中のSAMe含量は、SAMe含有乾燥酵母より過塩素酸を用いた公知の方法(例えば、Shiozaki S.,et all,Agric.Biol.Chem.,48,2293-2300(1984))でSAMeを抽出し、液体クロマトグラフィーによって定量した。なお、液体クロマトグラフィーには以下の分析条件を用いた。
カラム:ナカライ(nacalai tesque) COSMOSIL 4.6φ×100mm
溶離液:0.2M KH2PO4水溶液/メタノール=95/5(体積比)
流速:0.7mL/min、検出器:UV(260nm)、SAMe保持時間:約150秒
酵母菌体濃縮物に硫酸を添加することによってpH2、3又は4とした以外は実施例1と同様に処理して、硫酸添加後のpHと噴霧乾燥後のSAMe含量との関係を調べた。結果を表1に示す。
酵母菌体濃縮物への硫酸添加を行わない以外は実施例1と同様に処理して、噴霧乾燥した粉末乾燥酵母581gを得た。得られた粉末乾燥酵母中のSAMe含量は136mg/g−乾燥酵母であった。結果を表1に示す。
実施例1と同様にして(a)から(c)までの操作を行い、硫酸を添加することによってpH1とした酵母菌体濃縮物3.71kgを得た。この酵母菌体を未加熱のまま凍結乾燥器(日本真空技術株式会社製)の凍結乾燥用ステンレストレーに流し込み−50℃で凍結した後、最終棚段温度25℃の条件で36時間凍結乾燥した。得られた凍結乾燥酵母をさらに粉砕することによって粉末乾燥酵母612gを得た。得られた粉末乾燥酵母中のSAMe含量は170mg/g−乾燥酵母であった。結果を表2に示す。
酵母菌体濃縮物に硫酸を添加することによってpH2、3又は4とした以外は実施例5と同様に処理して、硫酸添加後のpHと凍結乾燥後のSAMe含量との関係を調べた。結果を表2に示す。
酵母菌体濃縮物への硫酸添加を行わない以外は実施例5と同様に処理して、凍結乾燥し粉砕した粉末乾燥酵母609gを得た。得られた粉末乾燥酵母中のSAMe含量は136mg/g−乾燥酵母であった。結果を表2に示す。
酵母菌体濃縮物に添加した硫酸を、塩酸、硝酸又は燐酸に変えた(添加後の酵母菌体濃縮物のpH:1)以外は実施例5と同様に処理して、鉱酸添加量と凍結乾燥後のSAMe含量との関係を調べた。結果を表3に示す。
実施例1と同様にして(a)から(b)までの操作を行い、この酵母菌体濃縮物をガラス製ビーカー、マグネット式攪拌機及び加熱水浴槽を用いて加熱温度を40℃、50℃、60℃、70℃又は90℃とし,加熱処理時間を60秒、300秒又は600秒とした条件で加熱処理した後、水槽にて25℃まで冷却した。これを凍結乾燥器(日本真空技術株式会社製)の凍結乾燥用のステンレストレーに流し込み零下50℃で凍結した後、最終棚段温度25℃の条件で36時間凍結乾燥した。得られた粉末乾燥酵母のSAMe含量を表4に示す。
実施例1と同様にして(a)から(c)までの操作を行い、硫酸添加によりpH1、2又は3に調整した酵母菌体濃縮物をガラス製ビーカー、マグネット式攪拌機、加熱水浴槽を用いて加熱温度60℃,加熱処理時間60秒,300秒又は600秒の条件で加熱処理した後、水槽にて25℃まで冷却した。これを凍結乾燥器(日本真空技術株式会社製)の凍結乾燥用のステンレストレーに流し込み零下50℃で凍結した後、最終棚段温度25℃の条件で36時間凍結乾燥した。得られた粉末乾燥酵母のSAMe含量は表5に示す。
実施例1と同様にして(a)から(c)までの操作を行い、硫酸添加によりpH3に調整した酵母菌体濃縮物3.71kgを得た。この酵母菌体濃縮物をガラス製ビーカー、マグネット式攪拌機、加熱水浴槽を用いて加熱温度40℃、50℃、70℃又は90℃,加熱処理時間60秒、300秒又は600秒の条件で加熱処理した後、水槽にて25℃まで冷却した。これを凍結乾燥器(日本真空技術株式会社製)の凍結乾燥用のステンレストレーに流し込み零下50℃で凍結した後、最終棚段温度25℃の条件で36時間凍結乾燥した。得られた粉末乾燥酵母のSAMe含量は下表6の通りであった。
Claims (7)
- S−アデノシル−L−メチオニン生産能を有する酵母を用い、S−アデノシル−L−メチオニンを含有する乾燥酵母を製造する方法において、酵母の菌体培養液より分離した酵母菌体濃縮物を、(1)鉱酸添加によりpHを1〜4に調整する処理、及び(2)40℃〜70℃に加熱する処理を行った後に、乾燥させることを特徴とする、S−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
- S−アデノシル−L−メチオニン生産能を有する酵母として、サッカロマイセス属に属する酵母を用いる、請求項1に記載のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
- サッカロマイセス属に属する酵母がサッカロマイセス・セレビジエである、請求項2に記載のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
- (1)鉱酸添加処理で使用する鉱酸が硫酸である、請求項1〜3のいずれかに記載のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
- (2)加熱処理を30〜600秒間行う、請求項1〜4のいずれかに記載のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
- 凍結乾燥法又は噴霧乾燥法により乾燥する、請求項1〜5のいずれかに記載のS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母の製造方法。
- 請求項1〜6のいずれかに記載した方法によって製造されたS−アデノシル−L−メチオニン含有乾燥酵母を成型してなる経口摂取用組成物。
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