JP4873444B2

JP4873444B2 - Blood coagulation retarder

Info

Publication number: JP4873444B2
Application number: JP2005164388A
Authority: JP
Inventors: 学村元
Original assignee: Japan Tobacco Inc
Current assignee: Japan Tobacco Inc
Priority date: 2005-06-03
Filing date: 2005-06-03
Publication date: 2012-02-08
Anticipated expiration: 2025-06-03
Also published as: JP2006335723A

Description

本発明は、植物由来の血液凝固遅延剤およびその製造方法に関するものである。 The present invention relates to a plant-derived blood coagulation retarder and a method for producing the same.

一般に、血栓ができることにより引き起こされる重篤な疾病として、脳梗塞やエコノミークラス症候群等が知られている。例えば、エコノミークラス症候群は、飛行機や新幹線等の長距離移動で長時間同じ姿勢で座り続けること等により、太ももの奥の静脈が圧迫され血液の巡りが悪くなることが原因で血栓ができ、その血栓が肺動脈を塞ぎ、その結果、呼吸困難、心臓機能の低下などの症状が起こる疾病である。このようなエコノミークラス症候群は、飛行機のエコノミークラスのシートで長時間旅行する人に多く見られ、特に欧米人は、血液が凝固するメカニズムに先天的な異常のある人が多いため、欧米の航空会社の中には、予め搭乗者全員にペットボトル飲料を配ったり、座席の一部を取り払って歩くスペースを設けたりするところもある。また、このようなエコノミークラス症候群は、今では、飛行機の搭乗者だけではなく、デスクワーク等で椅子に長時間座るような労働形態をとるオフィスワーカーやタクシーの運転手等にも広がっている。 In general, cerebral infarction, economy class syndrome and the like are known as serious diseases caused by the formation of blood clots. For example, economy class syndrome can cause blood clots due to poor blood circulation due to pressure on the veins in the back of the thigh due to long-distance movement of airplanes and bullet trains, etc. A disease in which blood clots block the pulmonary artery, resulting in symptoms such as dyspnea and decreased cardiac function. Such economy class syndrome is more common in people traveling for a long time on airplane economy class seats.Especially Westerners often have congenital abnormalities in the mechanism of blood clotting. Some companies distribute plastic bottle drinks to all passengers in advance, or provide a space to walk away from some seats. Such economy class syndrome is now spreading not only to airplane passengers but also to office workers, taxi drivers, etc. who take a form of work such as sitting on a chair for a long time by desk work or the like.

このような血栓が引き起こす疾病の治療や予防策として、血栓の形成を抑制したり、血栓を溶解させるといった機能を有する様々な食品素材が発明されている。しかしながら、例えば、プロポリス（特許文献１）、プロアントシアニジン（特許文献２）、ポークペプチド（特許文献３）等の食品素材は高価なものであるため、日常的に摂取することは困難なものであった。また、ナットウキナーゼ（特許文献４）、納豆抽出物（特許文献５）、ドコサヘキサエン酸（特許文献６）、タマネギの薄皮（特許文献７）等は素材特有の味が強いため、他の飲食品やサプリメント等への添加は困難なものであった。また、イヌゴマ抽出物（特許文献８）は、食経験のない素材であるため、安心して使用できる素材ではないといった問題を有するものであった。 Various food materials having functions of suppressing the formation of thrombus and dissolving the thrombus have been invented as treatments and preventive measures for diseases caused by such a thrombus. However, food materials such as propolis (Patent Document 1), proanthocyanidins (Patent Document 2), and pork peptides (Patent Document 3) are expensive and difficult to take on a daily basis. It was. Nattokinase (patent document 4), natto extract (patent document 5), docosahexaenoic acid (patent document 6), onion thin skin (patent document 7), etc. have a strong taste peculiar to the material, so other foods and drinks and supplements It was difficult to add to the above. Further, Inu Sesame Extract (Patent Document 8) has a problem that it is not a material that can be used with confidence because it is a material that has no food experience.

また、穀類、野菜または果物搾汁液中にも抗血栓性が認められるが、品種によるばらつきが多いことが報告されている（特許文献９）。このように、品質が一定で工業的に大量に生産することが可能で、特徴的な味を有することがなく、あらゆる食品にも適用できる血栓防止食品素材または血栓溶解食品素材はこれまで報告されていない。 Moreover, although antithrombogenicity is recognized also in cereals, vegetables, or fruit juice liquid, it has been reported that there are many dispersion | variations by a kind (patent document 9). Thus, a thrombus-preventing food material or a thrombus-dissolving food material that has a constant quality, can be produced industrially in large quantities, has no characteristic taste, and can be applied to any food has been reported so far. Not.

一方、コーヒー抽出物にはコーヒー酸、キナ酸、およびこれらのエステル化合物であるクロロゲン酸類等が含有されている。コーヒー酸には血栓溶解活性があり、そのためコーヒーに血栓防止効果が認められる可能性があること、この活性はクロロゲン酸に見られずに、コーヒー酸にのみに見られることが須見らによって報告されている（非特許文献１）。しかしながら、須見らが使用したコーヒー酸は、試薬であり、現在、食品添加物として認可されていないものであったため、食品に添加することは困難であるといった問題があった。 On the other hand, the coffee extract contains caffeic acid, quinic acid, and chlorogenic acids which are ester compounds thereof. It is reported by Sumi et al. That caffeic acid has thrombolytic activity, and that clots may have a thrombus-preventing effect, and that this activity is not found in chlorogenic acid but only in caffeic acid. (Non-Patent Document 1). However, the caffeic acid used by Sumi et al. Is a reagent and has not been approved as a food additive at present, so that there is a problem that it is difficult to add it to food.

また、一般的に、コーヒー豆に多く含まれるクロロゲン酸類は、クロロゲナーゼによりコーヒー酸とキナ酸とに加水分解されることが知られている。ここで、クロロゲナーゼは、食品添加物としての認可のある酵素であり、例えば、果汁の褐変防止方法（特許文献１０）や混濁の少ない茶飲料の製造（特許文献１１）等に使用されている。そのため、コーヒー豆から抽出したコーヒー抽出液を加水分解することにより、食品に添加することが可能な血栓防止素材を得る方法が考えられるが、通常のコーヒー抽出液を通常の方法で加水分解したものは、食品に添加できる血栓防止素材として用いるには、種々の問題を有したものであった。 Further, it is generally known that chlorogenic acids contained in a large amount in coffee beans are hydrolyzed into caffeic acid and quinic acid by chlorogenase. Here, the chlorogenase is an approved enzyme as a food additive, and is used, for example, in a method for preventing browning of fruit juice (Patent Document 10), manufacturing a tea beverage with less turbidity (Patent Document 11), and the like. . Therefore, it is possible to obtain a thrombus-preventing material that can be added to foods by hydrolyzing the coffee extract extracted from coffee beans. Had various problems when used as a thrombus prevention material that can be added to foods.

例えば、一般的にコーヒーは焙煎することにより、青く生っぽい風味を除去し、飲用することが可能となるが、このような焙煎は、コーヒー豆に高熱が加わるため、コーヒー豆に含まれるクロロゲン酸類が糖質やカフェイン等と反応を起こしてしまい、コーヒー酸の原料となるクロロゲン酸類の量が低下してしまうといった問題があった。 For example, in general, coffee can be roasted by removing the green and raw flavor, and such roasting is included in coffee beans because high heat is added to coffee beans. Chlorogenic acids react with sugars, caffeine, etc., and the amount of chlorogenic acids used as a raw material for caffeic acid is reduced.

また、例えばクロロゲン酸類を加水分解することによりコーヒー酸と共にキナ酸が生成するが、このキナ酸は有機酸であることから、反応液をクロロゲナーゼの至適ｐＨに保つために、加水分解の際には、例えばリン酸塩を含む緩衝能の強いバッファーが用いられる。しかしながら、リン酸塩はえぐ味や食感のぬめり等を有するため、至適ｐＨの維持に必要な量のリン酸塩は、添加する食品やサプリメント等の味を損ねてしまうといった問題があった。 In addition, for example, chlorogenic acids are hydrolyzed to produce quinic acid together with caffeic acid. Since this quinic acid is an organic acid, the hydrolysis is carried out in order to keep the reaction solution at the optimum pH of chlorogenase. For example, a buffer having a strong buffering capacity containing phosphate is used. However, since phosphate has a savory taste and texture, there is a problem that the amount of phosphate necessary for maintaining the optimum pH impairs the taste of foods and supplements to be added. .

さらに、例えばコーヒー豆から抽出したコーヒー抽出液にはカフェインが多く含まれているが、このカフェインは血管収縮作用を有しているため、大量に摂取した場合、血液の循環が悪くなり、血栓の形成を促進するおそれがあるといった問題を有していた。 Furthermore, for example, a coffee extract extracted from coffee beans contains a lot of caffeine, but since this caffeine has a vasoconstrictive action, when it is ingested in a large amount, the circulation of blood deteriorates, There was a problem that the formation of a thrombus might be promoted.

特開２００４−４３３８０号公報JP 2004-43380 A 特開２００４−２３８２８９号公報JP 2004-238289 A 特開２００４−２４２６７２号公報JP 2004-242672 A 特開２００２−３６０２２０号公報JP 2002-360220 A 特開平０９−３０９８３９号公報Japanese Patent Laid-Open No. 09-309839 特開２００３−３０６６９０号公報JP 2003-306690 A 特開２００２−１７１９３４号公報JP 2002-171934 A 特開平０７−１２６１６９号公報Japanese Patent Laid-Open No. 07-126169 特開２００４−２７９３９９号公報JP 2004-279399 A 特開２０００−１５７１７５号公報JP 2000-157175 A 特開平１１−３０８９５６号公報JP-A-11-308956 「コーヒーブレイク」平成１５年３月３１日発行第５１号ｐ．２４−２７“Coffee Break” issued on March 31, 2003 No. 51 p. 24-27

そこで、品質が一定で工業的に大量に生産することが可能で、飲料、ポーションタイプの飲料用携帯濃縮液、サプリメントおよび医薬品等の種々の形態で、安価に提供できる血栓防止効果を有する血液凝固遅延剤およびその製造方法の提供が望まれている。 Therefore, blood coagulation has a thrombus-preventing effect that can be provided at low cost in various forms such as beverages, potion-type portable concentrates for beverages, supplements, and pharmaceuticals that can be produced in large quantities industrially with a constant quality. It is desired to provide a retarder and a method for producing the same.

本発明は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出した抽出物を、クロロゲナーゼにより加水分解処理して得られる酵素処理抽出物を主成分とすることを特徴とする血液凝固遅延剤を提供する。 The present invention provides a blood coagulation retarding agent characterized by comprising an enzyme-treated extract obtained by hydrolyzing an extract extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids with chlorogenase.

本発明によれば、上記酵素処理抽出物は、血液の凝固を遅延させる効果を有するため、これらを主成分とする血液凝固遅延剤は、血栓の形成を抑制することができる。したがって、本発明の血液凝固遅延剤を摂取することによりエコノミークラス症候群等の血栓症に対する予防効果を得ることが可能となる。また、上記血液凝固遅延剤は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から得られる酵素処理抽出物を主成分とするものであることから、食品として安全に摂取することが可能となる。したがって、本発明の血液凝固遅延剤は、飲料や飲料用携帯濃縮液等に安全に利用することが可能となる。 According to the present invention, since the enzyme-treated extract has an effect of delaying blood coagulation, the blood coagulation retarding agent containing these as a main component can suppress thrombus formation. Therefore, by taking the blood coagulation retarder of the present invention, it is possible to obtain a preventive effect against thrombosis such as economy class syndrome. Moreover, since the said blood coagulation retarder has as a main component the enzyme treatment extract obtained from the plant raw material containing chlorogenic acid, it becomes possible to ingest safely as a foodstuff. Therefore, the blood coagulation retarder of the present invention can be safely used for beverages, beverage concentrates and the like.

また、上記発明においては、上記酵素処理抽出物の主成分がコーヒー酸であることが好ましい。コーヒー酸が主成分である酵素処理抽出物、すなわちコーヒー酸が主成分である血液凝固遅延剤は、血液の凝固を遅延させる効果が増すため、血栓症に対する予防効果がより高い血液凝固遅延剤とすることが可能となるからである。 Moreover, in the said invention, it is preferable that the main component of the said enzyme treatment extract is a caffeic acid. Enzyme-treated extract containing caffeic acid as a main component, that is, a blood coagulation retarding agent containing caffeic acid as a main component has an effect of delaying blood coagulation, and therefore has a blood coagulation retarding agent having a higher preventive effect on thrombosis. Because it becomes possible to do.

さらに上記発明においては、上記酵素処理抽出物に含まれるコーヒー酸の１回当たりの摂取量を６ｍｇ以上とすることが好ましい。これにより、血液の凝固を遅延させる効果をより有効的に得ることが可能となるからである。 Furthermore, in the said invention, it is preferable that the intake per time of the caffeic acid contained in the said enzyme treatment extract shall be 6 mg or more. This is because the effect of delaying blood coagulation can be obtained more effectively.

また本発明は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出したクロロゲン酸類を含む抽出物を、クロロゲナーゼを用いて加水分解処理することにより得られる血液凝固遅延剤の製造方法であって、上記植物原料が脱カフェイン処理したコーヒー豆であることを特徴とする血液凝固遅延剤の製造方法を提供する。 The present invention also provides a method for producing a blood coagulation retarder obtained by hydrolyzing an extract containing chlorogenic acids extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids using chlorogenase, wherein the plant raw material is Provides a method for producing a blood coagulation retarder, characterized in that is a decaffeinated coffee bean.

本発明によれば、上記植物原料が脱カフェイン処理したコーヒー豆であることから、血管収縮作用を有するカフェインの濃度を低下させた血液凝固遅延剤とすることができる。したがって、カフェインの血管収縮作用による血流の悪化を抑制した血液凝固遅延剤を得ることが可能となる。 According to this invention, since the said plant raw material is the coffee beans which carried out the decaffeination process, it can be set as the blood coagulation retarder which reduced the density | concentration of the caffeine which has a vasoconstriction effect | action. Therefore, it is possible to obtain a blood coagulation retarder that suppresses deterioration of blood flow due to the vasoconstrictive action of caffeine.

また、上記植物原料が、脱カフェイン処理したコーヒー豆を１〜６分間の範囲内で焙煎したものであることが好ましい。これにより、上記コーヒー豆に含まれるクロロゲン酸類と、糖質またはカフェイン等との熱による反応を抑制することで、クロロゲン酸類濃度の低下を抑え、かつ未焙煎コーヒー豆特有の青く生っぽい風味を抑えることが可能となる。したがって、青く生っぽい風味が除去された、コーヒー酸濃度の高い血液凝固遅延剤を得ることが可能となる。 Moreover, it is preferable that the said plant raw material is roasted for 1 to 6 minutes in the range of 1 to 6 minutes of decaffeinated coffee beans. As a result, by suppressing the reaction caused by heat between the chlorogenic acids contained in the coffee beans and sugars or caffeine, etc., the decrease in the chlorogenic acid concentration is suppressed, and the blue and freshness unique to unroasted coffee beans It becomes possible to suppress the flavor. Therefore, it is possible to obtain a blood coagulation retarder with a high caffeic acid concentration from which the blue and raw flavor has been removed.

本発明においては、上記加水分解処理で使用するバッファーとしてリン酸バッファーを用い、上記リン酸バッファーの濃度が１０〜２５ｍＭの範囲内であることが好ましい。これにより、リン酸バッファー特有のえぐ味や食感のぬめり等を感じない程度に抑えた血液凝固遅延剤を得ることが可能となるからである。
In the present invention, it is preferable that a phosphate buffer is used as a buffer used in the hydrolysis treatment, and the concentration of the phosphate buffer is within a range of 10 to 25 mM . This is because it is possible to obtain a blood coagulation retarder that is suppressed to such an extent that it does not feel the peculiar taste and texture of the phosphate buffer.

本発明の血液凝固遅延剤は、血液の凝固を遅延させる効果を有し、かつ食品として安全に摂取することが可能なものであるため、例えば、飲料や飲料用携帯濃縮液等に利用し、これらを摂取することにより、血栓症に対する予防効果を得ることができるといった効果を奏する。 Since the blood coagulation retarding agent of the present invention has an effect of delaying blood coagulation and can be safely ingested as a food, for example, it is used for beverages, portable concentrates for beverages, etc. By taking these, there is an effect that a preventive effect against thrombosis can be obtained.

本発明は、血液凝固遅延剤およびその製造方法に関するものである。以下、それぞれについて詳しく説明する。 The present invention relates to a blood coagulation retarder and a method for producing the same. Each will be described in detail below.

Ａ．血液凝固遅延剤
まず、本発明の血液凝固遅延剤について説明する。本発明の血液凝固遅延剤は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出された抽出物を、クロロゲナーゼにより加水分解処理して得られる酵素処理抽出物を主成分とすることを特徴とするものである。 A. Blood coagulation retarder First, the blood coagulation retarder of the present invention will be described. The blood coagulation retarding agent of the present invention is characterized in that an enzyme-treated extract obtained by hydrolyzing an extract extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids with chlorogenase is a main component. is there.

これまで、試薬として入手可能なコーヒー酸には血栓溶解活性を上昇させる働きがあることが見出され、報告されている。しかしながら、この知見は単に一度形成された血栓を溶解する点を見出したものであり、血栓の形成を抑制する点については触れていない。また、ここで用いられたコーヒー酸は、試薬であり、食品添加物として認可されているものではないため、食品等に利用することはできないものであった。 So far, caffeic acid available as a reagent has been found and reported to have a function of increasing thrombolytic activity. However, this finding merely found out that the thrombus once formed is dissolved, and does not mention the point of suppressing the formation of the thrombus. Moreover, since the caffeic acid used here is a reagent and is not approved as a food additive, it cannot be used for food.

本発明者等は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出した抽出物を、クロロゲナーゼにより加水分解処理して得られる酵素処理抽出物に、血液の凝固を遅延させる効果を新たに見出したものであり、これを主成分とする血液凝固遅延剤は、血栓の形成を抑制することができる。したがって、本発明の血液凝固遅延剤を摂取することによりエコノミークラス症候群等の血栓症に対する予防効果を得ることが可能となる。また、本発明の血液凝固遅延剤は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出された抽出物を、クロロゲナーゼにより加水分解処理することにより得られる酵素処理抽出物を主成分とする血液凝固遅延剤であることから、食品として安全に摂取することが可能なものであるため、飲料や飲料用携帯濃縮液等に利用することができる。
以下、本発明の血液凝固遅延剤の主成分である酵素処理抽出物について詳しく説明する。 The present inventors have newly found an effect of delaying blood coagulation to an enzyme-treated extract obtained by hydrolyzing an extract extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids with a chlorogenase. Yes, a blood coagulation retarder comprising this as a main component can suppress thrombus formation. Therefore, by taking the blood coagulation retarder of the present invention, it is possible to obtain a preventive effect against thrombosis such as economy class syndrome. Further, the blood coagulation retarder of the present invention is a blood coagulation retarder mainly composed of an enzyme-treated extract obtained by hydrolyzing an extract extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids with a chlorogenase. Therefore, since it can be safely ingested as food, it can be used for beverages, portable concentrates for beverages, and the like.
Hereinafter, the enzyme-treated extract that is the main component of the blood coagulation retarder of the present invention will be described in detail.

（酵素処理抽出物）
本発明に用いられる酵素処理抽出物は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出した抽出物をクロロゲナーゼにより加水分解処理することにより得られたものである。なお、本発明における植物原料とは、食品として一般的に知られているものを示すこととする。なお、ここでいうクロロゲン酸類とは、桂皮酸誘導体とキナ酸が結合した同族体の総称で、ネオクロロゲン酸、クリプトクロロゲン酸などのカフェイルキナ酸やジカフェイルキナ酸、フェルリキナ酸などからなることとする。 (Enzyme-treated extract)
The enzyme-treated extract used in the present invention is obtained by subjecting an extract extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids to hydrolysis with chlorogenase. In addition, suppose that the plant raw material in this invention shows what is generally known as a foodstuff. The term chlorogenic acids here is a general term for homologues in which cinnamic acid derivatives and quinic acid are combined. .

本発明に用いられるクロロゲン酸類を含有する植物原料とは、クロロゲン酸類を含有し、食品として用いることが可能なものであれば特に限定されるものではないが、例えば、コーヒー豆、サツマイモの葉、ゴボウの葉、ヨモギ、人参、タマネギ、大根、レタス、カリフラワー、セロリー、トマト、ブルーベリー、グレープフルーツ等を挙げることができ、中でもコーヒー豆を用いることが好ましい。コーヒー豆、特に未焙煎コーヒー豆には、比較的多くのクロロゲン酸類が含有されているからである。 The plant raw material containing chlorogenic acids used in the present invention is not particularly limited as long as it contains chlorogenic acids and can be used as a food. For example, coffee beans, sweet potato leaves, Examples include burdock leaves, mugwort, carrots, onions, radishes, lettuce, cauliflower, celery, tomatoes, blueberries, grapefruits, among which coffee beans are preferably used. This is because coffee beans, particularly unroasted coffee beans contain a relatively large amount of chlorogenic acids.

また、本発明に用いられるクロロゲン酸類を含有する植物原料として、カフェインを含有するものを用いる場合、脱カフェイン処理を施したものであることが好ましい。ここで、脱カフェイン処理を施したものとは、脱カフェイン処理により植物原料に含まれるカフェインを除去し、カフェインの含有量を低下させたもののことをいう。このような脱カフェイン処理を施した植物原料を用いることにより、上記植物原料から抽出した抽出物を、血管収縮作用を有するカフェインの含有量の低下したものとすることができる。したがって、このような抽出物から得られた血液凝固遅延剤は、血管収縮作用による血流の悪化を抑制したものとすることが可能となる。なお、このような脱カフェイン処理の方法としては、使用する植物原料により適宜選択されるものであり、特に限定されるものではない。 Moreover, when using the thing containing caffeine as a plant raw material containing the chlorogenic acids used for this invention, it is preferable that the thing which performed the decaffeination process is performed. Here, the thing which performed the decaffeination process means the thing which removed the caffeine contained in a plant raw material by the decaffeination process, and reduced the content of caffeine. By using a plant material subjected to such decaffeination treatment, the extract extracted from the plant material can have a reduced content of caffeine having a vasoconstrictive action. Therefore, the blood coagulation retarder obtained from such an extract can suppress the deterioration of blood flow due to the vasoconstriction action. In addition, as a method of such a decaffeination process, it selects suitably by the plant raw material to be used, and is not specifically limited.

本発明に用いられる抽出物としては、植物原料から抽出したものであり、上記クロロゲン酸類を含有するものであれば特に限定されるものではなく、他の成分を含有していてもよい。他の成分としては、例えばコーヒー酸、キナ酸、フェルラ酸、カフェイン等が挙げられるが、本発明においては、カフェインの含有量の少ない抽出物であることが好ましい。このような抽出物のカフェインの含有量としては、抽出物に対して０〜９質量％の範囲内が好ましく、中でも０〜１．５質量％の範囲内であることが好ましい。カフェインの含有量が上記範囲を超える場合、カフェインは血管収縮作用を有しているため、体内の血液の循環が悪くなるおそれがあり、血栓の形成を促進してしまうおそれがあるからである。 The extract used in the present invention is extracted from a plant raw material and is not particularly limited as long as it contains the above chlorogenic acids, and may contain other components. Examples of other components include caffeic acid, quinic acid, ferulic acid, and caffeine. In the present invention, an extract having a low content of caffeine is preferable. The content of caffeine in such an extract is preferably in the range of 0 to 9% by mass, more preferably in the range of 0 to 1.5% by mass with respect to the extract. If the content of caffeine exceeds the above range, caffeine has a vasoconstrictive action, so there is a possibility that blood circulation in the body may be deteriorated and the formation of thrombus may be promoted. is there.

なお、本発明でいう抽出物とは、植物原料に含有される成分のうち抽出操作により抽出されたもののことを示し、抽出操作の際に用いられる水等は含まないこととする。 In addition, the extract as used in this invention shows what was extracted by extraction operation among the components contained in a plant raw material, and shall not include the water etc. which are used in the case of extraction operation.

また、本発明に用いられる抽出物の植物原料からの抽出方法については、使用する植物原料により異なるものであるが、特に限定されるものではなく、例えばコーヒー豆を植物原料として用いた場合、コーヒー豆を粉砕し、熱水抽出法により抽出する方法等を挙げることができる。 Further, the extraction method of the extract used in the present invention from the plant raw material is different depending on the plant raw material to be used, but is not particularly limited. For example, when coffee beans are used as the plant raw material, Examples thereof include a method of pulverizing beans and extracting by hot water extraction.

本発明に用いられるクロロゲナーゼは、クロロゲン酸類をコーヒー酸とキナ酸とに加水分解する酵素である。本発明においては、一般に食品業界においてクロロゲナーゼと称される酵素であれば用いることが可能であり、特にその由来等は限定されるものではなく、また精製品であっても未精製な状態のものであっても用いることができる。 The chlorogenase used in the present invention is an enzyme that hydrolyzes chlorogenic acids into caffeic acid and quinic acid. In the present invention, it can be used as long as it is an enzyme generally called chlorogenase in the food industry, and its origin is not particularly limited, and even a purified product is in an unpurified state. Even a thing can be used.

一般的には、麹菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）の産生する酵素等が製造販売されており、具体的には、キッコーマン株式会社製のクロロゲン酸エステラーゼ等を用いることが可能である。 In general, enzymes produced by Aspergillus are manufactured and sold, and specifically, chlorogenic acid esterase manufactured by Kikkoman Corporation can be used.

本発明に用いられる酵素処理抽出物は、上記抽出物にクロロゲナーゼによる加水分解処理を施すことにより得られるものである。酵素処理抽出物とは、少なくともクロロゲン酸類の酵素分解物であるコーヒー酸が含まれていればよく、コーヒー酸以外の他成分を含むものであってもよい。例えば、クロロゲン酸類の酵素分解物であるキナ酸、酵素分解物以外の抽出物に含まれる他成分等を挙げることができる。 The enzyme-treated extract used in the present invention is obtained by subjecting the extract to a hydrolysis treatment with chlorogenase. The enzyme-treated extract only needs to contain at least caffeic acid, which is an enzymatic degradation product of chlorogenic acids, and may contain components other than caffeic acid. Examples thereof include quinic acid, which is an enzymatic degradation product of chlorogenic acids, and other components contained in extracts other than the enzymatic degradation product.

なお、本発明でいう酵素処理分解物とは、上記抽出物に含まれる成分に由来するものであり、加水分解処理により分解された分解物および分解されない成分から構成されるものとし、抽出物を得る際の抽出操作に用いる水や加水分解処理に用いるバッファー等は含まないこととする。 The enzyme-treated decomposed product as used in the present invention is derived from the components contained in the extract, and is composed of a decomposed product decomposed by hydrolysis treatment and a component that is not decomposed. It does not include water used for the extraction operation when obtained or a buffer used for the hydrolysis treatment.

このような酵素処理抽出物としては、主成分がコーヒー酸であることが好ましい。コーヒー酸が主成分である酵素処理抽出物、すなわちコーヒー酸が主成分である血液凝固遅延剤は、血液凝固を遅延させる効果がさらに増加するため、血栓症に対する予防効果のより高い血液凝固遅延剤とすることが可能となるからである。 As such an enzyme-treated extract, the main component is preferably caffeic acid. Enzyme-treated extract containing caffeic acid as a main component, that is, a blood coagulation retarding agent containing caffeic acid as a main component further increases the effect of delaying blood coagulation, and therefore has a higher preventive effect on thrombosis. This is because it becomes possible.

このような酵素処理抽出物中のコーヒー酸の含有量としては、具体的に、１．０〜１０．０質量％の範囲内、中でも４．０〜５．０質量％の範囲内であることが好ましい。 Specifically, the content of caffeic acid in such an enzyme-treated extract is within the range of 1.0 to 10.0% by mass, particularly within the range of 4.0 to 5.0% by mass. Is preferred.

また、本発明においては、上記コーヒー酸の一回当たりの摂取量としては、６ｍｇ以上であることが好ましく、特に９．０ｍｇ以上、中でも９．８〜１７．０ｍｇの範囲内であることが好ましい。これにより、血液の凝固を遅延させる効果をより有効的に得ることが可能となるからである。なお、本発明における上記コーヒー酸の摂取回数としては、通常、一日一回であることが好ましい。 In the present invention, the amount of the caffeic acid per one intake is preferably 6 mg or more, particularly 9.0 mg or more, and particularly preferably in the range of 9.8 to 17.0 mg. . This is because the effect of delaying blood coagulation can be obtained more effectively. In addition, as the frequency | count of intake of the said caffeic acid in this invention, it is preferable that it is once a day normally.

（その他）
本発明の血液凝固遅延剤は、上記酵素処理抽出物を主成分とするものである。本発明において、上記酵素処理抽出物の含有量としては、具体的に、０．０１〜２．０質量％の範囲内、中でも０．０５〜０．２質量％の範囲内であることが好ましい。これにより、本発明の効果を十分に得ることが可能となるからである。 (Other)
The blood coagulation retarder of the present invention is mainly composed of the above enzyme-treated extract. In the present invention, the content of the enzyme-treated extract is specifically within the range of 0.01 to 2.0% by mass, and preferably within the range of 0.05 to 0.2% by mass. . This is because the effect of the present invention can be sufficiently obtained.

なお、本発明の血液凝固遅延剤は、種々の形態で提供することができる。例えば、ポーションタイプの飲料用携帯濃縮液、サプリメント、医薬品等の形態を挙げることができる。また、本発明の血液凝固遅延剤を様々な食品に添加して提供することも可能である。添加する食品としては、例えば、コーヒー、牛乳、果汁、茶類抽出液、ココア、炭酸飲料、スポーツドリンク、スープ等を挙げることができる。 In addition, the blood coagulation retarder of this invention can be provided with a various form. For example, forms such as potion-type beverage concentrates for beverages, supplements, pharmaceuticals and the like can be mentioned. It is also possible to provide the blood coagulation retarder of the present invention by adding it to various foods. Examples of the food to be added include coffee, milk, fruit juice, tea extract, cocoa, carbonated drink, sports drink, soup and the like.

Ｂ．血液凝固遅延剤の製造方法
次に、本発明の血液凝固遅延剤の製造方法について説明する。
本発明の血液凝固遅延剤の製造方法は、クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出したクロロゲン酸類を含む抽出物を、クロロゲナーゼを用いて加水分解処理することにより得られる血液凝固遅延剤の製造方法であって、上記植物原料が脱カフェイン処理したコーヒー豆であることを特徴とするものである。 B. Next, a method for producing a blood coagulation retarder of the present invention will be described.
The method for producing a blood coagulation retarder of the present invention is a method for producing a blood coagulation retarder obtained by hydrolyzing an extract containing chlorogenic acids extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids using chlorogenase. The plant material is a decaffeinated coffee bean.

一般的に、コーヒー豆にはカフェインが多く含まれるため、コーヒー豆からコーヒー抽出物を抽出した際、コーヒー豆に含まれるクロロゲン酸類と共にカフェインも抽出される。カフェインは、覚醒作用や興奮作用を有するため、眠気覚ましや滋養強壮等の目的で医薬部外品や医薬品等に利用されている。しかしながら、カフェインは血管収縮作用も有しているため、大量に摂取した場合、体内の血液の循環が悪くなり、血栓が形成される可能性が高まるといった問題があった。 Generally, since coffee beans contain a lot of caffeine, when a coffee extract is extracted from coffee beans, caffeine is also extracted together with chlorogenic acids contained in the coffee beans. Since caffeine has an arousal action and an excitement action, caffeine is used for quasi-drugs and medicines for the purpose of awakening sleepiness and nutrition. However, since caffeine also has a vasoconstrictive action, there has been a problem that, when ingested in a large amount, blood circulation in the body deteriorates and the possibility of formation of a thrombus increases.

本発明によれば、上記植物原料として脱カフェイン処理したコーヒー豆を使用することにより、血管収縮作用を有するカフェインの濃度を低下させた血液凝固遅延剤とすることができる。したがって、血液循環が悪化する危険性を低下させた血液凝固遅延剤を得ることが可能となる。
以下、本発明の血液凝固遅延剤の製造方法について、各構成ごとに分けて詳細に説明する。 According to the present invention, by using decaffeinated coffee beans as the plant material, it is possible to obtain a blood coagulation retarder in which the concentration of caffeine having a vasoconstrictive action is reduced. Therefore, it is possible to obtain a blood coagulation retarder that has reduced the risk of worsening blood circulation.
Hereinafter, the method for producing a blood coagulation retarder of the present invention will be described in detail for each component.

（植物原料）
本発明の血液凝固遅延剤の製造方法は、植物原料として、脱カフェイン処理したコーヒー豆を用いる点に特徴を有するものである。ここで、脱カフェイン処理したコーヒー豆とは、コーヒー豆に含まれるカフェインを脱カフェイン処理により除去し、カフェインの含有量を低下させたコーヒー豆のことをいう。コーヒー豆はカフェインを比較的多く含有するため、脱カフェイン処理を施すことにより、カフェインの濃度を低下させた血液凝固遅延剤とすることができるといった利点を有する。 (Plant raw material)
The method for producing a blood coagulation retardant according to the present invention is characterized in that decaffeinated coffee beans are used as plant materials. Here, the decaffeinated coffee beans refer to coffee beans in which caffeine contained in the coffee beans is removed by decaffeination to reduce the content of caffeine. Since coffee beans contain a relatively large amount of caffeine, there is an advantage that a blood coagulation retarder with a reduced caffeine concentration can be obtained by performing decaffeination treatment.

本発明における脱カフェイン処理とは、コーヒー豆からカフェインを除去する処理であるが、その方法としては特に限定されるものではなく、例えばコーヒー豆を有機溶媒、水、超臨界流体化した二酸化炭素等の溶媒に浸し、カフェインを選択的に抽出する方法等を用いることができる。 The decaffeination treatment in the present invention is a treatment for removing caffeine from coffee beans, but the method is not particularly limited. For example, coffee beans are converted to organic solvent, water, supercritical fluid dioxide dioxide. A method of selectively extracting caffeine by immersing in a solvent such as carbon can be used.

本発明に用いられる脱カフェイン処理を施したコーヒー豆としては、焙煎したものであることが好ましい。コーヒー豆を焙煎することにより、未焙煎コーヒー豆特有の青く生っぽい風味を取り除くことができるからである。なお、コーヒー豆を焙煎する方法としては、一般的に用いられる焙煎方法を用いることができる。 The coffee beans subjected to decaffeination used in the present invention are preferably roasted. This is because roasting coffee beans can remove the blue and raw flavor peculiar to unroasted coffee beans. In addition, as a method for roasting coffee beans, a commonly used roasting method can be used.

この際の焙煎時間としては、１〜６分間の範囲内、中でも２〜４分間の範囲内であることが好ましい。焙煎時間が上記範囲を超える場合、上記コーヒー豆に含まれるクロロゲン酸類と、糖質またはカフェイン等との熱による反応を促進させ、クロロゲン酸類濃度が低下してしまうおそれがあるからである。また、焙煎時間が上記範囲に満たない場合、未焙煎コーヒー豆特有の青臭く生っぽい風味の残る血液凝固遅延剤となる可能性があるからである。 The roasting time at this time is preferably within a range of 1 to 6 minutes, and more preferably within a range of 2 to 4 minutes. This is because when the roasting time exceeds the above range, the reaction between the chlorogenic acids contained in the coffee beans and sugars or caffeine is promoted by heat, and the chlorogenic acid concentration may be lowered. Moreover, when the roasting time is less than the above range, there is a possibility that the blood coagulation retardant is left with a blue-smelling and raw flavor peculiar to unroasted coffee beans.

また、焙煎の際の焙煎温度としては、２００〜５００℃の範囲内、中でも２００〜３００℃の範囲内であることが好ましい。焙煎温度が上記範囲を超える場合、クロロゲン酸類と、糖質またはカフェイン等との熱による反応が急激に進行してしまうといったおそれがあるからである。また、焙煎温度が上記範囲に満たない場合、焙煎が不十分となってしまうといった可能性があるからである。 In addition, the roasting temperature during roasting is preferably in the range of 200 to 500 ° C, and more preferably in the range of 200 to 300 ° C. This is because when the roasting temperature exceeds the above range, the reaction between the chlorogenic acids and the sugar or caffeine or the like may proceed rapidly. Moreover, it is because roasting may become inadequate when roasting temperature is less than the said range.

（抽出物の抽出）
本発明においては、上述したクロロゲン酸類を含有するコーヒー豆から抽出物を抽出することにより、クロロゲン酸類を含有するコーヒー抽出物を得ることができる。 (Extract extraction)
In the present invention, a coffee extract containing chlorogenic acids can be obtained by extracting the extract from the coffee beans containing chlorogenic acids described above.

本発明においては、上記コーヒー豆からコーヒー抽出物を抽出する前に、上記コーヒー豆を粉砕することが好ましい。これにより、コーヒー豆に含まれる成分を効率よく抽出することが可能となるからである。なお、コーヒー豆を粉砕する方法としては、コーヒー豆を粉砕することが可能な方法であれば特に限定されるものではないが、例えばコーヒーミル等を用いて粉砕する方法を挙げることができる。 In the present invention, the coffee beans are preferably pulverized before extracting the coffee extract from the coffee beans. This is because the components contained in the coffee beans can be efficiently extracted. The method for pulverizing coffee beans is not particularly limited as long as it is a method capable of pulverizing coffee beans, and examples thereof include a method for pulverizing using a coffee mill.

また、本発明においては、上記コーヒー豆からクロロゲン酸類を含むコーヒー抽出物を抽出する方法としては特に限定されるものではなく、例えば熱水抽出法等を用いることができる。熱水抽出法とは、粉砕したコーヒー豆と熱水とを混合したものを、コーヒー用のペーパーフィルター等を用いて濾過し、コーヒー抽出物を含んだコーヒー抽出液とコーヒー豆とを濾別する方法である。この際、用いる熱水の温度としては、通常コーヒーを抽出する際に用いる熱水の温度と同様であれば特に限定されるものではなく、具体的には、５５〜９５℃の範囲内程度である。 Moreover, in this invention, it does not specifically limit as a method of extracting the coffee extract containing chlorogenic acids from the said coffee beans, For example, a hot water extraction method etc. can be used. In the hot water extraction method, a mixture of ground coffee beans and hot water is filtered using a paper filter for coffee, and the coffee extract containing the coffee extract is separated from the coffee beans. Is the method. At this time, the temperature of the hot water to be used is not particularly limited as long as it is the same as the temperature of the hot water normally used when extracting coffee, and specifically, it is in the range of 55 to 95 ° C. is there.

（加水分解処理）
本発明における加水分解処理とは、クロロゲナーゼを用いて、上記コーヒー抽出物に含まれるクロロゲン酸類の加水分解を行う処理である。このような酵素を用いた加水分解処理は、温度、時間、およびｐＨ等の条件により、得られる酵素処理抽出物中の各成分の濃度が大きく変動するものである。以下、加水分解処理の各条件について説明する。 (Hydrolysis treatment)
The hydrolysis treatment in the present invention is a treatment for hydrolyzing chlorogenic acids contained in the coffee extract using chlorogenase. In the hydrolysis treatment using such an enzyme, the concentration of each component in the obtained enzyme-treated extract varies greatly depending on conditions such as temperature, time, and pH. Hereinafter, each condition of a hydrolysis process is demonstrated.

本発明における加水分解処理は、酵素を用いた加水分解処理であることから、酵素の至適ｐＨ付近で加水分解処理を行うことが好ましい。本発明に用いられる酵素は、クロロゲナーゼであることから、至適ｐＨは中性付近である。本発明における加水分解処理を行うコーヒー抽出物を含んだコーヒー抽出液のｐＨとして、具体的には、ｐＨ５．５〜７．０の範囲内、中でもｐＨ５．５〜６．５の範囲内であることが好ましい。 Since the hydrolysis treatment in the present invention is a hydrolysis treatment using an enzyme, the hydrolysis treatment is preferably performed in the vicinity of the optimum pH of the enzyme. Since the enzyme used in the present invention is a chloroformase, the optimum pH is around neutral. The pH of the coffee extract containing the coffee extract to be hydrolyzed in the present invention is specifically within the range of pH 5.5 to 7.0, and more preferably within the range of pH 5.5 to 6.5. It is preferable.

上記コーヒー抽出液のｐＨを上記範囲に調整する方法としては、通常、バッファーを用いて調整する方法が用いられる。本発明に用いられるバッファーとしては、リン酸バッファーを用いることが好ましい。リン酸バッファーに含まれるリン酸塩は、食品添加物として認可されているからである。また、上記リン酸バッファーの濃度としては、１０〜２５ｍＭの範囲内、中でも１０〜１５ｍＭの範囲内であることが好ましい。リン酸バッファーの濃度が上記範囲を超えると、リン酸塩特有のえぐ味や食感のぬめり等が感じられ、他の食品等に添加した際、食品等の味を損ねてしまう可能性があるからである。また、リン酸バッファーの濃度が上記範囲に満たない場合、ｐＨの緩衝能を維持することが困難となり、クロロゲナーゼの活性が低下するおそれがあるからである。 As a method of adjusting the pH of the coffee extract to the above range, a method of adjusting using a buffer is usually used. As the buffer used in the present invention, a phosphate buffer is preferably used. This is because the phosphate contained in the phosphate buffer is approved as a food additive. Further, the concentration of the phosphate buffer is preferably in the range of 10 to 25 mM , and more preferably in the range of 10 to 15 mM . If the concentration of the phosphate buffer exceeds the above range, the peculiar taste and texture of the phosphate are felt, and when added to other foods, the taste of the foods may be impaired. Because. In addition, when the phosphate buffer concentration is less than the above range, it is difficult to maintain the pH buffering capacity, and the activity of chloroformase may be reduced.

本発明における加水分解処理温度としては、用いるクロロゲナーゼの活性化温度と同様の温度とするものであり、通常４０〜６０℃の範囲内程度とされる。 The hydrolysis treatment temperature in the present invention is the same temperature as the activation temperature of the chlorogenase used, and is usually in the range of 40 to 60 ° C.

本発明における加水分解処理の時間としては、特に限定されるものではないが、加水分解がほぼ完全に進行するのに要する時間と同様とすることが好ましく、具体的には６０〜１２０分程度とすることが好ましい。これにより、より多くのコーヒー酸を効率よく得ることが可能となるからである。 The time for the hydrolysis treatment in the present invention is not particularly limited, but is preferably the same as the time required for the hydrolysis to proceed almost completely, specifically about 60 to 120 minutes. It is preferable to do. This is because more caffeic acid can be obtained efficiently.

本発明における加水分解処理に用いるクロロゲナーゼの添加量としては、上記コーヒー抽出物に含まれるクロロゲン酸類と添加するクロロゲナーゼとの質量比で、クロロゲン酸類量を１とした場合、０．５〜３．０の範囲内、中でも１．０〜２．０の範囲内であることが好ましい。クロロゲナーゼの添加量が上記範囲に満たない場合、加水分解が効率的に進行しない可能性があるからである。また、クロロゲナーゼの添加量が上記範囲を超える場合、コスト的な面で問題が生じるおそれがあるからである。なお、クロロゲン酸類濃度を測定する方法としては、特に限定されるものではないが、例えば逆相ＨＰＬＣを用いて測定することができる。 The amount of chlorogenase used for the hydrolysis treatment in the present invention is 0.5 to 3 when the chlorogenic acid amount is 1 in terms of the mass ratio of the chlorogenic acids contained in the coffee extract to the chlorogenase to be added. Within the range of 0.0, particularly preferably within the range of 1.0 to 2.0. This is because hydrolysis may not proceed efficiently when the amount of addition of chloroformase is less than the above range. Moreover, if the amount of addition of the chlorinease exceeds the above range, there is a possibility that a problem may occur in terms of cost. In addition, it does not specifically limit as a method of measuring chlorogenic acid density | concentration, For example, it can measure using reverse phase HPLC.

なお、上記クロロゲナーゼについては、上述した「Ａ．血液凝固遅延剤」に記載したものと同様とすることができるので、ここでの説明は省略する。 The above-mentioned chlorogenase can be the same as that described in the above-mentioned “A. Blood coagulation retarder”, and therefore the description thereof is omitted here.

（その他）
本発明の血液凝固遅延剤の製造方法は、上記加水分解処理の後に、通常、上記クロロゲナーゼの失活処理が行われる。失活処理の方法としては、例えば酵素が失活する程度に加熱する方法等が用いられ、具体的には９０℃の湯煎で５分間加熱する方法を用いることができる。 (Other)
In the method for producing a blood coagulation retardant according to the present invention, the above-mentioned treatment for inactivating the above-mentioned chlorogenase is usually performed after the hydrolysis treatment. As a deactivation treatment method, for example, a method of heating to such an extent that the enzyme is deactivated is used, and specifically, a method of heating in a 90 ° C. hot water bath for 5 minutes can be used.

また、本発明の血液凝固遅延剤の製造方法は、上述した処理等の他、他の処理等を有していてもよく、例えば、上記失活処理の後に濃縮処理や滅菌処理を有していてもよい。濃縮処理に用いられる濃縮方法としては、一般的に用いられる濃縮方法であれば特に限定されるものではないが、例えばエバポレーター等を用いて濃縮する方法等を挙げることができる。また、殺菌処理に用いられる殺菌方法としては、オートクレーブ等の装置を用いる方法等を挙げることができる。 In addition, the method for producing a blood coagulation retarding agent of the present invention may have other treatments in addition to the above-described treatments, for example, a concentration treatment and a sterilization treatment after the deactivation treatment. May be. The concentration method used for the concentration treatment is not particularly limited as long as it is a commonly used concentration method, and examples thereof include a method of concentration using an evaporator or the like. Examples of the sterilization method used for the sterilization treatment include a method using an apparatus such as an autoclave.

なお、本発明は、上記実施形態に限定されるものではない。上記実施形態は、例示であり、本発明の特許請求の範囲に記載された技術的思想と実質的に同一な構成を有し、同様な作用効果を奏するもの、またはそれらの均等物は、いかなるものであっても本発明の技術的範囲に包含される。 The present invention is not limited to the above embodiment. The above embodiment is an exemplification, and has substantially the same configuration as the technical idea described in the claims of the present invention, and has the same operational effects or equivalents thereof. Is included in the technical scope of the present invention.

以下、実施例および比較例を挙げて本発明を具体的に説明する。 Hereinafter, the present invention will be specifically described with reference to Examples and Comparative Examples.

[実験例１：コーヒー豆の焙煎時間の検討]
焙煎時間をそれぞれ０（未焙煎）、２、３、４、８分としてコーヒー豆を焙煎した。なお、この時の加熱温度等の諸条件は、焙煎時間を８分とした時にＬ値が３０となるような条件とした。得られたそれぞれのコーヒー豆をコーヒーミルを用いて粉砕し、粉砕豆を得た。次いで、粉砕豆６ｇを６０℃の温水１０ｇに投入し、６０℃を保持しながら１０分間撹拌した。１０分後、粉砕豆の入った温水を氷冷し、その後濾紙による濾過と遠心分離により粉砕豆とコーヒー抽出物を含んだコーヒー抽出液とを濾別した。
得られたコーヒー抽出液の重量を測定し、逆相系のＨＰＬＣにより、コーヒー抽出液中のクロロゲン酸類濃度を定量し、粉砕豆１ｇ当たりのクロロゲン酸類量を算出した。結果を図１に示す。図１から焙煎時間が２〜４分でもクロロゲン酸類量に変化がないことが判明した。また、これらのコーヒー抽出液は、未焙煎コーヒー豆のコーヒー抽出液と比較して、未焙煎コーヒー豆特有の青く生っぽい風味が減少していることを確認した。 [Experimental Example 1: Examination of roasting time for coffee beans]
The coffee beans were roasted at roasting times of 0 (not roasted), 2, 3, 4 and 8 minutes, respectively. The conditions such as the heating temperature at this time were such that the L value was 30 when the roasting time was 8 minutes. The obtained coffee beans were pulverized using a coffee mill to obtain pulverized beans. Next, 6 g of ground beans were put into 10 g of hot water at 60 ° C. and stirred for 10 minutes while maintaining 60 ° C. After 10 minutes, the hot water containing the ground beans was ice-cooled, and then the ground beans and the coffee extract containing the coffee extract were separated by filtration through a filter paper and centrifugation.
The weight of the obtained coffee extract was measured, the concentration of chlorogenic acids in the coffee extract was quantified by reverse phase HPLC, and the amount of chlorogenic acids per gram of ground beans was calculated. The results are shown in FIG. FIG. 1 shows that the amount of chlorogenic acids does not change even when the roasting time is 2 to 4 minutes. Moreover, it was confirmed that these coffee extracts had a reduced blue and raw flavor peculiar to non-roasted coffee beans as compared with the coffee extract of non-roasted coffee beans.

[実験例２：リン酸バッファー濃度の検討]
焙煎時間が３分のコーヒー豆から実験例１と同様の方法でコーヒー抽出物を含むコーヒー抽出液を得た。得られたコーヒー抽出液に添加する５００ｍＭリン酸バッファーの添加量を、表１に示すように変え、クロロゲナーゼをクロロゲン酸類の濃度の１．４倍量を添加し、５５℃で１２０分間加水分解処理を行った。この際、０、６０、１２０分毎に反応液のｐＨ、クロロゲン酸類濃度およびコーヒー酸濃度を測定した。なお、各濃度については、逆相ＨＰＬＣにより測定した。その結果を表１に示す。 [Experimental Example 2: Examination of phosphate buffer concentration]
A coffee extract containing a coffee extract was obtained from coffee beans having a roasting time of 3 minutes in the same manner as in Experimental Example 1. The amount of 500 mM phosphate buffer added to the obtained coffee extract was changed as shown in Table 1, and the amount of chlorogenase was added 1.4 times the concentration of chlorogenic acids and hydrolyzed at 55 ° C for 120 minutes. Processed. At this time, the pH, chlorogenic acid concentration, and caffeic acid concentration of the reaction solution were measured every 0, 60, and 120 minutes. Each concentration was measured by reverse phase HPLC. The results are shown in Table 1.

表１から、リン酸バッファーの最終濃度が１０ｍＭ以下であっても、１２０分の反応時間で、ほぼ全てのクロロゲン酸類が消失することが分かった。また、反応液のｐＨをクロロゲナーゼの至適ｐＨである６付近で、バッファー効果の見られる最低リン酸濃度５０ｍＭとほぼ同程度のコーヒー酸を得るためにも、１０ｍＭの濃度が最適であることが明らかとなった。
また、１０ｍＭおよび２５ｍＭのリン酸バッファーが添加された反応液を、それぞれブラックコーヒーに１０倍希釈となるように添加したところ、２５ｍＭリン酸バッファー入りコーヒーには、リン酸塩特有のぬめりやえぐ味が多少感じられたが、１０ｍＭリン酸バッファー入りコーヒーには、リン酸塩特有のぬめりやえぐ味が感じられなかった。

From Table 1, it was found that even when the final concentration of the phosphate buffer was 10 mM or less, almost all chlorogenic acids disappeared in a reaction time of 120 minutes. In addition, in order to obtain caffeic acid having a pH almost equal to the minimum phosphoric acid concentration of 50 mM in which the buffer effect is observed when the pH of the reaction solution is around 6 which is the optimum pH of the chlorogenase, the concentration of 10 mM should be optimal. Became clear.
In addition, when the reaction solution to which 10 mM and 25 mM phosphate buffer was added was added to black coffee so as to be diluted 10-fold, respectively, the 25 mM phosphate buffered coffee had a slimy and delicious taste peculiar to phosphate. However, the 10 mM phosphate buffered coffee did not feel the peculiar slime or savory taste of phosphate.

[実施例]
未焙煎コーヒー豆特有の青臭みや生っぽさを減少させるために、脱カフェイン処理したデカフェコーヒー豆（商品名、キーコーヒー社製）を３分間焙煎し、その焙煎豆をコーヒーミルを用いて粉砕する。その粉砕豆を、粉砕豆の２０倍量（質量）の６０℃の温水に浸し、温度を６０℃に保持しながら２０分間撹拌した。その後、市販のコーヒー用ペーパーフィルタを用いた濾過および遠心分離により粉砕豆とコーヒー抽出物を含んだコーヒー抽出液とを濾別した。得られたコーヒー抽出液のクロロゲン酸類濃度を、逆相ＨＰＬＣを用いて測定した。その結果から、クロロゲン酸類の含有量を算出した後、クロロゲン酸類の質量を１とした際、１．４倍に相当する質量のクロロゲナーゼをコーヒー抽出液に添加し、また最終濃度が１０ｍＭとなるようにリン酸バッファーを添加した。次いで、コーヒー抽出液を５５℃に加熱し、９０分間撹拌しながら加水分解処理を行った。９０分後、９０℃の湯煎で５分間加熱し、クロロゲナーゼを失活させた。その後、エバポレーターを用いて５倍程度に濃縮し、１２１℃１５分でオートクレーブ殺菌を行い、血液凝固遅延剤とした。この血液凝固遅延剤は、コーヒー飲料に添加するまで冷蔵保管された。 [Example]
Decaffeinated decaffeinated coffee beans (trade name, manufactured by Key Coffee) are roasted for 3 minutes to reduce the peculiar smell and greenness of unroasted coffee beans, and the roasted beans are coffee milled. Grind using The ground beans were soaked in 60 ° C. warm water of 20 times the amount (mass) of the ground beans and stirred for 20 minutes while maintaining the temperature at 60 ° C. Thereafter, the ground bean and the coffee extract containing the coffee extract were separated by filtration using a commercially available paper filter for coffee and centrifugation. The concentration of chlorogenic acids in the obtained coffee extract was measured using reverse phase HPLC. From the results, after calculating the content of chlorogenic acids, when the mass of chlorogenic acids is 1, the amount of chlorogenase equivalent to 1.4 times is added to the coffee extract, and the final concentration is 10 mM. Phosphate buffer was added as follows. Next, the coffee extract was heated to 55 ° C. and hydrolyzed with stirring for 90 minutes. After 90 minutes, the mixture was heated in a 90 ° C. water bath for 5 minutes to deactivate the chlorinease. Then, it concentrated to about 5 times using the evaporator, and autoclaving was performed at 121 degreeC for 15 minutes, and it was set as the blood coagulation retarder. The blood clotting retarder was stored refrigerated until added to the coffee beverage.

[製造例１：缶コーヒー飲料の製造]
市販のコーヒー粉末から、粉末の８倍量（質量）の９０℃の温水でコーヒーを抽出し、抽出率が２５％程度のコーヒー抽出液を得た。そのコーヒー抽出液を、コーヒー豆換算で５６ｇ／１ｋｇとなるように蒸留水等を用いて調整し、ｐＨ調整剤、フレーバーを添加してコーヒー調合液を得た。このコーヒー調合液のコーヒー酸濃度、クロロゲン酸類濃度およびカフェイン濃度を、逆相ＨＰＬＣを用いて測定し、その結果を表２に示した。さらに、得られた調合液１９０ｇを、缶に充填し、１２１℃１５分間オートクレーブ殺菌を行い、缶コーヒー飲料とした。 [Production Example 1: Production of canned coffee beverage]
Coffee was extracted from commercial coffee powder with 90 times hot water of 8 times the amount (mass) of the powder to obtain a coffee extract with an extraction rate of about 25%. The coffee extract was adjusted with distilled water or the like so as to be 56 g / 1 kg in terms of coffee beans, and a pH adjusting agent and flavor were added to obtain a coffee blend. The coffee acid concentration, chlorogenic acid concentration and caffeine concentration of this coffee blend were measured using reverse phase HPLC, and the results are shown in Table 2. Further, 190 g of the obtained preparation liquid was filled into a can, and autoclaved at 121 ° C. for 15 minutes to obtain a can coffee beverage.

[製造例２、３：血液凝固遅延剤入り缶コーヒー飲料の製造]
製造例１で得られたコーヒー抽出液のコーヒー酸濃度を、逆相ＨＰＬＣを用いて測定し、コーヒー酸濃度で３０ｐｐｍ、６０ｐｐｍ分追加するように実施例で得た血液凝固遅延剤を添加した。なお、実施例で得た血液凝固遅延剤のコーヒー酸濃度は、３７５０ｐｐｍであった。これらのコーヒー酸濃度、クロロゲン酸類濃度およびカフェイン濃度を、逆相ＨＰＬＣを用いて測定し、その結果を表２に示した。その後、製造例１と同様に缶に充填し、殺菌処理を行い、血液凝固遅延剤入り缶コーヒー飲料を得た。 [Production Examples 2, 3: Production of canned coffee drink with blood coagulation retarder]
The caffeic acid concentration of the coffee extract obtained in Production Example 1 was measured using reverse phase HPLC, and the blood coagulation retarding agent obtained in the example was added so that 30 ppm and 60 ppm of caffeic acid concentration were added. The caffeic acid concentration of the blood coagulation retarder obtained in the example was 3750 ppm. These caffeic acid concentration, chlorogenic acid concentration and caffeine concentration were measured using reverse phase HPLC, and the results are shown in Table 2. Thereafter, the can was filled in the same manner as in Production Example 1, sterilized, and a can coffee beverage with a blood coagulation retarder was obtained.

（血液凝固遅延効果の確認試験）
製造例１（比較例）および製造例２、３（実施例）で作製した缶コーヒー飲料を、二重盲験試験に準じて１群６名で合計１８名の被験者に、１日１本ずつ連続８日間飲用してもらった。特に飲用開始初日および最終日（８日目）には、缶コーヒー飲料の飲用前後での血液を採取し、プロトロンビン時間（血液凝固時間）を測定した。有意差検定はｔ検定で行った。その結果を表３に示す。 (Confirmation test of blood coagulation delay effect)
The canned coffee beverages prepared in Production Example 1 (Comparative Example) and Production Examples 2 and 3 (Examples) were fed once a day to a total of 18 subjects with 6 people per group according to the double blind test. He was drunk for 8 consecutive days. In particular, on the first and last days of drinking (8th day), blood was collected before and after drinking the canned coffee drink, and the prothrombin time (blood clotting time) was measured. Significance test was performed by t test. The results are shown in Table 3.

表３から、製造例２、３で作製した血液凝固遅延剤入り缶コーヒー飲料を飲んだ群では、飲用後８日目の缶コーヒー飲料の飲用前後でプロトロンビン時間が優位に上昇していることが明らかとなった。
なお、製造例２、３で作製した血液凝固遅延剤入り缶コーヒー飲料を飲んだ群では、血栓溶解活性を上昇させるといった効果はみられなかった。

From Table 3, in the group that drank the canned coffee drink containing the blood coagulation retarder prepared in Production Examples 2 and 3, the prothrombin time was significantly increased before and after drinking the canned coffee drink on the 8th day after drinking. It became clear.
In addition, in the group which drank the canned coffee drink with the blood coagulation retarder produced by manufacture example 2, 3, the effect of raising thrombolytic activity was not seen.

本発明におけるコーヒー豆の焙煎時間に対するクロロゲン酸類の変化量を示すグラフである。It is a graph which shows the variation | change_quantity of chlorogenic acid with respect to the roasting time of the coffee bean in this invention.

Claims

クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出した抽出物を、クロロゲナーゼにより加水分解処理して得られる酵素処理抽出物を主成分とし、さらに失活処理されたクロロゲナーゼを含有する血液凝固遅延剤であって、
前記クロロゲン酸類を含有する植物原料が、コーヒー豆、サツマイモの葉、ゴボウの葉、ヨモギ、人参、タマネギ、大根、レタス、カリフラワー、セロリー、トマト、ブルーベリー、およびグレープフルーツからなる群から選択される少なくとも一つであることを特徴とする血液凝固遅延剤。 It is a blood coagulation retarder containing an enzyme-treated extract obtained by hydrolyzing an extract extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids with a chlorogenase, and further containing a deactivated chlorogenase. And
The plant material containing the chlorogenic acids is at least one selected from the group consisting of coffee beans, sweet potato leaves, burdock leaves, mugwort, carrots, onions, radishes, lettuce, cauliflower, celery, tomatoes, blueberries, and grapefruits. blood retarders, characterized in that it is One.

前記酵素処理抽出物が、コーヒー酸を主成分とすることを特徴とする請求項１に記載の血液凝固遅延剤。 The blood coagulation retarder according to claim 1, wherein the enzyme-treated extract contains caffeic acid as a main component.

前記酵素処理抽出物に含まれるコーヒー酸の１回当たりの摂取量を６ｍｇ以上とすることを特徴とする請求項１または請求項２に記載の血液凝固遅延剤。 The blood coagulation retarding agent according to claim 1 or 2, wherein the amount of caffeic acid contained in the enzyme-treated extract per intake is 6 mg or more.

クロロゲン酸類を含有する植物原料から抽出したクロロゲン酸類を含む抽出物を、クロロゲナーゼを用いて加水分解処理することにより得られる血液凝固遅延剤の製造方法であって、
前記植物原料が脱カフェイン処理したコーヒー豆であることを特徴とする血液凝固遅延剤の製造方法。 A method for producing a blood coagulation retarder obtained by hydrolyzing an extract containing chlorogenic acids extracted from a plant raw material containing chlorogenic acids using chlorogenase,
A method for producing a blood coagulation retardant, characterized in that the plant material is decaffeinated coffee beans.

前記植物原料が、脱カフェイン処理したコーヒー豆を１〜６分間の範囲内で焙煎したものであることを特徴とする請求項４に記載の血液凝固遅延剤の製造方法。 The method for producing a blood coagulation retarding agent according to claim 4, wherein the plant raw material is obtained by roasting decaffeinated coffee beans within a range of 1 to 6 minutes.

前記加水分解処理で使用するバッファーとしてリン酸バッファーを用い、前記リン酸バッファーの濃度が１０〜２５ｍＭの範囲内であることを特徴とする請求項４または請求項５に記載の血液凝固遅延剤の製造方法。 The blood coagulation retarding agent according to claim 4 or 5, wherein a phosphate buffer is used as a buffer used in the hydrolysis treatment, and the concentration of the phosphate buffer is in the range of 10 to 25 mM. Manufacturing method.