JP4860693B2 - 並行かつ同時分離を伴う電気泳動方法 - Google Patents
並行かつ同時分離を伴う電気泳動方法 Download PDFInfo
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Description
(a)分離チャンバを提供するステップであって、分離空間を画定する、第1の端壁、第2の端壁、第1の側壁、第2の側壁、および2枚のプレートと、第1の側壁および第2の側壁にそれぞれ近接して分離チャンバの中に配置された単一のアノードおよび単一のカソードと、第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの試料入口と、第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの分離媒体入口と、第1の端壁に近接しかつアノードに近接する第1のアノード安定化媒体入口と、第1の端壁に近接しかつカソードに近接する第1のカソード安定化媒体入口と、第1の端壁に近接し、かつ第1のアノード安定化媒体入口と第1のカソード安定化媒体入口との間にさらに配置された、1つまたは複数の追加的なアノード安定化媒体入口および1つまたは複数の追加的なカソード安定化媒体入口と、を備える分離チャンバを提供するステップと、
(b)少なくとも2つの分離媒体入口を介して、少なくとも1つの分離媒体を分離チャンバの中へ導入するステップと、
(c)少なくとも2つの試料入口を介して、1つまたは複数の分離されるべき試料を分離チャンバの中へ導入するステップと、
(d)第1のおよび追加的なアノード安定化媒体入口を介して、アノード安定化媒体を分離チャンバの中へ導入するステップ、ならびに第1のおよび追加的なカソード安定化媒体入口を介して、カソード安定化媒体を分離チャンバの中へ導入するステップと、を含み、分離部分空間を画定する1つまたは複数の境界が、追加的なアノード安定化媒体入口および追加的なカソード安定化媒体入口を通過する、アノードおよびカソード安定化媒体の隣接する流れによって設けられる、方法を提供する。
(a)分離チャンバを提供するステップであって、分離空間を画定する、第1の端壁、第2の端壁、第1の側壁、第2の側壁、および2枚のプレートと、第1の側壁および第2の側壁にそれぞれ近接して分離チャンバの中に配置されたアノードおよびカソードと、第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの試料入口と、第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの分離媒体入口と、第1の端壁に近接しかつアノードに近接する第1のアノード安定化媒体入口と、第1の端壁に近接しかつカソードに近接する第1のカソード安定化媒体入口と、第1の端壁に近接し、かつ第1のアノード安定化媒体入口と第1のカソード安定化媒体入口との間にさらに配置された、1つまたは複数の追加的なアノード安定化媒体入口および1つまたは複数の追加的なカソード安定化媒体入口と、を備える分離チャンバを提供するステップと、
(b)少なくとも2つの分離媒体入口を介して、少なくとも1つの分離媒体を分離チャンバの中へ導入するステップと、
(c)少なくとも2つの試料入口を介して、1つまたは複数の分離されるべき試料を分離チャンバの中へ導入するステップと、
(d)第1のおよび追加的なアノード安定化媒体入口を介して、アノード安定化媒体を分離チャンバの中へ導入するステップ、ならびに第1のおよび追加的なカソード安定化媒体入口を介して、カソード安定化媒体を分離チャンバの中へ導入するステップと、を含み、分離部分空間を画定する1つまたは複数の境界が、追加的なアノード安定化媒体入口および追加的なカソード安定化媒体入口を通過する、アノードおよびカソード安定化媒体の隣接する流れによって設けられ、アノード安定化媒体は一塩基酸を含み、そのアニオンが約40m2/V/秒以下の電気泳動移動度を有し、カソード安定化媒体は一塩基性塩基を含有し、そのカチオンが約40m2/V/秒以下の電気泳動移動度を有する、方法を提供する。
具体的には、本願発明は、分離チャンバ(100)内部の多連分離部分空間(136a〜136c)を使用する、並行かつ同時の多連過程を伴う電気泳動方法が提供される。1つの実施形態では、チャンバ(100)は、このチャンバの対向する側壁に平行に配置された単一のアノード(120)および単一のカソード(122)を含む。チャンバ中の分離空間は、境界(138)で3つの個々の分離部分空間(136a〜136c)に再分割される。それぞれの部分空間には、試料入口(140a〜140c)、分離媒体入口(126a〜126c)、アノード安定化媒体入口(128a〜128b)、およびカソード安定化媒体入口(130a〜130c)が設けられる。分離された画分の出口(132a〜132c)も設けられる。隣接する部分空間の間の境界(138)は、例えば、入口(130a)および(128b)ならびに入口(130b)および(128c)からの、カソード安定化媒体およびアノード安定化媒体の隣接する流れによって画定される。
u=s/H×t
上式で、sは移動距離(m)を表し、Hは電界強さ(V/m)を表し、さらにtは時間(秒)を表す。
Claims (27)
- (a)分離チャンバを提供するステップであって、
分離空間を画定する、第1の端壁、第2の端壁、第1の側壁、第2の側壁、および2枚のプレートと、
第1の側壁および第2の側壁にそれぞれ近接して前記分離チャンバの中に配置された単一のアノードおよび単一のカソードと、
前記第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの試料入口と、
前記第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの分離媒体入口と、
前記第1の端壁に近接しかつ前記アノードに近接する第1のアノード安定化媒体入口と、
前記第1の端壁に近接しかつ前記カソードに近接する第1のカソード安定化媒体入口と、
前記第1の端壁に近接し、かつ前記第1のアノード安定化媒体入口と前記第1のカソード安定化媒体入口との間にさらに配置された、1つまたは複数のアノード安定化媒体入口および1つまたは複数のカソード安定化媒体入口と
を具える分離チャンバを提供するステップと、
(b)前記少なくとも2つの分離媒体入口を介して、少なくとも1つの分離媒体を前記分離チャンバの中へ導入するステップと、
(c)前記少なくとも2つの試料入口を介して、1つまたは複数の分離されるべき試料を前記分離チャンバの中へ導入するステップと、
(d)前記アノードおよびカソードによって電界を生成するステップと、
(e)前記第1のおよび前記アノード安定化媒体入口を介して、アノード安定化媒体を前記分離チャンバの中へ導入するステップ、ならびに前記第1のおよび前記カソード安定化媒体入口を介して、カソード安定化媒体を前記分離チャンバの中へ導入するステップと
を具え、分離部分空間を画定する1つまたは複数の境界が、前記1つまたは複数のアノード安定化媒体入口および前記1つまたは複数のカソード安定化媒体入口を通過する、アノードおよびカソード安定化媒体の隣接する流れによって設けられることを特徴とする電気泳動の方法。 - 前記アノード安定化媒体は一塩基酸を含み、そのアニオンが40×10-9m2/V/秒以下の電気泳動移動度を有し、前記カソード安定化媒体は一塩基性塩基を含有し、そのカチオンが40×10-9m2/V/秒以下の電気泳動移動度を有することを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記一塩基酸のアニオンの前記電気泳動移動度は、25×10-9m2/V/秒から30×10-9m2/V/秒に亘り、前記一塩基性塩基のカチオンの前記電気泳動移動度は25×10-9m2/V/秒から30×10-9m2/V/秒に亘ることを特徴とする請求項2記載の方法。
- 前記アノード安定化媒体は、前記分離媒体の最低pH構成成分のpHよりも小さい0.5から3pHユニットのpHを有し、前記カソード安定化媒体は、前記分離媒体の最高pH構成成分のpHよりも高い0.5から3pHユニットのpHを有することを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記アノード安定化媒体は、グルコン酸、グルクロン酸、アセチルサリチル酸、2−(N−モルホリノ)エタンスルホン酸、および両性イオン性緩衝液から成る群から選択された酸を含むことを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記カソード安定化媒体は、N−メチル−D−グルコサミン、トリ−イソプロパノールアミン、および2−[ビス(2−ヒドロキシエチル)アミノ]−2−(ヒドロキシメチル)プロパン−1,3−ジオールから成る群から選択された塩基を含むことを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記分離チャンバは、s個の分離部分空間と、s−1対のアノード安定化媒体およびカソード安定化媒体入口と、少なくともs個の試料入口と、少なくともs個の分離媒体入口とを具え、sは2から7であることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記分離チャンバの前記第2の側壁に近接して配置された1つまたは複数の向流入口から、向流媒体をそれぞれの分離部分空間の中へ導入するステップをさらに具えたことを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記第1および第2の端壁と、前記第1および第2の側壁と、前記2枚のプレートとが、長方形の分離チャンバを画定することを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記アノードおよびカソードは、前記第1および第2の側壁に実質的に平行に配置されることを特徴とする請求項9記載の方法。
- 前記プレートは、0.1mmから1.5mmまでの距離を空けて配置されることを特徴とする請求項9記載の方法。
- 前記分離チャンバは、前記第2の端壁に近接して配置された複数の回収出口をさらに具えたことを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記1つまたは複数の試料は、等電集束法によって分離されることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記1つまたは複数の試料は、等速回転電気泳動によって分離されることを特徴とする請求項1記載の方法。
- (a)分離チャンバを提供するステップであって、
分離空間を画定する、第1の端壁、第2の端壁、第1の側壁、第2の側壁、および2枚のプレートと、
第1の側壁および第2の側壁にそれぞれ近接して前記分離チャンバの中に配置されたアノードおよびカソードと、
前記第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの試料入口と、
前記第1の端壁に近接して配置された少なくとも2つの分離媒体入口と、
前記第1の端壁に近接しかつ前記アノードに近接する第1のアノード安定化媒体入口と、
前記第1の端壁に近接しかつ前記カソードに近接する第1のカソード安定化媒体入口と、
前記第1の端壁に近接し、かつ前記第1のアノード安定化媒体入口と前記第1のカソード安定化媒体入口との間にさらに配置された、1つまたは複数のアノード安定化媒体入口および1つまたは複数のカソード安定化媒体入口と
を具えた分離チャンバを提供するステップと、
(b)前記少なくとも2つの分離媒体入口を介して、少なくとも1つの分離媒体を前記分離チャンバの中へ導入するステップと、
(c)前記少なくとも2つの試料入口を介して、1つまたは複数の分離されるべき試料を前記分離チャンバの中へ導入するステップと、
(d)前記アノードおよびカソードによって電界を生成するステップと、
(e)前記第1のおよび前記アノード安定化媒体入口を介して、アノード安定化媒体を前記分離チャンバの中へ導入するステップ、ならびに前記第1のおよび前記カソード安定化媒体入口を介して、カソード安定化媒体を前記分離チャンバの中へ導入するステップと
を具え、分離部分空間を画定する1つまたは複数の境界が、前記1つまたは複数のアノード安定化媒体入口および前記1つまたは複数のカソード安定化媒体入口を通過する、アノードおよびカソード安定化媒体の隣接する流れによって設けられ、前記アノード安定化媒体は一塩基酸を含み、そのアニオンが40×10 -9 m2/V/秒以下の電気泳動移動度を有し、前記カソード安定化媒体は一塩基性塩基を含み、そのカチオンが40×10 -9 m2/V/秒以下の電気泳動移動度を有することを特徴とする電気泳動の方法。 - 前記一塩基酸のアニオンの前記電気泳動移動度は、25×10-9m2/V/秒から30×10-9m2/V/秒に亘り、前記一塩基性塩基のカチオンの前記電気泳動移動度は25×10-9m2/V/秒から30×10-9m2/V/秒に亘ることを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記アノード安定化媒体は、前記分離媒体の最低pH構成成分のpHよりも小さい0.5から3pHユニットのpHを有し、前記カソード安定化媒体は、前記分離媒体の最高pH構成成分のpHよりも高い0.5から3pHユニットのpHを有することを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記アノード安定化媒体は、グルコン酸、グルクロン酸、アセチルサリチル酸、2−(N−モルホリノ)エタンスルホン酸、および両性イオン性緩衝液から成る群から選択された酸を含むことを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記カソード安定化媒体は、N−メチル−D−グルコサミン、トリ−イソプロパノールアミン、および2−[ビス(2−ヒドロキシエチル)アミノ]−2−(ヒドロキシメチル)プロパン−1,3−ジオールから成る群から選択された塩基を含むことを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記分離チャンバは、s個の分離部分空間と、s−1対のアノード安定化媒体およびカソード安定化媒体入口と、少なくともs個の試料入口と、少なくともs個の分離媒体入口とを備え、sは2から7であることを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記分離チャンバの前記第2の側壁に近接して配置された1つまたは複数の向流入口から、向流媒体をそれぞれの分離部分空間の中へ導入するステップをさらに具えたことを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記第1および第2の端壁と、前記第1および第2の側壁と、前記2枚のプレートとが、長方形の分離チャンバを画定することを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記アノードおよびカソードは、前記第1および第2の側壁に実質的に平行に配置されることを特徴とする請求項22記載の方法。
- 前記プレートは、0.1mmから1.5mmまでの距離を空けて配置されることを特徴とする請求項22記載の方法。
- 前記分離チャンバは、前記第2の端壁に近接して配置された複数の回収出口をさらに具えたことを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記1つまたは複数の試料は、等電集束法によって分離されることを特徴とする請求項15記載の方法。
- 前記1つまたは複数の試料は、等速回転電気泳動によって分離されることを特徴とする請求項15記載の方法。
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