JP4564664B2 - 保持された組織検体の光学的薄断片を形成するカセット - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は組織検体を保持するカセットに関し、特にモース（Ｍｏｈｓ）顕微鏡外科手術向けに患者から摘出した組織検体を共焦点顕微鏡、その他光学的画像化顕微鏡により光学的に薄断片形成可能な位置に保持するためのカセットに関する。本発明はさらに共焦点顕微鏡、その他光学的画像化顕微鏡による鏡検用の組織検体を調整するためのカセットを使用する方法、およびカセット内に保持された組織検体を光学的に薄断片作成するシステムに関する。
【０００２】
【発明の背景】
Ｍｏｈｓの顕微鏡外科手術では腫瘍、特に頭部頚部癌の皮膚上における腺癌を有する組織が顕微鏡の管理下において患者から摘出される。摘出された組織検体は、生検と呼ばれることが多く、水平に薄断片形成されて組織検体が提供され、これがスライド上で組織学的に調製される。このスライドは鏡検されて、摘出された組織検体中全体に腫瘍が含まれるか否かを調べられる。摘出された組織検体の縁に腫瘍が見出されなければ、腫瘍なしと決定される。摘出された組織中全体に腫瘍が発見されない場合は、患者からさらに別の組織検体が摘出され、この工程は、患者から腫瘍が完全に摘出されたことが明らかとなるまで反復される。Ｍｏｈｓ外科手術は「Ｍｏｈｓの外科手術・基礎と技術（ＭＯＨＳ ＳＵＲＧＥＲＹ ＦＵＮＤＡＭＥＮＴＡＬＳ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＩＱＵＥＳ）」（Ｋｅｎｎｅｔｈ Ｇ．ＧＲＯＳＳ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ ａｌ．ｅｄｓ，１９９９）と題した書物に記載されている。
【０００３】
Ｍｏｈｓ外科手術では、各組織検体を調製するために、ミクロトームによって多数の切片が手で作成されるが、各切片が平面的をなし互いに並行になっている。組織検体は、手による取り扱いがしやすく、ミクロトームで薄断片を形成できるようにまず凍結される。しかし、各組織検体から多数の切片が作られ、スライド上へ組織学的に調製される必要があるために、この作業工程は冗長となり、多大な時間を要する。
【０００４】
米国特許第４，７５２，３４７号はＭｏｈｓ外科手術用に組織検体の薄断片を形成するための方法と、組織調製用の装置を提供する。前記特許は、摘出された組織検体をプラットホーム上に置き、組織検体の上に可塑性のあるプラスチック膜を適用して、膜と組織検体との間にある領域を真空化する。これによってプラットホーム上へ膜をリトラクトし、組織検体の縁を、プラットホームに並行な平面的の位置へ押し付ける。膜圧のかかった状態で、前記組織検体は膜を介してオペレータの手によって所望する位置を得られるまで移動される。このようにして、組織検体の縁は前記縁が下向きになるまで平らに置かれる。前記組織検体は凍結されてプラットホームから剥離され、ミクロトームにより薄断片形成される。前記組織検体の縁はミクロトームによって薄断片形成される時点で平面的の位置におかれ、Ｍｏｈｓ外科手術に好都合な縁を有する単一切片を作れるようになる。この工程は顕微鏡下においてスライドを検査するために好都合な切片を作るには適しているが、従来のミクロトームによる薄断片形やスライド調製を行わずに患者から摘出した組織検体を鏡検できる共焦点顕微鏡等の光学的画像化技術にとっては有用ではない。
【０００５】
共焦点顕微鏡は、自発的または外科手術によって露出した組織を光学的に切断して、組織検体の顕微鏡画像を提供する。共焦点顕微鏡の例には、ニュヨークのルシード社（Ｌｕｃｉｄ Ｉｎｃ．ｏｆ Ｈｅｎｒｉｅｔｔａ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）によって製造されたビバスコープ（ＶｉｖａｓＣｏｐｅ）がある。共焦点顕微鏡におけるその他の例には、米国特許第５，７８８，６３９号にて説明され、国際特許出願ＷＯ ９６／２１９３８にて公開されており、「実験皮膚科雑誌１９９５年６月号、第１０４巻第６号」（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，ｖｏｌｕｍｅ １０４，ＮＯ．６，Ｊｕｎｅ １９９５）に記載されたミリンドらの文献（Ｍｉｌｉｎｄ ｒａｊａｄｈｙａｋｓｈａ ｅｔ ａｌ）「ヒトの皮膚を対象とした生体内での共焦点レーザー顕微鏡：メラニンは強いコントラストを与える」、および、ミリンドならびにジェームズ（Ｍｉｌｉｎｄ Ｒａｊａｄｈｙａｋｓｈａ ａｎｄ Ｊａｍｅｓ Ｍ．Ｚａｖｉｓｌａｎ）による「共焦点レーザ顕微鏡は生体内で組織を画像化する」（レーザー・フォーカス・ワールド、１９９７年２月号、１１９−１２７ページ）（Ｌａｓｅｒ Ｆｏｃｕｓ Ｗｏｒｌｄ，１９９７，ｐａｇｅｓ１１９−１２７）に示す文献に記述されている。さらに、顕微鏡による組織の光学的切断画像は光学コヒーレンストモグラフィまたは干渉計により、シュミットらの「低コヒーレント干渉計による疾病組織の光学的定性」（Ｓｃｈｍｉｔ ｅｔ ａｌ．，”Ｏｐｔｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｓｅａｓｅ ｔｉｓｓｕｅｓ ｕｓｉｎｇ ｌｏｗ−ｃｏｈｅｒｅｎｃｅｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ，Ｐｒｏｃ．ｏｆ ＳＰＩＥ）、または米国特許第５，０３４，６１３号に記述されるように提供される。
【０００６】
Ｍｏｈｓ外科手術用に作成した組織検体の光学的切断において問題となるのは、前記組織検体が腫瘍全体を含む場合、組織検体の縁を光学的に画像化しようとしたときに、組織検体の厚さが概して２−３ｍｍのように厚くなりすぎることにある。代表的には、共焦点顕微鏡の場合、組織検体が１００−２００ミクロンの範囲で適正な画像を提供するよう制限されている。組織検体の縁を光学的に画像化しようとする場合、前記組織検体の縁は、光学的に透明な表面を介して、前記組織検体が光学的に切断可能な面に対して平面的の位置にくるようにして、適正な画像を得ることが望ましい。
【０００７】
さらに、共焦点顕微鏡等の光学的画像化システムは、一般的に、前記組織検体の付近に液体の浸潤性対物レンズの使用を必要とする。これにより、対物レンズに適した光学係数を有する液体で組織検体を湿らせるか、または液体中に浸す必要があり、さもなくば前記システムの画像化性能が極度に劣化する。このため、適正な位置においた組織検体に対して液体を浸せるようにするか、または前記組織の画像化特性を変化させる目的で、別の液体と交換できるよう、液体の交換が可能であることが好ましい。
【０００８】
米国特許第４，７５２，３４７号は、プラットホームに対して真空に保たれたプラスチック膜下のプラットホームに対して前記組織検体の縁が平面的をなすよう記述しており、本特許において記述される前記組織検体は、光学的に切断されるよりはむしろ機械的に切断される。さらには、機械的切断に先だって、真空状態では組織検体と液体が共存できないため、かかる組織検体は光学的画像技術には適合しない。たとえば、真空状態での液体は、組織検体から吸引され、減圧下での気体はあらゆる気体に溶解して気泡を形成し、このような気体は沸騰または蒸発する。
【０００９】
さらに、Ｍｏｈｓ外科手術によって提供された組織検体由来の従来型スライドは、規制仕様に従って適正な最小限の保持時間を達成しなくてはならないか、または法律的目的に従ってスライドをさらに詳細に解析する必要が生じる。このためにはスライドを何年間にもわたって保存する必要があり、組織検体を分断したものが大量になる場合には厄介となる。さらには、各スライドには同定システムに従って標識をつけなくてはならず、必要とされれば移動可能でなくてはならない。
【００１０】
透析分野においては、米国特許第５，５０３，７４１号は、ガスケットの両面に固定した平行な二つの透析膜の間に、空虚な閉じられたチャンバを有する穴を記述している。針はガスケットから挿入され、試料はチャンバから供給または廃棄される。この穴は透析すなわちチャンバ内部の試料と外部溶液との間で分子交換を行う場合に許可されている。このような穴は透析に限定されており、光学的切断に際して平面的方向に組織検体を保持するためのメカニズムは提供されていない。
【００１１】
【発明の要約】
以上のように、患者から外科手術により摘出された試料を保持するためのカセットを提供し、共焦点顕微鏡またはその他光学的画像化顕微鏡によって試料を光学的に検査することが本発明の主要な目的である。
本発明における他の特徴は、光学的に透明な表面に対して組織検体の縁を配設し、それを平面状の配列状態に維持し得るような凹陥部に組織検体を保持するカセットを提供することである。
本発明におけるさらに他の特徴は、凹陥部内に組織検体を保持して、組織検体が保持されている前記凹陥部内に液体を注入しまたは前記凹陥部内から前記液体を除去することが可能なカセットを提供することにある。
【００１２】
本発明におけるさらに他の特徴は、共焦点顕微鏡その他光学的画像化顕微鏡により組織検体を光学的に切断することによって、モース外科手術により組織検体を保持できるようなカセットを提供することにある。
本発明におけるさらに他の特徴は、物理的に薄断片が作成され、多数のスライド上へ準備されたモース外科手術の試料を扱った先行技術よりも簡単に、組織検体を保存し識別するために利用できるような組織用カセットを提供することにある。
本発明におけるさらに他の特徴は、カセットを使用して共焦点顕微鏡その他光学的画像化顕微鏡により組織検体を鏡検するための方法を提供することにある。
本発明におけるさらに他の特徴は、カセットの上部および低部を介して試料全体を見渡せるような組織検体用保持カセットを提供することにある。
【００１３】
要するに、本発明は光学的に透明な固い窓を有し、その上部に組織検体を設置できる基底メンバと、窓を含む基底メンバ上の適正な部分の上に位置するプラスチック製の柔軟な膜と、内部に穴を有する上膜と、基底メンバ上に位置して組織検体の縁と膜との間の密閉状された凹陥部とを具体化している。凹陥部内の組織検体を使い、組織検体の縁部は上部メンバおよび膜の穴を介して配置させ、窓に対して組織検体が平面状を示すようにさせる。この縁部は膜との結合部位または組織検体周囲の複数の結合部において保持される。この組織検体は上部メンバの穴を介して目で見ることができ、基底メンバの窓を介して光学的画像化顕微鏡により画像化可能である。
【００１４】
この基底メンバは少なくとも１個の注入口を有しており、当該注入口を介してシリンジ針を使用して液体が凹陥部内部に注入され又、当該カセットの当該凹陥部内部の組織検体から当該液体を除去できる。このような液体があるおかげで、光学的画像化顕微鏡により画像化を実施することができ、あるいは目的を達成するために試料を保存するべく設置することができる。組織検体を識別する識別子を有するラベルをカセットに貼り付けることができる。
【００１５】
組織検体を含む凹陥部を形成させるためには、上部メンバの下部表面に接着性の両面テープを有し、基底メンバ上に上部メンバをおくとき、上部メンバと下部メンバを接着させる。他の実施形態において、基底メンバはその末端から上部メンバに受け取られる部分まで拡張する壁を有する。上部メンバは環状の***部を有し、基底メンバの壁内部に沿った環状のグローブに受け取られる外縁部に沿って広がっており、このおかげで上部メンバと下部メンバの間を封じ込めるようになっている。
【００１６】
カセットが閉じているとき、すなわち膜と窓との間の凹陥部に組織検体が閉じ込められているときは、組織検体の上部にある基底メンバに対して膜は上部メンバによってきつく締められている。膜圧が組織検体を基底メンバの窓の位置まで押し付けている。組織検体の頭頂部はカセットを閉じる前に切断して、組織検体が膜へ圧縮されているとき、組織検体の縁が窓の方へ移動できるようにしてある。医師または熟練した検査員等のユーザーは膜の応力下に第１プローブを使って組織検体の縁を窓と平面を成す様に設定し、２番目のプローブを使い、膜と窓を組織検体の縁部近くの数カ所で結合させることにより、平面的の位置におく。各ポイントで結合させるためには、第２プローブが窓近くの膜を押し、熱を加えて窓と膜を接着させる。このようにして、組織検体の縁部はカセットの窓により、光学的に透過可能な表面に対して平面的となる位置に向けられる。注入口を介して溶液を注入または除去することが可能であるが、これは、前記の複数の結合部は、膜と窓との間の凹陥部内に於ける前記組織検体を完全には密閉していないからである。結合を活性化させるその他の手段は超音波、コンタクトの利用、ＵＶ治療、接着等に使われている。このような接着剤は膜の下表面または膜に面する窓の上表面の両方またはいずれか一方に適用され、カセットに組織検体を装着する前に適用されて第２プローブが接着性結合することによって膜と窓が接触できるようにしている。
【００１７】
適正な方向を向いた組織検体の入ったカセットは、カセット中に含まれる組織検体の切片を顕微鏡的に画像化する共焦点画像化システムの一部を構成している。このシステムには、共焦点画像化ヘッドと、カセットを支えて共焦点画像化ヘッドの対物レンズに窓をあつらえるステージと、カセットの上部メンバを介して組織検体のイメージを捉えることのできるカメラとを含む。制御システムは画面につながり、共焦点画像化ヘッドとカメラのおかげで画面上に共焦点顕微鏡性画像により創り出された組織検体の顕微鏡的画像と、カメラに捉えられた巨視的画像の両方を画像化できる。カセット中で組織検体の鏡検を実施中は、カメラから得た画像を使って組織検体の各々に対応する切片の顕微鏡画像の位置を同定することができる。
【００１８】
本発明はさらに、共焦点顕微鏡その他光学的画像化顕微鏡による組織検体の鏡検に向けた組織検体の調製用カセットを使用する方法を具体化している。この方法には、基底メンバ上の光学的に透明な固い窓に組織検体をおくためのステップと、窓を含む基底メンバの適正な箇所に少なくとも光学的に透明かつ柔軟な膜をおくステップと、窓に対して平面的の向きに組織検体の縁をおき、膜と窓の間の凹陥部をつくって基底メンバに膜を閉じ込めるステップと、複数の箇所で窓に膜を結合させることによって窓に対して組織検体の縁がくるように固定するステップとを含む。
【００１９】
本発明における特徴と利点は、図面を伴い以下の説明を読むことによってさらに明らかとなる。
図１−３によれば、本発明におけるカセット１０は基底メンバ１２と上部メンバ１４とを有することが示されている。基底メンバ１２は穴１８と、穴１８に位置する光学的に透明な窓１６とを有する。上部メンバ１４は基底メンバ１２の穴１８よりも大きいことが好ましい穴２０を有する。基底メンバ１２および上部メンバ１４はヒンジ２４においてヒンジしており、これにより、図１に示すようにカセット１０を開いた状態にすることができ、図２に示す様に閉じた状態にすることができ、ここでは上部メンバ１４が基底メンバ１２を覆っている。好ましくは基底メンバ１２と上部メンバ１４はヒンジ２４によって互いに接着しているか、そうでない場合は、カセット１０が開いた状態のときに離れるかまたはくっついていない状態になる。
【００２０】
図３に示すように、基底メンバ１２の底表面１２ａにおいて、基底メンバは穴１８とつながった環状の棚２２を有する。窓１６は棚２２の中にあり、基底メンバの底部表面１２ａが窓１６の下部表面１６ａに対して平面的となるようにしている。窓１６は棚２２の上にグルー等の接着剤によって保持されているか、または基底メンバ１２により溶融して挿入されている。そうでない場合は、窓１６が棚２２のない穴１８の下方にある底部表面１２ａにくっついており、図４に示すように、窓１６を遮る底部表面１２ａの一部に沿って接着剤またはグルーによりくっついている。窓１６は薄ガラスまたはゼオネックスプラスチックまたはその他光学的に相同な材料を使い、光学的画像が形成できるような不定形ポリオレフィンの薄断片シートから構成されている。好ましくは、窓１６は厚さ０．００６インチのゼオネックス・プラスチックであって、図３または図４の図のいずれかの構造において基底メンバ１２にしっかりと付着している。カセット１０への窓１６の接着は、本発明に限定されない。基底メンバ１２の一部を形成する光学的に透明な窓を接着するためのあらゆる手段が使われる。窓１６の厚さは窓を介して組織検体を画像化する光学的画像化システムの作業距離によって変化する。さらに図５へ別に示すように、基底メンバ１２自体は、穴１８を含まない厚さ１２ミリメートルのゼオネックス・プラスチック等の光学的に透明な材料から構成されている。図５の窓１６はカセット１０が閉じた状態で穴２０の下にある基底メンバ１２の一部を意味している。
【００２１】
柔軟なプラスチック膜すなわちフィルム２６（図１および図１Ａ）は穴２０を横断する上部メンバ１４の底部表面１４ａに付着している。膜２６は上部メンバ１４の外縁部１４ｂまでは伸展せず、これによって領域１４ｃを上部メンバの外縁部へ追いやっている。両面テープ等の接着剤は膜２６を領域１４ｃの外側にある底部表面１４ａに沿って上部メンバ１２へ付着させている。任意には、膜６は図１Ａに示すように上部メンバ１２から分離し、この状態で膜はヒンジ２４によって片側が支えられている。たとえば、膜２６は食品保存用に汎用されるプラスチックラップ等の薄いプラスチックであって、ユーザーまたはカメラを介して視界が得られるよう適当に透明でなければならない。
【００２２】
さらに基底メンバ１２は、図１Ｂに示すように注入口２８を含む。注入口２８は基底メンバ１２の一部を通って基底メンバ１２の下部表面１２ａから伸展する開口部２８ａと、開口部２８ａから基底メンバ１２の上部表面１２ｂへ伸展するチャネル２８ｂと、基底メンバの底部表面１２ａから開口部２８ａへ受け取られる自己封入式膜２８ｃとから定義される。自己封入式膜２８ｃとチャネル２８ｂとの間は、チャネル２８ｂと接続する経路２８ｄである。自己封入式膜２８ｃはゴム製であり、シリンジ針を抜いたあとにバイアルの汚染による損失のないようシリンジ針を挿入できるような医療用バイアルとともに使われるものと類似している。基底メンバ１２における注入口の反対側３３を図１Ｃに示す。注入口３３は基底メンバ１２を一部通る開口部３３ａと、開口部３３ａから穴１８の壁へ伸展するチャネル３３ｂと、開口部３３ａへ受け取られる自己封入式膜３３ｃと、自己封入式膜３３ｃとチャネル３３ｂとの間の経路３３ｄとを有する。後に示すように、カセット１０が閉じた状態のとき、シリンジ針は注入口２８または３３から自己封入式膜２８ｃまたは３３ｃを通って経路２８ｄまたは３３ｄへ続き、チャネル２８ｂまたは３３ｂを介して組織検体を含むカセット１０の凹陥部から液を注入または廃棄する。図１には１箇所のみ注入口が図解されているが、カセット１０には１Ｂおよび１Ｃのように注入口が多数設けられている。
【００２３】
基底メンバ１２と上部メンバ１４はプラスチック等の堅い材料から構成されている。ヒンジ２４はプラスチック製か、あるいはテープ等のように接着性材料のストリップによりメンバの両側１２および１４の片面に沿って提供される。メンバ１２および１４ならびにヒンジ２４は、単一の溶融片か、別個の溶融片である。カセット１０の向きは、組織検体の幅より大きい直径を有する窓１６が窓上に位置するようになっている。たとえば、窓１６に対してカセットは直径２ｃｍ、厚さ３ｍｍを有する穴１８を有し、カセットを閉じたときに長さ２．５ｃｍ、幅２．５ｃｍ、高さ７ｍｍになる。カセット１０はこれら方向よりも大きく、大きな組織検体に対応できるようになっている。穴１８および２０は円形をしているが、直方体またはその他の形状をしている。
【００２４】
開いた状態では、図１および図１Ａに示すように、開いたカセット１０において、外科手術により摘出された組織検体１３は窓１６上に位置する。代表的には、組織検体は折れ曲がったスロープ状の面をして楕円状である。窓１４上に組織検体１３をおき、上部メンバ１６が基底メンバをカバーするように基底メンバ１２を設置し、膜２６が基底メンバの穴１８の上にある基底メンバと上部メンバの間に位置するようにする。この閉じた状態でのカセット１０すなわち閉じたカセットは、たとえば図２の例に示すようになる。図１Ａの例では、矢印３０に示すように、図６がヒンジ２４で定義されるアークに沿って回転する上部メンバ１４と膜２６とを示す。
【００２５】
閉じた状態では、ヘルメット様の封入が上部メンバと基底メンバ１２との間に形成されて、封入凹陥部を定義するか、または組織検体１３を含む膜２６と窓２６との間にコンパートメント２７を定義する（図２および図７）。このシールは両面テープ等の接着剤により、連続的に持ちあがった***部を有する上部メンバ１４の領域１４ｃに沿って提供される（図１および図１Ａ）。このシールはまた、連続的に持ちあがる***部を有する上部メンバ１４の領域１４ｃによっても提供され、基底メンバ１２の頭頂部表面１２ｂにあって連続的グルーブに対応し、受け取られ、上部メンバのスナップにある持ち上げられた***部が基底メンバのグルーブに適合するようにする。その他の封入手段が、上部メンバおよび基底メンバの間のガスケット、ＵＶ線修復用接着剤、超音波融解、または加熱融解として代用として使われることがある。
【００２６】
閉じたカセット内では、組織検体１３が上部メンバ１４の穴２０を介して窓１４と膜２６の両方から見える。穴２０は穴１８よりも大きいことが好ましいが、カセットが組織検体１３ａの空隙または空間２９を共に閉じている場合、穴１８と同じかあるいは小さく（図２）、穴２０を介して組織検体の縁部１３ａの回りに見える。さらには、凹陥部２７に封入された組織検体１３と共に、注入口２８（注入口３３との両方またはいずれか一方）が共に凹陥部２７内に保持された組織検体から液体を注入したり廃棄したりできる。インジシアと記したラベル３１は組織１３を識別し、カセット１０の頭部表面３２に取り付けられるか、または図２と図１１に見られるように、共に認められる。このインジシアは組織検体を識別するバーコードまたはアルファベットと数字で示され、患者名、月日、担当医、または外科手術過程におけるその他の参考因子を意味する。
【００２７】
図７−図１１に示すように、閉じたカセット内における窓１６上の組織検体１３の方向について記述される。カセット１０を閉じる前であれば、穴１８の窓１６における上部表面１６ｂ上の組織検体１３は基底メンバ１２の頭部表面１２ｂを超えて伸展し、図７に示すように、膜２６が組織検体を圧縮する。組織検体１３の頭頂部はカセット１０を開く前に窓１６近くで組織検体１３の縁部１３ａを移動できるように記録される。組織検体の縁部が窓１６の表面に対して鋭角となるときは、組織検体の頭頂部表面に複数のスコアリング用切り込みを入れる必要がある。このような切り込みは組織検体内を伸展しない上、交差パターンを形成するか、または組織検体の歪を緩和させて組織検体の縁部が窓１６に対して平らとなるよう動かす。
【００２８】
図８に示すように、担当医または熟練技術者等のユーザはプローブ３４を使って窓１６の下部にある組織検体の縁部１３ａの１つを取り扱い、円部が窓１６の上部表面１６ｂに対して平面的構造をとるようにする。この位置に保たれた縁部１３ａをもって、図９に示すように、プローブ３４を動かすとき、好ましい位置に縁部１３ａを維持するよう１番目のプローブ付近に窓１６が到達するまで空隙２９の膜２６に対して別のプローブ３６を動かす。このときプローブ３６はユーザにより活性化されて、熱によって活性化手段３８を接着させ、膜２６と窓１６との間で１点または位置４０において結合（溶融または接合）させ、これによって窓１６に対して所望される平面的の位置となるよう組織検体１３の縁部１３ａを保持する。加熱による結合手段３８は低温でプラスチック膜の材質を溶融し凹陥部の統合性に影響を及ぼさずに窓と融合させる。超音波溶融等、その他の結合部活性化手段も使われる。必要ならば、空隙２９における異なる位置４０にて１個以上の結合を使って縁部１４ａを保持する。これを、縁部１３ａの全体が窓１６に対して平面的となるよう保持されるまで、膜２６と窓６とを多数箇所で結合させるまで反復する。図１０と図１１は、組織検体１３が所望の平面的方向を保持するための多数の結合４０を示す。プローブ３４と３６には平坦な末端部がついており、膜２６に穴が開くのを避けるようにしている。このようにして、組織検体１３は閉じたカセット１０内を向いており、組織検体１３の縁部１３ａが窓１６に対して平面的の方向をとるようにし、組織検体周囲部の多数の点または位置４０によって膜２６と窓１６との間の結合を保持している。
【００２９】
温度または超音波によって形成された結合の代わりに、接触性接着剤が窓１６の上部表面１６ａまたは窓１６に面する膜２６の表面のいずれか一方または両方へ適用され、カセットへ組織検体が設置される前に、位置４０において巻く２６と窓１６とを接着性ボンドで互いに結合させるようにする。さらには、接触性接着剤はＵＶ線修復性の接着剤であって、結合が形成されたあと、ＵＶ光線にあててこれを硬化させる。
【００３０】
図１２に示すように、針４２のついたシリンジ（図示せず）を自己封入式膜２８ｃの注入口２８から挿入して、液体を経路２８ｄとチャネル２８ｂから凹陥部２７内部へ注ぎ込む。凹陥部２７内部において多数の結合が組織検体１３を封入することはないので、液体は自由に組織検体１３へ流れ出し、こうすることによって矢印４４に示すように、組織検体を液体中へ浸す。この液体は液体に一致する光学的係数を示し、光学的画像化顕微鏡によって組織検体の画像を写せるようにする。同様に、この液体が針４２のついたシリンジを使うことによって排出され、凹陥部２７から液体を吸い出す。自己封入式膜２８ｃは凹陥部２７の統合性を圧縮することなく針を挿入できるようにしている。こうすることにより、組織検体は所望する向きのままカセット内に保持され、その一方で注入口２８を介して注入された液体が浸透性を帯びてくる。組織検体１３と窓１６の間に注入された液体は膜２６の弾力性と液体の圧力とによって流れ出す。
【００３１】
図１Ｂの側面注入口３３にとって、図１２Ａは注入口３３から液体が流れ込んだ自己封入式膜３３ｃを介して挿入された針４２を示すか、またはそこから流出した液体を示し、経路３３ｄとチャネル３３ｂを介した凹陥部２７を示す。図１２Ａはまた、注入口３３と同一な別の側面注入口３３ａをも示すが、基底メンバ１２における反対側の注入口３３の方を向き、このカセットが二つの注入口３３と３３ａを有するようにしている。こうすることにより、注入口３３から同じに液体を注入して凹陥部２７を介して液体を流れさせ、注入口３３ａから液体を除去するか、またはこの逆の方法をとる。２番目の注入口３３ａはまた、１番目の注入口３３が機能しなくなった場合にバックアップする部分としての役割も果たしている。
【００３２】
図１３および１３ａによると、カセット１０の上部メンバと基底メンバを一緒に封入する上での別の実施形態が示されている。この実施形態では、カセット１０の基底メンバと上部メンバをそれぞれ４６と４８とし、図５の基底メンバを図示している。基底メンバ４６は環状の壁４６ａを有し、この末端部が伸展して上部膜４８が受け取られるよう内部へ入り込んでいる。上部膜４８は穴４９および環状の***部またはタング４８ａを有し、このタング４８ａは外縁に沿って伸展している。***部４８ａが基底メンバ４６の環状グルーブ４６ｂ内部へ、壁４６ａの内部に沿ってぴたりと一致するよう、上部メンバ４８は基底メンバ４６へ挿入可能であり、こうすることによって上部メンバ４８を基底メンバ４６へ封入して、膜５３と基底メンバ４６との間で封入された凹陥部５６を定義することになる。組織検体１３の縁部１３ａは窓５４に対する縁部が２次構造をなすよう向いており、上部メンバ４８の穴４９の下へ光学的に透過可能な基底メンバ４６の一部として定義されている。上部メンバ４８はループメンバ５２によって基底メンバ４６へ付着しており、プラスチック製である。穴４９は適度に大きいため、組織検体１３が膜５３と窓５４との間に多数の結合を創り出せるようになっており、前述のように、窓に対して平面的構造をとるよう縁部を保持している。膜５３は膜２６と類似しており、注入口５０は注入口２８と類似していて、壁４６ａを介して自己封入式膜５９とチャネル５８を有し、凹陥部５６の組織検体１３に液体を注入したり、排出したりできるようになっている。上部膜４８は円形をなすか、あるいはディスク状をしており、曲がった形状の低部表面４８ｂを有する。
【００３３】
図１３Ｂに示すように、図１３に示した実施形態では、２番目の注入口５０ａは基底メンバ４６の頭頂部表面からつながって提供されているか、または注入口５０の代用をなす。注入口５０と同様に、注入口５０は壁４６ａを介して自己封入式膜５９ａとチャネル５８ａを有し、シリンジ針を介して液体が流れるようにしており、凹陥部５６の中にある組織検体１３へ液体を注入し、廃棄することができる。二つの口５０と５０ａはそれぞれチャネル５８とチャネル５８ａとを有し、基底メンバ４６の長い方の反対側に位置する。カセット１０に二つの注入口をつけることによって、液体は１つの口から注入され、同時に他方の口から流出されて、液体が凹陥部５６から流れられるようにしている。１つまたは２つの注入口しか示していないが、さらに複数の注入口が基底メンバ内の異なる場所に同様に提供されている。図１３Ｃには注入口５０と５０ａの変種を示し、このなかで側面注入口５０ｂは基底メンバ４６の側面から提供されている。注入口５０と注入口５０ａに同じく、注入口５０ｂは壁４６ａを介して自己封入式膜５９ｂとチャネル５８ｂを有し、シリンジ針を介して液体が流れるようにしてあり、凹陥部５６内にある組織検体１３へ液体を注入したり、廃棄したりできる。２つの注入口等、側面の注入口５０ｂにおける多数の注入口は、基底メンバ４６の反対側の側面から提供される。
【００３４】
図１４に示すように、カセット１０を有する共焦点画像化システムが示されている。共焦点画像化システム６０は、共焦点画像化ヘッド６４に液体を浸潤させた対物レンズ４６ａがついたコンピュータ制御システム６２を含み、制御システム６２に接続して画面６６とユーザーインターフェース６８がついている。共焦点画像ヘッド６４と制御システム６２は前述のごとく米国特許第５、７８６、６３９号もしくは国際特許出願ＷＯ９６／２１９３８に公開され、本発明に参考文献として含まれるように、画面６６上へ光学的に薄断片形成された組織検体の共焦点画像を映し出す。共焦点画像化ヘッド６４、制御システム６２、画面６６、およびユーザーインタフェース６８はＬｕｃｉｄ，Ｉｎｃ．ｏｆ Ｈｅｎｒｉｅｔｔａ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋが製造した「ビバスコープ」（ＶｉｖａＳｃｏｐｅ）等の共焦点顕微鏡を意味する。Ｚ−アクチュエータ７０は、制御システム６２からの信号を介して組織内の深さ、すなわちカセット１０の窓１６に対する対物レンズ６４ａの距離を制御し共焦点画像化ヘッド６４（またはその代わりに対物レンズ６４ａのみ）をｚ軸方向へ動かすことができる。
【００３５】
共焦点画像化システム６０はさらにＸ−Ｙ座標７２を含み、これがカセット１０を支持して、カセットの窓１６を、液体に浸潤した共焦点画像化ヘッド６４の対物レンズ６４ａへ向かわせている。ステージ７２はアクチュエータ（図示なし）を有し、制御システム６２からの信号に反応してカセット１０をｘ軸およびｙ軸のオーソロジカルな方向へ動かすことができる。ユーザインターフェース６８はキーボード、マウス、ジョイスティック、あるいはこれらの組み合わせを意味し、制御システム６２を介してユーザがＺ−アクチュエータ７０とＸ−Ｙ座標７２を制御できるようにし、組織検体上の様々な場所を共焦点画像化ヘッド６４によって画像化できるようにする。カセットをステージ７２へ設置するに先立ち、浸潤させる対物レンズ６４ａの光学的係数に合わせた液体を、注入口２８または３３からカセット１０の凹陥部へ注入する。オプションとして光学カップリング液７１をレンズ６４ａとカセット１０の窓１６との間に入れ、光学的にレンズ６４ａを窓１６へカップリングさせる。液７１はカセット１０の凹陥部に浸した液体と同一の光学係数を有する。カセット１０は図１１または図１３のいずれかに示したものである。
【００３６】
共焦点画像化システム６０中のオプション用カメラ７４は、レンズ７４ａを介してカセット１０の上部メンバ１４にある穴２０の方向を向けてあり、組織検体の画像を捉えるべく提供されている。カメラ７４はデジタルカメラであり、静止画像を捉えるか、あるいはビデオカメラとする。制御システムはまたカメラ７４へ信号を送り、操作を制御し、カメラが画像を捉えるか、あるいはカメラの焦点を合わせる。カメラ７４によって捉えられた信号は制御システム６２に受け取られる。
【００３７】
画面６６上で制御システム６２は共焦点画像化ヘッド６４から得た組織検体の顕微鏡的切片の画像とカメラ７４からのマクロ画像を視覚化する。図１５は共焦点画像化中に画面６６のスクリーン（７５の印がついている）の例を示し、画像７６はカメラ７４から得られたカセット１０におけるマクロ画像をあらわし、画像７８は共焦点画像化ヘッド６４を介して画像化された組織検体の光学的切片をあらわす。像７６は光学的切断化中にスクリーン７５上に維持され、ユーザを補助して組織検体に対する顕微鏡的切片７８の位置を調節する。たとえば、箱７７はマクロ画像７６に対する顕微鏡的画像７８の相対的位置を示す。ｘ−ｙ座標７２はカメラレンズ７４ａに対しておかれ、クロスヘア等のマーカーがマクロ画像７６上で制御システム６２の上に重なり、組織検体に対する共焦点画像化ヘッド６４の相対的位置を示す。組織検体の縁部はカセット１０の窓１６に対して平面的の位置をなすため、組織検体の縁に沿って画面６６上に示された光学的切片は、Ｍｏｈｓ外科手術で採取した組織検体内において腫瘍が全体的に含まれているかどうかを決定するための情報を提供することができる。希望する場合は、組織検体上の様々な部分から得た光学的切断面の画像はｘ−軸とｙ−軸７２の動きを制御することによって制御システム６２を介して自動的に走査できる。光学的切片の走査像は電気的に制御システム６２のメモリと組み合わされて、ユーザ向けに大画面を有する光学的切片を提供する。別の共焦点画像化ヘッドを希望する場合、カセットの注入口２８を介して、液体を異なる光学的係数に合う液と交換する。
【００３８】
共焦点画像化ヘッド６４は前述のとおりであるが、別の光学的画像化技術をもヘッド６４にて使用することができ、シュミットら（Ｓｃｈｍｉｔｔ ｅｔ ａｌ．）が「低コヒーレント干渉計を使った疾患組織の光学的定性」（Ｐｒｏｃ． ｏｆ ＳＰＩＥ，第１８８９巻（１９９３年）または米国特許第５，０３４，６１３号に記述したように２陽子レーザ等を使用できる。
【００３９】
組織検体の画像化が完了したあと、組織検体をステージ７２から外してカセット１０にアーカイブする。組織検体を保存する場合は、凹陥部内にある液すべてを排出したあと、ホルマリン等の保存液を注入口２８からカセットの凹陥部に注入する。Ｍｏｈｓ外科手術で得た組織検体の入ったカセット全体は、このようにしてインジシア３１を入れた状態で未処理のまま工程を参照しながらカセット上に保管することができる。組織検体の光学的切断を行うことによってアーカイブすることが可能となり、未処理の組織検体は従来型のスライドよりも必要な保管スペースが小さくなりカセット上でインジシア３１の標識を簡単につけることができる。
【００４０】
特殊な浸潤液が注入口から組織検体１３の入ったカセット１０の凹陥部へ注入された場合は、像を増大させる目的で選択されることがある。組織検体１３と窓１６の間のインターフェース部分において、表面の皺は浸潤液で充たされ、組織検体へフォーカスされる光線の波面に光学的皺をもたらす。この皺が画像のフィデリティを低下させる。皺の影響は組織検体と浸潤液の参照係数を合わせることによって低く抑えることができる。図１６に示すように、組織検体１３の表面テクスチャに起因する皺は幅（ｈ）（皺のピークアペックスから皺の谷間の底部までの）を有する皺を作りだし、これが長さ約２００ミクロンになる。組織検体の屈折係数はｎ_Ｔ、浸潤液すなわち皺を充たし、組織検体の表面テクスチャを提供する屈折係数は係数ｎ_Ｉを有する。光線は画像化される切断面における焦点ｆに焦点を合わされる。波面は特殊なものとなり、焦点Ｆをカバレージする波面上にインプリントされた光学経路の差ψがあるためにディストアすることができる。この経路の差は皺高さｈとｎ_Ｔ、ｎ_Ｉの差で表わす関数となる。液体に合わせた係数を使うことにより、光学的経路の差が小さくなり、インプリントが最小限度に抑えられる。光学的経路の差ψは図１６の８０の位置で拡大されている。この光学的経路差は、焦点Ｆにプロパゲートする波面としても見える。この波面は球形をなしており、８２に示すように、球形の一部が皺を通過前に組織検体１３の表面にある。組織表面を透過したあとの光学的経路差のディストージョンはおよそψ＝ｈ（ｎ_Ｔ−ｎ_Ｉ）の関係式で表わされ、ここでｈはほぼ表面テクスチャの機械的深さとなる。光線波面（球形の波面）のディストージョンを補正するには、皺で示される屈折係数にばらつきがあるため、浸潤液８４の係数と組織検体の屈折係数の平均値に皺高さｈすなわち皺の山と谷の間の光学的距離を掛け合わせるが）、画像化システム６２に画像化されるレーザー光線の波長の４分の１を超えない。これによって、浸潤媒質８４はカセット中におかれる組織検体の種類によって選択され、実質的には組織検体の表面テクスチャが有る故に光学的ディストージョンに対して補正される。
【００４１】
前述の説明からは、保持された組織検体の光学的切断を可能にするようなカセットが提供されたことは明らかである。ここに記述したカセット、方法、およびシステムには発明に沿った変種および修飾物があり、疑いなく本発明において周知のものであることを示唆している。従って、これから述べる説明は図解によって示されなくてはならないが、これに制約を受けないものとする。
【図面の簡単な説明】
【図１】 ここでは、図１および図１Ａは本発明において開いた状態のカセットの透視図であって、図１はカセットの上部メンバに付着する膜を示し、図１Ａはカセットの上部メンバから離れた膜を示す。
図１Ｂは図１の線１Ｂ−１Ｂに沿った断面図を示し、図１の図１Ｂは図１におけるカセットの注入口を詳細に示す。
図１Ｃは図１の線３−３に沿ったカセットの縁面を部分的断面図である。
【図２】 図１または図１Ａを閉じたときのカセットの透視図である。
【図３】 図１の線３−３に沿った断面図であり、組織検体が入っていないときのカセットにおける基底メンバの窓を示す。
【図４】 図１の線３−３に沿った断面図であり、組織検体が入っていないときのカセットにおける基底メンバの窓の別な実施形態である。
【図５】 図１の線３−３に沿った断面図であり、組織検体が入っていないときの基底メンバを示す別の実施形態であり、ここで基底メンバは光学的に透明な材質から成り、カセットを閉じたときのカセットの窓を提供する。
【図６】 図３と類似した断面図であり、図１Ａのセットにおけるカセットが開いた状態から閉じた状態になったときの上部メンバと膜の動きを示す。
【図７】 図２の線７−７の断面図であり、膜とカセットの窓との間にある凹陥部へ封入された組織検体を示す。
【図８】 図７と同様の断面図であり、カセットの窓に対して平面的の位置にある組織検体の縁を１つ目のプローブとした例を示す。
【図９】 図８と同様の断面図であり、組織検体の縁を平面的の位置に保つため、膜と窓とを結合させるための２つ目のプローブとした例を示す。
【図１０】 図９と同様の断面図であり、組織検体の周辺における様々な位置において結合された窓と膜に対し、平面的となるよう組織検体の縁をおいた例を示す。
【図１１】 図１０のカセットの底面を示し、カセットの注入口と、組織検体の回りにおいて様々な位置で結合させることによって、窓に対して平面的をなすよう定めたカセット中における組織検体の縁の例を示す。
【図１２】 図１１の線１２−１２に沿った断面図であり、注入口を介してカセットの隙間へ液体を注入しているシリンジ針の例を示す。
図１２Ａは図１１の線１２−１２に沿った断面図であり、カセットの隙間への注入口を横からみた図を示す。
【図１３】 カセットの上部メンバと基底メンバを封入した別の実施形態である。
図１３Ａは図１３のカセットを線１３Ａ−１３Ａに沿って横断した図である。
図１３Ｂは図１３の線１３Ｂ−１３Ｂに沿った断面図であり、２つの注入口を示す。
図１３Ｃは図１３の線１３Ｃ−１３Ｃに沿った横断面図であり、図１Ｃの注入口を横からみた図を示す。
【図１４】 本発明に沿ったカセットつき共焦点顕微鏡システムのブロック図である。
【図１５】 カセット中にある組織検体を共焦点画像処理した際の、図１４のシステムにおける画面上に現れたスクリーンの図である。
【図１６】 組織検体とカセットの窓との間に形成された皺を図解した拡大図である。

Claims (53)

1. 光学的に透明な窓を有する基底メンバと、窓を含む前記基底メンバの実質的部分の上に移動できる膜と上部メンバとから構成され、組織検体が前記窓の上にあるときに、前記上部メンバが前記基底メンバの上に配置され、それによって内部に前記組織検体を入れることのできる前記膜と前記窓との間に形成された密閉状の凹陥部が形成されており、前記上部メンバは、前記組織検体が前記窓上に配置されている時に、前記膜を通して前記組織検体が観察可能であり、且つ、当該膜は、一つ若しくは複数の場所に於いて、当該窓上から操作されることによって当該窓と接触できる様に十分柔軟性を有している事を特徴とする、外科的に露出され縁を有する組織検体を光学的に画像化できるカセット。
2. 前記上部メンバは、前記組織検体が前記窓上に配置されている時に、穴部を介して前記膜を通して前記組織検体が観察可能となる様な穴を含み、前記上部メンバは、前記基底メンバ上に前記膜を配置させそれによって前記膜と前記窓との間に密閉状の凹陥部が形成されている事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
3. 前記組織検体が前記膜と前記窓の間の密閉状の凹陥部内に封入されたとき、前記組織検体が前記窓を通して見えるように構成されている事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
4. 前記組織検体が前記密閉状の凹陥部内に位置するとき、前記組織検体が前記膜を介して配置されている事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
5. 前記カセットは、前記組織検体が密閉状の凹陥部内に配置されているときに、前記組織検体は、前記膜を介して前記窓に対して平面状に配置される少なくとも１つの縁を有し、且つ、前記カセットは更に、前記組織検体の前記縁が前記窓に対して平面状に維持されるように、前記膜と前記窓との間に少なくとも１つの結合部を含んでいる事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
6. 前記カセットにおいて、前記上部メンバは穴を有しており、且つ前記カセットは、さらに前記組織検体が封入された前記凹陥部内に配置されたとき、前記穴を介して観察し得る前記組織検体の周辺に形成されたギャップ部と、前記組織検体の前記縁が前記窓に対して平面状に維持されるように、前記ギャップ部内部の所定の部位に於いて、前記膜と前記窓とを接続する複数の結合部とが含まれている事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
7. 前記基底メンバがさらに前記上部メンバに面する上部表面と、前記窓が位置する範囲内で、前記上部表面を介して延展されている穴とから構成されるような請求項１記載のカセット。
8. 前記基底メンバは、前記組織が配置される窓を提供するような光学的に透明な材質から構成される請求項１記載のカセット。
9. 前記基底メンバがさらに少なくとも１つの注入口を有し、そこから液体を注入したり、前記凹陥部から前記液体を除去できるように構成されている請求項１記載のカセット。
10. 前記注入口が自己封入式メンバと開口部から凹陥部へのチャネルとを有する開口部から構成されるような請求項９記載のカセット。
11. 前記注入口が前記基底メンバの低部または側面部を介して位置するような請求項９記載のカセット。
12. さらに上部メンバと基底メンバとを互いに開いた状態の位置に配設させ、それによって前記基底メンバ上の窓に組織検体を置けるようにするとともに、次いで、両者を閉じた状態の位置に配設させ、それによって前記上部メンバが前記基底メンバを覆って前記膜と前記組織検体が保持されている前記窓との間に凹陥部を形成できるようにしたカップリング手段を含んでいる事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
13. 前記カップリング手段がさらに前記膜の片側をカップリングさせて、前記上部メンバと基底メンバとの間に前記膜を保持できるようにした請求項１２記載のカセット。
14. 前記窓が固く形成されている請求項１記載のカセット。
15. さらに前記基底メンバにおける少なくとも１箇所の注入口と、前記膜と前記窓とを１つ以上の結合部によってつなぎ、組織検体を一定の方向に保持しながら、前記注入口を介して注入される液体を、前記組織検体を受け取れるよう形成する手段とから構成されるような請求項１記載のカセット。
16. 前記上部メンバが、１つの表面と、前記表面に沿って拡がる穴とを有し、かつ、前記膜は、前記上部メンバの表面に接合しうるような外部縁を有する事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
17. 前記膜がプラスチックの薄膜からなるような請求項１記載のカセット。
18. さらに前記基底メンバと前記上部メンバとを封入してこの中に封入凹陥部を形成する手段を含んでいる請求項１記載のカセット。
19. さらに上部メンバを下部メンバへ封止的に接合させ、前記膜と前記窓との間に凹陥部を形成するための集密的シールを形成する事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
20. 前記カセットに於いて、前記上部メンバが低部表面を有し、前記基底メンバが上部表面を有しており、前記上部メンバが前記基底メンバを覆って前記膜と前記窓との間に組織検体を保持できるような凹陥部を形成するとき、前記基底メンバの上部表面が前記上部メンバの前記低部表面に面するように構成されている請求項１記載のカセット。
21. 前記カセットにおいて、前記上部メンバは連続的外縁部を有し、前記基底メンバは前記上部メンバが入り込む連続的側壁を有し、さらに前記カセットは、前記膜と前記窓との間に組織検体を保持できるような凹陥部を形成するために、前記上部メンバと基底メンバにより提供されて基底メンバの側壁に沿って前記上部メンバの前記外縁部を結合させる結合手段を有する事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
22. 前記カセットは、さらに識別記号を有するラベルを含んでいる請求項１記載のカセット。
23. 基底メンバの光学的に透明な窓上に組織検体をおくステップと、前記窓を含む前記基底メンバの少なくとも実質的な部分の上に光学的に透明な膜を配置するステップであって、当該ステップでは、当該膜は、一つ若しくは複数の場所に於いて、当該窓に到達する為に操作されうる様に十分柔軟性を有しているステップと、前記膜と前記窓との間に凹陥部を創り出すために、膜を基底メンバに集密的に接合するステップとから構成されているべく共焦点顕微鏡その他光学的画像形成顕微鏡による鏡検に向けて組織検体を準備するための請求項１記載のカセットの使用方法。
24. 前記カセットの使用方法に於いて、前記窓に対して組織検体の縁を配置するステップと、複数の部位において前記膜を前記窓に固定することによって、窓に対する前記縁の位置を固定するステップとからなる請求項２３記載のカセットの使用方法。
25. さらに基底メンバ中の注入口を介して前記基底メンバを通して前記凹陥部へ液体を注入するステップを含んでいる事を特徴とする請求項２３に記載のカセットの使用方法。
26. 前記窓を介して前記組織検体を画像化するステップ更に含んでいる事を特徴とする請求項２３に記載のカセットの使用方法。
27. 請求項１に記載されたカセットと、
    前記膜を介して前記窓に対して前記組織検体の縁を平面的となるように配置する手段と、
    前記組織検体の周辺部における部位にあっては、前記組織検体のそれぞれの前記縁部が前記基底メンバの前記窓に対して平面的となるよう配置されたときに、前記窓に対して前記組織検体を保持するために、前記膜と前記窓との間に複数の結合部を形成する手段とから構成されると共に、前記膜は当該膜上から操作されることによって当該膜と接触できる様に十分柔軟性を有している、外科手術によって露出された縁を有する組織検体の光学的画像化を可能にするシステム。
28. 前記システムは、さらに前記カセットにおいて、前記凹陥部へ液体を注入する手段を含んでいる請求項２７記載のシステム。
29. 前記液は、前記組織検体の表面テクスチャが原因で生じた、光学的ひずみを実質的に補正する様な液体が選択される請求項２８記載のシステム。
30. 液体を注入する前記手段が、さらに前記液体を除去する手段を含んでいる請求項２８記載のシステム。
31. 前記組織検体を配置できる光学的に透明な窓を有する第１メンバと、前記窓を含む前記第１メンバの少なくとも実質的な部分の上に配置せしめられる薄く柔軟な材質の膜を含む第２メンバであって、且つ一つ若しくは複数の場所に於いて、当該膜上から操作されることによって当該窓と接触できる様に十分柔軟性を有している第２メンバと、表面と当該表面に伸展する穴とを有する第３メンバと、前記第２メンバが前記第１メンバの上に置かれるときに、前記第３メンバを前記第１メンバと接合させ、それによって組織検体を前記窓の上においたときに、前記第２メンバと前記窓との間に凹陥部を形成させる接合手段、とからなり、更に前記組織検体が前記窓上に配置されている時に、前記第３メンバの前記穴を介して、前記窓と前記第２メンバを通して前記組織検体が見られるように構成された組織検体用カセット。
32. 前記規定が前記第１メンバと第３メンバとを、前記第１メンバと前記第３メンバの周縁に沿って互いに接合させる手段を有する請求項３１記載のカセット。
33. 組織検体の所定の部分を光学的に画像化するシステムにおいて、当該システムは、請求項１に記載されたカセットと、当該窓に対して当該組織検体が保持され様に、当該組織検体に対して圧力を印加する手段と前記組織検体の一つあるいは複数の部分を表示する画像を発生させる為に、当該窓を介して当該組織検体に指向せしめられている画像処理手段と、から構成されているシステム。
34. 前記画像化手段が共焦点顕微鏡であるような請求項３３記載のシステム。
35. 前記共焦点顕微鏡が対物レンズを有し、前記システムがさらに前記対象レンズとカセットの窓の間に液体が提供されて、窓に対して光学的に対物レンズをカップリングさせるような請求項３４記載のシステム。
36. 前記画像化手段が光学的コヒーレントトモグラフィまたは２陽子顕微鏡のいずれかによって操作可能な請求項３３記載のシステム。
37. さらに前記画像化手段の各々に対して前記カセットを支持する移動可能なステージから構成されるような請求項３３記載のシステム。
38. 前記画像化手段が組織検体の所定の部位の顕微鏡画像を提供するための顕微鏡画像化手段であり、前記カセットが前記窓を有する基底メンバと、前記組織検体をそれを通じて見ることができる穴を有する上部メンバとを有し、前記システムがさらに前記カセットの前記穴を通じてイメージされた組織検体のマクロ画像を発生させる手段を含んでいる請求項３３記載のシステム。
39. 前記システムは、さらに前記制御システムに組み合わされた表示手段に於いて、少なくとも組織検体の前記顕微鏡画像とマクロ画像とをスクリーンを提供する前記顕微鏡画像化手段とマクロ的画像化手段とが組み合わされた制御システムを含んでいる請求項３８記載のシステム。
40. 前記カセットは、液体が注入され様な手段を有する請求項３３記載のシステム。
41. 前記カセットにおける前記組織検体がモース（Ｍｏｈｓ）外科手術を受けた患者から得られるような請求項３３記載のシステム。
42. 前記カセット内の前記組織検体は、共焦点顕微鏡によって前記窓を介して画像化が可能である事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
43. 前記カセット内の前記組織検体は、２陽子顕微鏡又は光学的コヒーレントトモグラフィの何れか一つに従って駆動される画像システムによって、前記窓を介して画像化が可能である事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
44. 前記カセットは、前記凹陥部内にある、前記組織検体の屈折係数と実質的にマッチする屈折係数を持った液体を含んでいる事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
45. 前記カセットは、更に前記凹陥部内にある、前記組織検体の表面テクスチャによる光学的ひずみを実質的に修正する液体を含んでいる事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
46. 前記基底メンバと前記上部メンバの少なくとも一つは、前記組織検体を代表するインジシアを有している事を特徴とする請求項１に記載のカセット。
47. 前記インジシアは、バーコード或はアルファベットと数字の組み合わせの何れかを表示するものである事を特徴とする請求項４６に記載のカセット。
48. 前記方法は、更に、前記組織検体の屈折係数と実質的にマッチする屈折係数を持った液体を前記凹陥部内に配置する工程を含んでいる事を特徴とする請求項２３に記載の方法。
49. 前記方法は、更に、前記組織検体の表面テクスチャによる光学的ひずみを実質的に修正する液体を前記凹陥部内に配置する工程を含んでいる事を特徴とする請求項２３に記載の方法。
50. 前記方法は、更に、前記組織検体を識別するインジシアを設ける工程を有している事を特徴とする請求項２３に記載の方法。
51. 前記画像化工程は、共焦点顕微鏡、２陽子顕微鏡及び光学的コヒーレントトモグラフィの一つにより実行される事を特徴とする請求項２６に記載の方法。
52. 前記システムは、更に、凹陥部内に、前記組織検体の屈折係数と実質的にマッチする屈折係数を持った液体を含んでいる事を特徴とする請求項２７に記載のシステム。
53. 前記液体は、前記組織検体の屈折係数と実質的にマッチする屈折係数を持っている事を特徴とする請求項４０に記載のシステム。

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