JP4195728B2 - プロアントシアニジンポリマー止瀉組成物の腸溶製剤 - Google Patents
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Description
本発明は、下痢の治療に有効なプロアントシアニジン重合体組成物の医薬製剤に関する。特に、本発明は、クロトンspp.(Croton spp.)またはカロフィラムspp.(Calophyllum spp.)から単離されたプロアントシアニジン重合体組成物の医薬製剤に関し、その製剤は、分泌性下痢に関連した液体損失とその結果生じる脱水症の低減に有効である。本発明の好ましい実施態様は、経口投与後に胃の酸環境から前記組成物を保護するプロアントシアニジン重合体組成物の医薬製剤、特に腸溶性コーティングされている製剤に関する。
2.発明の背景
本出願の第2節またはその他の任意の節における任意の参考文献の引用または確認は、かかる参考文献が本発明の従来技術として利用可能であることの容認とは解釈されないであろう。
2.1.分泌性下痢
分泌性下痢は、水下痢とも呼ばれ、開発途上国における、特に幼児および小児の病気および死亡率の主な原因であり、先進国からの開発途上国への訪問者も有意な割合で侵し、また外国を訪れる人をも侵し得る(「旅行者下痢」と呼ばれる)。分泌性下痢は、腸管による液体と電解質の両方の損失によって特徴づけられ、重篤な、そしてしばしば生命を脅かす脱水症を引き起こす。分泌下痢は、細菌性、ウイルス性、および原生動物性病原体によって引き起こされ、また、潰瘍性大腸炎、炎症性腸管症候群(inflammatory bowel syndrome)、ならびに胃腸管の癌および新形成のようなその他の非感染性病因によっても生じる。実際、下痢疾患の全ての型が分泌性の要素を有し得ると考えられている。
分泌下痢の2つの主要な細菌性源は、ビブリオコレラ菌(Vibrio cholerae)および大腸菌(Escherichia coli)である。大腸菌の腸毒素産生性型は、開発途上国における分泌下痢の重要な源であり、旅行者下痢の主要源である。下痢を引き起こす大腸菌のその他の株としては、腸出血性、腸侵襲性、腸病原性およびその他の株が挙げられる。分泌下痢を引き起こすその他の細菌性外的病原因子としては、その他のビブリオspp.(Vibrio spp.)、カンピロバクターspp.(Campylobacter spp.)、サルモネラspp.(Salmonella spp.)、アエロモナスspp.(Aeromonas spp.)、プレイオモナスspp.(Plesiomonas spp.)、赤痢菌spp.(Shigella spp.)、クレブシエラspp.(Klebsiella spp.)、シトロバクターspp.(Citrobacter spp.)、エルジニアspp.(Yersinia spp.)、クロストリジウムspp.(Clostridium spp.)、バクテリオイデスspp.(Bacteriodes spp.)、ブドウ球菌spp.(Staphylococcus spp.)、およびバチルスspp.(Bacillus spp.)、ならびにその他の腸細菌が挙げられる。また、分泌性下痢は、クリプトスポリジウムspp.(Cryptosporidium spp.)、例えばCryptosporidium parvumのような原生動物性病原体によっても引き起こされ得る。一般的には、Holland, 1990, Clin. Microbiol: Rev. 3:345; Harris, 1988, Ann. Clin. Lab. Sci. 18:102; Gracey, 1986, Clin. in Gastroent., 15:21; OomsおよびDegryse, 1986, Veterinary Res. Comm. 10:355; Black, 1982, Med. Clin. Nor. Am., 66:611を参照されたい。
ビブリオコレラ菌(V.cholerae)、大腸菌(E.coli)の腸毒素産生性株および種々のその他の腸細菌は、同様の機構によって分泌性下痢を誘発する。これらの病原体は、腸管上皮の頂端側細胞膜の特異的受容体に結合する毒素を産生する。受容体の結合は、アデニル酸シクラーゼ−またはグアニル酸シクラーゼ−介在シグナル伝達を作動させてcAMPまたはcGMPを増大させる。見かけ上特異的頂端側細胞膜タンパク質のリン酸化を経て作用するこの調節カスケードは、腸管上皮陰窩細胞から腸への塩素流出を刺激し、腸管上皮絨毛細胞によるナトリウムイオンおよび塩素イオンの正常な吸収を阻害する。塩素イオンおよびナトリウムイオン濃度の上昇は、浸透圧により腸管腔に水を排出させ、脱水症および電解質の損失を生じさせる。したがって、塩素イオン分泌を低下させる薬剤は、腸への液体の移動を防止し、正味の液体除去が生じるのを防止する。よって、そのような薬剤は、分泌性下痢に付随する危険な脱水症および電解質損失を治療し、防止するのに有用である。
本発明の医薬組成物は、特に、旅行者下痢および非特異的下痢の治療に特に有用である。旅行者下痢は、分泌下痢の一種であり、「第三世界」の国々を旅行する先進国の国民が経験する下痢と定義される。旅行者下痢の例としては、メキシコに初めて行き、到着後3〜5日以内に下痢をするという合衆国国民が経験する下痢疾患がある(Castelli & Carose, 1995, Chemotherapy 4(supp.1):20-32)。細菌は、主要な外的病原因子である腸毒素産生性大腸菌(ETEC)、赤痢菌spp.(Shigella spp.)、およびカンピロバクター ジェジュニ(Campylobacter jejuni)について、旅行者下痢の85%の原因であると推定される。また、原生動物およびウイルスも旅行者下痢を引き起こすが、細菌よりも頻度が低い(DuPont, 1995, Chemotherapy 4(supp.1):33-39)。メキシコでは、夏の期間(5月〜11月)においては、旅行者下痢に関する最も有力な外的病原因子はETECであるが、冬の期間においては、主要生物はカンピロバクター ジェジュニ(Campylobacter jejuni)である(DuPont, 1995, “Traveler’s diarrhea”, M. Blaserら編, pp.299-311, Raven Press, ニューヨーク)。メキシコに初めて行く合衆国の旅行者の約40%が旅行者下痢を経験する。
旅行者下痢とは対照的に、非特異的下痢(NSD)(これも分泌性の要素を有すると考えられる)は、原住民が経験する急性風土病性下痢疾患である。メキシコ居住者における非特異的下痢の発症の割合は、7%である(H.L.DuPont, 私文書(personal communication))。しかしながら、旅行者下痢とは異なり、非特異的下痢は一般的に抗生物質療法には応答せず、その病因は知られていない。
1975年以来、ヒューストンにあるテキサス大学保健科学センター(Health Sciences Center)の仲間とDuPontは、メキシコにおいて一連の臨床試験を行って種々の止瀉薬の効力を研究している。これらの研究からのプラシーボグループの結果に基づいて、DuPontらは、それぞれ、合衆国旅行者およびメキシコ国民における旅行者下痢および非特異的下痢の自然の歴史を特徴づけることができた。そのデータは、夏に旅行者下痢をした患者と、非特異的下痢の患者との間の下痢疾患の強さおよび持続期間に明白な相違があることを示すものである。5日間の評価においては、疾患の持続期間(登録の時から最後の不定形便までの平均時間)は、メキシコ国民が38時間であるのに対して合衆国旅行者は69時間であった(p=0.0001)。登録時からの便通の総数を分析したところ(0〜120時間)、合衆国からの旅行者は10.6便通であり、メキシコ居住者は5.6便通である(p=0.0001)(H.L. DuPont, 私文書)。
メキシコの冬の期間に生じる旅行者下痢についてはあまり多くのデータを入手することはできないが、一般的に、合衆国からの新規到着者の下痢疾患は、メキシコに数ヶ月間滞在している合衆国居住者が経験した下痢と類似している。夏の旅行者下痢よりも重篤でなく、非特異的下痢よりも重篤である傾向がある(H.L. DuPont, 私文書)。
また、分泌性下痢は、特に、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)感染および後天性免疫不全症候群(AIDS)、ならびにロタウイルス感染に付随する下痢のように、ウイルス感染にも関係する。AIDS患者のほとんどすべてが病気の進行のある時点で下痢を患い、AIDS患者の30%は慢性下痢を患う。AIDSに付随する下痢は、「HIV−関連慢性下痢」と呼ばれている。HIV疾患のこの下痢要素は、少なくとも何人かの患者においては、原生動物性病原体、特にクリプトスポリジウムspp.(Criptosporidium spp.)の二次感染によって引き起こされるものと考えられる。さらに、ロタウイルス感染は、特に開発途上国の幼児および小児における下痢の実質的な原因である。
また、分泌性下痢は、非ヒト動物、特に、ウシ属動物、ブタ、ヒツジ(ヒツジ属動物)、家禽(ニワトリなど)およびウマ科動物、ならびにその他のイヌ科動物、ネコ科動物などの飼いならされた動物のような家畜においても重大な問題である。下痢疾患は、若くてつい最近乳離れした家畜において特に一般的である。家畜、特に畜牛、ヒツジおよびブタのような食用動物における下痢疾患は、しばしば、腸毒素産生性、腸出血性およびその他の大腸菌(E.coli)、サルモネラspp.(Salmonella spp.)、クロストリジウムペルフリンゲンス(Clostridium perfringens)、バクテリオデスフラジリス(Bacteriodes fragilis)、カンピロバクターspp.(Campylobacter spp.)およびエルジニアエンテロコリティカ(Yersinia enterocolitica)のような細菌性病原体によって引き起こされる。さらに、原生動物性病原体、特にクリプトスポリジウム パルバム(Cryptosporidium parvum)、ならびにウイルス性外的病原因子、特にロタウイルスおよびコロナウイルスは、家畜の下痢の重大な原因である。家畜の下痢に関係しているその他のウイルス性外的病原因子としては、トガウイルス、パルボウイルス、カリチウイルス、アデノウイルス、ブレダウイルス(bredaviruses)およびアストロウイルス(astroviruses)が挙げられる。一般的には、Holland, 1990, Clin. Microbiology Rev. 3:345を参照されたい。また、GutzwillerおよびBlum, 1996, AJVR 57:560; Strombeck, 1995, Veterinary Quarterly 17(Suppl.1):S12; Vermunt, 1994, Austral. Veterinary J. 71:33; Driesenら, 1993, Austral. Veterinary J. 70:259; Mouricout, 1991, Eur. J. Epidemiol. 7:588; OomsおよびDegryse, 1986, Veterinary Res. Comm. 10:355も参照されたい。
2.2.タンニンまたはプロアントシアニジンを含む植物抽出物および下痢に対する使用
タンニンは広範な種類の植物において発見されており、加水分解型または縮合型のいずれかに分類される。プロアントシアニジンは、縮合型タンニンのグループであり、さらに以下に記載されている。下痢の治療薬または予防薬として伝統的な薬剤に用いられている多くの植物は、特に、タンニンおよびプロアントシアニジンを含むことが分かっている(例えば、Yoshidaら, 1993, Phytochemistry 32:1033; Yoshidaら, 1992, Chem. Pharm. Bull., 40:1997; Tamakaら, 1992, Chem. Pharm. Bull. 40:2092を参照されたい)。薬用植物、例えば、Pycanthus angolenisおよびBaphia nitidaからの粗抽出物は、動物試験において止瀉特性を有することが示されている(OnwukaemeおよびAnuforo, 1993, DiscoveryおよびInnovation, 5:317; OnwukaemeおよびLot, 1991, Phytotherapy Res., 5:254)。タンニンを含む粗抽出物、特にイナゴマメの莢およびヨーロッパグリの木からの抽出物が、下痢の治療薬または予防薬として提案されている(米国特許第5,043,160号;ヨーロッパ特許第481,396号)。
また、プロアントシアニジンを含む粗植物抽出物も下痢の治療薬または予防薬として提案されている。例えば、粗果実皮抽出物は、アントシアニジンおよびその他の化合物を含んでおり、下痢に対する使用が提案されている(米国特許第4,857,327号)。伝統的に下痢に対して使用されている、Q.petreaの木の樹皮には、オリゴマープロアントシアニジンが含まれていることが示されている(KonigおよびScholz, 1994, J. Nat. Prod., 57:14411; Pallenbach, 1993, Planta Med., 59:264)。Sclerocarya birrea樹皮抽出物の画分は、プロシアニジンも含んでおり、実験的に誘導した下痢に関連した腸管収縮を低下させた(Galvezら, 1993, Phyt. Res., 7:25; Galvezら, 1991, Phyt. Res., 5:276)。しかしながら、これらの研究はどれも、が抽出物の止瀉活性は、とりわけプロアントシアニジンによるものだということを示していない。
その他の研究は、プロアントシアニジンを含む一定の調製物が腸内のコレラトキシン作用を妨害し得ることを示唆している。粗茶抽出物は、カテキン(プロアントシアニジンモノマー)を含んでおり、コレラトキシンの5分後に投与した場合、培養CHO細胞におけるコレラトキシン誘導形態学的変化およびマウスにおけるコレラトキシン誘導腸液体蓄積の両方を妨げることが示されている(Todaら, 1991, J. App. Bact., 70:109)。しかしながら、粗茶抽出物は、コレラトキシンの30分後に投与した場合、マウスの腸における液体蓄積を防ぐことができず、カテキンが抽出物における活性物質であることは示されなかった。さらに、プロアントシアニジンを含むGuazuma ulmifolia樹皮抽出物は、SDS−PAGE分析により測定したところ、単離されたウサギ腸組織におけるコレラトキシン誘導イオン流出を、見かけ上、ポリマープロアントシアニジンとコレラトキシンとの物理的相互作用によって低下させた(Horら, 1996, Phytochemistry 42:109; Horら, 1995, Planta Med., 61:208)。しかしながら、コレラトキシン添加後の画分の添加は、塩素イオン分泌に作用しなかった。したがって、本発明とは全く反対に、この画分は、分泌下痢を引き起こす外的病原因子への曝露後、液体損失を低下または防止するのに有効ではなく、よって分泌性下痢の治療薬として有用ではない。
プロアントシアニジンは、その構造および起源に依存して異なる生理学的作用を有する。その他のプロアントシアニジンは、実際には、下痢の治療または予防に対して禁忌を示す。ブラックビーン(black bean)から単離されたオリゴマープロアントシアニジンは、単離された腸組織において塩素分泌を増大させ、ナトリウム吸収を低下させることが示されている{Silverstein, 1989, “Procyanidin from Black Bean(Phaseolus Vulgaris): Effects on Transport of Sodium, Chloride, Glucose, and Alanine in the Rat Ileum”, ワシントン州立大学(学位論文)}。したがって、腸内のイオン濃度の上昇は、腸管腔における液体蓄積を促進し、分泌性下痢と関連した液体および電解質の低下ならびに脱水症をより悪化させるであろう。実際、この参考文献は、特に、下痢に対する治療薬としてのプロアントシアニジンの使用とは別のことを教示しておらず、プロアントシアニジンが分泌下痢を引き起こすことを示唆している。
2.3.プロアントシアニジン
プロアントシアニジンおよびプロアントシアニジン重合体は、広範な種類の植物、特に成長に関して木の性質を有するものにおいて見出されるフェノール物質である(例えば、クロトンspp.およびカロフィラムspp.)。プロアントシアニジン重合体の一般的な化学構造は、下記のような、互いに共通のC(4)−(6)および/またはC(4)−C(8)結合によって連結された直鎖の5,7,3’,4’テトラヒドロキシまたは5,7,3’,5’ペンタヒドロキシフラボノイド3-オール単位からなる。
生合成研究によって、プロアントシアニジン重合体は、下記に示した型のモノマー単位からなることがわかった。Fletcherら, 1977, J.C.S. Perkin, 1:1628を参照されたい。
ポリマー鎖のモノマー単位(一般的には「ロイコアントシアニジン」と呼ばれる)は、cis(エピカテキンと呼ばれる)またはtrans(カテキンと呼ばれる)と呼ばれる2および/または4位にあるC−環の2つの立体化学のいずれかを基礎とするものであり得る。したがって、ポリマー鎖は、種々の構造単位に基づくものであり、広範な種類のプロアントシアニジン重合体と多数の可能な異性体が作り出される(Hemingwayら, 1982, J.C.S. Perkin, 1:1217)。13C NMRは、プロアントシアニジン重合体の構造を同定するのに役立っており、最近の研究によってダイマー、トリマーおよびテトラマープロアントシアニジンの化学的性質が解明された。フラボノイド3-オール単位の大型の重合体が、大部分の植物において支配的であり、6以上の単位を含む、2,000ダルトン以上の平均分子量を有するものが見出されている(Newmanら, 1987, Mag. Res. Chem., 25:118)。
2.4.クロトン種およびカロフィラム種由来の抽出物および化合物の民族植物学的使用
Croton sakutaris、Croton gossypifolius、Croton palanostima、Croton lechleri、Croton erythrochilus、Croton draconoidesなどのいくつかの異なるCroton木種は、南アメリカに見られ、Sangre de Dragoまたは「ドラゴンの血(Dragon’s Blood)」と呼ばれる赤色の粘性のあるラテックス樹液を産生する。Sangre de Dragoは、ペルーアマゾンの混血および原住民によって、インフルエンザおよび下痢に対して最もよく利用されている。Sangre de Dragoは、扁桃炎、咽喉感染、結核、消化性潰瘍、腸疾患、リウマチに対して、そして生殖能力を高めるために内服されており、成人および子どもの両方によって使用されている。また、Sangre de Dragoは、ヘルペスウイルス病巣および創傷治癒に対して出血を止めるためにも広く用いられている。樹液を抗感染症薬として開放創上に直接置き、治癒過程を促進させる。また、Sangre de Dragoは、過度の出血の場合に膣洗浄剤としても利用されている。
Croton draconoidesおよびCroton lechleri由来のSangre de Dragoにはタスピン(taspine)と同定されるアルカロイド(これは抗炎症活性を示す)が含まれていることが示されている(Persinosら, 1979, J. Pharm. Sci., 68:124)。また、タスピンは、鳥類骨髄芽球症ウイルス、ラッシャー白血病ウイルスおよびシミアン肉腫ウイルスにおいてRNA特異的DNAポリメラーゼ活性を阻害することも示されている(Sethi, 1977, Canadian J. Pharm. Sci., 12:7)。
Sangre de Dragoから単離された種々のフェノール化合物およびジテルペン化合物が、その抗腫瘍特性、抗菌特性および創傷治癒特性について試験された(Chenら, Planta Med., 60:541)。樹液中のプロアントシアニジンは、ほとんど抗腫瘍活性または抗菌活性を有しておらず、わずかに創傷治癒活性を有するということが分かった。
米国特許第5,211,944号には、まず、クロトン種からのプロアントシアニジン重合体組成物の単離および該組成物の抗ウイルス剤としての使用が記載されている(また、Ubillasら, 1994, Phytomedicine, 1:77も参照されたい)。プロアントシアニジン重合体組成物は、RSウイルス、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、ヘルペスウイルスなどの種々のウイルスに対して抗ウイルス活性を有することが示された。
Calophyllum inophylumは、インドから東アフリカ、ポリネシアに分布する木である。種子油は、疥癬、白癬および皮膚症の治療における駆虫薬として民間療法で用いられており、そして痛覚消失症などのその他の用途において用いられている。インドシナでは、粉末樹脂が潰瘍および創傷治癒に用いられている。インドネシアでは、樹皮を、腫脹腺(swollen glands)を治療するために外用し、利尿薬として内服している。樹液は、胸痛ならびに腫瘍および腫脹に対して緩和薬として使用されている。葉抽出物は、炎症眼の洗浄剤として使用されている。カンボジア人は、葉抽出物をめまいおよび片頭痛の治療のための吸入薬に用いている。サモア人は、樹液を矢毒として使用している。
米国特許第5,211,944号には、Calophyllum inophylumからのプロアントシアニジン重合体組成物の単離およびこの組成物の抗ウイルス剤としての使用も開示されている。
本発明のプロアントシアニジン重合体組成物は、酸不安定性であり、胃の酸性環境によって不活性化されることが確認されている。本出願の前には、クロトン種またはカロフィラム種のいずれかから単離されたプロアントシアニジン重合体組成物の医薬組成物であって、プロアントシアニジン重合体組成物を分泌性下痢の治療のために経口投与することができるように胃液の酸度から該プロアントシアニジン重合体組成物を保護するものについての開示はなされていない。
投与した場合に、分泌性下痢によって誘導された腸へのイオン流出が低減するような有効な医薬組成物が依然として必要とされている。そのような薬剤は、分泌性下痢によって引き起こされる液体および電解質損失ならびに脱水症を防ぐのに有効である。本発明の目的は、この要求を満たす止瀉薬の有効な医薬製剤を提供することであり、具体的には、胃の酸度から止瀉薬を保護する医薬製剤ならびに該医薬製剤を用いた下痢の治療方法を提供することである。
3.発明の概要
本発明は、治療に有効な量のプロアントシアニジン重合体組成物含有下痢止めを含む医薬組成物に関する。プロアントシアニジン重合体組成物はクロトンspp.(Croton spp.)、好ましくはクロトン・レクレリ(Croton lechleri)から調製することが好ましい。また、プロアントシアニジン重合体組成物はカロフィラムspp.(Calophyllum spp.)、好ましくはカロフィラム・イノフィラム(Calophyllum inophylum)からも調製できる。
本発明の医薬組成物は胃の酸性状態による分解からプロアントシアニジン重合体組成物を保護するように製剤化される。好ましい実施形態において、プロアントシアニジン組成物は腸溶コーティングを施される。別の好ましい実施形態では、プロアントシアニジン重合体組成物は胃酸の分泌を抑制しうる物質または胃液の酸性度を低下させうる物質と組み合わせて提供される。
本発明はまた、ヒトを含めた温血動物の下痢、特に分泌性下痢(secretory diarrhea)の治療方法を包含し、前記方法は、下痢を患うヒト以外の動物またはヒトに、胃酸の作用からプロアントシアニジン重合体組成物を保護するように製剤化された、治療に有効な量の、クロトンspp.(Croton spp.)またはカロフィラムspp.(Calophyllum spp.)から分離されたプロアントシアニジン重合体組成物またはその医薬として許容される誘導体、および製薬上許容される担体を含有する医薬組成物を投与することを含む。さらに、本発明は、ヒトを含めた動物の分泌性下痢の治療方法を包含し、前記方法は、下痢を患うヒト以外の動物またはヒトに、(a)治療に有効な量の、クロトンspp.(Croton spp.)またはカロフィラムspp.(Calophyllum spp.)から分離されたプロアントシアニジン重合体組成物またはその医薬として許容される誘導体、および製薬上許容される担体を含有する医薬組成物、ならびに(b)胃酸分泌を抑制するのに有効な量の胃酸分泌抑制化合物または胃酸を中和するのに有効な量の胃酸中和化合物、および製薬上許容される担体を含有する医薬組成物、を投与することを含む。
本発明はまた、ヒトを含めた温血動物の下痢の予防方法を提供し、前記方法は、下痢をおこす恐れがあるヒト以外の動物またはヒトに、胃酸の作用からプロアントシアニジン重合体組成物を保護するように製剤化された、予防に有効な量の、クロトンspp.(Croton spp.)またはカロフィラムspp.(Calophyllum spp.)から分離されたプロアントシアニジン重合体組成物またはその医薬として許容される誘導体、および製薬上許容される担体を含有する医薬組成物を投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
図1. クロマトグラフィーの時間経過(分)に対する、異なる処理を施した後のクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物のUV吸収(ミリ吸収単位:mAU)としてのクロマトグラフ様相を示すHPLCクロマトグラムのオーバーレイ。点線で示したクロマトグラムは水中でインキュベーションした後のプロアントシアニジン重合体組成物の様相(「水中」)を表し、実線はHCl中で0.03時間インキュベーションした後のプロアントシアニジン重合体組成物の様相(「HCl中で0.03時間後」)を表し、そして破線はHCl中で2.0時間インキュベーションした後のクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物の様相(「HCl中で2.0時間後」)を表す。
図2. 人工胃液中37℃で0.03時間インキュベーションした後のクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物のサンプルHPLCクロマトグラム。クロマトグラムは時間経過(分)に対するUV吸収(mAU)として示してある。
図3. 人工胃液中37℃で2時間インキュベーションした後のクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物のサンプルHPLCクロマトグラム。クロマトグラムは時間経過(分)に対するUV吸収(mAU)として示してある。
図4. 人工胃液中37℃で2時間インキュベーションし、続いて人工腸液で1:1に希釈して4時間以上インキュベーションした後のクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物のサンプルHPLCクロマトグラム。クロマトグラムは時間経過(分)に対するUV吸収(mAU)として示してある。
図5. 人工胃液中37℃で2時間インキュベーションし、続いて人工腸液で1:1に希釈して6時間以上インキュベーションした後のクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物のサンプルHPLCクロマトグラム。クロマトグラムは時間経過(分)に対するUV吸収(mAU)として示してある。
図6. 試験媒体中のクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物のHPLC様相のピーク面積を、水中のプロアントシアニジン重合体組成物のHPLC様相のピーク面積で割り、100を掛けて算出した、インキュベーション時間(h)の関数としてのピーク面積のパーセント(「ピーク面積%」)のプロット。四角のある線はSGF(人工胃液)中でインキュベーションした後のプロアントシアニジン重合体組成物のピーク面積%を表す。ダイヤ形のある点線はSGF中で2時間インキュベーションし、その後SIF(人工腸液)で1:1に希釈してさらにインキュベーションした後のプロアントシアニジン重合体組成物のピーク面積%を表す。
図7. この棒グラフは、コレラ毒素にさらしたマウスにおける腸液蓄積に及ぼすクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物の腸溶製剤の影響を示す。結果はマウスA〜Cの各群についての腸液蓄積比(mg液/mg腸)の平均として示してある。A群のマウスは水でのみ処置し、B群のマウスはグアーガム中の131mg/kgの腸溶プロアントシアニジン重合体組成物で処置し、C群のマウスにはグアーガムと共に「EUDRAGITTM」と糖を投与した。コレラ毒素にさらして7時間後に全群のマウスを評価した。詳細については以下の第7節を参照のこと。
図8. この棒グラフは、コレラ毒素にさらしたマウスにおける腸液蓄積に及ぼすクロトン・レクレリ(C. lechleri)由来のプロアントシアニジン重合体組成物の腸溶製剤の影響を示す。結果はマウスAおよびB群についての腸液蓄積比(mg液/mg腸)の平均として示してある。A群のマウスは水中の「EUDRAGITTM」および糖で処置し、B群のマウスは131mg/kgの腸溶プロアントシアニジン重合体組成物で処置した。
5.発明の詳細な説明
5.1.プロアントシアニジンポリマー組成物の調製
下痢の治療に有効なプロアントシアニジンポリマー組成物は、ロイコアントシアニジンのモノマー単位から構成される。ロイコアントシアニジンは、一般的に、カテキン、エピカテキン、ガロカテキン、ガロエピカテキン、フラボノール、フラボノール、およびフラバン-3,4-ジオール、ロイコシアニジンならびにアントシアニジンを含むモノマーフラボノイドである。分泌下痢の治療に有用なプロアントシアニジンポリマー組成物は、2〜30フラボノイド単位、好ましくは2〜15フラボノイド単位、より好ましくは2〜11フラボノイド単位、最も好ましくは平均分子量2100ダルトンの7フラボノイド単位のポリマーから構成される。
本発明において用いられるプロアントシアニジンポリマー組成物は、好ましくは、Croton種またはCalophyllum種から、米国特許第5,211,944号(これは参照により本明細書に含まれるものである)に開示された方法によって単離される。
好ましい実施態様においては、プロアントシアニジンポリマー組成物は、Croton lechleriから単離される。別の実施態様においては、プロアントシアニジンポリマー組成物はCalophyllum inophylumから単離される。
。
5.2.医薬製剤
プロアントシアニジン重合体組成物は、胃の酸環境において不安定であることが示されており、pH5.0〜約pH8.0で安定であることが分かった(下記の第6節を参照されたい)。したがって、本発明は、胃分泌物の酸度からプロアントシアニジン重合体組成物を保護する、該組成物の医薬製剤を提供する。好ましい実施態様においては、本発明の医薬製剤は、腸溶コーティングとさらに製薬上許容できるビヒクルとを有するプロアントシアニジン重合体組成物を含む。別の実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物を含む医薬組成物は、一方で、胃酸を中和するか、胃酸の分泌の防止する活性のある1以上の物質を含む。これらの製剤は、当技術分野で公知の方法によって調製することができる。例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 第18版, Alfonso R. Gennaro編, Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990に記載された方法を参照されたい。
プロアントシアニジン重合体組成物は、任意の治療上許容できる医薬剤形で提供され得る。医薬組成物は、経口投与のために、例えば、限定するものではないが、薬剤粉末、結晶、顆粒、小粒子(微小球およびマイクロカプセルのようなマイクロメートルオーダーの大きさの粒子を含む)、粒子(ミリメートルオーダーの大きさの粒子を含む)、ビーズ、微小ビーズ、ペレット、丸剤、マイクロ錠剤(microtablets)、圧縮錠剤もしくは錠剤粉砕物(tablet toriturates)、成形錠剤(molded tablets)もしくは錠剤粉砕物、ならびにカプセル剤(硬カプセル剤または軟カプセル剤のどちらかであり、組成物を粉末、粒子、ビーズ、溶液または懸濁液として含む)として製剤化することができる。また、医薬組成物は、経口投与のために、水性液中の液剤または懸濁剤として、ゲルカプセルに含有せしめた液体として、もしくは投与に都合のよい任意のその他の剤形として製剤化することもでき、または直腸投与のために、座剤、浣腸剤またはその他の都合のよい剤形として製剤化することもできる。また、プロアントシアニジン重合体組成物は、制御放出系として提供することもできる(例えば、Langer, 1990, Science 249:1527-1533を参照されたい)。
医薬製剤は、任意の種類の製薬上許容できる賦形剤、添加剤またはビヒクルを含むこともできる。例えば、限定するものではないが、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、セルロース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、ソルビトール、スクロース、イノシトール、粉末糖、ベントナイト、微結晶性セルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロースのような希釈剤または充填剤をプロアントシアニジン重合体組成物に添加することによって組成物の嵩を増大することができる。また、限定するものではないが、デンプン、ゼラチン、スクロース、グルコース、デキストロース、糖みつ、ラクトース、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、トチャカの抽出物、パンウォー(panwar)ゴム、インドゴム、イサポール(isapol)外皮の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ビーガム(Veegum)およびカラマツアラボガラクタン(larch arabogalactan)、ポリエチレングリコール、エチルセルロース、およびワックスのような結合剤を製剤に添加することによってその凝集特性を増大させることもできる。さらに、限定するものではないが、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、水素添加植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、カーボワックス、ラウリル硫酸ナトリウム、およびラウリル硫酸マグネシウムのような滑剤を製剤に添加してもよい。また、限定するものではないが、コロイド状二酸化ケイ素またはタルクのような滑剤(glidants)を添加することによって粉末製剤の流動特性を向上させることもできる。最後に、限定するものではないが、デンプン、粘土、セルロース、アルギン、ガム、架橋重合体(例えば、クロスカルメロース(croscarmelose)、クロスポビドン(crospovidone)、およびデンプングリコール酸ナトリウム)、ビーガム、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、セルロースおよび木産物、天然スポンジ、陽イオン交換樹脂、アルギン酸、グアーガム、柑橘類パルプ、カルボキシメチルセルロース、またはラウリル硫酸ナトリウムのような崩壊剤をデンプンとともに添加して腸における製剤の崩壊を促進することもできる。
本発明の好ましい実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物は、胃酸からプロアントシアニジン重合体組成物を保護する物質とともに製剤化される。より好ましい実施態様においては、プロアントシアニジン組成物は、腸溶コーティングされている。腸溶コーティングは、胃内ではそのままであるが、小腸に到達したら溶解して製剤の中身を放出させるものである。胃の中の非常に低いpH、すなわちpH1.5〜2.5にて酸性基がイオン化されず、コーティングが解離していない不溶体のままであるような酸性基を有する成分を用いて多数の腸溶コーティングが調製される。腸の環境のようなより高いpHレベルでは、腸溶コーティングはイオン化体に転化され、溶解してプロアントシアニジン組成物を放出する。その他の腸溶コーティングは、それらが小腸内で酵素によって分解されるまでそのままの状態であり、それ以外のものは水分への規定の曝露後に分離し、コーティングは小腸に入るまでそのままの状態である。
腸溶コーティングの調製に有用な重合体としては、限定するものではないが、シェラック、デンプンおよびアミロースアセテートフタレート、スチリン−マレイン酸共重合体、セルロースアセテートスクシネート、セルロースアセテートフタレート(CAP)、ポリビニルアセテートフタレート(PVAP)、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート(グレードHP-50およびHP-55)、エチルセルロース、脂肪、ステアリン酸ブチル、ならびに「EUDRAGIT(商標名)L 30D」、「EUDRAGIT(商標名)RL 30D」、「EUDRAGIT(商標名)RS 30D」および「EUDRAGIT(商標名)L 100-55」のような酸イオン化基を有するメタクリル酸−メタクリル酸エステル共重合体(「EUDRAGIT(商標名)」)が挙げられる。好ましい実施態様においては、医薬組成物には、プロアントシアニジン重合体組成物ならびに腸溶コーティング重合体「EUDRAGIT(商標名)L 30D」、平均分子量250,000ダルトンのメタクリル酸とアクリル酸メチルとのアニオン性共重合体が含まれる。
腸溶コーティングの崩壊は、使用されるコーティングの種類に依存して、腸酵素による加水分解または胆汁酸塩による乳化および分散によって生じる。例えば、エステラーゼはステアリン酸ブチルエステルをブタノールとステアリン酸に加水分解し、ブタノールは溶解するので、ステアリン酸は薬剤から剥離する。さらに、胆汁酸塩は、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、脂肪および脂肪誘導体を乳化させ、分散させる。その他の種類のコーティングは、水分との接触時間に依存して除去され、例えば、粉末カルナウバろう、ステアリン酸、ならびに寒天およびニレ樹皮の植物繊維から調製されたコーティングは、植物繊維が水分を吸収し、膨潤した後破裂する。崩壊に必要な時間は、コーティングの厚さおよび植物繊維とろうの割合に依存する。
プロアントシアニジン重合体組成物への腸溶コーティングの塗布は、腸溶コーティングの塗布についての当技術分野で公知の任意の方法によって行うことができる。例えば、限定するものではないが、腸溶重合体は、噴霧塗布に対しては5〜10%w/wの重合体、パン(pan)コーティングに対しては30%w/w以下の重合体を含有する有機溶媒を基剤とする溶液を用いて塗布することができる。通常使用される溶媒としては、限定するものではないが、アセトン、アセトン/酢酸エチル混合物、塩化メチレン/メタノール混合物、およびこれらの混合物を含む三次(tertiary)混合物が挙げられる。メタクリル酸−メタクリル酸エステル共重合体(「EUDRAGIT(商標名)」)のようないくつかの腸溶重合体は、溶媒として水を用いて塗布することができる。溶媒系の揮発性を調整することにより、粘着性による粘着を防ぎ、早期噴霧乾燥または溶媒が蒸発した場合の重合体の析出によるコーティングの多孔性の上昇を防ぐ必要がある。
さらに、可塑剤を腸溶コーティングに添加してコーティングフィルムのクラッキングを防止することができる。適当な可塑剤としては、ジエチルフタレート、アセチル化モノグリセリド、クエン酸トリエチル/クエン酸ポリエチルグリコールトリブチルおよびトリアセチンのような低分子量フタレートエステルが挙げられる。一般的に、可塑剤は、腸溶コーティング重合体の重量の10重量%の濃度で添加される。例えば、洗剤、シメチコンなどの乳化剤、例えば、タルクなどの粉末のようなその他の添加剤をコーティングに添加することによってコーティングの強度および平滑性を向上させることができる。さらに、顔料をコーティングに添加することによって医薬製剤に色を付けることができる。
好ましい実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物の医薬組成物は、硬質外殻ゼラチンカプセル剤に入れた腸溶コーティングしたビーズとして提供される。プロアントシアニジン重合体ビーズは、プロアントシアニジン重合体組成物をヒドロキシプロピルメチルセルロースと混合し、その混合物をノンパレイユ種(nonpareil seeds)(糖小球(sugar spheres))上に積層することによって調製される。次いで、ビーズをOpadry Clear(水と混合したもの)の封鎖塗によって被覆する。プロアントシアニジン重合体組成物に対して好ましい腸溶コーティングは、30%w/wの乾燥重合体物質を含む水性分散液として塗布される「EUDRAGIT(商標名)L 30D」であり、これは乳化剤として0.7%のラウリル硫酸ナトリウムNF(SLS)および2.3%のポリソルベート80 NF(Tween 20)が添加されており、コーティングの弾力性の向上のために可塑剤であるポリエチレングリコールおよびクエン酸エステルが添加されており、塗布プロセス中に膠着するという腸溶コーティング重合体の傾向を低減し、フィルムコーティングの平滑性を増大させるためにタルクが添加されている。腸溶コーティングされたビーズの最終組成は、17.3%w/wのノンパレイユ種、64.5%w/wのプロアントシアニジン重合体組成物、1.5%w/wのヒドロキシプロピルメチルセルロース、0.5%w/wのOpadry Clear、14.5%w/wの「EUDRAGIT(商標名)L 30D」、1.45%w/wのクエン酸トリエチル、および0.25%w/wのグリセリルモノステアレートである。この医薬製剤は、当技術分野で公知の任意の方法または下記の第8.1節に記載された方法によって調製され得る。
別の好ましい実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物の医薬組成物は、硬質外殻ゼラチンカプセル剤に供給されたか、または小児投与用の経口液剤に懸濁された腸溶コーティングした顆粒または粉末(径300〜500μの微小球)として製剤化される。また、腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物粉末または顆粒は、特に小児投与用に、食物と混合してもよい。この調製物は、下記の第8.2節に記載した方法のような、当技術分野で周知の技術を用いて調製され得る。一般的には、プロアントシアニジン重合体組成物顆粒および粉末は、限定するものではないが、結晶化、噴霧乾燥または任意の粉砕方法のような当技術分野で公知の方法を用いて、好ましくは高速ミキサー/グラニュレーターを用いて調製することができる。高速ミキサー/グラニュレーターとしては、例えば、「LITTLEFORD LODIGE(商標名)」ミキサー、「LITTLEFORD LODIGE(商標名)」MGTミキサー/グラニュレーター、および「GRAL(商標名)」ミキサー/グラニュレーターが挙げられる。高剪断粉末混合中、結合剤と呼ばれる造粒剤の溶液を粉末上に噴霧して粉末粒子を凝集させ、より大きな粒子または顆粒を形成させる。プロアントシアニジン重合体組成物顆粒を調製するのに有用な造粒剤としては、限定するものではないが、セルロース誘導体(カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロースなど)、ゼラチン、グルコース、ポリビニルピロリドン(PVP)、デンプンペースト、ソルビトール、スクロース、デキストロース、糖みつ、ラクトース、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、トチャカの抽出物、パンウォーゴム、インドゴム、イサポール外皮の粘液、ビーガムおよびカラマツアラボガラクタン、ポリエチレングリコールならびにワックスが挙げられる。造粒剤は、粒子または顆粒の質量の1〜30%の範囲の濃度で添加され得る。
プロアントシアニジン重合体組成物粉末または顆粒は、好ましくは、流動層装置を用いてコーティングされる。次いで、顆粒または粉末をOpadry Clear(水と混合したもの)の封鎖塗によって被覆する。プロアントシアニジン重合体組成物に対して好ましい腸溶コーティングは、30%w/wの乾燥重合体物質を含む水性分散液として塗布される「EUDRAGIT(商標名)L 30D」であり、これは乳化剤として0.7%のラウリル硫酸ナトリウムNF(SLS)および2.3%のポリソルベート80 NF(Tween 20)が添加されており、コーティングの弾力性の向上のために可塑剤であるポリエチレングリコールおよびクエン酸エステルが添加されており、塗布プロセス中に膠着するという腸溶コーティング重合体の傾向を低減し、フィルムコーティングの平滑性を増大させるためにタルクが添加されている。腸溶コーティングされた粉末の最終組成は、81.8%w/wのプロアントシアニジン重合体組成物、1.5%w/wのヒドロキシプロピルメチルセルロース、0.5%w/wのOpadry Clear、14.5%w/wの「EUDRAGIT(商標名)L 30D」、1.45%w/wのクエン酸トリエチル、および0.25%w/wのグリセリルモノステアレートである。腸溶コーティングされた顆粒の最終組成は、81.8%w/wのプロアントシアニジン重合体組成物、10%w/wのポリビニルピロリドン、1.5%w/wのヒドロキシプロピルメチルセルロース、0.5%w/wのOpadry Clear、14.5%w/wの「EUDRAGIT(商標名)L 30D」、1.45%w/wのクエン酸トリエチル、および0.25%w/wのグリセリルモノステアレートである。
腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物顆粒または粉末粒子は、さらに、特に小児投与のために、経口投与用の溶液に懸濁することができる。懸濁液は、溶液の粘性を高めることによりコーティングされた粉末粒子または顆粒の急速な沈降を防止するために増粘剤および保護コロイドが加えられている水性溶液から調製することができる。分子相互作用によって懸濁粒子のまわりに形成された水和層の強度を増大させ、プロアントシアニジン重合体組成物と製薬上相溶性のある任意の物質を増粘剤として使用することができ、限定するものではないが、ゼラチン、天然ゴム(例えば、トラガカント、キサンタン、グアー、アラビア、パンウォー、インドなど)、およびセルロース誘導体(例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなど)が挙げられる。任意に、Tweenなどの界面活性剤を添加することによって増粘剤の作用を向上させることができる。好ましい懸濁溶液は、0.2%のTweenを含有する水に2%w/wのヒドロキシプロピルメチルセルロース溶液を加えたものである。
さらに別の実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物は、腸溶コーティングされた錠剤として製剤化される。この実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物は、任意の製薬上許容できる希釈剤(上記に挙げたものなど)を用いて、プロアントシアニジン重合体組成物顆粒を調製するための上記の方法によって造粒される。次に、顆粒を、当技術分野で周知の方法、例えば、限定するものではないが、湿式造粒法、乾式造粒法または直接圧縮法を用いて錠剤に圧縮する。好ましい希釈剤は、微結晶性セルロース(「AVICEL(商標名)PH 200/300」)である。さらに、上記したような崩壊剤、および上記したような滑剤も錠剤に添加することができる。好ましい錠剤は、250mgのプロアントシアニジン重合体組成物、7mgの崩壊剤「AC-DI-SOL(商標名)」(架橋ナトリウムカルボキシメチルセルロース)、1.75mgの滑剤ステアリン酸マグネシウムおよび混合物を最大350mgにするのに必要な重量の「AVICEL(商標名)PH 200/300」を含有する。錠剤は、250グラムの「EUDRAGIT(商標名)L 30 D-55」、7.5グラムのクエン酸トリエチル、37.5グラムのタルクおよび205グラムの水から調製された腸溶コーティング混合物でコーティングされる。この製剤は、当技術分野で周知の方法または下記の第8.3節に記載された方法によって調製され得る。
小粒子(微小球、マイクロカプセルなどのマイクロメートルオーダーの大きさの粒子を含む)、粒子(ミリメートルオーダーの大きさの粒子を含む)、薬物結晶、ペレット、丸剤および微小ビーズに成形されたプロアントシアニジン重合体組成物は、流動層プロセスを用いてコーティングすることができる。このプロセスは、「GLATT(商標名)」、「AEROMATIC(商標名)」、「WURSTER(商標名)」またはその他で供給されているものなどの流動層装置を使用するものであり、これらによりプロアントシアニジン重合体組成物コアを密閉した円筒型の容器内で下方から導入される空気流によってぐるぐる回し、腸溶コーティングを、それを流動中のコア上に噴霧乾燥することによって形成させるものである。錠剤またはカプセル剤をコーティングするために、Accela-Cotaプロセス(「MANESTY」(商標名))を使用することができる。このプロセスでは、錠剤またはカプセル剤を穴あきジャケットを有する回転円筒式コーティングパンに入れ、噴霧ユニットをパンの内部に取り付け、乾燥空気を回転している錠剤またはカプセル剤に吸い込ませる。「GLATT(商標名)」浸漬刃(sword)プロセス、「DRIAM(商標名)」Doricoater、「STEINBERG(商標名)」装置、「PELLEGRINI(商標名)」装置、または「WALTHER(商標名)」装置などの任意のその他の種類のコーティングパンも使用することができる。
別の好ましい実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物は、直腸投与用の座剤として提供される。座剤は、座剤の調製に製薬上許容でき、プロアントシアニジン重合体組成物と相溶性のある任意のベース物質を用いて製剤化することができる。直腸投与はプロアントシアニジン重合体組成物を胃の酸環境に曝露しないので、直腸投与用医薬製剤は酸条件から組成物を保護するように製剤化する必要がない。プロアントシアニジン重合体組成物を用いて座剤を調製するために使用され得る座剤ベースとしては、限定するものではないが、ココア脂、グリセリン化ゼラチン、水素添加植物油、ポリエチレングリコールの混合物またはポリエチレングリコールの脂肪酸またはグリコール−界面活性剤の組み合わせまたは非イオン性界面活性剤材料(ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル(Tween)、ポリオキシエチレンステアレート、およびソルビタン脂肪酸エステルの混合物(SpanおよびArlacel))が挙げられる。しかしながら、プロアントシアニジン重合体組成物は親水性であることから、座剤用には親水性ベースが提案されている。プロアントシアニジン重合体組成物に対して好ましい座剤は、91グラムのグリセリン、9グラムのステアリン酸ナトリウム、5グラムの精製水から調製され、5%〜50%w/wのプロアントシアニジン重合体組成物でありうる。一方、座剤は、10グラムのプロアントシアニジン重合体組成物、20グラムのゼラチン、および70グラムのグリセリンを含み得る。プロアントシアニジン重合体組成物から調製された座剤は、限定するものではないが、圧縮成形、融合(fusion)、または好ましくは溶融成形などの当技術分野で公知の方法によって形作られ得る。プロアントシアニジン重合体組成物から座剤を調製する方法は、下記の第8.4節に記載されている。
別の実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物は、胃酸を中和する化合物を用いて製剤化される。一方、プロアントシアニジン重合体組成物を含む医薬組成物は、胃酸を中和する医薬組成物の投与と同時または投与後に投与される。胃酸を中和するのに有用な制酸薬などの化合物としては、限定するものではないが、炭酸アルミニウム、水酸化アルミニウム、亜硝酸ビスマス(bismuth subnitrate)、亜サリチル酸ビスマス(bismuth sumsalicylate)、炭酸カルシウム、ジヒドロキシアルミニウム炭酸ナトリウム、マガルドレート、炭酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウムおよびそれらの混合物が挙げられる。
別の実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物は、胃酸の分泌を抑制する化合物を用いて製剤化される。一方、プロアントシアニジン重合体組成物を含む医薬組成物は、胃酸の分泌を抑制する活性のある医薬組成物の投与と同時または投与後に投与される。胃酸の分泌を抑制するのに有用な化合物としては、限定するものではないが、ラニチジン、ニザチジン、ファモチジン、シメチジン、およびミソプロストールが挙げられる。
5.3 用途または使用方法
プロアントシアニジン重合体組成物は、腸管上皮細胞の塩素流出を低減し、分泌性下痢に関連した液体損失および脱水症を生じさせる腸管腔内への液体の移動を低減する。したがって、本発明の医薬製剤および方法は、分泌性下痢に対する予防および治療用途において、特に分泌性下痢に付随する脱水症および電解質損失を防止することにおいて有用である。
プロアントシアニジン重合体組成物の医薬製剤は、ヒトまたは動物における任意の型の分泌性下痢に対して治療または予防的に使用され得る。好ましい実施態様においては、医薬製剤は腸細菌によって引き起こされる分泌性下痢を治療するために用いられる。これらの腸細菌としては、限定するものではないが、コレラ菌(Vibrio cholerae)、腸病原性、腸毒素産生性、腸着生性、腸出血性、または腸侵襲性型の大腸菌(E.coli)などの大腸菌(E.coli)、その他のビブリオspp.(Vibrio spp.)、カンピロバクターspp.(Campylobacter spp.)、サルモネラspp.(Salmonella spp.)、アエロモナスspp.(Aeromonas spp.)、プレジオモナスspp.(Plesiomonas spp.)、赤痢菌spp.(Shigella spp.)、クレブシエラspp.(Klebsiella spp.)、シトロバクターspp.(Citrobacter spp.)、エルジニアspp.(Yersinia spp.)、クロストリジウムspp.(Clostridium spp.)、細菌様spp.(Bacteriodes spp.)、スタフィロコッカスspp.(Staphylococcus spp.)、およびバシラスspp.(Bacillus spp.)が挙げられる。また、この実施態様は、旅行者性下痢の治療も含む。
別の実施態様においては、医薬製剤は、限定するものではないが、ジアルジア(Giardia)およびクリプトスポリジウムspp.(Cryptosporidium spp.)、特にクリプトスポリジウム パルブム(Criptosporidium parvum)などの原生動物によって引き起こされる分泌性下痢を治療するために使用される。
別の実施態様においては、医薬製剤は、限定するものではないが、非特異的下痢、炎症性腸管症候群、潰瘍性大腸炎、胃腸管の癌および新形成などの非感染性病因によって引き起こされる分泌性下痢を治療するために使用される。
別の実施態様においては、本発明の医薬製剤は、AIDS患者におけるHIV−関連慢性下痢の治療のために使用される。さらに別の実施態様においては、医薬製剤は、限定するものではないが、ロタウイルスによって引き起こされる下痢などの、幼児または小児における下痢を治療するために使用される。
本発明の医薬製剤は、非ヒト動物、特に、限定するものではないが、ウシ属動物、ブタ、ヒツジ属動物、家禽(ニワトリなど)およびウマ科動物、ならびにイヌ科動物およびネコ科動物のようなその他の飼いならされた動物のような家畜における下痢を治療するためにも使用され得る。特に、本発明の医薬製剤は、腸毒素産生性、腸出血性およびその他の大腸菌(E.coli)、サルモネラspp.(Salmonella spp.)、ウェルシュ菌(Clostridium perfringens)、細菌様フラジリス(Bacteriodes fragilis)、カンピロバクターspp.(Campylobacter spp.)、およびエルジニア エンテロコリチカ(Yersinia enterocolitica)のような細菌性病原体、原生動物性病原体、特にクリプトスポリジウム パルブム(Cryptosporidium parvum)、およびウイルス性外的病原因子、特にロタウイルスおよびコロナウイルス、さらにトガウイルス、パルボウイルス、カリチウイルス、アデノウイルス、ブレダウイルスおよびアストロウイルスによって引き起こされる、非ヒト動物、特に畜牛、ヒツジ、ブタなどの食用動物における下痢疾患を治療するために使用することができる。
さらに、本発明の医薬製剤は、分泌性下痢の発症を防ぐためにヒトおよび非ヒト動物に予防的に投与することもできる。例えば、限定するものではないが、プロアントシアニジン重合体組成物医薬製剤は、旅行者性下痢の危険がある国に行く旅行者に、病気の予防に有効なときに投与することができる。本発明の医薬組成物は、HIV−関連慢性下痢の発症を防ぐために、AIDS患者に投与することができる。また、本発明の医薬組成物は、コレラ流行またはロタウイルス流行におびやかされた地域の子どもに、病気の広がりを防ぐために投与することができる。同様に、本発明の医薬組成物は、家畜、特に若いか、またはつい最近乳離れした家畜に、下痢疾患の発症を予防するために投与することができる。
本発明の製剤および方法にしたがって分泌性下痢の治療薬として使用する場合、経口投与用のプロアントシアニジン重合体組成物の医薬製剤の有効用量範囲は、0.1〜100mg/kg/日、好ましくは約0.1〜約40mg/kg/日、場合によっては0.1〜25mg/kg/日、さらに場合によっては0.1〜10mg/kg/日の範囲である。適切な用量が分泌性下痢の型および重篤度に依存するということは認識されるであろう。ヒト被検者は、最大2日間で、プロアントシアニジン重合体組成物を1日当たり少なくとも2グラム(25〜30mg/kg/日)まで許容することができるということが分かった。用量は、そのような用量が分泌性下痢の治療に必要な場合には、40mg/kg/日を超えてもよく、場合によっては最大100mg/kg/日であってもよいと考えられる。
本発明の製剤および方法にしたがって分泌性下痢の予防薬として使用する場合、経口投与用のプロアントシアニジン重合体組成物の医薬製剤の有効用量範囲は、0.1〜100mg/kg/日、好ましくは約0.1〜約40mg/kg/日、場合によっては0.1〜25mg/kg/日、さらに場合によっては0.1〜10mg/kg/日の範囲である。適切な用量が予防される分泌性下痢の型および重篤度に依存するということは認識されるであろう。ヒト被検者は、最大2日間で、プロアントシアニジン重合体組成物を1日当たり少なくとも2グラム(25〜30mg/kg/日)まで許容することができるということが分かった。用量は、そのような用量が分泌性下痢の予防に必要な場合には、40mg/kg/日を超えてもよく、場合によっては最大100mg/kg/日であってもよいと考えられる。
プロアントシアニジン重合体組成物は、任意の治療上許容できる剤形で、分泌性下痢の治療または予防のために投与することができる。医薬組成物は、限定するものではないが、薬物結晶、顆粒、小粒子(微小球およびマイクロカプセルのようなマイクロメートルオーダーの大きさの粒子を含む)、粒子(ミリメートルオーダーの大きさの粒子を含む)、ビーズ、微小ビーズ、ペレット、丸剤、マイクロ錠剤、圧縮錠剤もしくは錠剤粉砕物、成形錠剤もしくは錠剤粉砕物、ならびにカプセル剤(硬カプセル剤または軟カプセル剤のどちらかであり、組成物を粉末、粒子、ビーズ、溶液または懸濁液として含む)のような剤形で、経口投与することができる。また、医薬組成物は、水性液中の液剤もしくは懸濁剤として、ゲルカプセルに含有せしめた液体として、または投与に都合のよい任意のその他の剤形として経口投与することもでき、または座剤、浣腸剤またはその他の都合のよい剤形として直腸投与することもできる。
好ましい実施態様において、プロアントシアニジン重合体組成物を含む腸溶コーティングされた医薬組成物は、分泌性下痢の治療または予防のために投与される。好ましい腸溶製剤には、ハードシェルゼラチンカプセルに封入される腸溶コーティングされたビーズ、ハードシェルゼラチンカプセルに封入される腸溶コーティングされた微小球、懸濁液あるいは特に小児への投与に便利な製剤である食品中に混入される腸溶コーティングされた微小球、および腸溶コーティングされた圧縮錠剤が含まれる。別の実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物および胃酸を中和するまたは胃酸の分泌を抑制する化合物を含む医薬組成物を、分泌性下痢の治療のために投与する。さらに別の実施態様においては、プロアントシアニジン重合体組成物を含む医薬組成物を、分泌性下痢の治療のために、胃酸を中和するまたは胃酸の分泌を抑制するような医薬組成物の投与と同時に、またはその投与に続いて投与する。プロアントシアニジン重合体組成物はまた、直腸投与用に坐剤として製剤化することもできる。
本発明の医薬製剤はまた、単独で、または、再水和薬、抗生物質、抗自動運動性薬(anti-motility agent)、およびアタパルガイトのような液体吸収剤のような分泌性下痢の症状の治療または改善のための他の薬剤と組み合わせて投与することができる。
本発明の医薬製剤はまた、動物用飼料に混入して、ウシ、ブタ、ヒツジ、家禽、ウマ、イヌ、およびネコのような動物の分泌性下痢の治療に用いることができる。
以下に記載する実施例は説明を目的とするものであって、本発明の範囲を限定するためのものではない。
6. 実施例:C.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物に対する人工胃液、人工腸液および塩酸の作用
C.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物を経口投与した後、ヒトおよび動物の血漿サンプル中には重合体も重合体の誘導体も検出されなかった。けれども、静脈内投与の後には、動物の血漿中に重合体が検出および定量された。この結果より、プロアントシアニジン重合体組成物は、経口投与されると、胃腸管の中で変化した後、プロアントシアニジン重合体組成物から誘導されるが使用したHPLC法によっては検出されない種となって体循環へ吸収されるという仮説が導き出される。第一の可能性は、プロアントシアニジン重合体組成物が胃腸管中で完全な形のままで吸収されるが、吸収後に迅速に変換されるというものである。さらに、分子量の大きいプロアントシアニジン重合体は胃からも腸からも吸収されないというもう一つの可能性がある。
そこで、C.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物の安定性に対するHCl、人工胃液および人工腸液の作用に関する知見を得るために本研究を行った。ここで用いられた条件は消化管の化学的な条件と類似するように選択した。HClとともにインキュベーションをおこなうと、数分以内にプロアントシアニジン重合体組成物の濃度がおよそ25%減少した。同様に、人工胃液(SGF)とともにプロアントシアニジン重合体組成物をインキュベートすると数分後に32%の減少が、2時間インキュベートした後には48%の減少が観察された。HCl中でインキュベートした場合に観察された損失と比較して、人工胃液中でインキュベートした場合により大きい損失が観察されたのは、人工胃液の中でプロアントシアニジン重合体組成物がペプシンと結合したためではないかと思われる。人工胃液中でのインキュベーション後に、プロアントシアニジン重合体組成物-人工胃液混合物に、人工腸液を加えてインキュベートした場合には、濃度のそれ以上の有意な減少は観察されなかった。
6.1 材料および方法
経口投与されると、薬剤はおよそ2〜3時間胃液と接触した後、十二指腸を通り、そこで胃液と薬剤は迅速に腸液と混合される。したがって、in vivoの条件に最も近づけるために、まずプロアントシアニジン重合体組成物を人工胃液中で2時間インキュベートした後、人工腸液を加えて1:1の比率で希釈し、さらに6時間、37℃でインキュベートした。また、プロアントシアニジン重合体組成物を人工胃液(SGF)、塩酸(HCl)、または水の中で37℃でインキュベートした。それぞれの処理をおこなったサンプルからさまざまな時間間隔でアリコートを採取し、プロアントシアニジン重合体組成物の量をHPLCにより定量した。
試験混合物およびサンプルの調製:
1.人工胃液(SGF)は、USP XX、p.1105に従って、2.0gの塩化ナトリウムおよび3.2gのペプシン(ブタ胃粘膜由来のもの、Sigma)を7.0mlの塩酸および必要量の水(HPLC用等級、Fisher)に溶解して1000mlの溶液となるように調製した。この試験溶液のpHは約1.2であった。
2.人工腸液(SIF)は、USP XX、p.1105に従って、6.8gの一塩基リン酸カリウムを250mlの水に溶かし、190mlの0.2N水酸化ナトリウムおよび400mlの水を加えて調製した。次いで、10.0gのパンクレアチン(ブタ膵臓由来のもの、Sigma)を加えて混合し、得られた溶液を0.2N NaOHによってpH7.5±0.1に調節した。溶液を水で希釈して全体が1000mlとなるようにした。
3.塩酸(pH=1.7)は、800μlの12N塩酸を100mlの水に加えることにより調製した。
4. プロアントシアニジン重合体の貯蔵溶液は、1.0gのC.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物を10mlの蒸留水に溶かして調製した。
手順:
プロアントシアニジン重合体組成物貯蔵溶液を、SGFまたは精製水によって1:20に希釈した(全体の体積を10mlとした)。試験溶液を37℃のオーブン中でインキュベートし、1mlのアリコートを0.03、0.5、および2.0時間の時間間隔で撹拌しながら採取した。アリコートを14,000rpmで10分間遠心分離した後、700μlの上清を取り出し、50mMの二塩基リン酸ナトリウムを含む1N NaOHによってpH7.0±0.1に中和した。2時間のインキュベーション時間の終了時に、SGF中のプロアントシアニジン重合体組成物に1:1の比率でSIFを加えて、pHを7.0±0.1に調節した。最初にSGFとの混合物を作った後、2、2.5、4および6時間後にアリコートを採取して上記のように処理した。中和された上清をテトラヒドロフラン(HPLC用等級、Fisher)で、1:9に希釈した。サンプルを、Hewlett Packard 1050高速液体クロマトグラフを用いたHPLCにより、5m PLgel 500Aカラム(Polymer Laboratories)(300×7.5mm)および5m保護カラム(50×7.5mm)を用い、95%テトラヒドロフランおよび5%水を移動相として、注入量50ml、流速1ml/分および溶出時間11分でアッセイした。プロアントシアニジン重合体は波長280nmのUV吸収をアッセイすることによって検出した。
6.2 結果および考察
プロアントシアニジン重合体組成物を定量するために用いたHPLC法は、誘導体化またはイオン交換の過程を含んでおらず、結合していない、即ち「遊離」のプロアントシアニジン重合体を測定するものであり、タンパク質に結合したプロアントシアニジン重合体は測定しない。さらに、HPLCクロマトグラフィーはサイズ排除クロマトグラフィーを基礎とするので、プロアントシアニジン重合体の分子の大きさの変化(重合または分解)は検出するが、大きさまたは280nmにおける分子吸光係数に影響を与えない化学変化は検出しない。
プロアントシアニジン重合体組成物に対するHClの作用:
C.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物に対するin vitroでのHCl(胃液の主成分)の作用を試験するために、プロアントシアニジン重合体組成物をpH1.2のHCl中で2時間インキュベートした。0.03、0.5および2.0時間インキュベートした後にサンプルを採取し、HPLCを用いて分析した。HCl中でインキュベートした後のプロアントシアニジン重合体組成物のHPLCプロフィールのピーク面積を、水中でインキュベートした後のプロアントシアニジン重合体組成物のピーク面積と比較した(表1)。
結果は、HCl中では0.03時間後にプロアントシアニジン重合体組成物のピーク面積、すなわちプロアントシアニジン重合体組成物の濃度が19%減少したことを示している。HCl中で0.5時間および2.0時間インキュベートした後では、プロアントシアニジン重合体のピーク面積は、それぞれ28%および26%減少した。これらの結果は、HClと接触したことによるプロアントシアニジン重合体組成物の減少の大部分がインキュベーションの最初の2〜3分の間に起こったことを示している。
図1に、水およびHCl中で0.03時間、およびHCl中で2.0時間インキュベーションをおこなった後のプロアントシアニジン重合体組成物のクロマトグラムを示す。HCl中で2時間インキュベーションをおこなった後のプロアントシアニジン重合体のピーク面積の明らかな減少に加えて、ショルダーの保持時間の顕著なシフトが観察された。組成物をHCl中でインキュベートした後に観察されたショルダーの保持時間の5.8分から6.2分へのシフトは、HClがプロアントシアニジン重合体を、わずかに低分子量で元の化合物よりも長い保持時間を有するサブユニットへ分解したためであると説明することができる。
プロアントシアニジン重合体組成物に対するSGFの作用:
C.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物をSGFに加えると、混合物は不透明な赤色の沈殿を形成する。沈殿がペプシンまたは塩化ナトリウムによるものかどうかを決定するために、塩化ナトリウムを除いたSGFまたはペプシンを除いたSGFに、プロアントシアニジン重合体組成物を最終濃度が5mg/mlとなるように加えた。サンプルを14,000rpmで10分間遠心分離した後、ペプシンを含む混合物のみが沈殿を伴う不透明な赤色となり、このことは沈殿がプロアントシアニジン重合体組成物とペプシンの相互作用に起因することを示している。
プロアントシアニジン重合体組成物溶液をSGF中で2分間(0.03時間)インキュベートした後、HPLC分析によりプロアントシアニジン重合体のピーク面積がおよそ32%減少したことが示された。37℃で0.5および2.0時間インキュベーションをおこなった後に採取したサンプルではプロアントシアニジン重合体のピーク面積には有意な変化が見られなかった。SGF中で2分間および2時間インキュベートしたプロアントシアニジン重合体サンプルのクロマトグラムをそれぞれ図2および3に示し、この実験から得られたピーク面積のデータを表2に示す。
プロアントシアニジン重合体の濃度の減少の大部分はSGFと接触して2分以内に起こった。さらに、HPLCアッセイによって検出されたプロアントシアニジン重合体組成物の減少は、SGF中の酸による分解とSGF中でのペプシンとの結合の作用の組み合わせによるものかもしれない。
プロアントシアニジン重合体組成物をSGF溶液に加えた後の曲線下のピーク面積の急激な減少を、それぞれSGF中で2分および2時間インキュベートした後のプロアントシアニジン重合体組成物のクロマトグラムである図4および5に示す。
プロアントシアニジン重合体組成物に対するSIFの作用:
C.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物の小腸における動態をよりよく理解するために、腸液のプロアントシアニジン重合体組成物に対する作用をin vitroで研究した。in vivoの条件に最も近づけるために、プロアントシアニジン重合体組成物をまず人工胃液の中で2時間インキュベートした後、人工腸液を加えて1:1の比率で希釈し、37℃でさらに6時間インキュベートした。プロアントシアニジン重合体組成物-SGF溶液にSIFを加えた後、さまざまな時間間隔で採取したサンプルをHPLCで分析した。典型的なクロマトグラムを図4および5に示す。結果を表3および図6に示すが、この結果は、SIFがプロアントシアニジン重合体組成物の量を有意には減少させないことを示している。
6.3 結論
この研究において試験されたインキュベーション条件は、C.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物が経口投与後に遭遇する条件を模したものである。希塩酸およびSGFと共にプロアントシアニジン重合体組成物を数分間インキュベートすると、いくらかのプロアントシアニジン重合体組成物の損失(25-32%)が観察された。SGF中でインキュベートした場合にHCl中でインキュベートした場合よりも大きい損失が観察されたのは、プロアントシアニジン重合体組成物がSGF中のペプシンと結合するためであると考えられる。人工胃液とプロアントシアニジン重合体組成物の溶液の混合物に、人工腸液を加えてインキュベートした場合、プロアントシアニジン重合体組成物のそれ以上の有意な減少は観察されなかった。
プロアントシアニジン重合体組成物を分析するために用いられた方法はサイズ排除クロマトグラフィーを基礎とするので、この方法では天然のプロアントシアニジン重合体組成物と、大きさの有意な変化を伴わないような化学的な変化を受けたプロアントシアニジン重合体組成物を識別することが不可能なので、ここで得られた結果を解釈する場合には注意が必要である。
7. 実施例:コレラ毒素で処理したマウスにおける液体蓄積に対する腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物の作用の評価
この研究の目的は、コレラ毒素(CT)により処理されたマウスの腸管における液体蓄積に対する、腸溶コーティングされたCroton lechleriから調製されたプロアントシアニジン重合体組成物の作用を測定することである。コレラ毒素がマウスに液体蓄積を起こす病態生理学的メカニズムは、コレラ毒素および他の細菌毒素がヒトに液体蓄積を起こすメカニズムと同一である。このモデルにおいて試験化合物によって液体が減少することは、その化合物が下痢止め薬として有効であることを示している。開始時間(t0)に、マウスにコレラ毒素(平均体重約20gあたり15μg)を経口胃管栄養法により与え、肛門直腸をシアノアクリルアミドエステルによって塞いだ。3時間後(t3 h)、0.75%グアールガム(ビヒクル)中に懸濁させた腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物(131mg/kg)の一回用量を経口胃管栄養法によって投与した。水、並びに等濃度の“EUDRAGITTM”および砂糖をビヒクル中に含む対照溶液も二つの対照群に投与した。7時間コレラ毒素にさらした後(t7 h)、マウスを殺し、幽門から直腸までで盲腸を含むマウスの腸管全体を取り出した。マウスの腸管全体を取り出すのは、液体蓄積は小腸で起こるが、いくらかの液体は大腸に漏れるからである。液体蓄積(FA)を、盲腸を含む腸管および直腸中に蓄積された液体の質量と、腸管の質量から液体の質量を差し引いたものとの比として測定した。この実験条件下では、経口投与された腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物が、コレラ毒素で処理され直腸をふさがれた成体マウスの腸管における液体蓄積を有意に減少させることが示された。腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物(131mg/kg)の経口投与により、水の対照および“EUDRAGITTM”/砂糖/ビヒクルの対照における平均の液体蓄積比と比較して、液体蓄積比をそれぞれ平均45%および38%減少させた。
7.1 コレラ毒素およびプロアントシアニジン重合体組成物の調製
以下の材料を購入した:コレラ毒素(List Biological Lab, lot # CVX-48-3D);シアノアクリルアミドエステル(Borden Inc., Columbus, OH);動物給餌用針(Popper and Sons, Hyde Park, NY);炭酸水素ナトリウム(ACROSlot # 83559/1);グアールガム(Sigma, lot # 94H0195);“EUDRAGITTML30D”(PMRS, lot # R10538);40-60メッシュ砂糖球(PMRS, lot #R10542)。
コレラ毒素貯蔵溶液を調製するために、1mgのコレラ毒素を入れたバイアル瓶に1mlのHPLC用等級の水(Mill Q)を加え、別の二つのバイアル瓶をプールして4℃で保存した。動物に投与するためのコレラ毒素溶液は、240μlのコレラ毒素貯蔵溶液を560μlの7% w/vol NaHCO3で希釈することにより使用時に新しく調製した。NaHCO3の最終濃度は4.9%であった。それぞれのマウスに、15μgのコレラ毒素(50μl容量)を開始時間(t0)に経口胃管栄養法により与えた。
腸溶コーティングされたC.lechleriから得られたプロアントシアニジン重合体組成物の製剤は、17.3%(w/w)のノンパレイユシード(nonpareil seeds)(砂糖球、46/60メッシュ)(Paulaur, lot # 60084060)、64.6%のプロアントシアニジン重合体組成物、1.5%のヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC, Dow Chemical Co., lot # MM9410162E)、0.5%のOpadry Clear(Colorcon, lot # S835563)、14.5%の“EUDRAGITTM L 30D”(Rohm Tech., lot # 1250514132)、1.45%のクエン酸トリエチル(Morflex, lot #N5X291)、モノステアリン酸グリセリル(Rohmm Tech, lot # 502-229)、および精製水(USP)を含むものであった。
プロアントシアニジン重合体組成物を砂糖球の上に重層するための溶液は、HPMCおよびプロアントシアニジン重合体組成物を精製水(USP)に加えて溶解するまで撹拌することにより調製した。ノンパレイユシードを流動床プロセッサー(Niro-Precision Coater)の生成物ボウルに入れた。次いで、プロアントシアニジン重合体組成物/HPMC溶液を、標的の流動床の温度を30-35℃に保ちながら、流動化したノンパレイユシードの上に噴霧した。重層プロセスはすべての溶液を適用し終わるまで続けた。プロアントシアニジン重合体組成物の重層が完了した後、Opadry Clear(Opadry Clearを精製水(USP)と混合して調製)のシールコートを、標的の流動床の温度を30-35℃に保ちながら適用した。シールコートの適用が終わったらペレットを取り出し、1000μおよび425μのふるいにかけ、425μよりも大きく1000μよりも小さい重層された球を流動床プロセッサーの中に戻し入れた。その間に、水にクエン酸トリエチルおよびモノステアリン酸グリセリルを加えて65℃に加熱して混合することにより、腸溶コーティング溶液を調製した。この溶液を撹拌しながら“EUDRAGITTM L 30D-55”に加えた。次に、得られた腸溶コーティング溶液を、流動床プロセッサー中の重層した球上に、流動床の温度を30-35℃に保ちながら、すべての腸溶コーティング溶液がビーズ上に重層されるまで噴霧した。
経口胃管栄養法を容易にし、ビーズがすぐに沈殿することを防ぐために、増粘剤であるグアールガムを用いた。100mlの0.7%グアールガムを調製し、2mlの0.5M HClによってpH2に調節した。腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物ビーズを0.7%グアールガム溶液に懸濁させた。“EUDRAGITTM”および砂糖からなる対照溶液もまた0.7%グアールガム溶液中に等しい最終濃度となるように調製した。
7.2 方法および結果
実験は、Richardson and Kuhn, 1986, Infect. and Immun. 54: 522-528に従っておこなった。生後50日〜52日のオスのマウスで、体重が15.7g〜18.7gのものを用いた。試験動物は野生型C57Bl/6マウスで、Charles River Labから入手した。すべての動物は、実験の期間中、水を随意に与えて代謝ケージの中で飼育した。マウスは実験開始の24時間前から実験期間中にわたって絶食させた。最初(t0 h)に、マウスに15μgのコレラ毒素を経口胃管栄養法によって与えて、シアノアクリルアミドエステル(Superglue)によって肛門直腸を塞いだ。3時間後(t3 h)、腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物をグアールガム溶液へ懸濁させた懸濁液または対照溶液を、経口胃管栄養法によりマウスに投与した。7時間コレラ毒素にさらした後(t7 h)、マウスを殺して、幽門から直腸までで盲腸を含むマウスの腸管全体を取り出した。組織の破裂および液体の損失を防ぐために注意を払い、次に付着した腸間膜および結合組織を取り除いた。組織および内部の液体の質量を化学天秤を用いて測定した。次に、組織を縦に開いて液体を除去し、組織の水分を拭き取った。液体蓄積を、腸(小腸および大腸、盲腸を含む)内に蓄積された液体の質量と、腸の質量から液体の質量を差し引いたものとの比として測定した。
異なる処理に対する液体蓄積比の統計的な比較を、Microsoft Excel(Version 5.0)を用いて分散分析によっておこなった。有意性を決定するために、p<0.05のp-値を用いた。腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物を与えられたマウスにおいて、H2Oのみまたは“EUDRAGITTM”に砂糖を加えて0.75%グアールガム溶液に入れたものを与えられた動物と比較して、統計的に有意なコレラ毒素による液体蓄積比の減少が起こったかどうかを判定するために、Duncanの多重領域試験(Duncan’s multiple range test)をおこなった。
以下に説明する実験において、合計で24匹のマウス(各実験につき8匹のマウス)を次のように処理した。
グループA:t0でマウスにコレラ毒素を与え、続いてt3で水を1度投与し、コレラ毒素の投与後t7で屠殺した。
グループB:t0でマウスにコレラ毒素を与えた。t3でマウスに腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物を1度投与した(131mg/kg体重)。ビヒクルは、酸性化された0.75%グアーガム溶液から成っていた。動物はいずれもt7で屠殺した。
グループC:t0でマウスにコレラ毒素を与えた。t3でマウスに等濃度の「EUDRAGITTM」と糖を1度投与した(「EUDRAGITTM」1.33mg+糖1.046mg/kg体重)。ビヒクルは、酸性化された0.75%グァーガム溶液から成っていた。動物はいずれもt7で屠殺した。
被覆ビーズを腸へ完全に移動させるためにより長いインキュベーション時間が必要であることを示す予備的研究に基づいて、動物はいずれもコレラ毒素の投与後t7で屠殺した。より信頼性のある結果を得るために、動物の数を各グループにつきマウス8匹に増大させた。表4および図7は、密閉(sealed)成体マウスモデルにおいて腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物がコレラ毒素誘発体液分泌に及ぼす影響を示している。見て分かるように、コレラ毒素と共に7時間のインキュベーションを行った後でプロアントシアニジン重合体組成物131mg/kgを1度に投与したところ、コレラ毒素誘発体液蓄積が有意な減少(P<0.05)を呈した。対照の処理(グループAおよびC)を行った後で得られた結果と比較して、腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物ビーズ(グループB)では体液蓄積比が有意な減少を呈し、平均でそれぞれ45%および38%減少した。
この実験で経口栄養法により処理した結果、マウスは一匹も死亡しなかった。
この実験条件下において、腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物は、コレラ毒素で処理された密閉成体マウスの腸中での体液蓄積の有意な減少を呈した。これらの結果に基づくと、腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物(131mg/kg)の経口投与により、体液蓄積比は、「EUDRAGITTM」+糖の対照における平均体液蓄積比と比較して平均で38%減少した。
更に1グループあたり18〜20匹のマウスを使用して行った実験の結果が図8および表5に示されているが、これらの結果は、初期の実験から得られた結果を裏付けるものであった。コレラ毒素に暴露した3時間後(t3)にプロアントシアニジン重合体組成物131mg/kgを与えたグループBのマウスは、t3でEUDRAGITTMおよび糖を含む水を与えたマウスと比較して体液蓄積の有意な減少を呈した。
8. 実施例:医薬用製剤の調製
本発明に係るC. lechleri由来のプロアントシアニジン重合体組成物の様々な好ましい医薬用製剤を製造およびパッケージングするための方法について以下で具体的に説明する。
8.1. カプセル封入され腸溶コーティングされたビーズ
カプセル封入され腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物ビーズ製剤の調製に使用されるバッチ式処方および方法の詳細な説明を以下に記載する。各硬質シェルゼラチンカプセルには、プロアントシアニジン重合体組成物の腸溶コーティングされたビーズ250mgが入っていた。それぞれ16個の250mgキャップを含むHDPEボトル中にカプセルをパッケージングした。腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物のビーズに対する製剤には、17.3%(w/w)のノンパレイユシーズ(40/60メッシュの球状の糖、Paulaur、ロット#60084060)、64.5%のC. lechleri由来プロアントシアニジン重合体組成物、1.5%ヒドロキシプロピルメチルセルロース(Methocel E5 Premium、Dow Chemical Co.、ロット#MM9410162E)、0.5%のOpadry Clear(Colorcon、ロット#S83563)、14.5%の「EUDRAGITTM L30D」(Rohm Tech.、ロット#1250514132)、1.45%のクエン酸トリエチル(Morflex、ロット#N5X291)、グリセリルモノステアレート(Imwitor-900、Rohm Tech、ロット#502-229)、および精製水(USP)が含まれていた。
プロアントシアニジン重合体組成物を含有する層形成するコーティング溶液は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースとプロアントシアニジン重合体組成物を精製水(USP)に添加して溶解するまで混合することにより調製した。流動床プロセッサー(Nior-精密コーティング器)の製造ボール中にノンパレイユシーズを充填した。次に、目標の床温度30〜35℃において流動化ノンパレイユシーズ上にこの重合体溶液を噴霧することにより、ノンパレイユシーズ上に重合体溶液の層を形成させた。プロアントシアニジン重合体の層形成が完了した後、目標床温度30〜35℃でOpadry Clearを用いたシールコート(Opadry Clearを精製水(USP)と混合することにより調製した)を適用した。封入コーティングを塗布した後、ペレットを取出して1000μおよび425μスクリーンに通し、425μより大きくかつ1000μよりも小さい層形成された球を流動床プロセッサー中に戻した。その間に、65℃まで加熱された水にクエン酸トリエチルとグリセリルモノステアレートを添加混合し、次いでこの溶液を「EUDRAGITTM L30D-55」と混合することにより腸溶コーティング溶液を調製した。得られた腸溶コーティング溶液を層形成された球上に床温度30〜35℃の流動床プロセッサー中で噴霧し、すべての腸溶コーティング溶液をビーズ上に層形成させた。プロアントシアニジン重合体組成物が52.9%の濃度で存在することを示すHPLCアッセイの結果に基づいて、投与量が250mgとなるようにサイズ#0の硬質シェルゼラチンカプセル中に手で腸溶コーティングされたビーズを充填し、次いで、熱誘導ライニングキャップを備えた好適なHDPEボトル中にパッケージングした。
8.2. 腸溶コーティングされた顆粒および粉末粒子
腸溶コーティングされた顆粒もしくは粉末(直径300〜500μを有する微小球)を硬質シェルゼラチンカプセル中に入れるかまたは経口溶液中に懸濁させた形態でプロアントシアニジン重合体組成物を処方するための方法について以下に説明する。プロアントシアニジン重合体組成物粉末粒子は、高速ミキサー/グラニュレーター中でプロアントシアニジン重合体組成物とヒドロキシプロピルメチルセルロースを高剪断粉末混合することにより調製される。プロアントシアニジン重合体組成物顆粒は、粉末粒子が凝集してより大きな顆粒を形成するように高速ミキサー/グラニュレーター中で粉末上にポリビニルピロリドンを噴霧することにより調製される。次に、流動床装置を用いて、顆粒または粉末をOpadry Clear(水と混合したもの)の封入コートで覆い、続いて、30%w/w乾燥メタクリレート重合体物質を含有する水性分散液として適用される腸溶コーティング「EUDRAGITTM L 30D」でコーティングするが、この分散液には、乳化剤として0.7%のラウリル硫酸ナトリウムNF(SLS)および2.3%のポリソルベート80NF(Tween20)が供給され、更に、コーティングの弾性を改良するために、可塑剤であるクエン酸トリエチルおよびグリセリルモノステアレートが添加される。腸溶コーティングされた粉末の最終組成は、プロアントシアニジン重合体組成物81.8%w/w、ヒドロキシプロピルメチルセルロース1.5%w/w、Opadry clear 0.5%w/w、「EUDRAGITTM L 30D」14.5%w/w、クエン酸トリエチル1.45%w/w、およびグリセリルモノステアレート0.25%w/wである。腸溶コーティングされた顆粒の最終組成は、プロアントシアニジン重合体組成物81.8%w/w、ポリビニルピロリドン10%w/w、ヒドロキシプロピルメチルセルロース1.5%w/w、Opadry clear 0.5%w/w、「EUDRAGITTM L 30D」14.5%w/w、クエン酸トリエチル1.45%w/w、およびグリセリルモノステアレート0.25%w/wである。
腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物顆粒または粒子は、好適な投与量を与える量で硬質シェルゼラチンカプセル中に充填してもよい。
腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物顆粒または粉末粒子はまた、経口投与のために、特に、小児に投与するために、溶液中に懸濁させることもできる。懸濁溶液を調製するには、蒸留水97.8mlおよびTween80 0.2グラムの中でヒドロキシプロピルメチルセルロース2グラムを湿潤させ、この調製物を、超音波処理、40℃までの加熱、および3時間にわたる攪拌により均質になるまで混合し、更に、腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物粉末粒子または顆粒を均質溶液中に添加する。
8.3. 腸溶コーティングされた圧縮錠剤
腸溶コーティングされた錠剤としてプロアントシアニジン重合体組成物を処方するための方法について以下に説明する。各錠剤350mgに対して、架橋ナトリウムカルボキシメチルセルロース(「AC-DI-SOLTM」)7mgおよび十分量の微晶質セルロース(「AVICELTM PH 200/300」)と共に合計量が350mgとなるようにプロアントシアニジン重合体組成物250mgを顆粒化する。これらの成分をVブレンダー中で20〜30分間混合する。20〜30分間の混合を行った後、ステアリン酸マグネシウム1.75mgを添加し、この混合物を更に4〜5分間ブレンドする。得られた顆粒を5/16インチの標準的な凹型パンチを用いた回転式錠剤成形機にかけて圧縮する。「EUDRAGITTM L 30 D-55」250グラム、クエン酸トリエチル7.5グラム、タルク37.5グラム、および水205グラムから調製された腸溶コーティングされた混合物で錠剤をコーティングする。次に、有孔パンコーター(例えば、「ACCELA-COTATM」システム)中に錠剤を配置し、40℃において15rpmで回転させる。腸溶コーティングされた製剤を次の条件を用いて噴霧する:吸入空気温度44℃〜48℃、排出空気温度29℃〜32℃、生成物温度26℃〜30℃、1mm噴霧ノズル、パンスピード30〜32rpm、空気流量30〜32CFM、および噴霧圧力20PSI。最後に、60℃の吸入空気温度においてパンを15rpmで回転させながら30分間かけて錠剤を硬化させ、次いで熱を遮断した後、錠剤が冷却されて室温になるまで15rpmで錠剤を回転させる。
8.4. 坐剤
直腸投与のための坐剤としてのプロアントシアニジン重合体組成物の処方について以下に説明する。プロアントシアニジン重合体組成物に対する坐剤製剤の1つは、グリセリン91グラムを120℃まで加熱し、加熱したグリセリンにステアリン酸ナトリウム9グラムを溶解させ、次いで精製水5グラムを添加することにより調製することができる。このベースにプロアントシアニジン重合体組成物5%〜50%を添加し、次いで混合物を好適な型に注入する。このほか、ゼラチン20グラムおよびグリセリン70グラムを70℃まで加熱し、2時間攪拌し、次いで、予め5分間超音波処理し、均質な混合物が得られるまで40℃で攪拌することにより精製水中に溶解させたプロアントシアニジン重合体組成物10グラムを添加することによって、坐剤を調製してもよい。次に、坐剤を調製するために好適な型の中に製剤を注入してもよい。
9. 実施例:旅行者下痢または非特異性下痢を患った患者におけるプロアントシアニジン重合体組成物含有製剤の効果
急性の非特異性下痢および旅行者下痢の症状に対する治療におけるC. lechleri由来プロアントシアニジン重合体組成物の安全性および有効性を調べるために最初に20人の患者に対して行ったオープンラベル臨床試験から得られた結果を以下にまとめる。
9.1 ヒトに対する安全性および有効性の研究
旅行者下痢を患った合計20人の患者を研究対象とした。患者集団は、メキシコにいる米国から来た学生である若い(平均年齢=24歳)男性および女性の患者から成っていた。入国の際に検査員が学生を募集し、下痢が進行した後でかつ他の投薬を行う前に診療所に報告するように指示した。
被験者に対して次のパラメータを評価した。
a)通常の排便頻度(1日または1週間あたりの排便の回数)
b)下痢の始まった日時。
c)24時間前からの排便の回数。次のような一貫した基準に従って分類した。
−有形物:水中でもとの形状を保持する。
−軟質物:容器の形状になる。
−流動物:流動可能である。
(混合形態の便(例えば、軟質物/流動物)は、形状保持性の低いカテゴリー(例えば、流動物)に分類した。)
d)24時間前から現在までに現れた次の症状。
−痙攣
−肛門刺激
−テネスムス
−便意促迫(タイミングを15分間程度遅らせることができない)
−大便失禁(便通の調節能力の低下)
−不自由(通常の活動が妨げられる)
−悪心
−嘔吐
−腸内ガスの増大
スクリーニング評価の終了後、基準となる実験室試験のためのサンプルを入手し、研究のための1回目の投薬を行った。被験者に対して初回量1250mgの腸溶コーティングされたプロアントシアニジン重合体組成物を投与し、最初の24時間の治療に対して6時間ごとに更に250mgずつ3回の投与を行い、その後、投与2日目に1日合計2グラムとなるように1日4回500mgずつを投与した。プロアントシアニジン重合体組成物は、2日間だけ投与した。
基準となる診療所への訪問の間、研究のための患者に対して日記の記録および形状の観察を正確に行えるようにトレーニングし、次の評価パラメータを考慮対象にした。
1. 安全性
研究中に経験した副作用について患者に尋ねた。これらの副作用は、重症度、期間、研究用薬剤との関係、および採られた対策に関連して分類した。初期および研究終了時に採取した血液および尿を利用して変化を評価した。
2. 有効性
患者の日記および診療所への訪問から有効性を評価した。測定した重要な有効性パラメータは、排便頻度、一貫性、および無形の便の続いた時間であった。
9.2 結果
研究中、いずれの被験者においてもプロアントシアニジン重合体組成物が原因とみなしうる有意な副作用は観測されなかった。この実験に対する主要な有効性パラメータには、各自の報告した排便頻度および無形の便の続いた時間が含まれていた。これらのデータは表7にまとめられている。
平均すると、研究中3日間にわたり異常な排便頻度は正常に向かう傾向を示した。1日あたりの平均排便回数は、3日目でほぼ正常な頻度に戻った。4名の患者については、研究3日目に各自の正常な排便頻度に戻った。このほか、無形の便の続いた時間は平均で30.3時間であった。
胃腸の症状についての基準および追跡の報告を入手した。悪心、嘔吐、痙攣、ガス、便意促迫、テネスムス、肛門刺激、失禁、および不自由を含む9つの症状について重症度(軽症、中症、または重症)を記録するように患者に依頼した。
3日間の研究が終わるまでに合計9名の患者はこれらの症状が消失した。表8は、記載の時間までにすべての症状が消失した患者の数を示している。
症状が現れないときは0、軽症のときは1、中症のときは2、重症のときは3のスコアを与えることにより、症状に対する合計スコアを求めた。各時期におけるすべての患者の合計スコアを平均した値が表9に示されている。
データを綿密に調べることにより、次のような結論に達した:
1.薬剤は一般的には十分に許容範囲内にあったが、3名の患者は、研究対象の薬剤が関係すると思われる重症の一定の限られた進行経過をたどる限定性悪心を経験した。しかしながら、本研究では、副作用により研究からはずれる患者は一人も見られなかった。
2.治療期間中、血清化学上または血液学上の有意な変化は生じなかった。ただし、6名の患者は、検尿検査において変化が少し現れた。検尿検査におけるこれらの変化が有意な副作用を呈するものとは考えられない。これらの結果が研究対象の薬剤を使用した結果であるのかまたは潜伏していた疾患が進行したものかは不明であった。
3.排便頻度は、3日間の研究期間にわたり正常な頻度に戻る傾向を示した。
4.無形の便の続いた平均の時間は、従来の対照では69時間と報告されているのに対して30.3時間であった。
要約すると、更に、C. lechleri由来のプロアントシアニジン重合体組成物の腸溶コーティングされた製剤は、旅行者下痢にかかった患者の排便頻度および胃腸症状を回復させるのに有用であると結論付けられる。全体として薬剤は安全であるが、ただし、最もよく見られる症状として悪心が挙げられる。
本明細書中で説明および特許請求された本発明は、本明細書中に開示された特定の実施態様によって範囲が限定されるものではない。なぜなら、これらの実施態様は、本発明のいくつかの態様を例示することを目的としているからである。同等な実施態様はいずれも、本発明の範囲内にあるとみなされる。実際に、本明細書中に図示および説明されたもののほかに本発明の様々な修正が可能であることは当業者には自明であろう。このような修正は、添付の請求の範囲内に入るとみなされる。
本明細書中に引用されているすべての出版物は、引用によりその全体が本明細書中に含まれるものとする。
Claims (28)
- クロトン属の種(Croton spp.)から単離されたプロアントシアニジン重合体組成物、製薬上許容される担体および腸溶コーティングを含む、経口投与用医薬組成物。
- クロトン属の種がクロトン・レクレリ(Croton lechleri)であることを特徴とする、請求項1に記載の医薬組成物。
- カプセル剤として製剤化されていることを特徴とする、請求項1または2に記載の医薬組成物。
- 腸溶コーティングされたビーズを含む硬質シェルゼラチンカプセル剤として製剤化されていることを特徴とする、請求項3に記載の医薬組成物。
- 硬質シェルゼラチンカプセル中に入れるかまたは小児に投与するために経口溶液中に懸濁させた、腸溶コーティングされた顆粒もしくは粉末(直径300〜500μmを有する微小球)として製剤化されていることを特徴とする、請求項1または2に記載の医薬組成物。
- 顆粒を圧縮し腸溶コーティングした錠剤として製剤化されていることを特徴とする、請求項1または2に記載の医薬組成物。
- 腸溶コーティングが酸でイオン化可能な基を有するメタクリル酸−メタクリル酸エステル共重合体を含むことを特徴とする、請求項1〜6のいずれか1項に記載の医薬組成物。
- 腸溶コーティングが可塑剤をさらに含むことを特徴とする、請求項7に記載の医薬組成物。
- 可塑剤がポリエチレングリコールエステルおよびクエン酸エステルであることを特徴とする、請求項8に記載の医薬組成物。
- 滑剤を含むことを特徴とする、請求項1に記載の医薬組成物。
- 滑剤がステアリン酸マグネシウムであることを特徴とする、請求項10に記載の医薬組成物。
- クロトン属の種(Croton spp.)から単離されたプロアントシアニジン重合体組成物、製薬上許容される担体および腸溶コーティングを含む組成物の、医薬の製造における使用。
- クロトン属の種(Croton spp.)から単離されたプロアントシアニジン重合体組成物、製薬上許容される担体および腸溶コーティングを含む組成物の、分泌性下痢を治療するための医薬の製造における使用。
- クロトン属の種(Croton spp.)から単離されたプロアントシアニジン重合体組成物、製薬上許容される担体および腸溶コーティングを含む組成物の、分泌性下痢を予防するための医薬の製造における使用。
- クロトン属の種がクロトン・レクレリ(Croton lechleri)であることを特徴とする、請求項12〜14のいずれか1項に記載の使用。
- 分泌性下痢が非ヒト動物におけるものであることを特徴とする、請求項13〜15のいずれか1項に記載の使用。
- 非ヒト動物がウシ属動物、ブタ、ヒツジ属動物、家禽、ウマ科動物、イヌ科動物およびネコ科動物よりなる群から選択されることを特徴とする、請求項16に記載の使用。
- 分泌性下痢がヒトにおけるものであることを特徴とする、請求項13〜15のいずれか1項に記載の使用。
- 分泌性下痢を患うヒトが幼児または子供であることを特徴とする、請求項18に記載の使用。
- ヒトがHIV関連慢性下痢の治療を受けていることを特徴とする、請求項18または19に記載の使用。
- 分泌性下痢がクリプトスポリジウム属の種(Cryptosporidium spp.)により引き起こされることを特徴とする、請求項13〜19のいずれか1項に記載の使用。
- 分泌性下痢が細菌によって引き起こされることを特徴とする、請求項13〜19のいずれか1項に記載の使用。
- 細菌が大腸菌(Escherichia coli)、ビブリオ属の種(Vibrio spp.)、カンピロバクター属の種(Campylobacter spp.)、サルモネラ属の種(Salmonella spp.)、エロモナス属の種(Aeromonas spp.)、プレジオモナス属の種(Plesiomonas spp.)、シゲラ属の種(Shigella spp.)、クレブシェラ属の種(Klebsiella spp.)、シトロバクター属の種(Citrobacter spp.)、エルシニア属の種(Yersinia spp.)、クロストリジウム属の種(Clostridium spp.)、バクテロイデス属の種(Bacteroides spp.)、スタヒロコッカス属の種(Staphylococcus spp.)およびバシラス属の種(Bacillus spp.)、クロストリジウム・ペルフリンゲンス(Clostridium perfringens)、バクテロイデス・フラギリス(Bacteroides fragilis)、カンピロバクター属の種(Campylobacter spp.)、エルシニア・エンテロコリチカ(Yersinia enterocolitica)、クリプトスポリジウム・パルバム(Cryptosporidium parvum)の群から選択されることを特徴とする、請求項22に記載に使用。
- 細菌が毒素原性大腸菌またはカンピロバクター・ジェジュニ(Campylobacter jejuni)であることを特徴とする、請求項22または23に記載の使用。
- 分泌性下痢がウイルス性因子により引き起こされることを特徴とする、請求項13〜19のいずれか1項に記載の使用。
- ウイルス性因子がロタウイルスまたはコロナウイルスであることを特徴とする、請求項25に記載の使用。
- 分泌性下痢が非感染性病因により引き起こされることを特徴とする、請求項13〜20のいずれか1項に記載の使用。
- 非感染性病因が非特異的下痢、潰瘍性大腸炎、炎症性腸管症候群(inflammatory bowel syndrome)、ならびに胃腸管の癌および新生物の群から選択されることを特徴とする、請求項27に記載の使用。
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ES2522895T3 (es) | 2005-03-03 | 2014-11-19 | Alfa Wassermann S.P.A. | Nuevas formas polimorfas de rifaximina, procedimientos para su producción y uso de las mismas en preparados medicinales |
ITBO20050123A1 (it) | 2005-03-07 | 2005-06-06 | Alfa Wassermann Spa | Formulazioni farmaceutiche gastroresistenti contenenti rifaximina |
US20090076132A1 (en) * | 2005-03-11 | 2009-03-19 | Gary Pekoe | Antiviral compositions and methods of treatment |
JP5167461B2 (ja) * | 2005-09-16 | 2013-03-21 | 国立医薬品食品衛生研究所長 | 炎症性腸疾患予防剤 |
US7351853B2 (en) * | 2006-01-23 | 2008-04-01 | Albion Advanced Nutrition | Method of manufacturing a granular mineral composition |
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WO2007130892A2 (en) * | 2006-05-01 | 2007-11-15 | Napo Pharmaceuticals, Inc. | Method for treatment of constipation-predominant irritable bowel syndrome |
US20070254050A1 (en) * | 2006-05-01 | 2007-11-01 | Quart Barry D | Method for treatment of diarrhea-predominant irritable bowel syndrome |
US8048413B2 (en) * | 2006-05-17 | 2011-11-01 | Helene Huguet | Site-specific intestinal delivery of adsorbents, alone or in combination with degrading molecules |
WO2008083513A1 (fr) * | 2006-12-13 | 2008-07-17 | Beijing Gingko-Group Biological Technology Co., Ltd. | Extrait de pellicule de soja noir et procédé de préparation et d'utilisation de cet extrait |
WO2008115605A1 (en) * | 2007-03-22 | 2008-09-25 | Ibix | Clear bismuth treatments and methods for making |
US20110038917A1 (en) * | 2007-05-08 | 2011-02-17 | Rq Bioscience, Inc. | Therapeutic compositions and methods for treating gram-negative bacterial infections |
US8734867B2 (en) * | 2007-12-28 | 2014-05-27 | Liveleaf, Inc. | Antibacterial having an extract of pomegranate combined with hydrogen peroxide |
CA2712500A1 (en) * | 2008-01-24 | 2009-07-30 | Vitae Pharmaceuticals, Inc. | Cyclic carbazate and semicarbazide inhibitors of 11beta-hydroxysteroid dehydrogenase 1 |
WO2009131958A2 (en) * | 2008-04-21 | 2009-10-29 | Institute For Oneworld Health | Compounds, compositions and methods comprising triazine derivatives |
WO2009131947A2 (en) * | 2008-04-21 | 2009-10-29 | Institute For Oneworld Health | Compounds, compositions and methods comprising pyridazine derivatives |
US8236838B2 (en) * | 2008-04-21 | 2012-08-07 | Institute For Oneworld Health | Compounds, compositions and methods comprising isoxazole derivatives |
WO2009131957A2 (en) | 2008-04-21 | 2009-10-29 | Institute For Oneworld Health | Compounds, compositions and methods comprising oxadiazole derivatives |
WO2010033626A1 (en) * | 2008-09-19 | 2010-03-25 | Institute For Oneworld Health | Compounds, compositions and methods comprising imidazole and triazole derivatives |
US20100034968A1 (en) * | 2008-08-07 | 2010-02-11 | Vector Corporation | Polymer coating process using dry glidant in a rotor processor |
US8807070B2 (en) * | 2008-08-07 | 2014-08-19 | Vector Corporation | Rotor processor for dry powders |
US20100034967A1 (en) * | 2008-08-07 | 2010-02-11 | Vector Corporation | Dry polymer layering using a rotor processor |
FR2938430B1 (fr) * | 2008-11-14 | 2011-05-20 | Debregeas Et Associes Pharma | Granules a base de plantes |
JP2012519690A (ja) * | 2009-03-04 | 2012-08-30 | メタアクティブ、インコーポレイテッド | 生体分子の部位活性化複合体形成方法及び材料 |
US8511216B2 (en) * | 2009-03-30 | 2013-08-20 | Kanzaki Kokyukoki Mfg. Co., Ltd. | Hydraulic actuator unit |
US8343976B2 (en) * | 2009-04-20 | 2013-01-01 | Institute For Oneworld Health | Compounds, compositions and methods comprising pyrazole derivatives |
EA023814B1 (ru) * | 2009-08-26 | 2016-07-29 | Гленмарк Фармасьютикалс Лтд. | Способ получения полимерных композиций на основе проантоцианидина для фармацевтических форм |
US8652534B2 (en) | 2009-10-14 | 2014-02-18 | Berry Pharmaceuticals, LLC | Compositions and methods for treatment of mammalian skin |
IT1398550B1 (it) | 2010-03-05 | 2013-03-01 | Alfa Wassermann Spa | Formulazioni comprendenti rifaximina utili per ottenere un effetto prolungato nel tempo |
WO2012058664A1 (en) * | 2010-10-31 | 2012-05-03 | Salix Pharmaceuticals, Ltd. | Methods and compositions for treating hiv-associated diarrhea |
WO2012101008A1 (en) | 2011-01-27 | 2012-08-02 | Glenmark Pharmaceuticals Limited | Process for the production of proanthocyanidin polymeric composition |
WO2012135702A1 (en) * | 2011-04-01 | 2012-10-04 | Ocean Spray Cranberries, Inc. | Inflammation and immunity treatments |
US9192635B2 (en) | 2011-06-24 | 2015-11-24 | Liveleaf, Inc. | Method of treating damaged mucosal or gastrointestinal tissue by administering a composition comprising a mixture of pomegranate and green tea extracts and releasably bound hydrogen peroxide |
US8722040B2 (en) | 2011-06-24 | 2014-05-13 | Liveleaf, Inc. | Site-activated binding systems that selectively increase the bioactivity of phenolic compounds at target sites |
ITBO20110461A1 (it) | 2011-07-29 | 2013-01-30 | Alfa Wassermann Spa | Composizioni farmaceutiche comprendenti rifaximina, processi per la loro preparazione e loro uso nel trattamento di infezioni vaginali. |
IN2014MN01933A (ja) * | 2012-03-13 | 2015-07-10 | Piramal Entpr Ltd | |
ITBO20120368A1 (it) | 2012-07-06 | 2014-01-07 | Alfa Wassermann Spa | Composizioni comprendenti rifaximina e amminoacidi, cristalli di rifaximina derivanti da tali composizioni e loro uso. |
US8716351B1 (en) | 2012-12-23 | 2014-05-06 | Liveleaf, Inc. | Methods of treating gastrointestinal spasms |
ITMI20130476A1 (it) * | 2013-03-28 | 2014-09-29 | Novintethical Pharma Sagl | Composizioni per il trattamento di disturbi gastro-intestinali a base di complessi di tannini con proteine |
CN103536583B (zh) * | 2013-11-01 | 2015-02-25 | 潍坊医学院 | 一种原花青素缓释纳米微球及制备方法和应用 |
ES2810010T3 (es) | 2014-05-12 | 2021-03-08 | Alfasigma Spa | Preparación y uso de la forma cristalina tau de rifaximina solvatada con DEGME |
WO2015184109A1 (en) * | 2014-05-29 | 2015-12-03 | Jaguar Animal Health, Inc. | Methods of treating diarrhea in adult non-human animals |
WO2015184101A1 (en) * | 2014-05-29 | 2015-12-03 | Jaguar Animal Health, Inc. | Methods of treating diarrhea in neonatal and young non-human animals |
US20170095442A1 (en) * | 2014-05-29 | 2017-04-06 | Jaguar Animal Health, Inc. | Methods of Treating Salmonella-Induced Diarrhea in Non-Human Animals |
CN107106536A (zh) | 2015-01-09 | 2017-08-29 | 美洲豹动物健康公司 | 治疗伴侣动物的腹泻的方法 |
WO2016138118A1 (en) * | 2015-02-26 | 2016-09-01 | Jaguar Animal Health, Inc. | Use of croton- or calophyllum-derived proanthocyanidin polymers or botanical extracts in combination with rifaximin for the treatment of diarrhea in non-human animals |
CN107427697A (zh) * | 2015-02-26 | 2017-12-01 | 捷豹健康股份有限公司 | 在非人动物中治疗腹泻和促进肠道健康的方法 |
WO2018022475A1 (en) * | 2016-07-25 | 2018-02-01 | Jaguar Health, Inc | Methods of treating porcine epidemic diarrheal virus in piglets |
IT201600122310A1 (it) | 2016-12-01 | 2018-06-01 | Sofar Spa | Composizione per uso nella terapia di alterazioni dell'intestino |
EP3554254A1 (en) | 2016-12-15 | 2019-10-23 | Société des Produits Nestlé S.A. | Compositions and methods that modulate bacteria in a companion animal |
JOP20190275A1 (ar) | 2017-05-31 | 2019-11-27 | Napo Pharmaceuticals Inc | طرق وتركيبات لعلاج اضطراب إسهال خِلقي |
JOP20190276A1 (ar) | 2017-05-31 | 2019-11-27 | Napo Pharmaceuticals Inc | طرق وتركيبات لعلاج إسهال الحمض الصفراوي، والإسهال المرتبط باستئصال الأمعاء الدقيقة أو إزالة المرارة، ومتلازمة الأمعاء القصيرة |
JP7237014B2 (ja) * | 2017-12-27 | 2023-03-10 | サントリーホールディングス株式会社 | 腸管バリア機能改善用組成物 |
KR20200008826A (ko) | 2018-07-17 | 2020-01-29 | 성균관대학교산학협력단 | 대장균을 이용한 단백질가수분해효소 k의 생산 방법 |
CN109464491B (zh) * | 2018-12-03 | 2022-02-01 | 四川省畜牧科学研究院 | 诃子组合物及其在制备预防和/或治疗腹泻和/或***炎的产品中的应用 |
WO2022115481A1 (en) * | 2020-11-24 | 2022-06-02 | Napo Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating post-acute infection gastrointestinal disorders |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2377201A1 (fr) * | 1977-01-18 | 1978-08-11 | Fabre Sa Pierre | Composition pharmaceutique a activite anti-inflammatoire et vasculotrope |
SE446940B (sv) * | 1983-02-16 | 1986-10-20 | Carl Axel Virdalm | Medel for bekempande av sjukdomstillstand i matsmeltningsapparaten innehallande skal eller ytterdelar av ber eller frukter |
US4698360B1 (en) * | 1985-04-09 | 1997-11-04 | D Investigations Pharmacologiq | Plant extract with a proanthocyanidins content as therapeutic agent having radical scavenger effect and use thereof |
DE3564370D1 (en) * | 1985-08-30 | 1988-09-22 | Nestle Sa | Dietetic product with depurating and antidiarrheal activity and process for its preparation |
US5141735A (en) * | 1990-06-18 | 1992-08-25 | Hoffman-La Roche, Inc. | Substituted amino-benzodiazepines having anitviral activity |
US5211944A (en) * | 1990-10-12 | 1993-05-18 | Shaman Pharmaceuticals, Inc. | Proanthocyanidin polymers having antiviral activity and methods of obtaining same |
SI9011933A (sl) | 1990-10-15 | 1998-06-30 | TANIN SEVNICA Kemična industrija p.o. | Kostanjev taninski ekstrakt, postopek za njegovo pridobivanje in njegova uporaba |
US5234922A (en) | 1992-09-28 | 1993-08-10 | University Of Iowa Research Foundation | Use of sulfonylureas and other potassium channel regulators to treat secretory diarrhea |
US5750496A (en) * | 1996-08-12 | 1998-05-12 | Utah State University | Method of controlling cryptosporidium infectons using protease inhibitors |
CA2269078C (en) | 1996-10-16 | 2012-01-24 | Shaman Pharmaceuticals, Inc. | Enteric formulations of proanthocyanidin polymer antidiarrheal compositions |
-
1997
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