JP3687747B2 - 皮膚外用剤 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は化粧品あるいは皮膚科学的技術分野に関し、特に表皮細胞におけるラミニン５の産生能を高め、ヒト皮膚基底膜をケアして皮膚の老化を防止することのできる皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
表皮細胞におけるラミニン５の産生能を増強しうる薬剤としてはこれまでに大豆由来の調製物やリゾフォスファチジルコリン、リゾフォスファチジン酸等が知られている（特開平１１−３４３２２６号、特開２０００−２２６３０８号公報）。しかし、皮膚の正常な特性および機能維持における多様な機序が関与しうることについての示唆の存在を考慮すれば、そして可能であるなら、上記薬剤や調製物とは異なるカテゴリーに入る可能性があるが、または起源に由来する物質であって、表皮細胞におけるラミニン５の産生を高めうる物質の提供が望まれるであろう。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、第一に、表皮細胞におけるラミニン５の産生能を高めうる物質の多様化を図り、第二に、ヒト皮膚におけるラミニン５の産生能を高めることにより、延いては、ヒト皮膚基底膜の正常な構造または機能の維持または修復を行うための化粧料または皮膚科学的組成物を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記目的を達成すべく多種多様の物質についてラミニン５の産生能の増強作用について検討してきた。その結果、上述の大豆抽出物とは異なる特定の植物抽出物が優れたラミニン５の産生能を増強しうることを見出し、本発明を完成するに至った。後記するこれらの植物抽出物のラミニン５の産生能の増強作用等に関する報告は本発明者らの知る限りではこれまでに存在しておらず、抗皮膚老化剤への使用のみならず、皮膚外用剤への使用も全く知られていない。本発明はかかる知見に基づくものである。
【０００５】
したがって、本発明によれば、ケシ科ボコニア（Bocconia）属植物、マメ科プソフォカルプス（Psophocarpus）属植物、マメ科カシア（Cassia）属植物、マメ科エリスレア（Erythraea）属カンチャラグア（Canchalagua、学名：Erythraea chilensisまたはGentiana canchalagua）よりなる群から選ばれる植物の抽出物の一種または二種以上を有効成分とする皮膚外用剤が提供される。
【０００６】
【発明の実施の形態】
ラミニン５は、表皮と真皮の境界部に位置する表皮基底膜と呼ばれる各種糖蛋白質、プロテオグリカンより構成される構造体の主成分である（Rousselle ら、J．Cell Biol．114、567、1991）。ラミニン５が遺伝子異常によって欠損すると表皮水泡症が発生することが知られ、表皮の真皮への結合に必須のタンパク質である（Aberdam ら、Nat．Genet.，6、299、1994）。また、ラミニン５は、表皮基底膜形成を促進することが知られている（Tsunenaga ら、Matrix Biology 17、603、1998）。理論を述べることにより拘束されるものではないが、より具体的には、ラミニン５は正常な基底膜構造またはその機能の維持または修復に寄与し、日々の生活において紫外線、乾燥などの外的ストレス、さらに、精神的ストレスなどの内的なストレスによって傷害を受けて引起される基底膜の構造変化を修復することで皮膚の老化の進行を遅延させることができる。換言すれば、前記ラミニン５の産生を増強することは、ヒト皮膚基底膜の正常な構造の維持に役立ち、延いては、皮膚老化の防止または改善（抗老化）をもたらすであろう。
【０００７】
なお、「抗老化」とは、加齢や光老化等による基底膜の構造変化の蓄積に伴う皮膚の機能低下、具体的には、皮膚のしわ、たるみ、硬化等を防止、改善し、弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することを意味する。
【０００８】
したがって、本発明は、健常な皮膚の維持または障害を伴う皮膚の修復に、皮膚の重要かつ基本的な構造体に作用しうる化粧料または皮膚科学的組成物の提供をする上で役立つ。
【０００９】
本発明のラミニン５の産生促進剤およびヒト皮膚基底膜用の組成物に用いる有効成分は、具体的には、以下の植物に由来する。
【００１０】
ケシ科ボコニア（Bocconia）属植物の典型的なものは、メキシコ等に自生するパロ・アマリロ（Palo amarillo、学名：Bocconia arborea）をあげることができ、マメ科プソフォカルプス（Psophocarpus）属植物の典型的なものは、日本等に自生するシカクマメ（学名：Psophocarpus tetragonolobus）をあげることができ、マメ科カシア（Cassia）属植物の典型的なものは、ネパール等に自生するレタマ（Retama、学名：Cassia spinecens H.）をあげることができ、マメ科エリスレア（Erythraea）属カンチャラグア(Canchalagua、学名：Erythraea chilensisまたはGentiana canchalagua)はペルー等に自生する植物である。このうちシカクマメは、翼マメ（ウイングドビーン）、ミヤコグサとも称されている。
【００１１】
本発明に用いられる抽出物は上記植物の葉、茎、枝、花、樹皮、種子、果実、根茎または植物全草等を抽出溶媒と共に浸漬または加熱還流した後、濾過し濃縮して得られる。本発明に用いられる抽出溶媒は、通常抽出に用いられる溶媒であれば何でもよく、特にメタノール、エタノール等のＣ1−Ｃ6低級アルカノール類、含水低級アルカノール類、アセトンを初めとするＣ1−Ｃ6低級アルキル−Ｃ1−Ｃ6低級アルキルケトン、酢酸エチルを初めとするＣ2−Ｃ6低級アルカン酸Ｃ1−Ｃ6低級アルキル等の有機溶媒や水を単独あるいは組み合わせて用いることができる。こうして得られる抽出液は、そのまま、あるいはエタノール等でさらに希釈し、または乾燥物をそのまま、もしくは乾燥物を、例えばエタノールに再溶解して、本発明で用いる調製物とすることができる。
【００１２】
本発明に従う、有効成分の抽出物について、それらの起源たりうる植物を上記で例示したが、かような植物の近縁の種または株に由来する抽出物であっても、後述する特定の抽出物と同等またはそれ以上の表皮細胞におけるラミニン５の産生能を有するものであれば、すべて本発明の有効成分に包含される。
【００１３】
本発明における植物抽出物の配合量は、その配合により本発明の所期の効果が損われない範囲で広く配合することができる。かような配合量は、必要があれば、各抽出物について、予め後述するラミニン５の産生能の評価法により評価し、ボランティア等の協力を得れば適する用量が決定できる。かかる「必要があれば」というのは、これらの植物の採取場所、時期により、必ずしも有効成分が一定しない場合があることを考慮していることを意味する。
【００１４】
本発明の皮膚外用剤は、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、従来皮膚外用剤に用いるものであればいずれでもよく、剤型は特に問わない。
【００１５】
以上の製剤には、上述の必須成分以外に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、その他のラミニン５産生促進剤、抗老化薬剤、保湿剤、酸化防止剤、油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、防腐剤、アルコール類、ｐＨ調整剤、洗浄剤、乾燥剤、乳化剤、粉末成分、色材、水性成分、水、各種皮膚栄養剤、香料等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００１６】
その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩、グリチルレチン酸誘導体、サリチル酸誘導体、リゾフォスファチジルコリンやリゾフォスファチジン酸、大豆調製物等のラミニン５産生促進薬剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類、アルブチン、コウジ酸等の美白剤、ノニル酸ワレニルアミド、ニコチン酸ベンジルエステル、ニコチン酸β−ブトキシエチルエステル、カプサイシン、ジンゲロン、カンタリスチンキ、イクタモール、カフェイン、タンニン酸、α−ボルネオール、ニコチン酸トコフェロール、イノシトールヘキサニコチネート、シクランデレート、シンナリジン、トラゾリン、アセチルコリン、ベラパミル、セファランチン、γ−オリザノール等の血行促進剤、硫黄、チアントール等の抗脂漏剤、多様な目的から、ヒノキチオール、酸化亜鉛、アラントイン、ウコン抽出物、サイコ抽出物、イブキジャコウ抽出物、ヒオウギ抽出物、アセンヤク抽出物、ブナの芽抽出物、加水分解カゼイン、米抽出物加水分解液、米ぬか抽出物、トウニン抽出物、クララ抽出物、チオタウリン、ヒポタウリン、マジョラム抽出物、シリカ被覆酸化亜鉛、イチヤクソウ抽出物、キシリトール、アルギニン及びその塩酸塩、セリン、オウバク抽出成分、オウレン抽出成分、カッコン抽出成分、シコン抽出成分、シャクヤク抽出成分、センブリ抽出成分、バーチ抽出成分、セージ抽出成分、ビワ抽出成分、ニンジン抽出成分、アロエ抽出成分、ゼニアオイ抽出成分、アイリス抽出成分、ブドウ抽出成分、ヨクイニン抽出成分、ヘチマ抽出成分、ユリ抽出成分、サフラン抽出成分、センキュウ抽出成分、ショウキョウ抽出成分、オトギリソウ抽出成分、オノニス抽出成分、ローズマリー抽出成分、ニンニク抽出成分、トウガラシ抽出成分、ワレモコウ抽出成分、チンピ、トウキ等、レチノール、酢酸レチノール等のビタミンＡ類、リボフラビン、酪酸リボフラビン、フラビンアデニンヌクレオチド等のビタミンＢ２類、ピリドキシン塩酸塩、ピリドキシンジオクタノエート等のビタミンＢ２類、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸リン酸エステル、ＤＬ−α−トコフェロール−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルジカリウム等のビタミンＣ類、パントテン酸カルシウム、Ｄ−パントテニルアルコール、パントテニルエチルエーテル、アセチルパントテニルエチルエーテル等のパントテン酸類、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール等のビタミンＤ類、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等のニコチン酸類、α−トコフェロール、酢酸トコフェロール、ニコチン酸ＤＬ−α−トコフェロール、コハク酸ＤＬ−α−トコフェロール等のビタミンＥ類、ビタミンＰ、ビオチン等のビタミン類なども適宜配合することができる。
【００１７】
【実施例】
以下、本発明をさらに具体的に説明する。尚、本発明はこれにより限定されるものではない。
（Ｉ）植物抽出物の調製例
（Ｉ−１）パロ・アマリロ抽出物
パロ・アマリロの木質部分５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物７．２ｇを得た。
【００１８】
（Ｉ−２）シカクマメ抽出物
シカクマメの種子部分５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物４．６ｇを得た。
【００１９】
（Ｉ−３）レタマ抽出物
レタマの花及び枝部分５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物３．０ｇを得た。
【００２０】
（Ｉ−４）カンチャラグア抽出物
カンチャラグアの全草５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物５．２ｇを得た。
（ＩＩ）ラミニン５の産生能についての評価試験およびその結果
（１）表皮角質細胞の培養
表皮角質細胞はヒト***より単離し、カルシウム濃度の低い表皮細胞増殖培地（ＫＧＭ）にて培養した。この培地には牛脳下垂体抽出液とＥＧＦを添加した。細胞は第４代までＫＧＭで培養後、トリプシン−ＥＤＴＡ処理によって接着細胞を浮遊させ、ろ過によって細胞のアグリゲートを除き、均一な細胞懸濁液を得た。遠心分離によって細胞を集め、ＤＭＥＭ−Ｆ１２（２：１）−０.１％ＢＳＡに８×１０4／ｍｌとなるように再懸濁させた。この細胞懸濁液を０.５ｍｌ、２倍濃度の薬剤を含む同培地０.５ｍｌに加えた。培養は２４穴プレートを用いて、３７℃にて２４時間行った。培養終了時に、培養上清をエッペンドルフチューブに移し、１００００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を新たなチューブに移し、ラミニン５の測定の日まで−２０℃で保存した。また細胞内と培養プラスチック上に結合したラミニン５を可溶化するため、各種の界面活性剤を含むトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７.４）を各穴に添加し、一晩−２０℃で保存した。翌日、超音波処理を行い、再度凍結した。翌日、再度溶解後、１００００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清をチューブに移し、ラミニン５の測定の日まで−２０℃にて保存した。
（２）サンドイッチＥＬＩＳＡ法によるラミニン５の測定
培養上清、細胞層に存在するラミニン５はサンドイッチＥＬＩＳＡ法にて測定した。９６穴ＥＬＩＳＡプレートの固層にラミニン５のラミニンα３鎖に対するモノクローナル抗体、ＢＭ１６５を結合させた。ラミニン５をサンドイッチして測定するため、もう一種の抗体としてラミニンβ３鎖に対するモノクローナル抗体である６Ｆ１２を予めビオチン化（ｂ−６Ｆ１２）して用いた。本法では、機能を発揮しうるヘテロトリマー体（α３β３γ２）のみを測定し、ヘテロダイマー（β３γ２）を検出しない。ｂ−６Ｆ１２を含む３％ゼラチン・リン酸緩衝溶液を予め入れておいた各穴に試料を添加する。試料の穴内での最終希釈率は培養液が１／４、細胞層が１／１０とした。抗原抗体反応は３７℃で２時間行い、プレートを洗浄した後アビヂンＨＲＰ（ホースラディシュパーオキシダーゼ）溶液を添加し、更に３０分から１時間反応させた。洗浄後、ＨＲＰの基質であるＡＢＴＳ溶液を加え、４０５ｎｍの吸光度をＥＬＩＳＡプレートリーダーを用いて測定した。検量線は０〜４０ｎｇ／ｍｌの範囲で作成した。
【００２１】
ラミニン５の産生量は、培地中に遊離された量と細胞層に残った量との総和を算出し、植物抽出物を添加していない試料（コントロール）に対する相対的な値をもって示した。
（３）結果
結果を下記表１に示す。
【００２２】
【表１】
【００２３】
（ＩＩＩ）シカクマメ抽出物のＵＶＢによる皮膚のシワ形成に対する抑制効果の評価試験およびそれらの結果
シカクマメのメタノール抽出物（上記（Ｉ）の（Ｉ−２）参照）について、ＵＶＢによる皮膚のシワ形成に対する抑制効果を評価した。体重、皮膚状態に偏りがないよう、ヘアレスマウスを５匹ずつ以下の３群に分けた。
【００２４】
未処理群（ＵＶ未照射、薬剤無塗布群）
ＵＶ照射＋溶媒（８０％エタノール）塗布群
ＵＶ照射＋１％（ｗ／ｖ）シカクマメのメタノール抽出物塗布群（８０％エタノール溶液として調製）
マウスのシワ形成は、マウス背部にＵＶＢを繰り返し照射するというシュワルツらの方法（＊１）を一部変えて行った。ＵＶ照射群のマウス（４週齢）に、常法により背部にＵＶＢ（光源；東芝エレクトリック製 東芝 ＦＬ−２０ ＳＥ蛍光ランプ）を週３回、１０週間照射し（＊２、＊３）、さらに週５回薬剤を１００μｌずつ塗布した。ＵＶＢ照射日には、被験物質のＵＶ吸収の影響を避けるため、ＵＶ照射の後に薬剤を塗布した。また皮膚表面に薬剤の残りがないよう背部をエタノールで清拭後、ＵＶ照射を行った。開始後の照射量は３６ｍＪ／ｃｍ2／回とし、２週目以降は徐々に増加させ、１０週目は２１６ｍＪ／ｃｍ2／回とした。総照射量は４.６Ｊ／ｃｍ2であった。
【００２５】
ＵＶ連続照射開始１０週後、照射部位の経皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）、皮膚の厚さを測定し、ｔ検定により群間比較を行った（図１、図２）。ＴＥＷＬはTewameter (Courage & Khazaka社製）を用い、ＵＶによる皮膚肥厚度測定にはPeacock, Dial Thickness Gauge（尾崎製作所製）を用いた。
【００２６】
さらにマウス背部の写真を撮影し、ビセットらの方法（＊４）を一部変えた方法、即ち動物の群名を伏せた状態でシワの生成度合いを下記の表４に示す判定基準に従ってスコア化した（図３）。この作業を３名の測定者が個別に行い、群間のスコアに関して、Mann-WhitneyのＵ検定を行った。
【００２７】
表２
シワの視感判定基準表
評点：判定基準
０：シワを認めない。
１：評点２より浅い、短い、または数が少ない。
２：浅いシワを認める。
３：評点２より深い、または長い。評点４より浅い、短い、または数が少ない。
４：浅いシワを、全面に認める。
５：評点４より深い、または長い。評点６より浅い、または短い。
６：深く長いシワを認める。
７：評点６より深く長いシワが増す。評点８より浅い、または短い。
８：深く、長いシワを全面に認める。
【００２８】
図１より、溶媒（８０％エタノール）塗布群（コントロール）の顕著なＴＥＷＬ値の上昇に対して、シカクマメ抽出物の塗布群は該上昇が有意に抑制されていることから、光りによる皮膚バリアの乱れに対して回復促進効果を有することが明らかである。
【００２９】
また図２から、ＵＶによるコントロール群の皮膚肥厚に対し、シカクマメ抽出物の塗布群では有意に抑制されていることが明らかとなった。
【００３０】
さらに図３より明らかなように、溶媒（８０％エタノール）塗布群は深いシワの形成が認められた。これに対し本発明のシカクマメエキス塗布群では、シワの形成は顕著に抑制され、統計的に有意であることが確認される。
以上より、シカクマメ抽出物には紫外線による皮膚の変調に効果があることが確認された。
【００３１】
＜参考文献＞
＊１ Haratake A． et al. J. Invest. Dermatol. 108:769-775, 1997.
＊２ Naganumaa M. et al. J. Dermatol. Sci. 25:29-35, 2001.
＊３ Schwartz E. J. Invest. Dermatol. 91:158-161, 1988.
＊４ Bissett DL. et al. Photochemistry and Photobiology 46: 367-378,
1987.
実施例１ クリーム
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 １０.０ 重量％
ステアリルアルコール ４.０
ステアリン酸ブチル ８.０
ステアリン酸モノグリセリンエステル ２.０
ビタミンＥアセテート ０.５
ビタミンＡパルミテート ０.１
マカデミアナッツ油 １.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
グリセリン ４.０
１，２−ペンタンジオール ３.０
水酸化カリウム 適量
アスコルビン酸リン酸マグネシウム ０.１
Ｌ−アルギニン塩酸塩 ０.０１
エデト酸三ナトリウム ０.０５
パロ・アマリロメタノール抽出物 ０.５
イオン交換水 残余
（製法）
Ａの油相部とＢの水相部をそれぞれ７０℃に加熱し完全溶解する。Ａ相をＢ相に加えてよく攪拌した後、乳化機で乳化する。乳化物を熱交換器を用いて冷却する。
実施例２ クリーム
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 ５.０ 重量％
ステアリルアルコール ４.０
イソプロピルミリステート １８.０
グリセリンモノステアリン酸エステル ３.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
プロピレングリコール １０.０
シカクマメエタノール抽出物 ５.０
アルブチン １０.０
水酸化カリウム 適量
亜硫酸水素ナトリウム ０.０１
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例３ クリーム
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 ２.０ 重量％
ステアリルアルコール ７.０
水添ラノリン ２.０
スクワラン ５.０
２−オクチルドデシルアルコール ６.０
ポリオキシエチレン（２５モル）
セチルアルコールエーテル ３.０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２.０
レチノール ０.１
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
プロピレングリコール ５.０
レタマアセトン抽出物 １.０
亜硫酸水素ナトリウム ０.０３
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例４ しわ予防クリーム
（処方）
（Ａ相）
固形パラフィン ５.０ 重量％
ミツロウ １０.０
ワセリン １５.０
流動パラフィン ４１.０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２.０
ポリオキシエチレン（２０モル）
ソルビタンモノラウリン酸エステル ２.０
石けん粉末 ０.１
硼砂 ０.２
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
カンチャラグア酢酸エチル抽出物 ３.０
ウコン1,3−ブチレングリコール抽出物 ０.５
亜硫酸水素ナトリウム ０.０３
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例５ 抗老化クリーム
（処方）
（Ａ相）
マイクロクリスタリンワックス １.０ 重量％
密ロウ ２.０
ラノリン ２０.０
流動パラフィン １０.０
スクワラン ５.０
セスキオレイン酸ソルビタン ４.０
ポリオキシエチレン（２０モル）
ソルビタンモノオレイン酸エステル １.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
プロピレングリコール ７.０
パロ・アマリロ
１，３−ブチレングリコール抽出物 ０.１
サイコ抽出物 １.０
亜硫酸水素ナトリウム ０.０１
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例６ 乳液
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 ２.５ 重量％
ワセリン ５.０
流動パラフィン １０.０
ポリオキシエチレン（１０モル）
モノオレイン酸エステル ２.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
ポリエチレングリコール１５００ ３.０
トリエタノールアミン １.０
シカクマメ５０％エタノール水溶液抽出物 ０.０５
亜硫酸水素ナトリウム ０.０１
イオン交換水 残余
（Ｃ相）
カルボキシビニルポリマー１％水溶液 ５.０
（商品名：カーボポール941，B.F.Goodrich Chemical company）
（製法）
Ａの油相部とＢの水相部をそれぞれ７０℃に加熱し完全溶解する。Ａ相をＢ相に加えてよく攪拌した後、Ｃ相を加えてさらに攪拌する。乳化機で乳化後、熱交換器を用いて冷却する。
実施例７ 乳液
（処方）
（Ａ相）
スクワラン ５.０ 重量％
オレイルオレート ３.０
ワセリン ２.０
セスキオレイン酸ソルビタン ０.８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル
（２ＯＥＯ） １.２
レチノール ０.０１
月見草油 ０.５
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
１，３−ブチレングリコール ４.５
エタノール ３.０
カルボキシビニルポリマー ０.２
水酸化カリウム 適量
Ｌ−アルギニンＬ−アスパラギン酸塩 ０.０１
レタマメタノール抽出物 ０.５
エリスリトール ０.５
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０.０５
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例８ 乳液
（処方）
（Ａ相）
シクロメチコン ２.０ 重量％
ホホバ油 １.０
スクワラン ０.５
（Ｂ相）
アクリル酸・メタクリル酸アルキル重合体 ０.１
カルボキシビニルポリマー ０.１
カンチャラグアアセトン抽出物 １.０
水酸化ナトリウム 適量
アルコール ５.０
防腐剤 適量
グリセリン ５.０
キシリトール ５.０
１，３−ブチレングリコール １０.０
イオン交換水 残余
（製法）
Ａ相、Ｂ相をそれぞれよく攪拌して混合溶解する。Ａ相をＢ相に加えて乳化機で乳化する。
実施例９ ゼリー
（処方）
９５％エチルアルコール １０.０ 重量％
ジプロピレングリコール １５.０
ポリオキシエチレン（５０モル）
オレイルアルコールエーテル ２.０
カルボキシビニルポリマー １.０
（商品名：カーボポール940，B.F.Goodrich Chemical company）
水酸化ナトリウム 適量
Ｌ−アルギニン ０.１
パロ・アマリロ酢酸エチル抽出物 １０.０
2−ヒドロキシ−4−メトキシ
ベンゾフェノンスルホン酸ナトリウム ０.０５
エチレンジアミンテトラアセテート・
３ナトリウム・２水 ０.０５
防腐剤 適量
香料 適量
イオン交換水 残余
（製法）
イオン交換水にカーボポール９４０を均一に溶解し、ポリオキシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテルを溶解した９５％エタノールとパロ・アマリロ酢酸エチル抽出物を水相に添加する。次いで、その他の成分を加えたのち水酸化カリウム、Ｌ−アルギニンで中和させ増粘する。
実施例１０ 美容液
（処方）
（Ａ相）
エチルアルコール（９５％） １０.０ 重量％
ポリオキシエチレン（２０モル）
オクチルドデカノール １.０
パントテニールエチルエーテル ０.１
メチルパラベン ０.１５
（Ｂ相）
水酸化カリウム 適量
（Ｃ相）
グリセリン ５.０
ジプロピレングリコール １０.０
カルボキシビニルポリマー ０.２
（商品名：カーボポール940，B.F.Goodrich Chemical company）
シカクマメ
１，３−ブチレングリコール抽出物 １.５
アスコルビン酸グルコシド ５.０
イオン交換水 残余
（製法）
Ａ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ｃ相にＡ相を加えて可溶化する。次いでＢ相を加えてよく攪拌する。
実施例１１ パック
（処方）
（Ａ相）
ジプロピレングリコール ５.０ 重量％
ポリオキシエチレン（60モル）
硬化ヒマシ油 ５.０
（Ｂ相）
オリーブ油 ５.０
酢酸トコフェロール ０.２
防腐剤 適量
香料 ０.２
（Ｃ相）
レタマエタノール抽出物 ０.０１
亜硫酸水素ナトリウム ０.０３
ポリビニルアルコール
（ケン化度９０、重合度２，０００） １３.０
エタノール ７.０
イオン交換水 残余
（製法）
Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ相にＢ相を加えて可溶化する。次いでこれをＣ相に加えてよく攪拌する。
実施例１２ 化粧水
（処方）
（Ａ相）
エタノール ５.０ 重量％
ＰＯＥオレイルアルコールエーテル ２.０
オレイルアルコール ０.１
２−エチルヘキシルーＰ−ジメチル
アミノベンゾエート ０.１８
香料 適量
（Ｂ相）
１，３−ブチレングリコール ９.５
グリセリン ２.０
ピロリドンカルボン酸ナトリウム ０.５
ニコチン酸アミド ０.３
カンチャラグアメタノール抽出物 ０.１
β−シクロデキストリン １.０
エリスリトール ０.０５
イオン交換水 残余
（製法）
Ａのアルコール相をＢの水相に添加し、可溶化して化粧水を得る。
実施例１３ 固形ファンデーション
（処方）
セリサイト １５.０ 重量％
マイカ ２０.０
合成マイカ １０.０
タルク 残余
酸化亜鉛 ２.０
ＰＭＭＡ球状粉末 ４.０
窒化ホウ素 ３.０
ミリスチン酸亜鉛 ２.０
酸化チタン １０.０
黄色酸化鉄 ２.７
赤色酸化鉄 １.０
黒色酸化鉄 ０.１
スクワラン ７.０
ジメチルポリシロキサン ４.０
セスキイソステアリン酸ソルビタン １.０
パロ・アマリロアセトン抽出物 ０.００１
防腐剤 適量
酸化防止剤 適量
香料 適量
（製法）
セリサイト〜黒色酸化鉄の粉末成分をブレンダーで十分混合し、これにスクワラン〜セスキイソステアリン酸ソルビタンの油性成分、パロ・アマリロアセトン抽出物、防腐剤、酸化防止剤、香料を加え良く混練した後、容器に充填、成型する。
実施例１４ 乳化型ファンデーション（クリームタイプ）
（処方）
（粉体部）
二酸化チタン １０.３ 重量％
セリサイト ５.４
カオリン ３.０
黄色酸化鉄 ０.８
ベンガラ ０.３
黒色酸化鉄 ０.２
（油相）
デカメチルシクロペンタシロキサン １１.５
流動パラフィン ４.５
ポリオキシエチレン変性ジメチル
ポリシロキサン ４.０
（水相）
イオン交換水 ５０.０
１，３−ブチレングルコール ４.５
シカクマメメタノール抽出物 ０.１
セスキオレイン酸ソルビタン ３.０
防腐剤 適量
香料 適量
（製法）
水相を加熱撹拌後、十分に混合粉砕した粉体部を添加してホモミキサー処理する。更に加熱混合した油相を加えてホモミキサー処理した後、撹拌しながら香料を添加して室温まで冷却する。
【００３２】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明の皮膚外用剤は、優れたラミニン5産生促進作用を有しており、加齢や光老化等による基底膜の構造変化に伴う皮膚のしわ、たるみ、硬化などの皮膚の機能低下に優れた効果を有すると共に、弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することのできるものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】後述の（ＩＶ）シカクマメ抽出物のＵＶＢによる皮膚のシワ形成に対する抑制効果をＴＥＷＬ値の比較によって示すグラフである。
【図２】該抑制効果を皮膚厚の比較によって示すグラフである。
【図３】該抑制効果をシワの視感判定基準表に従うシワスコアで表示したグラフである。
【発明の属する技術分野】
本発明は化粧品あるいは皮膚科学的技術分野に関し、特に表皮細胞におけるラミニン５の産生能を高め、ヒト皮膚基底膜をケアして皮膚の老化を防止することのできる皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
表皮細胞におけるラミニン５の産生能を増強しうる薬剤としてはこれまでに大豆由来の調製物やリゾフォスファチジルコリン、リゾフォスファチジン酸等が知られている（特開平１１−３４３２２６号、特開２０００−２２６３０８号公報）。しかし、皮膚の正常な特性および機能維持における多様な機序が関与しうることについての示唆の存在を考慮すれば、そして可能であるなら、上記薬剤や調製物とは異なるカテゴリーに入る可能性があるが、または起源に由来する物質であって、表皮細胞におけるラミニン５の産生を高めうる物質の提供が望まれるであろう。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、第一に、表皮細胞におけるラミニン５の産生能を高めうる物質の多様化を図り、第二に、ヒト皮膚におけるラミニン５の産生能を高めることにより、延いては、ヒト皮膚基底膜の正常な構造または機能の維持または修復を行うための化粧料または皮膚科学的組成物を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記目的を達成すべく多種多様の物質についてラミニン５の産生能の増強作用について検討してきた。その結果、上述の大豆抽出物とは異なる特定の植物抽出物が優れたラミニン５の産生能を増強しうることを見出し、本発明を完成するに至った。後記するこれらの植物抽出物のラミニン５の産生能の増強作用等に関する報告は本発明者らの知る限りではこれまでに存在しておらず、抗皮膚老化剤への使用のみならず、皮膚外用剤への使用も全く知られていない。本発明はかかる知見に基づくものである。
【０００５】
したがって、本発明によれば、ケシ科ボコニア（Bocconia）属植物、マメ科プソフォカルプス（Psophocarpus）属植物、マメ科カシア（Cassia）属植物、マメ科エリスレア（Erythraea）属カンチャラグア（Canchalagua、学名：Erythraea chilensisまたはGentiana canchalagua）よりなる群から選ばれる植物の抽出物の一種または二種以上を有効成分とする皮膚外用剤が提供される。
【０００６】
【発明の実施の形態】
ラミニン５は、表皮と真皮の境界部に位置する表皮基底膜と呼ばれる各種糖蛋白質、プロテオグリカンより構成される構造体の主成分である（Rousselle ら、J．Cell Biol．114、567、1991）。ラミニン５が遺伝子異常によって欠損すると表皮水泡症が発生することが知られ、表皮の真皮への結合に必須のタンパク質である（Aberdam ら、Nat．Genet.，6、299、1994）。また、ラミニン５は、表皮基底膜形成を促進することが知られている（Tsunenaga ら、Matrix Biology 17、603、1998）。理論を述べることにより拘束されるものではないが、より具体的には、ラミニン５は正常な基底膜構造またはその機能の維持または修復に寄与し、日々の生活において紫外線、乾燥などの外的ストレス、さらに、精神的ストレスなどの内的なストレスによって傷害を受けて引起される基底膜の構造変化を修復することで皮膚の老化の進行を遅延させることができる。換言すれば、前記ラミニン５の産生を増強することは、ヒト皮膚基底膜の正常な構造の維持に役立ち、延いては、皮膚老化の防止または改善（抗老化）をもたらすであろう。
【０００７】
なお、「抗老化」とは、加齢や光老化等による基底膜の構造変化の蓄積に伴う皮膚の機能低下、具体的には、皮膚のしわ、たるみ、硬化等を防止、改善し、弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することを意味する。
【０００８】
したがって、本発明は、健常な皮膚の維持または障害を伴う皮膚の修復に、皮膚の重要かつ基本的な構造体に作用しうる化粧料または皮膚科学的組成物の提供をする上で役立つ。
【０００９】
本発明のラミニン５の産生促進剤およびヒト皮膚基底膜用の組成物に用いる有効成分は、具体的には、以下の植物に由来する。
【００１０】
ケシ科ボコニア（Bocconia）属植物の典型的なものは、メキシコ等に自生するパロ・アマリロ（Palo amarillo、学名：Bocconia arborea）をあげることができ、マメ科プソフォカルプス（Psophocarpus）属植物の典型的なものは、日本等に自生するシカクマメ（学名：Psophocarpus tetragonolobus）をあげることができ、マメ科カシア（Cassia）属植物の典型的なものは、ネパール等に自生するレタマ（Retama、学名：Cassia spinecens H.）をあげることができ、マメ科エリスレア（Erythraea）属カンチャラグア(Canchalagua、学名：Erythraea chilensisまたはGentiana canchalagua)はペルー等に自生する植物である。このうちシカクマメは、翼マメ（ウイングドビーン）、ミヤコグサとも称されている。
【００１１】
本発明に用いられる抽出物は上記植物の葉、茎、枝、花、樹皮、種子、果実、根茎または植物全草等を抽出溶媒と共に浸漬または加熱還流した後、濾過し濃縮して得られる。本発明に用いられる抽出溶媒は、通常抽出に用いられる溶媒であれば何でもよく、特にメタノール、エタノール等のＣ1−Ｃ6低級アルカノール類、含水低級アルカノール類、アセトンを初めとするＣ1−Ｃ6低級アルキル−Ｃ1−Ｃ6低級アルキルケトン、酢酸エチルを初めとするＣ2−Ｃ6低級アルカン酸Ｃ1−Ｃ6低級アルキル等の有機溶媒や水を単独あるいは組み合わせて用いることができる。こうして得られる抽出液は、そのまま、あるいはエタノール等でさらに希釈し、または乾燥物をそのまま、もしくは乾燥物を、例えばエタノールに再溶解して、本発明で用いる調製物とすることができる。
【００１２】
本発明に従う、有効成分の抽出物について、それらの起源たりうる植物を上記で例示したが、かような植物の近縁の種または株に由来する抽出物であっても、後述する特定の抽出物と同等またはそれ以上の表皮細胞におけるラミニン５の産生能を有するものであれば、すべて本発明の有効成分に包含される。
【００１３】
本発明における植物抽出物の配合量は、その配合により本発明の所期の効果が損われない範囲で広く配合することができる。かような配合量は、必要があれば、各抽出物について、予め後述するラミニン５の産生能の評価法により評価し、ボランティア等の協力を得れば適する用量が決定できる。かかる「必要があれば」というのは、これらの植物の採取場所、時期により、必ずしも有効成分が一定しない場合があることを考慮していることを意味する。
【００１４】
本発明の皮膚外用剤は、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、従来皮膚外用剤に用いるものであればいずれでもよく、剤型は特に問わない。
【００１５】
以上の製剤には、上述の必須成分以外に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、その他のラミニン５産生促進剤、抗老化薬剤、保湿剤、酸化防止剤、油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、防腐剤、アルコール類、ｐＨ調整剤、洗浄剤、乾燥剤、乳化剤、粉末成分、色材、水性成分、水、各種皮膚栄養剤、香料等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００１６】
その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩、グリチルレチン酸誘導体、サリチル酸誘導体、リゾフォスファチジルコリンやリゾフォスファチジン酸、大豆調製物等のラミニン５産生促進薬剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類、アルブチン、コウジ酸等の美白剤、ノニル酸ワレニルアミド、ニコチン酸ベンジルエステル、ニコチン酸β−ブトキシエチルエステル、カプサイシン、ジンゲロン、カンタリスチンキ、イクタモール、カフェイン、タンニン酸、α−ボルネオール、ニコチン酸トコフェロール、イノシトールヘキサニコチネート、シクランデレート、シンナリジン、トラゾリン、アセチルコリン、ベラパミル、セファランチン、γ−オリザノール等の血行促進剤、硫黄、チアントール等の抗脂漏剤、多様な目的から、ヒノキチオール、酸化亜鉛、アラントイン、ウコン抽出物、サイコ抽出物、イブキジャコウ抽出物、ヒオウギ抽出物、アセンヤク抽出物、ブナの芽抽出物、加水分解カゼイン、米抽出物加水分解液、米ぬか抽出物、トウニン抽出物、クララ抽出物、チオタウリン、ヒポタウリン、マジョラム抽出物、シリカ被覆酸化亜鉛、イチヤクソウ抽出物、キシリトール、アルギニン及びその塩酸塩、セリン、オウバク抽出成分、オウレン抽出成分、カッコン抽出成分、シコン抽出成分、シャクヤク抽出成分、センブリ抽出成分、バーチ抽出成分、セージ抽出成分、ビワ抽出成分、ニンジン抽出成分、アロエ抽出成分、ゼニアオイ抽出成分、アイリス抽出成分、ブドウ抽出成分、ヨクイニン抽出成分、ヘチマ抽出成分、ユリ抽出成分、サフラン抽出成分、センキュウ抽出成分、ショウキョウ抽出成分、オトギリソウ抽出成分、オノニス抽出成分、ローズマリー抽出成分、ニンニク抽出成分、トウガラシ抽出成分、ワレモコウ抽出成分、チンピ、トウキ等、レチノール、酢酸レチノール等のビタミンＡ類、リボフラビン、酪酸リボフラビン、フラビンアデニンヌクレオチド等のビタミンＢ２類、ピリドキシン塩酸塩、ピリドキシンジオクタノエート等のビタミンＢ２類、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸リン酸エステル、ＤＬ−α−トコフェロール−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルジカリウム等のビタミンＣ類、パントテン酸カルシウム、Ｄ−パントテニルアルコール、パントテニルエチルエーテル、アセチルパントテニルエチルエーテル等のパントテン酸類、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール等のビタミンＤ類、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等のニコチン酸類、α−トコフェロール、酢酸トコフェロール、ニコチン酸ＤＬ−α−トコフェロール、コハク酸ＤＬ−α−トコフェロール等のビタミンＥ類、ビタミンＰ、ビオチン等のビタミン類なども適宜配合することができる。
【００１７】
【実施例】
以下、本発明をさらに具体的に説明する。尚、本発明はこれにより限定されるものではない。
（Ｉ）植物抽出物の調製例
（Ｉ−１）パロ・アマリロ抽出物
パロ・アマリロの木質部分５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物７．２ｇを得た。
【００１８】
（Ｉ−２）シカクマメ抽出物
シカクマメの種子部分５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物４．６ｇを得た。
【００１９】
（Ｉ−３）レタマ抽出物
レタマの花及び枝部分５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物３．０ｇを得た。
【００２０】
（Ｉ−４）カンチャラグア抽出物
カンチャラグアの全草５０ｇを、室温で１週間エタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、エタノール抽出物５．２ｇを得た。
（ＩＩ）ラミニン５の産生能についての評価試験およびその結果
（１）表皮角質細胞の培養
表皮角質細胞はヒト***より単離し、カルシウム濃度の低い表皮細胞増殖培地（ＫＧＭ）にて培養した。この培地には牛脳下垂体抽出液とＥＧＦを添加した。細胞は第４代までＫＧＭで培養後、トリプシン−ＥＤＴＡ処理によって接着細胞を浮遊させ、ろ過によって細胞のアグリゲートを除き、均一な細胞懸濁液を得た。遠心分離によって細胞を集め、ＤＭＥＭ−Ｆ１２（２：１）−０.１％ＢＳＡに８×１０4／ｍｌとなるように再懸濁させた。この細胞懸濁液を０.５ｍｌ、２倍濃度の薬剤を含む同培地０.５ｍｌに加えた。培養は２４穴プレートを用いて、３７℃にて２４時間行った。培養終了時に、培養上清をエッペンドルフチューブに移し、１００００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を新たなチューブに移し、ラミニン５の測定の日まで−２０℃で保存した。また細胞内と培養プラスチック上に結合したラミニン５を可溶化するため、各種の界面活性剤を含むトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７.４）を各穴に添加し、一晩−２０℃で保存した。翌日、超音波処理を行い、再度凍結した。翌日、再度溶解後、１００００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清をチューブに移し、ラミニン５の測定の日まで−２０℃にて保存した。
（２）サンドイッチＥＬＩＳＡ法によるラミニン５の測定
培養上清、細胞層に存在するラミニン５はサンドイッチＥＬＩＳＡ法にて測定した。９６穴ＥＬＩＳＡプレートの固層にラミニン５のラミニンα３鎖に対するモノクローナル抗体、ＢＭ１６５を結合させた。ラミニン５をサンドイッチして測定するため、もう一種の抗体としてラミニンβ３鎖に対するモノクローナル抗体である６Ｆ１２を予めビオチン化（ｂ−６Ｆ１２）して用いた。本法では、機能を発揮しうるヘテロトリマー体（α３β３γ２）のみを測定し、ヘテロダイマー（β３γ２）を検出しない。ｂ−６Ｆ１２を含む３％ゼラチン・リン酸緩衝溶液を予め入れておいた各穴に試料を添加する。試料の穴内での最終希釈率は培養液が１／４、細胞層が１／１０とした。抗原抗体反応は３７℃で２時間行い、プレートを洗浄した後アビヂンＨＲＰ（ホースラディシュパーオキシダーゼ）溶液を添加し、更に３０分から１時間反応させた。洗浄後、ＨＲＰの基質であるＡＢＴＳ溶液を加え、４０５ｎｍの吸光度をＥＬＩＳＡプレートリーダーを用いて測定した。検量線は０〜４０ｎｇ／ｍｌの範囲で作成した。
【００２１】
ラミニン５の産生量は、培地中に遊離された量と細胞層に残った量との総和を算出し、植物抽出物を添加していない試料（コントロール）に対する相対的な値をもって示した。
（３）結果
結果を下記表１に示す。
【００２２】
【表１】
（ＩＩＩ）シカクマメ抽出物のＵＶＢによる皮膚のシワ形成に対する抑制効果の評価試験およびそれらの結果
シカクマメのメタノール抽出物（上記（Ｉ）の（Ｉ−２）参照）について、ＵＶＢによる皮膚のシワ形成に対する抑制効果を評価した。体重、皮膚状態に偏りがないよう、ヘアレスマウスを５匹ずつ以下の３群に分けた。
【００２４】
未処理群（ＵＶ未照射、薬剤無塗布群）
ＵＶ照射＋溶媒（８０％エタノール）塗布群
ＵＶ照射＋１％（ｗ／ｖ）シカクマメのメタノール抽出物塗布群（８０％エタノール溶液として調製）
マウスのシワ形成は、マウス背部にＵＶＢを繰り返し照射するというシュワルツらの方法（＊１）を一部変えて行った。ＵＶ照射群のマウス（４週齢）に、常法により背部にＵＶＢ（光源；東芝エレクトリック製 東芝 ＦＬ−２０ ＳＥ蛍光ランプ）を週３回、１０週間照射し（＊２、＊３）、さらに週５回薬剤を１００μｌずつ塗布した。ＵＶＢ照射日には、被験物質のＵＶ吸収の影響を避けるため、ＵＶ照射の後に薬剤を塗布した。また皮膚表面に薬剤の残りがないよう背部をエタノールで清拭後、ＵＶ照射を行った。開始後の照射量は３６ｍＪ／ｃｍ2／回とし、２週目以降は徐々に増加させ、１０週目は２１６ｍＪ／ｃｍ2／回とした。総照射量は４.６Ｊ／ｃｍ2であった。
【００２５】
ＵＶ連続照射開始１０週後、照射部位の経皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）、皮膚の厚さを測定し、ｔ検定により群間比較を行った（図１、図２）。ＴＥＷＬはTewameter (Courage & Khazaka社製）を用い、ＵＶによる皮膚肥厚度測定にはPeacock, Dial Thickness Gauge（尾崎製作所製）を用いた。
【００２６】
さらにマウス背部の写真を撮影し、ビセットらの方法（＊４）を一部変えた方法、即ち動物の群名を伏せた状態でシワの生成度合いを下記の表４に示す判定基準に従ってスコア化した（図３）。この作業を３名の測定者が個別に行い、群間のスコアに関して、Mann-WhitneyのＵ検定を行った。
【００２７】
表２
シワの視感判定基準表
評点：判定基準
０：シワを認めない。
１：評点２より浅い、短い、または数が少ない。
２：浅いシワを認める。
３：評点２より深い、または長い。評点４より浅い、短い、または数が少ない。
４：浅いシワを、全面に認める。
５：評点４より深い、または長い。評点６より浅い、または短い。
６：深く長いシワを認める。
７：評点６より深く長いシワが増す。評点８より浅い、または短い。
８：深く、長いシワを全面に認める。
【００２８】
図１より、溶媒（８０％エタノール）塗布群（コントロール）の顕著なＴＥＷＬ値の上昇に対して、シカクマメ抽出物の塗布群は該上昇が有意に抑制されていることから、光りによる皮膚バリアの乱れに対して回復促進効果を有することが明らかである。
【００２９】
また図２から、ＵＶによるコントロール群の皮膚肥厚に対し、シカクマメ抽出物の塗布群では有意に抑制されていることが明らかとなった。
【００３０】
さらに図３より明らかなように、溶媒（８０％エタノール）塗布群は深いシワの形成が認められた。これに対し本発明のシカクマメエキス塗布群では、シワの形成は顕著に抑制され、統計的に有意であることが確認される。
以上より、シカクマメ抽出物には紫外線による皮膚の変調に効果があることが確認された。
【００３１】
＜参考文献＞
＊１ Haratake A． et al. J. Invest. Dermatol. 108:769-775, 1997.
＊２ Naganumaa M. et al. J. Dermatol. Sci. 25:29-35, 2001.
＊３ Schwartz E. J. Invest. Dermatol. 91:158-161, 1988.
＊４ Bissett DL. et al. Photochemistry and Photobiology 46: 367-378,
1987.
実施例１ クリーム
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 １０.０ 重量％
ステアリルアルコール ４.０
ステアリン酸ブチル ８.０
ステアリン酸モノグリセリンエステル ２.０
ビタミンＥアセテート ０.５
ビタミンＡパルミテート ０.１
マカデミアナッツ油 １.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
グリセリン ４.０
１，２−ペンタンジオール ３.０
水酸化カリウム 適量
アスコルビン酸リン酸マグネシウム ０.１
Ｌ−アルギニン塩酸塩 ０.０１
エデト酸三ナトリウム ０.０５
パロ・アマリロメタノール抽出物 ０.５
イオン交換水 残余
（製法）
Ａの油相部とＢの水相部をそれぞれ７０℃に加熱し完全溶解する。Ａ相をＢ相に加えてよく攪拌した後、乳化機で乳化する。乳化物を熱交換器を用いて冷却する。
実施例２ クリーム
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 ５.０ 重量％
ステアリルアルコール ４.０
イソプロピルミリステート １８.０
グリセリンモノステアリン酸エステル ３.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
プロピレングリコール １０.０
シカクマメエタノール抽出物 ５.０
アルブチン １０.０
水酸化カリウム 適量
亜硫酸水素ナトリウム ０.０１
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例３ クリーム
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 ２.０ 重量％
ステアリルアルコール ７.０
水添ラノリン ２.０
スクワラン ５.０
２−オクチルドデシルアルコール ６.０
ポリオキシエチレン（２５モル）
セチルアルコールエーテル ３.０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２.０
レチノール ０.１
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
プロピレングリコール ５.０
レタマアセトン抽出物 １.０
亜硫酸水素ナトリウム ０.０３
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例４ しわ予防クリーム
（処方）
（Ａ相）
固形パラフィン ５.０ 重量％
ミツロウ １０.０
ワセリン １５.０
流動パラフィン ４１.０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２.０
ポリオキシエチレン（２０モル）
ソルビタンモノラウリン酸エステル ２.０
石けん粉末 ０.１
硼砂 ０.２
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
カンチャラグア酢酸エチル抽出物 ３.０
ウコン1,3−ブチレングリコール抽出物 ０.５
亜硫酸水素ナトリウム ０.０３
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例５ 抗老化クリーム
（処方）
（Ａ相）
マイクロクリスタリンワックス １.０ 重量％
密ロウ ２.０
ラノリン ２０.０
流動パラフィン １０.０
スクワラン ５.０
セスキオレイン酸ソルビタン ４.０
ポリオキシエチレン（２０モル）
ソルビタンモノオレイン酸エステル １.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
プロピレングリコール ７.０
パロ・アマリロ
１，３−ブチレングリコール抽出物 ０.１
サイコ抽出物 １.０
亜硫酸水素ナトリウム ０.０１
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例６ 乳液
（処方）
（Ａ相）
ステアリン酸 ２.５ 重量％
ワセリン ５.０
流動パラフィン １０.０
ポリオキシエチレン（１０モル）
モノオレイン酸エステル ２.０
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
ポリエチレングリコール１５００ ３.０
トリエタノールアミン １.０
シカクマメ５０％エタノール水溶液抽出物 ０.０５
亜硫酸水素ナトリウム ０.０１
イオン交換水 残余
（Ｃ相）
カルボキシビニルポリマー１％水溶液 ５.０
（商品名：カーボポール941，B.F.Goodrich Chemical company）
（製法）
Ａの油相部とＢの水相部をそれぞれ７０℃に加熱し完全溶解する。Ａ相をＢ相に加えてよく攪拌した後、Ｃ相を加えてさらに攪拌する。乳化機で乳化後、熱交換器を用いて冷却する。
実施例７ 乳液
（処方）
（Ａ相）
スクワラン ５.０ 重量％
オレイルオレート ３.０
ワセリン ２.０
セスキオレイン酸ソルビタン ０.８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル
（２ＯＥＯ） １.２
レチノール ０.０１
月見草油 ０.５
防腐剤 適量
香料 適量
（Ｂ相）
１，３−ブチレングリコール ４.５
エタノール ３.０
カルボキシビニルポリマー ０.２
水酸化カリウム 適量
Ｌ−アルギニンＬ−アスパラギン酸塩 ０.０１
レタマメタノール抽出物 ０.５
エリスリトール ０.５
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０.０５
イオン交換水 残余
（製法）
実施例１と同様。
実施例８ 乳液
（処方）
（Ａ相）
シクロメチコン ２.０ 重量％
ホホバ油 １.０
スクワラン ０.５
（Ｂ相）
アクリル酸・メタクリル酸アルキル重合体 ０.１
カルボキシビニルポリマー ０.１
カンチャラグアアセトン抽出物 １.０
水酸化ナトリウム 適量
アルコール ５.０
防腐剤 適量
グリセリン ５.０
キシリトール ５.０
１，３−ブチレングリコール １０.０
イオン交換水 残余
（製法）
Ａ相、Ｂ相をそれぞれよく攪拌して混合溶解する。Ａ相をＢ相に加えて乳化機で乳化する。
実施例９ ゼリー
（処方）
９５％エチルアルコール １０.０ 重量％
ジプロピレングリコール １５.０
ポリオキシエチレン（５０モル）
オレイルアルコールエーテル ２.０
カルボキシビニルポリマー １.０
（商品名：カーボポール940，B.F.Goodrich Chemical company）
水酸化ナトリウム 適量
Ｌ−アルギニン ０.１
パロ・アマリロ酢酸エチル抽出物 １０.０
2−ヒドロキシ−4−メトキシ
ベンゾフェノンスルホン酸ナトリウム ０.０５
エチレンジアミンテトラアセテート・
３ナトリウム・２水 ０.０５
防腐剤 適量
香料 適量
イオン交換水 残余
（製法）
イオン交換水にカーボポール９４０を均一に溶解し、ポリオキシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテルを溶解した９５％エタノールとパロ・アマリロ酢酸エチル抽出物を水相に添加する。次いで、その他の成分を加えたのち水酸化カリウム、Ｌ−アルギニンで中和させ増粘する。
実施例１０ 美容液
（処方）
（Ａ相）
エチルアルコール（９５％） １０.０ 重量％
ポリオキシエチレン（２０モル）
オクチルドデカノール １.０
パントテニールエチルエーテル ０.１
メチルパラベン ０.１５
（Ｂ相）
水酸化カリウム 適量
（Ｃ相）
グリセリン ５.０
ジプロピレングリコール １０.０
カルボキシビニルポリマー ０.２
（商品名：カーボポール940，B.F.Goodrich Chemical company）
シカクマメ
１，３−ブチレングリコール抽出物 １.５
アスコルビン酸グルコシド ５.０
イオン交換水 残余
（製法）
Ａ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ｃ相にＡ相を加えて可溶化する。次いでＢ相を加えてよく攪拌する。
実施例１１ パック
（処方）
（Ａ相）
ジプロピレングリコール ５.０ 重量％
ポリオキシエチレン（60モル）
硬化ヒマシ油 ５.０
（Ｂ相）
オリーブ油 ５.０
酢酸トコフェロール ０.２
防腐剤 適量
香料 ０.２
（Ｃ相）
レタマエタノール抽出物 ０.０１
亜硫酸水素ナトリウム ０.０３
ポリビニルアルコール
（ケン化度９０、重合度２，０００） １３.０
エタノール ７.０
イオン交換水 残余
（製法）
Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ相にＢ相を加えて可溶化する。次いでこれをＣ相に加えてよく攪拌する。
実施例１２ 化粧水
（処方）
（Ａ相）
エタノール ５.０ 重量％
ＰＯＥオレイルアルコールエーテル ２.０
オレイルアルコール ０.１
２−エチルヘキシルーＰ−ジメチル
アミノベンゾエート ０.１８
香料 適量
（Ｂ相）
１，３−ブチレングリコール ９.５
グリセリン ２.０
ピロリドンカルボン酸ナトリウム ０.５
ニコチン酸アミド ０.３
カンチャラグアメタノール抽出物 ０.１
β−シクロデキストリン １.０
エリスリトール ０.０５
イオン交換水 残余
（製法）
Ａのアルコール相をＢの水相に添加し、可溶化して化粧水を得る。
実施例１３ 固形ファンデーション
（処方）
セリサイト １５.０ 重量％
マイカ ２０.０
合成マイカ １０.０
タルク 残余
酸化亜鉛 ２.０
ＰＭＭＡ球状粉末 ４.０
窒化ホウ素 ３.０
ミリスチン酸亜鉛 ２.０
酸化チタン １０.０
黄色酸化鉄 ２.７
赤色酸化鉄 １.０
黒色酸化鉄 ０.１
スクワラン ７.０
ジメチルポリシロキサン ４.０
セスキイソステアリン酸ソルビタン １.０
パロ・アマリロアセトン抽出物 ０.００１
防腐剤 適量
酸化防止剤 適量
香料 適量
（製法）
セリサイト〜黒色酸化鉄の粉末成分をブレンダーで十分混合し、これにスクワラン〜セスキイソステアリン酸ソルビタンの油性成分、パロ・アマリロアセトン抽出物、防腐剤、酸化防止剤、香料を加え良く混練した後、容器に充填、成型する。
実施例１４ 乳化型ファンデーション（クリームタイプ）
（処方）
（粉体部）
二酸化チタン １０.３ 重量％
セリサイト ５.４
カオリン ３.０
黄色酸化鉄 ０.８
ベンガラ ０.３
黒色酸化鉄 ０.２
（油相）
デカメチルシクロペンタシロキサン １１.５
流動パラフィン ４.５
ポリオキシエチレン変性ジメチル
ポリシロキサン ４.０
（水相）
イオン交換水 ５０.０
１，３−ブチレングルコール ４.５
シカクマメメタノール抽出物 ０.１
セスキオレイン酸ソルビタン ３.０
防腐剤 適量
香料 適量
（製法）
水相を加熱撹拌後、十分に混合粉砕した粉体部を添加してホモミキサー処理する。更に加熱混合した油相を加えてホモミキサー処理した後、撹拌しながら香料を添加して室温まで冷却する。
【００３２】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明の皮膚外用剤は、優れたラミニン5産生促進作用を有しており、加齢や光老化等による基底膜の構造変化に伴う皮膚のしわ、たるみ、硬化などの皮膚の機能低下に優れた効果を有すると共に、弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持することのできるものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】後述の（ＩＶ）シカクマメ抽出物のＵＶＢによる皮膚のシワ形成に対する抑制効果をＴＥＷＬ値の比較によって示すグラフである。
【図２】該抑制効果を皮膚厚の比較によって示すグラフである。
【図３】該抑制効果をシワの視感判定基準表に従うシワスコアで表示したグラフである。
Claims (5)
- パロ・アマリロ(Palo amarillo、学名：Bocconia arborea)、およびレタマ(Retama、学名：Cassia spinecens H.)よりなる群から選ばれる植物の抽出物を有効成分とする皮膚外用剤。
- 皮膚外用剤に用いるものであって、 パロ・アマリロ(Palo amarillo、学名：Bocconia arborea)、シカクマメ（学名：Psophocarpus tetragonolobus)の種子、およびレタマ(Retama、学名：Cassia spinecens H.)よりなる群から選ばれる植物の抽出物からなる抗老化剤。
- 皮膚外用剤に用いるものであって、パロ・アマリロ(Palo amarillo、学名：Bocconia arborea)、シカクマメ（学名：Psophocarpus tetragonolobus)の種子、およびレタマ(Retama、学名：Cassia spinecens H.)よりなる群から選ばれる植物の抽出物からなるシワ形成の抑制剤。
- 皮膚外用剤に用いるものであって、 パロ・アマリロ(Palo amarillo、学名：Bocconia arborea)、シカクマメ（学名：Psophocarpus tetragonolobus)の種子、およびレタマ(Retama、学名：Cassia spinecens H.)よりなる群から選ばれる植物の抽出物からなるラミニン５産生促進剤。
- ヒト皮膚基底膜の構造または機能の維持または修復するために使用することを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤。
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