JP3390873B2 - 血清蛋白分画のｍ蛋白検出方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、電気泳動分析方法にに
より測定されたサンプル検体の血清蛋白分画の測定デ−
タのＭ蛋白検出方法に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】従来、医療機関の臨床検査室等における
血清蛋白の分析・検査に当たっては、セルロ−ズアセテ
−ト膜を用いた電気泳動法が広く用いられている。電気
泳動による血清の分画による分析の場合は、得られた検
体の図即ち分画パタ−ンを形成せしめ、その後、染色液
にて染色し、血清以外の部分を脱色させたものを濃度計
にて測定・定量する分析方法である。

【０００３】図１８は、電気泳動分析法によって得られ
たサンプル検体の濃度図即ちパタ−ンを示す。図１８に
示す如く、パタ−ンの谷の線をフラクションといい、こ
のフラクションとフラクションの間を分画と言い、１分
画目は１番目のフラクションと２番目のフラクションの
間、２分画目は２番目のフラクションと３番目のフラク
ションの間、以下同様で、分画数が５の場合に限り１〜
５分画目をアルブミン（Ａlb），α1 グロブリン、α2
グロブリン、βグロブリン、γグロブリンと言う。これ
ら蛋白のうち、蛋白質の１種であるＭ蛋白（モノクロ−
ナル・プロティン）を測定し、身体の異常を判断する診
断法が行われている。一般にＭ蛋白は正常な場合、パタ
−ンに現れない程小さいのが普通である。従ってＭ蛋白
がパタ−ン上に現れるまで増加している場合は何等かの
異常例えば骨髄腫等が発生していると判定できる。

【０００４】この様な電気泳動分析は、最近では全て自
動的に行われるようになっており、その為の全自動装置
も実用化されている。次に図１９に示すように、全自動
電気泳動装置２０によって測定されたサンプル検体の血
清蛋白分画に関するデ−タは、入力インタ−フェイス２
２を通してコンピュ−タ−２１のＣＰＵ211 に入力さ
れ、演算処理される。コンピュ−タ−２１は、ＣＰＵ 2
11とＲＡＭ212A、ＲＯＭ212Bとからなるメモリ−212 と
により構成され、磁気ディスク等の外部メモリ−２３が
接続されている。ＣＰＵ 211には、外部入力手段、例え
ばキ−ボ−ド１１が入力インタ−フェイス２２を介して
接続されており、対象血清、いわゆるコントロ−ル検体
のナンバ−NO．入力、サンプル検体のNO．入力等必要事
項を入力できるようになっている。ＣＰＵ211 で演算処
理された結果は、出力インタ−フェイス２５を通して出
力装置２６のＣＴＲ261 及びプリンタ−262 に出力さ
れ、画面に表示されると同時に、プリントアウトされ
る。このようにして、全自動泳動装置２０によって得ら
れた血清蛋白分画のデ−タは、一般に専門の臨床医師に
よって検査・判定されている。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】以上の如く、従来は、
電気泳動分析によって測定された血清中の蛋白を分画す
ることで得られた濃度パタ−ン図からＭ蛋白の存否を判
断し、医師は患者の病態を診断している。この場合、正
常値を設け、これと比較しながら判定を下すようにして
いるが、単に分画パタ−ンの高低レベルの他に、濃度図
に表われた波形パタ−ンの微小な変化や分画値の全体の
中の比率など、考慮すべき要素が多くあり、判定に経験
と知識を必要とする。そのため、実際にはこの濃度図が
十分に生かされているとはいえない状況である。また、
その経験と知識も臨床医によって区々に異なるので経験
のある専門の臨床医のみが判定作業に従事することにな
る。また、測定された血清中の蛋白分画パタ−ンのデ−
タ−は、検体毎に区々であるから、全ての検体について
詳細に検査・判定を行わなければならず、多大の労力と
時間を要することになる。そのため、判定を行う臨床医
に多大の負担を与えることになり、その貴重な能力を判
定作業に費やすと言った問題があった。さらに、測定さ
れた濃度パタ−ン図の中にＭ蛋白が存在する場合、それ
が特に微量のＭ蛋白の場合は判定が困難で見落とした
り、誤認することが多く、判定の精度の向上が望まれて
いた。

【０００６】本発明は以上の問題を解決するためになさ
れたものであり、病態の診断特に血清中の蛋白分画中の
Ｍ蛋白の存在を全自動泳動分析装置や濃度計により判断
することにより、従来のように熟練の専門医を要せず
に、判定の精度の高く、患者の病態を正確に診断できる
血清蛋白分画のＭ蛋白検出方法を提供することを目的と
する。

【０００７】

【課題を解決するための手段】

(1) 本発明は、電気泳動分析方法により測定されたサン
プル検体の血清蛋白分画の測定デ−タのパタ−ンにおい
て、次のような蛋白検出方法を行うものである。 (1-1)半値幅法 サンプル検体の血清蛋白分画のピ−クの高さと、そのピ
−クの半分の高さの所の山の幅の比を取り、これが一定
の値以上になった時、そこにＭ蛋白が存在すると言う方
法である。尚、ここで分画のピ−クの半分の高さとなる
点の距離を半値幅という。 (1-2)ピ−ク比法 アルブミン（蛋白の一つで、濃度パタ−ンの中では一般
に最も高いピ−クを示す）分画と他の分画のピ−クを比
較して、その割合の値が一定の値Ｋ1 以上になった時、
そこにＭ蛋白が存在すると言う方法である。 (1-3)傾斜法 濃度パタ−ン図を描いている線の傾きが一定の値Ｋ2 以
上になった時、そこにＭ蛋白が存在すると言う方法であ
る。 (1-4)変曲点法 濃度パタ−ン図を描いている線の軌跡を二次微分し、そ
の二次微分のグラフで零を切る点が同一分画内で１つで
なくなった場合、その点をＭ蛋白が存在すると言う方法
である。 (1-5)差分法 正常な検体をコントロ−ル検体として、このコントロ−
ル検体の濃度パタ−ン図と患者のサンプル検体の濃度パ
タ−ン図との差を取り、この差が一定の値Ｋ3 以上にな
った時、そこにＭ蛋白が存在すると言う方法である。 (1-6)６分画法 正常な人は５分画（濃度パタ−ン図の山が５つある）で
あるが、６分画になった時、それぞれの分画の幅を正常
なものと比較して正常な分画１つの中に２つの分画を認
めた時、その２つの分画の幅の内狭いものをＭ蛋白とす
る方法である。

【０００８】(2) 本発明は、また、セルロ−ズアセテ−
ト膜の支持体上に、被検査血清を塗布した上で通電し、
電気泳動による血清の分画パタ−ンを形成せしめ、その
後、染色液にて染色し、血清以外の部分を脱色させたも
のを濃度計にて測定、定量する電気泳動分析装置と前記
測定されたサンプル検体の血清蛋白分画の測定デ−タを
コンピュ−タ−に入力し、計算し、判断し、出力し、得
られた測定されたサンプル検体の血清蛋白分画の測定デ
−タのパタ−ンによってＭ蛋白の存否を判定するに当
り、下記の [i]〜[iii] 組合せの方法のうちから選ばれ
た１方法により、Ｍ蛋白が含まれているかを判断し、前
記判断結果により総合的にＭ蛋白の存否を判断するＭ蛋
白検出方法である。 [i]半値幅法＋ピ−ク比法＋傾斜法＋変曲点法の４方
法、 [ii]ピ−ク比法＋傾斜法＋変曲点法＋差分法＋６分画法
の５方法、 [iii]半値幅法＋ピ−ク比法＋傾斜法＋変曲点法＋差分
法＋６分画法の６方法。

【０００９】

【作用】本発明は、前述の如く、半値幅法，ピ−ク比
法，傾斜法，変曲点法，差分法，６分画法の検出方法の
うちどれか１つでも当てはまれば、Ｍ蛋白が含まれてい
るものと判断するものである。従って形状が多岐に亘る
Ｍ蛋白でも本発明方法を採用することにより、精度の高
い判別が出来、誤認が避けられるものである。

【００１０】次に各検出方法の特徴について述べる。 (1) 半値幅法は、小〜中量のＭ蛋白が含まれる場合に
有効である。例えば正常なパタ−ンでは、γグロブリン
はなだらかな山になるのが普通で結果的に半値幅は広く
なる。従ってこの幅が、アルブミン程度まで細くなった
場合はその分画にＭ蛋白が含まれていると判断できる。 (2) ピ−ク比法は、比較的に多量のＭ蛋白が含まれる
場合に有効である。例えば正常なパタ−ンでは、各グロ
ブリンのピ−クはアルブミンのピ−クの１／５程度であ
るから、この比が１／２程度になる場合はその分画にＭ
蛋白が含まれていると判断できる。 (3) 傾斜法は、中〜多量のＭ蛋白が含まれる場合に有
効である。例えば正常なパタ−ンでは、γ分画はなだら
かな勾配になるのが普通で、この勾配が、アルブミンの
勾配に近づいた場合はその分画にＭ蛋白が含まれている
と判断できる。 (4) 変曲点法は、ピ−クにならない程小量のＭ蛋白が
含まれる場合に有効である。前記の(1)-(3) の種類の判
定方法では、多かれ少かれ、Ｍ蛋白がピ−クや大きな勾
配を作らなければならなかったが、この変曲点法の場
合、２次微分波形を用いることにより、微量のＭ蛋白で
も判定出来るようになった。 (5) 差分による方法は、中〜多量のＭ蛋白が含まれる
場合に有効である。コントロ−ル検体（正常な状態に近
いパタ−ン）から大きくずれているかどうかを見ること
によって判断できるものである。しかしながら、差分は
コントロ−ル検体との差がある値以上になった場合に、
Ｍ蛋白として検出する方法なので、サンプル検体のデ−
タしかない場合には判定できない問題点がある。また、
コントロ−ル検体が正しく測定出来ない場合には、正常
である筈の検体にもＭ蛋白として検出してしまう恐れが
ある。この差分によって検出できる検体はピ−ク比及び
傾斜法によっても検出できることが判明した。 (6) ６分画法は、６分画の場合に有効である。通常で
はピ−クにならない部分を、コントロ−ル検体との比較
で抽出し、Ｍ蛋白の位置を検出するものである。しかし
ながら、この方法は上記差分法と同様にコントロ−ル検
体と比較して判断するので、サンプル検体のデ−タしか
ない場合には判定できない問題点があり、また、コント
ロ−ル検体が正しく測定出来ない場合には、正常である
筈の検体にもＭ蛋白として検出してしまう恐れがある。
更に、６分画である場合に必ずどこかの分画がＭ蛋白と
なってしまいますが、実際には６分画であってもＭ蛋白
でない場合がある。

【００１１】本発明方法においては、１検体当たりのポ
イント数を当初1024ポイントとしていたが、図２２に示
す如く、１２ビット×200 ポイントのデ−タ例として図
２８などに示す全自動泳動分析装置にて処理しているの
で、処理能力が飛躍的に向上した。更に、図２８などに
示すような、バッファ−ライズ部、アプリケ−タ−部、
泳動槽部、染脱色部、濃度計部及び演算処理部からなる
全自動泳動分析装置に、前述のようなＭ蛋白の検出方法
に基づく指令を入力し、計算し、判断せしめることによ
り、本発明方法の目的である熟練の専門医を要せずに、
判定の精度の高く、患者の病態を正確に診断できるもの
である。

【００１２】

【実施例】本発明の実施例は、全自動泳動分析装置２０
を用いて、図１６に示すように、濃度計で測定されたパ
タ−ンは、１２ビット×２００ポイントのデ−タ列とし
て処理した。

【００１３】［実施例１］先ず、第１の実施例として、
半値幅による検出方法について述べる。図１は、本発明
の第１実施例（半値幅法）に於ける検出方法を示す説明
図、図２は、同じく本発明の第１実施例（半値幅法）の
フロ−チャ−ト、図３は、半値幅を求めるためのフロ−
チャ−トである。先ず、図３のフロ−チャ−トに従って
半値幅を求める。 Ｓ1 ：該当分画のピ−クの１／２をｈとする。 Ｓ2 ：該当分画のピ−クの位置をＬとする。 Ｓ3 ：ｈがパタ−ンＬよりが大きいか？ＰＡＴ（Ｌ）＜
ｈ？ Ｓ4 ：ｎｏならばＬ←Ｌ−１としＳ3 に戻る。 Ｓ5 ：該当分画のピ−クの位置をＲとする。 Ｓ6 ：ＰＡＴ（Ｒ）＜ｈ？ Ｓ7 ：ｎｏならばＲ←Ｒ＋１としＳ6 に戻る。 Ｓ8 ：ｙｅｓならばＲ−Ｌを半値幅とする。 Ｓ9 ：終了する。 以上により半値幅を求める。そして、図２のフロ−チャ
−トにより、血清蛋白分画のＭ蛋白の検出を行う。 Ｓ1 ：アルブミン（ＡＬｂ）の半値幅を求めＨＡとす
る。 Ｓ2 ：分画数をｉとする。 Ｓ3 ：ＨＰ←０ Ｓ4 ：ｉ分画目の半値幅をＨＧとする。 Ｓ5 ：ＨＧ／ＨＡの値がＫ3(i)より小さいか？ Ｓ6 ：ｎｏならばＳ11に。 Ｓ7 ：ｙｅｓならばｉ分画目にピ−クの一番高い分画
（ＨＰ）を探す。 Ｓ8 ：ｎｏならばＳ11に。 Ｓ9 ：ｉ分画ピ−ク→ＨＰ Ｓ10：ｉ分画ピ−クがＨＰであればＭ蛋白と判断する。 Ｓ11：ｎｏならばｉ−１を演算する。 Ｓ12：ｉ＜１？ｎｏならばＳ3 のステップに戻り繰返
す。 Ｓ14：ｙｅｓならば終了する。 なお、基準値Ｋ3 は各分画毎に定められている。本発明
の半値幅による検出方法は、図１に示すようにアルブミ
ンの半値幅ＨＡと各グロブリンの半値幅ＨＧの比が基準
値Ｋ3(i)より小さい場合、その分画にＭ蛋白が多量に含
まれていると判断できるものである。基準値Ｋ3 は各分
画毎に定められている。

【００１４】［実施例２］第２の実施例として、ピ−ク
比法による検出方法について述べる。図４は、本発明の
第２実施例に於ける検出方法を示す説明図、図５は同じ
く本発明の第２実施例のフロ−チャ−トである。まず、
図４及び図５に示すように、 Ｓ1 〜Ｓ5 ：１分画目ピ−クと２分画目ピ−クを比べて
大きい方をＰＡとし、スタ−ト地点ｉを変える。 Ｓ6 ：ｉ分画目のピ−クＰＧを求め、 Ｓ7 ：ＰＧ／ＰＡのピ−ク比がＫ1 より大きいか？ Ｓ8 ：ｎｏならば、ｉ←ｉ+1分画目のピ−クを求め、 Ｓ9 ：ｙｅｓならばｉ分画目にＭ蛋白が含まれていると
判断する。 Ｓ10：ｉ＞分画数？ Ｓ11：ｎｏならばＳ3 のステップに戻る。 Ｓ12：ｙｅｓならば終了。 即ち、本発明のピ−クによる検出方法は、図１に示すよ
うに、各グロブリンのピ−クＰＧをアルブミンのピ−ク
ＰＡで割った値が、基準値Ｋ1 （この場合Ｋ1 ＝0.4）
より大きくなった場合、その分画にＭ蛋白が含まれると
判断する。

【００１５】［実施例３］第３の実施例として、傾斜に
よるＭ蛋白の検出方法について述べる。図６は傾斜によ
る検出方法を示す説明図であり、図７は同じく傾斜によ
る検出方法のフロ−チャ−トである。まず、図６及び図
７に示すように、 Ｓ1 ：パタ−ン (1)〜(200) までの傾斜ＤＥＦを求め、 Ｓ2 ：｜PAT(i+1)-PAT(i) ｜をDEF(i)とする。 Ｓ3 ：ｉ←ｉ+1，次のパタ−ンへ、 Ｓ4 ：ｉ＝パタ−ンの最後？ Ｓ5 ：ｙｅｓならば DEF()の最大値×Ｋ2 をDEF-THR と
する。 Ｓ6 ：ｎｏならばＳ2 のステップに戻る。 Ｓ7 ：２番目のフラクションの位置 Ｓ8 ：DEF(i)＞ DEF-THR？ Ｓ9 ：ｙｅｓならばｉ番目の点はＭ蛋白が含まれると判
断する。 Ｓ10：ｎｏならばｉ+1→ｉ Ｓ11：ｉ＞パタ−ンの最後？ Ｓ12：ｎｏならばＳ8 ステップに戻る。 Ｓ13：ｙｅｓならば終了。 即ち、本発明の傾斜による検出方法は、図６に示すよう
にα1 グロビリン以降の傾斜 DEFが基準値より大きくな
った場合、その分画にＭ蛋白が含まれると判断する。

【００１６】［実施例４］第４の実施例として、変曲点
による検出方法について述べる。図８は変曲点による検
出（γ分画）方法を示す説明図、図９は同じく変曲点に
よる検出（γ分画）による検出方法のフロ−チャ−ト、
図１０は変曲点による検出（β分画）方法を示す説明図
であり、図１１は同じく変曲点による検出（β分画）に
よる検出方法のフロ−チャ−トである。 (1) γ上のＭ蛋白の検出方法 まず、図８及び図９に示すように、 Ｓ1 ：γグロブリンの始点Ｆ1 からγグロブリンの終点
Ｆ2 までの範囲で２次微分が最初に負になる位置Ｌ1 を
求める。 Ｓ2 ：前記Ｌ1 が存在したか？ Ｓ3 ：ｙｅｓならばＬ1 からγグロブリンの終点Ｆ2 ま
での範囲で２次微分が最初に正になる位置Ｌｒを求め
る。 Ｓ4 ：ｎｏならば変曲点による検出（β）による検出の
ステップへ続く。 Ｓ5 ：前記Ｌｒが存在したか？ Ｓ6 ：ｙｅｓならばＬ1 からＬｒまでの範囲で２次微分
が最小になる位置ＭＬを求める。 Ｓ7 ：ｎｏならば変曲点による検出（β）による検出の
ステップへ続く。 Ｓ8 ：γグロブリンの始点Ｆ1 からＭＬまでの範囲でパ
タ−ンの高さがＭＬの高さの半分になる位置ＨＬを求め
る。 Ｓ9 ：ＨＬとＭＬの距離をＷＬとする。 Ｓ10：Ｌｒからγグロブリンの終点Ｆ2 までの範囲で２
次微分が最初に負になる位置Ｒ1 を求める。 Ｓ11：Ｒ1 が存在したか？ Ｓ12：ｙｅｓならばＲ1 からγグロブリンの終点Ｆ2 ま
での範囲で２次微分が最初に正になる位置Ｒｒを求め
る。 Ｓ13：ｎｏならば変曲点による検出（β）による検出の
ステップへ続く。 Ｓ14：Ｒｒが存在したか？ Ｓ15：ｙｅｓならばＲ1 からＲｒまでの範囲で２次微分
が最小になる位置ＭＲを求める。 Ｓ16：ｎｏならば変曲点による検出（β）による検出の
ステップへ続く。 Ｓ17：ＭＲからパタ−ンの終点までの範囲でパタ−ンの
高さがＭＲの高さの半分になる位置ＨＲを求める。 Ｓ18：ＨＲとＭＲの距離をＷＲとする。 Ｓ19：ＷＬ＞ＷＲ？ Ｓ20：ｙｅｓならばＭＲの位置にＭ蛋白が含まれると判
断する。 Ｓ21：ｎｏならばＭＬの位置にＭ蛋白が含まれると判断
する。 Ｓ22：終了する。 即ち、γ上のＭ蛋白の検出方法は、γ分画の始点から終
点までの範囲で２次微分の値が「＋から−」「−から
＋」なる位置を探す。これらの位置が１組しか無い場合
は次の（２）の検出方法に移行する。２組の変曲点Ｌ1
，Ｌｒ，Ｒ1 ，Ｒｒが存在する場合には、山の半分の
高さとなる位置までの距離ＷＬ，ＷＲの短い方にＭ蛋白
が含まれていると判断できる。

【００１７】(2) β上のＭ蛋白の検出方法 まず、図１０及び図１１に示すように、 Ｓ1 ：βグロブリンの頂点からγグロブリンの始点まで
の範囲で２次微分が最初に負になる位置Ｌ1 を求める。 Ｓ2 ：前記Ｌ1 が存在したか？ Ｓ3 ：ｙｅｓならばＬ1 からγグロブリンの始点までの
範囲で２次微分が最初に正になる位置Ｌｒを求める。 Ｓ4 ：ｎｏならば終了。 Ｓ5 ：前記Ｌｒが存在したか？ Ｓ6 ：ｙｅｓならばＬｒからγグロブリンの始点までの
範囲で２次微分が最初に正になる位置Ｒを求める。 Ｓ7 ：ｎｏならば終了。 Ｓ8 ：Ｒが存在したか？ Ｓ9 ：ｙｅｓならばＬｒからＲまでの範囲で２次微分が
最小になる位置Ｍを求める。 Ｓ10：ｎｏならば終了。 Ｓ11：Ｍの位置にＭ蛋白が含まれると判断する。 Ｓ12：終了する。 即ち、β上のＭ蛋白の検出方法は、β分画の頂点からγ
グロブリンの終点までの範囲で２次微分の値が「−から
＋」「＋から−」なる位置を探す。通常の分画では「−
から＋」なる位置はあるが、「＋から−」になる点は無
い。ところがピ−クにならない程のβグロブリンの山が
存在する場合、この点Ｌ1 ，Ｌｒ，Ｒが現れる。このと
き、ＬｒとＲの間の最小値Ｍの位置にＭ蛋白が含まれて
いると判断できる。

【００１８】［実施例５］第５の実施例として、差分に
よる検出方法について述べる。図１２は差分による検出
方法について説明図、図１３は同じく差分による検出に
よる検出方法のフロ−チャ−トである。まず、図１２及
び図１３に示すように、 Ｓ1 ：パタ−ン１〜 200までの差分を求める。 Ｓ2 ：コントロ−ル検体高さ−サンプル検体高さ＝DEF
(i)を求める。 ｜CNT(i)-PAT(i) ｜＝DEF(i) Ｓ3 ：ポイントを１ずらす。 Ｓ4 ：ｉ＞パタ−ンの最後？ Ｓ5 ｙｅｓならば３番目のフラクションの位置，ｍi ←
ｉ，DEF(mi) をmax とする。max ←DEF(mi) Ｓ6 ：ｎｏならばＳ2 のステップに戻る。 Ｓ7 ：ｍａｘ＜DEF(i)？ Ｓ8 ：ｙｅｓならばｍi ←ｉ，DEF(mi) をmax とする。
max ←DEF(mi) とする。 Ｓ9 ：ｎｏ又はＳ8 のステップに続いてｉ+1→ｉ Ｓ10：ｉ＞パタ−ンの最後？ Ｓ11：ｎｏならばＳ7 ステップに戻る。 Ｓ12：ｙｅｓならばｍａｘ＞Ｋ₃ ？ Ｓ13：ｎｏならば終了。 Ｓ14：ｙｅｓならばｍi の位置にＭ蛋白が含まれている
と判断する。 Ｓ15：終了する。 即ち、本発明の差分による検出方法は、コントロ−ル検
体とサンプル検体のパタ−ンの差の絶対値［図１３のフ
ロ−チャ−トではＤＥＦ(i) ］を求め、その絶対値の最
大値（図１２の説明図、図１３のフロ−チャ−トではma
x ）が、基準値（図１３のフロ−チャ−トではＫ₃ ）よ
り大きくなった場合、その分画にＭ蛋白が含まれている
と判断する。

【００１９】［実施例６］第６の実施例として、６分画
による検出方法について述べる。図１４は６分画による
検出方法について説明図、図１５は同じく６分画による
検出による検出方法のフロ−チャ−トである。まず、図
１４及び図１５に示すように、 Ｓ1 ：パタ−ンは６分画か？ Ｓ2 ：ｙｅｓならば１分画目から６分画までを求める。 Ｓ3 ：ｎｏならば終了。 Ｓ4 ：コントロ−ル検体のｉ分画目の範囲にサンプル検
体のｉ分画目及びｉ+1の分画目のピ−クが入っているか
？ Ｓ5 ：ｎｏならばｉ←ｉ+1 Ｓ6 ：ｉ＝６ならば終了でｎｏならばＳ4 ステップに戻
る。 Ｓ7 ：Ｓ4 ステップでｙｅｓならばｉ分画目の始点をＬ
とする。 Ｓ8 ：ｉ+1分画目の始点からｉ+1分画目の終点までの範
囲で△ｙになる位置をＲとする。 Ｓ9 ：Ｌとｉ分画目の終点までの距離をＷＬとする。 Ｓ10：Ｒとｉ分画目の終点までの距離をＷＲとする。 Ｓ11：ＷＬ＜ＷＲ？。 Ｓ12：ｙｅｓならばｉ分画目の位置にＭ蛋白が含まれて
いると判断する。 Ｓ13：ｎｏならばｉ+1分画目の位置にＭ蛋白が含まれて
いると判断する。 Ｓ14：終了する。 即ち、本発明の６分画による検出方法は、コントロ−ル
検体とサンプル検体のピ−ク位置を比較し、ピ−ク位置
が大きくずれている分画（図１９の説明図では５分画
目）にＭ蛋白が含まれていると判断するものである。

【００２０】次に、図１７に診断システムの検体デ−タ
分析例を示す。また表１にピ−ク比法，傾斜法，半値幅
法、変曲点法の各検出方法別並びに量別の検出成績を、
表２に本発明法Ｉ（実施例２のピ−ク比法，実施例３の
傾斜法，実施例１の半値幅法、実施例４の変曲点法の４
検出法により検出した場合）と本発明法II（実施例２の
ピ−ク比法，実施例３の傾斜法，実施例４の変曲点法，
実施例５の差分法，実施例６の６分画法の５検出法によ
り検出した場合）検出率の比較を示す。

【００２１】

【表１】

【００２２】

【表２】

【００２３】なお、１つの検体について、２種類以上の
方法が検出する場合があるので、表のピ−ク比〜変曲点
の値を加算しても検出数とは一致しない。表１に示すよ
うに、Ｍ蛋白の量別での検出率は、当然中量及び多量の
場合は、１００％の検出率を示し、微量でも９３％であ
り、全体として９８％の検出率で検出できる。また検出
方法別では、半値幅法が全体の２４／６６（３６％），
傾斜法が全体の１７／６６（２６％），ピ−ク比法が全
体の１５／６６（２３％）次いで変曲点法全体の１０／
６６（１５％）の順であり、量別の場合、Ｍ蛋白が微量
の場合、変曲点法の場合が検出成績が良好（７／１５＝
４７％）で、半値幅（４／１５＝２７％），傾斜（３／
１５＝２０％），ピ−ク比法（１／１５＝７％）の順で
あり、ピ−ク比、傾斜の検出数が減り、半値幅の検出が
かなりの割合で存在する傾向を有する。

【００２４】

【発明の効果】本発明の血清蛋白分画のＭ蛋白検出方法
によれば、精度の高い検出法を組み合わせて検出可能な
ので、患者の病態が正確に診断され、従来のように熟練
を要せずに診断できる等の効果を奏することが出来る。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の第１実施例（半値幅法）に於ける検出
方法を示す説明図。

【図２】同じく本発明の第１実施例（半値幅法）のフロ
−チャ−ト。

【図３】本発明の第１実施例（半値幅法）に於ける半値
幅のフロ−チャ−ト。

【図４】本発明の第２実施例（ピ−ク比法）に於ける検
出方法を示す説明図。

【図５】同じく本発明の第２実施例（ピ−ク比法）のフ
ロ−チャ−ト。

【図６】本発明の第３実施例（傾斜法）に於ける検出方
法を示す説明図。

【図７】同じく本発明の第３実施例（傾斜法）のフロ−
チャ−ト。

【図８】本発明の第４実施例（変曲点法：γ分画）に於
ける検出方法を示す説明図。

【図９】同じく本発明の第４実施例（変曲点法：γ分
画）に於ける検出方法のフロ−チャ−ト。

【図１０】本発明の第４実施例（変曲点法：β分画）に
於ける検出方法を示す説明図。

【図１１】同じく本発明の第４実施例（変曲点法：β分
画）に於ける検出方法のフロ−チャ−ト。

【図１２】本発明の第５実施例（差分法）に於ける検出
方法を示す説明図。

【図１３】同じく本発明の第５実施例（差分法）に於け
る検出方法のフロ−チャ−ト。

【図１４】本発明の第６実施例（６分画法）に於ける検
出方法を示す説明図。

【図１５】同じく本発明の第６実施例（６分画法）に於
ける検出方法のフロ−チャ−ト。

【図１６】測定デ−タの構成の説明図。

【図１７】診断システムの検体デ−タ分析例の説明図。

【図１８】電気泳動分析法によって得られたサンプル検
体の濃度図（パタ−ン）。

【図１９】全自動電気泳動装置のフロ−チャ−トを示す
説明図。

【符号の説明】

１１ キ−ボ−ド ２０ 全自動泳動分析装置 ２１ コンピュ−タ− ２２ 入力インタ−フェイス ２３ 外部メモリ− ２５ 出力インタ−フェイス ２６ 出力装置

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭62−47534（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−2656（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−278442（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) G01N 33/50 - 33/98 G01N 27/447

Claims (2)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 電気泳動分析方法により測定されたサン
   プル検体の血清蛋白分画の測定データのパターンにおい
   て、アルブミンの血清蛋白分画ピークの半分の高さとな
   る点の距離（半値幅）ＨＡと各グロブリンの血清蛋白分
   画ピークの半分の高さとなる点の距離（半値幅）ＨＧの
   比が小さくなり、グロブリンの半値幅ＨＧがアルプミン
   の半値幅程度まで細くなった場合に、該血清蛋白分画に
   Ｍ蛋白が含まれていると判断することを特徴とする血清
   蛋白分画のＭ蛋白検出方法。
2. 【請求項２】 セルローズアセテート膜の支持体上に、
   被検査血清を塗布した上で通電し、電気泳動による血清
   の分画パターンを形成せしめ、その後、染色液にて染色
   し、血清以外の部分を脱色させたものを濃度計にて測定
   ・定量する電気泳動分析装置と前記測定されたサンプル
   検体の血清蛋白分画の測定データをコンピュータに入力
   し、計算し、判断し、出力し、得られた測定されたサン
   プル検体の血清蛋白分画の測定データのパターンによっ
   てＭ蛋白の存否を判定するに当たり、 （１）アルブミンの血清蛋白分画ピークの半分の高さと
   なる点の距離（半値幅）ＨＡと各グロブリンの血清蛋白
   分画ピークの半分の高さとなる点の距離（半値幅）ＨＧ
   の比が小さくなり、グロブリンの半値幅ＨＧがアルプミ
   ンの半値幅程度まで細くなった場合に該血清蛋白分画に
   Ｍ蛋白が含まれていると判断する半値幅法、 （２）各グロブリンの血清蛋白分画のピークＰＧが、ア
   ルブミンの血清蛋白分画のピークＰＡの１／２程度にな
   った場合、該血清蛋白分画にＭ蛋白が含まれているとピ
   ーク比によって判断するピーク比法、 （３）α１グロブリン以降の血清蛋白分画の傾斜ＤＥＦ
   が、アルブミンの傾斜に近づいた場合、該血清蛋白分画
   にＭ蛋白が含まれていると傾斜によって判断する傾斜
   法、 （４）γグロブリンの血清蛋白分画の始点からγグロブ
   リンの血清蛋白分画の終点までの範囲で２次微分の値が
   負になる変曲点Ｌ１、Ｒ１が存在し、２次微分の値が正
   となる変曲点Ｌｒ、Ｒｒの２組の変曲点が存在する場合
   には各々の山の半分の高さとなる位置までの距離ＷＬ、
   ＷＲの短い方にγグロブリンの血清蛋白分画上にＭ蛋白
   が含まれていると判断し、γグロブリンの血清蛋白分画
   上に１組しか変曲点がないが、βグロブリンの血清蛋白
   分画の頂点からγグロブリンの血清蛋白分画の始点まで
   の範囲で２次微分の値が正になる変曲点Ｌ１、Ｒが存在
   し、負になる変曲点Ｌｒが存在する場合には、Ｌｒから
   Ｒまでの範囲で２次微分が最小となる位置Ｍに、βグロ
   ブリンの血清蛋白分画上にＭ蛋白が含まれていると変曲
   点によって判断する変曲点法、 （５）サンプル検体のパターンの絶対値がコントロール
   検体のパターンの絶対値を越えて大きくなった場合、該
   血清蛋白分画にＭ蛋白が含まれていると判断する差分
   法、 （６）コントロール検体とサンプル検体のピーク位置を
   比較し、該ピーク位置が大きくずれている分画にＭ蛋白
   が含まれていることを６分画によって判断する６分画
   法、 以上（１）〜（６）方法の内、組合わせ［ｉ］：（１）
   〜（４）、または組合わせ［ｉｉ］：（１）〜（６）の
   いずれか一方により、Ｍ蛋白の存否を判断することを特
   徴とする血清蛋白分画のＭ蛋白検出方法。