JP3199281B2 - 水性液体のイオン強度及び/又は比重量の測定用試薬及び測定方法 - Google Patents
水性液体のイオン強度及び/又は比重量の測定用試薬及び測定方法Info
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Description
比重量の測定方法及びこの目的のための試薬に関し、前
記試薬の組成はイオン強度を示す色変化が本質的に測定
する液体の比重量に直接的に依存し、そしてpH変化に依
存しないようにしたものである。
の補助的な装置例えば比重計、比重瓶又は屈折計を使用
する種々の方法で測定することができる。達成し得る測
定精度は例外なく良好であるが、これらの装置が関連す
る測定方法に付随して時々複雑な補正及び温度調節又は
清掃作業の必要があることも真実である。特に一連の又
は連続的な検査のため、そのような方法は従って装置に
関する高い費用をかけることで使用することができまた
自動化することができる。尿の臨床化学的検査において
も、自動化と試験の単純化の問題は費用の低減に関連し
て特別な役割を果たす。従ってすべての臨床化学の開発
の方向への前向きの道はこれまでいわゆる乾燥化学(「d
ry chemistry」)特に試験用小片の形態で具体化される
それの開発について長い時間が費やされてきた。
発研究者に特別の問題を提供したのである。というのは
今日まで知られているすべての試験方法はこれを試験用
小片に移し換えることができなかったからである。この
ような状況下で開発化学者には、臨床化学者が尿中に通
常含まれる物質の濃度に関連する記述に第一に関心を持
つことが役立つこととなった。従って化学者によって密
度が測定されることになった。というのは、求める物質
の濃度にそれは本質的に相関するからであった。
び顕著な位置を占めている。従って総合的な性質の1つ
として、塩濃度を測定することは理にかなうものと思わ
れる。
ン強度を測定する方法はUS−A−4,318,709及
び対応するDE−A−29 44 980に記述されてい
る。この方法においては、試料を弱酸性又は弱塩基性の
少なくとも50%が中和された高分子電解質ポリマー及
び指示薬を含む試薬と混合する。基礎となる原理は水溶
液の比重量とイオン強度との間の比例関係である。
オン基を持つポリマーである。ポリアクリル酸又はポリ
ビニルアミンを挙げることができる例である。
62)の試験用小片への移し換えは明らかに技術的な困
難を含むが、一方緩衝剤系でイオンにより起こるpH変化
は試験用小片を使用して極めて容易に測定することがで
きる。緩衝剤系は錯体化緩衝物質及びイオン交換高分子
電解質を含む。EP 0 023 631の実施例に見ら
れるように増加するイオン強度によりpH変化を達成する
ための本質的な要素は緩衝物質の性質とpHである。
ば高分子電解質ポリマーを使用しないで少なくとも1つ
のpH緩衝物質及び/又は錯体化剤及びpH指示薬を指示薬
として含む方法を開示している。
びEP 114 315に記述のような塩により起こるpH
変動の測定は、尿のpH変化を試験用小片の対応する緩衝
化により不適当にしか補償することができない。
共に変化し、そして試験用小片が「にじみ出す」(bleed
out)欠点を持つ。これは1分後に比重量について読み
取った値が2分後又は更に5分後に読み取った値と大き
く異なる結果となる。次に試験がこの目的のために特別
に訓練された人間によらないで例えば任意の患者によっ
て実行され、そして評価が常に同時に実行されない場合
これは健康状態の誤った解釈を生じ、重大な結果を引き
起こす。
する錯体化剤の親和性が異なるため示される結果が本質
的に試料中のイオン特に金属イオンの組成に依存すると
いう欠点を持つ。しかしながら、この組成も通常の尿に
おいては大きな変動にさらされる。
シグナルを発生し、そしてこの方法により作った試験用
小片のにじみ出しを防ぐ水性液体のイオン強度及び/又
は比重量を測定する方法を開発する目的に基づいてい
た。
してそれ自身pH指示薬として使用する物質と緩衝塩に洗
浄剤を添加することにより比重量をpH測定法により間接
的に求めるのではなく、イオン濃度(表1参照)により
起こる色変化として直接求められ、そしてそれらの優れ
た色の輝きの結果既知のそれより相当に高い感度を持
ち、そしてその上高い色の定常性とにじみ出しに対する
堅牢度を示す試薬が得られることを見出した。
液体のイオン強度及び/又は比重量を測定するための緩
衝剤添加試薬(buffered reagent)に関するもので、前
記試薬は少なくとも1つの洗浄剤及びそれ自身pH指示薬
として知られる物質を指示薬として含み、そして試料添
加によるそのpH変化が観察され得る色変化に相当するそ
れよりも低いものである。
ブロモチモールブルーを含むのが好ましい。
いくつかの第四アンモニウム塩の混合物である。双性イ
オン洗浄剤又は双性イオン洗浄剤の混合物も適してい
る。
せるのが好ましい。
ことからなる水性液体のイオン強度及び/又は比重量の
測定方法に関する。
は比重量を測定するためのプラスチックス小片及び試薬
をそれに付着させ及び含浸させた吸着剤の支持体から作
られた試験用小片にも関し、前記試薬は上述の試薬を試
薬として使用することからなる。
るそのイオン強度、及び/又は比重量を本発明の方法に
より測定する水性液体中に溶解するか及び/又は溶解し
なくてもよい。溶解する成分はイオン及び非イオン物質
である。溶解しない成分は溶解性の乏しい化学物質のみ
ならず他の材料例えば細胞のような生物学的物質である
こともできる。
高度に適している。尿の検査に特に適していることが認
められた。
る。pH緩衝物質は弱酸とこの酸の事実上完全に解離した
塩との混合物及び/又は弱塩基とこの塩基の事実上完全
に解離した塩との混合物〔例えば Rompps Chemie Lexik
on(ロンプ化学辞典(Rompp'sChemical Encyclopedi
a)、第7版、5巻、見出し語「Buffer」)参照〕であ
る。緩衝剤のpHは酸又は塩基の添加によりほとんど変化
しない。
い緩衝物質は例えばリン酸、ホウ酸、炭酸、クエン酸、
ジエチルマロン酸、ニトリロ−トリスメチレンリン酸の
イオンを含む緩衝剤である。双性イオン緩衝剤例えばグ
リシン緩衝剤又は2−(N−モルホリノ)エタンスルホ
ン酸(MES)も適している。pH緩衝物質は試料添加後
の濃度が0.005〜1.0mol/リットル、好ましくは
0.08〜0.3mol/リットル、極めて好ましくは0.1
0〜0.18mol/リットルである濃度で使用する。
浄剤の用語と界面活性剤の用語は本発明の意味では同義
語である〔同じく Rompps Chemie Lexikon(ロンプ化学
辞典、第7版、6巻、見出し語「Surfactants」)参
照〕。
(quats)及び双性イオン洗浄剤型の洗浄剤である。本
発明の試験組成物において、洗浄剤は含浸溶液中0.0
4%〜5%の濃度で使用するのが好ましい。洗浄剤は従
来技術の試験組成物のすぐれたところを改良するために
使用することもできる。洗浄剤混合物の使用も好まし
い。
の適当な指示薬はそれ自身4〜12のpH測定用pH指示薬
として知られる物質である。チモールブルーとブロモチ
モールブルーがこの場合特に高度に適している。
0.1〜100mmol/リットル、特に好ましくは1〜5
0mmol/リットルの範囲である。
の添加を何等必要としない。しかしながら、高分子電解
質又は錯体化剤を含むイオン強度又は比重量測定用試薬
への洗浄剤の添加はこれらの試薬により高い色の輝きを
与え、従って本発明の一部分である。
支持体中の両方で実施することができる。
上の吸着剤支持体に被覆として好都合に適用されている
それである。好ましい支持体は多孔質支持体材料又はマ
ットである。マットは繊維で作った紙類似の支持体を意
味すると解される。試薬を含浸させた吸着剤支持体は好
ましくは吸着剤支持体材料に試薬の溶液を含浸させそし
てそれを乾燥することにより製造される。この方法によ
り、試薬の膜が全表面上好ましくは内部表面にも形成さ
れる。試薬は支持体にも適用でき、例えば膜形成及び膨
潤性添加物と共に試験小片に直接適用することができ
る。試薬は慣用の添加物例えば安定剤、湿潤剤又は膨潤
剤を含むこともできる。
これらの試験小片は試薬の溶液を含浸させ乾燥したマッ
トからなるテスト領域を持つ。このテスト領域を検査さ
れる尿と、例えば試験小片を尿に浸漬して接触させ、そ
してテスト領域が濡れたらできるだけ早く引き上げる。
次いでテスト領域が示す色を試験小片に取り付けられた
サンプルの色と比較される。この場合サンプルの各々の
色には比重量の値が割り当てられている。求める比重量
は一致する色を持つサンプルに割り当てられた値であ
る。
又は比重量を測定するためのテスト領域はそれ自身当業
者に知られた多数の小片の成分である。
urg, Germany)の名前で知られる装置を用いてテスト領
域の読み取りと評価を行うのが好ましい。
ば次の組成を持つ。
は7.5、最終濃度80〜300mmol/リットル 洗浄剤:双性イオン洗浄剤、好ましくはベンゼトニウム
クロリド0.2〜2%(w/v)、好ましくは1% 指示薬:pH7〜9で色変化するpH指示薬、好ましくはチ
モールブルー又はブロモチモールブルー、濃度1〜50
mmol/リットル、好ましくは5〜20mmol/リットル
るそれ自身知られた方法で実行することができる。視覚
評価の場合、この検量線は例えばカラースケールであ
る。
には既に実行することができる。次に得られる色は少な
くとも15分間安定であり、従って例えば比較的長い一
連の測定においてもなお測定値は直接比較可能である。
一部分をなすものである。
で本発明を何等制限するものではない。
を含浸させ乾燥する。
を約pH7.5の90mMのリン酸二水素一ナトリウム溶液
の90mlに溶解する。1.5%濃度のブロモチモールブ
ルーメタノール溶液の10mlを添加後、混合物のpHを1
M水酸化ナトリウム溶液でpH7.5に調節する。得られ
る試験紙を5×5mmの正方形に切断し、そして堅いプラ
スチック膜の上に接着する。この方法で試験紙が得ら
れ、これを種々の濃度の尿の中に浸漬した後視覚により
そして反射測光法により評価することができる。その結
果を表1に示す。
この目的に適する装置(RapimatR, Behringwerke AG, G
ermany)を使用して完全に自動的に評価した(図1)。
使用した尿は臨床尿試料(×)で、これをより低い密度
範囲用として蒸留水で1+1に希釈した(△)。密度単
位を次のように定義した。 DU=(測定した密度−1,000)×103
ットルの緩衝液を含む実施例1の溶液を、試料添加の前
と後にpH電極の使用により測定した。対応する量の蒸留
水と混合したそれぞれの出発溶液に関連する相対的pH変
化を表2に示す。
1及びEP 114 315/実施例9.1により調製
し、上述のように試験した。
種々の濃度の尿試料に浸漬した後自動式装置で測定して
得られる測定値と密度単位との相関を示す図である。
Claims (9)
- 【請求項1】 色指示薬を使用した水性液体のイオン強
度又は比重量を測定するための緩衝剤添加試薬であっ
て、前記試薬は少なくとも1つの洗浄剤及び1つのpH指
示薬を含み、前記洗浄剤の1つが少なくともベンゼトニ
ウムクロリドであり、そして試料添加によるpH変化が観
察され得る色変化に相当するそれよりも低いものである
上記試薬。 - 【請求項2】 pH指示薬がチモールブルー又はブロモチ
モールブルーである請求項1記載の試薬。 - 【請求項3】 洗浄剤が1つ又はそれより多い第四アン
モニウム塩を含む請求項1記載の試薬。 - 【請求項4】 洗浄剤が1つ又はそれより多い双性イオ
ン洗浄剤を含む請求項1記載の試薬。 - 【請求項5】 吸着剤支持体の上に含浸させた請求項1
記載の試薬。 - 【請求項6】 (i) 液体を請求項1記載の緩衝剤添加
試薬と接触させ、 (ii) 得られる混合物の色変化を測定し、そして (iii) イオン強度又は比重量を色変化から求める 水性液体のイオン強度又は比重量の測定方法。 - 【請求項7】 検量線をイオン強度又は比重量を求める
ために使用する請求項6記載の方法。 - 【請求項8】 試薬を吸着剤支持体の上に含浸させる請
求項6記載の方法。 - 【請求項9】 プラスチック小片及び請求項1記載の試
薬をそれに付着させ及び含浸させた吸着剤支持体からな
る水性液体のイオン強度又は比重量の測定のための試験
用小片。
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1997
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