JP3155562B2 - 抗 体 - Google Patents
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、癌抑制遺伝子といわれ
ているｐ５３遺伝子の産物（ｐ５３蛋白）に対する抗体
に関する。本発明の抗体は癌の診断薬として使用でき
る。
ているｐ５３遺伝子の産物（ｐ５３蛋白）に対する抗体
に関する。本発明の抗体は癌の診断薬として使用でき
る。
【０００２】
【従来の技術】ｐ５３蛋白は核に局在するリン酸蛋白で
あり本来Simian virus 40T抗原と会合する蛋白として発
見され、その後分子量５８kdのアデノウイルスＥ１Ｂ蛋
白、熱ショック蛋白ＨＳＰ７０と結合することが明らか
になった。このｐ５３蛋白はヒトの腫瘍では４０％の乳
癌、３０％の大腸癌組織で発現異常が見られた。これら
の腫瘍組織中、癌細胞株中におけるｐ５３蛋白の蓄積は
ＳＶ４０Large T 抗原、Ｅ１Ｂ５８kd蛋白との会合又は
ｐ５３遺伝子及び蛋白の変異によってもたらされると考
えらている。また、最新の知見ではｐ５３蛋白は正常細
胞においては細胞増殖を負に制御することが示唆されて
おり、ｐ５３蛋白の不活性化あるいは変異が細胞の腫瘍
化をもたらすことが報告されている。従って、このｐ５
３遺伝子産物に対する抗体は癌の診断薬として使用でき
る。
あり本来Simian virus 40T抗原と会合する蛋白として発
見され、その後分子量５８kdのアデノウイルスＥ１Ｂ蛋
白、熱ショック蛋白ＨＳＰ７０と結合することが明らか
になった。このｐ５３蛋白はヒトの腫瘍では４０％の乳
癌、３０％の大腸癌組織で発現異常が見られた。これら
の腫瘍組織中、癌細胞株中におけるｐ５３蛋白の蓄積は
ＳＶ４０Large T 抗原、Ｅ１Ｂ５８kd蛋白との会合又は
ｐ５３遺伝子及び蛋白の変異によってもたらされると考
えらている。また、最新の知見ではｐ５３蛋白は正常細
胞においては細胞増殖を負に制御することが示唆されて
おり、ｐ５３蛋白の不活性化あるいは変異が細胞の腫瘍
化をもたらすことが報告されている。従って、このｐ５
３遺伝子産物に対する抗体は癌の診断薬として使用でき
る。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、癌の診断薬として利用することができる、ｐ５３遺
伝子産物に対する抗体を提供することである。
は、癌の診断薬として利用することができる、ｐ５３遺
伝子産物に対する抗体を提供することである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意研究の
結果、ｐ５３蛋白中の特定のアミノ酸配列から成るペプ
タイドが高い抗原性を有し、かつ、該抗原に対する抗体
は癌組織中のｐ５３蛋白と特異的に結合することを見出
し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、下記のア
ミノ酸配列を有するペプタイド（以下、単に抗原ペプタ
イドと言うことがある）を抗原として得られる抗体を提
供する。 Cys-Phe-Thr-Glu-Asp-Pro-Gly-Pro-Asp-Glu-Ala-Pro-Ar
g-Met-Pro-Glu-Ala
結果、ｐ５３蛋白中の特定のアミノ酸配列から成るペプ
タイドが高い抗原性を有し、かつ、該抗原に対する抗体
は癌組織中のｐ５３蛋白と特異的に結合することを見出
し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、下記のア
ミノ酸配列を有するペプタイド（以下、単に抗原ペプタ
イドと言うことがある）を抗原として得られる抗体を提
供する。 Cys-Phe-Thr-Glu-Asp-Pro-Gly-Pro-Asp-Glu-Ala-Pro-Ar
g-Met-Pro-Glu-Ala
【０００５】上述のように、本発明の抗原は、上記ペプ
タイドを対応抗原として得られるものである。抗原ペプ
タイドのアミノ酸配列はヒトｐ５３蛋白の５４番目から
６９番目のアミノ酸配列に相当し、キャリアー蛋白を結
合するためにシスティンをアミノ末端に加えたアミノ酸
配列である（Molecular and Cellular Biology、 July19
85、 p.1601-1610) 。
タイドを対応抗原として得られるものである。抗原ペプ
タイドのアミノ酸配列はヒトｐ５３蛋白の５４番目から
６９番目のアミノ酸配列に相当し、キャリアー蛋白を結
合するためにシスティンをアミノ末端に加えたアミノ酸
配列である（Molecular and Cellular Biology、 July19
85、 p.1601-1610) 。
【０００６】以下、本発明の抗体の調製方法について述
べる。まず、上記抗原ペプタイドを調製する。これは、
市販の自動ペプタイド合成装置を用いて容易に行なうこ
とができる。
べる。まず、上記抗原ペプタイドを調製する。これは、
市販の自動ペプタイド合成装置を用いて容易に行なうこ
とができる。
【０００７】次いで、抗原ペプタイドを適当なキャリヤ
ーと結合させる。キャリヤーとしては、従来より公知の
種々のキャリヤー蛋白、例えば、キーホールリンペット
ヘモシアニン、アルブミン、サイログロブリン等を使用
することができる。キャリヤー蛋白と抗原ペプタイドと
の結合は、従来より公知の方法、例えばサイシニイミド
を用いる方法等を用いることができる。
ーと結合させる。キャリヤーとしては、従来より公知の
種々のキャリヤー蛋白、例えば、キーホールリンペット
ヘモシアニン、アルブミン、サイログロブリン等を使用
することができる。キャリヤー蛋白と抗原ペプタイドと
の結合は、従来より公知の方法、例えばサイシニイミド
を用いる方法等を用いることができる。
【０００８】次いで、キャリヤーに結合された抗原ペプ
タイドで、動物を免疫する。免疫する動物としては、マ
ウス、ウサギ、ラット、ヒツジ等を使用することがで
き、免疫の方法は常法により行なうことができる。
タイドで、動物を免疫する。免疫する動物としては、マ
ウス、ウサギ、ラット、ヒツジ等を使用することがで
き、免疫の方法は常法により行なうことができる。
【０００９】次いで、免疫した動物から採血し、抗血清
を得る。得られた抗血清より本発明の抗体を得る方法
は、従来知られているいずれの方法でも構わない。例え
ば、ｐ５３遺伝子産物が多量に蓄積しているヒト胃癌細
胞株ＭＫＮ−１を可溶化し、ウエスタンブロッテングで
蛋白をニトロセルロースに転写し、採取した抗血清で蛋
白のバンドを検出し、この検出された蛋白の分子量が53
000 ダルトンであるか否かで判定することができる。
を得る。得られた抗血清より本発明の抗体を得る方法
は、従来知られているいずれの方法でも構わない。例え
ば、ｐ５３遺伝子産物が多量に蓄積しているヒト胃癌細
胞株ＭＫＮ−１を可溶化し、ウエスタンブロッテングで
蛋白をニトロセルロースに転写し、採取した抗血清で蛋
白のバンドを検出し、この検出された蛋白の分子量が53
000 ダルトンであるか否かで判定することができる。
【００１０】あるいは、上記のように免疫した動物のリ
ンパ球とミエローマ細胞とを融合させ、本発明の抗体を
特異的に産生するハイブリドーマを選択し、これからモ
ノクローナル抗体として本発明の抗体を得ることもでき
る。なお、上記方法に従った下記実施例において得られ
た免疫グロブリンは下記のような性質を有するものであ
った。 (1) 免疫グロブリンの種類：ＩｇＧ (2) 分子量 ：１５０×１０3 (3) 抗原ペプタイド及びｐ５３蛋白と特異的に反応す
る。
ンパ球とミエローマ細胞とを融合させ、本発明の抗体を
特異的に産生するハイブリドーマを選択し、これからモ
ノクローナル抗体として本発明の抗体を得ることもでき
る。なお、上記方法に従った下記実施例において得られ
た免疫グロブリンは下記のような性質を有するものであ
った。 (1) 免疫グロブリンの種類：ＩｇＧ (2) 分子量 ：１５０×１０3 (3) 抗原ペプタイド及びｐ５３蛋白と特異的に反応す
る。
【００１１】
【発明の効果】本発明により、抗原ペプタイド及び癌組
織中に蓄積されるｐ５３蛋白と特異的に反応する抗体が
提供された。本発明の抗体は、癌組織の癌細胞の核のみ
を染色することができ、癌の診断に有効なものである。
また、ｐ５３遺伝子産物を高発現している癌患者の血液
中にｐ５３に対する自己抗体の出現が報告されており、
ｐ５３蛋白そのものが血中に流出していることは明らか
である。従って、本発明の抗体は、癌患者血清中のｐ５
３蛋白を測定し、又はｐ５３に対する自己抗体価を測定
することによる癌診断に使用できる。
織中に蓄積されるｐ５３蛋白と特異的に反応する抗体が
提供された。本発明の抗体は、癌組織の癌細胞の核のみ
を染色することができ、癌の診断に有効なものである。
また、ｐ５３遺伝子産物を高発現している癌患者の血液
中にｐ５３に対する自己抗体の出現が報告されており、
ｐ５３蛋白そのものが血中に流出していることは明らか
である。従って、本発明の抗体は、癌患者血清中のｐ５
３蛋白を測定し、又はｐ５３に対する自己抗体価を測定
することによる癌診断に使用できる。
【００１２】
【実施例】以下、本発明を実施例により具体的に説明す
るが、本発明の実施例はこれらに限られるものではな
い。実施例１ (1) 抗原蛋白の調製 抗原ペプタイドの合成をベックマン社の９０１３自動ペ
プタイド合成装置を用いて固相法により行なった後、高
速液体クロマトグラフィーにより精製した。得られたペ
プタイドのペプタイド構成は１規定の塩酸で１２０℃で
一晩加水分解してアミノ酸分析機を用いて測定し、理論
値と一致することを確認した。このペプタイドにキャリ
ヤー蛋白を以下のように結合した。すなわち、抗原ペプ
タイド１０mgと牛サイログログリン３mgを１mlの蒸留水
に溶解し、３０mgの１−エチル−３−（３−ジメチルア
ミノプロピル）カルボジイミド塩酸を加えて遮光し室温
で一晩反応させた後、蒸留水で十分に透析した。抗原ペ
プタイドとキャリヤー蛋白とが結合したか否かはＳＤＳ
電気泳動により確認した。
るが、本発明の実施例はこれらに限られるものではな
い。実施例１ (1) 抗原蛋白の調製 抗原ペプタイドの合成をベックマン社の９０１３自動ペ
プタイド合成装置を用いて固相法により行なった後、高
速液体クロマトグラフィーにより精製した。得られたペ
プタイドのペプタイド構成は１規定の塩酸で１２０℃で
一晩加水分解してアミノ酸分析機を用いて測定し、理論
値と一致することを確認した。このペプタイドにキャリ
ヤー蛋白を以下のように結合した。すなわち、抗原ペプ
タイド１０mgと牛サイログログリン３mgを１mlの蒸留水
に溶解し、３０mgの１−エチル−３−（３−ジメチルア
ミノプロピル）カルボジイミド塩酸を加えて遮光し室温
で一晩反応させた後、蒸留水で十分に透析した。抗原ペ
プタイドとキャリヤー蛋白とが結合したか否かはＳＤＳ
電気泳動により確認した。
【００１３】(2) 抗体の作製 (1) で得られたキャリヤーとペプタイド結合物（１００
μg のペプタイドに相当）をフロインドの完全アジュバ
ンドと共にウサギの背部に注射した。以後毎週１００μ
g のペプタイド相当の抗原蛋白をフロインド不完全アジ
ュバンドに混合して同様に合計８回免疫した。最終免疫
後１０日目に全採血を行ない抗血清を分離した。この抗
血清をプロテインＡを用いたアフィニティクロマトグラ
フィー法によりＩｇＧ分画を単離した。すなわち、プロ
テインＡセファロースＣＬ４Ｂ（ファルマシア社製）２
mlをカラムに充填し、１０mlの３Ｍ NaCl添加1.5Mグリ
シン溶液（pH8.7 ）（結合緩衝液）で平衡化した。血清
を同量の結合緩衝液で希釈してカラムに流してプロテイ
ンＡにＩｇＧを結合させた後、３０mlの結合緩衝液でカ
ラムを洗った。次に、0.1Mグリシン塩酸(pH3.0) で溶出
させＩｇＧ分画を得た。この精製抗体の純度はＳＤＳ電
気泳動によって検定した。
μg のペプタイドに相当）をフロインドの完全アジュバ
ンドと共にウサギの背部に注射した。以後毎週１００μ
g のペプタイド相当の抗原蛋白をフロインド不完全アジ
ュバンドに混合して同様に合計８回免疫した。最終免疫
後１０日目に全採血を行ない抗血清を分離した。この抗
血清をプロテインＡを用いたアフィニティクロマトグラ
フィー法によりＩｇＧ分画を単離した。すなわち、プロ
テインＡセファロースＣＬ４Ｂ（ファルマシア社製）２
mlをカラムに充填し、１０mlの３Ｍ NaCl添加1.5Mグリ
シン溶液（pH8.7 ）（結合緩衝液）で平衡化した。血清
を同量の結合緩衝液で希釈してカラムに流してプロテイ
ンＡにＩｇＧを結合させた後、３０mlの結合緩衝液でカ
ラムを洗った。次に、0.1Mグリシン塩酸(pH3.0) で溶出
させＩｇＧ分画を得た。この精製抗体の純度はＳＤＳ電
気泳動によって検定した。
【００１４】(3) 抗ｐ５３遺伝子産物抗体の性質 (i) 抗体の免疫特異性 ｐ５３遺伝子が高発現しているヒト胃癌細胞株ＭＫＮ−
１をリン酸緩衝液でよく洗い、ＲＩＰＡ緩衝液（１％Ｎ
Ｐ４０、0.1%デオキシコール酸ナトリウム塩、0.15M Na
Cl、 １mMフェニルエチルスルフォニールフルオライド、
５０mMトリス塩酸（pH7.4)）に４℃で２０分間懸濁して
溶解した。この溶解液を120、000gで３０分間遠心し、得
られた上清をライセートとした。ライセートをLaemmli
の方法に従い１２％ＳＤＳポリアクリルアミドゲルにて
電気泳動した後、テフコ社製のウエスタンブロット装置
で全蛋白をニトロセルロースメンブランに電気的に転写
した。このメンブランを３％牛血清アルブミンを含むリ
ン酸緩衝液に室温で一晩浸した後、メンブランを0.05%
Tween20 を含むリン酸緩衝液（ＴＰＢＳ）で洗浄し、抗
ｐ５３遺伝子産物抗体を反応させた。同様にメンブラン
を洗浄し、山羊ビオチン結合ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗
体（ベクター社製）をインキュベートした。発色はベク
ター社のストレプトアビジンビオチンペルオキシダーゼ
キットを用い、４−クロロナフトールを基質として行な
った。検出された蛋白の分子量は５３kdであり、これは
ｐ５３遺伝子産物の分子量と一致する。また、抗ｐ５３
遺伝子抗体を抗原ペプタイドで吸収した後に同様なウエ
スタンブロットを行なうと、この５３kdのバンドは検出
されず、本抗体が特異的に認識している蛋白であること
が証明された。
１をリン酸緩衝液でよく洗い、ＲＩＰＡ緩衝液（１％Ｎ
Ｐ４０、0.1%デオキシコール酸ナトリウム塩、0.15M Na
Cl、 １mMフェニルエチルスルフォニールフルオライド、
５０mMトリス塩酸（pH7.4)）に４℃で２０分間懸濁して
溶解した。この溶解液を120、000gで３０分間遠心し、得
られた上清をライセートとした。ライセートをLaemmli
の方法に従い１２％ＳＤＳポリアクリルアミドゲルにて
電気泳動した後、テフコ社製のウエスタンブロット装置
で全蛋白をニトロセルロースメンブランに電気的に転写
した。このメンブランを３％牛血清アルブミンを含むリ
ン酸緩衝液に室温で一晩浸した後、メンブランを0.05%
Tween20 を含むリン酸緩衝液（ＴＰＢＳ）で洗浄し、抗
ｐ５３遺伝子産物抗体を反応させた。同様にメンブラン
を洗浄し、山羊ビオチン結合ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗
体（ベクター社製）をインキュベートした。発色はベク
ター社のストレプトアビジンビオチンペルオキシダーゼ
キットを用い、４−クロロナフトールを基質として行な
った。検出された蛋白の分子量は５３kdであり、これは
ｐ５３遺伝子産物の分子量と一致する。また、抗ｐ５３
遺伝子抗体を抗原ペプタイドで吸収した後に同様なウエ
スタンブロットを行なうと、この５３kdのバンドは検出
されず、本抗体が特異的に認識している蛋白であること
が証明された。
【００１５】(ii)抗ｐ５３遺伝子産物抗体による組織染
色 ヒト胃癌組織のアセトン固定パラフィン切片又は凍結切
片を作製し、抗ｐ５３遺伝子抗体を４℃で一晩反応させ
た。リン酸緩衝液でガラスプレートを洗浄し、山羊ビオ
チン結合ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（ベクター社製）
を室温で１時間反応させた後、リン酸緩衝液でプレート
を洗浄しベクター社のストレプトアビジンビオチンペル
オキシダーゼキットを用いて３、３’−ジアミノベンチ
ジン４塩酸を基質として発色を行なった。その結果、癌
細胞の核のみが染まり、正常細胞の核は染まらなかっ
た。また、さらにプロティンＡセファロースＣＬ４Ｂ
（ファルマシア社製）を充填したカラムクロマトグラフ
ィー法により精製した本抗体をファルマシア社のビオチ
ン化キットを用いてビオチン化して染色しても同様の結
果を得た。なお、精製抗体の蛍光標識は、精製抗体を0.
1M炭酸水素ナトリウム（pH9.5 ）で１mg/ml に調製しフ
ルオロセインイソチアネート１mg/ml と混合し３７℃で
３０分反応させた後、脱塩カラムＰＤ−１０（ファルマ
シア社製）に通して回収した。本発明の抗体は癌組織の
染色において有用であることが明らかになった。
色 ヒト胃癌組織のアセトン固定パラフィン切片又は凍結切
片を作製し、抗ｐ５３遺伝子抗体を４℃で一晩反応させ
た。リン酸緩衝液でガラスプレートを洗浄し、山羊ビオ
チン結合ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（ベクター社製）
を室温で１時間反応させた後、リン酸緩衝液でプレート
を洗浄しベクター社のストレプトアビジンビオチンペル
オキシダーゼキットを用いて３、３’−ジアミノベンチ
ジン４塩酸を基質として発色を行なった。その結果、癌
細胞の核のみが染まり、正常細胞の核は染まらなかっ
た。また、さらにプロティンＡセファロースＣＬ４Ｂ
（ファルマシア社製）を充填したカラムクロマトグラフ
ィー法により精製した本抗体をファルマシア社のビオチ
ン化キットを用いてビオチン化して染色しても同様の結
果を得た。なお、精製抗体の蛍光標識は、精製抗体を0.
1M炭酸水素ナトリウム（pH9.5 ）で１mg/ml に調製しフ
ルオロセインイソチアネート１mg/ml と混合し３７℃で
３０分反応させた後、脱塩カラムＰＤ−１０（ファルマ
シア社製）に通して回収した。本発明の抗体は癌組織の
染色において有用であることが明らかになった。
【００１６】(iii) ｐ５３遺伝子産物の定量 精製した抗ｐ５３遺伝子産物抗体を１０μg/mlの濃度に
希釈して５０μl ずつイムノプレート（ヌンク社製）に
まき４℃で一晩放置した。ＴＰＢＳで洗浄後、５％正常
ウサギ血清を含むリン酸緩衝液で３７℃で２時間インキ
ュベートしてブロッキングを行なった。同様にＴＰＢＳ
で洗浄後、１μg/mlの抗原ペプタイドを連続希釈して５
０μl をウエルに加えて蛋白定量のための標準液とし
た。一方、ＲＩＰＡ緩衝液で可溶化したヒト神経芽細胞
Jones １×１０6 個を測定試料として別のウエルに入れ
３７℃で１時間反応させた。プレートを洗浄後、0.1 μ
g/ml濃度のビオチン結合抗ｐ５３遺伝子産物抗体を３７
℃で１時間反応させてさらに洗浄した。発色はベクター
社のストレプトアビジンビオチンペルオキシダーゼキッ
トを用いＯ−フェニレンジアミン２塩酸塩を基質として
行なった。１Ｎの硫酸で反応を停止させて４９０nmの吸
収をバイオラッド社のマイクロプレートリーダーモデル
3560で測定した。その結果、段階希釈した抗原ペプタイ
ドの標準曲線が得られ、ｐ５３蛋白は３９４アミノ酸で
あり、抗原ペプタイドは１７アミノ酸であることからｐ
５３の蛋白量が推定された（図１）。この方法により試
料の細胞株中のｐ５３蛋白量が計算できた。
希釈して５０μl ずつイムノプレート（ヌンク社製）に
まき４℃で一晩放置した。ＴＰＢＳで洗浄後、５％正常
ウサギ血清を含むリン酸緩衝液で３７℃で２時間インキ
ュベートしてブロッキングを行なった。同様にＴＰＢＳ
で洗浄後、１μg/mlの抗原ペプタイドを連続希釈して５
０μl をウエルに加えて蛋白定量のための標準液とし
た。一方、ＲＩＰＡ緩衝液で可溶化したヒト神経芽細胞
Jones １×１０6 個を測定試料として別のウエルに入れ
３７℃で１時間反応させた。プレートを洗浄後、0.1 μ
g/ml濃度のビオチン結合抗ｐ５３遺伝子産物抗体を３７
℃で１時間反応させてさらに洗浄した。発色はベクター
社のストレプトアビジンビオチンペルオキシダーゼキッ
トを用いＯ−フェニレンジアミン２塩酸塩を基質として
行なった。１Ｎの硫酸で反応を停止させて４９０nmの吸
収をバイオラッド社のマイクロプレートリーダーモデル
3560で測定した。その結果、段階希釈した抗原ペプタイ
ドの標準曲線が得られ、ｐ５３蛋白は３９４アミノ酸で
あり、抗原ペプタイドは１７アミノ酸であることからｐ
５３の蛋白量が推定された（図１）。この方法により試
料の細胞株中のｐ５３蛋白量が計算できた。
【図１】ｐ５３蛋白定量を行なうための抗原ペプタイド
標準曲線を示す図。
標準曲線を示す図。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖｏ ｌ．159，Ｎｏ．３（1986）ｐ．529− 534 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07K 16/32 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (1)
- 【請求項１】 下記のアミノ酸配列を有するペプタイド
を抗原として得られる抗体。 Cys-Phe-Thr-Glu-Asp-Pro-Gly-Pro-Asp-Glu-Ala-Pro-Ar
g-Met-Pro-Glu-Ala
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16344391A JP3155562B2 (ja) | 1991-06-10 | 1991-06-10 | 抗 体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16344391A JP3155562B2 (ja) | 1991-06-10 | 1991-06-10 | 抗 体 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05213994A JPH05213994A (ja) | 1993-08-24 |
| JP3155562B2 true JP3155562B2 (ja) | 2001-04-09 |
Family
ID=15773990
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP16344391A Expired - Fee Related JP3155562B2 (ja) | 1991-06-10 | 1991-06-10 | 抗 体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3155562B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2698367B1 (fr) * | 1992-11-02 | 1995-02-17 | Eurobio Lab | Fragments de la protéine p53 et leurs utilisations dans la détection et le suivi d'états pathologiques. |
-
1991
- 1991-06-10 JP JP16344391A patent/JP3155562B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．１５９，Ｎｏ．３（１９８６）ｐ．５２９−５３４ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05213994A (ja) | 1993-08-24 |
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