JP3070290B2 - 耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する微生物及びその利用法 - Google Patents
耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する微生物及びその利用法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、耐熱性アルカリキシラ
ナーゼを生産する新規な微生物と該微生物の利用方法に
関する。より詳しく言うと、本発明は、耐熱性アルカリ
キシラナーゼを生産する微生物であるバチルス（Bacill
us）属に属するバチルス エスピーＢＸ−１（微工研菌
寄第１３０５２号）、バチルス エスピーＢＸ−２（微
工研菌寄第１３０５３号）、バチルス エスピーＢＸ−
３（微工研菌寄第１３０５４号）、バチルス エスピー
ＢＸ−４（微工研菌寄第１３０５５号）と、該耐熱性ア
ルカリキシラナーゼ生産菌による耐熱性アルカリキシラ
ナーゼの製造方法、ならびに耐熱性アルカリキシラナー
ゼ生産菌及び／または該微生物の生産する耐熱性アルカ
リキシラナーゼによるパルプの漂白方法に関する。
ナーゼを生産する新規な微生物と該微生物の利用方法に
関する。より詳しく言うと、本発明は、耐熱性アルカリ
キシラナーゼを生産する微生物であるバチルス（Bacill
us）属に属するバチルス エスピーＢＸ−１（微工研菌
寄第１３０５２号）、バチルス エスピーＢＸ−２（微
工研菌寄第１３０５３号）、バチルス エスピーＢＸ−
３（微工研菌寄第１３０５４号）、バチルス エスピー
ＢＸ−４（微工研菌寄第１３０５５号）と、該耐熱性ア
ルカリキシラナーゼ生産菌による耐熱性アルカリキシラ
ナーゼの製造方法、ならびに耐熱性アルカリキシラナー
ゼ生産菌及び／または該微生物の生産する耐熱性アルカ
リキシラナーゼによるパルプの漂白方法に関する。
【０００２】キシラナーゼは、ヘミセルロース中のキシ
ランを分解する酵素であるが、今まであまり有効な利用
法が開発されていなかった。しかし、クラフトパルプを
キシラナーゼで処理すると漂白性が向上し、パルプの漂
白工程で用いる塩素等の薬品や排液中のＡＯＸが削減で
きることや、機能性オリゴ糖の有用性が明らかにされて
以来、キシラーゼは注目されるようになった酵素であ
る。
ランを分解する酵素であるが、今まであまり有効な利用
法が開発されていなかった。しかし、クラフトパルプを
キシラナーゼで処理すると漂白性が向上し、パルプの漂
白工程で用いる塩素等の薬品や排液中のＡＯＸが削減で
きることや、機能性オリゴ糖の有用性が明らかにされて
以来、キシラーゼは注目されるようになった酵素であ
る。
【０００３】
【従来の技術】パルプ製造工程に於いては、クラフト蒸
解を始めとしてアルカリ条件や高温条件での処理が多
く、従って酵素処理を紙パルプ製造工程中で効率よく実
施するために耐熱性で耐アルカリ性のキシラナーゼが求
められている。このような耐熱性アルカリキシラナーゼ
を用いることができれば、ｐＨ調整のための薬品が削減
できるとともに、反応を高温およびアルカリの条件で行
なうことができるため雑菌の繁殖も防ぐことができる。
解を始めとしてアルカリ条件や高温条件での処理が多
く、従って酵素処理を紙パルプ製造工程中で効率よく実
施するために耐熱性で耐アルカリ性のキシラナーゼが求
められている。このような耐熱性アルカリキシラナーゼ
を用いることができれば、ｐＨ調整のための薬品が削減
できるとともに、反応を高温およびアルカリの条件で行
なうことができるため雑菌の繁殖も防ぐことができる。
【０００４】キシラーゼを生産する微生物としては、キ
シラナーゼの総説（Microbiological Reviews Sept., 3
05,1988 ）などによるとアスペルギルス（Aspergillus
）属、トリコデルマ（Trichoderma ）属、アウレオバ
シデウム（Aureobasidium ）属、ストレプトマイセス
（Streptomyces）属、スエヒロタケ（Schizophyllum co
mmune ）等の糸状菌、バチルス（Bacillus）属やクロス
トリジウム（Clostridium）等の細菌類等数多くの微生
物が知られているがほとんどが酸性乃至中性で活性を有
するキシラナーゼを生産するものであり、アルカリキシ
ラナーゼを生産する微生物についてはバチルス（Bacill
us）属（System.Appl.Microbiol.,8,152,1986,Appl.Mic
robiol.and Biotechnol.,19,335,1984）、アエロモナス
(Aeromonas)属（Agric. Biol.Chem.,40,3037,1985）,
ストレプトマイセス（Streptomyces）属（Biotechnol.L
et.,12,225,1990 ）等に属する一部の菌株しか知られて
ない。
シラナーゼの総説（Microbiological Reviews Sept., 3
05,1988 ）などによるとアスペルギルス（Aspergillus
）属、トリコデルマ（Trichoderma ）属、アウレオバ
シデウム（Aureobasidium ）属、ストレプトマイセス
（Streptomyces）属、スエヒロタケ（Schizophyllum co
mmune ）等の糸状菌、バチルス（Bacillus）属やクロス
トリジウム（Clostridium）等の細菌類等数多くの微生
物が知られているがほとんどが酸性乃至中性で活性を有
するキシラナーゼを生産するものであり、アルカリキシ
ラナーゼを生産する微生物についてはバチルス（Bacill
us）属（System.Appl.Microbiol.,8,152,1986,Appl.Mic
robiol.and Biotechnol.,19,335,1984）、アエロモナス
(Aeromonas)属（Agric. Biol.Chem.,40,3037,1985）,
ストレプトマイセス（Streptomyces）属（Biotechnol.L
et.,12,225,1990 ）等に属する一部の菌株しか知られて
ない。
【０００５】またパルプにキシラナーゼを作用させ、漂
白薬品やＡＯＸを低減させようとする試みについてもい
くつか報告されており、例えばViikali et.al Bleachi
ng with enzymes, 3rd international conference on
biotechnology in the pulpand paper industry p.67
1988 、特開平２−２１００８６号公報、特開平２−２
２１４８２号公報、特開平２−２６４０８７号公報、特
開平２−２９３４８６号公報、特開平３−４０８８７号
公報、特開平３−５０５７８５号公報などがあるが、こ
れらはすべて酸性キシラナーゼに関するものである。
白薬品やＡＯＸを低減させようとする試みについてもい
くつか報告されており、例えばViikali et.al Bleachi
ng with enzymes, 3rd international conference on
biotechnology in the pulpand paper industry p.67
1988 、特開平２−２１００８６号公報、特開平２−２
２１４８２号公報、特開平２−２６４０８７号公報、特
開平２−２９３４８６号公報、特開平３−４０８８７号
公報、特開平３−５０５７８５号公報などがあるが、こ
れらはすべて酸性キシラナーゼに関するものである。
【０００６】一方、アルカリ性キシラナーゼを用いたも
のとしては、例えばノボ社のPulpzyme HB がありL.S.Pe
derson et.al" Bleach boosting of kraft pulp using
alkaline hemicellulase", Production of bleached ch
emical pulp in the futureinternational pulp bleach
ing conference 1991,Vol.2 p.107 および紙パルプ技
術タイムズ, 5 ，20-25,1992などで報告されているが、
本酵素は至適ｐＨが中性から弱アルカリでありｐＨ９で
は活性がほとんどない。
のとしては、例えばノボ社のPulpzyme HB がありL.S.Pe
derson et.al" Bleach boosting of kraft pulp using
alkaline hemicellulase", Production of bleached ch
emical pulp in the futureinternational pulp bleach
ing conference 1991,Vol.2 p.107 および紙パルプ技
術タイムズ, 5 ，20-25,1992などで報告されているが、
本酵素は至適ｐＨが中性から弱アルカリでありｐＨ９で
は活性がほとんどない。
【０００７】他にアルカリ性キシラナーゼを用いた例と
しては"Stefan Hogman et.al" Bleachability improvem
ent of softwood kraft pulp through treatment with
an alkali and thermostable xylanase", 5th internat
ional conference on biotechnology in the pulp and
paper industry 1992 p.5 があり、針葉樹酸素晒クラフ
トパルプを至適ｐＨが９、至適温度が６５℃のアルカリ
キシラナーゼを用いて処理すると、カッパー価が１７．
１から１５．６に低下することを示している。
しては"Stefan Hogman et.al" Bleachability improvem
ent of softwood kraft pulp through treatment with
an alkali and thermostable xylanase", 5th internat
ional conference on biotechnology in the pulp and
paper industry 1992 p.5 があり、針葉樹酸素晒クラフ
トパルプを至適ｐＨが９、至適温度が６５℃のアルカリ
キシラナーゼを用いて処理すると、カッパー価が１７．
１から１５．６に低下することを示している。
【０００８】また、Viikali et.al "Important propert
ies of xylanases for use in thepulp and paper indu
stry", 5th international conference on biotechnolo
gyin the pulp and paper industry 1992 p.4 は、ｐＨ
５〜８、温度が５０〜８０℃でバチルス ステアロサー
モフィラス（Bacillus stearothermophilus ）由来のア
ルカリキシラナーゼを用いて広葉樹未晒クラフトパルプ
を処理することにより、化学漂白における塩素ガスを２
５％低減出来ることを示している。
ies of xylanases for use in thepulp and paper indu
stry", 5th international conference on biotechnolo
gyin the pulp and paper industry 1992 p.4 は、ｐＨ
５〜８、温度が５０〜８０℃でバチルス ステアロサー
モフィラス（Bacillus stearothermophilus ）由来のア
ルカリキシラナーゼを用いて広葉樹未晒クラフトパルプ
を処理することにより、化学漂白における塩素ガスを２
５％低減出来ることを示している。
【０００９】なお、キシラナーゼは一般的にキシランを
炭素源としたとき最も生産性が高く、また生産性は落ち
るがキシランを含むような小麦ふすま等の農産廃棄物や
パルプ、バガス等の植物繊維等の炭素源を用いて生産す
ることもできる。しかしキシランを含まないグルコース
などではほとんど生産しない。
炭素源としたとき最も生産性が高く、また生産性は落ち
るがキシランを含むような小麦ふすま等の農産廃棄物や
パルプ、バガス等の植物繊維等の炭素源を用いて生産す
ることもできる。しかしキシランを含まないグルコース
などではほとんど生産しない。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】アルカリ及び高温条件
の多い紙パルプ製造工程においては、酸性のキシラナー
ゼを使うにあたっては、温度やｐＨを酵素反応が可能な
範囲まで下げ、更に酵素反応中の温度及びｐＨを制御す
る必要がある。また工程によっては酵素反応終了後に更
にアルカリを加えて従来のｐＨに戻したり、温度を高く
することが必要になるため、多大な薬品やエネルギー、
および設備が必要となる。
の多い紙パルプ製造工程においては、酸性のキシラナー
ゼを使うにあたっては、温度やｐＨを酵素反応が可能な
範囲まで下げ、更に酵素反応中の温度及びｐＨを制御す
る必要がある。また工程によっては酵素反応終了後に更
にアルカリを加えて従来のｐＨに戻したり、温度を高く
することが必要になるため、多大な薬品やエネルギー、
および設備が必要となる。
【００１１】もし、耐熱性アルカリキシラナーゼを用い
ることができれば、温度やｐＨの調整、制御が不要にな
るため、従来の製造ラインに効率よくキシラナーゼ処理
を組み込むことができる。しかし、現在容易に入手でき
るキシラナーゼは酸性、乃至中性の中温キシラナーゼで
ある。これらのキシラナーゼはアルカリ性や高温におい
ては極めて不安定であるため、アルカリ、高温での反応
に用いることはできない。
ることができれば、温度やｐＨの調整、制御が不要にな
るため、従来の製造ラインに効率よくキシラナーゼ処理
を組み込むことができる。しかし、現在容易に入手でき
るキシラナーゼは酸性、乃至中性の中温キシラナーゼで
ある。これらのキシラナーゼはアルカリ性や高温におい
ては極めて不安定であるため、アルカリ、高温での反応
に用いることはできない。
【００１２】７０℃以上を至適反応温度とする耐熱性ア
ルカリキシラナーゼについては市販されておらず入手が
困難であり、またその生産菌としてもバチルス（Bacill
us）属等に属する一部の菌株が知られているにすぎな
い。またキシラナーゼはキシラン及びキシランを含む炭
素源を用いて生産できるが、キシランは高価であり、経
済的に効率よくキシラナーゼを生産させるには、グルコ
ースなどのキシラン以外の安価な炭素源でも生産できる
アルカリキシラナーゼ生産菌が望まれている。
ルカリキシラナーゼについては市販されておらず入手が
困難であり、またその生産菌としてもバチルス（Bacill
us）属等に属する一部の菌株が知られているにすぎな
い。またキシラナーゼはキシラン及びキシランを含む炭
素源を用いて生産できるが、キシランは高価であり、経
済的に効率よくキシラナーゼを生産させるには、グルコ
ースなどのキシラン以外の安価な炭素源でも生産できる
アルカリキシラナーゼ生産菌が望まれている。
【００１３】以上のことから、本発明は、耐熱性アルカ
リキシラナーゼを生産する新規な微生物を提供すること
を目的とするものである。
リキシラナーゼを生産する新規な微生物を提供すること
を目的とするものである。
【００１４】
【課題を解決しようとする手段】本発明者らは、耐熱性
と耐アルカリ性を有するキシラナーゼ生産菌を求め、鋭
意広範なスクリーニングを行なった結果、パルプ工場内
の土壌から耐熱性及び耐アルカリ性において優れた性質
を有する耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する好アル
カリ性バチルス（Bacillus）属に属する菌株を見いだし
た。
と耐アルカリ性を有するキシラナーゼ生産菌を求め、鋭
意広範なスクリーニングを行なった結果、パルプ工場内
の土壌から耐熱性及び耐アルカリ性において優れた性質
を有する耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する好アル
カリ性バチルス（Bacillus）属に属する菌株を見いだし
た。
【００１５】本発明は、耐熱性アルカリキシラナーゼを
生産する微生物であるバチルス（Bacillus）属に属する
バチルス エスピーＢＸ−１（Bacillus sp.BX-1) 、バ
チルス エスピーＢＸ−２（Bacillus sp.BX-2) 、バチ
ルス エスピーＢＸ−３（Bacillus sp.BX-3) 、バチル
ス エスピーＢＸ−４（Bacillus sp.BX-4) と、該耐熱
性アルカリキシラナーゼ生産菌による耐熱性アルカリキ
シラナーゼの製造方法、ならびに該微生物の生産する耐
熱性アルカリキシラナーゼによるパルプの漂白方法に関
する。
生産する微生物であるバチルス（Bacillus）属に属する
バチルス エスピーＢＸ−１（Bacillus sp.BX-1) 、バ
チルス エスピーＢＸ−２（Bacillus sp.BX-2) 、バチ
ルス エスピーＢＸ−３（Bacillus sp.BX-3) 、バチル
ス エスピーＢＸ−４（Bacillus sp.BX-4) と、該耐熱
性アルカリキシラナーゼ生産菌による耐熱性アルカリキ
シラナーゼの製造方法、ならびに該微生物の生産する耐
熱性アルカリキシラナーゼによるパルプの漂白方法に関
する。
【００１６】本発明の本菌株は、全て１％の炭酸ナトリ
ウムを含むアルカリ培地（グルコースまたはキシラン
1.0、ペプトン0.5 、酵母抽出物0.5 、K2HPO4 0.1 、M
gSO4・7H2O 0.02、 Na2CO3 1.0 、pH10.3の各成分組成
の数値は重量％を示す。以下も同様。）でよく生育す
る。本菌株の菌学的性質は次の通りである。
ウムを含むアルカリ培地（グルコースまたはキシラン
1.0、ペプトン0.5 、酵母抽出物0.5 、K2HPO4 0.1 、M
gSO4・7H2O 0.02、 Na2CO3 1.0 、pH10.3の各成分組成
の数値は重量％を示す。以下も同様。）でよく生育す
る。本菌株の菌学的性質は次の通りである。
【００１７】まず（ａ）形態的性質について、（１）バ
チルス エスピーＢＸ−１、バチルスエスピーＢＸ−
２、バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピー
ＢＸ−４はいずれも形態は桿菌であり、大きさはバチル
ス エスピーＢＸ−１は２．５〜５×０．３〜０．７μ
ｍ、バチルス エスピーＢＸ−２は２．５〜５×０．４
〜０．７μｍ、バチルス エスピーＢＸ−３は２．５〜
５．５×０．４〜０．７μｍ、バチルスエスピーＢＸ−
４は２．５〜５×０．４〜０．７μｍである。（２）バ
チルス エスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−
２、バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピー
ＢＸ−４は、いづれも卵型の端立内性胞子（１．０〜
２．５×０．４〜１．０μｍ）を作り、（３）運動性を
有する。（４）バチルス エスピーＢＸ−１、バチルス
エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３は単
細胞であるが、数個の連鎖状になることがある。バチル
ス エスピーＢＸ−３については単細胞であるが、連鎖
が数十におよぶことがある。
チルス エスピーＢＸ−１、バチルスエスピーＢＸ−
２、バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピー
ＢＸ−４はいずれも形態は桿菌であり、大きさはバチル
ス エスピーＢＸ−１は２．５〜５×０．３〜０．７μ
ｍ、バチルス エスピーＢＸ−２は２．５〜５×０．４
〜０．７μｍ、バチルス エスピーＢＸ−３は２．５〜
５．５×０．４〜０．７μｍ、バチルスエスピーＢＸ−
４は２．５〜５×０．４〜０．７μｍである。（２）バ
チルス エスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−
２、バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピー
ＢＸ−４は、いづれも卵型の端立内性胞子（１．０〜
２．５×０．４〜１．０μｍ）を作り、（３）運動性を
有する。（４）バチルス エスピーＢＸ−１、バチルス
エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３は単
細胞であるが、数個の連鎖状になることがある。バチル
ス エスピーＢＸ−３については単細胞であるが、連鎖
が数十におよぶことがある。
【００１８】（５）バチルス エスピーＢＸ−１、バチ
ルス エスピーＢＸ−２、バチルスエスピーＢＸ−３、
バチルス エスピーＢＸ−４のグラム染色性は陽性ある
いは不定。
ルス エスピーＢＸ−２、バチルスエスピーＢＸ−３、
バチルス エスピーＢＸ−４のグラム染色性は陽性ある
いは不定。
【００１９】（ｂ）各種培地における生育状態等は以下
のようである（以下培地中の成分組成を示す数値は重量
％）。 （１）肉汁寒天平板培地（Difco nutrient broth 0.8、
寒天1.5 、Na2CO3 1.0、 pH10.3 ）でバチルス エスピ
ーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス
エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも良
く生育する。４菌株ともコロニーの形状は円形または不
規則表面は円滑であるが生育に従って粗野になり、周縁
は円滑であるが生育に従って不規則になる。色調はバチ
ルス エスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−
２、バチルス エスピーＢＸ−４は淡黄土色の不透明で
光沢はやや鈍い。バチルス エスピーＢＸ−３はやや白
く透明で光沢がある。
のようである（以下培地中の成分組成を示す数値は重量
％）。 （１）肉汁寒天平板培地（Difco nutrient broth 0.8、
寒天1.5 、Na2CO3 1.0、 pH10.3 ）でバチルス エスピ
ーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス
エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも良
く生育する。４菌株ともコロニーの形状は円形または不
規則表面は円滑であるが生育に従って粗野になり、周縁
は円滑であるが生育に従って不規則になる。色調はバチ
ルス エスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−
２、バチルス エスピーＢＸ−４は淡黄土色の不透明で
光沢はやや鈍い。バチルス エスピーＢＸ−３はやや白
く透明で光沢がある。
【００２０】（２）NaClを７．５％含む肉汁寒天平板培
地（Difco nutrient broth 0.8、NaCl 7.5、寒天1.5 、
Na2CO3 1.0、 pH10.3 ）でバチルス エスピーＢＸ−
１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピー
ＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも良く生育す
る。
地（Difco nutrient broth 0.8、NaCl 7.5、寒天1.5 、
Na2CO3 1.0、 pH10.3 ）でバチルス エスピーＢＸ−
１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピー
ＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも良く生育す
る。
【００２１】（３）NaClを１２％含む肉汁寒天平板培地
（Difco nutrient broth 0.8、NaCl12、寒天1.5 、Na2C
O3 1.0、 pH10.3 ）ではバチルス エスピーＢＸ−１、
バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ
−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも生育が悪い。
（Difco nutrient broth 0.8、NaCl12、寒天1.5 、Na2C
O3 1.0、 pH10.3 ）ではバチルス エスピーＢＸ−１、
バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ
−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも生育が悪い。
【００２２】（４）肉汁寒天平板培地（Difco nutrient
broth 0.8、寒天1.5 、pH7.0 ）では バチルス エス
ピーＢＸ−２と バチルス エスピーＢＸ−３は生育す
るが、バチルス エスピーＢＸ−１とバチルス エスピ
ーＢＸ−４は生育が悪い。
broth 0.8、寒天1.5 、pH7.0 ）では バチルス エス
ピーＢＸ−２と バチルス エスピーＢＸ−３は生育す
るが、バチルス エスピーＢＸ−１とバチルス エスピ
ーＢＸ−４は生育が悪い。
【００２３】（５）肉汁ゼラチン培地（Difco beef ext
ract 1.0、ペプトン 1.0、 NaCl 0.5 、ゼラチン 12.0
、 Na2CO3 1.0 、pH10.3) ではバチルス エスピーＢ
Ｘ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エス
ピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも生育
し、液化する。次表に（ｃ）生理学的性質を示す
ract 1.0、ペプトン 1.0、 NaCl 0.5 、ゼラチン 12.0
、 Na2CO3 1.0 、pH10.3) ではバチルス エスピーＢ
Ｘ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エス
ピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも生育
し、液化する。次表に（ｃ）生理学的性質を示す
【００２４】
【表】 表 １ エスピー エスピー エスピー エスピー ＢＸ−１ ＢＸ−２ ＢＸ−３ ＢＸ−４ （１）硝酸塩の還元 ＋ − ＋ − （２）ＶＰテスト ＋ ＋ ＋ ＋ （３）インドールの生成 − − − − （４）硫化水素の生成 − − − − （５）澱粉の加水分解 ＋ ＋ ＋ ＋ （６）クエン酸の利用 Koser − − − − Christensen ＋ ＋ ＋ ＋ （７）オキシダーゼ ＋ ＋ ＋ ＋ （８）カタラーゼ ＋ ＋ ＋ ＋ （９）糖類の利用 アラビノース ＋ ＋ ＋ ＋ ガラクトース ＋ ＋ ＋ ＋ グルコース ＋ ＋ ＋ ＋ マルトース ＋ ＋ ＋ − マンニトール ＋ ＋ ＋ ＋ マンノース ＋ ＋ ＋ − シュクロース ＋ ＋ ＋ ＋ キシロース ＋− ＋− ＋− ＋−
【００２５】ガスの発生はバチルス エスピーＢＸ−
１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピー
ＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも認められな
かった。
１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピー
ＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４とも認められな
かった。
【００２６】(10)バチルス エスピーＢＸ−１、バチル
ス エスピーＢＸ−２、バチルスエスピーＢＸ−３、バ
チルス エスピーＢＸ−４とも生育の温度範囲は２０〜
５５℃、生育至適温度は４０〜５０℃である。
ス エスピーＢＸ−２、バチルスエスピーＢＸ−３、バ
チルス エスピーＢＸ−４とも生育の温度範囲は２０〜
５５℃、生育至適温度は４０〜５０℃である。
【００２７】(11)バチルス エスピーＢＸ−１、バチル
ス エスピーＢＸ−２、バチルスエスピーＢＸ−３、バ
チルス エスピーＢＸ−４とも生育のpH範囲は６〜１
２、生育至適pHは９〜１０．５である。
ス エスピーＢＸ−２、バチルスエスピーＢＸ−３、バ
チルス エスピーＢＸ−４とも生育のpH範囲は６〜１
２、生育至適pHは９〜１０．５である。
【００２８】(12)ＧＣ含量はバチルス エスピーＢＸ−
１は４９．４％、バチルス エスピーＢＸ−２は４３．
１％、バチルス エスピーＢＸ−３は４３．８％、バチ
ルスエスピーＢＸ−４は５１．１％であった。
１は４９．４％、バチルス エスピーＢＸ−２は４３．
１％、バチルス エスピーＢＸ−３は４３．８％、バチ
ルスエスピーＢＸ−４は５１．１％であった。
【００２９】以上の菌学的性質についてBergy's Manual
of Systematic Bacteriology を参考にして検討した結
果、これら４菌株は胞子を形成する好気性のグラム陽性
桿菌であり、カタラーゼ陽性であることからバチルス
（Bacillus）属に属することは明かであるが種別につい
ては該当するものがなく、これらの菌株は新菌株である
と判断した。
of Systematic Bacteriology を参考にして検討した結
果、これら４菌株は胞子を形成する好気性のグラム陽性
桿菌であり、カタラーゼ陽性であることからバチルス
（Bacillus）属に属することは明かであるが種別につい
ては該当するものがなく、これらの菌株は新菌株である
と判断した。
【００３０】これらの菌株をバチルス エスピーＢＸ−
１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピー
ＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４と命名し、微生
物工業技術研究所に寄託した。受託番号は、バチルス
エスピーＢＸ−１(Bacillussp.BX-1)は微工研菌寄第１
３０５２号、バチルス エスピーＢＸ−２(Bacillussp.
BX-2)は微工研菌寄第１３０５３号、バチルス エスピ
ーＢＸ−３(Bacillussp.BX-3)は微工研菌寄第１３０５
４号、バチルス エスピーＢＸ−４(Bacillussp.BX-4)
は微工研菌寄第１３０５５号である。
１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピー
ＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４と命名し、微生
物工業技術研究所に寄託した。受託番号は、バチルス
エスピーＢＸ−１(Bacillussp.BX-1)は微工研菌寄第１
３０５２号、バチルス エスピーＢＸ−２(Bacillussp.
BX-2)は微工研菌寄第１３０５３号、バチルス エスピ
ーＢＸ−３(Bacillussp.BX-3)は微工研菌寄第１３０５
４号、バチルス エスピーＢＸ−４(Bacillussp.BX-4)
は微工研菌寄第１３０５５号である。
【００３１】既知であるバチルス（Bacillus）属のアル
カリキシラナーゼ生産菌Ｃ−１２５（System. Appl.Mic
robiol.8,152,1986 ）と本発明を比較するとＣ−１２５
はＶＰテストが陰性であるのに対しバチルス エスピー
ＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エ
スピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４は全て陽
性であること、またＣ−１２５はアルカリキシラナーゼ
生産量が本発明の１／１００程度であることよりバチル
ス エスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、
バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ
−４とＣ−１２５は明らかに異なる菌株である。
カリキシラナーゼ生産菌Ｃ−１２５（System. Appl.Mic
robiol.8,152,1986 ）と本発明を比較するとＣ−１２５
はＶＰテストが陰性であるのに対しバチルス エスピー
ＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エ
スピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４は全て陽
性であること、またＣ−１２５はアルカリキシラナーゼ
生産量が本発明の１／１００程度であることよりバチル
ス エスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、
バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ
−４とＣ−１２５は明らかに異なる菌株である。
【００３２】また、既知であるバチルス（Bacillus）属
の耐熱性アルカリキシラナーゼ生産菌（Appl.Microbio
l. and Biotechnol., 19,335,1984）Ｗ１、Ｗ２、Ｗ
３、Ｗ４と比較するとＷ２、Ｗ４はオキシダーゼが陰性
であるのに対し、バチルス エスピーＢＸ−１、バチル
ス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３、
バチルスエスピーＢＸ−４は全てオキシダーゼ陽性であ
る。
の耐熱性アルカリキシラナーゼ生産菌（Appl.Microbio
l. and Biotechnol., 19,335,1984）Ｗ１、Ｗ２、Ｗ
３、Ｗ４と比較するとＷ２、Ｗ４はオキシダーゼが陰性
であるのに対し、バチルス エスピーＢＸ−１、バチル
ス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３、
バチルスエスピーＢＸ−４は全てオキシダーゼ陽性であ
る。
【００３３】Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４とも１２％ＮａＣ
ｌを含む培地で生育するのに対し、バチルス エスピー
ＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エ
スピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４は全て生
育しない。
ｌを含む培地で生育するのに対し、バチルス エスピー
ＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エ
スピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４は全て生
育しない。
【００３４】Ｗ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４とも中立胞子であ
るのに対し、バチルス エスピーＢＸ−１、バチルス
エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３、バチ
ルスエスピーＢＸ−４は全て端立胞子である。
るのに対し、バチルス エスピーＢＸ−１、バチルス
エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３、バチ
ルスエスピーＢＸ−４は全て端立胞子である。
【００３５】以上のことから本発明のバチルス エスピ
ーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス
エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４は、既
知のアルカリキシラナーゼ生産菌であるバチルス（Baci
llus）属のＷ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４と明らかに異なる菌
株である。
ーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス
エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４は、既
知のアルカリキシラナーゼ生産菌であるバチルス（Baci
llus）属のＷ１、Ｗ２、Ｗ３、Ｗ４と明らかに異なる菌
株である。
【００３６】これらの新菌株を培養することで耐熱性ア
ルカリキシラナーゼを生産することができる。炭素源、
窒素源は資化して耐熱性アルカリキシラナーゼを生産す
ることのできるものであればいずれも用いることができ
る。例えば炭素源としては、キシランやキシランを含む
ような小麦ふすま等の農産廃棄物やパルプ、バガス等の
植物繊維等のほかキシランを含まないような廃糖蜜や澱
粉、グルコースなどの単糖類を使用することができる。
例えば窒素源としては酵母エキス、ペプトン、各種アミ
ノ酸、大豆、コーンスティープリカー、各種無機窒素等
の窒素化合物を用いることができる。また、各種の塩類
やビタミン、ミネラル等を用いることができる。
ルカリキシラナーゼを生産することができる。炭素源、
窒素源は資化して耐熱性アルカリキシラナーゼを生産す
ることのできるものであればいずれも用いることができ
る。例えば炭素源としては、キシランやキシランを含む
ような小麦ふすま等の農産廃棄物やパルプ、バガス等の
植物繊維等のほかキシランを含まないような廃糖蜜や澱
粉、グルコースなどの単糖類を使用することができる。
例えば窒素源としては酵母エキス、ペプトン、各種アミ
ノ酸、大豆、コーンスティープリカー、各種無機窒素等
の窒素化合物を用いることができる。また、各種の塩類
やビタミン、ミネラル等を用いることができる。
【００３７】培養温度およびｐＨは菌が生育しアルカリ
セルラーゼを生産する範囲であればいずれでも良く培養
温度は２０〜５５℃、好ましくは４０〜５０℃でｐＨは
６〜１２、好ましくは９〜１０．５である。本発明の微
生物を培養した後、菌体を分離し、培養濾液をそのまま
耐熱性アルカリキシラナーゼ粗酵素液として使用するこ
とができる。こうして得られた耐熱性アルカリキシラナ
ーゼは至適反応温度が５０〜７０℃、至適ｐＨが７〜１
１．５である。
セルラーゼを生産する範囲であればいずれでも良く培養
温度は２０〜５５℃、好ましくは４０〜５０℃でｐＨは
６〜１２、好ましくは９〜１０．５である。本発明の微
生物を培養した後、菌体を分離し、培養濾液をそのまま
耐熱性アルカリキシラナーゼ粗酵素液として使用するこ
とができる。こうして得られた耐熱性アルカリキシラナ
ーゼは至適反応温度が５０〜７０℃、至適ｐＨが７〜１
１．５である。
【００３８】また、透析、塩析、限外濾過、凍結乾燥等
の手段により、粗酵素を濃縮、あるいは固体化すること
ができる。さらに、粗酵素をゲル濾過による分子量分画
や各種イオン交換樹脂、ハイドロキシアパタイト、等電
点分画等により精製することができる。
の手段により、粗酵素を濃縮、あるいは固体化すること
ができる。さらに、粗酵素をゲル濾過による分子量分画
や各種イオン交換樹脂、ハイドロキシアパタイト、等電
点分画等により精製することができる。
【００３９】化学パルプ及び機械パルプ製造工程におい
て、パルプに対し本発明の耐熱性アルカリキシラナーゼ
処理を行うことで漂白を行なうことができる。該キシラ
ーゼによる漂白処理の前後に、さらに化学漂白やアルカ
リ抽出を組み入れることでパルプの漂白を行なうことが
できる。アルカリキシラナーゼ処理は２回以上に分けて
行うこともできる。
て、パルプに対し本発明の耐熱性アルカリキシラナーゼ
処理を行うことで漂白を行なうことができる。該キシラ
ーゼによる漂白処理の前後に、さらに化学漂白やアルカ
リ抽出を組み入れることでパルプの漂白を行なうことが
できる。アルカリキシラナーゼ処理は２回以上に分けて
行うこともできる。
【００４０】次に実施例を示すが、本発明はこれらによ
って限定されるものではない。
って限定されるものではない。
【実施例１】キシラン（カバ材由来、シグマ社製）1.０
％、ペプトン0.５％、酵母抽出物0.５％、K2HPO4 0.１
％、MgSO4 ・7H2O 0.０２％、 Na2CO3 1.０％、pH 10.
３の液体培地にバチルス エスピーＢＸ−１、バチルス
エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３、バ
チルス エスピーＢＸ−４をそれぞれ植菌し、４５℃で
２４時間培養した。培養終了後、遠心分離（10,000rpm
×10min.）して培養上清を分離し、耐熱性アルカリキシ
ラナーゼを得た。
％、ペプトン0.５％、酵母抽出物0.５％、K2HPO4 0.１
％、MgSO4 ・7H2O 0.０２％、 Na2CO3 1.０％、pH 10.
３の液体培地にバチルス エスピーＢＸ−１、バチルス
エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ−３、バ
チルス エスピーＢＸ−４をそれぞれ植菌し、４５℃で
２４時間培養した。培養終了後、遠心分離（10,000rpm
×10min.）して培養上清を分離し、耐熱性アルカリキシ
ラナーゼを得た。
【００４１】培養上清中の耐熱性アルカリキシラナーゼ
を次の方法により測定した。１％キシラン溶液（ブナ材
キシラン、シグマ社製 ｐＨ８．０、１／１０ McIlvai
ne Buffer）２００μｌに酵素溶液５０μｌを添加し、
７０℃にて１０分間反応させる。ＤＮＳ試薬を５００μ
ｌ添加して５分間煮沸した後直ちに氷冷し、４ｍｌの蒸
留水を加えて５００ｎｍの吸光度を測定する。検量線は
濃度既知のキシロースを用いて作製する。キシラナーゼ
活性は上記の条件で１分間に１μｍｏｌの還元糖を生成
する酵素量を１Unit（ユニット）とする。その結果、培
養上清中の耐熱性アルカリキシラナーゼ活性はバチルス
エスピーＢＸ−１は、５１Ｕ／ｍｌ、バチルス エス
ピーＢＸ−２は３７Ｕ／ｍｌバチルス エスピーＢＸ−
３は３４Ｕ／ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−４は３１
Ｕ／ｍｌであった。
を次の方法により測定した。１％キシラン溶液（ブナ材
キシラン、シグマ社製 ｐＨ８．０、１／１０ McIlvai
ne Buffer）２００μｌに酵素溶液５０μｌを添加し、
７０℃にて１０分間反応させる。ＤＮＳ試薬を５００μ
ｌ添加して５分間煮沸した後直ちに氷冷し、４ｍｌの蒸
留水を加えて５００ｎｍの吸光度を測定する。検量線は
濃度既知のキシロースを用いて作製する。キシラナーゼ
活性は上記の条件で１分間に１μｍｏｌの還元糖を生成
する酵素量を１Unit（ユニット）とする。その結果、培
養上清中の耐熱性アルカリキシラナーゼ活性はバチルス
エスピーＢＸ−１は、５１Ｕ／ｍｌ、バチルス エス
ピーＢＸ−２は３７Ｕ／ｍｌバチルス エスピーＢＸ−
３は３４Ｕ／ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−４は３１
Ｕ／ｍｌであった。
【００４２】
【実施例２】グルコース1.０％、ペプトン0.５％、酵母
抽出物0.５％、K2HPO4 0.１％、MgSO4 ・7H2O 0.０２
％、 Na2CO3 1.０％、pH10.3の液体培地にバチルスエ
スピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチル
ス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４を
それぞれ植菌し、４５℃で２４時間培養した。 培養終
了後、遠心分離（10,000rpm ×10min.）して培養上清を
分離し、耐熱性アルカリキシラナーゼを得た。培養上清
中の耐熱性アルカリキシラナーゼを実施例１と同様に測
定した結果、バチルス エスピーＢＸ−１は、３１Ｕ／
ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−２は２０Ｕ／ｍｌ、バ
チルス エスピーＢＸ−３は１８Ｕ／ｍｌ、バチルス
エスピーＢＸ−４は１４Ｕ／ｍｌであった。
抽出物0.５％、K2HPO4 0.１％、MgSO4 ・7H2O 0.０２
％、 Na2CO3 1.０％、pH10.3の液体培地にバチルスエ
スピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、バチル
ス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ−４を
それぞれ植菌し、４５℃で２４時間培養した。 培養終
了後、遠心分離（10,000rpm ×10min.）して培養上清を
分離し、耐熱性アルカリキシラナーゼを得た。培養上清
中の耐熱性アルカリキシラナーゼを実施例１と同様に測
定した結果、バチルス エスピーＢＸ−１は、３１Ｕ／
ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−２は２０Ｕ／ｍｌ、バ
チルス エスピーＢＸ−３は１８Ｕ／ｍｌ、バチルス
エスピーＢＸ−４は１４Ｕ／ｍｌであった。
【００４３】
【実施例３】キシラン（カバ材由来、シグマ社製）1.０
％、ペプトン0.５％、酵母抽出物0.５％、K2HPO4 0.１
％、MgSO4 ・7H2O 0.０２％、pH 7.0の液体培地にバチ
ルスエスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、
バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ
−４をそれぞれ植菌し、４５℃で２４時間培養した。培
養終了後、遠心分離（10,000rpm ×10min.）して培養上
清を分離し、耐熱性アルカリキシラナーゼを得た。培養
上清中の耐熱性アルカリキシラナーゼを実施例１と同様
に測定した結果、バチルス エスピーＢＸ−１は３３Ｕ
／ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−２は２３Ｕ／ｍｌ、
バチルス エスピーＢＸ−３は１７Ｕ／ｍｌ、バチルス
エスピーＢＸ−４は１８Ｕ／ｍｌであった。
％、ペプトン0.５％、酵母抽出物0.５％、K2HPO4 0.１
％、MgSO4 ・7H2O 0.０２％、pH 7.0の液体培地にバチ
ルスエスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−２、
バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピーＢＸ
−４をそれぞれ植菌し、４５℃で２４時間培養した。培
養終了後、遠心分離（10,000rpm ×10min.）して培養上
清を分離し、耐熱性アルカリキシラナーゼを得た。培養
上清中の耐熱性アルカリキシラナーゼを実施例１と同様
に測定した結果、バチルス エスピーＢＸ−１は３３Ｕ
／ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−２は２３Ｕ／ｍｌ、
バチルス エスピーＢＸ−３は１７Ｕ／ｍｌ、バチルス
エスピーＢＸ−４は１８Ｕ／ｍｌであった。
【００４４】
【実施例４】グルコース1.０％、ペプトン0.５％、酵母
抽出物0.５％、K2HPO4 0.１％、MgSO4 ・7H2O 0.０２
％、pH7.0 の液体培地にバチルス エスピーＢＸ−１、
バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ
−３、バチルス エスピーＢＸ−４をそれぞれ植菌し、
４５℃で２４時間培養した。培養終了後、遠心分離（1
0,000rpm ×10min.）して培養上清を分離し、耐熱性ア
ルカリキシラナーゼを得た。培養上清中の耐熱性アルカ
リキシラナーゼを実施例１と同様に測定した結果、バチ
ルス エスピーＢＸ−１は３０Ｕ／ｍｌ、バチルス エ
スピーＢＸ−２は２０Ｕ／ｍｌ、バチルス エスピーＢ
Ｘ−３は１７Ｕ／ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−４は
１５Ｕ／ｍｌであった。
抽出物0.５％、K2HPO4 0.１％、MgSO4 ・7H2O 0.０２
％、pH7.0 の液体培地にバチルス エスピーＢＸ−１、
バチルス エスピーＢＸ−２、バチルス エスピーＢＸ
−３、バチルス エスピーＢＸ−４をそれぞれ植菌し、
４５℃で２４時間培養した。培養終了後、遠心分離（1
0,000rpm ×10min.）して培養上清を分離し、耐熱性ア
ルカリキシラナーゼを得た。培養上清中の耐熱性アルカ
リキシラナーゼを実施例１と同様に測定した結果、バチ
ルス エスピーＢＸ−１は３０Ｕ／ｍｌ、バチルス エ
スピーＢＸ−２は２０Ｕ／ｍｌ、バチルス エスピーＢ
Ｘ−３は１７Ｕ／ｍｌ、バチルス エスピーＢＸ−４は
１５Ｕ／ｍｌであった。
【００４５】
【実施例５】 ＜耐熱性アルカリキシラナーゼ処理によるパルプ漂白性
の向上＞広葉樹未晒クラフトパルプに実施例１で得られ
た耐熱性アルカリキシラナーゼをそれぞれパルプ絶乾重
量あたり１０Ｕ添加しパルプ濃度３％、ｐＨ９、６０℃
にて４時間反応させる。反応終了後、塩素−アルカリ抽
出−次亜塩素酸塩−二酸化塩素の順で常法により漂白を
行なった。
の向上＞広葉樹未晒クラフトパルプに実施例１で得られ
た耐熱性アルカリキシラナーゼをそれぞれパルプ絶乾重
量あたり１０Ｕ添加しパルプ濃度３％、ｐＨ９、６０℃
にて４時間反応させる。反応終了後、塩素−アルカリ抽
出−次亜塩素酸塩−二酸化塩素の順で常法により漂白を
行なった。
【００４６】その結果、酵素処理しないものに比べ、白
色度を低下させること無く塩素量をバチルス エスピー
ＢＸ−１の耐熱性アルカリキシラナーゼでは２６％、バ
チルス エスピーＢＸ−２の耐熱性アルカリキシラナー
ゼでは２４％、バチルス エスピーＢＸ−３の耐熱性ア
ルカリキシラナーゼでは２６％、バチルス エスピーＢ
Ｘ−４の耐熱性アルカリキシラナーゼでは２５％削減す
ることができた。
色度を低下させること無く塩素量をバチルス エスピー
ＢＸ−１の耐熱性アルカリキシラナーゼでは２６％、バ
チルス エスピーＢＸ−２の耐熱性アルカリキシラナー
ゼでは２４％、バチルス エスピーＢＸ−３の耐熱性ア
ルカリキシラナーゼでは２６％、バチルス エスピーＢ
Ｘ−４の耐熱性アルカリキシラナーゼでは２５％削減す
ることができた。
【００４７】
【発明の効果】本発明は耐熱性アルカリキシラナーゼを
生産する新規微生物を提供したものある。本発明によ
り、耐熱性アルカリキシラナーゼを生産できることが可
能になり、耐熱性アルカリキシラナーゼの工業的生産に
貢献するとともに、紙パルプ製造において塩素等の薬品
節減、排水中のＡＯＸ節減などに貢献することができた
ものである。
生産する新規微生物を提供したものある。本発明によ
り、耐熱性アルカリキシラナーゼを生産できることが可
能になり、耐熱性アルカリキシラナーゼの工業的生産に
貢献するとともに、紙パルプ製造において塩素等の薬品
節減、排水中のＡＯＸ節減などに貢献することができた
ものである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:07） (56)参考文献 Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．, ｖｏｌ．49，ｎｏ．11（1985）ｐ．3165 −3169 Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎｔ．Ｔｅｃｈｎｏ ｌ．，ｖｏｌ．64，ｎｏ．５（1985) ｐ．373−377 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ) ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (2)
- 【請求項１】 耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する
微生物であるバチルス（Bacillus）属に属する菌株バチ
ルス エスピーＢＸ−１、バチルス エスピーＢＸ−
２、バチルス エスピーＢＸ−３、バチルス エスピー
ＢＸ−４。 - 【請求項２】 請求項１記載の耐熱性アルカリキシラナ
ーゼ生産菌を培養し、該培養物から耐熱性アルカリキシ
ラナーゼを採取することを特徴とする耐熱性アルカリキ
シラナーゼの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24007692A JP3070290B2 (ja) | 1992-08-18 | 1992-08-18 | 耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する微生物及びその利用法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24007692A JP3070290B2 (ja) | 1992-08-18 | 1992-08-18 | 耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する微生物及びその利用法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0662839A JPH0662839A (ja) | 1994-03-08 |
| JP3070290B2 true JP3070290B2 (ja) | 2000-07-31 |
Family
ID=17054139
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24007692A Expired - Fee Related JP3070290B2 (ja) | 1992-08-18 | 1992-08-18 | 耐熱性アルカリキシラナーゼを生産する微生物及びその利用法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3070290B2 (ja) |
-
1992
- 1992-08-18 JP JP24007692A patent/JP3070290B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．４９，ｎｏ．１１（１９８５）ｐ．３１６５−３１６９ |
| Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎｔ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．，ｖｏｌ．６４，ｎｏ．５（１９８５）ｐ．３７３−３７７ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0662839A (ja) | 1994-03-08 |
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