JP3068656B2 - 新規なペプチド及びアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド並びにそれらを含有する経口摂食組成物 - Google Patents
新規なペプチド及びアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド並びにそれらを含有する経口摂食組成物Info
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、高血圧の予防等を目的
とする医薬品、健康食品等として有用な新規なペプチド
及びアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド並びにそれ
らを含有する経口摂食組成物に関するものである。
とする医薬品、健康食品等として有用な新規なペプチド
及びアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド並びにそれ
らを含有する経口摂食組成物に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】今日の老齢化社会において、心臓病、脳
血管障害、ガンなどの成人病は生命に重大な脅威を与え
ている。それらの増悪因子として大きなウェートを占め
ているものに高血圧症があり、高血圧症の治療および予
防が大きな課題となっている。高血圧症には２次性高血
圧症と本態性高血圧症があり、その中で主を占める本態
性高血圧症は、食塩の摂取過剰、レニン−アンジオテン
シン−アルドステロン系、カリクレイン−キニン−プロ
スタグランジン系の調節不全、カテコラミン分泌過剰な
どの相互作用により、発症するものと考えられている。
血管障害、ガンなどの成人病は生命に重大な脅威を与え
ている。それらの増悪因子として大きなウェートを占め
ているものに高血圧症があり、高血圧症の治療および予
防が大きな課題となっている。高血圧症には２次性高血
圧症と本態性高血圧症があり、その中で主を占める本態
性高血圧症は、食塩の摂取過剰、レニン−アンジオテン
シン−アルドステロン系、カリクレイン−キニン−プロ
スタグランジン系の調節不全、カテコラミン分泌過剰な
どの相互作用により、発症するものと考えられている。
【０００３】このレニン−アンジオテンシン系、カリク
レイン−キニン系の調節にはアンジオテンシン変換酵素
（Angiotensin Converting Enzyme 、以下ＡＣＥとい
う）が存在し、血液中に昇圧ペプチドであるアンジオテ
ンシン２を産生する一方で、降圧ペプチドであるキニン
を加水分解する作用を有する酵素である。従ってＡＣＥ
を阻害することは全体として血圧上昇を抑制することに
なる。
レイン−キニン系の調節にはアンジオテンシン変換酵素
（Angiotensin Converting Enzyme 、以下ＡＣＥとい
う）が存在し、血液中に昇圧ペプチドであるアンジオテ
ンシン２を産生する一方で、降圧ペプチドであるキニン
を加水分解する作用を有する酵素である。従ってＡＣＥ
を阻害することは全体として血圧上昇を抑制することに
なる。
【０００４】この様な考えから、天然物および合成物に
ついてＡＣＥ阻害物質の探索が精力的に行われ、すでに
プロリン誘導体化合物がその有用性から実用に供されて
いる。一方、ある種の食品、漢方薬の中にも、作用の強
弱はあるものの本酵素阻害作用があることも報告されて
いる（日本農芸化学会誌 ,Vol.57,No.11,1143,1983）。
それらの中で、カゼインのトリプシン分解物についてだ
けがＡＣＥ阻害ペプチドの単離、精製がなされ、アミノ
酸構造も解明されているのが現状である（特開昭５８−
１０９４２５号）。
ついてＡＣＥ阻害物質の探索が精力的に行われ、すでに
プロリン誘導体化合物がその有用性から実用に供されて
いる。一方、ある種の食品、漢方薬の中にも、作用の強
弱はあるものの本酵素阻害作用があることも報告されて
いる（日本農芸化学会誌 ,Vol.57,No.11,1143,1983）。
それらの中で、カゼインのトリプシン分解物についてだ
けがＡＣＥ阻害ペプチドの単離、精製がなされ、アミノ
酸構造も解明されているのが現状である（特開昭５８−
１０９４２５号）。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】高血圧症の中でも、特
に、本態性高血圧症は発症原因が多岐にわたるため、根
本的な治療法もなく、対症療法がほとんどである。その
ため日常的な血圧のコントロールは、いわゆる降圧剤も
しくは血圧降下作用を有する成分の含有された健康食品
を摂取することにより行われている。血圧を正常にコン
トロールすることは成人病の増悪因子を減少させ、ひい
ては生体の老化現象を遅延させるために、人類が切望し
ているものでもある。
に、本態性高血圧症は発症原因が多岐にわたるため、根
本的な治療法もなく、対症療法がほとんどである。その
ため日常的な血圧のコントロールは、いわゆる降圧剤も
しくは血圧降下作用を有する成分の含有された健康食品
を摂取することにより行われている。血圧を正常にコン
トロールすることは成人病の増悪因子を減少させ、ひい
ては生体の老化現象を遅延させるために、人類が切望し
ているものでもある。
【０００６】古来、世界各国で食用されてきたローヤル
ゼリーは高血圧、糖尿病、ガン、更年期障害、神経痛、
脳血管障害等に有用であると報告されている。また、若
年者の正常な心身の発達をもたらし、ローヤルゼリーを
食してきたものには長寿の者が多いと言われている。し
かし、ローヤルゼリーの中の生理活性物質が何であるか
について解明した報告は少なく、ローヤルゼリーの中の
最大の生理活性物質と言われている１０−ヒドロキシデ
セン酸の作用をみたものがほとんどである。
ゼリーは高血圧、糖尿病、ガン、更年期障害、神経痛、
脳血管障害等に有用であると報告されている。また、若
年者の正常な心身の発達をもたらし、ローヤルゼリーを
食してきたものには長寿の者が多いと言われている。し
かし、ローヤルゼリーの中の生理活性物質が何であるか
について解明した報告は少なく、ローヤルゼリーの中の
最大の生理活性物質と言われている１０−ヒドロキシデ
セン酸の作用をみたものがほとんどである。
【０００７】そこで本発明の目的は、血圧を上昇させる
作用を有するアンジオテンシン変換酵素を阻害し、降圧
作用を発揮できるペプチドを提供すること及びこのペプ
チドを健康食品や医薬品として利用できる経口摂食組成
物を提供することにある。
作用を有するアンジオテンシン変換酵素を阻害し、降圧
作用を発揮できるペプチドを提供すること及びこのペプ
チドを健康食品や医薬品として利用できる経口摂食組成
物を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】即ち、第１の発明は、Se
r-Leu-Pro-Lys-Leu-His-Glu-Trp なる構造からなるペプ
チド（以下、ＲＪＰ8 と略す）をその要旨としている。
第２の発明は、Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys
なる構造からなるペプチド（以下、ＲＪＰ9 と略す）を
その要旨としている。
r-Leu-Pro-Lys-Leu-His-Glu-Trp なる構造からなるペプ
チド（以下、ＲＪＰ8 と略す）をその要旨としている。
第２の発明は、Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys
なる構造からなるペプチド（以下、ＲＪＰ9 と略す）を
その要旨としている。
【０００９】第３の発明は、Tyr-Asn-Glu-Val-Pro なる
構造からなるペプチド（以下、ＲＪＰ5 と略す）をその
要旨としている。第４の発明は、ローヤルゼリーを蛋白
質分解酵素により分解してなり、Ser-Leu-Pro- Lys-Leu
-His-Glu-Trp、Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys
又はTyr-Asn-Glu-Val-Proなる構造からなるアンジオテ
ンシン変換酵素阻害ペプチドをその要旨としている。第
５の発明は、経口摂食可能な第１〜４の発明のペプチド
を含有する高血圧の予防又は治療のための経口摂食組成
物をその要旨としている。
構造からなるペプチド（以下、ＲＪＰ5 と略す）をその
要旨としている。第４の発明は、ローヤルゼリーを蛋白
質分解酵素により分解してなり、Ser-Leu-Pro- Lys-Leu
-His-Glu-Trp、Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys
又はTyr-Asn-Glu-Val-Proなる構造からなるアンジオテ
ンシン変換酵素阻害ペプチドをその要旨としている。第
５の発明は、経口摂食可能な第１〜４の発明のペプチド
を含有する高血圧の予防又は治療のための経口摂食組成
物をその要旨としている。
【００１０】次に、各発明について詳細に説明する。第
１〜３の発明でいうペプチドＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲ
ＪＰ5 は、それぞれSer-Leu-Pro-Lys-Leu-His-Glu-Trp
、Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys 及びTyr-Asn
-Glu-Val-Pro なる構造を有し、後述する製造方法によ
って製造され、構造解析によって構造が決定されてい
る。これらのペプチドは、前述したＡＣＥを阻害するペ
プチドである。上記ペプチドを構成するアミノ酸は、次
の意味を表す。即ち、Ser はセリン、Leu はロイシン、
Pro はプロリン、Lys はリジン、His はヒスチジン、Gl
u はグルタミン酸、Trp はトリプトファン、Ile はイソ
ロイシン、Tyr はチロシン、Asn はアスパラギン、Val
はバリンである。
１〜３の発明でいうペプチドＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲ
ＪＰ5 は、それぞれSer-Leu-Pro-Lys-Leu-His-Glu-Trp
、Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys 及びTyr-Asn
-Glu-Val-Pro なる構造を有し、後述する製造方法によ
って製造され、構造解析によって構造が決定されてい
る。これらのペプチドは、前述したＡＣＥを阻害するペ
プチドである。上記ペプチドを構成するアミノ酸は、次
の意味を表す。即ち、Ser はセリン、Leu はロイシン、
Pro はプロリン、Lys はリジン、His はヒスチジン、Gl
u はグルタミン酸、Trp はトリプトファン、Ile はイソ
ロイシン、Tyr はチロシン、Asn はアスパラギン、Val
はバリンである。
【００１１】次に、第４の発明でいうローヤルゼリー由
来のＡＣＥ阻害ペプチドとしては、例えば以下に示す如
きアミノ酸配列を有するＲＪＰｎ（ｎはアミノ酸数を表
す。例えば、ｎ＝４〜２０のポリペプチド）などがあ
り、それらは単独で、もしくは、混合物として用いられ
る。これらＡＣＥ阻害ペプチドはトリプシン、キモトリ
プシン、ペプシン、ブロメライン、パパイン、プロリン
エンドペプチダーゼ等の蛋白質分解酵素のほか、細菌由
来の蛋白質分解酵素〔例えばプロテアーゼ（ズブチリシ
ン、サーモライシン、ナガーゼ等）〕の処理によって得
られる。例えばＲＪＰ8 の調製は次のようにして行われ
る。蜂蜜由来のローヤルゼリーをｐＨ5.0 〜9.0 の条件
下トリプシンにより分解し、分解物を酸処理あるいは加
熱処理することにより蛋白質分解酵素および未分解ロー
ヤルゼリー蛋白を沈澱除去する。
来のＡＣＥ阻害ペプチドとしては、例えば以下に示す如
きアミノ酸配列を有するＲＪＰｎ（ｎはアミノ酸数を表
す。例えば、ｎ＝４〜２０のポリペプチド）などがあ
り、それらは単独で、もしくは、混合物として用いられ
る。これらＡＣＥ阻害ペプチドはトリプシン、キモトリ
プシン、ペプシン、ブロメライン、パパイン、プロリン
エンドペプチダーゼ等の蛋白質分解酵素のほか、細菌由
来の蛋白質分解酵素〔例えばプロテアーゼ（ズブチリシ
ン、サーモライシン、ナガーゼ等）〕の処理によって得
られる。例えばＲＪＰ8 の調製は次のようにして行われ
る。蜂蜜由来のローヤルゼリーをｐＨ5.0 〜9.0 の条件
下トリプシンにより分解し、分解物を酸処理あるいは加
熱処理することにより蛋白質分解酵素および未分解ロー
ヤルゼリー蛋白を沈澱除去する。
【００１２】次いで、上清を必要ならばアルカリで中和
し、減圧下濃縮し、ゲル濾過用の担体（東洋曹達株式会
社製の商品名トヨパール４０Ｓ）等を充填したカラムに
添加し、蒸留水で溶出させ、ＡＣＥ阻害画分を集める。
そして、必要ならば同様の精製を繰り返すか又はイオン
交換、疎水カラムクロマトグラフィ等で精製を繰り返す
ことにより、ＡＣＥを阻害する特徴を有するペプチドが
得られる。
し、減圧下濃縮し、ゲル濾過用の担体（東洋曹達株式会
社製の商品名トヨパール４０Ｓ）等を充填したカラムに
添加し、蒸留水で溶出させ、ＡＣＥ阻害画分を集める。
そして、必要ならば同様の精製を繰り返すか又はイオン
交換、疎水カラムクロマトグラフィ等で精製を繰り返す
ことにより、ＡＣＥを阻害する特徴を有するペプチドが
得られる。
【００１３】また、逆相カラムを用いた高速液体クロマ
トグラフィ〔溶出液：0.05% トリフルオロ酢酸（ＴＦ
Ａ）を含むアセトニトリル／水のグラジエント溶出〕に
よりＡＣＥ阻害画分を分取することができる。また、有
機化学的な合成法により得ることができる。以下にポリ
スチレン樹脂を用いる固相法を利用し、ペプチドＲＪＰ
8 の合成を行う。用いるアミノ酸はすべてＬ体を用い、
官能基は以下のように封鎖しておく。即ち、Ｓｅｒ（Ｔ
ｏｓ）、Ｌｙｓ（2-chlorophenyloxy carbonyl) 、Ｈｉ
ｓ（Ｔｏｓ）、Ｇｌｕ（Ｏ−Ｂｚｌ）、Ｔｒｐ（Ｔｏ
ｓ）である。（ ）内が保護基を示す。なお、アミノ酸
保護基の略号は以下の置換基を表す。
トグラフィ〔溶出液：0.05% トリフルオロ酢酸（ＴＦ
Ａ）を含むアセトニトリル／水のグラジエント溶出〕に
よりＡＣＥ阻害画分を分取することができる。また、有
機化学的な合成法により得ることができる。以下にポリ
スチレン樹脂を用いる固相法を利用し、ペプチドＲＪＰ
8 の合成を行う。用いるアミノ酸はすべてＬ体を用い、
官能基は以下のように封鎖しておく。即ち、Ｓｅｒ（Ｔ
ｏｓ）、Ｌｙｓ（2-chlorophenyloxy carbonyl) 、Ｈｉ
ｓ（Ｔｏｓ）、Ｇｌｕ（Ｏ−Ｂｚｌ）、Ｔｒｐ（Ｔｏ
ｓ）である。（ ）内が保護基を示す。なお、アミノ酸
保護基の略号は以下の置換基を表す。
【００１４】 Ｂｏｃ：tert-butyloxy-carbonyl基 Ｔｏｓ：ｐ−トルエンスルフォニル基 Ｂｚｌ：ベンジル基 ＰＡＭ：p-methoxy phenyl acetamidomethyl resin ＡＡｎ：ｎ番目のアミノ酸 ポリスチレン樹脂に架橋されたＡＡ1 （ＡＡ1 −ＰＡ
Ｍ）をＴＦＡを用いた脱保護基反応によりＨ−ＡＡ1 −
ＰＡＭを合成し、それにＢｏｃ−ＡＡ2 −ＯＨをジクロ
ロメタン中でＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド）を用いてジメチルホルムアミド中で縮合させ、Ｂｏ
ｃ−ＡＡ2 −ＡＡ1 −ＰＡＭを合成、未反応のＡＡ1 −
ＰＡＭを無水酢酸を用い不活性化する。
Ｍ）をＴＦＡを用いた脱保護基反応によりＨ−ＡＡ1 −
ＰＡＭを合成し、それにＢｏｃ−ＡＡ2 −ＯＨをジクロ
ロメタン中でＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド）を用いてジメチルホルムアミド中で縮合させ、Ｂｏ
ｃ−ＡＡ2 −ＡＡ1 −ＰＡＭを合成、未反応のＡＡ1 −
ＰＡＭを無水酢酸を用い不活性化する。
【００１５】得られたＢｏｃ−ＡＡ2 −ＡＡ1 −ＰＡＭ
を再度ＴＦＡで脱保護基反応を行い、同様にＢｏｃ−Ａ
Ａ3 −ＯＨを縮合させ、以下同様にして、ＡＡ8 まで縮
合反応を行う。なおＡＡ1 ＝Ｓｅｒ，ＡＡ2 ＝Ｌｅｕ，
ＡＡ3 ＝Ｐｒｏ，ＡＡ4 ＝Ｌｙｓ，ＡＡ5 ＝Ｌｅｕ，Ａ
Ａ6 ＝Ｈｉｓ，ＡＡ7 ＝Ｇｌｕ，ＡＡ8 ＝Ｔｒｐであ
る。縮合反応終了後、フッ化水素（ＨＦ）を用い脱保護
基反応を行い、Ｂｏｃ，ＰＡＭおよび側鎖の保護基を除
去し、目的とするペブチドＲＪＰ8 を得る。
を再度ＴＦＡで脱保護基反応を行い、同様にＢｏｃ−Ａ
Ａ3 −ＯＨを縮合させ、以下同様にして、ＡＡ8 まで縮
合反応を行う。なおＡＡ1 ＝Ｓｅｒ，ＡＡ2 ＝Ｌｅｕ，
ＡＡ3 ＝Ｐｒｏ，ＡＡ4 ＝Ｌｙｓ，ＡＡ5 ＝Ｌｅｕ，Ａ
Ａ6 ＝Ｈｉｓ，ＡＡ7 ＝Ｇｌｕ，ＡＡ8 ＝Ｔｒｐであ
る。縮合反応終了後、フッ化水素（ＨＦ）を用い脱保護
基反応を行い、Ｂｏｃ，ＰＡＭおよび側鎖の保護基を除
去し、目的とするペブチドＲＪＰ8 を得る。
【００１６】以上の様に得られたローヤルゼリー由来Ａ
ＣＥ阻害ペプチド類は通常、粉末の形状で単離し、適当
な無毒性の経口投与用担体と共に適宜な形状、形態から
なる組成物として医薬品又は経口摂食用もしくは経腸栄
養剤などに供してもよい。組成物の例としてはＡＣＥ阻
害ペプチドと薬学的に許容される担体（賦形剤、滑沢
剤、結合剤、着色剤、矯味剤、賦香剤）と共に経口投与
用の医薬品製剤の形態、例えば錠剤（糖衣錠、発泡剤、
フィルムコート錠、咀爵錠など）、カプセル剤、トロー
チ剤、粉末剤、細粒剤、顆粒剤などとしたものがある。
ＣＥ阻害ペプチド類は通常、粉末の形状で単離し、適当
な無毒性の経口投与用担体と共に適宜な形状、形態から
なる組成物として医薬品又は経口摂食用もしくは経腸栄
養剤などに供してもよい。組成物の例としてはＡＣＥ阻
害ペプチドと薬学的に許容される担体（賦形剤、滑沢
剤、結合剤、着色剤、矯味剤、賦香剤）と共に経口投与
用の医薬品製剤の形態、例えば錠剤（糖衣錠、発泡剤、
フィルムコート錠、咀爵錠など）、カプセル剤、トロー
チ剤、粉末剤、細粒剤、顆粒剤などとしたものがある。
【００１７】また、固形、液状の医薬品又は食品もしく
は嗜好品、例えば、菓子類、粉末茶、スポーツ飲料、ア
ルコール飲料、アイスクリーム、ヨーグルトなどの形態
としてもよい。前記経口摂食食物中のＡＣＥ阻害ペプチ
ドの含有量は剤形により適宜選択が可能であるが一般に
０．０１〜１００重量％の範囲である。
は嗜好品、例えば、菓子類、粉末茶、スポーツ飲料、ア
ルコール飲料、アイスクリーム、ヨーグルトなどの形態
としてもよい。前記経口摂食食物中のＡＣＥ阻害ペプチ
ドの含有量は剤形により適宜選択が可能であるが一般に
０．０１〜１００重量％の範囲である。
【００１８】以下の如く本発明の経口摂食物は後で示す
試験例の様に強力なＡＣＥ阻害作用を示し、これを高血
圧症の予防、高血圧傾向の緩和または血圧調節を目的と
して、継続的に摂取することが可能であり、高血圧予防
のための健康食品等としての使用により、その有効性が
発揮できる。この目的に本発明の経口摂食物を用いる場
合、一般的に１日あたり０．０１〜５０mg／kg体重の範
囲で経口摂食するのが適当である。
試験例の様に強力なＡＣＥ阻害作用を示し、これを高血
圧症の予防、高血圧傾向の緩和または血圧調節を目的と
して、継続的に摂取することが可能であり、高血圧予防
のための健康食品等としての使用により、その有効性が
発揮できる。この目的に本発明の経口摂食物を用いる場
合、一般的に１日あたり０．０１〜５０mg／kg体重の範
囲で経口摂食するのが適当である。
【００１９】さらに、前記活性ペプチドと蜂産品、即
ち、ローヤルゼリー、プロポリス、蜂蜜、花粉、蜂の子
等と適宜に併用もしくは混和することにより、より一層
効果を向上させることができる。即ち、上記の蜂産品で
も、加工したもの（例えば加熱処理したもの、又は凍結
乾燥粉末などの各種形状のもの）であっても良い。ま
た、経口摂食組成物としては、活性成分を薬学的に許容
される担体と共に経口投与用の医薬品製剤の形態（例え
ば、錠剤など）にしたり、食品、嗜好品の形態にして用
いることができる。
ち、ローヤルゼリー、プロポリス、蜂蜜、花粉、蜂の子
等と適宜に併用もしくは混和することにより、より一層
効果を向上させることができる。即ち、上記の蜂産品で
も、加工したもの（例えば加熱処理したもの、又は凍結
乾燥粉末などの各種形状のもの）であっても良い。ま
た、経口摂食組成物としては、活性成分を薬学的に許容
される担体と共に経口投与用の医薬品製剤の形態（例え
ば、錠剤など）にしたり、食品、嗜好品の形態にして用
いることができる。
【００２０】
【作用】第１〜３の発明のペプチドＲＪＰ8 、ＲＪＰ9
及びＲＪＰ5 は、いずれもＡＣＥを阻害する作用を発揮
する。第４の発明では、ローヤルゼリーを原料とし、こ
れを蛋白質分解酵素によって分解することにより得られ
るペプチドがアンジオテンシン変換酵素の阻害作用を発
現する。
及びＲＪＰ5 は、いずれもＡＣＥを阻害する作用を発揮
する。第４の発明では、ローヤルゼリーを原料とし、こ
れを蛋白質分解酵素によって分解することにより得られ
るペプチドがアンジオテンシン変換酵素の阻害作用を発
現する。
【００２１】第５の発明では、第１〜４の発明のペプチ
ドを含有する組成物は、健康食品としての経口摂食組成
物となり、ＡＣＥを阻害することにより、高血圧の予防
等の作用が発現される。
ドを含有する組成物は、健康食品としての経口摂食組成
物となり、ＡＣＥを阻害することにより、高血圧の予防
等の作用が発現される。
【００２２】
【実施例】以下に本発明を具体化した実施例について説
明する。即ち、ＡＣＥ阻害ペプチドの製造例、構造解
析、ＡＣＥ阻害ペプチドの活性測定法、本発明経口摂食
物の活性成分であるローヤルゼリー由来ＡＣＥ阻害ペプ
チドの急性毒性試験の結果について説明する。 〔ＡＣＥ阻害ペプチドの活性測定〕１ｇの家兎の肺をア
セトン中で沈降、乾燥した粉末（シグマ社製）を５ｍｌ
のリン酸緩衝液（ｐＨ８．３）に溶解し、１００００
Ｇ、３０分の遠心分離処理後の上清液を上記緩衝液で３
倍に希釈してＡＣＥ酵素液として、酵素阻害を測定し
た。測定法はBiochem.Pharm,Vol,20,pp1637 〜1648,197
1 および、Anal.Biochem.,Vol.84,pp361〜369,1978の方
法に準じた。即ち、100mM リン酸カリウム緩衝液（300m
M 塩化ナトリウムを含む）pH8.3 に、基質として1mM ト
リペプチド（Hip-His-Leu 、ペプチド研究所製）を 100
μl 、ＡＣＥ酵素液 100μl 及び試料液 100μl を加
え、３７℃、３０分間の反応後、沸騰水中で５分間加熱
することにより、反応を終了させ、反応生成物の馬尿酸
をトリクロルトリアジン試薬で誘導体化し、測定波長３
８２nmにおける吸光度を比色定量する方法である。
明する。即ち、ＡＣＥ阻害ペプチドの製造例、構造解
析、ＡＣＥ阻害ペプチドの活性測定法、本発明経口摂食
物の活性成分であるローヤルゼリー由来ＡＣＥ阻害ペプ
チドの急性毒性試験の結果について説明する。 〔ＡＣＥ阻害ペプチドの活性測定〕１ｇの家兎の肺をア
セトン中で沈降、乾燥した粉末（シグマ社製）を５ｍｌ
のリン酸緩衝液（ｐＨ８．３）に溶解し、１００００
Ｇ、３０分の遠心分離処理後の上清液を上記緩衝液で３
倍に希釈してＡＣＥ酵素液として、酵素阻害を測定し
た。測定法はBiochem.Pharm,Vol,20,pp1637 〜1648,197
1 および、Anal.Biochem.,Vol.84,pp361〜369,1978の方
法に準じた。即ち、100mM リン酸カリウム緩衝液（300m
M 塩化ナトリウムを含む）pH8.3 に、基質として1mM ト
リペプチド（Hip-His-Leu 、ペプチド研究所製）を 100
μl 、ＡＣＥ酵素液 100μl 及び試料液 100μl を加
え、３７℃、３０分間の反応後、沸騰水中で５分間加熱
することにより、反応を終了させ、反応生成物の馬尿酸
をトリクロルトリアジン試薬で誘導体化し、測定波長３
８２nmにおける吸光度を比色定量する方法である。
【００２３】阻害率は次式より算出した。 阻害率＝（Ｅ0 −Ｅs ）／Ｅ0 ×１００％ Ｅ0 ：阻害剤を含まない時の３８２ｎｍの吸光度 Ｅs ：阻害剤を含む時の３８２ｎｍの吸光度 なお、阻害率５０％の時の試料濃度をＩＣ50とする。 〔ＡＣＥ阻害試験〕ＡＣＥ阻害作用（ＩＣ50）の結果は
表１の通りである。
表１の通りである。
【００２４】
【表１】
【００２５】表１において、ＣＥＩ12、ＣＥＩβ7 、Ｃ
ＥＩ6 はカゼイン由来ペプチドを示す。（フードケミカ
ル、Nov.39 ,1988から引用した。） 〔蛋白質濃度の測定〕試料中のタンパク質の濃度をビュ
レット法で測定した。標準タンパク質として牛血清アル
ブミンを用いて換算した。 〔製造例１、ＡＣＥ阻害ペプチドの製造例〕ローヤルゼ
リー蛋白２ｇをリン酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに添
加、さらにトリプシンを５ｍｇ加え、３７℃で２４時間
インキュベートする。その後、沸騰水中で１０分加熱処
理する。放冷後、不溶物を遠心分離操作により除去し、
得られた上清を陰イオン交換樹脂（東洋曹達株式会社製
の商品名ＤＥＡＥトヨパール）を充填したカラム（φ３
０ｍｍ×３０ｃｍ）に添加した。
ＥＩ6 はカゼイン由来ペプチドを示す。（フードケミカ
ル、Nov.39 ,1988から引用した。） 〔蛋白質濃度の測定〕試料中のタンパク質の濃度をビュ
レット法で測定した。標準タンパク質として牛血清アル
ブミンを用いて換算した。 〔製造例１、ＡＣＥ阻害ペプチドの製造例〕ローヤルゼ
リー蛋白２ｇをリン酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに添
加、さらにトリプシンを５ｍｇ加え、３７℃で２４時間
インキュベートする。その後、沸騰水中で１０分加熱処
理する。放冷後、不溶物を遠心分離操作により除去し、
得られた上清を陰イオン交換樹脂（東洋曹達株式会社製
の商品名ＤＥＡＥトヨパール）を充填したカラム（φ３
０ｍｍ×３０ｃｍ）に添加した。
【００２６】未吸着画分を陽イオン交換樹脂（東洋曹達
株式会社製の商品名ＳＰトヨパール）を充填したカラム
（φ２０ｍｍ×３０ｃｍ）に添加し、吸着画分について
ギ酸アンモニウムのグラジエント溶出を行った。溶出条
件は０〜０．５Ｍギ酸アンモニウム水溶液、ｐＨ６．
８、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ。さらに、アミコン濃縮器
を用い、分子量５０００未満のＡＣＥ阻害画分を集め、
凍結乾燥後、ＡＣＥ阻害ペプチド２８３ｍｇ（白色粉
末）を得た。これはＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ 5 を
含む粗組成物である。 〔製造例２、ＡＣＥ阻害ペプチドの製造例〕ローヤルゼ
リー蛋白２ｇを５０ｍｌのリン酸緩衝液（ｐＨ２）に添
加、さらにペプシン１０ｍｇを加え、３７℃で２４時間
インキュベートする。その後、沸騰水中で１０分間加熱
処理する。放冷後、不溶物を遠心分離操作により除去
し、得られた上清をトヨパール４０Ｓが充填されたカラ
ム（φ３０ｍｍ×１００ｃｍ）に添加し、蒸留水で溶出
した。
株式会社製の商品名ＳＰトヨパール）を充填したカラム
（φ２０ｍｍ×３０ｃｍ）に添加し、吸着画分について
ギ酸アンモニウムのグラジエント溶出を行った。溶出条
件は０〜０．５Ｍギ酸アンモニウム水溶液、ｐＨ６．
８、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ。さらに、アミコン濃縮器
を用い、分子量５０００未満のＡＣＥ阻害画分を集め、
凍結乾燥後、ＡＣＥ阻害ペプチド２８３ｍｇ（白色粉
末）を得た。これはＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ 5 を
含む粗組成物である。 〔製造例２、ＡＣＥ阻害ペプチドの製造例〕ローヤルゼ
リー蛋白２ｇを５０ｍｌのリン酸緩衝液（ｐＨ２）に添
加、さらにペプシン１０ｍｇを加え、３７℃で２４時間
インキュベートする。その後、沸騰水中で１０分間加熱
処理する。放冷後、不溶物を遠心分離操作により除去
し、得られた上清をトヨパール４０Ｓが充填されたカラ
ム（φ３０ｍｍ×１００ｃｍ）に添加し、蒸留水で溶出
した。
【００２７】活性画分をＳＰトヨパールを充填したカラ
ム（φ２０ｍｍ×３０ｃｍ）に添加し、吸着画分につい
てギ酸アンモニウムのグラジエント溶出を行った。溶出
条件は０〜０．５Ｍギ酸アンモニウム水溶液、ｐＨ６．
８、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎである。さらに、アミコン
濃縮器を用い、分子量５００以上、５０００未満のＡＣ
Ｅ阻害画分を集め、凍結乾燥後、ＡＣＥ阻害ペプチド２
５８ｍｇ（白色粉末）を得た。これはＲＪＰ8 、ＲＪＰ
9 及びＲＪＰ5 を含む粗組成物である。 〔製造例３、ＲＪＰ8 の製造例〕ローヤルゼリー蛋白２
ｇをリン酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに添加、さらにト
リプシンを５ｍｇを加え、３７℃で２４時間インキュベ
ートした。その後、塩酸でｐＨ１にし、不溶物を遠心分
離操作により除去し、得られた上清を減圧濃縮した。こ
れを５ｍｌに濃縮しセファデックスＧ−２５カラムクロ
マトグラフィー（φ３０ｍｍ×１００ｃｍ）において蒸
留水で溶出し、活性画分を分取し、濃縮した。
ム（φ２０ｍｍ×３０ｃｍ）に添加し、吸着画分につい
てギ酸アンモニウムのグラジエント溶出を行った。溶出
条件は０〜０．５Ｍギ酸アンモニウム水溶液、ｐＨ６．
８、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎである。さらに、アミコン
濃縮器を用い、分子量５００以上、５０００未満のＡＣ
Ｅ阻害画分を集め、凍結乾燥後、ＡＣＥ阻害ペプチド２
５８ｍｇ（白色粉末）を得た。これはＲＪＰ8 、ＲＪＰ
9 及びＲＪＰ5 を含む粗組成物である。 〔製造例３、ＲＪＰ8 の製造例〕ローヤルゼリー蛋白２
ｇをリン酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに添加、さらにト
リプシンを５ｍｇを加え、３７℃で２４時間インキュベ
ートした。その後、塩酸でｐＨ１にし、不溶物を遠心分
離操作により除去し、得られた上清を減圧濃縮した。こ
れを５ｍｌに濃縮しセファデックスＧ−２５カラムクロ
マトグラフィー（φ３０ｍｍ×１００ｃｍ）において蒸
留水で溶出し、活性画分を分取し、濃縮した。
【００２８】さらに、高速液体クロマトグラフィー（Ｈ
ＰＬＣ）：島津製作所製ＬＣ−８Ａ型；カラムShimpack
ＰＲＥＰ−ＯＤＳ（Ｌ）（φ５０ｍｍ×２５ｃｍ）を
用い、溶出液は０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル
のグラジエント溶出で活性画分を分取した。流速は１０
ｍｌ／ｍｉｎ、検出器はＳＰＤ−Ｍ６Ａ、検出波長２１
０ｎｍである。なお、分取したＡＣＥ阻害精製ペプチド
のうちＲＪＰ8 の凍結乾燥後の収量は１５．３ｍｇ（白
色粉末）であった。 〔製造例４、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 の製造例〕製造例１
で得られたＡＣＥ阻害ペプチドを逆相カラムを用いたＨ
ＰＬＣでさらに分離精製を行い数種のＡＣＥ阻害ペプチ
ドから製造例３と同様にＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 を得た。 〔アミノ酸一次構造及びアミノ酸分析の例〕次に、アミ
ノ酸一次構造解析及びアミノ酸分析を行った。
ＰＬＣ）：島津製作所製ＬＣ−８Ａ型；カラムShimpack
ＰＲＥＰ−ＯＤＳ（Ｌ）（φ５０ｍｍ×２５ｃｍ）を
用い、溶出液は０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル
のグラジエント溶出で活性画分を分取した。流速は１０
ｍｌ／ｍｉｎ、検出器はＳＰＤ−Ｍ６Ａ、検出波長２１
０ｎｍである。なお、分取したＡＣＥ阻害精製ペプチド
のうちＲＪＰ8 の凍結乾燥後の収量は１５．３ｍｇ（白
色粉末）であった。 〔製造例４、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 の製造例〕製造例１
で得られたＡＣＥ阻害ペプチドを逆相カラムを用いたＨ
ＰＬＣでさらに分離精製を行い数種のＡＣＥ阻害ペプチ
ドから製造例３と同様にＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 を得た。 〔アミノ酸一次構造及びアミノ酸分析の例〕次に、アミ
ノ酸一次構造解析及びアミノ酸分析を行った。
【００２９】製造例３及び製造例４のペプチドは島津製
作所製全自動タンパク質一次構造分析装置ＰＳＱ−１シ
ステムにより、以下のポリペプチドであることが示され
た。また、アミノ酸分析システム（ＷＡＴＥＲＳ社製の
商品名、ＰＩＣＯ−ＴＡＧシステム）により、ＲＪ
Ｐ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 のアミノ酸組成を支持する
分析結果が得られた。
作所製全自動タンパク質一次構造分析装置ＰＳＱ−１シ
ステムにより、以下のポリペプチドであることが示され
た。また、アミノ酸分析システム（ＷＡＴＥＲＳ社製の
商品名、ＰＩＣＯ−ＴＡＧシステム）により、ＲＪ
Ｐ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 のアミノ酸組成を支持する
分析結果が得られた。
【００３０】 （ＲＪＰ8 の一次構造） Ser-Leu-Pro-Lys-Leu-His-Glu-Trp （ＲＪＰ9 の一次構造） Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys （ＲＪＰ5 の一次構造） Tyr-Asn-Glu-Val-Pro （ＲＪＰ8 のアミノ酸組成） Ｇｌｕ １４．３０％ Ｓｅｒ １４．２８％ Ｈｉｓ １４．３２％ Ｐｒｏ １４．２５％ Ｌｅｕ ２８．７２％ Ｌｙｓ １４．１６％ Ｔｒｐ − （測定不可） （ＲＪＰ9 のアミノ酸組成） Ｇｌｕ １２．５６％ Ｓｅｒ １２．３７％ Ｈｉｓ １２．４１％ Ｐｒｏ １２．４３％ Ｌｅｕ ２５．７６％ Ｌｙｓ １２．６７％ Ｉｌｅ １２．３６％ Ｔｒｐ − （測定不可） （ＲＪＰ5 のアミノ酸組成） Ｇｌｕ ２０．６０％ Ｖａｌ ２１．３２％ Ｐｒｏ １９．５６％ Ａｓｎ １９．８２％ Ｔｙｒ １９．９６％ 〔各ＡＣＥ阻害ペプチドの急性毒性試験〕 （１）試験方法 各ＡＣＥ阻害ペプチドの５％水溶液を試料にして、ＩＣ
Ｒ系マウス体重平均２１．９±０．４ｇのものを１群１
０匹用いて実験に供した。試験前１晩絶食させ、例え
ば、当該ペプチド５ｇ／Ｋｇをゾンデを用いて経口投与
した。投与後、１週間、生死および一般症状などの観察
を行った。 （２）試験結果 例えばＲＪＰ5 のＬＤ50は５ｇ／Ｋｇ以上であり、死亡
例はなかった。また、一般症状観察では虚脱、立毛、呼
吸異常、るいそう（震え）、腹這い、発汗などの異常状
態は全く見られなかった。なお、他のＡＣＥ阻害ペプチ
ドの結果も同様であった。
Ｒ系マウス体重平均２１．９±０．４ｇのものを１群１
０匹用いて実験に供した。試験前１晩絶食させ、例え
ば、当該ペプチド５ｇ／Ｋｇをゾンデを用いて経口投与
した。投与後、１週間、生死および一般症状などの観察
を行った。 （２）試験結果 例えばＲＪＰ5 のＬＤ50は５ｇ／Ｋｇ以上であり、死亡
例はなかった。また、一般症状観察では虚脱、立毛、呼
吸異常、るいそう（震え）、腹這い、発汗などの異常状
態は全く見られなかった。なお、他のＡＣＥ阻害ペプチ
ドの結果も同様であった。
【００３１】次に、製造例１、ＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及び
ＲＪＰ5 のＡＣＥ阻害ペプチドの降圧作用について試験
した。 〔実験例１、各ＡＣＥ阻害ペプチドの降圧試験〕 （１）試料及び投与方法 製造例１、製造例３及び製造例４で得られたペプチド１
ｇ／Ｋｇ体重となるように生理食塩水に溶解したもの５
ｍｌをゾンデで強制的に経口投与した。 （２）実験動物 雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）８週令を１週間予
備飼育した後、１群５匹使用した。 （３）血圧測定 投与前後、非観血的尾動脈血圧計（理研）を用いて、経
時的に各ラットの血圧を測定した。そして、その平均値
を求めた。 （４）試験結果 結果を表２に示した。表２より明らかなように、投与量
に依存した血圧降下作用がみられた。また、その降下は
投与６時間後でも持続していた。 〔実験例２、配合例７の健康食品の降圧試験〕後述する
配合例７の健康食品（プロポリス液にＲＪＰ8 を混ぜた
もの）３ｇ／kg体重をゾンデで強制的に投与した。対照
にはＡＣＥ阻害ペプチドを含まないものを用いた。
ＲＪＰ5 のＡＣＥ阻害ペプチドの降圧作用について試験
した。 〔実験例１、各ＡＣＥ阻害ペプチドの降圧試験〕 （１）試料及び投与方法 製造例１、製造例３及び製造例４で得られたペプチド１
ｇ／Ｋｇ体重となるように生理食塩水に溶解したもの５
ｍｌをゾンデで強制的に経口投与した。 （２）実験動物 雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）８週令を１週間予
備飼育した後、１群５匹使用した。 （３）血圧測定 投与前後、非観血的尾動脈血圧計（理研）を用いて、経
時的に各ラットの血圧を測定した。そして、その平均値
を求めた。 （４）試験結果 結果を表２に示した。表２より明らかなように、投与量
に依存した血圧降下作用がみられた。また、その降下は
投与６時間後でも持続していた。 〔実験例２、配合例７の健康食品の降圧試験〕後述する
配合例７の健康食品（プロポリス液にＲＪＰ8 を混ぜた
もの）３ｇ／kg体重をゾンデで強制的に投与した。対照
にはＡＣＥ阻害ペプチドを含まないものを用いた。
【００３２】以下、実験例１と同様に行った。その結果
を表２に示す。次に、製造例１のペプチド又はＲＪＰ8
を配合して、下記配合例１〜７に示す経口摂食組成物を
作製した。 〔配合例１〕脱脂粉乳 8.0重量％、植物油脂 11.0 重量
％、砂糖 14.0 重量％、安定剤 0.3重量％、乳化剤 0.3
重量％、香料 0.1重量％、製造例１のペプチド 1.0重量
％、卵黄 7.0重量％、水 55.0 重量％を混合、攪拌して
アイスクリームを得た。 〔配合例２〕精製ハチミツ 12000mg、ビタミンＣ 1000m
g、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム 10mg 、ニコチン酸ア
ミド 10mg 、製造例１のペプチド 5mg、香料 適量、こ
れらに水を加えて全量を５０mlとし、これを混合、攪拌
してドリンク剤を得た。 〔配合例３〕食塩に製造例１のペプチドを５重量％混合
して食卓塩を得た。 〔配合例４〕通常の製造方法で造られた味噌に、製造例
１のペプチドを 0.5重量％練り込むことにより味噌を作
製した。 〔配合例５〕通常の製造方法で造られた醤油 100mlあた
り、製造例１のペプチドを 0.5重量％混合することによ
り醤油を作製した。 〔配合例６〕通常の製造方法で造られたパン生地に製造
例１のペプチドを 0.1重量％添加することによりパンを
作製した。 〔配合例７〕通常の製造方法で造られた健康食品、例え
ばプロポリス食品 100g あたり、１重量％のＲＪＰ8 を
添加することにより健康食品を作製した。
を表２に示す。次に、製造例１のペプチド又はＲＪＰ8
を配合して、下記配合例１〜７に示す経口摂食組成物を
作製した。 〔配合例１〕脱脂粉乳 8.0重量％、植物油脂 11.0 重量
％、砂糖 14.0 重量％、安定剤 0.3重量％、乳化剤 0.3
重量％、香料 0.1重量％、製造例１のペプチド 1.0重量
％、卵黄 7.0重量％、水 55.0 重量％を混合、攪拌して
アイスクリームを得た。 〔配合例２〕精製ハチミツ 12000mg、ビタミンＣ 1000m
g、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム 10mg 、ニコチン酸ア
ミド 10mg 、製造例１のペプチド 5mg、香料 適量、こ
れらに水を加えて全量を５０mlとし、これを混合、攪拌
してドリンク剤を得た。 〔配合例３〕食塩に製造例１のペプチドを５重量％混合
して食卓塩を得た。 〔配合例４〕通常の製造方法で造られた味噌に、製造例
１のペプチドを 0.5重量％練り込むことにより味噌を作
製した。 〔配合例５〕通常の製造方法で造られた醤油 100mlあた
り、製造例１のペプチドを 0.5重量％混合することによ
り醤油を作製した。 〔配合例６〕通常の製造方法で造られたパン生地に製造
例１のペプチドを 0.1重量％添加することによりパンを
作製した。 〔配合例７〕通常の製造方法で造られた健康食品、例え
ばプロポリス食品 100g あたり、１重量％のＲＪＰ8 を
添加することにより健康食品を作製した。
【００３３】
【表２】
【００３４】表２において、血圧降下の値は、投与前血
圧値−投与後血圧値の値を示す。なお、各例における投
与前の血圧値は１５０〜１６０mmＨｇである。 （注１）特開昭６２−２７０５３３号公報の試験例１に
基づく。この場合の血圧の初期値は１７４mmＨｇであ
る。 （注２）投与５時間後の値である。
圧値−投与後血圧値の値を示す。なお、各例における投
与前の血圧値は１５０〜１６０mmＨｇである。 （注１）特開昭６２−２７０５３３号公報の試験例１に
基づく。この場合の血圧の初期値は１７４mmＨｇであ
る。 （注２）投与５時間後の値である。
【００３５】上記のように、ローヤルゼリーを蛋白質分
解酵素で分解して得たペプチドを含む組成物を経口投与
することにより、有効な血圧降下物質が得られたことは
ローヤルゼリーが古来から言われてきた生理作用を証明
するものである。図１は、製造例１で得られたペプチド
のフラクション数と波長280nm における吸光度との関係
及びＡＣＥ阻害活性を示すグラフである。図中、実線１
は製造例１で得られたペプチドＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及び
ＲＪＰ5 を含む粗組成物についてのフラクション数と吸
光度との関係を示す線である。また、破線２はこの粗組
成物についてのＡＣＥ阻害活性を示す線である。同図か
らわかるように、実線１の吸光度が高くなるほど、それ
に対応して破線２も高くなっており、相関関係が認めら
れる。そして、各ピークの位置にＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 又
はＲＪＰ5 が存在しており、これを単離することによっ
て、ＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 が得られる。
解酵素で分解して得たペプチドを含む組成物を経口投与
することにより、有効な血圧降下物質が得られたことは
ローヤルゼリーが古来から言われてきた生理作用を証明
するものである。図１は、製造例１で得られたペプチド
のフラクション数と波長280nm における吸光度との関係
及びＡＣＥ阻害活性を示すグラフである。図中、実線１
は製造例１で得られたペプチドＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及び
ＲＪＰ5 を含む粗組成物についてのフラクション数と吸
光度との関係を示す線である。また、破線２はこの粗組
成物についてのＡＣＥ阻害活性を示す線である。同図か
らわかるように、実線１の吸光度が高くなるほど、それ
に対応して破線２も高くなっており、相関関係が認めら
れる。そして、各ピークの位置にＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 又
はＲＪＰ5 が存在しており、これを単離することによっ
て、ＲＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 が得られる。
【００３６】
【発明の効果】第１〜３の発明でいうペプチドであるＲ
ＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 は、いずれも新規なペプ
チドであり、安全性が高く、高血圧の予防、治療等に有
効性の高い医薬品または食品等の経口摂食組成物として
有用なものであるという優れた効果を奏する。
ＪＰ8 、ＲＪＰ9 及びＲＪＰ5 は、いずれも新規なペプ
チドであり、安全性が高く、高血圧の予防、治療等に有
効性の高い医薬品または食品等の経口摂食組成物として
有用なものであるという優れた効果を奏する。
【００３７】第４の発明では、ローヤルゼリーを蛋白質
分解酵素によって分解してなるペプチドは、特に高血圧
の予防、治療等に有効であるという効果を奏する。第５
の発明では、第１〜４の発明のペプチドが、経口摂食可
能なものであり、これを主成分とする組成物は、高血圧
の予防等のための健康食品として好適な経口摂食組成物
となるという効果を奏する。
分解酵素によって分解してなるペプチドは、特に高血圧
の予防、治療等に有効であるという効果を奏する。第５
の発明では、第１〜４の発明のペプチドが、経口摂食可
能なものであり、これを主成分とする組成物は、高血圧
の予防等のための健康食品として好適な経口摂食組成物
となるという効果を奏する。
【図１】本発明の実施例を表し、ペプチドのフラクショ
ン数と吸光度との関係及びアンジオテンシン変換酵素阻
害活性を示すグラフである。
ン数と吸光度との関係及びアンジオテンシン変換酵素阻
害活性を示すグラフである。
配列番号：１ 配列の長さ：８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ser Leu Pro Lys Leu His Glu Trp 1 5 配列番号：２ 配列の長さ：９ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ser Leu Pro Ile Leu His Glu Trp Lys 1 5 配列番号：３ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Tyr Asn Glu Val Pro 1 5
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ // Ｃ１２Ｐ 21/06 Ａ６１Ｋ 37/64 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07K 7/06 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ) ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)
Claims (5)
- 【請求項１】 Ser-Leu-Pro-Lys-Leu-His-Glu-Trp な
る構造からなるペプチド。 - 【請求項２】 Ser-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys
なる構造からなるペプチド。 - 【請求項３】 Tyr-Asn-Glu-Val-Pro なる構造からなる
ペプチド。 - 【請求項４】 ローヤルゼリーを蛋白質分解酵素により
分解してなり、Ser-Leu-Pro-Lys-Leu-His-Glu-Trp、Ser
-Leu-Pro-Ile-Leu-His-Glu-Trp-Lys又はTyr-Asn-Glu-Va
l-Proなる構造からなるアンジオテンシン変換酵素阻害
ペプチド。 - 【請求項５】 経口摂食可能な請求項１〜４のペプチド
を含有する高血圧の予防又は治療のための経口摂食組成
物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3042022A JP3068656B2 (ja) | 1991-03-07 | 1991-03-07 | 新規なペプチド及びアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド並びにそれらを含有する経口摂食組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3042022A JP3068656B2 (ja) | 1991-03-07 | 1991-03-07 | 新規なペプチド及びアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド並びにそれらを含有する経口摂食組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04279597A JPH04279597A (ja) | 1992-10-05 |
| JP3068656B2 true JP3068656B2 (ja) | 2000-07-24 |
Family
ID=12624544
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3042022A Expired - Lifetime JP3068656B2 (ja) | 1991-03-07 | 1991-03-07 | 新規なペプチド及びアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド並びにそれらを含有する経口摂食組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3068656B2 (ja) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5902790A (en) * | 1995-10-03 | 1999-05-11 | Cytran, Inc. | Pharmaceutical angiostatic dipeptide compositions and method of use thereof |
| JPH07236447A (ja) * | 1994-03-03 | 1995-09-12 | Mokuzai Hozon Center:Kk | 味噌、しょうゆ等調味料の製造方法 |
| NL9400418A (nl) * | 1994-03-16 | 1995-11-01 | Campina Melkunie Bv | Werkwijzen voor de bereiding van glutaminerijke peptiden en voedingspreparaten daarmee gemaakt. |
| TWI225070B (en) * | 1999-12-01 | 2004-12-11 | Food Industry Res & Dev Inst | Novel peptides used as angiotensin converting enzyme inhibitor and preparation process thereof |
| JP3748360B2 (ja) * | 2000-05-26 | 2006-02-22 | 新潟県 | マイタケを用いた高機能食品の製造方法 |
| JP2005179235A (ja) * | 2003-12-18 | 2005-07-07 | Yamada Bee Farm | ローヤルゼリー又はその処理物の水溶性画分から得られる特定の分子量画分を有効成分とする気分の障害の予防、治療又は改善用組成物 |
| CN1680429A (zh) * | 2004-02-16 | 2005-10-12 | 株式会社山田养蜂场 | 源自蜂王浆的抗氧化肽 |
| JP4707401B2 (ja) * | 2004-02-16 | 2011-06-22 | 株式会社山田養蜂場本社 | ローヤルゼリー由来の抗酸化性ペプチド |
| JP2005281145A (ja) * | 2004-03-26 | 2005-10-13 | Yamada Bee Farm | ローヤルゼリー由来の新規アンジオテンシンｉ変換酵素阻害ペプチド |
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-
1991
- 1991-03-07 JP JP3042022A patent/JP3068656B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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