JP2596321B2 - 糖化ヘモグロビンの測定方法 - Google Patents
糖化ヘモグロビンの測定方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、糖化ヘモグロビンの測
定方法に関する。
定方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】糖化ヘモグロビン、特にＡ 1C は、糖尿病
患者においてその血中濃度が増加することが知られてお
り、糖化ヘモグロビンの測定は、血糖値の測定と併用し
て糖尿病の診断及び進行度の測定に利用されている。
患者においてその血中濃度が増加することが知られてお
り、糖化ヘモグロビンの測定は、血糖値の測定と併用し
て糖尿病の診断及び進行度の測定に利用されている。
【０００３】従来、糖化ヘモグロビンの測定は、検体
（赤血球抽出液）中の糖化ヘモグロビンを固相に直接結
合させ、洗浄し、標識抗糖化ヘモグロビン抗体を反応さ
せ、洗浄し、前記標識を測定することにより行なわれて
いる。しかしながら、この方法では、それぞれの検体中
の糖化ヘモグロビンを固相に直接結合させるいう前処理
（例えば、４℃で一夜インキュベート）が必要であり、
これは時間がかかり、大量の検体を迅速に測定すること
は不可能である。
（赤血球抽出液）中の糖化ヘモグロビンを固相に直接結
合させ、洗浄し、標識抗糖化ヘモグロビン抗体を反応さ
せ、洗浄し、前記標識を測定することにより行なわれて
いる。しかしながら、この方法では、それぞれの検体中
の糖化ヘモグロビンを固相に直接結合させるいう前処理
（例えば、４℃で一夜インキュベート）が必要であり、
これは時間がかかり、大量の検体を迅速に測定すること
は不可能である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、簡便、迅速に糖化ヘモグロビンの測定を行なうこと
ができる糖化ヘモグロビンの測定方法を提供することで
ある。
は、簡便、迅速に糖化ヘモグロビンの測定を行なうこと
ができる糖化ヘモグロビンの測定方法を提供することで
ある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本願発明者らは、鋭意研
究の結果、糖化ヘモグロビンを含むかもしれない検体と
未感作のラテックスを混合し、続いてあるいは同時に抗
糖化ヘモグロビン抗体を反応させることにより、これま
でのような時間がかかる工程を排除することができ、そ
のため糖化ヘモグロビンの測定が迅速に行なえることを
見出し本発明を完成した。
究の結果、糖化ヘモグロビンを含むかもしれない検体と
未感作のラテックスを混合し、続いてあるいは同時に抗
糖化ヘモグロビン抗体を反応させることにより、これま
でのような時間がかかる工程を排除することができ、そ
のため糖化ヘモグロビンの測定が迅速に行なえることを
見出し本発明を完成した。
【０００６】すなわち、本発明は、糖化ヘモグロビンを
含むかもしれない検体と未感作のラテックスを混合し、
続いてあるいは同時に抗糖化ヘモグロビン抗体を反応さ
せ、前記糖化ヘモグロビンが吸着したラテックスを前記
抗糖化ヘモグロビン抗体を介して凝集させることを測定
することから成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供す
る（以下、この方法を第１の発明ということがある）。
含むかもしれない検体と未感作のラテックスを混合し、
続いてあるいは同時に抗糖化ヘモグロビン抗体を反応さ
せ、前記糖化ヘモグロビンが吸着したラテックスを前記
抗糖化ヘモグロビン抗体を介して凝集させることを測定
することから成る糖化ヘモグロビンの測定方法を提供す
る（以下、この方法を第１の発明ということがある）。
【０００７】本発明の方法では、検体の糖化ヘモグロビ
ンが未感作のラテックスに容易に結合するため、抗糖化
ヘモグロビン抗体を混ぜるだけで凝集が起きる。このた
め、個々の測定においては、検体と抗糖化ヘモグロビン
抗体及び未感作のラテックスを混合するだけで検体中の
糖化ヘモグロビンがラテックスに吸着し、かつ抗糖化ヘ
モグロビン抗体により抗原抗体反応を生じ、凝集を起こ
させることができる。この方法は従来の糖化ヘモグロビ
ンを直接固相に結合させる工程に比べれば１／１０〜１
／１００の時間で行なえるので、従来方法に比べて大幅
な時間短縮が達成される。
ンが未感作のラテックスに容易に結合するため、抗糖化
ヘモグロビン抗体を混ぜるだけで凝集が起きる。このた
め、個々の測定においては、検体と抗糖化ヘモグロビン
抗体及び未感作のラテックスを混合するだけで検体中の
糖化ヘモグロビンがラテックスに吸着し、かつ抗糖化ヘ
モグロビン抗体により抗原抗体反応を生じ、凝集を起こ
させることができる。この方法は従来の糖化ヘモグロビ
ンを直接固相に結合させる工程に比べれば１／１０〜１
／１００の時間で行なえるので、従来方法に比べて大幅
な時間短縮が達成される。
【０００８】さらにまた、本発明者らは、検体と未感作
ラテックスを混合し、これに抗糖化ヘモグロビン抗体を
結合させた粒子を反応させ、生成する凝集により糖化ヘ
モグロビンを測定できることを見いだした。
ラテックスを混合し、これに抗糖化ヘモグロビン抗体を
結合させた粒子を反応させ、生成する凝集により糖化ヘ
モグロビンを測定できることを見いだした。
【０００９】すなわち、本発明は、粒子に結合された抗
糖化ヘモグロビン抗体と、糖化ヘモグロビンを含むかも
しれない検体と未感作ラテックスとを反応させ、免疫凝
集反応を生起させた後、得られた凝集より前記糖化ヘモ
グロビンを測定することから成る糖化ヘモグロビンの測
定方法を提供する（以下、この方法を第２の発明という
ことがある）。
糖化ヘモグロビン抗体と、糖化ヘモグロビンを含むかも
しれない検体と未感作ラテックスとを反応させ、免疫凝
集反応を生起させた後、得られた凝集より前記糖化ヘモ
グロビンを測定することから成る糖化ヘモグロビンの測
定方法を提供する（以下、この方法を第２の発明という
ことがある）。
【００１０】この第２の発明の方法によっても、従来の
方法に比べてはるかに短時間で糖化ヘモグロビンを測定
することができる。
方法に比べてはるかに短時間で糖化ヘモグロビンを測定
することができる。
【００１１】以下、本発明をより詳細に説明する。
【００１２】抗糖化ヘモグロビン抗体はポリクローナル
抗体でもモノクローナル抗体でもよいが、測定の精度を
高めるためにモノクローナル抗体であることが好まし
い。本発明者らは、下記実施例に詳述する方法により、
糖化ヘモグロビンに対して特異的に反応し、正常なヘモ
グロビンとは実質的に反応しないモノクローナル抗体を
作製することに成功した（モノクローナル抗体３Ｆ１
０、ＦＥＲＭ ＢＰ−４３１１）。本発明の方法（第１
及び第２の発明の方法、以下、単に「本発明」と言う場
合は第１及び第２の発明を意味する）では、このモノク
ローナル抗体を好ましく用いることができる。
抗体でもモノクローナル抗体でもよいが、測定の精度を
高めるためにモノクローナル抗体であることが好まし
い。本発明者らは、下記実施例に詳述する方法により、
糖化ヘモグロビンに対して特異的に反応し、正常なヘモ
グロビンとは実質的に反応しないモノクローナル抗体を
作製することに成功した（モノクローナル抗体３Ｆ１
０、ＦＥＲＭ ＢＰ−４３１１）。本発明の方法（第１
及び第２の発明の方法、以下、単に「本発明」と言う場
合は第１及び第２の発明を意味する）では、このモノク
ローナル抗体を好ましく用いることができる。
【００１３】未感作ラテックスの使用については、通常
市販されているラテックスをそのまま使用するか、トリ
ス−コハク酸緩衝液、リン酸緩衝液又は酢酸緩衝液で数
回洗浄したものを好ましく使用することができる。ま
た、第２の発明の方法における粒子への抗糖化ヘモグロ
ビン抗体の結合は、一般的には物理吸着法により行う。
すなわち、１〜５０μｇ／ｍｌに希釈した抗体に粒子濃
度が0.1 〜１０％（ｗ／ｖ）程度になるように混合し、
４℃〜室温で攪拌する。これを十分遠心洗浄し、最後に
ＢＳＡ１％溶液に保存して使用することができる。
市販されているラテックスをそのまま使用するか、トリ
ス−コハク酸緩衝液、リン酸緩衝液又は酢酸緩衝液で数
回洗浄したものを好ましく使用することができる。ま
た、第２の発明の方法における粒子への抗糖化ヘモグロ
ビン抗体の結合は、一般的には物理吸着法により行う。
すなわち、１〜５０μｇ／ｍｌに希釈した抗体に粒子濃
度が0.1 〜１０％（ｗ／ｖ）程度になるように混合し、
４℃〜室温で攪拌する。これを十分遠心洗浄し、最後に
ＢＳＡ１％溶液に保存して使用することができる。
【００１４】本発明の方法において用いられる粒子とし
ては、直径0.05〜５μｍ、好ましくは０．１〜２μｍの
ラテックスで未使用のもので通常の緩衝液に分散させて
使用する。ラテックスとしては、例えばスチレン重合
体、スチレン−ブタジエン共重合体、スチレン−アクリ
ル酸エステル共重合体、スチレン−ジビニルベンゼン共
重合体等を挙げることができる。
ては、直径0.05〜５μｍ、好ましくは０．１〜２μｍの
ラテックスで未使用のもので通常の緩衝液に分散させて
使用する。ラテックスとしては、例えばスチレン重合
体、スチレン−ブタジエン共重合体、スチレン−アクリ
ル酸エステル共重合体、スチレン−ジビニルベンゼン共
重合体等を挙げることができる。
【００１５】このラテックスと検体及び抗糖化ヘモグロ
ビン抗体の混和は４℃〜４０℃の間で行われ、その凝集
は分光学的には混和後直ちに認められる。
ビン抗体の混和は４℃〜４０℃の間で行われ、その凝集
は分光学的には混和後直ちに認められる。
【００１６】０．０５〜５μｍの粒子を用いることによ
り、検体と抗ヒト糖化ヘモグロビン抗体と粒子とを例え
ば黒色のスライドグラス上で混合し、凝集して沈殿する
粒子の有無を観察することにより検体中の糖化ヘモグロ
ビンを検出することができる。また、吸光度測定により
糖化ヘモグロビンを定量することも可能である。この場
合、粒径は小さいものが好ましいが、ブランクを除去で
きるなら１μｍ程度の粒径でも吸光度変化を測定でき
る。また、未感作ラテックスと抗ヒト糖化ヘモグロビン
抗体を結合させたラテックスを用いることにより、より
高感度かつ迅速に検体中の糖化ヘモグロビンを検出する
ことができる。
り、検体と抗ヒト糖化ヘモグロビン抗体と粒子とを例え
ば黒色のスライドグラス上で混合し、凝集して沈殿する
粒子の有無を観察することにより検体中の糖化ヘモグロ
ビンを検出することができる。また、吸光度測定により
糖化ヘモグロビンを定量することも可能である。この場
合、粒径は小さいものが好ましいが、ブランクを除去で
きるなら１μｍ程度の粒径でも吸光度変化を測定でき
る。また、未感作ラテックスと抗ヒト糖化ヘモグロビン
抗体を結合させたラテックスを用いることにより、より
高感度かつ迅速に検体中の糖化ヘモグロビンを検出する
ことができる。
【００１７】ラテックスの凝集は、目視によりその凝集
を確認することができるほか、0.05〜1.0 μｍのラテッ
クス粒子を用いる場合は、分光測定によりその散乱光を
測定し凝集を確認することができる。測定波長は４００
ｎｍ〜８００ｎｍあるいは赤外光を使用することが好ま
しい。これにより検体中の糖化ヘモグロビンを検出する
ことができる。この場合においても、糖化ヘモグロビン
に特異的なモノクローナル抗体としては、下記実施例で
詳述する、ヒト糖化ヘモグロビンＡ 1C に特異的なモノク
ローナル抗体３Ｆ１０を用いることが好ましい。
を確認することができるほか、0.05〜1.0 μｍのラテッ
クス粒子を用いる場合は、分光測定によりその散乱光を
測定し凝集を確認することができる。測定波長は４００
ｎｍ〜８００ｎｍあるいは赤外光を使用することが好ま
しい。これにより検体中の糖化ヘモグロビンを検出する
ことができる。この場合においても、糖化ヘモグロビン
に特異的なモノクローナル抗体としては、下記実施例で
詳述する、ヒト糖化ヘモグロビンＡ 1C に特異的なモノク
ローナル抗体３Ｆ１０を用いることが好ましい。
【００１８】
【実施例】実施例１ (1) ヒト糖化ヘモグロビンＡ 1C に対するモノクローナル
抗体の作製ヒト 糖化ヘモグロビンＡ 1C をフロイントコンプリートア
ジュバントに十分に分散させこの１００μｌでＢａｌｂ
／ｃマウスに２週間おきに４回免疫した。この免疫マウ
スを屠殺後脾臓を摘出し、これより脾細胞を１０6 個得
た。それをマウスミエローマ細胞とＰＥＧの存在下で融
合させ培養した。増殖した細胞の上清を採取しＥＬＩＳ
Ａ法により抗ヒト糖化ヘモグロビン抗体の有無を調べ
た。該抗体が陽性の細胞を限界希釈法により試験し、抗
ヒト糖化ヘモグロビン抗体を産生している細胞を確認し
た。
抗体の作製ヒト 糖化ヘモグロビンＡ 1C をフロイントコンプリートア
ジュバントに十分に分散させこの１００μｌでＢａｌｂ
／ｃマウスに２週間おきに４回免疫した。この免疫マウ
スを屠殺後脾臓を摘出し、これより脾細胞を１０6 個得
た。それをマウスミエローマ細胞とＰＥＧの存在下で融
合させ培養した。増殖した細胞の上清を採取しＥＬＩＳ
Ａ法により抗ヒト糖化ヘモグロビン抗体の有無を調べ
た。該抗体が陽性の細胞を限界希釈法により試験し、抗
ヒト糖化ヘモグロビン抗体を産生している細胞を確認し
た。
【００１９】これにより得られた細胞を抗ヒト糖化ヘモ
グロビンマウスモノクローナル抗体産生細胞（ハイブリ
ドーマ細胞）として大量に培養し、マウス腹腔中に注射
した。２週間後より３日おきに腹水を採取し、目的の抗
ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を得た。この
抗ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を３Ｆ１０
と命名し、３Ｆ１０を産生するハイブリドーマを平成４
年６月１０日に微工研に寄託した。この寄託は平成５年
５月２５日に国際寄託に切り替えられ、その受託番号は
ＦＥＲＭ ＢＰ−４３１１である。なお、３Ｆ１０はＩ
ｇＧであることを確認した。
グロビンマウスモノクローナル抗体産生細胞（ハイブリ
ドーマ細胞）として大量に培養し、マウス腹腔中に注射
した。２週間後より３日おきに腹水を採取し、目的の抗
ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を得た。この
抗ヒト糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体を３Ｆ１０
と命名し、３Ｆ１０を産生するハイブリドーマを平成４
年６月１０日に微工研に寄託した。この寄託は平成５年
５月２５日に国際寄託に切り替えられ、その受託番号は
ＦＥＲＭ ＢＰ−４３１１である。なお、３Ｆ１０はＩ
ｇＧであることを確認した。
【００２０】（２）未感作ラテックスを用いた凝集法に
よるヒト糖化ヘモグロビンの測定 直径０．２５４μｍの未感作ポリスチレンラテックス
（日本合成ゴム社製、０．０２５重量％）２ｍｌにそれ
ぞれ別々に５種類の溶血検体５μｌを加え、混和した。
５分後に３Ｆ１０抗糖化ヘモグロビンＡ１Ｃマウスｌｇ
Ｇ５０μｇを加え、直ちに日立２２０分光光度計で３７
℃攪拌下波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定した。結果
を下記表１に示す。
よるヒト糖化ヘモグロビンの測定 直径０．２５４μｍの未感作ポリスチレンラテックス
（日本合成ゴム社製、０．０２５重量％）２ｍｌにそれ
ぞれ別々に５種類の溶血検体５μｌを加え、混和した。
５分後に３Ｆ１０抗糖化ヘモグロビンＡ１Ｃマウスｌｇ
Ｇ５０μｇを加え、直ちに日立２２０分光光度計で３７
℃攪拌下波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定した。結果
を下記表１に示す。
【００２１】
【表１】
【００２２】実施例２ 抗ヒト糖化ヘモグロビンＡ 1C モノクローナル抗体３Ｆ１
０結合ラテックスの調製 ポリスチレンラテックス（１０％（ｗ／ｖ）、直径0.05
μｍ）１００μｌを、実施例１で作製した抗ヒト糖化ヘ
モグロビンモノクローナルＡ 1C 抗体３Ｆ１０を含む２０
ｍＭ酢酸緩衝液９００μｌ（３Ｆ１０濃度：４０μｇ／
ｍｌ、ｐＨ６．０）に混合し、エンドオーバーミキサー
で攪拌した。これを遠心分離（5000 g x15 分）し、生
理食塩水で４回洗浄し、１重量％ＢＳＡを含む２０ｍＭ
酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）に懸濁させ（0.5 wt%)、保存
した。
０結合ラテックスの調製 ポリスチレンラテックス（１０％（ｗ／ｖ）、直径0.05
μｍ）１００μｌを、実施例１で作製した抗ヒト糖化ヘ
モグロビンモノクローナルＡ 1C 抗体３Ｆ１０を含む２０
ｍＭ酢酸緩衝液９００μｌ（３Ｆ１０濃度：４０μｇ／
ｍｌ、ｐＨ６．０）に混合し、エンドオーバーミキサー
で攪拌した。これを遠心分離（5000 g x15 分）し、生
理食塩水で４回洗浄し、１重量％ＢＳＡを含む２０ｍＭ
酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）に懸濁させ（0.5 wt%)、保存
した。
【００２３】検体５μｌと未感作ラテックス１００μｌ
（0.05μｍ、0.25 wt%）を混合し、次に上記のように調
製した３Ｆ１０結合ラテックスを１ｍｌ混和し、直ちに
攪拌下、波長８００ｎｍの吸光度の増加を調べた。下記
表２に検体中の全ヘモグロビンに対する糖化ヘモグロビ
ンの割合（％）と１分間当たりの吸光度の変化を示す。
（0.05μｍ、0.25 wt%）を混合し、次に上記のように調
製した３Ｆ１０結合ラテックスを１ｍｌ混和し、直ちに
攪拌下、波長８００ｎｍの吸光度の増加を調べた。下記
表２に検体中の全ヘモグロビンに対する糖化ヘモグロビ
ンの割合（％）と１分間当たりの吸光度の変化を示す。
【００２４】
【表２】
【００２５】実施例３ ３Ｆ１０抗体のＡ 1C への特異性 直径０．２５４μｍの未感作ポリスチレンラテックス溶
液（トリス−コハク酸緩衝液（ｐＨ５．５、０．２％ト
ライトンＸ−１００（商品名）を含む。）テックス濃度
０．０２５％）２ｍｌを３７℃に調節したセルに入れ
た。これにイオン交換クロマトグラフィー精製により得
られたヒトＡ1C抗原（１ｍｇ／ｍｌ）又はヒトヘモグロ
ビン（Ａ0 抗原）（１ｍｇ／ｍｌ）を別々に加え、３７
℃で５分間攪拌しながら加温した。５分後、Ａ0 抗原を
感作したラテックス液には３Ｆ１０抗体（８ｍｇ／ｍ
ｌ）を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液には３−４抗
体（抗ヒトヘモグロビンモノクローナル抗体、８ｍｇ／
ｍｌ）を各２μｌずつ加え、直ちに日立２２０分光光度
計で波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定した。さらに１
４分後、Ａ0 抗原を感作したラテックス液に３−４抗体
を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液に３Ｆ１０抗体を
それぞれ終濃度が８μｇ／ｍｌになるように添加した。
結果を図１に示す。
液（トリス−コハク酸緩衝液（ｐＨ５．５、０．２％ト
ライトンＸ−１００（商品名）を含む。）テックス濃度
０．０２５％）２ｍｌを３７℃に調節したセルに入れ
た。これにイオン交換クロマトグラフィー精製により得
られたヒトＡ1C抗原（１ｍｇ／ｍｌ）又はヒトヘモグロ
ビン（Ａ0 抗原）（１ｍｇ／ｍｌ）を別々に加え、３７
℃で５分間攪拌しながら加温した。５分後、Ａ0 抗原を
感作したラテックス液には３Ｆ１０抗体（８ｍｇ／ｍ
ｌ）を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液には３−４抗
体（抗ヒトヘモグロビンモノクローナル抗体、８ｍｇ／
ｍｌ）を各２μｌずつ加え、直ちに日立２２０分光光度
計で波長７５０ｎｍの吸光度変化を測定した。さらに１
４分後、Ａ0 抗原を感作したラテックス液に３−４抗体
を、Ａ1C抗原を感作したラテックス液に３Ｆ１０抗体を
それぞれ終濃度が８μｇ／ｍｌになるように添加した。
結果を図１に示す。
【００２６】図１に示されるように、Ａ0 抗原で感作し
たラテックスに対して３Ｆ１０抗体はほとんど反応しな
かった。これに対して、３−４抗体を加えると凝集反応
が起こり吸光度の上昇を認めた。同様にして、Ａ1C 抗原
で感作したラテックスでは３Ｆ１０抗体あるいは３−４
抗体の添加で同等の反応性を示した。
たラテックスに対して３Ｆ１０抗体はほとんど反応しな
かった。これに対して、３−４抗体を加えると凝集反応
が起こり吸光度の上昇を認めた。同様にして、Ａ1C 抗原
で感作したラテックスでは３Ｆ１０抗体あるいは３−４
抗体の添加で同等の反応性を示した。
【００２７】
【発明の効果】本発明の方法により、簡便、迅速に糖化
ヘモグロビンの測定を行なうことができる糖化ヘモグロ
ビンの測定方法が提供された。
ヘモグロビンの測定を行なうことができる糖化ヘモグロ
ビンの測定方法が提供された。
【図１】ヒトヘモグロビン又はヒト糖化ヘモグロビンを
固定化したラテックス粒子液に３Ｆ１０抗体又は３−４
抗体をそれぞれ加え、次いで３−４抗体又は３Ｆ１０抗
体をそれぞれ加えた際の吸光度の経時的変化を示す図で
ある。
固定化したラテックス粒子液に３Ｆ１０抗体又は３−４
抗体をそれぞれ加え、次いで３−４抗体又は３Ｆ１０抗
体をそれぞれ加えた際の吸光度の経時的変化を示す図で
ある。
フロントページの続き (72)発明者 田中 愛子 東京都新宿区西新宿２丁目７番１号 富 士レビオ株式会社内 (72)発明者 谷本 徹二 東京都新宿区西新宿２丁目７番１号 富 士レビオ株式会社内 (56)参考文献 特開 平４−145367（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−280571（ＪＰ，Ａ)
Claims (8)
- 【請求項１】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビ
ンを含むかもしれない検体とを反応させ、抗糖化ヘモグ
ロビン抗体を反応させ、前記糖化ヘモグロビンが吸着し
たラテックスの抗糖化ヘモグロビン抗体を介した凝集を
測定することから成る糖化ヘモグロビンの測定方法。 - 【請求項２】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビ
ンを含むかもしれない検体とを反応させ、次いで抗糖化
ヘモグロビン抗体を反応させ、前記糖化ヘモグロビンが
吸着したラテックスの抗糖化ヘモグロビン抗体を介した
凝集を測定することから成る請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビ
ンを含むかもしれない検体と、抗糖化ヘモグロビン抗体
を同時に反応させ、前記糖化ヘモグロビンが吸着したラ
テックスの抗糖化ヘモグロビン抗体を介した凝集を測定
することから成る請求項１記載の方法。 - 【請求項４】 未感作のラテックスの粒径が0.05〜５μ
ｍである請求項１ないし３のいずれか１項記載の方法。 - 【請求項５】 未感作のラテックスと、糖化ヘモグロビ
ンを含むかもしれない検体と、粒子に結合された抗糖化
ヘモグロビン抗体とを反応させ、免疫凝集反応を生起さ
せた後、得られた凝集より前記糖化ヘモグロビンを測定
することから成る糖化ヘモグロビンの測定方法。 - 【請求項６】 未感作のラテックスの粒径が0.05〜５μ
ｍである請求項５記載の方法。 - 【請求項７】 粒子が直径0.05〜５μｍのラテックス、
直径0.5 〜１０μｍのゼラチン粒子及び動物赤血球から
成る群より選択される請求項５記載の方法。 - 【請求項８】 前記抗糖化ヘモグロビン抗体はモノクロ
ーナル抗体３Ｆ１０である請求項１ないし７のいずれか
１項に記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5165119A JP2596321B2 (ja) | 1992-06-16 | 1993-06-10 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4-181708 | 1992-06-16 | ||
| JP18170892 | 1992-06-16 | ||
| JP5165119A JP2596321B2 (ja) | 1992-06-16 | 1993-06-10 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0666795A JPH0666795A (ja) | 1994-03-11 |
| JP2596321B2 true JP2596321B2 (ja) | 1997-04-02 |
Family
ID=26489974
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5165119A Expired - Lifetime JP2596321B2 (ja) | 1992-06-16 | 1993-06-10 | 糖化ヘモグロビンの測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
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-
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