JP2024504825A - 抗原結合タンパク質およびその使用 - Google Patents
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Abstract
本出願は、同じまたは重複するＰＤ－１エピトープへの結合についてペムブロリズマブと競合する抗原結合タンパク質およびその使用に関するものである。上記の抗原結合タンパク質は、約２μｇ／ｍＬ以下のＥＣ５０で、ヒトＰＤ－Ｌ１のヒトＰＤ－１への結合を効果的に阻害することができる。
Description
本出願は、バイオ医薬品の分野に関し、具体的に、抗原結合タンパク質およびその使用に関するものである。
ヒトプログラム細胞死受容体－１（ＰＤ－１）は、活性化したＴリンパ球の表面に発現している主要な免疫チェックポイントの一つとして知られており、リガンドＰＤ－Ｌ１（プログラム細胞死受容体－リガンド１、ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ－Ｌｉｇａｎｄ １）およびＰＤ－Ｌ２（プログラム細胞死受容体－リガンド２、ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ－Ｌｉｇａｎｄ ２）に結合すると、生体内でＴリンパ球の活性および関連細胞免疫応答を阻害するすることができる。ＰＤ－Ｌ１は、Ｂ、Ｔリンパ球および微小血管上皮細胞などの末梢細胞、肺、肝臓、心臓などの組織細胞で広く発現している。ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用が、ＰＤ－Ｌ１発現陽性腫瘍細胞による免疫監視回避の主な原因であることが、多くの研究により明らかにされている。腫瘍細胞によるＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１シグナル伝達経路の負の制御を遮断し、免疫系を活性化することにより、Ｔ細胞関連の腫瘍特異的細胞性免疫応答を促進し、腫瘍を治療することができる。
現在、抗ＰＤ－１抗体は、選択性が低く、親和性が低いという欠点もある。そのため、ＰＤ－１に対して高い親和性や、大きな特異性を持つ新規な抗ＰＤ－１抗体を開発する必要がある。
現在、抗ＰＤ－１抗体は、選択性が低く、親和性が低いという欠点もある。そのため、ＰＤ－１に対して高い親和性や、大きな特異性を持つ新規な抗ＰＤ－１抗体を開発する必要がある。
本出願は、以下の特性の１つ以上：１）ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、約１１μｇ／ｍＬ以下のＥＣ５０でＰＤ－１に結合すること、２）競合ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、約２μｇ／ｍＬ以下のＥＣ５０でヒトＰＤ－Ｌ１のヒトＰＤ－１への結合を阻害すること、および３）霊長類（ヒトまたはサルなど）のＰＤ－１に結合することが可能であること、を有する単離された抗原結合タンパク質を提供した。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、参照抗体と同じまたは重複するＰＤ－１エピトープに結合する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、参照抗体と同じまたは重複するＰＤ－１エピトープに結合する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、ＰＤ－１への結合について上記の参照抗体と競合する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、ＰＤ－１に対する結合親和性が、上記の参照抗体のＰＤ－１に対する結合親和性と実質的に同じである。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、および配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体のＶＨは、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域ＶＬを含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体のＶＬは、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、ＰＤ－１に対する結合親和性が、上記の参照抗体のＰＤ－１に対する結合親和性と実質的に同じである。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、および配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体のＶＨは、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域ＶＬを含む。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体のＶＬは、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはその抗原結合断片を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ１、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ２および配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ１、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ２および配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ１、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ２、および配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ１、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ２および配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ１、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ２および配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ１、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ２、および配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する上記のＨＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３は、
１）ＨＣＤＲ１：配列番号１、ＨＣＤＲ２：配列番号２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２）ＨＣＤＲ１：配列番号１、ＨＣＤＲ２：配列番号４２、およびＨＣＤＲ３：配列番号５５；
３）ＨＣＤＲ１：配列番号４、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４）ＨＣＤＲ１：配列番号５、ＨＣＤＲ２：配列番号４４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
５）ＨＣＤＲ１：配列番号６、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
６）ＨＣＤＲ１：配列番号７、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
７）ＨＣＤＲ１：配列番号８、ＨＣＤＲ２：配列番号４７、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
８）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
９）ＨＣＤＲ１：配列番号１０、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１０）ＨＣＤＲ１：配列番号１１、ＨＣＤＲ２：配列番号４４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１１）ＨＣＤＲ１：配列番号１２、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１２）ＨＣＤＲ１：配列番号１３、ＨＣＤＲ２：配列番号４８、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１３）ＨＣＤＲ１：配列番号１４、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１４）ＨＣＤＲ１：配列番号１５、ＨＣＤＲ２：配列番号４７、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１５）ＨＣＤＲ１：配列番号１６、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１６）ＨＣＤＲ１：配列番号１７、ＨＣＤＲ２：配列番号４９、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１７）ＨＣＤＲ１：配列番号１８、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１８）ＨＣＤＲ１：配列番号１９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１９）ＨＣＤＲ１：配列番号２０、ＨＣＤＲ２：配列番号５０、およびＨＣＤＲ３：配列番号５６；
２０）ＨＣＤＲ１：配列番号２１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５７；
２１）ＨＣＤＲ１：配列番号２２、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２２）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５１、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２３）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５８；
２４）ＨＣＤＲ１：配列番号２３、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２５）ＨＣＤＲ１：配列番号２４、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５９；
２６）ＨＣＤＲ１：配列番号２５、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６０；
２７）ＨＣＤＲ１：配列番号２６、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６１；
２８）ＨＣＤＲ１：配列番号２７、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２９）ＨＣＤＲ１：配列番号２８、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３０）ＨＣＤＲ１：配列番号２９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３１）ＨＣＤＲ１：配列番号２５、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号６２；
３２）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５０、およびＨＣＤＲ３：配列番号６３；
３３）ＨＣＤＲ１：配列番号３０、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３４）ＨＣＤＲ１：配列番号３１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３５）ＨＣＤＲ１：配列番号３２、ＨＣＤＲ２：配列番号５３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３６）ＨＣＤＲ１：配列番号３３、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３７）ＨＣＤＲ１：配列番号３４、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６４；
３８）ＨＣＤＲ１：配列番号３５、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５７；
３９）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４０）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６５；
４１）ＨＣＤＲ１：配列番号３６、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４２）ＨＣＤＲ１：配列番号３７、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４３）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５９；
４４）ＨＣＤＲ１：配列番号３８、ＨＣＤＲ２：配列番号５４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４５）ＨＣＤＲ１：配列番号３９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４６）ＨＣＤＲ１：配列番号４０、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５５；
４７）ＨＣＤＲ１：配列番号４１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４８）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６６；
４９）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６７
から選択されるアミノ酸配列のいずれか１つの群を含む。
１）ＨＣＤＲ１：配列番号１、ＨＣＤＲ２：配列番号２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２）ＨＣＤＲ１：配列番号１、ＨＣＤＲ２：配列番号４２、およびＨＣＤＲ３：配列番号５５；
３）ＨＣＤＲ１：配列番号４、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４）ＨＣＤＲ１：配列番号５、ＨＣＤＲ２：配列番号４４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
５）ＨＣＤＲ１：配列番号６、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
６）ＨＣＤＲ１：配列番号７、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
７）ＨＣＤＲ１：配列番号８、ＨＣＤＲ２：配列番号４７、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
８）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
９）ＨＣＤＲ１：配列番号１０、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１０）ＨＣＤＲ１：配列番号１１、ＨＣＤＲ２：配列番号４４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１１）ＨＣＤＲ１：配列番号１２、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１２）ＨＣＤＲ１：配列番号１３、ＨＣＤＲ２：配列番号４８、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１３）ＨＣＤＲ１：配列番号１４、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１４）ＨＣＤＲ１：配列番号１５、ＨＣＤＲ２：配列番号４７、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１５）ＨＣＤＲ１：配列番号１６、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１６）ＨＣＤＲ１：配列番号１７、ＨＣＤＲ２：配列番号４９、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１７）ＨＣＤＲ１：配列番号１８、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１８）ＨＣＤＲ１：配列番号１９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１９）ＨＣＤＲ１：配列番号２０、ＨＣＤＲ２：配列番号５０、およびＨＣＤＲ３：配列番号５６；
２０）ＨＣＤＲ１：配列番号２１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５７；
２１）ＨＣＤＲ１：配列番号２２、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２２）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５１、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２３）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５８；
２４）ＨＣＤＲ１：配列番号２３、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２５）ＨＣＤＲ１：配列番号２４、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５９；
２６）ＨＣＤＲ１：配列番号２５、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６０；
２７）ＨＣＤＲ１：配列番号２６、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６１；
２８）ＨＣＤＲ１：配列番号２７、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２９）ＨＣＤＲ１：配列番号２８、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３０）ＨＣＤＲ１：配列番号２９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３１）ＨＣＤＲ１：配列番号２５、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号６２；
３２）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５０、およびＨＣＤＲ３：配列番号６３；
３３）ＨＣＤＲ１：配列番号３０、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３４）ＨＣＤＲ１：配列番号３１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３５）ＨＣＤＲ１：配列番号３２、ＨＣＤＲ２：配列番号５３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３６）ＨＣＤＲ１：配列番号３３、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３７）ＨＣＤＲ１：配列番号３４、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６４；
３８）ＨＣＤＲ１：配列番号３５、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５７；
３９）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４０）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６５；
４１）ＨＣＤＲ１：配列番号３６、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４２）ＨＣＤＲ１：配列番号３７、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４３）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５９；
４４）ＨＣＤＲ１：配列番号３８、ＨＣＤＲ２：配列番号５４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４５）ＨＣＤＲ１：配列番号３９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４６）ＨＣＤＲ１：配列番号４０、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５５；
４７）ＨＣＤＲ１：配列番号４１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４８）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６６；
４９）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６７
から選択されるアミノ酸配列のいずれか１つの群を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、Ｃ末端が上記のＨＣＤＲ１のＮ末端に直接的または間接的に連結されており、かつ配列番号６８、１４４－１４８、２３０および／または２３５で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ１を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、上記のＨＣＤＲ１と上記のＨＣＤＲ２との間に位置し、かつ配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、上記のＨＣＤＲ２と上記のＨＣＤＲ３との間に位置し、かつ配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、Ｎ末端が上記のＨＣＤＲ３のＣ末端に直接的または間接的に連結されており、かつ配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ４を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号６８、１４４－１４８、２３０および／または２３５で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ１、配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ２、配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ３、および配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ４を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３９および／または２３４で表されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４３および／または２３６で表されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質のＶＨは、配列番号７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、上記のＨＣＤＲ１と上記のＨＣＤＲ２との間に位置し、かつ配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ２を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、上記のＨＣＤＲ２と上記のＨＣＤＲ３との間に位置し、かつ配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ３を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、Ｎ末端が上記のＨＣＤＲ３のＣ末端に直接的または間接的に連結されており、かつ配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ４を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号６８、１４４－１４８、２３０および／または２３５で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ１、配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ２、配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ３、および配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ４を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１３９および／または２３４で表されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号１４３および／または２３６で表されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＶＨを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質のＶＨは、配列番号７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、抗体またはその抗原結合断片を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体またはその抗原結合断片を含む。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ断片、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ｄｉ－ｓｃＦｖ、ＶＨＨおよび／またはｄＡｂからなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、上記の抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体および／または完全ヒト抗体を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、免疫グロブリンＦｃ領域をさらに含む。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、上記のＦｃ領域に直接的または間接的に連結されている。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨのＣ末端は、上記のＦｃ領域のＮ末端に直接的または間接的に連結されている。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、上記のＦｃ領域とインフレームで融合している。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、リンカーを介して上記のＦｃ領域に連結されている。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体またはその抗原結合断片を含む。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ断片、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ｄｉ－ｓｃＦｖ、ＶＨＨおよび／またはｄＡｂからなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、上記の抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体および／または完全ヒト抗体を含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、配列番号７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、免疫グロブリンＦｃ領域をさらに含む。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、上記のＦｃ領域に直接的または間接的に連結されている。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨのＣ末端は、上記のＦｃ領域のＮ末端に直接的または間接的に連結されている。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、上記のＦｃ領域とインフレームで融合している。
いくつかの実施形態において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、リンカーを介して上記のＦｃ領域に連結されている。
いくつかの実施形態において、上記のリンカーは、ペプチドリンカーを含む。
いくつかの実施形態において、上記のリンカーは、柔軟なリンカーを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで順次、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨ、上記のリンカーおよび上記のＦｃ領域を含む。
いくつかの実施形態において、上記のリンカーは、柔軟なリンカーを含む。
いくつかの実施形態において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで順次、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨ、上記のリンカーおよび上記のＦｃ領域を含む。
いくつかの実施形態において、上記のＦｃ領域は、ＩｇＧ１由来のＦｃまたはＩｇＧ４由来のＦｃを含む。
いくつかの実施形態において、上記のＦｃ領域は、配列番号１２１－１２５のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態において、上記のＦｃ領域は、配列番号１２１－１２５のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質を含む１種類以上のポリペプチドを提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを含む１種類以上の免疫複合体を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質、または上記のポリペプチドをコードする１種類以上の単離された核酸分子を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された核酸分子を含む１種類以上のベクターを提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子および／または上記のベクターを含むおよび／または発現する１種類以上の細胞を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドを調製する方法であって、上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの発現を可能にする条件下で、上記の細胞を培養する方法を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞、および任意に薬学的に許容されるアジュバントおよび／または賦形剤を含む１種類以上の医薬組成物を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法であって、
上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを投与することを含む方法を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを含む１種類以上のキットを提供した。
いくつかの実施形態において、上記のキットは、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法を記載した説明書を含む。
一方、本出願は、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法において使用されるキットの調製における上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドの使用を提供した。
一方、本出願は、疾患または病気を予防および／または治療するための医薬品の調製における、１種類以上の上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
一方、本出願は、疾患または病気を予防、緩和および／または治療するための１種類以上の上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞および／または上記の医薬組成物を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを含む１種類以上の免疫複合体を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質、または上記のポリペプチドをコードする１種類以上の単離された核酸分子を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された核酸分子を含む１種類以上のベクターを提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子および／または上記のベクターを含むおよび／または発現する１種類以上の細胞を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドを調製する方法であって、上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの発現を可能にする条件下で、上記の細胞を培養する方法を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞、および任意に薬学的に許容されるアジュバントおよび／または賦形剤を含む１種類以上の医薬組成物を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法であって、
上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを投与することを含む方法を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを含む１種類以上のキットを提供した。
いくつかの実施形態において、上記のキットは、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法を記載した説明書を含む。
一方、本出願は、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法において使用されるキットの調製における上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドの使用を提供した。
一方、本出願は、疾患または病気を予防および／または治療するための医薬品の調製における、１種類以上の上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
一方、本出願は、疾患または病気を予防、緩和および／または治療するための１種類以上の上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞および／または上記の医薬組成物を提供した。
いくつかの実施形態において、上記の疾患または病気は、腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択される。
一方、本出願は、疾患または病気を予防および／または治療するための方法であって、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、および／または上記の細胞の有効量を必要とする被験者に投与することを含む方法を提供した。
いくつかの実施形態において、上記の疾患または病気は、腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、上記の疾患または病気は、腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含む。
いくつかの実施形態において、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択される。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害する方法であって、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、および／または上記の細胞の有効量を必要とする被験者に投与することを含む方法を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞および／または上記の医薬組成物を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための医薬品の調製における、上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
当該技術分野における当業者は、以下の詳細な説明から、本願の他の態様および利点を容易に理解することができる。以下の詳細な説明では、本出願の例示的な実施形態のみが示され、説明される。当該技術分野における当業者が認識するように、本出願の内容は、当業者が本出願に関わる発明の精神および範囲から逸脱することなく、開示された特定の実施形態に変更を加えることを可能にする。これに対応して、本出願の明細書における図面および説明は、限定的なものではなく、単に例示的なものである。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞および／または上記の医薬組成物を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための医薬品の調製における、上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
当該技術分野における当業者は、以下の詳細な説明から、本願の他の態様および利点を容易に理解することができる。以下の詳細な説明では、本出願の例示的な実施形態のみが示され、説明される。当該技術分野における当業者が認識するように、本出願の内容は、当業者が本出願に関わる発明の精神および範囲から逸脱することなく、開示された特定の実施形態に変更を加えることを可能にする。これに対応して、本出願の明細書における図面および説明は、限定的なものではなく、単に例示的なものである。
本出願に係る発明の具体的な特徴は、添付の特許請求の範囲に示されている。本出願に係る発明の特徴および利点は、以下に詳細に説明する例示的な実施形態および添付の図面を参照することによって、よりよく理解することができる。添付図面の簡単な説明は、次のとおりである。
図１は、本出願の上記の抗原結合タンパク質のＳＤＳ－ＰＡＧＥタンパク質発現結果を示す。
図２は、本出願は、上記の抗原結合タンパク質の組換えヒトＰＤ－１、組換えサルＰＤ－１および組換えマウスＰＤ－１に対する結合活性を示す。
図３Ａ～３Ｂは、本出願の上記のＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃとペムブロリズマブ（Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）の抗原タンパク質に対する親和性キネティックスの検出結果を示す。
以下、本願発明の実施形態は、具体的な実施例により説明されるが、本願発明の他の利点や効果は、当該技術分野における当業者であれば、本明細書の開示内容から、容易に理解することができるであろう。
用語の定義
本出願において、「単離された」という用語は通常、天然の状態から人工的な手段で得られることを指す。ある「単離された」物質または成分は、天然界に存在する場合に、存在する天然環境が変化し、または天然環境から単離され、またはその両方である可能性がある。例えば、ある単離されていないポリヌクレオチドまたはポリペプチドがある生体動物に天然に存在し、この天然状態で単離された高純度の同一のポリヌクレオチドまたはポリペプチドを単離されたものと言う。「単離された」という用語は、人工的または合成的な物質の混入や、物質の活性に影響を与えない他の不純物の存在を排除するものではない。
本出願において、「単離された」という用語は通常、天然の状態から人工的な手段で得られることを指す。ある「単離された」物質または成分は、天然界に存在する場合に、存在する天然環境が変化し、または天然環境から単離され、またはその両方である可能性がある。例えば、ある単離されていないポリヌクレオチドまたはポリペプチドがある生体動物に天然に存在し、この天然状態で単離された高純度の同一のポリヌクレオチドまたはポリペプチドを単離されたものと言う。「単離された」という用語は、人工的または合成的な物質の混入や、物質の活性に影響を与えない他の不純物の存在を排除するものではない。
本出願において、「抗原結合タンパク質」という用語は通常、特定の抗原を特異的に認識および／または中和することができるポリペプチド分子を意味する。本出願において、「抗原結合タンパク質」という用語は、「抗体」または「抗原結合断片」を含み得る。例えば、上記の抗体は、ジスルフィド結合によって相互に連結された少なくとも２本の重（Ｈ）鎖と２本の軽（Ｌ）鎖からなる免疫グロブリンを含み、その抗原結合部分を含む任意の分子を含むことができる。「抗体」という用語は、モノクローナル抗体、抗体断片または抗体誘導体が含まれ、また、ラクダ抗体、完全ヒト抗体、キメラ抗体、単鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、および抗原に結合した抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’および（Ｆａｂ）２ 断片）が含まれるが、これらに限定されるものではない。「抗体」という用語は、原核細胞で発現する抗体、非グリコシル化抗体および本明細書に記載の任意の抗原結合抗体断片およびその誘導体などの、抗体の全ての組換え形態を含むことがある。本出願において、上記の「抗体」は、単一ドメイン抗体も含まれ得る。
本出願において、「単一ドメイン抗体」という用語は通常、抗体の軽鎖を欠失し、重鎖可変領域のみで構成されている抗体のクラスを意味する。研究によると、フタコブラクダ、ヒトコブラクダ、アルパカ、ラマには、重鎖のみで構成されながら完全な機能を持ち、可変領域（ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｃＡｂ、ＶＨＨと単に呼ぶ）の分子量が従来の抗体の１／１０しかなく、現在入手可能な抗体の完全な機能を持つ最も小さい分子断片であって、単一ドメイン抗体（ｓｉｎｇｌｅ ｄｏｍａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ， ｓｄＡｂ）と呼ばれている重鎖抗体（ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ｈｃＡｂ）が存在することが判明している。単一ドメイン抗体は、他の抗体と比較して、免疫原性が低く、分子が小さく、透過性が強いという利点があるため、基礎研究、医薬品開発、疾患治療など幅広い応用が期待されている。例えば、単一ドメイン抗体は、アルパカ由来であってもよい。単一ドメイン抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）で構成されている場合がある。「重鎖可変領域」という用語は通常、抗原結合断片の重鎖のアミノ末端ドメインを意味する。重鎖可変領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存的領域に点在する相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域にさらに区別されることができる。各重鎖可変領域は、Ｈ－ＦＲ１、ＨＣＤＲ１、Ｈ－ＦＲ２、ＨＣＤＲ２、Ｈ－ＦＲ３、ＨＣＤＲ３、Ｈ－ＦＲ４がこの順でアミノ末端からカルボキシル末端に向かって配列されてよい３つのＣＤＲと４つのＦＲ領域から構成される。重鎖可変領域には、抗原（例えば、ＰＤ－１）と相互作用する結合ドメインが含まれる。上記のＣＤＲｓの正確な境界の定義は、システムによって異なる。Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９８７）および（１９９１））が記載したシステムは、抗原結合タンパク質の任意の可変領域に適用できる明確な残基番号付けシステムを提供し、ＣＤＲｓ定義するための正確な残基境界も提供している。これらのＣＤＲｓは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと呼ばれる場合がある。Ｃｈｏｔｈｉａら（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６： ９０１－９１７ （１９８７） ａｎｄ Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３４２： ８７７－８８３ （１９８９））は、アミノ酸配列レベルではかなりの多様性があるが、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓ内のあるサブポーションがほぼ同一のペプチド骨格の立体配座をとることを発見した。これらのサブポーションは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＨ１、Ｈ２、Ｈ３と名付けられ、ここで「Ｌ」は軽鎖領域を、「Ｈ」は重鎖領域をそれぞれ示す。これらの領域は、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲｓと呼ばれる場合があり、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと重複する境界を有している。Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと重複するＣＤＲｓを定義するための他の境界は、Ｐａｄｌａｎ（ＦＡＳＥＢ Ｊ．９：１３３－１３９（１９９５））およびＭａｃＣａｌｌｕｍ（Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２６２（５）：７３２－４５（１９９６））によって記載されている。なお、ＣＤＲ境界の他の定義は、上記のシステムのいずれかに厳密に従わないかもしれないが、特定の残基や残基群、あるいはＣＤＲｓ全体が抗原結合に大きな影響を与えないという予測や実験的発見に従って短縮または延長されることは可能であるが、依然としてＫａｂａｔ ＣＤＲｓと重複することになる。本出願において、ＣＤＲｓはＩＭＧＴ番号付けシステムによって定義することができる。本出願において、「単一ドメイン抗体」という用語は、「ナノボディ」および「ＶＨＨ」と互換可能に使用される。本願の特許請求の範囲は、ＩＭＧＴ番号付けシステムの定義に示される配列に基づいているが、他のＣＤＲ定義規則に対応するアミノ酸配列も本願の保護範囲に含まれる。例示的な定義規則を下表に示す。
本出願において、「単一ドメイン抗体」という用語は通常、抗体の軽鎖を欠失し、重鎖可変領域のみで構成されている抗体のクラスを意味する。研究によると、フタコブラクダ、ヒトコブラクダ、アルパカ、ラマには、重鎖のみで構成されながら完全な機能を持ち、可変領域（ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｃＡｂ、ＶＨＨと単に呼ぶ）の分子量が従来の抗体の１／１０しかなく、現在入手可能な抗体の完全な機能を持つ最も小さい分子断片であって、単一ドメイン抗体（ｓｉｎｇｌｅ ｄｏｍａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ， ｓｄＡｂ）と呼ばれている重鎖抗体（ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ｈｃＡｂ）が存在することが判明している。単一ドメイン抗体は、他の抗体と比較して、免疫原性が低く、分子が小さく、透過性が強いという利点があるため、基礎研究、医薬品開発、疾患治療など幅広い応用が期待されている。例えば、単一ドメイン抗体は、アルパカ由来であってもよい。単一ドメイン抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）で構成されている場合がある。「重鎖可変領域」という用語は通常、抗原結合断片の重鎖のアミノ末端ドメインを意味する。重鎖可変領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存的領域に点在する相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域にさらに区別されることができる。各重鎖可変領域は、Ｈ－ＦＲ１、ＨＣＤＲ１、Ｈ－ＦＲ２、ＨＣＤＲ２、Ｈ－ＦＲ３、ＨＣＤＲ３、Ｈ－ＦＲ４がこの順でアミノ末端からカルボキシル末端に向かって配列されてよい３つのＣＤＲと４つのＦＲ領域から構成される。重鎖可変領域には、抗原（例えば、ＰＤ－１）と相互作用する結合ドメインが含まれる。上記のＣＤＲｓの正確な境界の定義は、システムによって異なる。Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９８７）および（１９９１））が記載したシステムは、抗原結合タンパク質の任意の可変領域に適用できる明確な残基番号付けシステムを提供し、ＣＤＲｓ定義するための正確な残基境界も提供している。これらのＣＤＲｓは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと呼ばれる場合がある。Ｃｈｏｔｈｉａら（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６： ９０１－９１７ （１９８７） ａｎｄ Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３４２： ８７７－８８３ （１９８９））は、アミノ酸配列レベルではかなりの多様性があるが、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓ内のあるサブポーションがほぼ同一のペプチド骨格の立体配座をとることを発見した。これらのサブポーションは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＨ１、Ｈ２、Ｈ３と名付けられ、ここで「Ｌ」は軽鎖領域を、「Ｈ」は重鎖領域をそれぞれ示す。これらの領域は、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲｓと呼ばれる場合があり、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと重複する境界を有している。Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと重複するＣＤＲｓを定義するための他の境界は、Ｐａｄｌａｎ（ＦＡＳＥＢ Ｊ．９：１３３－１３９（１９９５））およびＭａｃＣａｌｌｕｍ（Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２６２（５）：７３２－４５（１９９６））によって記載されている。なお、ＣＤＲ境界の他の定義は、上記のシステムのいずれかに厳密に従わないかもしれないが、特定の残基や残基群、あるいはＣＤＲｓ全体が抗原結合に大きな影響を与えないという予測や実験的発見に従って短縮または延長されることは可能であるが、依然としてＫａｂａｔ ＣＤＲｓと重複することになる。本出願において、ＣＤＲｓはＩＭＧＴ番号付けシステムによって定義することができる。本出願において、「単一ドメイン抗体」という用語は、「ナノボディ」および「ＶＨＨ」と互換可能に使用される。本願の特許請求の範囲は、ＩＭＧＴ番号付けシステムの定義に示される配列に基づいているが、他のＣＤＲ定義規則に対応するアミノ酸配列も本願の保護範囲に含まれる。例示的な定義規則を下表に示す。
ここで、表中のアミノ酸範囲は、本出願の抗原結合タンパク質のＮ末端から始まるアミノ酸番号付け範囲を指し、例えば「２６－３３」とは、Ｎ末端から２６位から３３位までのアミノ酸配列を指す。
本出願において、「モノクローナル抗体」という用語は通常、実質的に均質の抗体の集団を指し、すなわち、該集団を構成する個々の抗体は、微量存在するかもしれない起こりうる天然突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原性部位に直接に対応する。例えば、上記のモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法によって調製されてもよいし、または組換えＤＮＡ法によって細菌、真核動物や植物細胞で産生されてもよい。モノクローナル抗体は、ファージ抗体ライブラリーから、例えばＣｌａｃｋｓｏｎ ｅｔａｌ． ， Ｎａｔｕｒｅ， ３５２：６２４－６２８（１９９１）およびＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１－５９７（１９９１）に記載の技術を使用して得られてもよい。
本出願において、「キメラ抗体」という用語は通常、重鎖または軽鎖の各アミノ酸配列の一部が特定の種に由来する抗体、または特定のクラスに属する抗体の対応するアミノ酸配列と相同であり、その鎖の残りのセグメントが他の種の対応する配列と相同である抗体を意味する。例えば、軽鎖と重鎖の可変領域は、いずれも１つの動物種（例えば、マウス、ラットなど）の抗体の可変領域に由来し、定常部分は、別の種（例えば、ヒト）に由来する抗体の配列と相同である。例えば、キメラ抗体を得るために、非ヒトＢ細胞やハイブリドーマ細胞を用いて、可変領域を産生することができ、それに結合する定常領域はヒト由来とすることができる。上記の可変領域は、調製容易なメリットを持ち、その特異性は、それが組み合わせた定常領域由来による影響がない。同時に、キメラ抗体は、定常領域がヒト由来でありうるため、注射の場合、定常領域がヒト由来でない抗体を用いる場合に比べて、免疫応答を引き起こす可能性が低い。
本出願において、「ＰＤ－１」または「ＰＤ１」という用語は通常、１９９２年に最初に記述された２８８アミノ酸のＩ型膜タンパク質であるヒトプログラム細胞死受容体－１を指す（Ｉｓｈｉｄａ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ，１１（１９９２）、３８８７－３８９５）。ＰＤ－１は、Ｔ細胞制御因子の伸長したＣＤ２８／ＣＴＬＡ－４ファミリーのメンバーであり、かつＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１、ＣＤ２７４）とＰＤ－Ｌ２（Ｂ７－ＤＣ、ＣＤ２７３）という２つのリガンドを有する。このタンパク質の構造は、細胞外のＩｇＶドメインと、その後に膜貫通領域と、細胞内尾部とを含む。細胞内尾部には、免疫受容体チロシンベース阻害モチーフと免疫受容体チロシンベーススイッチモチーフに位置する２つのリン酸化部位が含まれ、ＰＤ－１がＴＣＲシグナルを負に制御することが示唆されている。このことは、リガンド結合の際のＰＤ－１の細胞質尾部に対するＳＨＰ－１およびＳＨＰ－２ホスファターゼの結合に一致している。ＰＤ－１は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）が介在する活性化に従ってアップレギュレーションされ、活性化したＴ細胞および疲弊したＴ細胞の両方で観察される（Ａｇａｔａ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ． Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ８（１９９６），７６５－７７２）。ＰＤ－１は、比較的広い発現パターンを有するが、その最も重要な役割は、Ｔ細胞に対する共阻害受容体としての役割であろう（Ｃｈｉｎａｉ ｅｔ ａｌ．， Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ３６（２０１５），５８７－５９５）。したがって、Ｔ細胞応答を向上させるために、ＰＤ－１とそのリガンドとの相互作用を遮断することにより、腫瘍を治療することに集中している。「ＰＤ－１タンパク質」、「ＰＤ－１」、「ＰＤ１」、「ＰＤＣＤ１」、「ｈＰＤ－１」および「ｈＰＤ－Ｉ」は互換可能に使用することができ、ヒトＰＤ－１のアイソフォーム、種ホモログ、機能的活性断片、およびＰＤ－１と少なくとも１つの共通エピトープを有するアナログを含む。例えば、上記の「機能的活性断片」は、天然に存在するタンパク質の少なくとも１つの内因性機能（例えば、本出願に記載の抗原結合タンパク質に結合する）を保持する断片を含み得る。例えば、上記の「機能的活性断片」は、本出願の抗原結合タンパク質に結合するドメインが含まれ得る。ヒトＰＤ１の例示的なアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｑ１５１１６に示され得る。
本出願において、「ＰＤ－Ｌ１」または「ＰＤＬ１」という用語は通常、Ｂ７ホモログ１、Ｂ７－Ｈ１、分化クラスター２７４、（３）２７４またはＣＤ２７４とも呼ばれ、ＰＤ－１に結合するとＴ細胞の活性化およびサイトカインの分泌をダウンレギュレートする、プログラム細胞死受容体－リガンド１を指す。「ＰＤ－Ｌ１」は、霊長類（例えば、ヒトおよびカニクイザル）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類を含む、任意の脊椎動物に由来する任意の天然ＰＤ－Ｌ１を含む。この用語には、「完全長」の未加工のＰＤ－Ｌ１、および細胞プロセシングにより生成されるＰＤ－Ｌ１のあらゆる形態を包括する。ＰＤ－Ｌ１は、跨膜タンパク質または可溶性タンパク質として存在し得る。「ＰＤ－Ｌ１」は、完全なＰＤ－Ｌ１およびその断片を含み、さらにＰＤ－Ｌ１の機能的断片、アイソフォーム、種ホモログ、誘導体、アナログ、およびＰＤ－Ｌ１と少なくとも１つの共通エピトープを有するアナログを含む。例えば、上記の「機能的活性断片」は、天然に存在するタンパク質の少なくとも１つの内因性機能（例えば、本出願に記載の抗原結合タンパク質への結合）を保持する断片を含み得る。例えば、上記の「機能的活性断片」は、本出願の抗原結合タンパク質に結合するドメインを含み得る。ヒトＰＤ－Ｌ１の例示的なアミノ酸配列は、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿００１２５４６５３またはＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｑ９ＮＺＱ７で見出すことができる。
本出願は、本明細書に記載の特定のタンパク質およびヌクレオチドに加えて、その機能的変異体、誘導体、アナログ、ホモログおよびその断片を含み得る。
本出願は、本明細書に記載の特定のタンパク質およびヌクレオチドに加えて、その機能的変異体、誘導体、アナログ、ホモログおよびその断片を含み得る。
「機能的変異体」という用語は、天然に存在する配列に対して実質的に同一のアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一のヌクレオチド配列によってコードされ、天然に存在する配列の１種類以上の活性を有することができるポリペプチドを指す。本出願の文脈において、任意の所与の配列の変異体は、そのうちの残基の特定の配列（アミノ酸またはヌクレオチド残基のいずれか）が上記のポリペプチドまたはポリヌクレオチドが実質的に少なくとも１種類の内因性機能の配列を保持するように改変されていることを意味する。変異体配列は、元の機能的活性が維持される限り、天然に存在するタンパク質および／またはポリヌクレオチドに存在する少なくとも１つのアミノ酸残基および／またはヌクレオチド残基の付加、欠失、置換、改変、切替および／または変異によって得ることができる。
本出願において、「誘導体」という用語は通常、得られるポリペプチドまたはポリヌクレオチドが少なくとも１種類の内因性機能を実質的に保持する限り、本出願のポリペプチドまたはポリヌクレオチドに関連して、配列の１つ（または複数）のアミノ酸残基から／対しての任意の置換、変異、改変、切替、欠失および／または付加を含むことを意味する。
本出願において、「アナログ」という用語は通常、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドに関して、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドの任意の模倣体、すなわち、該模倣体により模倣されるポリペプチドまたはポリヌクレオチドの少なくとも１種類の内因性機能を有する化学化合物を含む。
本出願において、「誘導体」という用語は通常、得られるポリペプチドまたはポリヌクレオチドが少なくとも１種類の内因性機能を実質的に保持する限り、本出願のポリペプチドまたはポリヌクレオチドに関連して、配列の１つ（または複数）のアミノ酸残基から／対しての任意の置換、変異、改変、切替、欠失および／または付加を含むことを意味する。
本出願において、「アナログ」という用語は通常、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドに関して、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドの任意の模倣体、すなわち、該模倣体により模倣されるポリペプチドまたはポリヌクレオチドの少なくとも１種類の内因性機能を有する化学化合物を含む。
通常、改変された配列が実質的に必要な活性または能力を保持する限り、アミノ酸置換、例えば少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０または２０つ以上）のアミノ酸置換を行うことができる。アミノ酸置換には、非天然に存在するアナログを使用することが含まれる場合がある。
本出願において、「ホモログ」という用語は通常、天然に存在するヌクレオチド配列に対して特定の相同性を持つアミノ酸配列またはヌクレオチド配列を指す。「相同性」という用語は、配列の「同一性」に相当する場合がある。相同配列は、サブジェクト配列に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．９％同一のアミノ酸配列を含み得る。一般的に、ホモログは、サブジェクトアミノ酸配列と同一の活性部位などを含むことになる。相同性は、類似性（すなわち、化学的特性／機能が類似したアミノ酸残基）に基づいて考慮することもできるし、配列の同一性の観点から相同性を表現することができる。本出願において記載する配列番号のアミノ酸配列またはヌクレオチド配列のいずれかに対してあるパーセントの同一性を有する配列は、言及された配列番号の全長にわたって当該パーセントの同一性を有する配列を指す。配列同一性を特定するために、配列比較を行うことができ、これは当該技術分野における当業者に周知の種々の手段、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、ＮＥＥＤＬＥまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどを用いて行うことができる。当該技術分野における当業者であれば、比較される全長配列において最適な比較を実現するために必要な任意のアルゴリズムを含め、比較に使用する適切なパラメータを決定することが可能である。
本出願で使用されるタンパク質またはポリペプチドはまた、サイレント変化を生じ、機能的に同等のタンパク質をもたらすアミノ酸残基の欠失、挿入または置換を有し得る。内因性機能を保持する限り、残基の極性、電荷、溶解性、疎水性、親水性および／または両親媒性における類似性に基づいて、意図的にアミノ酸置換を行うことができる。例えば、負に荷電したアミノ酸にはアスパラギン酸やグルタミン酸があり、正に荷電したアミノ酸にはリジンやアルギニンがあり、親水性値が類似し非荷電極性頭部基を持つアミノ酸にはアスパラギン、グルタミン、セリンや、スレオニン、チロシンがある。
本出願において、「腫瘍」という用語は通常、様々な腫瘍成長因子の作用下で局所組織細胞が増殖することによって形成される新生物を指す。例えば、腫瘍は、固形腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含み得る。「ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍」という用語は通常、疾患の進行または免疫監視の回避につながるＰＤ－Ｌ１発現の変化によって形成される腫瘍を指す。例えば、上記の「ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍」は、疾患の進行または免疫監視の回避につながるＰＤ－Ｌ１の発現レベルのアップレギュレーションによって形成される腫瘍である場合がある。上記のＰＤ－Ｌ１のタンパク質発現に関連する腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１陽性腫瘍である場合がある。ＰＤ－Ｌ１陽性の腫瘍では、腫瘍細胞の表面または腫瘍微小環境におけるＰＤ－Ｌ１のタンパク質発現レベルが、正常細胞と比較して約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％またはそれ以上高くなる。
本出願において、「固形腫瘍」という用語は通常、臨床検査（例えば、Ｘ線、ＣＴスキャン、Ｂ超音波または触診）によって検出される有形の腫れを指す。例えば、上記の固形腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択されるものであり得る。
本出願において、「血液腫瘍」という用語は通常、Ｘ線、ＣＴスキャン、Ｂ超音波または触診で見ることも触れることもできない腫瘍を指す。例えば、上記の血液腫瘍は、白血病を含む場合がある。例えば、上記の血液腫瘍は、リンパ腫を含む場合がある。例えば、上記の血液腫瘍は、多発性骨髄腫を含む場合がある。
本出願において、「免疫複合体」という用語は通常、上記の他の試薬（例えば、化学療法剤、放射性元素、細胞増殖阻害剤や、細胞毒性薬）を上記の単離された抗原結合タンパク質と複合体化する（例えば、リンカー分子による共有結合）ことによって形成される複合体を指し、該複合体は、標的細胞上の抗原に対する上記の単離された抗原結合タンパク質の特異的結合により、上記の他の試薬を標的細胞（例えば、腫瘍細胞）に送達することができる。その後、上記の免疫複合体は上記のように内在化され、最終的に標的細胞の内部（例えば、リソソームなどの小胞）に取り込まれ、その際に、上記の免疫複合体中のリンカー分子を溶解し、上記の他の試薬を放出することにより、細胞毒作用を発揮させることができる。なお、上記の抗原は、上記の標的細胞から分泌され、上記の標的細胞外の隙間に位置することもある。
本出願において、「被験者」という用語は通常、ヒトまたはヒト以外の動物を指し、ネコ、イヌ、ウマ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウサギ、マウス、ラットまたはサルが含まれるが、これらに限定されるものではない。
本出願において、「核酸分子」という用語は通常、その天然環境から単離されるか、または人工的に合成される任意の長さの単離形態であるヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチドまたはそのアナログを指す。
本出願において、「ベクター」という用語は通常、連結された別の核酸を輸送することができる核酸分子を意味する。上記のベクターは、挿入された核酸分子を細胞内および／または細胞間に移入することができる。上記のベクターには、主にＤＮＡまたはＲＮＡの細胞への挿入に用いられるベクター、主にＤＮＡまたはＲＮＡの複製に用いられるベクター、および主にＤＮＡまたはＲＮＡの転写および／または翻訳の発現に用いられるベクターが含まれ得る。上記のベクターは、適当な細胞に導入されると転写されてポリペプチドに翻訳されることができるポリヌクレオチドであり得る。一般に、上記のベクターを含む適当な細胞を培養することにより、上記のベクターは所望の発現産物を産生することができる。本出願において、上記のベクターはレンチウイルスベクターが含まれ得る。
本出願において、「細胞」という用語は通常、本出願に記載の核酸分子を有するプラスミドまたはベクターを含み得るかまたは含んでおり、または本出願に記載のポリペプチドまたは本出願に記載の抗原結合タンパク質を発現し得る個々の細胞、細胞株または細胞培養物を指す。上記の細胞は、単一細胞の子孫を含んでもよい。子孫細胞は、自然変異、偶発的変異または意図的変異により、本出願に記載のポリペプチドや、抗原結合タンパク質を発現きる限り、形態またはゲノムの点で元の親細胞と必ずしも完全に同一である必要はない。上記の細胞は、本出願に記載のベクターを用いてインビトロで細胞をトランスフェクトすることによって得ることができる。上記の細胞は、原核細胞（例えば大腸菌）、または真核細胞（例えばＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨｅＬａ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＣＯＳ－１細胞、ＮＳ０細胞または骨髄腫細胞などの酵母細胞）であり得る。いくつかの実施形態において、上記の細胞は、免疫細胞であってもよい。例えば、上記の免疫細胞は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）、マクロファージ、ＮＫＴ細胞、単球、樹状細胞、顆粒球、リンパ球、白細胞および／または末梢血単核球からなる群から選択されるものであってもよい。
本出願において、「治療」という用語は通常、（ｉ）疾患、病気および／または病状に罹患しやすいが診断されていない患者における疾患、病気および／または病状の発生を予防すること；（ｉｉ）該疾患、病気または病状を抑制し、すなわちその進行を阻止すること；および（ｉｉｉ）該疾患、病気または病状を緩和し、すなわち該疾患、病気および／または病状ならびに／あるいは該疾患、病気および／または病状に関連する症状を退行させることを指す。
本出願において、「ポリペプチド」、「ペプチド」、「タンパク質」、「プロテイン」という用語は、交換可能に使用され、一般的に、任意の長さのアミノ酸の重合体を指す。該重合体は、直鎖であっても分岐していてもよく、改変されたアミノ酸を含んでもよく、非アミノ酸によって中断されていてもよい。これらの用語は、改変されたアミノ酸重合体をも含む。これらの改変には、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質化（ｌｉｐｉｄａｔｉｏｎ）、アセチル化、リン酸化、または他の任意の操作（例えば、標識成分への結合）が含まれる場合がある。「アミノ酸」という用語は、グリシン、ＤおよびＬ光学異性体、ならびにアミノ酸アナログおよびペプチド模倣体を含む、天然および／または非天然あるいは合成アミノ酸を含む。
本出願において、「ポリヌクレオチド」、「ヌクレオチド」、「ヌクレオチド配列」、「核酸」、および「オリゴヌクレオチド」という用語は、交換可能に使用され、一般に、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド、またはそれらのアナログなどの任意の長さのヌクレオチドの重合形態を指す。ポリヌクレオチドは、あらゆる立体構造を持ち、既知または未知のあらゆる機能を発揮することができる。下記はポリヌクレオチドの非限定的な例である：遺伝子または遺伝子断片のコード領域または非コード領域、連鎖解析に従って定義された複数の遺伝子座（１つの遺伝子座）、エクソン、イントロン、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、転移ＲＮＡ、リボソームＲＮＡ、短干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、短ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、リボザイム、ｃＤＮＡ、組換えポリヌクレオチド、分岐ポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、任意の配列の単離ＤＮＡ、任意の配列の単離ＲＮＡ、核酸プローブ、およびプライマー。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログなどの１つまたは複数の改変ヌクレオチドを含み得る。必要に応じて、ヌクレオチド構造に対する改変を重合体の構築の前後に導入し得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって中断されることがある。ポリヌクレオチドは、重合後に例えば標識成分を複合体化するにより、さらに改変され得る。
本出願において、「ＫＤ」（同様に、「ＫＤ」または「ＫＤ」）という用語通常は、指「親和定数」または「平衡解離定数」を指し、滴定測定において平衡状態で得られる値、または解離速度定数（ｋｄ）を結合速度定数（ｋａ）で割ることによって得られる値を意味する。結合速度定数（ｋａ）、解離速度定数（ｋｄ）、平衡解離定数（ＫＤ）は、抗原（例えば、ＰＤ－１タンパク質）に対する結合タンパク質（例えば、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質）の結合親和性を示すために用いられる。結合速度定数および解離速度定数を決定する方法は、当該技術分野でよく知られている。蛍光ベースの技術を使用することで、高感度が得られ、生理的緩衝液で平衡状態にあるサンプルを調べることができる。例えば、上記のＫＤ値は、Ｏｃｔｅｔ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ社）によって、またはＢＩＡｃｏｒｅ（生体分子間相互作用解析システム、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）などの他の実験的アプローチや機器によって測定することができる。なお、上記のＫＤ値は、Ｓａｐｉｄｙｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｂｏｉｓｅ、Ｉｄａｈｏ）社のＫｉｎＥｘＡ（結合平衡除外法、Ｋｉｎｅｔｉｃ Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ Ａｓｓａｙ）によって、または他の表面プラズモン共振器（ＳＰＲ）装置によって測定することができる。本出願において、上記のＫＤ値はＢＩＡｃｏｒｅによって測定することができる。
本出願において、「および／または」という用語は、いずれか１つまたは２つの選択肢を意味するものとして理解されるべきである。
本出願において、「含む」という用語は通常、明確に特定された特徴を含むことを意味するが、他の要素を除外するものではない。いくつかの場合において、「含む」とは指定された構成要素のみを含む場合もカバーする。いくつかの場合において、「含む」とは「……から構成される」の意味もカバーする。
本出願において、「約」という用語は通常、指定された値の上下０．５％－１０％の範囲、例えば指定された値の上下０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、３．５％、４％、４．５％、５％、５．５％、６％、６．５％、７％、７．５％、８％、８．５％、９％、９．５％、または１０％の範囲に変動するものを指す。
本出願において、「含む」という用語は通常、含むこと、備えること、含有することや、有することを指す。場合によって、「であること」、「からなる」という意味もある。
本出願において、「含む」という用語は通常、明確に特定された特徴を含むことを意味するが、他の要素を除外するものではない。いくつかの場合において、「含む」とは指定された構成要素のみを含む場合もカバーする。いくつかの場合において、「含む」とは「……から構成される」の意味もカバーする。
本出願において、「約」という用語は通常、指定された値の上下０．５％－１０％の範囲、例えば指定された値の上下０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、３．５％、４％、４．５％、５％、５．５％、６％、６．５％、７％、７．５％、８％、８．５％、９％、９．５％、または１０％の範囲に変動するものを指す。
本出願において、「含む」という用語は通常、含むこと、備えること、含有することや、有することを指す。場合によって、「であること」、「からなる」という意味もある。
発明の詳細な説明
本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質
一方、本出願は、ＥＬＳＡアッセイにおいて、約１１μｇ／ｍＬ以下（例えば、上記のＥＣ５０が約１１μｇ／ｍＬより高くなく、約１０μｇ／ｍＬより高くなく、約９．５μｇ／ｍＬより高くなく、約９．０μｇ／ｍＬより高くなく、約８．５μｇ／ｍＬより高くなく、約８．０μｇ／ｍＬより高くなく、約７．５μｇ／ｍＬより高くなく、約７．０μｇ／ｍＬより高くなく、６．５μｇ／ｍＬより高くなく、約６．０μｇ／ｍＬより高くなく、５．５μｇ／ｍＬより高くなく、約５．０μｇ／ｍＬより高くなく、約４．５μｇ／ｍＬより高くなく、約４．０μｇ／ｍＬより高くなく、約３．５μｇ／ｍＬより高くなく、約３．０μｇ／ｍＬより高くなく、約２．５μｇ／ｍＬより高くなく、約２．０μｇ／ｍＬより高くなく、約１．５μｇ／ｍＬより高くなく、約１．０μｇ／ｍＬより高くなく、約０．５μｇ／ｍＬより高くなく、約０．４μｇ／ｍＬより高くなく、約０．３μｇ／ｍＬより高くなく、約０．２μｇ／ｍＬより高くなくあるいは約０．１μｇ／ｍＬより高くなくまたはそれ以下）のＥＣ５０でＰＤ－１に結合し得る単離された抗原結合タンパク質を提供する。
競合ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質は、約２μｇ／ｍＬ以下（例えば、上記のＥＣ５０が約１．９μｇ／ｍＬより高くなく、約１．８μｇ／ｍＬより高くなく、約１．７μｇ／ｍＬより高くなく、約１．５μｇ／ｍＬより高くなく、約１．３μｇ／ｍＬより高くなく、約１．１μｇ／ｍＬより高くなく、約１．０μｇ／ｍＬより高くなく、約０．９μｇ／ｍＬより高くなく、０．８μｇ／ｍＬより高くなく、約０．７μｇ／ｍＬより高くなく、０．６μｇ／ｍＬより高くなく、約０．５μｇ／ｍＬより高くなく、約０．４μｇ／ｍＬより高くなく、約０．３μｇ／ｍＬより高くなく、約０．２μｇ／ｍＬより高くなく、あるいは約０．１μｇ／ｍＬより高くなくまたはそれ以下）のＥＣ５０で、ヒトＰＤ－Ｌ１のヒトＰＤ－１への結合を阻害し得る。
本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質
一方、本出願は、ＥＬＳＡアッセイにおいて、約１１μｇ／ｍＬ以下（例えば、上記のＥＣ５０が約１１μｇ／ｍＬより高くなく、約１０μｇ／ｍＬより高くなく、約９．５μｇ／ｍＬより高くなく、約９．０μｇ／ｍＬより高くなく、約８．５μｇ／ｍＬより高くなく、約８．０μｇ／ｍＬより高くなく、約７．５μｇ／ｍＬより高くなく、約７．０μｇ／ｍＬより高くなく、６．５μｇ／ｍＬより高くなく、約６．０μｇ／ｍＬより高くなく、５．５μｇ／ｍＬより高くなく、約５．０μｇ／ｍＬより高くなく、約４．５μｇ／ｍＬより高くなく、約４．０μｇ／ｍＬより高くなく、約３．５μｇ／ｍＬより高くなく、約３．０μｇ／ｍＬより高くなく、約２．５μｇ／ｍＬより高くなく、約２．０μｇ／ｍＬより高くなく、約１．５μｇ／ｍＬより高くなく、約１．０μｇ／ｍＬより高くなく、約０．５μｇ／ｍＬより高くなく、約０．４μｇ／ｍＬより高くなく、約０．３μｇ／ｍＬより高くなく、約０．２μｇ／ｍＬより高くなくあるいは約０．１μｇ／ｍＬより高くなくまたはそれ以下）のＥＣ５０でＰＤ－１に結合し得る単離された抗原結合タンパク質を提供する。
競合ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質は、約２μｇ／ｍＬ以下（例えば、上記のＥＣ５０が約１．９μｇ／ｍＬより高くなく、約１．８μｇ／ｍＬより高くなく、約１．７μｇ／ｍＬより高くなく、約１．５μｇ／ｍＬより高くなく、約１．３μｇ／ｍＬより高くなく、約１．１μｇ／ｍＬより高くなく、約１．０μｇ／ｍＬより高くなく、約０．９μｇ／ｍＬより高くなく、０．８μｇ／ｍＬより高くなく、約０．７μｇ／ｍＬより高くなく、０．６μｇ／ｍＬより高くなく、約０．５μｇ／ｍＬより高くなく、約０．４μｇ／ｍＬより高くなく、約０．３μｇ／ｍＬより高くなく、約０．２μｇ／ｍＬより高くなく、あるいは約０．１μｇ／ｍＬより高くなくまたはそれ以下）のＥＣ５０で、ヒトＰＤ－Ｌ１のヒトＰＤ－１への結合を阻害し得る。
本出願において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、参照抗体と同じまたは重複するＰＤ－１エピトープに結合し得る。例えば、上記の単離された抗原結合タンパク質は、ＰＤ－１への結合について上記の参照抗体と競合し得る。
本出願において、上記の単離された抗原結合タンパク質のＰＤ－１に対する結合親和性は、上記の参照抗体のＰＤ－１に対する結合親和性と実質的に同じであってよい。例えば、結合親和性は、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定し得る。例えば、上記の結合親和性は、ＥＣ５０によって特徴付けられることがある。例えば、結合親和性に関するＥＬＩＳＡアッセイにおいて、ＰＤ－１に対する上記の単離された抗原結合タンパク質のＥＣ５０は、ＰＤ－１に対する上記の参照抗体のＥＣ５０とほぼ等しいか、またはそれ以下である。
本出願において、上記の参照抗体は、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３うちの少なくとも１つ、２つまたは３つを含み得る重鎖可変領域ＶＨを含み得る。
本出願において、上記の単離された抗原結合タンパク質のＰＤ－１に対する結合親和性は、上記の参照抗体のＰＤ－１に対する結合親和性と実質的に同じであってよい。例えば、結合親和性は、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定し得る。例えば、上記の結合親和性は、ＥＣ５０によって特徴付けられることがある。例えば、結合親和性に関するＥＬＩＳＡアッセイにおいて、ＰＤ－１に対する上記の単離された抗原結合タンパク質のＥＣ５０は、ＰＤ－１に対する上記の参照抗体のＥＣ５０とほぼ等しいか、またはそれ以下である。
本出願において、上記の参照抗体は、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３うちの少なくとも１つ、２つまたは３つを含み得る重鎖可変領域ＶＨを含み得る。
本出願において、上記のＨＣＤＲｓの正確な境界は、異なるシステムで異なって定義され得る。例えば、本出願に記載のＨＣＤＲｓは、抗原結合タンパク質の任意の可変領域に適用できる明確な残基番号付けシステムだけではなく、ＣＤＲｓを定義する正確な残基境界をも提供するＫａｂａｔシステムで（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９８７）および（１９９１））に記載のシステムを参照）により定義され得る。これらのＣＤＲｓは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと呼ばれる場合がある。例えば、本出願に記載のＨＣＤＲｓは、Ｃｈｏｔｈｉａシステム（Ｃｈｏｔｈｉａらの研究（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）およびＣｈｏｔｈｉａら、Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７－８８３（１９８９））を参照）により定義され得る。Ｃｈｏｔｈｉａらは、アミノ酸配列レベルではかなりの多様性があるが、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓ内のあるサブポーションがほぼ同一のペプチド骨格の立体配座をとることを発見した。これらのサブポーションは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＨ１、Ｈ２、Ｈ３と名付けられ、ここで「Ｌ」は軽鎖領域を、「Ｈ」は重鎖領域をそれぞれ示す。これらの領域は、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲｓと呼ばれる場合があり、Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと重複する境界を有している。Ｋａｂａｔ ＣＤＲｓと重複するＣＤＲｓを定義するための他の境界は、Ｐａｄｌａｎ（ＦＡＳＥＢ Ｊ．９：１３３－１３９（１９９５））およびＭａｃＣａｌｌｕｍ（Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２６２（５）：７３２－４５（１９９６））によって記載されている。なお、ＣＤＲ境界の他の定義は、上記のシステムのいずれかに厳密に従わないかもしれないが、特定の残基や残基群、あるいはＣＤＲｓ全体が抗原結合に大きな影響を与えないという予測や実験的発見に従って短縮または延長されることは可能であるが、依然としてＫａｂａｔ ＣＤＲｓと重複することになる。本出願において、ＨＣＤＲｓはＩＭＧＴ番号付けシステムによって定義することができる。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ（配列番号１３８）であって、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ７はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ（配列番号１４２）であり、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨまたはＲであってよく、Ｘ７はＡ、ＨまたはＳであってよい。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ（配列番号１３８）であって、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ７はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ（配列番号１４２）であり、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨまたはＲであってよく、Ｘ７はＡ、ＨまたはＳであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１ＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１３７）であり、ここで、Ｘ１はＩまたはＬであってよく、Ｘ４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１ＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１３７）であり、ここで、Ｘ１はＩまたはＬであってよく、Ｘ４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＩＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１４１）であり、ここで、Ｘ４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５はＦまたはＹであってよく、Ｘ６はＡまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、ＱまたはＴであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１３６）であり、ここで、Ｘ１はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ４はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１４０）であり、ここで、Ｘ１はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ４はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ５はＲ、ＳまたはＴであってよい。
ＩＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１４１）であり、ここで、Ｘ４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５はＦまたはＹであってよく、Ｘ６はＡまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、ＱまたはＴであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１３６）であり、ここで、Ｘ１はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ４はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１４０）であり、ここで、Ｘ１はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ４はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ５はＲ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４８で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４８で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号４１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＶＨは、フレームワーク領域Ｈ－ＦＲ１、Ｈ－ＦＲ２、Ｈ－ＦＲ３およびＨ－ＦＲ４を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号６７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＶＨは、フレームワーク領域Ｈ－ＦＲ１、Ｈ－ＦＲ２、Ｈ－ＦＲ３およびＨ－ＦＲ４を含み得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８、１４４－１４８、２３０および／または２３５で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨ－ＦＲ１－４を有する抗体を含み得る。
本出願において、上記の参照抗体は、配列番号１３９で表されるアミノ酸配列を有し得る重鎖可変領域を含み得る。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＸ５１ＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１３９）であり、ここで、Ｘ２６はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２９はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ３０はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５１はＩまたはＬであってよく、Ｘ５４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ１０３はでＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶあってよい。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＸ５１ＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１３９）であり、ここで、Ｘ２６はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２９はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ３０はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５１はＩまたはＬであってよく、Ｘ５４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ１０３はでＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶあってよい。
本出願において、上記の参照抗体は、配列番号１４３で表されるアミノ酸配列を有し得る重鎖可変領域を含み得る。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＩＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１４３）であり、ここで、Ｘ２６はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ２９はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ３０はＲ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５５はＦまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、ＱまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨまたはＲであってよく、Ｘ１０３はＡ、ＨまたはＳであってよい。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＩＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１４３）であり、ここで、Ｘ２６はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ２９はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ３０はＲ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５５はＦまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、ＱまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨまたはＲであってよく、Ｘ１０３はＡ、ＨまたはＳであってよい。
本出願において、上記の参照抗体の重鎖可変領域は、配列番号７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
本出願において、上記の参照抗体は、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含み得る軽鎖可変領域ＶＬを含み得る。
本出願において、上記の参照抗体のＬＣＤＲ３は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＬＣＤＲ２は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＬＣＤＲ３は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＬＣＤＲ２は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の参照抗体のＬＣＤＲ１は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の参照抗体のＬＣＤＲ１は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ２は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＬＣＤＲ３は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＬＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ１は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ２は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ３は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＬＣＤＲ１－３を有する抗原結合タンパク質を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＶＨは、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＶＬは、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＶＨおよびＶＬを有する抗原結合タンパク質を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＬＣＤＲ１は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ２は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の参照抗体のＬＣＤＲ３は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＬＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＨＣＤＲ１は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ２は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＨＣＤＲ３は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ１は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ２は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の参照抗体のＬＣＤＲ３は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＬＣＤＲ１－３を有する抗原結合タンパク質を含み得る。
例えば、上記の参照抗体のＶＨは、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体のＶＬは、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じＶＨおよびＶＬを有する抗原結合タンパク質を含み得る。
本出願において、上記の参照抗体は、例えば、配列番号１３４で表されるアミノ酸配列を有し得る重鎖および軽鎖を含み得る。例えば、上記の参照抗体の軽鎖は、配列番号１３５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の参照抗体は、ペムブロリズマブまたはそれと同じ重鎖および軽鎖を有する抗原結合タンパク質を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３うちの少なくとも１つ、２つまたは３つを含み得る重鎖可変領域ＶＨを含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３うちの少なくとも１つ、２つまたは３つを含み得る重鎖可変領域ＶＨを含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ（配列番号１３８）であり、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ７はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよい。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ（配列番号１３８）であり、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ７はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ （配列番号１４２）であり、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨまたはＲであってよく、Ｘ７はＡ、ＨまたはＳであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＡＡＤＸ４ＤＸ６Ｘ７ＧＦＤＹ （配列番号１４２）であり、ここで、Ｘ４はＩまたはＬであってよく、Ｘ６はＨまたはＲであってよく、Ｘ７はＡ、ＨまたはＳであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１ＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１３７）であり、ここで、Ｘ１はＩまたはＬであってよく、Ｘ４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよい。
Ｘ１ＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１３７）であり、ここで、Ｘ１はＩまたはＬであってよく、Ｘ４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＩＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１４１）であり、ここで、Ｘ４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５はＦまたはＹであってよく、Ｘ６はＡまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、ＱまたはＴであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
ＩＧＷＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ８（配列番号１４１）であり、ここで、Ｘ４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５はＦまたはＹであってよく、Ｘ６はＡまたはＳであってよく、Ｘ８はＥ、ＱまたはＴであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１３６）であり、ここで、Ｘ１はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ４はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよい。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１３６）であり、ここで、Ｘ１はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ４はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ５はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１４０）であり、ここで、Ｘ１はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ４はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ５はＲ、ＳまたはＴであってよい。
Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＩＹＡ（配列番号１４０）であり、ここで、Ｘ１はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ３はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ４はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ５はＲ、ＳまたはＴであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１の配列は、ＩＭＧＴ定義規則に従って決定され得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有し得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４８で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４８で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号１９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５１で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５３で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号４１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＶＨは、フレームワーク領域Ｈ－ＦＲ１、Ｈ－ＦＲ２、Ｈ－ＦＲ３およびＨ－ＦＲ４を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記の抗原結合タンパク質のＨＣＤＲ３は、配列番号６７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３を有する抗体を含み得る。
例えば、上記の抗原結合タンパク質のＶＨは、フレームワーク領域Ｈ－ＦＲ１、Ｈ－ＦＲ２、Ｈ－ＦＲ３およびＨ－ＦＲ４を含み得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号２３０および／または２３５で表されるアミノ酸配列を有し得る。本出願において、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号２３１で表されるアミノ酸配列を有し得る。本出願において、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号２３２で表されるアミノ酸配列を有し得る。本出願において、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号２３３で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８、１４４－１４８、および／または２３０で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９、および／または１４９－１５１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０、および／または１５２－１６１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１、および／または１６２で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９、および／または１４９－１５１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０、および／または１５２－１６１で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１、および／または１６２で表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、かつ上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨ－ＦＲ１－４を有する抗体を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、配列番号２３４で表されるアミノ酸配列を有し得る重鎖可変領域を含み得る。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＸ１ＶＱＸ２ＧＧＳＬＸ３ＬＳＣＡＸ４ＳＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９ＩＹＡＸ１０Ｘ１１ＷＦＲＱＡＰＧＫＸ１２Ｘ１３ＥＦＶＡＧＸ１４ＧＷＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＴＸ１８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＸ１９ＩＳＲＤＮＸ２０ＫＮＴＸ２１Ｘ２２ＬＸ２３ＭＮＳＬＸ２４Ｘ２５ＥＤＴＡＸ２６ＹＹＣＡＡＤＸ２７ＤＸ２８Ｘ２９ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＸ３０ＶＴＶＳＳ（配列番号２３４）であり、ここで、Ｘ１はＬ、またはＳであってよく、Ｘ２はＰ、またはＶであってよく、Ｘ３はＲ、またはＴであってよく、Ｘ４はＡ、またはＴであってよく、Ｘ５はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、またはＶであってよく、Ｘ６はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、またはＶであってよく、Ｘ７はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、またはＶであってよく、Ｘ８はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹであってよく、Ｘ９はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、またはＴであってよく、Ｘ１０はＡ、またはＭであってよく、Ｘ１１はＧ、またはＭであってよく、Ｘ１２はＥ、またはＧであってよく、Ｘ１３はＨ、またはＬであってよく、Ｘ１４はＩ、またはＬであってよく、Ｘ１５はＡ、Ｎ、Ｒ、またはＳであってよく、Ｘ１６はＡ、Ｆ、Ｗ、またはＹであってよく、Ｘ１７はＡ、Ｇ、またはＳであってよく、Ｘ１８はＥ、Ｑ、Ｓ、またはＴであってよく、Ｘ１９はＧ、またはＴであってよく、Ｘ２０はＳ、またはＴであってよく、Ｘ２１はＬ、またはＶであってよく、Ｘ２２はＡ、またはＹであってよく、Ｘ２３はＬ、またはＱであってよく、Ｘ２４はＫ、またはＲであってよく、Ｘ２５はＡ、またはＰであってよく、Ｘ２６はＩ、またはＶであってよく、Ｘ２７はＩ、またはＬであってよく、Ｘ２８はＨ、Ｒ、またはＶであってよく、Ｘ２９はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、またはＶであってよく、Ｘ３０はＬ、またはＱであってよい。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＸ１ＶＱＸ２ＧＧＳＬＸ３ＬＳＣＡＸ４ＳＸ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８Ｘ９ＩＹＡＸ１０Ｘ１１ＷＦＲＱＡＰＧＫＸ１２Ｘ１３ＥＦＶＡＧＸ１４ＧＷＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＴＸ１８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＸ１９ＩＳＲＤＮＸ２０ＫＮＴＸ２１Ｘ２２ＬＸ２３ＭＮＳＬＸ２４Ｘ２５ＥＤＴＡＸ２６ＹＹＣＡＡＤＸ２７ＤＸ２８Ｘ２９ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＸ３０ＶＴＶＳＳ（配列番号２３４）であり、ここで、Ｘ１はＬ、またはＳであってよく、Ｘ２はＰ、またはＶであってよく、Ｘ３はＲ、またはＴであってよく、Ｘ４はＡ、またはＴであってよく、Ｘ５はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、またはＶであってよく、Ｘ６はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、またはＶであってよく、Ｘ７はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、またはＶであってよく、Ｘ８はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、またはＹであってよく、Ｘ９はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、またはＴであってよく、Ｘ１０はＡ、またはＭであってよく、Ｘ１１はＧ、またはＭであってよく、Ｘ１２はＥ、またはＧであってよく、Ｘ１３はＨ、またはＬであってよく、Ｘ１４はＩ、またはＬであってよく、Ｘ１５はＡ、Ｎ、Ｒ、またはＳであってよく、Ｘ１６はＡ、Ｆ、Ｗ、またはＹであってよく、Ｘ１７はＡ、Ｇ、またはＳであってよく、Ｘ１８はＥ、Ｑ、Ｓ、またはＴであってよく、Ｘ１９はＧ、またはＴであってよく、Ｘ２０はＳ、またはＴであってよく、Ｘ２１はＬ、またはＶであってよく、Ｘ２２はＡ、またはＹであってよく、Ｘ２３はＬ、またはＱであってよく、Ｘ２４はＫ、またはＲであってよく、Ｘ２５はＡ、またはＰであってよく、Ｘ２６はＩ、またはＶであってよく、Ｘ２７はＩ、またはＬであってよく、Ｘ２８はＨ、Ｒ、またはＶであってよく、Ｘ２９はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、またはＶであってよく、Ｘ３０はＬ、またはＱであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、配列番号２３６で表されるアミノ酸配列を有し得る重鎖可変領域を含み得る。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＸ１ＳＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＧＬＥＦＶＡＧＩＧＷＸ７Ｘ８Ｘ９ＴＸ１０ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＴＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＡＤＸ１１ＤＸ１２Ｘ１３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２３６）であり、ここで、Ｘ１はＡ、またはＴであってよく、Ｘ２はＧ、Ｈ、またはＫであってよく、Ｘ３はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、Ｓ、またはＶであってよく、Ｘ４はＤ、Ｒ、またはＶであってよく、Ｘ５はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、またはＴであってよく、Ｘ６はＲ、Ｓ、またはＴであってよく、Ｘ７はＡ、またはＮであってよく、Ｘ８はＦ、またはＹであってよく、Ｘ９はＡ、またはＳであってよく、Ｘ１０はＥ、Ｑ、またはＴであってよく、Ｘ１１はＩ、またはＬであってよく、Ｘ１２はＨ、またはＲであってよく、Ｘ１３はＡ、Ｈ、またはＳであってよい。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＸ１ＳＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＧＬＥＦＶＡＧＩＧＷＸ７Ｘ８Ｘ９ＴＸ１０ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＴＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＡＤＸ１１ＤＸ１２Ｘ１３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２３６）であり、ここで、Ｘ１はＡ、またはＴであってよく、Ｘ２はＧ、Ｈ、またはＫであってよく、Ｘ３はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、Ｓ、またはＶであってよく、Ｘ４はＤ、Ｒ、またはＶであってよく、Ｘ５はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、またはＴであってよく、Ｘ６はＲ、Ｓ、またはＴであってよく、Ｘ７はＡ、またはＮであってよく、Ｘ８はＦ、またはＹであってよく、Ｘ９はＡ、またはＳであってよく、Ｘ１０はＥ、Ｑ、またはＴであってよく、Ｘ１１はＩ、またはＬであってよく、Ｘ１２はＨ、またはＲであってよく、Ｘ１３はＡ、Ｈ、またはＳであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、配列番号１３９で表されるアミノ酸配列を有し得る重鎖可変領域を含み得る。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＸ５１ＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１３９）であり、ここで、Ｘ２６はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２９はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ３０はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５１はＩまたはＬであってよく、Ｘ５４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ１０３はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよい。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＸ５１ＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１３９）であり、ここで、Ｘ２６はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２９はＤ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶまたはＹであってよく、Ｘ３０はＡ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５１はＩまたはＬであってよく、Ｘ５４はＡ、Ｎ、ＲまたはＳであってよく、Ｘ５５はＡ、Ｆ、ＷまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡ、ＧまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、Ｑ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ１０３はＡ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶであってよい。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、配列番号１４３で表されるアミノ酸配列を有し得る重鎖可変領域を含み得る。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＩＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１４３）であり、ここで、Ｘ２６はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ２９はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ３０はＲ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５５はＦまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、ＱまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨまたはＲであってよく、Ｘ１０３はＡ、ＨまたはＳであってよい。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＶＧＧＳＬＴＬＳＣＡＡＳＸ２６Ｘ２７Ｘ２８Ｘ２９Ｘ３０ＩＹＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＨＥＦＶＡＧＩＧＷＸ５４Ｘ５５Ｘ５６ＴＸ５８ＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＧＩＳＲＤＮＴＫＮＴＶＡＬＬＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＸ１００ＤＸ１０２Ｘ１０３ＧＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ（配列番号１４３）であり、ここで、Ｘ２６はＧ、ＨまたはＫであってよく、Ｘ２７はＡ、Ｇ、Ｌ、Ｎ、ＳまたはＶであってよく、Ｘ２８はＤ、ＲまたはＶであってよく、Ｘ２９はＧ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、ＲまたはＴであってよく、Ｘ３０はＲ、ＳまたはＴであってよく、Ｘ５４はＡまたはＮであってよく、Ｘ５５はＦまたはＹであってよく、Ｘ５６はＡまたはＳであってよく、Ｘ５８はＥ、ＱまたはＴであってよく、Ｘ１００はＩまたはＬであってよく、Ｘ１０２はＨまたはＲであってよく、Ｘ１０３はＡ、ＨまたはＳであってよい。
本出願において、上記の重鎖可変領域は、配列番号７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１８２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－６と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号７９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－７と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１８５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－７ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－７ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－８と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１８６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－８ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－８ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－９と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１０と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１１と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１２と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１３と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１９１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１３ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１３ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１４と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１５と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１９３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１５ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１５ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１６と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号１９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１７と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１８と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－１９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－１９と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２０と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２１と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２２と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２３と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２４と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２０２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２４ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２４ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２５と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２０３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２５ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２５ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２６と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号９９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２７と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２８と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－２９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－２９と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３０と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３０ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２０８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３０ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３０ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３１と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３２と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２１０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３２ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３２ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３３と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３５と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３６と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３７と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１０９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３８と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３９と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３９ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２１７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－３９ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－３９ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４０またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１１で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４０またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４０と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４１またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４１またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４１と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４２と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２２３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４２ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４２ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４３またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１４で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４３またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４３と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１５で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４４と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号５４で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２２２で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４４ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４４ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１６で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４５と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号１６１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号１６２で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号２２３で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４５ Ｈまたはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４５ Ｈと同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４６またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１７で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４６またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４６と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号４１で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号３で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４７またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１８で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４７またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４７と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４８またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１１９で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４８またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４８と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、ＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を含み得る重鎖可変領域を含み得る。例えば、上記のＨＣＤＲ１は、配列番号９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ２は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨＣＤＲ３は、配列番号６７で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ１は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ２は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ３は、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を有し得、上記のＨ－ＦＲ４は、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を有し得、例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４９またはそれと同じＨＣＤＲ１－３およびＨ－ＦＲ１－４を有する抗原結合タンパク質を含み得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質の重鎖可変領域は、配列番号１２０で表されるアミノ酸配列を有し得る。例えば、上記の抗原結合タンパク質は、単一ドメイン抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－４９またはそれと同じＨＣＤＲ３（例えば、それと同じＨＣＤＲ１－３）を有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。いくつかの場合において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＭＨＰＤ１－Ａ－４９と同じＶＨを有する抗原結合タンパク質（例えば、単一ドメイン抗体）を含み得る。
本出願において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、免疫グロブリンＦｃ領域をさらに含む。例えば、本出願は、本出願の抗原結合タンパク質と免疫グロブリンのＦｃ領域とを含むポリペプチドを提供した。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨは、上記のＦｃ領域に直接的または間接的に連結されている。本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＶＨのＣ末端が、上記のＦｃ領域のＮ末端に直接的または間接的に連結されている。本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＶＨが上記のＦｃ領域とインフレームで融合している。
本出願において、上記の抗原結合タンパク質は、上記のＶＨがリンカーを介して上記のＦｃ領域に連結されている。例えば、上記のリンカーはペプチドリンカーを含む。例えば、上記のリンカーは柔軟なリンカーを含む。
本出願において、上記の単離された抗原結合タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで順次、上記の抗原結合タンパク質の上記のＶＨ、上記のリンカーおよび上記のＦｃ領域を含む。
本出願において、上記のＦｃ領域はＩｇＧ１由来のＦｃまたはＩｇＧ４由来のＦｃを含む。例えば、上記のＦｃ領域は、配列番号１２１－１２５のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有し得る。
ポリペプチドおよび免疫複合体
一方、本出願は、本出願の単離された抗原結合タンパク質を含み得る１種類以上のポリペプチドを提供した。例えば、上記のポリペプチドは、融合タンパク質を含み得る。
一方、本出願は、本出願の単離された抗原結合タンパク質を含み得る１種類以上の免疫複合体を提供した。いくつかの実施形態において、上記の免疫複合体は、薬学的に許容される治療剤も含み得る。
一方、本出願は、本出願の単離された抗原結合タンパク質を含み得る１種類以上のポリペプチドを提供した。例えば、上記のポリペプチドは、融合タンパク質を含み得る。
一方、本出願は、本出願の単離された抗原結合タンパク質を含み得る１種類以上の免疫複合体を提供した。いくつかの実施形態において、上記の免疫複合体は、薬学的に許容される治療剤も含み得る。
核酸、ベクター、細胞および医薬組成物
一方、本出願は、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質をコードすることが可能な単離された１種類以上の核酸分子をさらに提供した。例えば、上記の１種類以上の核酸分子の各々は、上記の抗原結合タンパク質の全体または一部（例えば、ＨＣＤＲ１－３、重鎖可変領域うちの１種類以上）をコードすることができる。
一方、本出願は、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質をコードすることが可能な単離された１種類以上の核酸分子をさらに提供した。例えば、上記の１種類以上の核酸分子の各々は、上記の抗原結合タンパク質の全体または一部（例えば、ＨＣＤＲ１－３、重鎖可変領域うちの１種類以上）をコードすることができる。
本出願に記載の核酸分子は単離されてもよい。例えば、（ｉ）インビトロで、例えばポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）で増幅されること、（ｉｉ）クローニングによって組換え産生されること、（ｉｉｉ）例えば酵素消化およびゲル電気泳動分画によって精製されること、または（ｉｖ）例えば化学合成によって合成されること、からなる方法で産生または合成され得る。例えば、上記の単離された核酸は組換えＤＮＡ技術により調製される核酸分子であってもよく。
本出願において、上記の単離された抗原結合タンパク質をコードする核酸は、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質の核酸分子を得るために逆転写ＰＣＲおよびＰＣＲを利用することを含むがこれらに限定されない、当該技術分野で既知の種々の方法によって調製され得る。
一方、本出願は、本出願に記載の１種類以上の核酸分子を含む１種類以上のベクターを提供した。各ベクターには、１種類以上の上記の核酸分子が含まれ得る。なお、上記のベクターは、適切な宿主細胞においておよび適切な条件下で該ベクターの選択を可能にする標識遺伝子などの他の遺伝子をも含み得る。なお、上記のベクターは、適切な宿主におけるコード領域の正確な発現を可能にする発現制御エレメントをさらに含み得る。そのような制御エレメントは当業者に公知であり、例えばプロモーター、リボソーム結合部位、エンハンサー、および遺伝子の転写またはｍＲＮＡの翻訳を制御する他の制御エレメントなどが含まれ得る。いくつかの実施形態において、上記の発現制御配列は制御され得るエレメントである。上記の発現制御配列の具体的な構造は、種または細胞型の機能によって異なり得るが、一般に、ＴＡＴＡボックス、キャップ配列、ＣＡＡＴ配列などのような、それぞれ転写および翻訳の開始に関与する５’末端非転写配列ならびに５’末端および３’末端非翻訳配列を含む。例えば、５’末端非転写発現制御配列は、機能的に連結された核酸の転写制御のためのプロモーター配列を含有するプロモーター領域を含み得る。上記の発現制御配列はまた、エンハンサー配列または上流活性化配列を含み得る。本出願において、適切なプロモーターは、例えばＳＰ６、Ｔ３およびＴ７ポリメラーゼのためのプロモーター、ヒトＵ６ＲＮＡプロモーター、ＣＭＶプロモーター、およびある部分が他の細胞タンパク質（例えばヒトＧＡＰＤＨ、グリセルアルデヒド－３－リン酸デヒドロゲナーゼ）の遺伝子プロモーターのある部分に融合しており、付加的なイントロンを含むかまたは含まないそれらの人工ハイブリッドプロモーター（例えばＣＭＶ）を包含する。本出願に記載の１種類以上の核酸分子は、上記の発現制御エレメントに作動可能に連結され得る。
上記のベクターには、例えばプラスミド、コスミド、ウイルス、バクテリオファージまたは、例えば遺伝子工学において従来使用される別のベクターが挙げられる。例えば、上記のベクターは発現ベクターであってもよい。例えば、上記のベクターはウイルスベクターであってもよい。ウイルスベクターは、患者に直接的に（インビボ）、またはインビトロで細胞をウイルスで処理し、処理した細胞を患者に投与する（エクスビボ）など間接的に投与することができる。ウイルスベクター技術は当該技術分野で公知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１ ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）およびウイルス学および分子生物学の他のマニュアルに記載されている。従来のウイルスベースのシステムには、遺伝子導入用の逆転写ウイルスベクター、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクターおよび単純ヘルペスウイルスベクターが含まれ得る。いくつかの場合において、逆転写ウイルス、レンチウイルス、アデノ随伴ウイルスを用いた方法で、遺伝子を宿主ゲノムに導入し組み込むことができ、挿入された遺伝子の長期発現が可能になる。レンチウイルスベクターは、非***細胞への形質導入または感染が可能であり、典型的には高いウイルス力価を生じる逆転写ウイルスベクターである。レンチウイルスベクターは、長末端反復配列５’ＬＴＲおよび短縮された３’ＬＴＲ、ＲＲＥ、ｒｅｖ応答エレメント（ｃＰＰＴ）、セントラル終結配列（ＣＴＳ）および／または転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）が含まれる場合がある。本出願に記載のベクターは細胞に導入することができる。
一方、本出願は、細胞を提供した。上記の細胞は、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、１種類以上の核酸分子および／または本出願に記載の１種類以上のベクターを含み得る。例えば、各種類の細胞または各細胞は、１つまたは１種類の本出願に記載の核酸分子またはベクターを含み得る。例えば、各種類の細胞または各細胞は、複数（例えば、２つ以上）または複数種類（例えば、２種類以上）の本出願に記載の核酸分子またはベクターを含み得る。例えば、本出願に記載のベクターは、原核細胞（例えば、細菌細胞）、ＣＨＯ細胞、ＮＳ／０細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、２９３Ｆ細胞もしくはＨＥＫ２９３Ａ細胞、または植物由来の細胞、真菌または酵母細胞などの他の真核細胞などの上記の宿主細胞に導入することができる。本出願に記載のベクターは、電気穿孔、ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎｅトランスフェクション、ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎトランスフェクションなどの当該技術分野で既知の方法で上記の宿主細胞に導入することができる。例えば、上記の細胞には、酵母細胞が含まれ得る。例えば、上記の細胞には、大腸菌細胞が含まれ得る。例えば、上記の細胞には、哺乳動物細胞が含まれ得る。例えば、上記の細胞には、免疫細胞が含まれ得る。
上記の細胞には、免疫細胞が含まれ得る。いくつかの場合において、上記の細胞には、免疫細胞が含まれ得る。例えば、上記の細胞には、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、ＮＫＴ細胞、単球、樹状細胞、顆粒球、リンパ球、白細胞および／または末梢血単核球が含まれる場合がある。
一方、本出願は、医薬組成物を提供した。上記の医薬組成物は、本出願に記載の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞、および／または薬学的に許容されるアジュバントおよび／または賦形剤を含み得る。本出願において、上記の薬学的に許容されるアジュバントには、緩衝剤、酸化防止剤、保存料、低分子量ポリペプチド、タンパク質、親水性ポリマー、アミノ酸、炭水化物、キレート剤、対イオン、金属錯体および／または非イオン性界面活性剤が含まれる場合がある。本出願に記載の細胞と不適合でない限り、任意の従来の培地または試薬も、本出願の医薬組成物への使用を考慮することができる。本出願において、上記の薬学的に許容される賦形剤には、医薬品製剤の主薬以外の付加物が含まれ得、補助物とも呼ばれる。例えば、上記の賦形剤には、錠剤の結合剤、充填剤、崩壊剤、滑沢剤が含まれてもよい。例えば、上記の賦形剤には、漢方丸薬の酒、酢、薬用ジュースなどが含まれてもよい。例えば、上記の賦形剤は、軟膏、クリームの半固形製剤におけるマトリックス部分が含まれ得る。例えば、上記の賦形剤としては、液体製剤の保存料、酸化防止剤、矯味薬、香料、共溶媒、乳化剤、可溶化剤、浸透圧調節剤、着色剤などが挙げられる。
検出方法、キット、使用および方法
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを投与することを含む、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法を提供した。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを投与することを含む、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法を提供した。
本出願において、上記の方法は、インビトロ方法、非診断的または非治療的方法が含まれ得る。
例えば、上記の方法は、
１）サンプルを、本出願の抗原結合タンパク質と接触させるステップ；および
２）サンプルに結合した上記の抗原結合タンパク質の存在および／または含有量を検出することにより、被験者から得られたサンプルにおけるＰＤ－１の存在および／または発現レベルを決定するステップ
を含み得るＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための非診断的方法を含み得る。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを含み得るキットを提供した。
例えば、上記の方法は、
１）サンプルを、本出願の抗原結合タンパク質と接触させるステップ；および
２）サンプルに結合した上記の抗原結合タンパク質の存在および／または含有量を検出することにより、被験者から得られたサンプルにおけるＰＤ－１の存在および／または発現レベルを決定するステップ
を含み得るＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための非診断的方法を含み得る。
一方、本出願は、上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドを含み得るキットを提供した。
本出願において、上記のキットは、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法を記載した説明書も含み得る。例えば、上記の方法は、インビトロ方法、エクスビボ方法、非診断的または非治療的方法を含み得る。
一方、本出願は、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法において使用されるキットの調製における上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドの使用を提供した。例えば、上記の方法は、インビトロ方法、エクスビボ方法、非診断的または非治療的方法を含み得る。
一方、本出願は、疾患または病気を予防および／または治療するための医薬品の調製における上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法において使用されるキットの調製における上記の単離された抗原結合タンパク質または上記のポリペプチドの使用を提供した。例えば、上記の方法は、インビトロ方法、エクスビボ方法、非診断的または非治療的方法を含み得る。
一方、本出願は、疾患または病気を予防および／または治療するための医薬品の調製における上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
一方、本出願は、疾患または病気を予防、緩和および／または治療するための上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞および／または上記の医薬組成物を提供した。
例えば、上記の疾患または病気は、腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の重鎖は、ＰＤ－Ｌ１発現のアップレギュレーションに関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択され得る。
例えば、上記の疾患または病気は、腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の重鎖は、ＰＤ－Ｌ１発現のアップレギュレーションに関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択され得る。
一方、本出願は、疾患または病気を予防および／または治療するための方法であって、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、および／または上記の細胞の有効量を必要とする被験者に投与することを含む方法を提供した。
例えば、上記の疾患または病気は、腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の重鎖は、ＰＤ－Ｌ１発現のアップレギュレーションに関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択され得る。
例えば、上記の疾患または病気は、腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、固形腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、血液腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の重鎖は、ＰＤ－Ｌ１発現のアップレギュレーションに関連する腫瘍を含み得る。例えば、上記の腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択され得る。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害する方法であって、上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、および／または上記の細胞の有効量を必要とする被験者に投与することを含む方法を提供した。上記の方法はエクスビボまたはインビトロ方法であってよい。本出願において、上記の方法は、生物学的サンプルを、本出願に記載の抗原結合タンパク質および／またはＰＤ－Ｌ１にＰＤ－１に対する上記の抗原結合タンパク質および／またはＰＤ－Ｌ１の結合を可能にする条件下で接触させ、上記の抗原結合タンパク質とＰＤ－１との間に複合体が形成されるか否か、およびＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１との間に複合体が形成されるか否かを検出することを含み得る。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための上記の単離された抗原結合タンパク質、上記のポリペプチド、上記の免疫複合体、上記の単離された核酸分子、上記のベクター、上記の細胞および／または上記の医薬組成物を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための医薬品の調製における上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
一方、本出願は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための医薬品の調製における上記の単離された抗原結合タンパク質および／または上記のポリペプチドの使用を提供した。
以下の実施形態は、いかなる理論によっても限定されることを意図することなく、本出願の抗原結合タンパク質、調製方法および使用を解釈することのみを意図しており、本出願の発明的範囲を限定することを意図するものではない。
実施例
実施例１ アルパカの免疫化
１匹の健康な雌の成体アルパカ（Ａｌｐａｃａ）を組換えヒトＰＤ－１タンパク質で免疫化した。初回免疫では、組換えヒトＰＤ－１タンパク質１ ｍｇを、等容量のフロイント完全アジュバントで乳化後に、多箇所の皮下注射を行い、追加免疫では、組換えヒトＰＤ－１タンパク質０．５ ｍｇおよび等容量のフロイント不完全アジュバントで乳化後に、多箇所の皮下注射を行い、合計３回の追加免疫を行った。
実施例１ アルパカの免疫化
１匹の健康な雌の成体アルパカ（Ａｌｐａｃａ）を組換えヒトＰＤ－１タンパク質で免疫化した。初回免疫では、組換えヒトＰＤ－１タンパク質１ ｍｇを、等容量のフロイント完全アジュバントで乳化後に、多箇所の皮下注射を行い、追加免疫では、組換えヒトＰＤ－１タンパク質０．５ ｍｇおよび等容量のフロイント不完全アジュバントで乳化後に、多箇所の皮下注射を行い、合計３回の追加免疫を行った。
実施例２ アルパカ免疫ライブラリーの構築
２．１ 免疫終了後、アルパカの末梢血を採取し、リンパ球分離液（Ｓｏｌａｒｂｉｏ、Ｃａｔ．Ｐ８９００）を用いて、リンパ球を分離し、ＴＲＩｚｏｌTM Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｃａｔ． １５５９６０１８）を用いて全ＲＮＡを抽出した。
２．２ 采用ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔTM ＩＩ １ｓｔ Ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ（ＴＡＫＡＲＡ， Ｃｏｄｅ Ｎｏ．６２１０Ｂ）を用いた逆転写によりｃＤＮＡを取得し、ネステッドＰＣＲによりＶＨＨ遺伝子を増幅した。
２．３ ＶＨＨ遺伝子断片をゲル精製キット（ＴＡＫＡＲＡ， Ｃｏｄｅ Ｎｏ．９７６１）で回収後に、制限エンドヌクレアーゼｓｆｉｌ（ＴＡＫＡＲＡ， Ｃｏｄｅ Ｎｏ．１２４４Ａ）で消化した後、ファージミドベクターｐＣｏｍｂ ３ＸＳＳにクローニングし、構築したクローンをＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１エレクトロコンピテント細胞に形質転換し、ＰＤ－１単一ドメイン抗体ライブラリーを得た。
２．４ プレート勾配希釈法を用いてライブラリーの容量が３．２×１０８であると測定し、コロニーＰＣＲの結果から、ライブラリーのクローン率が９８％であったことを示した。適量のライブラリー菌液（菌数約３．２×１０９）を取り、ＬＢ培地（含アンピシリン）１００ｍＬに接種して、対数中期まで培養し、ヘルパーファージＭ１３ＫＯ７を適量入れて６０分間感染後、培地を２×ＹＴ（アンピシリンおよびカナマイシン含有）２００ｍＬに置換し、３０℃で激しく振とうしながら１２時間培養し、遠心分離により上清を取得し、２０％ＰＥＧ－ＮａＣｌ溶液を適量加えて、ファージを沈殿させ、適量のＰＢＳで再懸濁して沈殿させることによって、その後のスクリーニングにそのまま使用できるファージディスプレイライブラリーを得た。
２．１ 免疫終了後、アルパカの末梢血を採取し、リンパ球分離液（Ｓｏｌａｒｂｉｏ、Ｃａｔ．Ｐ８９００）を用いて、リンパ球を分離し、ＴＲＩｚｏｌTM Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｃａｔ． １５５９６０１８）を用いて全ＲＮＡを抽出した。
２．２ 采用ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔTM ＩＩ １ｓｔ Ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ（ＴＡＫＡＲＡ， Ｃｏｄｅ Ｎｏ．６２１０Ｂ）を用いた逆転写によりｃＤＮＡを取得し、ネステッドＰＣＲによりＶＨＨ遺伝子を増幅した。
２．３ ＶＨＨ遺伝子断片をゲル精製キット（ＴＡＫＡＲＡ， Ｃｏｄｅ Ｎｏ．９７６１）で回収後に、制限エンドヌクレアーゼｓｆｉｌ（ＴＡＫＡＲＡ， Ｃｏｄｅ Ｎｏ．１２４４Ａ）で消化した後、ファージミドベクターｐＣｏｍｂ ３ＸＳＳにクローニングし、構築したクローンをＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１エレクトロコンピテント細胞に形質転換し、ＰＤ－１単一ドメイン抗体ライブラリーを得た。
２．４ プレート勾配希釈法を用いてライブラリーの容量が３．２×１０８であると測定し、コロニーＰＣＲの結果から、ライブラリーのクローン率が９８％であったことを示した。適量のライブラリー菌液（菌数約３．２×１０９）を取り、ＬＢ培地（含アンピシリン）１００ｍＬに接種して、対数中期まで培養し、ヘルパーファージＭ１３ＫＯ７を適量入れて６０分間感染後、培地を２×ＹＴ（アンピシリンおよびカナマイシン含有）２００ｍＬに置換し、３０℃で激しく振とうしながら１２時間培養し、遠心分離により上清を取得し、２０％ＰＥＧ－ＮａＣｌ溶液を適量加えて、ファージを沈殿させ、適量のＰＢＳで再懸濁して沈殿させることによって、その後のスクリーニングにそのまま使用できるファージディスプレイライブラリーを得た。
実施例３ ナノボディのスクリーニング
ＰＤ－１ナノボディは、固相アフィニティスクリーニング法を用いて、合計３スクリーニングラウンドを行った。
３．１ 被覆：マイクロウェルプレートを、組換えヒトＰＤ－１タンパク質で、第１ラウンドでは１００μｇ／ｍＬ、第２ラウンドでは５０μｇ／ｍＬ、第３ラウンドでは２０μｇ／ｍＬの被覆濃度で、４℃一晩被覆した。
３．２ ブロッキング：第１ラウンドと第３ラウンドは３％オボアルブミンで、第２ラウンドは３％ウシ血清アルブミンで、３７℃、１時間の条件下でブロッキングした。
３．３ 結合および洗浄：スクリーニングは、第１ラウンドで、ブロッキング液を除去した後、マイクロウェルプレートに実施例２で構築したナノボディのファージディスプレイライブラリー１００μＬを加えて、３７℃で１時間インキュベートして結合させた後、未結合のライブラリーを除去し、それぞれマイクロウェルプレートをＰＢＳＴおよびＰＢＳで（各５回）洗浄することにより、未結合または結合性の低いファージを除去し；第２ラウンドで、ＰＢＳＴおよびＰＢＳで各１０回洗浄し、第３ラウンドで、ＰＢＳＴおよびＰＢＳで各２０回洗浄した。
３．４ 特異的ファージの溶出：マイクロウェルプレートにグリシン塩酸緩衝液（ｐＨ ２．２）１００μＬを加えて、特異的ファージを解離させ、軽く１０分間振とう後、溶出液を採取した。
３．５ 溶出物の力価測定および増幅：対数増殖期にあるＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１を溶出物に感染させ、少量の感染したＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１を勾配希釈し、適量の勾配希釈液をＬＢ固体培地（プレート希釈法）に均一に塗布し、１２～１４時間後にプレートをカウントして、ファージの溶出量を算出し、残りのファージを増幅し、次のスクリーニングラウンドのための特異的ファージエンリッチメントライブラリーを得た。
３．６ 同定：上記の第２ラウンドおよび第３ラウンドで溶出物力価を測定するためのプレートから、それぞれ９３個のクローンをランダムにピックアップし、増幅によりファージを得、ＥＬＩＳＡで同定した。方法は、組換えヒトＰＤ－１タンパク質（被覆濃度２μｇ／ｍＬ）で被覆、５％スキムミルクでブロッキング後、同定されるファージを加え、３７℃で１時間結合させ、洗浄後、Ｇｏａｔ ａｎｔｉ－Ｌｌａｍａ ＩｇＧ （Ｈ＋Ｌ） Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ［ＨＲＰ］を加え、３７℃で１時間結合させ、洗浄後、ＴＭＢ基質溶液を加えて発色させ、マイクロプレートリーダーでＯＤ４５０を読み取った。陽性対照ウェル（各ラウンドのエンリッチメントライブラリー）、陰性対照ウェル（ヘルパーファージＭ１３ＫＯ７）およびブランクウェル（ＰＢＳ）を設定した。被測ウェルのＯＤ値が陰性対照の３倍以上の場合、陽性と判定した。陽性ウェルの対応するクローンを保菌し、プラスミドを抽出し、配列決定し、ＤＮＡ配列をアミノ酸配列に翻訳して比較し、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３配列がすべて同一のクローンを同一の抗体株とみなし、ＨＣＤＲ配列が異なるクローンを異なる抗体株とみなした。
ＰＤ－１ナノボディは、固相アフィニティスクリーニング法を用いて、合計３スクリーニングラウンドを行った。
３．１ 被覆：マイクロウェルプレートを、組換えヒトＰＤ－１タンパク質で、第１ラウンドでは１００μｇ／ｍＬ、第２ラウンドでは５０μｇ／ｍＬ、第３ラウンドでは２０μｇ／ｍＬの被覆濃度で、４℃一晩被覆した。
３．２ ブロッキング：第１ラウンドと第３ラウンドは３％オボアルブミンで、第２ラウンドは３％ウシ血清アルブミンで、３７℃、１時間の条件下でブロッキングした。
３．３ 結合および洗浄：スクリーニングは、第１ラウンドで、ブロッキング液を除去した後、マイクロウェルプレートに実施例２で構築したナノボディのファージディスプレイライブラリー１００μＬを加えて、３７℃で１時間インキュベートして結合させた後、未結合のライブラリーを除去し、それぞれマイクロウェルプレートをＰＢＳＴおよびＰＢＳで（各５回）洗浄することにより、未結合または結合性の低いファージを除去し；第２ラウンドで、ＰＢＳＴおよびＰＢＳで各１０回洗浄し、第３ラウンドで、ＰＢＳＴおよびＰＢＳで各２０回洗浄した。
３．４ 特異的ファージの溶出：マイクロウェルプレートにグリシン塩酸緩衝液（ｐＨ ２．２）１００μＬを加えて、特異的ファージを解離させ、軽く１０分間振とう後、溶出液を採取した。
３．５ 溶出物の力価測定および増幅：対数増殖期にあるＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１を溶出物に感染させ、少量の感染したＥ．ｃｏｌｉ ＴＧ１を勾配希釈し、適量の勾配希釈液をＬＢ固体培地（プレート希釈法）に均一に塗布し、１２～１４時間後にプレートをカウントして、ファージの溶出量を算出し、残りのファージを増幅し、次のスクリーニングラウンドのための特異的ファージエンリッチメントライブラリーを得た。
３．６ 同定：上記の第２ラウンドおよび第３ラウンドで溶出物力価を測定するためのプレートから、それぞれ９３個のクローンをランダムにピックアップし、増幅によりファージを得、ＥＬＩＳＡで同定した。方法は、組換えヒトＰＤ－１タンパク質（被覆濃度２μｇ／ｍＬ）で被覆、５％スキムミルクでブロッキング後、同定されるファージを加え、３７℃で１時間結合させ、洗浄後、Ｇｏａｔ ａｎｔｉ－Ｌｌａｍａ ＩｇＧ （Ｈ＋Ｌ） Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ［ＨＲＰ］を加え、３７℃で１時間結合させ、洗浄後、ＴＭＢ基質溶液を加えて発色させ、マイクロプレートリーダーでＯＤ４５０を読み取った。陽性対照ウェル（各ラウンドのエンリッチメントライブラリー）、陰性対照ウェル（ヘルパーファージＭ１３ＫＯ７）およびブランクウェル（ＰＢＳ）を設定した。被測ウェルのＯＤ値が陰性対照の３倍以上の場合、陽性と判定した。陽性ウェルの対応するクローンを保菌し、プラスミドを抽出し、配列決定し、ＤＮＡ配列をアミノ酸配列に翻訳して比較し、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３配列がすべて同一のクローンを同一の抗体株とみなし、ＨＣＤＲ配列が異なるクローンを異なる抗体株とみなした。
実施例４ ＶＨＨの発現および精製
実施例３でスクリーニングした陽性クローンをＴｏｐ１０Ｆ’に形質転換し、ＩＰＴＧによってＶＨＨの発現を誘導した。遠心分離により細胞沈殿を回収し、超音波破砕後上清を採取し、ＴＡＬＯＮ（登録商標） Ｍｅｔａｌ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｒｅｓｉｎｓによって精製し、緩衝液をリン酸緩衝液に置換した。ＯＤ２８０値を測定することによって、精製されたＶＨＨを定量し、将来の使用に備えて４℃で保存された。ここで、抗原（ヒト組換えＰＤ－１）に対して親和性が高くかつヒト組換えＰＤ－１への結合についてヒト組換えＰＤ－Ｌ１と競合できるＶＨＨがスクリーニングされたＳＤＳ ＰＡＧＥは図１に示されており、得られたＶＨＨはＭＨＰＤ１－Ａと名付けられた。
実施例３でスクリーニングした陽性クローンをＴｏｐ１０Ｆ’に形質転換し、ＩＰＴＧによってＶＨＨの発現を誘導した。遠心分離により細胞沈殿を回収し、超音波破砕後上清を採取し、ＴＡＬＯＮ（登録商標） Ｍｅｔａｌ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｒｅｓｉｎｓによって精製し、緩衝液をリン酸緩衝液に置換した。ＯＤ２８０値を測定することによって、精製されたＶＨＨを定量し、将来の使用に備えて４℃で保存された。ここで、抗原（ヒト組換えＰＤ－１）に対して親和性が高くかつヒト組換えＰＤ－１への結合についてヒト組換えＰＤ－Ｌ１と競合できるＶＨＨがスクリーニングされたＳＤＳ ＰＡＧＥは図１に示されており、得られたＶＨＨはＭＨＰＤ１－Ａと名付けられた。
実施例５ 抗原タンパク質への結合におけるＶＨＨの組換えヒトＰＤ－Ｌ１との競合のＥＬＩＳＡ実験
組換えヒトＰＤ－１抗原（２μｇ／ｍＬ）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＭＨＰＤ１－Ａサンプルは開始濃度２０μｇ／ｍＬで０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳで２倍勾配希釈した。４μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－Ｌ１－Ｆｃおよび濃度の異なるＶＨＨを、抗原（組換えヒトＰＤ－１タンパク質）で被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ二次抗体（１：５０００、１％カゼイン含有）で行われ、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出し、その結果を表１に示した。その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａはヒト組換えＰＤ－Ｌ１とヒト組換えＰＤ－１の結合を効果的に阻害できることが明らかになった。
組換えヒトＰＤ－１抗原（２μｇ／ｍＬ）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＭＨＰＤ１－Ａサンプルは開始濃度２０μｇ／ｍＬで０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳで２倍勾配希釈した。４μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－Ｌ１－Ｆｃおよび濃度の異なるＶＨＨを、抗原（組換えヒトＰＤ－１タンパク質）で被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ二次抗体（１：５０００、１％カゼイン含有）で行われ、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出し、その結果を表１に示した。その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａはヒト組換えＰＤ－Ｌ１とヒト組換えＰＤ－１の結合を効果的に阻害できることが明らかになった。
実施例６ 融合タンパク質の発言および精製
ＭＨＰＤ１－ＡおよびヒトＦｃ断片（ＶＨＨのＣ末端はヒトＦｃヒンジ領域のＮ末端直接に連結されている）をコードする核酸配列を有するｐＴＴ５組換えベクターを合成し、以下のように、１５μｇのプラスミドＤＮＡをＯｐｔｉ－ＭＥＭ（登録商標） Ｉで総容量が０．５ｍＬになるまで希釈すること、３０μＬ ２９３ｆｅｃｔｉｎTM試薬をＯｐｔｉ－ＭＥＭ（登録商標） Ｉで総容量が０．５ｍＬになるまで希釈すること；軽く混合、室温で５分間インキュベートすること、からなるステップで、リポソーム－ＤＮＡ複合体を用意した。希釈したｐＴＴ５組換えベクターを希釈した２９３ｆｅｃｔｉｎTM試薬に加えて、軽く均一に混合し、室温で３０分間インキュベートした。上記の混合物を１ × １０６ ｃｅｌｌｓ／ｍＬ細胞含有のシェークフラスコに加えて、３７℃で８％ＣＯ２を含む細胞インキュベーターに入れて、１２５ ｒｐｍで回転するオービタルオシレーターでインキュベートした。トランスフェクション後４日目に、上清を収集して、ＰｉｅｒｃｅＴＭのＰｒｏｔｅｉｎ Ａアガロースゲルで精製し、緩衝液をリン酸緩衝液に置換し、得られた融合タンパク質をＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃと名付けた。
ＭＨＰＤ１－ＡおよびヒトＦｃ断片（ＶＨＨのＣ末端はヒトＦｃヒンジ領域のＮ末端直接に連結されている）をコードする核酸配列を有するｐＴＴ５組換えベクターを合成し、以下のように、１５μｇのプラスミドＤＮＡをＯｐｔｉ－ＭＥＭ（登録商標） Ｉで総容量が０．５ｍＬになるまで希釈すること、３０μＬ ２９３ｆｅｃｔｉｎTM試薬をＯｐｔｉ－ＭＥＭ（登録商標） Ｉで総容量が０．５ｍＬになるまで希釈すること；軽く混合、室温で５分間インキュベートすること、からなるステップで、リポソーム－ＤＮＡ複合体を用意した。希釈したｐＴＴ５組換えベクターを希釈した２９３ｆｅｃｔｉｎTM試薬に加えて、軽く均一に混合し、室温で３０分間インキュベートした。上記の混合物を１ × １０６ ｃｅｌｌｓ／ｍＬ細胞含有のシェークフラスコに加えて、３７℃で８％ＣＯ２を含む細胞インキュベーターに入れて、１２５ ｒｐｍで回転するオービタルオシレーターでインキュベートした。トランスフェクション後４日目に、上清を収集して、ＰｉｅｒｃｅＴＭのＰｒｏｔｅｉｎ Ａアガロースゲルで精製し、緩衝液をリン酸緩衝液に置換し、得られた融合タンパク質をＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃと名付けた。
実施例７ ヒト、サルおよびマウスＰＤ－１との融合タンパク質の種間交差検証
９６ウェルＧｒｅｉｎｅｒプレートを、それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質、組換えサルＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質、組換えマウスＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質で４℃で一晩被覆した。２日目に１％カゼインでブロッキング後、ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質サンプル５μｇ／ｍＬおよび１．６７μｇ／ｍＬを抗原被覆プレートにそれぞれ加えて、２時間インキュベートした。その後、プレートをＰＢＳＴで洗浄し、抗ヒトＩｇＧ－ＨＲＰ（１％カゼインで １：５０００ 希釈）を加えて１時間インキュベートして、結合アッセイを行った。図２に示すように、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓおよび組換えサルＰＤ－１－ｈｉｓに結合し得るが、組換えマウスＰＤ－１－ｈｉｓには結合活性を示さなかった。
９６ウェルＧｒｅｉｎｅｒプレートを、それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質、組換えサルＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質、組換えマウスＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質で４℃で一晩被覆した。２日目に１％カゼインでブロッキング後、ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質サンプル５μｇ／ｍＬおよび１．６７μｇ／ｍＬを抗原被覆プレートにそれぞれ加えて、２時間インキュベートした。その後、プレートをＰＢＳＴで洗浄し、抗ヒトＩｇＧ－ＨＲＰ（１％カゼインで １：５０００ 希釈）を加えて１時間インキュベートして、結合アッセイを行った。図２に示すように、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓおよび組換えサルＰＤ－１－ｈｉｓに結合し得るが、組換えマウスＰＤ－１－ｈｉｓには結合活性を示さなかった。
実施例８ 組換えヒトＰＤ－１に対する融合タンパク質の親和性の検出
アミンカップリングキット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ， Ｃａｔ Ｎｏ．ＢＲ１０００５０）を使用して、標準的なアミンカップリング手順に従って、２５℃で約２５０ＲＵの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質をＣＭ５チップにカップリングした。２倍連続希釈したＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃサンプル（５濃度検出）を、２５℃で３０ μＬ／ｍｉｎの流速で、結合時間１２０ｓ、解離時間６００ｓで順次注入した。Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）８Ｋ解析ソフトウェア（ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ）を使用して、１：１ Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデルに曲線をフィッティングし、その結合速度定数、解離速度定数および結合解離定数などの動力学定数を決定した。
その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－１に対して親和性が高いことが明らかになって、組換えヒトＰＤ１－ｈｉｓに対するＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃの結合の動力学定数を表２に示した。
アミンカップリングキット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ， Ｃａｔ Ｎｏ．ＢＲ１０００５０）を使用して、標準的なアミンカップリング手順に従って、２５℃で約２５０ＲＵの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質をＣＭ５チップにカップリングした。２倍連続希釈したＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃサンプル（５濃度検出）を、２５℃で３０ μＬ／ｍｉｎの流速で、結合時間１２０ｓ、解離時間６００ｓで順次注入した。Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）８Ｋ解析ソフトウェア（ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ）を使用して、１：１ Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデルに曲線をフィッティングし、その結合速度定数、解離速度定数および結合解離定数などの動力学定数を決定した。
その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－１に対して親和性が高いことが明らかになって、組換えヒトＰＤ１－ｈｉｓに対するＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃの結合の動力学定数を表２に示した。
実施例９ 組換えヒトＰＤ－１への結合における融合タンパク質の組換えヒトＰＤ－Ｌ１との競合のＥＬＩＳＡ実験
組換えヒトＰＤ－Ｌ１（Ｃ－Ｆｃ、０．２μｇ／ウェル）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは開始濃度１０μｇ／ｍＬで０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳで２倍勾配希釈した。０．５μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－１（Ｃ－Ｆｃ ＆ Ｃ－Ａｖｉ ＆ Ｃ－６×Ｈｉｓ）および濃度の異なるＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃを、抗原で被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出はホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジン（１：１００００）で行われ、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出し、その結果を表３に示した。
その結果から、被験のＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－Ｌ１と組換えヒトＰＤ－１の結合を競合的に阻害でき、活性が陽性対照Ｎｉｖｏｌｕｍａｂと同等以上であることが明らかになった。
組換えヒトＰＤ－Ｌ１（Ｃ－Ｆｃ、０．２μｇ／ウェル）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは開始濃度１０μｇ／ｍＬで０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳで２倍勾配希釈した。０．５μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－１（Ｃ－Ｆｃ ＆ Ｃ－Ａｖｉ ＆ Ｃ－６×Ｈｉｓ）および濃度の異なるＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃを、抗原で被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出はホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジン（１：１００００）で行われ、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出し、その結果を表３に示した。
その結果から、被験のＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－Ｌ１と組換えヒトＰＤ－１の結合を競合的に阻害でき、活性が陽性対照Ｎｉｖｏｌｕｍａｂと同等以上であることが明らかになった。
実施例１０ ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞に対する融合タンパク質の結合活性
ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞を、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地中、ＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）で培養した。細胞を収集して、テストバッファーで１回洗浄した。細胞をカウントして、生存率を検出し、各試験管に３×１０５生細胞を加えて、それぞれ濃度の異なるＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（３０００ ｎｇ／ｍＬ、１０００ ｎｇ／ｍＬ、３００ ｎｇ／ｍＬ、１００ ｎｇ／ｍＬ、３０ ｎｇ／ｍＬ、１０ ｎｇ／ｍＬ、３ ｎｇ／ｍＬ、１ ｎｇ／ｍＬおよび０．３ ｎｇ／ｍＬ）１００μＬを加えて、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で洗浄後、説明書に従ってＰＥ－抗ヒトＩｇＧを１００μＬ加えて、暗所、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で３回洗浄し、各サンプルを２００μＬ ＰＢＳに再懸濁し、フローサイトメーターで検出した。データは、ＦＣＳ Ｅｘｐｒｅｓｓ ６ ＰｌｕｓおよびＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５ソフトウェアを用いて解析した。
その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａ ＦｃはヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞に結合することが可能であることが明らかになり、ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞に対するＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃの結合のＥＣ５０を表４に示した。
ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞を、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地中、ＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）で培養した。細胞を収集して、テストバッファーで１回洗浄した。細胞をカウントして、生存率を検出し、各試験管に３×１０５生細胞を加えて、それぞれ濃度の異なるＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（３０００ ｎｇ／ｍＬ、１０００ ｎｇ／ｍＬ、３００ ｎｇ／ｍＬ、１００ ｎｇ／ｍＬ、３０ ｎｇ／ｍＬ、１０ ｎｇ／ｍＬ、３ ｎｇ／ｍＬ、１ ｎｇ／ｍＬおよび０．３ ｎｇ／ｍＬ）１００μＬを加えて、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で洗浄後、説明書に従ってＰＥ－抗ヒトＩｇＧを１００μＬ加えて、暗所、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で３回洗浄し、各サンプルを２００μＬ ＰＢＳに再懸濁し、フローサイトメーターで検出した。データは、ＦＣＳ Ｅｘｐｒｅｓｓ ６ ＰｌｕｓおよびＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５ソフトウェアを用いて解析した。
その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａ ＦｃはヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞に結合することが可能であることが明らかになり、ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞に対するＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃの結合のＥＣ５０を表４に示した。
実施例１１ ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞への結合における融合タンパク質のヒトＰＤ－Ｌ１との競合
ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞を、ＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）で、１０％ＦＢＳおよび１ ｍｇ／ｍＬ Ｇ４１８を含むＤＭＥＭ培地で培養した。細胞を収集して、テストバッファーで１回洗浄した。細胞をカウントして、生存率を検出し、各試験管に３×１０５生細胞（細胞生存率≧９５％）を加えた。１．０μｇ／ｍＬビオチン化ヒトＰＤ－Ｌ１タンパク質および連続希釈したＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（濃度０．０３μｇ／ｍＬ～１０μｇ／ｍＬ）をそれぞれ室温で混合し、３０分間インキュベートし、混合物を３×１０５生細胞含有遠心チューブにそれぞれ加え、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で洗浄後、説明書に従ってＰＥ－ＳＡを１００μＬ加えて、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で３回洗浄し、各サンプルを１００μＬ ＰＢＳに再懸濁し、フローサイトメーターで検出した。データは、ＦＣＳ Ｅｘｐｒｅｓｓ ６ ＰｌｕｓおよびＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５ソフトウェアを用いて解析した。
その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－Ｌ１とｈＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞の結合を競合的に阻害でき、競合的結合活性が陽性対照Ｎｉｖｏｌｕｍａｂよりもわずかに優れていたことが明らかになった。ＨＥＫ２９３／ｈＰＤ１への結合におけるＭＨＰＤ１－Ａ ＦｃのヒトＰＤ－Ｌ１との競合のＥＣ５０値を表５に示した。
ヒトＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞を、ＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）で、１０％ＦＢＳおよび１ ｍｇ／ｍＬ Ｇ４１８を含むＤＭＥＭ培地で培養した。細胞を収集して、テストバッファーで１回洗浄した。細胞をカウントして、生存率を検出し、各試験管に３×１０５生細胞（細胞生存率≧９５％）を加えた。１．０μｇ／ｍＬビオチン化ヒトＰＤ－Ｌ１タンパク質および連続希釈したＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（濃度０．０３μｇ／ｍＬ～１０μｇ／ｍＬ）をそれぞれ室温で混合し、３０分間インキュベートし、混合物を３×１０５生細胞含有遠心チューブにそれぞれ加え、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で洗浄後、説明書に従ってＰＥ－ＳＡを１００μＬ加えて、４℃で１時間インキュベートした。細胞を洗浄緩衝液で３回洗浄し、各サンプルを１００μＬ ＰＢＳに再懸濁し、フローサイトメーターで検出した。データは、ＦＣＳ Ｅｘｐｒｅｓｓ ６ ＰｌｕｓおよびＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５ソフトウェアを用いて解析した。
その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃは組換えヒトＰＤ－Ｌ１とｈＰＤ－１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞の結合を競合的に阻害でき、競合的結合活性が陽性対照Ｎｉｖｏｌｕｍａｂよりもわずかに優れていたことが明らかになった。ＨＥＫ２９３／ｈＰＤ１への結合におけるＭＨＰＤ１－Ａ ＦｃのヒトＰＤ－Ｌ１との競合のＥＣ５０値を表５に示した。
実施例１２ 抗原タンパク質に対する融合タンパク質およびペムブロリズマブ（Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）の親和性キネティックスの検出
Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標） ８Ｋ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）による親和性キネティックスの検出：アミンカップリングキット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ， Ｃａｔ Ｎｏ．ＢＲ１０００５０）を使用して、標準的なアミンカップリング手順に従って、２５℃で組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質をＣＭ５チップ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ， Ｃａｔ Ｎｏ．ＢＲ１００５３０）にカップリングした。１つの実験では、２５℃で３０ μＬ／ｍｉｎの流速で、Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）およびＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）、またはＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）および緩衝液を、または緩衝液およびＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）を、各サンプルの結合時間３００ｓで順次注入し、親和性キネティックス曲線を図３Ａに示した。もう１つの実験では、２５℃で３０ μＬ／ｍｉｎの流速で、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）およびＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）、またはＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）および緩衝液、または緩衝液およびＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）を、各サンプルの結合時間３００ｓで順次注入し、親和性キネティックス曲線を図３Ｂに示した。上記の検出結果をまとめて、ＰＤ１－Ｈｉｓタンパク質に対するＭＨＰＤ１－Ａ ＦｃおよびＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂの結合のエピトープが同一であるかまたは重複していると推定される。
Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標） ８Ｋ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）による親和性キネティックスの検出：アミンカップリングキット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ， Ｃａｔ Ｎｏ．ＢＲ１０００５０）を使用して、標準的なアミンカップリング手順に従って、２５℃で組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓタンパク質をＣＭ５チップ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ， Ｃａｔ Ｎｏ．ＢＲ１００５３０）にカップリングした。１つの実験では、２５℃で３０ μＬ／ｍｉｎの流速で、Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）およびＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）、またはＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）および緩衝液を、または緩衝液およびＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）を、各サンプルの結合時間３００ｓで順次注入し、親和性キネティックス曲線を図３Ａに示した。もう１つの実験では、２５℃で３０ μＬ／ｍｉｎの流速で、ＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）およびＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）、またはＭＨＰＤ１－Ａ Ｆｃ（２ μＭ）および緩衝液、または緩衝液およびＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（１００ ｎＭ）を、各サンプルの結合時間３００ｓで順次注入し、親和性キネティックス曲線を図３Ｂに示した。上記の検出結果をまとめて、ＰＤ１－Ｈｉｓタンパク質に対するＭＨＰＤ１－Ａ ＦｃおよびＰｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂの結合のエピトープが同一であるかまたは重複していると推定される。
実施例１３ ＶＨＨ変異体の構築
ＭＨＰＤ１－Ａの配列に対して、データベース配列解析を行うことによって、構造の予測と経験に基づき、ＨＣＤＲ１－３のいくつかのアミノ酸部位を変異させた一連のＶＨＨ変異体配列を設計した。設計されたＶＨＨ変異体配列に従って、それぞれ全遺伝子合成（Ｈｉｓタグ）を行い、ｐｃＤＮＡ３．４プラスミドをＮｏｔＩ／ ＸｂａＩで酵素消化し（ＮＥＢ， Ｃａｔ． Ｒ０１８９Ｌ、Ｒ０１４５Ｌ）、ＶＨＨ変異体の遺伝子配列と組換え、組換えプラスミドをＴＯＰ１０コンピテントに形質転換し、菌液を塗布し、３７℃で１６～２０時間培養した。プレートから単一コロニーを選択してコロニーＰＣＲを行い、電気泳動により陽性クローンを同定し、陽性クローンを選定して配列決定を行い、正しく配列決定されたクローンについて拡大培養を行い、プラスミドを抽出した。ＨＥＫ２９３細胞をリポソームトランスフェクション試薬で一過性にトランスフェクションし、３７℃、５％ＣＯ２含有の細胞インキュベーターに入れて、１２５ｒｐｍで回転するオービタルオシレーターでインキュベートした。５日目に、上清を遠心分離で採取し、Ｎｉアフィニティークロマトグラフィー（（Ｎｉ Ｓｍａｒｔ Ｂｅａｄｓ ６ＦＦ， ＧＥ ＃１７５３１８０２）で精製し、透析によって緩衝液をリン酸緩衝液に置換することによって、それぞれＭＨＰＤ１－Ａ－４、ＭＨＰＤ１－Ａ－７、ＭＨＰＤ１－Ａ－８、ＭＨＰＤ１－Ａ－１３、ＭＨＰＤ１－Ａ－１５、ＭＨＰＤ１－Ａ－２４、ＭＨＰＤ１－Ａ－２５、ＭＨＰＤ１－Ａ－３０、ＭＨＰＤ１－Ａ－３２、ＭＨＰＤ１－Ａ－３９、ＭＨＰＤ１－Ａ－４２、ＭＨＰＤ１－Ａ－４４およびＭＨＰＤ１－Ａ－４５と名付けられた一連のＶＨＨ変異体を得た。
ＭＨＰＤ１－Ａの配列に対して、データベース配列解析を行うことによって、構造の予測と経験に基づき、ＨＣＤＲ１－３のいくつかのアミノ酸部位を変異させた一連のＶＨＨ変異体配列を設計した。設計されたＶＨＨ変異体配列に従って、それぞれ全遺伝子合成（Ｈｉｓタグ）を行い、ｐｃＤＮＡ３．４プラスミドをＮｏｔＩ／ ＸｂａＩで酵素消化し（ＮＥＢ， Ｃａｔ． Ｒ０１８９Ｌ、Ｒ０１４５Ｌ）、ＶＨＨ変異体の遺伝子配列と組換え、組換えプラスミドをＴＯＰ１０コンピテントに形質転換し、菌液を塗布し、３７℃で１６～２０時間培養した。プレートから単一コロニーを選択してコロニーＰＣＲを行い、電気泳動により陽性クローンを同定し、陽性クローンを選定して配列決定を行い、正しく配列決定されたクローンについて拡大培養を行い、プラスミドを抽出した。ＨＥＫ２９３細胞をリポソームトランスフェクション試薬で一過性にトランスフェクションし、３７℃、５％ＣＯ２含有の細胞インキュベーターに入れて、１２５ｒｐｍで回転するオービタルオシレーターでインキュベートした。５日目に、上清を遠心分離で採取し、Ｎｉアフィニティークロマトグラフィー（（Ｎｉ Ｓｍａｒｔ Ｂｅａｄｓ ６ＦＦ， ＧＥ ＃１７５３１８０２）で精製し、透析によって緩衝液をリン酸緩衝液に置換することによって、それぞれＭＨＰＤ１－Ａ－４、ＭＨＰＤ１－Ａ－７、ＭＨＰＤ１－Ａ－８、ＭＨＰＤ１－Ａ－１３、ＭＨＰＤ１－Ａ－１５、ＭＨＰＤ１－Ａ－２４、ＭＨＰＤ１－Ａ－２５、ＭＨＰＤ１－Ａ－３０、ＭＨＰＤ１－Ａ－３２、ＭＨＰＤ１－Ａ－３９、ＭＨＰＤ１－Ａ－４２、ＭＨＰＤ１－Ａ－４４およびＭＨＰＤ１－Ａ－４５と名付けられた一連のＶＨＨ変異体を得た。
実施例１４ 抗原タンパク質への結合におけるＶＨＨ変異体の組換えヒトＰＤ－Ｌ１との競合のＥＬＩＳＡ実験
組換えヒトＰＤ－１タンパク質（２μｇ／ｍＬ）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＶＨＨ変異を、０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳを用いて開始濃度２０μｇ／ｍＬで２倍勾配希釈した。４μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－Ｌ１－Ｆｃおよび濃度の異なるＶＨＨ変異体を、抗原（組換えヒトＰＤ－１タンパク質）被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ二次抗体（１：５０００、１％カゼイン含有）で行われた。分析の結果から、ＶＨＨ変異体は組換えヒトＰＤ－Ｌ１と組換えヒトＰＤ－１の結合を効果的に阻害できたことが明らかになった。
組換えヒトＰＤ－１タンパク質（２μｇ／ｍＬ）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＶＨＨ変異を、０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳを用いて開始濃度２０μｇ／ｍＬで２倍勾配希釈した。４μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－Ｌ１－Ｆｃおよび濃度の異なるＶＨＨ変異体を、抗原（組換えヒトＰＤ－１タンパク質）被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ二次抗体（１：５０００、１％カゼイン含有）で行われた。分析の結果から、ＶＨＨ変異体は組換えヒトＰＤ－Ｌ１と組換えヒトＰＤ－１の結合を効果的に阻害できたことが明らかになった。
実施例１５包含ＶＨＨ変異体を含む融合タンパク質の構築
親和性の高いＶＨＨ変異体を選択し、その遺伝子配列およびＦｃ配列を全長配列に合成し、ｐｃＤＮＡ３．４プラスミドをＮｏｔＩ／ＸｂａＩで酵素消化し（ＮＥＢ， Ｃａｔ． Ｒ０１８９Ｌ、Ｒ０１４５Ｌ）、上記の全長配列と組換えし、組換えプラスミドをＴＯＰ１０コンピテントに形質転換し、菌液を塗布し、３７℃で１６～２０時間培養した。プレートから単一コロニーを選択してコロニーＰＣＲを行い、電気泳動により陽性クローンを同定し、陽性クローンを選定して配列決定を行い、正しく配列決定されたクローンについて拡大培養を行い、プラスミドを抽出した。ＨＥＫ２９３細胞をリポソームトランスフェクション試薬で一過性にトランスフェクションし、３７℃、５％ＣＯ２含有の細胞インキュベーターに入れて、１２５ｒｐｍで回転するオービタルオシレーターでインキュベートした。５日目に、上清を遠心分離で採取し、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａアフィニティークロマトグラフィーで精製し、透析によって緩衝液をリン酸緩衝液に置換することによって、ＶＨＨ変異体を含む融合タンパク質を得た。
親和性の高いＶＨＨ変異体を選択し、その遺伝子配列およびＦｃ配列を全長配列に合成し、ｐｃＤＮＡ３．４プラスミドをＮｏｔＩ／ＸｂａＩで酵素消化し（ＮＥＢ， Ｃａｔ． Ｒ０１８９Ｌ、Ｒ０１４５Ｌ）、上記の全長配列と組換えし、組換えプラスミドをＴＯＰ１０コンピテントに形質転換し、菌液を塗布し、３７℃で１６～２０時間培養した。プレートから単一コロニーを選択してコロニーＰＣＲを行い、電気泳動により陽性クローンを同定し、陽性クローンを選定して配列決定を行い、正しく配列決定されたクローンについて拡大培養を行い、プラスミドを抽出した。ＨＥＫ２９３細胞をリポソームトランスフェクション試薬で一過性にトランスフェクションし、３７℃、５％ＣＯ２含有の細胞インキュベーターに入れて、１２５ｒｐｍで回転するオービタルオシレーターでインキュベートした。５日目に、上清を遠心分離で採取し、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａアフィニティークロマトグラフィーで精製し、透析によって緩衝液をリン酸緩衝液に置換することによって、ＶＨＨ変異体を含む融合タンパク質を得た。
実施例１６ 抗原タンパク質への結合におけるＶＨＨ変異体を含む融合タンパク質の組換えヒトＰＤ－Ｌ１との競合のＥＬＩＳＡ実験
組換えヒトＰＤ－Ｌ１（Ｃ－Ｆｃ、０．２μｇ／ウェル）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＶＨＨ変異体融合タンパク質を、０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳを用いて開始濃度１０μｇ／ｍＬで２倍勾配希釈した。０．５μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－１（Ｃ－Ｆｃ ＆ Ｃ－Ａｖｉ ＆ Ｃ－６×Ｈｉｓ）および濃度の異なるＶＨＨ変異体融合タンパク質を、抗原被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジン（１：１００００）で行われた。分析の結果から、ＶＨＨ変異体融合タンパク質は組換えヒトＰＤ－Ｌ１と組換えヒトＰＤ－１の結合を効果的に阻害できたことが明らかになった。
組換えヒトＰＤ－Ｌ１（Ｃ－Ｆｃ、０．２μｇ／ウェル）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。１％カゼインでブロッキングした。ＶＨＨ変異体融合タンパク質を、０．１％ＢＳＡ／ＰＢＳを用いて開始濃度１０μｇ／ｍＬで２倍勾配希釈した。０．５μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－１（Ｃ－Ｆｃ ＆ Ｃ－Ａｖｉ ＆ Ｃ－６×Ｈｉｓ）および濃度の異なるＶＨＨ変異体融合タンパク質を、抗原被覆された９６ウェルプレートに加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジン（１：１００００）で行われた。分析の結果から、ＶＨＨ変異体融合タンパク質は組換えヒトＰＤ－Ｌ１と組換えヒトＰＤ－１の結合を効果的に阻害できたことが明らかになった。
実施例１７ ナノボディのヒト化および抗原タンパク質に対するヒト化ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性の検出
オリジナルのラクダ抗体ＭＨＰＤ１－Ａの配列に対して、データベース配列解析を行うことによって、参照ヒト配列Ｇｅｒｍｅｌｉｎｅを特定し、第１ラウンドでヒト化後に、ヒト化の程度が８６．４４％から９０．６８％であり、それらをナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質に構築し、ＥｘｐｉＣＨＯ－ｓで一過性に発現し、ヒト化の程度および親和性に基づいて、第２ラウンドのヒト化を行い、第２ラウンドでヒト化後に、ヒト化の程度が全て９０％以上になり、それらをナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質に構築し、ＥｘｐｉＣＨＯ－ｓで一過性に発現し、結合活性を検証するように、ヒト化配列を設計した。
抗原タンパク質（ヒトＰＤ－１）に対するヒト化の程度の異なるナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性は、２ラウンドでヒト化後、それぞれＥＬＩＳＡ法で検証された。それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓ抗原タンパク質を、９６ウェルＥＬＩＳＡプレートに３０μＬ／ウェルで加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。二次抗体Ｇｏａｔ－Ａｎｔｉ－Ｈｕｍａｎ－ＩｇＧ－Ｆｃ－ＨＲＰ（Ｓｉｇｍａから購入）を１：８０００に希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で５０分間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。ＴＭＢ（ＳｕｒＭｏｄｉｃｓから購入）を各ウェルに３０μＬ／ウェルで加えて、室温、暗所で１分～５分間発色させた。２Ｍ塩酸を３０μＬ／ウェルで加え、反応を停止させた。ＯＤ４５０の吸光度値を、マイクロプレートリーダーで読み取った。Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出して表６に示した。その結果から、ヒト化ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質は、依然として抗原タンパク質に効果的に結合することができ、ヒト化ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の一部は抗原タンパク質に対する親和性が親抗体と同等以上であったことが明らかになった。
オリジナルのラクダ抗体ＭＨＰＤ１－Ａの配列に対して、データベース配列解析を行うことによって、参照ヒト配列Ｇｅｒｍｅｌｉｎｅを特定し、第１ラウンドでヒト化後に、ヒト化の程度が８６．４４％から９０．６８％であり、それらをナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質に構築し、ＥｘｐｉＣＨＯ－ｓで一過性に発現し、ヒト化の程度および親和性に基づいて、第２ラウンドのヒト化を行い、第２ラウンドでヒト化後に、ヒト化の程度が全て９０％以上になり、それらをナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質に構築し、ＥｘｐｉＣＨＯ－ｓで一過性に発現し、結合活性を検証するように、ヒト化配列を設計した。
抗原タンパク質（ヒトＰＤ－１）に対するヒト化の程度の異なるナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性は、２ラウンドでヒト化後、それぞれＥＬＩＳＡ法で検証された。それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓ抗原タンパク質を、９６ウェルＥＬＩＳＡプレートに３０μＬ／ウェルで加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。二次抗体Ｇｏａｔ－Ａｎｔｉ－Ｈｕｍａｎ－ＩｇＧ－Ｆｃ－ＨＲＰ（Ｓｉｇｍａから購入）を１：８０００に希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で５０分間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。ＴＭＢ（ＳｕｒＭｏｄｉｃｓから購入）を各ウェルに３０μＬ／ウェルで加えて、室温、暗所で１分～５分間発色させた。２Ｍ塩酸を３０μＬ／ウェルで加え、反応を停止させた。ＯＤ４５０の吸光度値を、マイクロプレートリーダーで読み取った。Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出して表６に示した。その結果から、ヒト化ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質は、依然として抗原タンパク質に効果的に結合することができ、ヒト化ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の一部は抗原タンパク質に対する親和性が親抗体と同等以上であったことが明らかになった。
実施例１８ ヒト化ナノボディの親和性成熟および抗原に対するナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性検出（第１ラウンド）
親抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－Ｈ１９のＶＨＨを第二者のファージディスプレイベクターにクローニングした。そのＨＣＤＲに対して１点変異または３点連続変異をそれぞれ行い、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを構築するように、一連のプライマーを設計した。イムノチューブスクリーニング（すなわち、固相スクリーニング）を用いて、イムノチューブを抗原タンパク質ｈＰＤ－１－Ｈｉｓで被覆し、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを加えて、インキュベート、洗浄、溶出を行い、２～３ラウンドのパニングを経て、親和性の高い特異的モノクローナル抗体を濃縮した。親和性成熟スクリーニングを経て、ｈＰＤ－１－Ｈｉｓ抗原に親和性の高い候補抗体をＥＬＩＳＡレベルでスクリーニングし、ＶＨＨレベルでの親和性と配列に基づいて、１４個の候補分子を選択し、ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を構築した。
ＥＬＩＳＡ法による、抗原タンパク質（ｈＰＤ－１－ｈｉｓ）に対する親和性成熟したナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性の検証：９６ウェルＥＬＩＳＡプレートに、それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓ抗原タンパク質を３０μＬ／ウェルで加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。二次抗体Ｇｏａｔ－Ａｎｔｉ－Ｈｕｍａｎ－ＩｇＧ－Ｆｃ－ＨＲＰを１：８０００に希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で５０分間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで９回洗浄した。ＴＭＢを各ウェルに３０μＬ／ウェルで加え、室温、暗所で１分～５分間発色させた。２Ｍ塩酸を３０μＬ／ウェルで加え、反応を停止させた。ＯＤ４５０の吸光度値を、マイクロプレートリーダーで読み取った。Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出した（表７を参照）。その結果から、複数のナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質は、親和性成熟後、抗原タンパク質ヒトＰＤ－１への結合活性が親ＭＨＰＤ１－Ａ－Ｈ１９ Ｆｃよりも優れていたことが明らかになった。
親抗体ＭＨＰＤ１－Ａ－Ｈ１９のＶＨＨを第二者のファージディスプレイベクターにクローニングした。そのＨＣＤＲに対して１点変異または３点連続変異をそれぞれ行い、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを構築するように、一連のプライマーを設計した。イムノチューブスクリーニング（すなわち、固相スクリーニング）を用いて、イムノチューブを抗原タンパク質ｈＰＤ－１－Ｈｉｓで被覆し、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを加えて、インキュベート、洗浄、溶出を行い、２～３ラウンドのパニングを経て、親和性の高い特異的モノクローナル抗体を濃縮した。親和性成熟スクリーニングを経て、ｈＰＤ－１－Ｈｉｓ抗原に親和性の高い候補抗体をＥＬＩＳＡレベルでスクリーニングし、ＶＨＨレベルでの親和性と配列に基づいて、１４個の候補分子を選択し、ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を構築した。
ＥＬＩＳＡ法による、抗原タンパク質（ｈＰＤ－１－ｈｉｓ）に対する親和性成熟したナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性の検証：９６ウェルＥＬＩＳＡプレートに、それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓ抗原タンパク質を３０μＬ／ウェルで加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。二次抗体Ｇｏａｔ－Ａｎｔｉ－Ｈｕｍａｎ－ＩｇＧ－Ｆｃ－ＨＲＰを１：８０００に希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で５０分間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで９回洗浄した。ＴＭＢを各ウェルに３０μＬ／ウェルで加え、室温、暗所で１分～５分間発色させた。２Ｍ塩酸を３０μＬ／ウェルで加え、反応を停止させた。ＯＤ４５０の吸光度値を、マイクロプレートリーダーで読み取った。Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出した（表７を参照）。その結果から、複数のナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質は、親和性成熟後、抗原タンパク質ヒトＰＤ－１への結合活性が親ＭＨＰＤ１－Ａ－Ｈ１９ Ｆｃよりも優れていたことが明らかになった。
実施例１９ 組換えヒトＰＤ－１への結合における親和性成熟ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の組換えヒトＰＤ－Ｌ１との競合のＥＬＩＳＡ実験
組換えヒトＰＤ－Ｌ１－ｍＦｃ（８μｇ／ｍＬ）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で１時間インキュベートした。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。０．５μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－１－Ｆｃ－Ｂｉｏｔｉｎを、抗原被覆された９６ウェルプレートに３０μＬ／ウェルで加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジン（１：１００００）で行われ、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＩＣ５０値を算出して表８に示した。その結果から、複数のナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質は、親和性成熟後、リガンドヒトＰＤ－Ｌ１に結合する抗原タンパク質ヒトＰＤ－１に対して競合的阻害活性が親和性成熟前よりも上昇し、かつ陽性対照よりも優れたことが明らかになった。
組換えヒトＰＤ－Ｌ１－ｍＦｃ（８μｇ／ｍＬ）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で１時間インキュベートした。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。０．５μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－１－Ｆｃ－Ｂｉｏｔｉｎを、抗原被覆された９６ウェルプレートに３０μＬ／ウェルで加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジン（１：１００００）で行われ、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＩＣ５０値を算出して表８に示した。その結果から、複数のナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質は、親和性成熟後、リガンドヒトＰＤ－Ｌ１に結合する抗原タンパク質ヒトＰＤ－１に対して競合的阻害活性が親和性成熟前よりも上昇し、かつ陽性対照よりも優れたことが明らかになった。
実施例２０ ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の生物学的活性検出
Ｊｕｒｋａｔ－ＮＦＡＴ－ＰＤ１遺伝子組み換え細胞をエフェクター細胞とし、Ｈｅｐ３Ｂ－ＯＳ８－ＰＤＬ１を標的細胞とし、ＰＤ１／ＰＤＬ１の結合を遮断するナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の生物学的活性を、ルシフェラーゼアッセイシステムによって検出した。Ｈｅｐ３Ｂ－ＯＳ８－ＰＤＬ１細胞を１０％ＦＢＳ添加ＰＲＭＩ１６４０培地に再懸濁し、９６ウェル細胞培養プレートに接種し、細胞インキュベーターに入れて一晩培養した。２日目に、培地を細胞培養プレートから除去し、濃度の異なるナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を含む予め調製済みの培地５０ｕＬおよびＪｕｒｋａｔ－ＮＦＡＴ－ＰＤ１細胞懸濁液５０ｕＬを各ウェルに加えて、二酸化炭素インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）に入れて６時間インキュベートした。細胞培養プレートを取り出して、室温で５～１０分間平衡化し、ルシフェラーゼレポーター遺伝子検出試薬（Ｏｎｅ－ＧｌｏTM Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ ａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ， Ｐｒｏｍｅｇａ）１００ｕＬを各ウェルに加えて、少なくとも３分間インキュベート後に、マイクロプレートリーダーで蛍光シグナルを測定した（表９を参照）。その結果から、親和性成熟した抗体Ａ－３ Ｈ Ｆｃ、Ａ－４ Ｈ Ｆｃ、Ａ－７ Ｈ Ｆｃは下流レポーター遺伝子の蛍光シグナルに対するＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の結合による阻害を効果的に遮断でき、生物学的活性は陽性対照Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂと同等以上であったことが明らかになった。
Ｊｕｒｋａｔ－ＮＦＡＴ－ＰＤ１遺伝子組み換え細胞をエフェクター細胞とし、Ｈｅｐ３Ｂ－ＯＳ８－ＰＤＬ１を標的細胞とし、ＰＤ１／ＰＤＬ１の結合を遮断するナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の生物学的活性を、ルシフェラーゼアッセイシステムによって検出した。Ｈｅｐ３Ｂ－ＯＳ８－ＰＤＬ１細胞を１０％ＦＢＳ添加ＰＲＭＩ１６４０培地に再懸濁し、９６ウェル細胞培養プレートに接種し、細胞インキュベーターに入れて一晩培養した。２日目に、培地を細胞培養プレートから除去し、濃度の異なるナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を含む予め調製済みの培地５０ｕＬおよびＪｕｒｋａｔ－ＮＦＡＴ－ＰＤ１細胞懸濁液５０ｕＬを各ウェルに加えて、二酸化炭素インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）に入れて６時間インキュベートした。細胞培養プレートを取り出して、室温で５～１０分間平衡化し、ルシフェラーゼレポーター遺伝子検出試薬（Ｏｎｅ－ＧｌｏTM Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ ａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ， Ｐｒｏｍｅｇａ）１００ｕＬを各ウェルに加えて、少なくとも３分間インキュベート後に、マイクロプレートリーダーで蛍光シグナルを測定した（表９を参照）。その結果から、親和性成熟した抗体Ａ－３ Ｈ Ｆｃ、Ａ－４ Ｈ Ｆｃ、Ａ－７ Ｈ Ｆｃは下流レポーター遺伝子の蛍光シグナルに対するＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の結合による阻害を効果的に遮断でき、生物学的活性は陽性対照Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂと同等以上であったことが明らかになった。
実施例２１ ナノボディの親和性成熟、ヒトＰＤ－１に対するナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合、およびヒトＰＤ－１への結合におけるヒトＰＤ－Ｌ１との競合的結合活性（第２ラウンド）
親ＭＨＰＤ１－Ａ－７ ＨのＶＨＨを第二者のファージディスプレイベクターにクローニングした。そのＨＣＤＲに対して１点変異または３点連続変異をそれぞれ行い、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを構築するように、一連のプライマーを設計した。イムノチューブスクリーニング（すなわち、固相スクリーニング）を用いて、イムノチューブを抗原タンパク質ｈＰＤ－１－Ｈｉｓで被覆し、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを加えて、インキュベート、洗浄、溶出を行い、２～３ラウンドのパニングを経て、親和性の高い特異的モノクローナル抗体を濃縮した。親和性成熟スクリーニングを経て、ｈＰＤ－１－Ｈｉｓ抗原に親和性の高い候補抗体をＥＬＩＳＡレベルでスクリーニングし、ＶＨＨレベルでの親和性と配列に基づいて、２９個の候補分子を選択し、ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を構築した。
ＥＬＩＳＡ法による、抗原タンパク質（ｈＰＤ－１－ｈｉｓ）に対する親和性成熟したナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性の検証：９６ウェルＥＬＩＳＡプレートに、それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓ抗原タンパク質を３０μＬ／ウェルで加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。二次抗体Ｇｏａｔ－Ａｎｔｉ－Ｈｕｍａｎ－ＩｇＧ－Ｆｃ－ＨＲＰを１：８０００に希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で５０分間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで９回洗浄した。ＴＭＢを各ウェルに３０μＬ／ウェルで加え、室温、暗所で１分～５分間発色させた。２Ｍ塩酸を３０μＬ／ウェルで加え、反応を停止させた。ＯＤ４５０の吸光度値を、マイクロプレートリーダーで読み取った。Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出して表１０に示し、抗原タンパク質ヒトＰＤ－１に対して複数のナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性は、親ＭＨＰＤ１－Ａ－７ Ｈ Ｆｃと同等であった。
親ＭＨＰＤ１－Ａ－７ ＨのＶＨＨを第二者のファージディスプレイベクターにクローニングした。そのＨＣＤＲに対して１点変異または３点連続変異をそれぞれ行い、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを構築するように、一連のプライマーを設計した。イムノチューブスクリーニング（すなわち、固相スクリーニング）を用いて、イムノチューブを抗原タンパク質ｈＰＤ－１－Ｈｉｓで被覆し、親和性成熟ファージディスプレイライブラリーを加えて、インキュベート、洗浄、溶出を行い、２～３ラウンドのパニングを経て、親和性の高い特異的モノクローナル抗体を濃縮した。親和性成熟スクリーニングを経て、ｈＰＤ－１－Ｈｉｓ抗原に親和性の高い候補抗体をＥＬＩＳＡレベルでスクリーニングし、ＶＨＨレベルでの親和性と配列に基づいて、２９個の候補分子を選択し、ナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を構築した。
ＥＬＩＳＡ法による、抗原タンパク質（ｈＰＤ－１－ｈｉｓ）に対する親和性成熟したナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性の検証：９６ウェルＥＬＩＳＡプレートに、それぞれ２μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＤ－１－ｈｉｓ抗原タンパク質を３０μＬ／ウェルで加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。二次抗体Ｇｏａｔ－Ａｎｔｉ－Ｈｕｍａｎ－ＩｇＧ－Ｆｃ－ＨＲＰを１：８０００に希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で５０分間インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで９回洗浄した。ＴＭＢを各ウェルに３０μＬ／ウェルで加え、室温、暗所で１分～５分間発色させた。２Ｍ塩酸を３０μＬ／ウェルで加え、反応を停止させた。ＯＤ４５０の吸光度値を、マイクロプレートリーダーで読み取った。Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＥＣ５０値を算出して表１０に示し、抗原タンパク質ヒトＰＤ－１に対して複数のナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質の結合活性は、親ＭＨＰＤ１－Ａ－７ Ｈ Ｆｃと同等であった。
ヒトＰＤ－１に対する親和性の高い融合タンパク質の一部を選択し、ヒトＰＤ－１への結合における組換えＰＤ－Ｌ１との競合的結合活性を検出した。組換えヒトＰＤ－Ｌ１－ｍＦｃ（８μｇ／ｍＬ）を９６ウェルプレートに加えて、４℃一晩被覆した。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した。５％ＰＢＳ－Ｍｉｌｋを加えて、室温で１時間インキュベートした。全てのナノボディ－Ｆｃ融合タンパク質を、開始濃度１０μｇ／ｍＬで３倍勾配希釈し、３０μＬ／ウェルで各ウェルに加えて、室温で１時間インキュベートした。抗原被覆された９６ウェルプレートに０．５μｇ／ｍＬ組換えヒトＰＤ－１－Ｆｃ－Ｂｉｏｔｉｎを３０μＬ／ウェルで加えて、室温で１時間インキュベートした。ウェルプレートは異なるインキュベーションの間にＰＢＳＴで洗浄された。検出は、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジン（１：１００００）で行われ、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、曲線をフィッティングしＩＣ５０値を算出して表１１に示した。その結果から、ＭＨＰＤ１－Ａ－１５ Ｈ Ｆｃは、親和性成熟後、リガンドｈ－ＰＤ－Ｌ１に結合する抗原タンパク質に対して競合的阻害活性が親和性成熟前よりも上昇し、複数の融合タンパク質の競合的阻害活性が陽性対照よりも優れたことが明らかになった。
Claims (80)
- 参照抗体と同じまたは重複するＰＤ－１エピトープに結合する
単離された抗原結合タンパク質。 - ＰＤ－１への結合について前記参照抗体と競合する
請求項１に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - ＰＤ－１に対する結合親和性は、前記参照抗体のＰＤ－１に対する結合親和性と実質的に同じである
請求項１～２のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 以下の特性、すなわち
１）ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、約１１μｇ／ｍＬ以下のＥＣ５０で、ＰＤ－１に結合すること、
２）競合ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、約２μｇ／ｍＬ以下のＥＣ５０で、ヒトＰＤ－Ｌ１のヒトＰＤ－１への結合を阻害することの１つ以上を有する
請求項１～３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 霊長類由来のＰＤ－１に結合可能である
請求項１～４のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記霊長類は、ヒトおよび／またはサルを含む
請求項５に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む
請求項１～６のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む
請求項１～７のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む
請求項１～８のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、および配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む
請求項１～９のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＶＨは、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を有する
請求項１０に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む
請求項１～１１のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２を含む
請求項１～１２のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１を含む
請求項１～１３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域ＶＬを含む
請求項１～１４のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＶＬは、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を有する
請求項１５に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記参照抗体は、ペムブロリズマブまたはその抗原結合断片を含む
請求項１～１６のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３を含む
請求項１～１７のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ３は、配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有する
請求項１８に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ３は、配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する
請求項１８～１９のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２を含む
請求項１～２０のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ２は、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有する
請求項２１に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ２は、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する
請求項２１～２２のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１を含む
請求項１～２３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ１は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有する
請求項２４に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ１は、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する
請求項２４～２５のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ１、配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ２および配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ＶＨを含む
請求項１～２６のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＶＨは、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ１、配列番号１４１で表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ２および配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ３を含む
請求項２７に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＶＨは、配列番号１、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０および４１のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ１、配列番号２、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５４のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ２および配列番号３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６および６７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する前記ＨＣＤＲ３を含む
請求項２７～２８のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３は、
１）ＨＣＤＲ１：配列番号１、ＨＣＤＲ２：配列番号２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２）ＨＣＤＲ１：配列番号１、ＨＣＤＲ２：配列番号４２、およびＨＣＤＲ３：配列番号５５；
３）ＨＣＤＲ１：配列番号４、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４）ＨＣＤＲ１：配列番号５、ＨＣＤＲ２：配列番号４４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
５）ＨＣＤＲ１：配列番号６、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
６）ＨＣＤＲ１：配列番号７、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
７）ＨＣＤＲ１：配列番号８、ＨＣＤＲ２：配列番号４７、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
８）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
９）ＨＣＤＲ１：配列番号１０、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１０）ＨＣＤＲ１：配列番号１１、ＨＣＤＲ２：配列番号４４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１１）ＨＣＤＲ１：配列番号１２、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１２）ＨＣＤＲ１：配列番号１３、ＨＣＤＲ２：配列番号４８、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１３）ＨＣＤＲ１：配列番号１４、ＨＣＤＲ２：配列番号４５、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１４）ＨＣＤＲ１：配列番号１５、ＨＣＤＲ２：配列番号４７、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１５）ＨＣＤＲ１：配列番号１６、ＨＣＤＲ２：配列番号４３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１６）ＨＣＤＲ１：配列番号１７、ＨＣＤＲ２：配列番号４９、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１７）ＨＣＤＲ１：配列番号１８、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１８）ＨＣＤＲ１：配列番号１９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
１９）ＨＣＤＲ１：配列番号２０、ＨＣＤＲ２：配列番号５０、およびＨＣＤＲ３：配列番号５６；
２０）ＨＣＤＲ１：配列番号２１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５７；
２１）ＨＣＤＲ１：配列番号２２、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２２）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５１、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２３）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５８；
２４）ＨＣＤＲ１：配列番号２３、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２５）ＨＣＤＲ１：配列番号２４、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５９；
２６）ＨＣＤＲ１：配列番号２５、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６０；
２７）ＨＣＤＲ１：配列番号２６、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６１；
２８）ＨＣＤＲ１：配列番号２７、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
２９）ＨＣＤＲ１：配列番号２８、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３０）ＨＣＤＲ１：配列番号２９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３１）ＨＣＤＲ１：配列番号２５、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号６２；
３２）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５０、およびＨＣＤＲ３：配列番号６３；
３３）ＨＣＤＲ１：配列番号３０、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３４）ＨＣＤＲ１：配列番号３１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３５）ＨＣＤＲ１：配列番号３２、ＨＣＤＲ２：配列番号５３、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３６）ＨＣＤＲ１：配列番号３３、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
３７）ＨＣＤＲ１：配列番号３４、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６４；
３８）ＨＣＤＲ１：配列番号３５、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５７；
３９）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号５４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４０）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６５；
４１）ＨＣＤＲ１：配列番号３６、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４２）ＨＣＤＲ１：配列番号３７、ＨＣＤＲ２：配列番号５２、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４３）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５９；
４４）ＨＣＤＲ１：配列番号３８、ＨＣＤＲ２：配列番号５４、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４５）ＨＣＤＲ１：配列番号３９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４６）ＨＣＤＲ１：配列番号４０、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号５５；
４７）ＨＣＤＲ１：配列番号４１、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号３；
４８）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６６；
４９）ＨＣＤＲ１：配列番号９、ＨＣＤＲ２：配列番号４６、およびＨＣＤＲ３：配列番号６７
から選択されるアミノ酸配列のいずれか１つの群を含む
請求項２７～２９のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - Ｃ末端が前記ＨＣＤＲ１のＮ末端に直接的または間接的に連結されており、かつ配列番号６８、１４４－１４８、２３０および／または２３５で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ１を含む
請求項１～３０のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ１と前記ＨＣＤＲ２との間に位置し、かつ配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ２を含む
請求項１～３１のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＨＣＤＲ２と前記ＨＣＤＲ３との間に位置し、かつ配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ３を含む
請求項１～３２のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - Ｎ末端が前記ＨＣＤＲ３のＣ末端に直接的または間接的に連結されており、かつ配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ４を含む
請求項１～３３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号６８、１４４－１４８、２３０および／または２３５で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ１、配列番号６９、１４９－１５１および／または２３１で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ２、配列番号７０、１５２－１６１および／または２３２で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ３および配列番号７１、１６２および／または２３３で表されるアミノ酸配列を有するＨ－ＦＲ４を含む
請求項１～３４のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号１３９および／または２３４で表されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＶＨを含む
請求項１～３５のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号１４３および／または２３６で表されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＶＨを含む、
請求項３６に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記ＶＨは、配列番号中７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する
請求項３６～３７のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 抗体またはその抗原結合断片を含む
請求項１～３８のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 単一ドメイン抗体またはその抗原結合断片を含む
請求項３９に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ断片、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ｄｉ－ｓｃＦｖ、ＶＨＨおよび／またはｄＡｂからなる群から選択される
請求項３９～４０のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体および／または完全ヒト抗体を含む
請求項３９～４１のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 配列番号７２－１２０および／または１６３－２２７のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する
請求項１～４２のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 免疫グロブリンＦｃ領域をさらに含む
請求項１～４３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記抗原結合タンパク質の前記ＶＨは、前記Ｆｃ領域に直接的または間接的に連結されている
請求項４４に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記抗原結合タンパク質の前記ＶＨのＣ末端は、前記Ｆｃ領域のＮ末端に直接的または間接的に連結されている
請求項４４～４５のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記抗原結合タンパク質の前記ＶＨは、前記Ｆｃ領域とインフレームで融合している
請求項４４～４６のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記抗原結合タンパク質の前記ＶＨは、リンカーを介して前記Ｆｃ領域に連結されている
請求項４４～４７のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記リンカーはペプチドリンカーを含む
請求項４８に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記リンカーは、柔軟なリンカーを含む
請求項４８～４９のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - Ｎ末端からＣ末端まで順次、前記抗原結合タンパク質の前記ＶＨ、前記リンカーおよび前記Ｆｃ領域を含む
請求項４８～５０のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１由来のＦｃまたはＩｇＧ４由来のＦｃを含む
請求項４４～５１のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 前記Ｆｃ領域は、配列番号１２１－１２５および／または２２８－２２９のいずれか１つで表されるアミノ酸配列を有する
請求項４４～５２のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質。 - 請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質を含む
ポリペプチド。 - 請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質または請求項５４に記載のポリペプチドを含む
免疫複合体。 - 請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質、または請求項５４に記載のポリペプチドをコードする
単離された核酸分子。 - 請求項５６に記載の単離された核酸分子を含む
ベクター。 - 請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質、請求項５４に記載のポリペプチド、請求項５５に記載の免疫複合体、請求項５６に記載の単離された核酸分子および／または請求項５７に記載のベクターを含むおよび／または発現する
細胞。 - 請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質および／または請求項５４に記載のポリペプチドを調製する方法であって、前記単離された抗原結合タンパク質および／またはに記載のポリペプチドの発現を可能にする条件下で、請求項５８に記載の細胞を培養する
方法。 - 請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質、請求項５４に記載のポリペプチド、請求項５５に記載の免疫複合体、請求項５６に記載の単離された核酸分子、請求項５７に記載のベクター、請求項５８に記載の細胞、および任意に薬学的に許容されるアジュバントおよび／または賦形剤を含む
医薬組成物。 - ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法であって、
請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質または請求項５４に記載のポリペプチドを投与することを含む
方法。 - 請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質または請求項５４に記載のポリペプチドを含む
キット。 - ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法を記載した説明書を含む
請求項６２に記載のキット。 - ＰＤ－１の存在および／または含有量を検出するための方法において使用されるキットの調製における請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質または請求項５４に記載のポリペプチドの使用。
- 疾患または病気を予防および／または治療するための医薬品の調製における、請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質および／または請求項５４に記載のポリペプチドの使用。
- 疾患または病気を予防、緩和および／または治療するための請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質、請求項５４に記載のポリペプチド、請求項５５に記載の免疫複合体、請求項５６に記載の単離された核酸分子、請求項５７に記載のベクター、請求項５８に記載の細胞および／または請求項６０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
- 前記疾患または病気は、腫瘍を含む
請求項６５～６６のいずれか１項に記載の使用。 - 前記腫瘍は、固形腫瘍を含む
請求項６７に記載の使用。 - 前記腫瘍は、血液腫瘍を含む
請求項６７～６８のいずれか１項に記載の使用。 - 前記腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含む
請求項６７～６９のいずれか１項に記載の使用。 - 前記腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択される
請求項６７～７０のいずれか１項に記載の使用。 - 疾患または病気を予防および／または治療するための方法であって、請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質、請求項５４に記載のポリペプチド、請求項５５に記載の免疫複合体、請求項５６に記載の単離された核酸分子、請求項５７に記載のベクター、および／または請求項５８に記載の細胞の有効量を必要とする被験者に投与することを含む
方法。 - 前記疾患または病気は、腫瘍を含む
請求項７２に記載の方法。 - 前記腫瘍は、固形腫瘍を含む
請求項７３に記載の方法。 - 前記腫瘍は、血液腫瘍を含む
請求項７３～７４のいずれか１項に記載の方法。 - 前記腫瘍は、ＰＤ－Ｌ１の発現に関連する腫瘍を含む
請求項７３～７５のいずれか１項に記載の方法。 - 前記腫瘍は、黒色腫、肺癌、頭頸部扁平上皮癌、リンパ腫、肝細胞がん、腎細胞がん、尿路上皮がん、結腸直腸がん、および乳癌からなる群から選択される
請求項７３～７６のいずれか１項に記載の方法。 - ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害する方法であって、請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質、請求項５４に記載のポリペプチド、請求項５５に記載の免疫複合体、請求項５６に記載の単離された核酸分子、請求項５７に記載のベクター、および／または請求項５８に記載の細胞の有効量を必要とする被験者に投与することを含む
方法。 - ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質、請求項５４に記載のポリペプチド、請求項５５に記載の免疫複合体、請求項５６に記載の単離された核酸分子、請求項５７に記載のベクター、請求項５８に記載の細胞および／または請求項６０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
- ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の相互作用を阻害するための医薬品の調製における、請求項１～５３のいずれか１項に記載の単離された抗原結合タンパク質および／または請求項５４に記載のポリペプチドの使用。
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