JP2023528305A

JP2023528305A - 抗体製剤及びその使用

Info

Publication number: JP2023528305A
Application number: JP2022572324A
Authority: JP
Inventors: イプ，アナ; パテール，ケタキ; タリー，クレア; トロイハイト，ミヒャエル・ヨット; ジャン，ジュン
Original assignee: アムジエン・インコーポレーテツド
Priority date: 2020-05-29
Filing date: 2021-05-28
Publication date: 2023-07-04
Also published as: CN115697406A; AU2021281445A1; KR20230019145A; EP4157353A1; WO2021243284A1; BR112022024296A2; CA3183934A1

Abstract

抗体製剤並びにこのような製剤を製造及び使用する方法が本明細書で提供される。製剤は、静脈内投与用であり得る。いくつかの実施形態では、製剤は、皮下投与用である。いくつかの実施形態では、製剤は、抗Ｃ５抗体、例えばエクリズマブなどを含む。

Description

関連出願
本願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０２０年５月２９日出願の米国仮特許出願第６３／０３１，６３４号明細書の利益を主張する。

配列表
本願は、電子フォーマットの配列表と共に出願されている。配列表は、２０２１年５月２８日に作成された、サイズが２１．３ｋｂであるＡ－２５９０－ＷＯ－ＰＣＴ＿Ｆｉｎａｌ＿ＳｅｑＬｉｓｔｉｎｇ＿０５２８２０２１という名称のファイルとして提供される。本配列表の電子フォーマットにおける情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本開示は、抗体用製剤並びにこのような製剤を製造及び使用するための方法に関する。

補体系は、免疫応答の一部としてカスケード様式で互いに相互作用する一連のタンパク質を含み、抗体免疫応答とともに補完的な役割を果たし、微生物に対する宿主防御及び炎症性反応の調節において重要な役割を果たす。補体は、３つの経路：古典経路、副経路、及びレクチン経路によって活性化され、各経路は最初は異なるタンパク質に関与するが、全ての経路は補体成分Ｃ３の切断に集まっている。Ｃ３はＣ３ａに切断され、炎症を促進して循環免疫細胞を動員する。一方、Ｃ３ｂは他の成分と複合体を形成して、補体系の後期成分間の反応カスケードを開始する。Ｃ３ｂは他の補体成分と複合体を形成し、Ｃ５コンベルターゼ複合体を形成する。補体成分Ｃ５は、Ｃ５コンベルターゼ複合体によって、Ｃ５ａ及びＣ５ｂに切断される。Ｃ５ａは、炎症細胞の化学誘引物質として作用するなどして、炎症を促進する。Ｃ５ｂは細胞表面に付着したままであり、そこで膜侵襲複合体（ＭＡＣ）の形成を引き起こす。ＭＡＣは、膜にまたがる親水性の細孔であり、細胞に出入りする流体の自由流を促進し、それによって細胞を破壊する。

補体系の調節不全は、様々な病的状態を引き起こす可能性がある。細胞は、補体系の標的が病原性細胞に限定されるように、補体カスケードの影響から細胞を保護するタンパク質を発現する。多くの補体関連障害及び疾患は、補体カスケードによる自己細胞の異常な破壊に関連している。このような障害の例は、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）であり、ＰＮＨは、補体を介した攻撃による赤血球血小板及びその他の血液細胞の破壊を防ぐ１つ以上の細胞保護タンパク質を枯渇させる遺伝子変異から生じる可能性があり、溶血性貧血（細胞溶解による赤血球数の減少）、ヘモグロビン尿症（ＲＢＣ溶解による尿中のヘモグロビン）、及び／又はヘモグロビン血症（ＲＢＣ溶解による血流中の遊離ヘモグロビン）を特徴とし得る。

補体関連障害を治療するために使用できる治療薬は、補体Ｃ５に結合する抗体など、Ｃ５切断を阻害できる薬剤である。このような治療薬の一例は、Ｓｏｌｉｒｉｓ（登録商標）（ＡｌｅｘｉｏｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＨａｖｅｎ，ＣＴ）として販売されているエクリズマブである。別の例は、Ｕｌｔｏｍｉｒｉｓ（登録商標）（ＡｌｅｘｉｏｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＨａｖｅｎ，ＣＴ）として販売されているラブリズマブである。

本開示は、安定で、凝集が少ない、及び／又は他の利点を有する抗体製剤の必要性を満たす製剤を提供する。

本明細書では、抗体製剤並びにこのような製剤を製造及び使用するための方法が提供される。製剤は、医薬製剤又は医薬組成物であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、抗Ｃ５抗体である。

一実施形態では、製剤は、緩衝剤、安定剤、及びキレート剤を含む。いくつかの実施形態では、緩衝液は、酢酸塩を含む。酢酸塩の濃度は、０．１ｍＭ～５０ｍＭ、例えば０．５ｍＭ～５０ｍＭ、１ｍＭ～５０ｍＭ、２．５ｍＭ～４０ｍＭ、５ｍＭ～３０ｍＭ、又は１０ｍＭ～２０ｍＭなどであり得る。一実施形態では、酢酸塩の濃度は、約１０ｍＭである。いくつかの実施形態では、製剤の安定剤は、ポリオール、例えばソルビトールなどである。一実施形態では、ポリオール、例えばソルビトールなどの濃度は、約５％（ｗ／ｖ）である。一実施形態では、製剤中のキレート剤の濃度は、０．０１ｍＭ～０．０５ｍＭ、例えば約０．０５ｍＭなどである。一実施形態では、キレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）である。いくつかの実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００１～０．１％（ｗ／ｖ）、例えば０．０１％（ｗ／ｖ）などである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０である。製剤は、酢酸塩の緩衝能力内のｐＨを有し得る。一実施形態では、ｐＨは、４．５～５．８である。一実施形態では、ｐＨは、約５．２である。

いくつかの実施形態では、抗体は、エクリズマブ又はラブリズマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＤＲＨ１～３が、それぞれ、配列番号１～３又は４、５、及び３のアミノ酸配列を有するＣＤＲＨ１～３を含み得る。一実施形態では、抗体はＣＤＲＬ１～３を含み、ＣＤＲＬ１～３のアミノ酸配列は、それぞれ、配列番号１２～１４である。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６又は７の重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１５の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８又は９のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１６のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を有する重鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体の濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬである。

図１は、検出可能な微量金属を含まないソルビトール製剤、検出可能な微量金属を含むソルビトール製剤（２つの異なるロットであるロットＡ及びロットＢからのエクリズマブ）、及びＰＢＳ製剤中の１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブについて、２５℃で６カ月間のＳＥ－ＵＨＰＬＣにより測定された高分子量種のパーセンテージを示している。図２は、５０℃でのＰＢＳ製剤、ＥＤＴＡを含まないソルビトール製剤、及びＥＤＴＡを含むソルビトール製剤中のエクリズマブの相対効力（％）を示している。図３は、４０℃で１３週間、様々な濃度のＥＤＴＡを含むソルビトール製剤のＨＩＣ－ＨＰＬＣプレピークによって測定された、エクリズマブの酸化形態のパーセンテージを示している。図４は、４０℃で１３週間、様々な濃度のＥＤＴＡを含むソルビトール製剤のＳＥ－ＵＨＰＬＣによって測定された、高分子量種のパーセンテージを示している。図５は、５０℃で１４日間のインキュベーションの強制劣化条件（ＦＤ）下での、非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブ薬剤製品（ＤＰ）（ＧＭＰＤＰ１、ＧＭＰＤＰ２、ＧＭＰＤＰ３）、及びＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰ（ＳＵＳＤＰ）について、ＳＥ－ＵＨＰＬＣにより測定された高分子量種のパーセンテージを示している。図６Ａは、５０℃で２週間のインキュベーションの強制劣化条件（ＦＤ）下での、非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブ薬剤製品（ＤＰ）（ＧＭＰ１ＤＰ、ＧＭＰ２ＤＰ）、及びＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰ（ＳＵＳＤＰ）のＷ１０７の酸化のパーセンテージを示している。図６Ｂは、５０℃で２週間のインキュベーションの強制劣化条件（ＦＤ）下での、非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブ薬剤製品（ＤＰ）（ＧＭＰ１ＤＰ、ＧＭＰ２ＤＰ）、及びＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰ（ＳＵＳＤＰ）の相対効力（％）を示している。図７は、５０℃で２週間のインキュベーションの強制劣化条件（ＦＤ）下での、非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブ薬剤製品（ＤＰ）（ＧＭＰ２ＤＰ）、及びＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰ（ＳＵＳＤＰ）のＨＩＣ－ＨＰＬＣによって測定されたメインピークのパーセンテージを示している。図８は、５０℃で２週間のインキュベーションの強制劣化条件（ＦＤ）下での、非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブ薬剤製品（ＤＰ）（ＧＭＰ２ＤＰ）、及びＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰ（ＳＵＳＤＰ）のＨＩＣ－ＨＰＬＣによって測定されたプレピークのパーセンテージを示している。

本開示は、抗体製剤並びにこのような製剤を製造及び使用するための方法を提供する。一実施形態では、抗体は、補体タンパク質Ｃ５に特異的に結合する抗体である。抗体は抗Ｃ５抗体であり得る。一実施形態では、抗体は、エクリズマブである。別の実施形態では、抗体は、ラブリズマブである。

一実施形態では、抗体は、ＣＤＲＨ１についてはＧＹＩＦＳＮＹＷＩＱ（配列番号１）のアミノ酸配列、ＣＤＲＨ２についてはＥＩＬＰＧＳＧＳＴＥＹＴＥＮＦＫＤ（配列番号２）のアミノ酸配列、及びＣＤＲＨ３についてはＹＦＦＧＳＳＰＮＷＹＦＤＶ（配列番号３）のアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＤＲＨ１についてはＧＨＩＦＳＮＹＷＩＱ（配列番号４）のアミノ酸配列、ＣＤＲＨ２についてはＥＩＬＰＧＳＧＨＴＥＹＴＥＮＦＫＤ（配列番号５）のアミノ酸配列、及びＣＤＲＨ３については配列番号３のアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲを含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメインを含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域を含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域を含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する重鎖を含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する重鎖を含む。

いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＤＲＬ１についてはＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１２）のアミノ酸配列、ＣＤＲＬ２についてはＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１３）のアミノ酸配列、及びＣＤＲＬ２についてはＱＮＶＬＮＴＰＬＴ（配列番号１４）のアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲを含む。

一実施形態では、抗体は、
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＴＮＬＡＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＮＶＬＮＴＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１５）
のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域を含む。

一実施形態では、抗体は、

のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。

一実施形態では、抗体は、ＣＤＲＨ１～３が、それぞれ、配列番号１～３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１～３を含む重鎖；及びＣＤＲＬ１～３が、それぞれ、配列番号１２～１４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１～３を含む軽鎖を含む。別の実施形態では、抗体は、ＣＤＲＨ１～３が、それぞれ、配列番号４、５、及び３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１～３を含む重鎖；並びにＣＤＲＬ１～３が、それぞれ、配列番号１２～１４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１～３を含む軽鎖を含む。

別の実施形態では、抗体は、配列番号６のアミノ酸配列を含む可変領域を含む重鎖及び配列番号１５のアミノ酸配列を含む可変領域を含む軽鎖を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む可変領域を含む重鎖及び配列番号１５のアミノ酸配列を含む可変領域を含む軽鎖を含む。

更に別の実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６及び８のアミノ酸配列を含む可変領域及び定常領域を含む重鎖；並びにそれぞれ、配列番号１５及び１６のアミノ酸配列を含む可変領域及び定常領域を含む軽鎖を含む。更に別の実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７及び９のアミノ酸配列を含む可変領域及び定常領域を含む重鎖；並びにそれぞれ、配列番号１５及び１６のアミノ酸配列を含む可変領域及び定常領域を含む軽鎖を含む。

別の実施形態では、抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの実施形態では、１～３００ｍｇ／ｍＬの抗Ｃ５抗体が、本明細書で開示される製剤中に存在する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の製剤は、１～５０ｍｇ／ｍＬ、１～３００ｍｇ／ｍＬ、１～２５０ｍｇ／ｍＬ、１～２００ｍｇ／ｍＬ、１～１００ｍｇ／ｍＬの抗Ｃ５抗体を含む。一実施形態では、製剤は、１０～５０ｍｇ／ｍＬの抗Ｃ５抗体を含む。一実施形態では、製剤は、３００ｍｇ／ｍＬ未満、２５０ｍｇ／ｍＬ未満、２００ｍｇ／ｍＬ未満、１００ｍｇ／ｍＬ未満、５０ｍｇ／ｍＬ未満、４５ｍｇ／ｍＬ未満、４０ｍｇ／ｍＬ未満、３０ｍｇ／ｍＬ未満、又は２５ｍｇ／ｍＬ未満の抗Ｃ５抗体を含む。一実施形態では、製剤は、約３００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、又は約５ｍｇ／ｍＬの抗Ｃ５抗体を含む。一実施形態では、製剤は、約１０ｍｇ／ｍＬの抗Ｃ５抗体を含む。

いくつかの実施形態では、製剤は、抗Ｃ５抗体（例えば、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖及び配列番号１７の軽鎖を含む約１０ｍｇ／ｍＬの抗体）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩を含む緩衝剤）と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）と、任意選択的に、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））及び／又は界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０）と、を含む。いくつかの実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２である。

いくつかの実施形態では、製剤は、緩衝剤、例えば酢酸塩などを含む。一実施形態では、酢酸塩又は酢酸塩緩衝剤の濃度は、０．１ｍＭ～５０ｍＭ、０．５ｍＭ～５０ｍＭ、１ｍＭ～５０ｍＭ、１ｍＭ～４０ｍＭ、２．５ｍＭ～４０ｍＭ、１ｍＭ～３０ｍＭ、１ｍＭ～２０ｍＭ、１ｍＭ～１０ｍＭ、１ｍＭ～５ｍＭ、５ｍＭ～３０ｍＭ、又は１０ｍＭ～２０ｍＭである。一実施形態では、酢酸塩又は酢酸塩緩衝剤の濃度は、約０．５ｍＭ、約１ｍＭ、約２．５ｍＭ、約５ｍＭ、約１０ｍＭ、約２０ｍＭ、約３０ｍＭ、約４０ｍＭ、又は約５０ｍＭである。一実施形態では、酢酸塩又は酢酸塩緩衝剤の濃度は、１０ｍＭである。

いくつかの実施形態では、製剤は、４．５～５．８のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、製剤は、約４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、又は５．８であるｐＨを有する。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２である。

いくつかの実施形態では、製剤は、安定剤を含む。一実施形態では、安定剤は、ポリオール又は糖である。いくつかの実施形態では、安定剤は、スクロース、ソルビトール、グリセロール、トレハロース（例えば、α，α－トレハロース又はトレハロース二水和物）、マンニトール、デキストロース、デキストラン、グルコース、又はこれらの任意の組み合わせである。一実施形態では、安定剤は、ソルビトールである。安定剤の濃度は、０～５０％（ｗ／ｖ）の安定剤であり得る。いくつかの実施形態では、製剤は、０～２５％（ｗ／ｖ）の安定剤を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、０～２０％（ｗ／ｖ）、５～５０％（ｗ／ｖ）、１０～２０％（ｗ／ｖ）、０～１０％（ｗ／ｖ）、５～１０％（ｗ／ｖ）、又は２～１０％（ｗ／ｖ）の安定剤を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、約１．５％、約２％、約２．５％、約３％、約３．５％、約４％、約４．５％、約５％、約５．５％、約６％、約６．５％、約７％、約７．５％、約８％、約８．５％、約９％、約９．５％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、又は約２０％（ｗ／ｖ）の安定剤、例えばソルビトールなどを含む。一実施形態では、製剤は、約５％（ｗ／ｖ）のソルビトールを含む。

一実施形態では、製剤は、キレート剤を含む。キレート剤は、１，４，７，１０－テトラアザシクロドデカン－１，４，７，１０－四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，７－トリアザシクロノナン、１－グルタル酸－４，７酢酸（ＮＯＤＡＧＡ）、１，４，７－トリアザシクロノナン－１，４，７－三酢酸（ＮＯＴＡ）、ヒドラジン－ニコチン酸（ＨＹＮＩＣ）、メルカプトアセチルグリシルトリグリシン（ＭＡＧ３）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラミン（ＴＥＴＡ）、イミノ二酢酸、ジエチレントリアミン－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，Ｎ’’－五酢酸（ＤＴＰＡ）、及び／又はこれらの組み合わせであり得る。一実施形態では、キレート剤はＥＤＴＡである。キレート剤の濃度は、０．０１ｍＭ～０．１０ｍＭ、例えば約０．０１ｍＭ、０．０２ｍＭ、０．０３ｍＭ、０．０４ｍＭ、０．０５ｍＭ、０．０６ｍＭ、０．０７ｍＭ、０．０８ｍＭ、０．０９ｍＭ、又は０．１０ｍＭなどであり得る。一実施形態では、ＥＤＴＡなどのキレート剤の濃度は、約０．０５ｍＭである。

一実施形態では、製剤はまた、界面活性剤を含む。界面活性剤は、ポリオキシエチレングリコールアルキルエーテル、ポリオキシプロピレングリコールアルキルエーテル、グルコシドアルキルエーテル、ポリオキシエチレングリコールオクチルフェノールエーテル、ポリオキシエチレングリコールアルキルフェノールエーテル、グリセロールアルキルエステル、ポリオキシエチレングリコールソルビタンアルキルエステル、ソルビタンアルキルエステル、コカミドＭＥＡ、コカミドＤＥＡ、ドデシルジメチルアミンオキシド、ポロキサマー、ポリエトキシル化獣脂アミン（ＰＯＥＡ）、又はこれらの組み合わせであり得る。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０である。別の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０である。更に別の実施形態では、界面活性剤は、ポロキサマー、例えばポロキサマー１８８などである。一実施形態では、界面活性剤は、プルロニック（登録商標）Ｆ－６８である。いくつかの実施形態では、製剤は、０．００１～３％（ｗ／ｖ）、０．００１～２％（ｗ／ｖ）、０．００１～１％（ｗ／ｖ）、０．００１～０．５％（ｗ／ｖ）、又は０．０１％～０．１％（ｗ／ｖ）の界面活性剤を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、約０．０１％（ｗ／ｖ）の界面活性剤、例えばポリソルベート８０などを含む。

いくつかの実施形態では、製剤は、１つ以上の更なる賦形剤又は薬物、例えば防腐剤、緩衝剤、等張化剤、酸化防止剤、安定剤、非イオン性の湿潤剤若しくは清澄剤、及び／又は増粘剤などを更に含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される製剤は、静脈内注射又は点滴（ＩＶ）、皮下注射（ＳＣ）、腹腔内（ＩＰ）注射、眼内注射、関節内注射、又は筋肉内注射（ＩＭ）に使用される。

製剤は、補体－関連障害、例えば、リウマチ性関節炎（ＲＡ）；抗リン脂質抗体症候群；ループス腎炎；虚血再かん流障害；非典型溶血性***症候群（ａＨＵＳ）；典型若しくは感染性の溶血性***症候群（ｔＨＵＳ）；デンスデポジット病（ＤＤＤ）；発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）；視神経脊髄炎（ＮＭＯ）若しくは視神経脊髄炎スペクトラム障害（ＮＭＯＳＤ）；多巣性運動ニューロパチー（ＭＭＮ）；多発性硬化症（ＭＳ）；黄斑変性症（例えば加齢黄斑変性（ＡＭＤ）など）；溶血、肝酵素上昇、及び低血小板（ＨＥＬＬＰ）症候群；血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）；自然胎児消失；Ｐａｕｃｉ－免疫性血管炎；表皮水疱症；習慣性流産；又は外傷性脳損傷などを治療又は予防するために使用することができる。いくつかの実施形態では、補体－関連障害は、糖尿病が関連した血管障害、網膜中心静脈閉塞症、心血管障害、心筋炎、脳血管障害、末梢血管障害、腎血管障害、腸間膜／腸血管障害、移植及び／若しくは再移植に対する血管再開通術、血管炎、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病腎炎、全身性エリテマトーデス関連血管炎、関節リウマチ関連血管炎、免疫複合体性血管炎、高安病、拡張型心筋症、糖尿病性血管障害、川崎病（動脈炎）、静脈ガス塞栓症（ＶＧＥ）並びにステント留置、回転性のアテレクトミー、又は経皮経管冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）の後の再狭窄などの補体－関連血管障害である。いくつかの実施形態では、補体－関連障害は、重症筋無力症（ＭＧ）、寒冷凝集素症、皮膚筋炎、グレーブス病、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、ギランバレー症候群、デゴス病、移植片拒絶（例えば移植による拒絶反応）、敗血症、火傷（例えば重度の火傷）、全身性炎症反応性の敗血症、敗血性ショック、脊髄損傷、糸球体腎炎、橋本甲状腺炎、Ｉ型糖尿病、乾癬、天疱瘡、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、グッドパスチャー症候群、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、又は劇症型ＡＰＳ（ＣＡＰＳ）である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される製剤は、血栓性微小血管症（ＴＭＡ）、補体関連障害が関連したＴＭＡなどを治療するための方法で使用することができる。一実施形態では、製剤は、ＰＮＨ、ａＨＵＳ、全身性ＭＧ（ｇＭＧ）若しくは難治性ｇＭＧ、及び／又はＮＭＯＳＤを治療するためのものである。

いくつかの実施形態では、製剤は、例えば対象への抗体の全身送達のために薬学的に許容される希釈剤に希釈することができる抗Ｃ５抗体の濃縮溶液である。一実施形態では、１０ｍｇ／ｍＬの濃度の３００ｍｇの抗Ｃ５抗体の単一ユニットバイアル中にあり、５ｍｇ／ｍＬの最終濃度に希釈することができる。希釈剤は、塩化ナトリウム溶液（例えば、０．４５％又は０．９％の塩化ナトリウム）、デキストロース溶液（例えば、水中５％のデキストロース）、又はリンゲル液であり得る。

いくつかの実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より安定性が高い。例えば、特定のｐＨ（例えば、約５．２）で抗Ｃ５抗体（例えば、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩）と、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））と、界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ））と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）とを含む製剤は、ＥＤＴＡを含まない同様の製剤（すなわち、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のＰＳ８０、ｐＨ５．２）、又は緩衝剤と、等張化剤と、界面活性剤とを含み、キレート剤を含まない別の製剤（例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のＰＳ８０、ｐＨ７．０））よりも安定であり得る。

一実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より、一定期間（例：約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日）日、約１２日、約１３日、約１４日、若しくは約１５日；又は約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約１３週間、約１４週間、若しくは約１５週間）後に、安定性が高い。一実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より、約５０℃、４０℃、約３０℃、約２５℃、約５℃、約－２０℃、又は約－３０℃などの所定の温度又はストレス条件で、安定性が高い。

一実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より、一定期間後及び所定の温度（例：約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日）日、約１２日、約１３日、約１４日、若しくは約１５日；又は約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約１３週間、約１４週間、若しくは約１５週間；約５０℃、４０℃、約３０℃、約２５℃、約５℃、約－２０℃、又は約－３０℃）後で、安定性が高い。

製剤の安定性は、当該技術分野において公知の任意の方法によって決定することができる。一実施形態では、製剤の安定性は、クロマトグラフィー、例えばサイズ排除クロマトグラフィー、例えばサイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ－ＨＰＬＣ）若しくはサイズ排除超高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ－ＵＨＰＬＣ）又は疎水性高速液体クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）によって判断され、ここで、ストレスプロセス及び／又は保存条件前の第１の製剤からの第１のピークの変化又は差が、ストレスプロセス及び／又は保存条件後の同じ製剤からの第２のピークと比較して小さく、ストレスプロセス及び／又は保存条件前後のそれぞれの第１のピーク及び第２のピークの変化又は差が大きい第２の製剤と比較して小さいことは、第１の製剤が第２の製剤よりも安定していることを示す。

別の実施形態では、製剤の安定性は、製剤の濁度（例えば、ＯＤ４０５ｎｍでの測定など）、回収されたタンパク質の割合（例えば、ＳＥ－ＨＰＬＣにより判断される）及び／又はタンパク質の純度（例えば、ＳＥ－ＨＰＬＣにより測定される）によって測定され、ここで、より低い濁度、より高い回収率及びより高い純度が高い安定生を示す。いくつかの実施形態では、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（還元又は非還元）を使用して、製剤の安定性を判断する。いくつかの実施形態では、ＣＥ－ＳＤＳ（還元又は非還元）を使用して、製剤の安定性を判断する。いくつかの実施形態では、非対称フロー式フィールドフローフラクショネーション（ＡＦ４）が使用される。他の実施形態では、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、例えばキャピラリー等電点電気泳動（ｃＩＥＦ）が使用される。いくつかの実施形態では、ＡＥＸ－ＨＰＬＣが使用される。第２の製剤と比較して、第１の製剤でのフラグメントの増加及び／又はＩＥＦの変化は、第１の製剤の安定性が低いことを示す。任意の１つの方法又は方法の組み合わせを使用して製剤の安定性を判断することができる。

いくつかの実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より力価が高い。例えば、特定のｐＨ（例えば、約５．２）で抗Ｃ５抗体（例えば、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩）と、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））と、界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ））と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）とを含む製剤は、ＥＤＴＡなどのキレート剤を含まない同様の製剤（すなわち、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のＰＳ８０、ｐＨ５．２）、又は緩衝剤と、等張化剤と、界面活性剤とを含み、キレート剤を含まない別の製剤（例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のＰＳ８０、ｐＨ７．０））よりも力価が高い。力価は、当該技術分野で公知の任意のアッセイによって決定することができる。抗Ｃ５抗体が補体タンパク質Ｃ５の活性を阻害する能力を測定することによっても力価を決定することができる。

一実施形態では、溶血アッセイは、抗Ｃ５抗体の力価を決定するために使用される。一実施形態では、アッセイは、抗Ｃ５抗体による末端補体活性化の下流のエンドポイントであるニワトリ赤血球溶解の阻害を定量化する生物学的特性評価方法である。このアッセイでは、様々な濃度の抗Ｃ５抗体を一定濃度の正常ヒト血清とインキュベートする。次いで、この混合物を、ウサギ抗ニワトリ赤血球抗体でコーティングされたニワトリ赤血球と共にインキュベートする。インキュベーション後、混合物を遠心分離し、上澄みに放出されたヘモグロビンの吸光度（例えば、Ａ４０５ｎｍで）を測定することにより、溶血の程度を定量化する。補体活性化の量は、吸光度の強度と相関する。結果は、パーセント相対力価（％力価）値として報告できる。

別の実施形態では、力価は、生成される生成物の量が補体の機能活性に比例する、末端補体活性化から生じる生成物の検出による補体活性化の溶血アッセイによって決定される。一実施形態では、アッセイは、ヒト血清中の補体タンパク質Ｃ５の活性化を阻害する抗Ｃ５抗体の能力を測定する酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）である。アッセイは、生成される産物（例えば、Ｃ５ｂ－９ネオ抗原）の量が補体の機能活性に比例する末端補体活性化の結果として産生される生成物（例えば、ヒトＣ５ｂ－９モノクローナル抗体が特異的であるネオ抗原）に対して標識検出剤（例えば、アルカリホスファターゼ標識ヒトＣ５ｂ－９モノクローナル抗体に特異的）を使用することができる。一実施形態では、様々な濃度の抗Ｃ５抗体を、補体アクチベーター（ザイモサンなど）の存在下で一定濃度の正常ヒト血清とインキュベートする。インキュベーション中、正常なヒト血清補体はザイモサンによって活性化され、末端補体活性化の結果として生成されるＣ５ｂ－９複合体がザイモサンに結合する。Ｃ５ｂ－９はアルカリホスファターゼ標識Ｃ５ｂ－９抗体で検出され、検出されたＣ５ｂ－９の量は補体活性化の量と相関する。アッセイは、標識されたＣ５ｂ－９の抗Ｃ５抗体用量依存検出を測定する（すなわち、抗体用量の増加、Ｃ５ｂ－９の検出の減少、したがって補体活性化）。試験サンプルの活性は、試験サンプルの応答を参照標準で得られた応答と比較することによって決定できる（すなわち、相対力価）。

一実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より、一定の期間（例えば、約１週間、約２週間；又は約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日、約１２日、約１３日、約１４日、若しくは１５日）後に、力価が高い。

例えば、特定のｐＨ（例えば、約５．２）で抗Ｃ５抗体（例えば、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩）と、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））と、界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ））と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）とを含む製剤は、ＥＤＴＡなどのキレート剤を含まない同様の製剤（すなわち、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のＰＳ８０、ｐＨ５．２）、又は緩衝剤と、等張化剤と、界面活性剤とを含むキレート剤を含まない別の製剤（例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のＰＳ８０、ｐＨ７．０））よりも、約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日、約１２日、約１３日、約１４日、又は約１５日後に、力価を高くすることができる。

いくつかの実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より凝集が少ない。例えば、特定のｐＨ（例えば、約５．２）で抗Ｃ５抗体（例えば、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩）と、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））と、界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ））と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）とを含む製剤は、ＥＤＴＡなどのキレート剤を含まない同様の製剤（すなわち、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のＰＳ８０、ｐＨ５．２）、又は緩衝剤と、等張化剤と、界面活性剤とを含み、キレート剤を含まない別の製剤（例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のＰＳ８０、ｐＨ７．０））よりも凝集が少ない。凝集レベルは、サイズ排除超高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ－ＵＨＰＬＣ）又は疎水性相互作用クロマトグラフ高速液体クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）などの当該技術分野で公知の方法によって決定することができる。

一実施形態では、抗Ｃ５抗体をキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）とともに含む製剤は、キレート剤を含まない製剤より、一定の期間（例えば、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約１３週間、約１４週間、又は約１５週間）後に、凝集が少ない。

例えば、特定のｐＨ（例えば、約５．２）で抗Ｃ５抗体（例えば、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩）と、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））と、界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ））と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）とを含む製剤は、ＥＤＴＡなどのキレート剤を含まない同様の製剤（すなわち、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のＰＳ８０、ｐＨ５．２）、又は緩衝剤と、等張化剤と、界面活性剤とを含み、キレート剤を含まない別の製剤（例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のＰＳ８０、ｐＨ７．０））よりも、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約１３週間、約１４週間、又は約１５週間後に、凝集を減らすことができる。

別の例では、特定のｐＨ（例えば、約５．２）で抗Ｃ５抗体（例えば、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩）と、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））と、界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ））と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）とを含む製剤は、ＥＤＴＡなどのキレート剤を含まない同様の製剤（すなわち、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のＰＳ８０、ｐＨ５．２）、又は緩衝剤と、等張化剤と、界面活性剤とを含み、キレート剤を含まない別の製剤（例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のＰＳ８０、ｐＨ７．０））よりも、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約１３週間、約１４週間、又は約１５週間後に；約５０℃、４０℃、約３０℃、約２５℃、約５℃、約－２０℃、又は約－３０℃で、凝集を減らすことができる。

理論に束縛されるものではないが、特定のｐＨ（例えば、約５．２）で抗Ｃ５抗体（例えば、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ）と、緩衝剤（例えば、１０ｍＭの酢酸塩）と、安定剤（例えば、５％のソルビトール（ｗ／ｖ））と、界面活性剤（例えば、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ））と、キレート剤（例えば、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ）とを含む製剤は、ＥＤＴＡなどのキレート剤を含まない同様の製剤（すなわち、１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のＰＳ８０、ｐＨ５．２）、又は緩衝剤と、等張化剤と、界面活性剤とを含み、キレート剤を含まない別の製剤（例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のＰＳ８０、ｐＨ７．０））よりも、力価を高く、且つ／又は凝集を低くすることができる、なぜなら、抗Ｃ５抗体は、微量金属の存在により重鎖に酸化修飾を有する可能性があり、それが構造変化を引き起こし、凝集体形成の増加且つ／又は生物活性の低下をもたらす可能性があるためである。例えば、エクリズマブは、重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＨ－３）トリプトファン（配列番号３の９位であって、配列番号１０の１０７位に対応する）、Ｗ１０７に酸化修飾を有する可能性があり、これは、構造変化及び凝集体形成を引き起こす可能性があり、微量金属の存在により、生物活性が低下する。エクリズマブを含む製剤中の微量金属の存在は、そのＣＤＲＨ－３の酸化により、微量金属が検出されない製剤と比較して、ＨＭＷ種のパーセンテージが高くなる、及び／又は力価が低くなる可能性がある。検出可能な微量金属を含む製剤中のエクリズマブの不安定性は、エクリズマブの金属触媒酸化（例えば、鉄触媒酸化、フェントン反応）が原因である可能性がある。製剤中のキレート剤の存在は、微量金属の存在の影響を相殺する可能性があり（例えば、鉄触媒酸化、フェントン反応の阻害）、したがって、Ｗ１０７の酸化などのエクリズマブの酸化修飾を減少させる。

いくつかの実施形態では、エクリズマブは、シングルユースシステム（ＳＵＳ）で製造される。いくつかの実施形態では、ＳＵＳで製造されたエクリズマブは、非ＳＵＳで製造されたエクリズマブと比較して、エクリズマブの酸化修飾（例えば、Ｗ１０７の酸化）を減少させた。例えば、いくつかの実施形態では、ＳＵＳで製造されたエクリズマブは、非ＳＵＳで製造されたエクリズマブと比較して、微量金属が減少している。いくつかの実施形態では、ＳＵＳで製造されたエクリズマブ薬剤製品又は原薬には、微量金属が存在しないか、又は誘導結合プラズマ質量分析（ＩＰＣ－ＭＳ）などの従来の手段では検出できない。微量金属が減少した状態で製造されたエクリズマブ及び／又は検出可能な微量金属が存在しないエクリズマブは、検出可能な微量金属を含むエクリズマブと比較して、安定性及び／又は力価が向上している可能性がある（例えば、ＣＲＨ－３トリプトファン（配列番号３の９位であって、配列番号１０の１０５位に対応する）におけるようなエクリズマブの鉄触媒酸化又はフェントン反応などの金属触媒酸化による）。

いくつかの実施形態では、エクリズマブ原薬は、ＳＵＳで製造される。いくつかの実施形態では、エクリズマブ薬剤製品は、ＳＵＳで製造される。いくつかの実施形態では、エクリズマブ原薬及び薬剤製品は、ＳＵＳで製造される。いくつかの実施形態では、ＳＵＳは、プラスチック材料から作られた使い捨て可能な材料の使用を含む。例えば、ＳＵＳで使用される容器は、ＥＭＤＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）から入手可能なものなど、市販のシングルユースプロセス容器、例えば、ＰｕｒｅＦｌｅｘ（商標）フィルムで製造された容器、例えば超低密度ポリエチレン（ＵＬＤＰＥ）で構成された製品層を備えたＰｕｒｅＦｌｅｘ（商標）バッグなどであり得、これは、緩衝剤、製剤、プロセス内保持、及び充填（例えば、サージ槽）の単位操作のための薬剤製品の調製又は製造のためのプロセスで使用することができる。いくつかの実施形態では、ＳＵＳで使用される容器は、金属を含まないか、又は金属を浸出させない材料で作製されている。いくつかの実施形態では、材料は、プラスチックである。いくつかの実施形態では、材料は、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）である。

一実施形態では、ＳＵＳ（例えば、プロセスの１つ以上の工程で金属ではなくプラスチック製の容器を使用するなど）を使用して製造された原薬（例えば、エクリズマブ原薬）で検出される金属レベルは、非ＳＵＳ（例えば、プロセスの同じ対応する工程の１つ以上でのステンレス鋼容器を使用するなど）を使用して製造された原薬よりも低い。一実施形態では、ＳＵＳプロセスは、ステンレス鋼の槽又は容器（例えば、サージ槽）の代わりに、ＳＵＳ槽又は容器（例えば、サージ槽）を通してウイルス濾過された生成物を通過させることを含む。別の実施形態では、ＳＵＳプロセスは、ステンレス鋼の槽又は容器（例えば、濃縮水槽）の代わりに、ＵＦ／ＤＦ後の生成物を回収するためのＳＵＳ槽又は容器（例えば、濃縮水槽）を含む。いくつかの実施形態では、ＤＳは、ＳＵＳ容器（例えば、バッグ）で保存される。

別の実施形態では、ＳＵＳ（例えば、プロセスの１つ以上の工程で金属ではなくプラスチック製の容器を使用するなど）を使用して製造された薬剤製品（例えば、エクリズマブ薬剤製品）で検出される金属レベルは、非ＳＵＳ（例えば、プロセスの同じ対応する工程の１つ以上でのステンレス鋼容器を使用するなど）を使用して製造された薬剤製品よりも低い。薬剤製品が一定期間など保持される製剤及び／又は保持タンクは、ＳＵＳ内のこれらのプラスチック材料（例えば、ＥＶＡ）から作製することができる。プラスチック材料は、金属が浸出しないように、薬剤製品が金属との接触を最小限から全くしないようにすることができる。一実施形態では、金属のレベルは、ＳＵＳを使用して製造された薬剤製品（エクリズマブなど）では検出されないなど、最小限である。非ＳＵＳは、主にシングルユース容器の代わりにステンレス鋼（ＳＳ）成分の使用を含む。例えば、製剤が一定期間保持される製剤及び／又は保持タンクは、プラスチック材料で作製された容器などの使い捨て容器ではなく、ＳＳで作られている。いくつかの実施形態では、これらのＳＳ成分は、製剤化又は濾過された薬剤製品に金属を浸出させる可能性があり、タンパク質の分解を促進する可能性がある。

詳細な説明及び以下の実施例は、本発明を例示するものであり、本発明は、それに限定するものとして解釈されるべきではない。本発明の説明に基づき、当業者によって様々な変更形態及び修正形態がなされ得、そうした変更形態及び修正形態も本発明に含まれる。

実施例１
凍結解凍安定性及び異なる温度条件で保存する能力を有する製剤の開発が行われた。ソルビトール製剤中の１０ｍｇ／ｍＬの濃度でのエクリズマブ（配列番号１０）の液体安定性は、サイズ排除超高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ－ＵＨＰＬＣ）、ペプチドマッピング、疎水性相互作用クロマトグラフィー－高性能液体クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）、及びＥＬＩＳＡ系力価アッセイによって評価された。

５℃の保存条件及び４０℃の加速条件下及び５０℃の強制劣化条件のいずれにおいても、ＥＬＩＳＡ系力価アッセイから生成された力価データに基づいて、ソルビトール製剤（（１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ５．２）中の１０ｍｇ／ｍＬの濃度のエクリズマブは、ＰＢＳ製剤（１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ７．０）中の１０ｍｇ／ｍＬの濃度のエクリズマブと比較して、生成物の不安定性を示した。

本ＥＬＩＳＡ系力価アッセイでは、ヒト血清中の補体タンパク質Ｃ５の活性化を阻害するエクリズマブの能力は、補体の機能活性に比例する生成されたＣ５ｂ－９ネオ抗原の量を決定することによって測定された。様々な濃度のエクリズマブを、ザイモサン（補体アクチベータ）の存在下で一定濃度の正常ヒト血清（ＮＨＳ）とインキュベートした。インキュベーション中、正常なヒト血清補体はアッセイプレート上のザイモサンコーティングによって活性化され、末端補体活性化の結果として生成されるＣ５ｂ－９複合体がザイモサンに結合した。次いで、プレートウェルを洗浄し、アルカリホスファターゼ標識Ｃ５ｂ－９抗体でＣ５ｂ－９を検出した。プレートウェルにアルカリホスファターゼ基質溶液を添加した後、吸光度を４０５ｎｍで測定した。補体活性化の量は、４０５ｎｍの吸光度と相関し、４０５ｎｍの吸光度でのエクリズマブの用量依存的減少の測定値を提供する。次いで、活性は、サンプルの応答を参照標準で得られた応答と比較することによって決定した（相対力価）。

エクリズマブを含むＰＢＳ製剤への鉄のスパイクは、ソルビトール製剤中のエクリズマブで観察される、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ及びペプチドマッピング分析によって決定されたのと同じ分解プロファイルをもたらしたため、不安定性は低レベルの微量金属（＜１ｐｐｍ）によって引き起こされる場合があると考えられた。

これが事実であるかどうかを判断するために、検出可能な微量金属、例えば、鉄（ＩＰＣ－ＭＳによって検出される）を含まないソルビトール製剤（１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ５．２）中の１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、検出可能な微量金属を含むソルビトール製剤（１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ５．２）（２つの異なるロットのエクリズマブは、ソルビトール製剤であるロットＡ及びロットＢで製剤化された）中の１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブ、及びＰＢＳ製剤（１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ７．０）中の１０ｍｇ／ｍＬのエクリズマブを、２５℃で６カ月間保存し、２週間、１カ月、２カ月、３カ月、６カ月の時点でＳＥ－ＵＨＰＬＣで分析した（図１）。ＳＥ－ＵＨＰＬＣは、流体力学的体積の違いに基づいてタンパク質を分離し、流体力学的体積が大きい分子は、体積が小さい分子よりも早く溶出する。サンプルを、ＳＥ－ＵＨＰＬＣカラム（ＢＥＨ２００、ＵＰＬＣカラム、４．６ｍｍ×１５０ｍｍ、１．７μｍ（ＷａｔｅｒｓＣｏｒｐ．，１８６００５２２５）上にロードし、リン酸ナトリウム／塩化ナトリウム緩衝液により均一濃度で分離し、溶出液をＵＶ吸光度（２８０ｎｍ）で監視した。総積分面積と比較した分離された各成分のパーセンテージを計算することによって純度を決定した（ＨＭＷ凝集体のレベルは、総ピーク面積に対するＨＭＷピークの総面積を決定することによって計算した）。

ＳＥＣ－ＵＨＰＬＣで検出される高分子量（ＨＭＷ）種のパーセンテージは、検出可能な微量金属を含むソルビトール製剤では、検出可能な微量金属を含まないソルビトール製剤と比較して、並びにＰＢＳ製剤と比較してより速い速度で増加した。

検出可能な微量金属（例えば、鉄）を含むソルビトール製剤は、検出可能な微量金属を含まないソルビトール製剤と比較して、ＨＭＷ種のパーセンテージが高くなったため、検出可能な微量金属を含むソルビトール製剤中のエクリズマブの不安定性は、エクリズマブの金属触媒酸化（例えば、鉄触媒酸化、フェントン反応）が原因である可能性があると考えられた。ソルビトール製剤中のエクリズマブのペプチドマッピングを実施した。サンプルを減らした後、トリプシン又はＡｓｐ－Ｎで消化する前に、サイズ排除系脱塩カラムによって余分な試薬を除去する。次いで、得られたペプチドを、トリフルオロ酢酸／アセトニトリル（ＴＦＡ／ＡＣＮ）勾配で、ＲＰ－ＨＰＬＣによって分離し、ＭＳ及びＭＳ／ＭＳデータ収集で２１４ｎｍのＵＶによって監視する。各タイプの翻訳後修飾（ＰＴＭ）のレベルを、目的の残基を含む修飾ペプチドのＵＶトレースの積分ピーク面積と、非修飾残基と修飾残基の両方を含むペプチドの積分ピーク面積とを比較した（ＭａｓｓＡｎａｌｙｚｅｒソフトウェアを使用して得られる）。

結果は、重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＨ－３）トリプトファン（配列番号３の９位であって、配列番号１０の１０７位に対応する）、Ｗ１０７上の酸化修飾を表す＋１６Ｄａ、＋３２Ｄａ及び＋１４Ｄａペプチドの形成を示した。これらの修飾に続いて、構造が変化し、凝集体が形成され、生物活性の低下がもたらされる可能性がある。検出可能な微量金属を含むソルビトール製剤中のエクリズマブの相対力価は、検出可能な微量金属を含まないソルビトール製剤中のエクリズマブよりも低いと決定され、この力価の損失は、還元ペプチドマッピングによって決定されるＷ１０７の酸化によるものであると決定された。

検出可能な微量金属を含むソルビトール製剤中のエクリズマブの力価の低下を（例えば、エクリズマブの金属触媒酸化を阻害することによって）減少させることができるかどうかを決定するために、ソルビトール製剤にＥＤＴＡを添加した。ＥＤＴＡを含むソルビトール製剤（１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、０．０５ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ５．２）中のエクリズマブ（１０ｍｇ／ｍＬ）の相対力価を、５０℃の加速条件で２週間、ＰＢＳ製剤（１０ｍＭのリン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ７．０）及びＥＤＴＡを含まないソルビトール製剤（１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール、０．０１％のポリソルベート８０、ｐＨ５．２）中のエクリズマブ（１０ｍｇ／ｍＬ）と比較した（図２）。ソルビトール製剤中のエクリズマブの力価は、ＥＤＴＡを含むソルビトール製剤中のエクリズマブ及びＰＢＳ製剤中のエクリズマブと比較して、はるかに速い速度で減少した。

製剤中のＥＤＴＡの量がエクリズマブの酸化レベルを制御できるかどうかを判断するために、様々な量のＥＤＴＡ（０、０．０１ｍＭ、０．０３ｍＭ、及び０．０５ｍＭ）を、エクリズマブが１０ｍｇ／ｍＬで存在するソルビトール製剤（１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール（ｗ／ｖ）、０．０１％のポリソルベート８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ５．２）中に含ませた。製剤を４０℃で１３週間保存した。エクリズマブの酸化形態の製剤は、ＨＩＣ－ＨＰＬＣプレピークにより測定された（図３）。ＨＩＣ－ＨＰＬＣは、ＡＢＰ９５９トリプトファン酸化種の定量的純度分析に使用した。サンプルを、直列に接続された２つのＨＩＣ－ＨＰＬＣカラム（ＰｒｏｐａｃＨＩＣ－１０，５μｍ，４．６×１００ｍｍ（Ｔｈｅｒｍｏ，０６３６５５））にロードし、硫酸アンモニウム及び酢酸ナトリウム緩衝液の塩勾配が減少する中で分離し、２２０ｎｍの紫外（ＵＶ）吸光度で溶出液を監視した。総積分面積と比較した分離された各成分のパーセンテージを計算することによって純度を決定した。酸化トリプトファンのレベルは、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析によって決定されたプレピークのパーセンテージのレベルと直線的な相関がある（プレピークのパーセンテージは、総積分ピーク面積に対するプレピーク面積に等しくなる）。凝集のレベル（ＨＭＷ種のパーセンテージで測定）は、ＳＥＣ－ＵＨＰＬＣによって決定された（図４）。図３及び４でそれぞれ示されるように、最大量の酸化及びＨＭＷ種が、ＥＤＴＡを含まない製剤で見つかった。

本実施例は、金属触媒酸化（フェントン反応を介して）及びその後の凝集、沈殿、並びにその他の化学修飾を防ぐことで、優れたタンパク質の溶解性及び安定性を提供するエクリズマブ用のＥＤＴＡを含むソルビトール製剤が開発されたことを実証している。ＥＤＴＡを含むエクリズマブの本製剤は、ＰＢＳ製剤だけでなく、ＥＤＴＡを含まないソルビトール製剤よりも優れた安定性を提供する。

実施例２
非シングルユースシステム（ＳＵＳ）を使用して製造されたエクリズマブ薬剤製品（ＤＰ）と、ＳＵＳを使用したエクリズマブＤＰとの比較を実施した。

ＳＵＳ及び非ＳＵＳＤＰの両方について、同じ原薬プロセスを実施した。細胞培養プロセスは、振盪フラスコ、ＷａｖｅＢｉｏｒｅａｃｔｏｒ（商標）（Ｃｙｔｖｉａ，Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ，ＵＳＡ）、５００Ｌのシングルユースバイオリアクター（ＳＵＢ）、及び２０００Ｌの生産ＳＵＢで実施した。交互タンジェント流（ＡＴＦ）フィルタを使用して細胞を採取し、ＳＵＳ（ポリエチレン（ＰＥ）フィルム、ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（商標）ＡＳＩ（商標）ｉｍＰＵＬＳＥＳｉｎｇｌｅＵｓｅＭｉｘｅｒ）中に保持した後で、プロテインＡによる精製用に処理した。プロテインＡ精製からの溶出液を、ウイルスの不活性化及び中和のために低ｐＨまで滴定し、その後濾過し、カチオン交換カラム（ＣＥＸ）で処理した。次いで、ＣＥＸからの溶出液を混合モード陰イオン交換クロマトグラフィー（ＭＭＡ）で処理した。次いで、ＭＭＡフロースルーをウイルス濾過によって処理した。ウイルス濾過プールを、接続されたプロセスで限外濾過／ダイアフィルトレーション（ＵＦ／ＤＦ）にかけ、これにより、ウイルス濾過プールを製剤バッファーにバッファー交換し、エクリズマブ原薬（ＤＳ）の目標濃度に濃縮することができた。回収されたＵＦ／ＤＦプールを、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）でスパイクし、ＳＵＳバッグに濾過して、－３０℃で保存した。

非ＳＵＳＤＰでは、ＤＳは、非ＳＵＳ製剤タンク（ステンレス鋼、ＳＳ）内のソルビトール製剤（１０ｍＭの酢酸塩、５％のソルビトール、０．０１％のポリソルベート８０、ｐＨ５．２）中で１０ｍｇ／ｍＬの濃度で製剤化し、その後、０．２２μｍのＰＶＤＦフィルタに通して濾過し、次いで、非ＳＵＳ（ＳＳ）保持タンクで保持して、０．２２μｍのＰＶＤＦフィルタで再度濾過し、次いでサージＳＵＳバッグに保持した後で充填する。本方法を使用して製造されたエクリズマブＤＰは、ＧＭＰロットと示した（図５～８を参照）。

ＤＰ用ＳＵＳでは、プロセスは、ＳＳタンクの代わりにＳＵＳエチルビニルアセテート（ＥＶＡ）バッグを使用したことを除いて、非ＳＵＳＤＰプロセスと同じであった（すなわち、ＳＳ製剤タンクの代わりにＳＵＳＥＶＡバッグが使用され、ＳＳ保持タンクの代わりにＳＵＳＥＶＡバッグが使用された）。本方法を使用して製造されたエクリズマブＤＰは、ＳＵＳロットと示した（図５～８を参照）。

非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰロット（ＧＭＰＤＰ１、ＧＭＰＤＰ２、及びＧＭＰＤＰ３）中の、ＳＥ－ＵＨＰＬＣ法（実施例１に記載）によって決定された高分子量（ＨＭＷ）種のパーセンテージを、５０℃、１４日間の強制劣化条件下でＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰロット（ＳＵＳＤＰ）のＨＭＷのパーセンテージと比較した。ＨＭＷ種又は凝集体のパーセンテージを測定し、図５に示す。図５が示すように、強制劣化条件下のＳＵＳエクリズマブＤＰロット中のＨＭＷのパーセンテージは、強制劣化条件下の非ＳＵＳエクリズマブＤＰロットと比較して大幅に減少した。

非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰロット（ＧＭＰ１ＤＰ、ＧＭＰ２ＤＰ）中の、重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＨ－３）トリプトファン（配列番号３の９位であって、配列番号１０の１０７位に対応）Ｗ１０７の酸化修飾量を、強制劣化条件下でＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰロット（ＳＵＳＤＰ）と比較し、ペプチドマッピングによっても決定した（実施例１に記載）。図６Ａは、強制劣化条件下でのＳＵＳエクリズマブＤＰロットのＷ１０７酸化のレベルが、強制劣化条件下での非ＳＵＳエクリズマブＤＰロット（ＧＭＰ１ＤＰ、ＧＭＰ２ＤＰ）のレベルと比較してはるかに低いことを示している。

実施例１に記載のＥＬＩＳＡ系力価アッセイを使用して、強制劣化条件下で非ＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰロット（ＧＭＰ１ＤＰ、ＧＭＰ２ＤＰ）の力価を、強制劣化条件下でＳＵＳを使用して製造されたエクリズマブＤＰロット（ＳＵＳＤＰ）と比較した。図６Ｂで示すように、非ＳＵＳエクリズマブＤＰロットとは対照的に、ＳＵＳエクリズマブＤＰロットでは力価の損失は見られなかった。

加えて、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ分析（実施例１で実施されたとおり）は、強制劣化条件下のＳＵＳエクリズマブＤＰロットが、強制劣化条件下の非ＳＵＳエクリズマブＤＰロット（ＧＭＰ２ＤＰ）と比較して、ＨＩＣメインピークの損失がないことを示し、図７で示すように、強制劣化条件下のＳＵＳエクリズマブＤＰロットは、ＨＩＣプレピークのパーセンテージで示されるように、純度の損失を示さなかった（図８）。

本発明を様々な実施形態の観点から記載してきたが、当業者であれば変形及び修正を想到するであろうことは理解されよう。したがって、添付の特許請求の範囲は、特許請求される本発明の範囲内にあるそのような均等な変形の全てを包含することが意図されている。さらに、本明細書で使用した項目の見出しは、構成を目的としているに過ぎず、記載される主題を限定するものと解釈すべきではない。本出願に引用した全ての参考文献は、あらゆる目的のために参照により明示的に本明細書に組み込まれる。

Claims

ａ）抗Ｃ５抗体と、
ｂ）緩衝剤と、
ｃ）安定剤と、
ｄ）キレート剤と、
を含む製剤。
前記抗体が、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３を含み、前記ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３のアミノ酸配列が、それぞれ、配列番号１、２、及び３、又はそれぞれ、配列番号４、５、及び３である、請求項１に記載の製剤。
前記抗体が、配列番号６又は７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、請求項２に記載の製剤。
前記抗体が、配列番号８又は９のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の製剤。
前記抗体が、配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項１に記載の製剤。
前記抗体が、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３を含み、前記ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３のアミノ酸配列が、それぞれ、配列番号１２、１３、及び１４である、請求項１～５のいずれか一項に記載の製剤。
前記抗体が、配列番号１５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項６に記載の製剤。
前記抗体が、配列番号１６のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の製剤。
前記抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の製剤。
前記抗体が、配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を有する重鎖及び配列番号１７のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１に記載の製剤。
前記重鎖が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する、請求項１０に記載の製剤。
前記重鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有する、請求項１０に記載の製剤。
前記緩衝剤が、酢酸塩を含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載の製剤。
前記酢酸塩の濃度が、５ｍＭ～２０ｍＭである、請求項１３に記載の製剤。
前記酢酸塩の濃度が、約１０ｍＭである、請求項１４に記載の製剤。
前記安定剤が、ポリオールである、請求項１～１５のいずれか一項に記載の製剤。
前記ポリオールが、ソルビトールである、請求項１６に記載の製剤。
前記ソルビトールの濃度が、約５％（ｗ／ｖ）である、請求項１７に記載の製剤。
前記キレート剤の濃度が、０．０１ｍＭ～０．０５ｍＭである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の製剤。
前記キレート剤の濃度が、約０．０５ｍＭである、請求項１９に記載の製剤。
前記キレート剤が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）である、請求項１～２０のいずれか一項に記載の製剤。
界面活性剤を更に含み、前記界面活性剤の濃度が、０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）である、請求項１～２１のいずれか一項に記載の製剤。
前記界面活性剤の濃度が、約０．０１％である、請求項２２に記載の製剤。
前記界面活性剤が、ポリソルベート８０である、請求項２２又は２３に記載の製剤。
前記製剤のｐＨが、４．５～５．８である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の製剤。
前記製剤のｐＨが、約５．２である、請求項２５に記載の製剤。
前記抗体の濃度が、約１０ｍｇ／ｍＬである、請求項１～２６のいずれか一項に記載の製剤。
請求項１～２７のいずれか一項に記載の製剤を製造する方法。
抗Ｃ５抗体薬剤製品を製造する方法であって、
ａ）抗Ｃ５抗体原薬を、シングルユースシステムの製剤容器で、緩衝剤と、安定剤と、任意選択的に、キレート剤とを含む製剤に製剤化することと、
ｂ）得られた薬剤製品を最初に濾過することと、
ｃ）前記薬剤製品をシングルユースシステムの保持容器に保持することと、
ｄ）前記薬剤製品を再度濾過することと、
ｅ）前記薬剤製品をサージ容器中で保持することと、
を含む、方法。
前記製剤容器、前記保持容器、又は前記製剤及び保持容器の両方が、金属を含有しない、請求項２９に記載の方法。
前記製剤容器、前記保持容器、又は前記製剤及び保持容器の両方が、プラスチックである、請求項３０に記載の方法。
前記製剤容器、前記保持容器、又は前記製剤及び保持容器の両方が、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）を含む、請求項２９に記載の方法。
前記薬剤製品が、金属を含む、製剤容器、保持容器、又は製剤及び保持容器の両方の使用を除いて、同じプロセスで製造された薬剤製品と比較して、凝集体が少ないか、酸化レベルが低いか、力価の損失が少ないか、又は純度の損失が少ない、請求項３０～３２のいずれか一項に記載の方法。
前記金属が、ステンレス鋼である、請求項３３に記載の方法。
前記抗体が、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３を含み、前記ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３のアミノ酸配列が、それぞれ、配列番号１、２、及び３、又はそれぞれ、配列番号４、５、及び３である、請求項２９に記載の方法。
前記抗体が、配列番号６又は７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、請求項３５に記載の方法。
前記抗体が、配列番号８又は９のアミノ酸配列を有する重鎖定常領域を含む、請求項３６に記載の方法。
前記抗体が、配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項３７に記載の方法。
前記抗体が、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３を含み、前記ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３のアミノ酸配列が、それぞれ、配列番号１２、１３、及び１４である、請求項２９～３８のいずれか一項に記載の方法。
前記抗体が、配列番号１５のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項３９に記載の方法。
前記抗体が、配列番号１６のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域を含む、請求項３９又は４０に記載の方法。
前記抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項４１に記載の方法。
前記抗体が、配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を有する重鎖及び配列番号１７のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項２９に記載の方法。
重鎖が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する、請求項２９に記載の方法。
重鎖が、配列番号１１のアミノ酸配列を有する、請求項２９に記載の方法。
前記緩衝剤が、酢酸塩を含む、請求項２９～４５のいずれか一項に記載の方法。
前記酢酸塩の濃度が、５ｍＭ～２０ｍＭである、請求項４６に記載の方法。
前記酢酸塩の濃度が、約１０ｍＭである、請求項４７に記載の方法。
前記安定剤が、ポリオールである、請求項２９～４８のいずれか一項に記載の方法。
前記ポリオールが、ソルビトールである、請求項４９に記載の方法。
前記ソルビトールの濃度が、約５％（ｗ／ｖ）である、請求項５０に記載の方法。
前記キレート剤の濃度が、０．０１ｍＭ～０．０５ｍＭである、請求項２９～５１のいずれか一項に記載の方法。
前記キレート剤の濃度が、約０．０５ｍＭである、請求項５２に記載の方法。
前記キレート剤が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）である、請求項２９～５３のいずれか一項に記載の方法。
前記製剤が、界面活性剤を更に含み、前記界面活性剤の濃度が、０．００１％～０．１％（ｗ／ｖ）である、請求項２９～５４のいずれか一項に記載の方法。
前記界面活性剤の濃度が、約０．０１％である、請求項５５に記載の方法。
前記界面活性剤が、ポリソルベート８０である、請求項５５又は５６に記載の方法。
前記製剤のｐＨが、４．５～５．８である、請求項２９～５７のいずれか一項に記載の方法。
前記製剤のｐＨが、約５．２である、請求項５８に記載の方法。
前記抗体の濃度が、約１０ｍｇ／ｍＬである、請求項２９～５９のいずれか一項に記載の方法。