JP2023016530A - イムノクロマト試験片 - Google Patents
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Abstract
【課題】 インフルエンザウイルスＡ、インフルエンザウイルスＢ、および重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２を同時かつ高感度に検出し得るイムノクロマト試験片を提供する。【解決手段】 本発明は、測定試料中のインフルエンザウイルスＡ、Ｂ（Ｆｌｕ－Ａ、Ｂ）のヌクレオカプシドタンパク質（Ｎタンパク質）とそれぞれ特異的に結合する抗体Ａ１、Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ａ、Ｂとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド１と、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド２と、Ｆｌｕ－Ａ、ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ２、Ｂ２を固定したテストラインＡ、Ｂを具備したメンブレン１と、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ２を固定したテストラインＣを具備したメンブレン２と、から構成されるイムノクロマト試験片である。【選択図】なし
Description
本発明は、インフルエンザウイルスＡ（Ｆｌｕ－Ａ）のヌクレオカプシドタンパク質（Ｎタンパク質）、インフルエンザウイルスＢ（Ｆｌｕ－Ｂ）のＮタンパク質、および重症急性呼吸器症候群（Ｓｅｖｅｒｅ Ａｃｕｔｅ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のＮタンパク質を同時かつ高感度に検出し得るイムノクロマト試験片、およびイムノクロマト試験片を含むキットに関する。
インフルエンザは冬期に流行する感染症で、高熱、上気道炎、倦怠感などの臨床症状を呈するが、それらの症状のみではＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、アデノ、ＲＳなど他のウイルスに起因する感染症と区別することは容易ではない。ここで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の原因ウイルスであり、２０２０年初より世界中で急速に流行している。
インフルエンザウイルスは分節状のマイナス鎖ＲＮＡをゲノム遺伝子とするウイルスで、ＨＡ、ＮＡ、ＰＡ、ＰＢ１、ＰＢ２、Ｍ、ＮＰ、ＮＳの８分節から成る。インフルエンザウイルスは、構成するタンパク質のうち、マトリックスタンパク質（Ｍ１）とＮタンパク質（ＮＰ）の抗原性の違いにより、Ａ型、Ｂ型およびＣ型に分類される。該タンパク質は抗原性がそれぞれ異なるため、異なる型の間で交差反応を示さない。
インフルエンザに対する治療薬として、オセルタミビルリン酸塩、ザナミビル水和物、ペラミビル水和物、ラニナミビルオクタン酸エステル水和物、アマンタジン塩酸塩が用いられているが、Ｍ２阻害剤であるアマンタジン塩酸塩はＢ型インフルエンザウイルスの感染増殖を阻害しないためＡ型インフルエンザの治療にのみ用いられる。さらに前４者はノイラミニダーゼ（ＮＡ）阻害剤として同一の作用点を示す治療薬であるが、インフルエンザの型によって解熱時間やウイルス残存率などの有効性に差異があることが指摘されている（非特許文献１）。従って、インフルエンザの型の鑑別は、その後の適切な治療薬選択のために重要である。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、一般的なコロナウイルスと同様に、ヌクレオカプシドおよび当該ヌクレオカプシドを取り囲むエンベロープで構成され、前記ヌクレオカプシドには、ウイルスゲノム（ＲＮＡ）および当該ウイルスゲノムに結合するヌクレオカプシドタンパク質（Ｎタンパク質）が含まれ、前記エンベロープには、脂質および当該脂質に結合するスパイクタンパク質（Ｓタンパク質）、膜タンパク質（Ｍタンパク質）、およびエンベロープタンパク質（Ｅタンパク質）が含まれる。Ｎタンパク質は、ウイルスコアの形成、並びに、ウイルスゲノムのパッケージングおよび転写等に関与するタンパク質であり、セリン（Ｓ）／アルギニン（Ｒ）リッチな領域を有するリンカーを介してＮ末端ドメイン（ＮＴＤ）およびＣ末端ドメイン（ＣＴＤ）が結合した構造を有する。非特許文献２には、Ｎタンパク質が多量にリン酸化されることが記載され、リン酸化部位のマッピングが示されている。Ｎタンパク質のアミノ酸配列は株間で保存されているため、Ｎタンパク質は診断マーカー等として使用される。
複数ある感染症診断法の中でも迅速・簡便・安価であるイムノクロマト法は最も普及した技術の１つである。イムノクロマト法とは毛細管現象を利用した免疫測定法であり、インフルエンザ検査などにおいて世界的に普及している。イムノクロマト法を用いて測定対象物質を検出する手法の一つとしては、抗原抗体反応を利用したサンドイッチ法が挙げられる。サンドイッチ法では測定対象物質に対してエピトープの異なる２種類の抗体を利用する。一方の抗体は、金コロイド、着色ラテックス粒子、蛍光粒子等の検出粒子と感作した検出抗体として使用する。他方の抗体は、多孔質支持体の表面に線状に固定した捕捉抗体としてテストラインを形成する。加えて、前記検出抗体を特異的に捕捉する抗体を多孔質支持体の表面の、前記テストラインとは異なる位置に線状に固定しコントロールラインを形成する。測定試料中に含まれる測定対象物質は、多孔質支持体の一端（上流側）から展開し、検出抗体と免疫複合体を形成しながら移動し、テストライン上で捕捉抗体と接触して捕捉され発色する。測定対象物質と免疫複合体を形成しなかった遊離の検出粒子と感作した検出抗体はテストライン上を通過し、コントロールラインの抗体に捕捉され発色する。これらの発色強度を目視で確認することで測定対象物質の有無を判定することができる。従来のインフルエンザの検出には抗ＮＰ抗体（特許文献１および２）などが特に用いられていた。
現在、インフルエンザおよびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検査は、項目ごとに個別の検査キットを用いて行われている。このため、例えば、高熱、上気道炎、倦怠感などの臨床症状を示した患者のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検査が陰性であった場合、インフルエンザの検査を行うために、再度、患者から検体を採取する必要がある。検体は、鼻腔や咽頭から綿棒等を用いて採取するが、患者にとっては苦痛を伴い、負担を強いられることになる。
Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ． ２００８ Ｊａｎ；５６（１）：５１－５７． Ｅｐｕｂ ２００７ Ｏｃｔ １５．
Ｋｌａｎｎ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ， ８０（１）， ２０２０， ｐｐ．１６４－１７４
本発明は、Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質を同時かつ高感度に検出し得るイムノクロマト試験片、イムノクロマト試験片を含むキットを提供することを課題とするものである。
本発明者は、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ１と検出粒子との複合体、およびＦｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ１と検出粒子との複合体を担持したコンジュゲーションパッド１と、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１と検出粒子との複合体を担持したコンジュゲーションパッド２と、Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ２を線状に固定したテストラインＡ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ２を線状に固定したテストラインＢ、および前記抗体Ａ２またはＢ２と特異的に結合する抗体Ｄ１を線状に固定したコントロールライン１を具備したメンブレン１と、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ２を線状に固定したテストラインＣ、および前記抗体Ｃ２と特異的に結合する抗体Ｄ２を線状に固定したコントロールライン２を具備したメンブレン２を使用することで、Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質を同時かつ高感度に検出し得るイムノクロマト試験片を得られることを見出した。また、検出粒子としてセルロース系着色微粒子を使用することにより、Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質をさらに高感度で検出できることを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、代表的な本発明は以下の通りである。
１． （１）吸収パッド１と、
（２）測定試料中のインフルエンザウイルスＡ（Ｆｌｕ－Ａ）のヌクレオカプシドタンパク質（Ｎタンパク質）と特異的に結合する抗体Ａ２を線状に固定したテストラインＡ、インフルエンザウイルスＢ（Ｆｌｕ－Ｂ）のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ２を線状に固定したテストラインＢ、および前記抗体Ａ２またはＢ２と特異的に結合する抗体Ｄ１を線状に固定したコントロールライン１を具備したメンブレン１と、
（３）Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体、およびＦｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド１と、
（４）サンプルパッドと、
（５）測定試料中の重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド２と、
（６）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ２を線状に固定したテストラインＣ、および前記抗体Ｃ２と特異的に結合する抗体Ｄ２を線状に固定したコントロールライン２を具備したメンブレン２と、
（７）吸収パッド２と、
から構成されることを特徴とするイムノクロマト試験片。
２． 前記吸収パッド１、前記メンブレン１、前記コンジュゲーションパッド１、前記サンプルパッド、前記コンジュゲーションパッド２、前記メンブレン２、および前記吸収パッド２が順に連接配置されていることを特徴とする１．に記載のイムノクロマト試験片。
３． 前記テストラインＡとテストラインＢの発色が異なり、かつテストラインＡまたはテストラインＢの発色とテストラインＣの発色とが同じであることを特徴とする１．または２．に記載のイムノクロマト試験片。
４． 前記テストラインＡ／テストラインＢ／テストラインＣの発色がそれぞれ赤／青／赤、赤／青／青、青／赤／赤、青／赤／青のいずれかであることを特徴とする１．～３．のいずれかに記載のイムノクロマト試験片。
５． 前記テストラインＡとテストラインＢの発色が同じで、かつテストラインＣの発色とは異なることを特徴とする１．または２．に記載のイムノクロマト試験片。
６． 前記テストラインＡ／テストラインＢ／テストラインＣの発色がそれぞれ赤／赤／青、または青／青／赤であることを特徴とする１．、２．または５．のいずれかに記載のイムノクロマト試験片。
７． １．～６．のいずれかに記載のイムノクロマト試験片、測定試料採取具、フィルター、測定試料希釈液からなることを特徴とするイムノクロマトキット。
１． （１）吸収パッド１と、
（２）測定試料中のインフルエンザウイルスＡ（Ｆｌｕ－Ａ）のヌクレオカプシドタンパク質（Ｎタンパク質）と特異的に結合する抗体Ａ２を線状に固定したテストラインＡ、インフルエンザウイルスＢ（Ｆｌｕ－Ｂ）のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ２を線状に固定したテストラインＢ、および前記抗体Ａ２またはＢ２と特異的に結合する抗体Ｄ１を線状に固定したコントロールライン１を具備したメンブレン１と、
（３）Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体、およびＦｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド１と、
（４）サンプルパッドと、
（５）測定試料中の重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド２と、
（６）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ２を線状に固定したテストラインＣ、および前記抗体Ｃ２と特異的に結合する抗体Ｄ２を線状に固定したコントロールライン２を具備したメンブレン２と、
（７）吸収パッド２と、
から構成されることを特徴とするイムノクロマト試験片。
２． 前記吸収パッド１、前記メンブレン１、前記コンジュゲーションパッド１、前記サンプルパッド、前記コンジュゲーションパッド２、前記メンブレン２、および前記吸収パッド２が順に連接配置されていることを特徴とする１．に記載のイムノクロマト試験片。
３． 前記テストラインＡとテストラインＢの発色が異なり、かつテストラインＡまたはテストラインＢの発色とテストラインＣの発色とが同じであることを特徴とする１．または２．に記載のイムノクロマト試験片。
４． 前記テストラインＡ／テストラインＢ／テストラインＣの発色がそれぞれ赤／青／赤、赤／青／青、青／赤／赤、青／赤／青のいずれかであることを特徴とする１．～３．のいずれかに記載のイムノクロマト試験片。
５． 前記テストラインＡとテストラインＢの発色が同じで、かつテストラインＣの発色とは異なることを特徴とする１．または２．に記載のイムノクロマト試験片。
６． 前記テストラインＡ／テストラインＢ／テストラインＣの発色がそれぞれ赤／赤／青、または青／青／赤であることを特徴とする１．、２．または５．のいずれかに記載のイムノクロマト試験片。
７． １．～６．のいずれかに記載のイムノクロマト試験片、測定試料採取具、フィルター、測定試料希釈液からなることを特徴とするイムノクロマトキット。
本発明のイムノクロマト試験片は、特定の抗体、および検出粒子を、特定の配置で担持させているため、同時かつ高感度にＦｌｕ－ＡのＮタンパク質、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質を検出することができる。
本発明のイムノクロマト試験片は測定試料中のインフルエンザウイルスＡ（Ｆｌｕ－Ａ）のヌクレオカプシドタンパク質（Ｎタンパク質）、インフルエンザウイルスＢ（Ｆｌｕ－Ｂ）のＮタンパク質、および重症急性呼吸器症候群（Ｓｅｖｅｒｅ Ａｃｕｔｅ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のＮタンパク質を検出するための試験片である。
本発明において、Ｆｌｕ－Ａは、Ｈ１Ｎ１、Ｈ１Ｎ２、Ｈ２Ｎ２、Ｈ２Ｎ３、Ｈ３Ｎ２、Ｈ３Ｎ８、Ｈ４Ｎ６、Ｈ５Ｎ１、Ｈ５Ｎ２、Ｈ６Ｎ２、Ｈ７Ｎ１、Ｈ７Ｎ７、Ｈ７Ｎ９、Ｈ８Ｎ４、Ｈ９Ｎ２、Ｈ１０Ｎ７、Ｈ１１Ｎ６、Ｈ１２Ｎ５、Ｈ１３Ｎ６、Ｈ１４Ｎ５、Ｈ１５Ｎ８、およびＨ１６Ｎ３の各亜型を含む、公知の全てのＦｌｕ－Ａ株を対象とする。
本発明において、Ｆｌｕ－Ｂ型は、抗原的・遺伝系統的に異なる２つのグループ、すなわち山形系統およびビクトリア系統に分類されるが、いずれの系統のウイルス株も含む、公知の全てのＦｌｕ－Ｂ株を対象とする。
本発明において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質は、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号（ＭＮ９０８９４７）に開示されたアミノ酸配列を有するものを指す。なお、ＳＡＲＳ－ＣｏＶのＮタンパク質は、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号（ＡＹ２７８７４１）に開示されたアミノ酸配列を有するものを指す。
本発明において、測定試料は、生物試料であってもよく非生物試料であってもよい。また、測定試料には、採取したままの試料のみならず、当該試料に対して夾雑物の除去等の前処理を施したものも含まれる。
前記生物試料としては、特に限定されないが例えば血液、血清、血漿、骨髄液、リンパ液、涙、鼻汁、鼻腔洗浄液、鼻腔拭い液、唾液、うがい液、喀痰、咽頭拭い液、汗、気管吸引液、気管支洗浄液、胸水、腹水、羊水、腸管洗浄液、尿、糞便、細胞抽出液、組織抽出液、臓器抽出液等が挙げられる。前記非生物試料としては、特に限定されないが例えば蛇口、取っ手、手すり、つり革、スイッチ、壁、床、机、椅子、便座等の環境表面から採取した試料等が挙げられる。
本発明のイムノクロマト試験片の構成は、イムノクロマト試験片の測定試料溶液の添加部（滴下部）を上流側として、前記添加部を有するサンプルパッド、コンジュゲーションパッド、メンブレン、吸収パッドの順に連接配置されている。次いで、本発明のイムノクロマト試験片の一例を、図面を参照して説明する。図１および２において、１はサンプルパッド、２１はコンジュゲーションパッド１、２２はコンジュゲーションパッド２、３１はメンブレン１、３２はメンブレン２、４１は吸収パッド１、４２は吸収パッド２、５はバッキングシート、６～７はテストラインＡ～Ｂ、８はテストラインＣ、９１はコントロールライン１、９２はコントロールライン２、１０は粘着シートをそれぞれ示す。
図１および図２の例では、イムノクロマト試験片は、幅３～５ｍｍ（好ましくは４ｍｍ程度）、長さ８０～１６０ｍｍ（好ましくは１００ｍｍ程度）の細長い短冊状の形態をしている。なお、イムノクロマト試験片のコンジュゲーションパッド１には測定試料中のＦｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体、およびＦｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体が、コンジュゲーションパッド２にはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体がそれぞれ担持されている。また、イムノクロマト試験片のメンブレン１の上流側の端部から約８ｍｍの位置にＦｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ２を線状に固定したテストラインＡ、前記端部から約１０ｍｍの位置にＦｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ２を線状に固定したテストラインＢ、前記端部から約１４ｍｍの位置に前記抗体Ａ２またはＢ２と特異的に結合する抗体Ｄ１を線状に固定したコントロールライン１が形成される。また、イムノクロマト試験片のメンブレン２の上流側の端部から約８ｍｍの位置にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ２を線状に固定したテストラインＣ、前記端部から約１４ｍｍの位置に前記抗体Ｃ２と特異的に結合する抗体Ｄ２を線状に固定したコントロールライン２が形成される。
本発明で用いるサンプルパッドは、測定試料を速やかに吸収した後、下流のコンジュゲーションパッド、メンブレン、吸収パッドへ展開できる材質のものであれば、特に限定されないが、例えばセルロース製のろ紙または不織布、ガラス製のろ紙または不織布、ポリエステル製のろ紙または不織布、ポリエチレン製のろ紙または不織布が挙げられる。これらの中でも、セルロース製のろ紙が好ましい。また、前記サンプルパッドの厚さは、０．１～２．０ｍｍが好ましく、０．２～１．０ｍｍがより好ましい。厚さが小さいと、下流での測定試料の流れが不均一となり測定精度が低下することがある。一方、厚さが大きいと、下流への展開が遅くなり測定時間が長くなることがある。また、下流への展開に必要となる測定試料量が多くなる。
本発明で用いるコンジュゲーションパッド１および２は、測定試料中のＦｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体を乾燥状態で保持でき、かつ測定試料の下流への展開と共に前記複合体を速やかに放出することができる材質のものであれば、特に限定されないが、例えばセルロース製のろ紙または不織布、ガラス製のろ紙または不織布、ポリエステル製のろ紙または不織布、ポリエチレン製のろ紙または不織布が挙げられる。これらの中でも、ガラス製のろ紙が好ましい。また、前記コンジュゲーションパッド１および２の厚さは、０．１ｍｍ～２．０ｍｍが好ましく、０．２ｍｍ～１．０ｍｍがより好ましい。厚さが小さいと、目的量の前記複合体を乾燥状態で保持できないことがある。一方、厚さが大きいと、下流への展開が遅くなり測定時間が長くなることがある。また、下流への展開に必要となる測定試料量が多くなる。
本発明で用いるメンブレン１および２は、測定試料を精度よく均一に展開できるものであれば、特に限定されないが、例えばセルロース、セルロース誘導体、ニトロセルロース、酢酸セルロース、ポリウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリデン、またはナイロン製のメンブレンが挙げられる。これらの中でも、ニトロセルロース製のメンブレンが好ましい。
本発明で用いる吸収パッド１および２は、上流より展開してきた測定試料を速やかに吸収した後、逆流しないよう保持できるものであれば、特に限定されないが、例えばセルロース製のろ紙または不織布、ガラス製のろ紙または不織布、ポリエステル製のろ紙または不織布、ポリエチレン製のろ紙または不織布が挙げられる。これらの中でも、セルロース製のろ紙が好ましい。また、前記吸収パッド１および２の厚さは、０．２ｍｍ～５．０ｍｍが好ましく、０．５ｍｍ～２．０ｍｍがより好ましい。厚さが小さいと、測定試料の滴下量によっては一度吸収パッドに吸収された測定試料がメンブレン側に逆流することがある。一方、厚さが大きいと、イムノクロマト試験片およびイムノクロマト試験片を覆うハウジングケースのサイズも大きくなり、ＰＯＣＴの観点から好ましくない。
なお、本発明で用いる抗体Ａ１～Ｃ１、抗体Ａ２～Ｃ２、抗体Ｄ１～Ｄ２はモノクローナル抗体であってもポリクローナル抗体であってもよいが、モノクローナル抗体が好ましい。抗体は、任意のアイソタイプ、例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭ等であることができるが、ＩｇＧが好ましい。また、抗体は、市販品を用いてもよいし、別途公知の方法で製造してもよい。
前記セルロース系着色微粒子Ａ～Ｃは、大量の水酸基を有するため、多くの反応性染料を共有結合により保持することができるだけでなく、濃染化した後も水などへの安定分散性を保持することができる。セルロース系着色微粒子として、再生セルロース、精製セルロース、天然セルロース等を用いることができるし、一部誘導体化されたセルロースを用いてもよい。前記セルロース系着色微粒子の質量の２０～９０質量％はセルロース由来であることが好ましく、２０～８０質量％がより好ましく、２０～７０質量％がさらに好ましい。
前記セルロース系着色微粒子Ａ～Ｃの平均粒子径は、特に限定されないが、１００ｎｍ～１０００ｎｍが好ましく、２００ｎｍ～８００ｎｍがより好ましい。平均粒子径が大きいと、下流への展開が遅くなり、測定時間が長くなる。また、メンブレン上に捕捉されやすくなり、バックグラウンド自体が発色してしまうことでテストラインおよびコントロールラインでの発色が不明瞭になる。一方、平均粒子径が小さいと、物理吸着または化学結合できる抗体量が低下し、測定感度が低下する。
前記セルロース系着色微粒子としては、旭化成社製の着色セルロースナノビーズ（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標））が挙げられる。前記セルロース系着色微粒子の色は、特に限定されないが、例えば赤、橙、黄、緑、青、紺、紫、黒、蛍光が挙げられる。特に、ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）赤（ＲＥ２）の粒子濃度１質量％でのＯＤは２４０、ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）青（ＢＬ２）の粒子濃度１質量％でのＯＤは２６５、ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）緑（ＧＲ１）の粒子濃度１質量％でのＯＤは１６０、ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）黒（ＫＲ１）の粒子濃度１質量％でのＯＤは１５０であるため、赤および青が好ましい。
前記セルロース系着色微粒子Ａ～Ｃへの前記抗体Ａ１～Ｃ１の結合量は、セルロース系着色微粒子と抗体の仕込み質量比を調整することで制御でき特に限定されないが、セルロース系着色微粒子と抗体との仕込み質量比は１：０．０１～１：１が好ましく、１：０．０２～１：０．５がより好ましく、１：０．０２～１：０．２がさらに好ましい。質量比が前記範囲を外れると、セルロース系着色微粒子への抗体の結合量が不十分となるとか、セルロース系着色微粒子への抗体の結合量が増えすぎ、抗原抗体反応に寄与しない抗体が増えるため、測定感度が低下することがある。
前記抗体Ａ１～Ｃ１と前記セルロース系着色微粒子Ａ～Ｃとの結合方法は特に限定されないが、疎水結合による物理吸着または共有結合による化学結合で感作するのが好ましく、操作が簡便でありかつコストも安い物理吸着がより好ましい。なお、感作効率を向上させるため、セルロース系着色微粒子に反応性活性基を導入してもよい。反応性活性基としては、特に限定されないが、例えばカルボキシル基、アミノ基、アルデヒド基、チオール基、エポキシ基、水酸基が挙げられる。これらの中でも、カルボキシル基、アミノ基が好ましい。カルボキシル基の場合は、カルボジイミドを用いてリガンドのアミノ基と共有結合を形成することができる。
前記コンジュゲーションパッド１に、測定試料中のＦｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体、およびＦｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体を担持させる方法、および前記コンジュゲーションパッド２に測定試料中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体を担持させる方法は特に限定されないが、例えば前記複合体の溶液をコンジュゲーションパッドに均一に塗布、噴霧または含浸した後、恒温槽内で適当な温度で一定時間乾燥することで作製することができる。前記複合体の溶液の塗布量は、特に限定されないが、ライン長１ｃｍ辺り５μＬ～５０μＬが好ましい。また、前記複合体の溶液におけるセルロース系着色微粒子濃度は、特に限定されないが、０．０１～０．５質量％が好ましく、０．０２～０．２質量％がより好ましく、０．０２～０．１質量％がさらに好ましい。濃度が低いと、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質を十分捕捉・検出することができず、測定感度が低下することがある。一方、濃度が高くても、測定感度の向上は見られず、コストだけが高くなる。次いで、前記塗布後に乾燥するのが好ましい。乾燥温度は、特に限定されないが、２０℃～８０℃が好ましく、２０℃～６０℃がより好ましい。乾燥時間は乾燥温度によって異なるが、通常は５分間～１２０分間である。
メンブレン１および２に前記テストラインＡ～Ｃを形成する捕捉抗体Ａ２～Ｃ２と前記コントロールライン１および２を形成する捕捉抗体Ｄ１およびＤ２を線状に固定する方法は、特に限定されないが、例えば前記テストラインＡ～Ｃを形成する捕捉抗体Ａ２～Ｃ２と前記コントロールライン１および２を形成する捕捉抗体Ｄ１およびＤ２を、それぞれ線上に一定量を異なる位置に塗布した後、恒温槽内で適当な温度で一定時間乾燥することで作製することができる。前記両捕捉抗体の塗布量は、特に限定されないが、ライン長１ｃｍ辺り０．１μＬ～２μＬが好ましい。また、前記両捕捉抗体の塗布濃度は、特に限定されないが、０．１ｍｇ／ｍＬ～１０ｍｇ／ｍＬが好ましく、０．２ｍｇ／ｍＬ～８ｍｇ／ｍＬがより好ましく、０．５ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬがさらに好ましい。濃度が低いと、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質を十分捕捉・検出することができず、測定感度が低下する。一方、濃度が高くても、測定感度の向上は見られず、コストだけが高くなる。次いで、前記塗布後に乾燥するのが好ましい。乾燥温度は、特に限定されないが、２０℃～８０℃が好ましく、２０℃～６０℃がより好ましい。乾燥時間は乾燥温度によって異なるが、通常は５分間～１２０分間である。
本発明のイムノクロマト試験片は、前記作製したメンブレン１および２を粘着シート１０の左右２箇所に貼り付け、次いでコンジュゲーションパッド１および２をメンブレン１および２の上流側の末端上に一部重ね合わせて貼り付け、次いでサンプルパッドを粘着シート１０の中央部に貼り付け、次いで吸収パッド１および２をメンブレン１および２の下流側の末端上に一部重ね合わせて貼り付けた後、一定幅の短冊状に切断することで作製することができる。なお、テストラインＡ～Ｃおよびコントロールライン１、２は試験片を作製した後に調製してもよいし、試験片を作製する前に調製してもよい。
前記イムノクロマト試験片は、少なくともサンプルパッド上に測定試料を滴下するための第一の開口部、メンブレン１上にテストラインＡ、Ｂおよびコントロールライン１を目視で確認するための第二の開口部、メンブレン２上にテストラインＣおよびコントロールライン２を目視で確認するための第三の開口部、を有する適当なプラスチック製のハウジングケースに収容されたものでも良い。
本発明のイムノクロマト試験片は、視認性の観点から、テストラインＡ～Ｃにおいて、前記テストラインＡとテストラインＢの発色が異なり、かつテストラインＡまたはテストラインＢの発色とテストラインＣの発色とが同じであることが好ましく、テストラインＡ～Ｃの発色がそれぞれ赤／青／赤、赤／青／青、青／赤／赤、青／赤／青のいずれかであることがより好ましい。前記発色は隣り合うテストラインＡ、Ｂの色が異なるため、仮にラインが出現した際に、ラインの色および位置からＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂのどちらが陽性であったかが一目で判断することができる。なお、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は離れた位置にラインがでるため、Ｆｌｕ－ＡまたはＦｌｕ－Ｂのいずれかと同じ発色でも視認性に支障はない。特に、前述の通りＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）では、特に赤と青の視認性が高いため、赤と青の組み合わせが好適である。前記発色であれば、仮にラインが出現した際に、Ｆｌｕ－ＡまたはＦｌｕ－ＢとＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を誤認する恐れを減ずることができる。なお、コントロールラインはテストラインに捕捉されなかった検出粒子を捕捉して発色するメカニズムである。
また、本発明のイムノクロマト試験片は、視認性の観点から、テストラインＡ～Ｃにおいて、前記テストラインＡとテストラインＢの発色が同じで、かつテストラインＣの発色とは異なることが好ましく、テストラインＡ～Ｃの発色がそれぞれ赤／赤／青、または青／青／赤であることがより好ましい。前記発色はＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂの色が同じで、かつＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の色とは異なるため、仮にラインが出現した際に、ラインの位置からＦｌｕ－ＡとＦｌｕ－Ｂ、ラインの色からＦｌｕ－ＡまたはＦｌｕ－ＢとＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のどちらかが陽性であったかを一目で判断することができる。特に、前述の通りＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）では、特に赤と青の視認性が高いため、赤と青の組み合わせが好適である。前記発色であれば、仮にラインが出現した際に、Ｆｌｕ－ＡまたはＦｌｕ－ＢとＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を誤認する恐れを減ずることができる。
本発明において、イムノクロマト測定キットは、イムノクロマト試験片に加え、測定試料を採取するための測定試料採取具、測定試料を前処理および／または希釈するための測定試料希釈液、測定試料をろ過するためのフィルターを含むのが好ましい。
前記測定試料希釈液は、測定試料の展開性を向上させ、かつ免疫反応に影響しないノニオン性界面活性剤を含むことが好ましい。前記ノニオン性界面活性剤としては、特に限定されないが、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）系界面活性剤等）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｂｒｉｊ（登録商標）系界面活性剤等）、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）系界面活性剤等）、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アルキルグルコシド、ショ糖脂肪酸エステル等が挙げられる。また、前記界面活性剤は単独で用いてもよいし、二種以上を組み合わせて用いてもよい。ノニオン性界面活性剤の濃度としては、０．０１～５．０質量％が好ましく、０．０５～４．０質量％がより好ましく、０．１～３．０質量％がさらに好ましい。濃度が０．０１質量％より低いと、下流への展開が困難となることがある。また、展開が不均一となり測定精度が低下することがある。一方、濃度が５．０質量％より高いと、物理的に吸着している、検出粒子と抗体、および／またはメンブレンと抗体が乖離し、測定値が得られないことがある。
前記測定試料希釈液は、無機塩類やｐＨ調整に用いる緩衝剤を添加しても良い。前記緩衝剤としては、目的とするｐＨ範囲において充分な緩衝能力を有していれば、いかなる種類の緩衝剤を用いてもよく、例えば、トリス、リン酸、フタル酸、クエン酸、マレイン酸、コハク酸、シュウ酸、ホウ酸、酒石酸、酢酸、炭酸、グッドバッファー（ＭＥＳ、ＡＤＡ、ＰＩＰＥＳ、ＡＣＥＳ、コラミン塩酸、ＢＥＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳ、アセトアミドグリシン、トリシン、グリシンアミド、ビシン）が挙げられる。これらの中でも、本発明に用いる抗体の至適ｐＨ範囲である７．０付近において充分な緩衝能力を有する等の理由から、トリス、リン酸、ＭＥＳ、ＰＩＰＥＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳが好ましく、トリス、リン酸、ＰＩＰＥＳがより好ましい。
以下、本発明を実施例に基づいて詳細に説明する。本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
（実施例１）
（１）抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体の調製
１．０質量％の青色のセルロース系着色微粒子Ａ（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）１００μＬ、１０ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬社製）（ｐＨ８．０）９００μＬ、抗体Ａ１として１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＮ５、ＭＡｂｓ：ＩｎＡ２４５、ＨｙＴｅｓｔ社製）１００μＬを１５ｍＬの遠沈管に加え、ボルテックスで撹拌した。次いで、３７℃で１２０分間静置した。次いで、１．０質量％のカゼイン（０３０－０１５０５、富士フィルム和光純薬社製）、１００ｍＭのホウ酸緩衝液（０２１－０２１９５、富士フィルム和光純薬社製）からなるブロッキング液（ｐＨ８．０）１２ｍＬを加え、さらに３７℃で６０分間静置した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）を用い、１３，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作セルロース系着色微粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、５０ｍＭのホウ酸緩衝液（０２１－０２１９５、富士フィルム和光純薬社製）からなる洗浄液（ｐＨ１０．０）１２ｍＬを加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）を用い、１３，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作セルロース系着色微粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、１５質量％のスクロース（１９６－０００１５、富士フィルム和光純薬社製）、０．２質量％のカゼイン（０３０－０１５０５、富士フィルム和光純薬社製）、６２ｍＭのホウ酸緩衝液（０２１－０２１９５、富士フィルム和光純薬社製）からなる塗布液（ｐＨ９．２）２．０ｍＬを加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理し、抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体１を得た。
（１）抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体の調製
１．０質量％の青色のセルロース系着色微粒子Ａ（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）１００μＬ、１０ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬社製）（ｐＨ８．０）９００μＬ、抗体Ａ１として１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＮ５、ＭＡｂｓ：ＩｎＡ２４５、ＨｙＴｅｓｔ社製）１００μＬを１５ｍＬの遠沈管に加え、ボルテックスで撹拌した。次いで、３７℃で１２０分間静置した。次いで、１．０質量％のカゼイン（０３０－０１５０５、富士フィルム和光純薬社製）、１００ｍＭのホウ酸緩衝液（０２１－０２１９５、富士フィルム和光純薬社製）からなるブロッキング液（ｐＨ８．０）１２ｍＬを加え、さらに３７℃で６０分間静置した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）を用い、１３，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作セルロース系着色微粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、５０ｍＭのホウ酸緩衝液（０２１－０２１９５、富士フィルム和光純薬社製）からなる洗浄液（ｐＨ１０．０）１２ｍＬを加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）を用い、１３，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作セルロース系着色微粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、１５質量％のスクロース（１９６－０００１５、富士フィルム和光純薬社製）、０．２質量％のカゼイン（０３０－０１５０５、富士フィルム和光純薬社製）、６２ｍＭのホウ酸緩衝液（０２１－０２１９５、富士フィルム和光純薬社製）からなる塗布液（ｐＨ９．２）２．０ｍＬを加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理し、抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体１を得た。
（２）抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体の調製
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｂ１としてマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｖｉｒｕｓ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：１１３１、ＶｉｒｏＳｔａｔ社製）を、赤色のセルロース系着色微粒子Ａの代わりにセルロース系着色微粒子Ｂ（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は（１）抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体１を得た。
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｂ１としてマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｖｉｒｕｓ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：１１３１、ＶｉｒｏＳｔａｔ社製）を、赤色のセルロース系着色微粒子Ａの代わりにセルロース系着色微粒子Ｂ（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は（１）抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体１を得た。
（３）抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体の調製
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｃ１としてマウス由来抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ａｎｔｉ－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２－ＮＰ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＳＣＶ－１０８、東洋紡社製）を使用する以外は（１）抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｃ１と青色のセルロース系着色微粒子Ｃ（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）との複合体１を得た。
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｃ１としてマウス由来抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ａｎｔｉ－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２－ＮＰ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＳＣＶ－１０８、東洋紡社製）を使用する以外は（１）抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｃ１と青色のセルロース系着色微粒子Ｃ（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）との複合体１を得た。
（４）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレンの作製
抗体Ａ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ Ｖｉｒｕｓ （ＮＰ） Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：ＢＭＲｉａ０１７、Ｃｌｏｎｅ：ＦＬＡ－８５９、Ｂｉｏ Ｍａｔｒｉｘ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｃ.社製）、抗体Ｂ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ, ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＦ１８/ＲＩＦ１７、ＭＡｂｓ：Ｒ２／３、ＨｙＴｅｓｔ社製）、抗体Ｃ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ａｎｔｉ－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２－ＮＰ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＳＣＶ－１０９、東洋紡社製）、抗体Ｄ１およびＤ２として１．０ｍｇ／ｍＬのウサギ由来抗マウスＩｇＧポリクローナル抗体（Ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ－ｈｅａｖｙ ａｎｄ ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ａ９０－１１７Ａ、ＢＥＴＨＹＬ社製）を準備した。次いで、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ｂｉｏ Ｊｅｔノズル（ＢＨＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、２５ｍｍ×３００ｍｍのイムノクロマト用メンブレン（ＩＡＢ０９０、Ａｄｖａｎｔｅｃ社製）の上流側から８ｍｍの位置に、前記抗体Ａ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布し（テストラインＡ）、メンブレンの上流側から１０ｍｍの位置に、前記抗体Ｂ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布し（テストラインＢ）、メンブレンの上流側から１４ｍｍの位置に、前記抗体Ｄ１を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布した後（コントロールライン１）、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、ライン幅約１ｍｍのテストラインＡ、Ｂおよびコントロールライン１を形成することで、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１を得た。次いで、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ｂｉｏ Ｊｅｔノズル（ＢＨＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、前記メンブレン１とは異なる２５ｍｍ×３００ｍｍのイムノクロマト用メンブレン（ＩＡＢ０９０、Ａｄｖａｎｔｅｃ社製）の上流側から８ｍｍの位置に、前記抗体Ｃ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布し（テストラインＣ）、メンブレンの上流側から１４ｍｍの位置に、前記抗体Ｄ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布した後（コントロールライン２）、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、ライン幅約１ｍｍのテストラインＣおよびコントロールライン２を形成することで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２を得た。
抗体Ａ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ Ｖｉｒｕｓ （ＮＰ） Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：ＢＭＲｉａ０１７、Ｃｌｏｎｅ：ＦＬＡ－８５９、Ｂｉｏ Ｍａｔｒｉｘ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｃ.社製）、抗体Ｂ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ, ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＦ１８/ＲＩＦ１７、ＭＡｂｓ：Ｒ２／３、ＨｙＴｅｓｔ社製）、抗体Ｃ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ａｎｔｉ－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２－ＮＰ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＳＣＶ－１０９、東洋紡社製）、抗体Ｄ１およびＤ２として１．０ｍｇ／ｍＬのウサギ由来抗マウスＩｇＧポリクローナル抗体（Ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ－ｈｅａｖｙ ａｎｄ ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ａ９０－１１７Ａ、ＢＥＴＨＹＬ社製）を準備した。次いで、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ｂｉｏ Ｊｅｔノズル（ＢＨＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、２５ｍｍ×３００ｍｍのイムノクロマト用メンブレン（ＩＡＢ０９０、Ａｄｖａｎｔｅｃ社製）の上流側から８ｍｍの位置に、前記抗体Ａ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布し（テストラインＡ）、メンブレンの上流側から１０ｍｍの位置に、前記抗体Ｂ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布し（テストラインＢ）、メンブレンの上流側から１４ｍｍの位置に、前記抗体Ｄ１を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布した後（コントロールライン１）、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、ライン幅約１ｍｍのテストラインＡ、Ｂおよびコントロールライン１を形成することで、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１を得た。次いで、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ｂｉｏ Ｊｅｔノズル（ＢＨＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、前記メンブレン１とは異なる２５ｍｍ×３００ｍｍのイムノクロマト用メンブレン（ＩＡＢ０９０、Ａｄｖａｎｔｅｃ社製）の上流側から８ｍｍの位置に、前記抗体Ｃ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布し（テストラインＣ）、メンブレンの上流側から１４ｍｍの位置に、前記抗体Ｄ２を１．０μＬ／ｃｍの塗布量で塗布した後（コントロールライン２）、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、ライン幅約１ｍｍのテストラインＣおよびコントロールライン２を形成することで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２を得た。
（５）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドの作製
１０ｍｍ×３００ｍｍのコンジュゲーションパッド（ＧＬＡＳＳＦＩＢＥＲ ＤＩＡＧＮＯＳＴＩＣ ＰＡＤ、ＧＦＤＸ００１０５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）の全面に、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ａｉｒ Ｊｅｔノズル（ＡＪＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体１を１５μＬ／ｃｍの塗布量で均一に塗布し、抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体１を１５μＬ／ｃｍの塗布量で均一に塗布した後、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１を得た。次いで、前記コンジュゲーションパッド１とは異なる１０ｍｍ×３００ｍｍのコンジュゲーションパッド（ＧＬＡＳＳＦＩＢＥＲ ＤＩＡＧＮＯＳＴＩＣ ＰＡＤ、ＧＦＤＸ００１０５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）の全面に、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ａｉｒ Ｊｅｔノズル（ＡＪＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体１を１５μＬ／ｃｍの塗布量で均一に塗布した後、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド２を得た。
１０ｍｍ×３００ｍｍのコンジュゲーションパッド（ＧＬＡＳＳＦＩＢＥＲ ＤＩＡＧＮＯＳＴＩＣ ＰＡＤ、ＧＦＤＸ００１０５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）の全面に、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ａｉｒ Ｊｅｔノズル（ＡＪＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体１を１５μＬ／ｃｍの塗布量で均一に塗布し、抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体１を１５μＬ／ｃｍの塗布量で均一に塗布した後、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１を得た。次いで、前記コンジュゲーションパッド１とは異なる１０ｍｍ×３００ｍｍのコンジュゲーションパッド（ＧＬＡＳＳＦＩＢＥＲ ＤＩＡＧＮＯＳＴＩＣ ＰＡＤ、ＧＦＤＸ００１０５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）の全面に、分注プラットフォーム（ＸＹＺ３０６０、ＢＩＯＤＯＴ社製）と、Ａｉｒ Ｊｅｔノズル（ＡＪＱＨＲ－ＸＹＺ、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体１を１５μＬ／ｃｍの塗布量で均一に塗布した後、４５℃に調整した乾燥機（ＷＦＯ－５１０、東京理化器械社製）で３０分間乾燥し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド２を得た。
（６）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片の作製
９０ｍｍ×３００ｍｍのバッキングシート（ＧＬ－５７８８８、Ｌｏｈｍａｎｎ社製）の一端から１０ｍｍ～３５ｍｍの位置にＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１を、前記バッキングシートの他端から１０ｍｍ～３５ｍｍの位置にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２をそれぞれ貼り合わせた。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１の上流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるようＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１を、前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２の上流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるようＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド２をそれぞれ貼り合わせた。次いで、前記バッキングシートの中央に２５ｍｍ×３００ｍｍのサンプルパッド（ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ ＦＩＢＥＲ ＳＡＭＰＬＥ ＰＡＤＳ、ＣＦＳＰ００２０００、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）を貼り合わせた。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１の下流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるよう２０ｍｍ×３００ｍｍの吸収パッド１（ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ ＦＩＢＥＲ ＳＡＭＰＬＥ ＰＡＤＳ、ＣＦＳＰ００２０００、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）を、前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２の下流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるよう２０ｍｍ×３００ｍｍの吸収パッド２（ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ ＦＩＢＥＲ ＳＡＭＰＬＥ ＰＡＤＳ、ＣＦＳＰ００２０００、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）をそれぞれ貼り合わせた。次いで、ギロチン式カッティングモジュール（ＣＭ５０００、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、幅４ｍｍ、長さ９０ｍｍの短冊状にカットすることで、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１を得た。
９０ｍｍ×３００ｍｍのバッキングシート（ＧＬ－５７８８８、Ｌｏｈｍａｎｎ社製）の一端から１０ｍｍ～３５ｍｍの位置にＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１を、前記バッキングシートの他端から１０ｍｍ～３５ｍｍの位置にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２をそれぞれ貼り合わせた。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１の上流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるようＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１を、前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２の上流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるようＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド２をそれぞれ貼り合わせた。次いで、前記バッキングシートの中央に２５ｍｍ×３００ｍｍのサンプルパッド（ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ ＦＩＢＥＲ ＳＡＭＰＬＥ ＰＡＤＳ、ＣＦＳＰ００２０００、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）を貼り合わせた。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１の下流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるよう２０ｍｍ×３００ｍｍの吸収パッド１（ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ ＦＩＢＥＲ ＳＡＭＰＬＥ ＰＡＤＳ、ＣＦＳＰ００２０００、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）を、前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２の下流側に、メンブレンと５ｍｍ重なるよう２０ｍｍ×３００ｍｍの吸収パッド２（ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ ＦＩＢＥＲ ＳＡＭＰＬＥ ＰＡＤＳ、ＣＦＳＰ００２０００、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）をそれぞれ貼り合わせた。次いで、ギロチン式カッティングモジュール（ＣＭ５０００、ＢＩＯＤＯＴ社製）を用い、幅４ｍｍ、長さ９０ｍｍの短冊状にカットすることで、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１を得た。
（７）測定試料希釈液の調製
１００ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬社製）（ｐＨ８．５）１Ｌ、塩化ナトリウム（１９１－０１６６５、富士フィルム和光純薬社製）８．７７ｇ、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート：Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０（１６６－２１２１３、富士フィルム和光純薬社製）２ｇ、ポリオキシエチレン（１０）オクチルフェニルエーテル：ＴｒｉｔｏｎＸ（登録商標）－１００（１６０－２４７５１、富士フィルム和光純薬社製）９ｇを５００ｍＬガラス瓶に加え、溶解することで測定試料希釈液を調製した。
１００ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬社製）（ｐＨ８．５）１Ｌ、塩化ナトリウム（１９１－０１６６５、富士フィルム和光純薬社製）８．７７ｇ、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート：Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０（１６６－２１２１３、富士フィルム和光純薬社製）２ｇ、ポリオキシエチレン（１０）オクチルフェニルエーテル：ＴｒｉｔｏｎＸ（登録商標）－１００（１６０－２４７５１、富士フィルム和光純薬社製）９ｇを５００ｍＬガラス瓶に加え、溶解することで測定試料希釈液を調製した。
（８）Ｆｌｕ－Ａ試料、Ｆｌｕ－Ｂ試料およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ２試料の調製
市販のＦｌｕ－ＡのＮタンパク質であるＰｕｒｉｆｉｅｄ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｐｒｏｔｅｉｎ （Ｈ1Ｎ1 ｓｔｒａｉｎ）（３０－ＡＩ５０、Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ社製）を、前記測定試料希釈液にて１０μｇ/ｍＬに希釈することでＦｌｕ－Ａ試料を得た。市販のＦｌｕ－ＢのＮタンパク質であるＰｕｒｉｆｉｅｄ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｐｒｏｔｅｉｎ（３０－ＡＩ７５、Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ社製）を、前記測定試料希釈液にて１０μｇ/ｍＬに希釈することでＦｌｕ－Ｂ試料を得た。市販のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質であるＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｎｕｃｌｅｏｃａｐｓｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎ（２３０－３０１６４、ＲａｙＢｉｏｔｅｃｈ社製）を、前記測定試料希釈液にて１０ｎｇ/ｍＬに希釈することでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料を得た。
市販のＦｌｕ－ＡのＮタンパク質であるＰｕｒｉｆｉｅｄ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｐｒｏｔｅｉｎ （Ｈ1Ｎ1 ｓｔｒａｉｎ）（３０－ＡＩ５０、Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ社製）を、前記測定試料希釈液にて１０μｇ/ｍＬに希釈することでＦｌｕ－Ａ試料を得た。市販のＦｌｕ－ＢのＮタンパク質であるＰｕｒｉｆｉｅｄ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｐｒｏｔｅｉｎ（３０－ＡＩ７５、Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ社製）を、前記測定試料希釈液にて１０μｇ/ｍＬに希釈することでＦｌｕ－Ｂ試料を得た。市販のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質であるＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｎｕｃｌｅｏｃａｐｓｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎ（２３０－３０１６４、ＲａｙＢｉｏｔｅｃｈ社製）を、前記測定試料希釈液にて１０ｎｇ/ｍＬに希釈することでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料を得た。
（９）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片の評価：非特異吸着の評価
前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片を水平な台に設置した。次いで、前記測定試料希釈液１５０μＬを、マイクロピペットで分取し、サンプルパッドに緩やかに滴下し、２５℃で１５分間静置した。次いで、メンブレン上のテストラインＡ～Ｃの反射吸光度（ｍＡｂｓ）をイムノクロマトリーダー（Ｃ１００６０－１０、測定モード：Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｌｏｉｄ、Ｌｉｎｅ（赤色ライン測定時）またはＬａｔｅｘ、Ｌｉｎｅ（青色または緑色ライン測定時）、浜松ホトニクス社製）を用いて測定した。得られた結果を表１に示す。なお、非特異吸着は反射吸光度が１０ｍＡｂｓ以下であれば良好と判断できる。
前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片を水平な台に設置した。次いで、前記測定試料希釈液１５０μＬを、マイクロピペットで分取し、サンプルパッドに緩やかに滴下し、２５℃で１５分間静置した。次いで、メンブレン上のテストラインＡ～Ｃの反射吸光度（ｍＡｂｓ）をイムノクロマトリーダー（Ｃ１００６０－１０、測定モード：Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｌｏｉｄ、Ｌｉｎｅ（赤色ライン測定時）またはＬａｔｅｘ、Ｌｉｎｅ（青色または緑色ライン測定時）、浜松ホトニクス社製）を用いて測定した。得られた結果を表１に示す。なお、非特異吸着は反射吸光度が１０ｍＡｂｓ以下であれば良好と判断できる。
（１０）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片の評価：感度の評価
前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片を水平な台に設置した。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ試料、Ｆｌｕ－Ｂ試料、またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料１５０μＬを、マイクロピペットで分取し、サンプルパッドに緩やかに滴下し、２５℃で１５分間静置した。次いで、メンブレン上のコントロールラインおよびテストラインの反射吸光度（ｍＡｂｓ）をイムノクロマトリーダー（Ｃ１００６０－１０、測定モード：Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｌｏｉｄ、Ｌｉｎｅ（赤色ライン測定時）またはＬａｔｅｘ、Ｌｉｎｅ（青色または緑色ライン測定時）、浜松ホトニクス社製）を用いて測定した。得られた結果を表１に示す。なお、感度は反射吸光度が５０ｍＡｂｓ以下であれば不良、５０ｍＡｂｓ超であれば良好と判断した。
前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片を水平な台に設置した。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ試料、Ｆｌｕ－Ｂ試料、またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料１５０μＬを、マイクロピペットで分取し、サンプルパッドに緩やかに滴下し、２５℃で１５分間静置した。次いで、メンブレン上のコントロールラインおよびテストラインの反射吸光度（ｍＡｂｓ）をイムノクロマトリーダー（Ｃ１００６０－１０、測定モード：Ｇｏｌｄ Ｃｏｌｌｏｉｄ、Ｌｉｎｅ（赤色ライン測定時）またはＬａｔｅｘ、Ｌｉｎｅ（青色または緑色ライン測定時）、浜松ホトニクス社製）を用いて測定した。得られた結果を表１に示す。なお、感度は反射吸光度が５０ｍＡｂｓ以下であれば不良、５０ｍＡｂｓ超であれば良好と判断した。
（１１）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片の評価：視認性の評価
前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片を水平な台に設置した。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ試料１５０μＬ（テストラインＡおよびコントロールラインが発色）、Ｆｌｕ－Ｂ試料１５０μＬ（テストラインＢおよびコントロールラインが発色）、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料１５０μＬ（テストラインＣおよびコントロールラインが発色）、またはＦｌｕ－Ａ試料５０μＬ、Ｆｌｕ－Ｂ試料５０μＬ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料５０μＬの混合液１５０μＬ（テストラインＡ～Ｃおよびコントロールラインが発色）を、マイクロピペットで分取し、サンプルパッドに緩やかに滴下し、２５℃で１５分間静置した。次いで、メンブレン上のコントロールラインおよびテストラインを１０名で目視し、１０名中１０名が項目判定容易であると判定したものを◎、１０名中８～９名が項目判定容易であると判定したものを〇、１０名中６～７名が項目判定容易であると判定したものを△、１０名中５名以下が項目判定容易であると判定したものを×と評価した。ここで項目判定は、前記メンブレン上のコントロールラインおよびテストラインを目視し、出現した４本ラインがそれぞれどの項目のラインであるかを即座に判定できるかで評価した。得られた結果を表１に示す。
前記Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片を水平な台に設置した。次いで、前記Ｆｌｕ－Ａ試料１５０μＬ（テストラインＡおよびコントロールラインが発色）、Ｆｌｕ－Ｂ試料１５０μＬ（テストラインＢおよびコントロールラインが発色）、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料１５０μＬ（テストラインＣおよびコントロールラインが発色）、またはＦｌｕ－Ａ試料５０μＬ、Ｆｌｕ－Ｂ試料５０μＬ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２試料５０μＬの混合液１５０μＬ（テストラインＡ～Ｃおよびコントロールラインが発色）を、マイクロピペットで分取し、サンプルパッドに緩やかに滴下し、２５℃で１５分間静置した。次いで、メンブレン上のコントロールラインおよびテストラインを１０名で目視し、１０名中１０名が項目判定容易であると判定したものを◎、１０名中８～９名が項目判定容易であると判定したものを〇、１０名中６～７名が項目判定容易であると判定したものを△、１０名中５名以下が項目判定容易であると判定したものを×と評価した。ここで項目判定は、前記メンブレン上のコントロールラインおよびテストラインを目視し、出現した４本ラインがそれぞれどの項目のラインであるかを即座に判定できるかで評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例２）
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片２を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片２を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例３）
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片３を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片３を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例４）
セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片４を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片４を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例５）
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片５を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片５を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例６）
セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片６を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片６を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例７）
セルロース系着色微粒子Ａに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片７を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ａに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片７を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例８）
セルロース系着色微粒子Ｂに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片８を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ｂに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片８を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例９）
セルロース系着色微粒子Ａに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片９を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ａに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片９を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例１０）
セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１０を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１０を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例１１）
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１１を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ａに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１１を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例１２）
セルロース系着色微粒子Ａに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１２を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
セルロース系着色微粒子Ａに緑色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＧＲ１：Ｇｒｅｅｎ、平均粒子径３３５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｂに青色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＢＬ２：Ｄａｒｋ Ｎａｖｙ、平均粒子径３６５ｎｍ、旭化成社製）を、セルロース系着色微粒子Ｃに赤色粒子（ＮａｎｏＡｃｔ（登録商標）、ＲＥ２：Ｄａｒｋ Ｒｅｄ、平均粒子径３４０ｎｍ、旭化成社製）を、それぞれ使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１２を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例１３）
抗体Ａ１として１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＮ５、ＭＡｂｓ：ＩｎＡ２４５、ＨｙＴｅｓｔ社製）の代わりに、１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体３（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ （Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｃ０１７３２Ｍ、Ｍｅｒｉｄｉａｎ社製）を使用し、抗体Ａ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ Ｖｉｒｕｓ （ＮＰ） Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：ＢＭＲｉａ０１７、Ｃｌｏｎｅ：ＦＬＡ－８５９、Ｂｉｏ Ｍａｔｒｉｘ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｃ.社製）の代わりに、２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体４（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ （Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｃ０１７３１Ｍ、Ｍｅｒｉｄｉａｎ社製）を使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１３を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
抗体Ａ１として１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＮ５、ＭＡｂｓ：ＩｎＡ２４５、ＨｙＴｅｓｔ社製）の代わりに、１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体３（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ （Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｃ０１７３２Ｍ、Ｍｅｒｉｄｉａｎ社製）を使用し、抗体Ａ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ Ｖｉｒｕｓ （ＮＰ） Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：ＢＭＲｉａ０１７、Ｃｌｏｎｅ：ＦＬＡ－８５９、Ｂｉｏ Ｍａｔｒｉｘ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｃ.社製）の代わりに、２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体４（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ （Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｃ０１７３１Ｍ、Ｍｅｒｉｄｉａｎ社製）を使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１３を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（実施例１４）
抗体Ｂ１としてマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｖｉｒｕｓ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：１１３１、ＶｉｒｏＳｔａｔ社製）の代わりに、１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体３（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ （Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｃ０１７４４Ｍ、Ｍｅｒｉｄｉａｎ社製）を使用し、抗体Ｂ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ, ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＦ１８/ＲＩＦ１７、ＭＡｂｓ：Ｒ２／３、ＨｙＴｅｓｔ社製）の代わりに、２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体４（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ、ＭＡＢ７０４２Ｐ、ＢＢＩ社製）を使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１４を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
抗体Ｂ１としてマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｖｉｒｕｓ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：１１３１、ＶｉｒｏＳｔａｔ社製）の代わりに、１．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体３（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ （Ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ）、Ｃ０１７４４Ｍ、Ｍｅｒｉｄｉａｎ社製）を使用し、抗体Ｂ２として２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体２（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ, ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＦ１８/ＲＩＦ１７、ＭＡｂｓ：Ｒ２／３、ＨｙＴｅｓｔ社製）の代わりに、２．０ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体４（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ、ＭＡＢ７０４２Ｐ、ＢＢＩ社製）を使用する以外は実施例１と同様の方法にてＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片１４を作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表１に示す。
（比較例１）
（１２）抗体Ａ１と金コロイドとの複合体の調製
ＯＤ５２０＝１．０の金コロイド粒子（ＥＭＧＣ４０：Ｒｅｄ、平均粒子径４０ｎｍ、ＢＢＩ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ社製）１３．５ｍＬ、５０ｍＭのりん酸二水素カリウム（１６６－０４２５５、富士フィルム和光純薬工業社製）（ｐＨ７．０）１．５ｍＬ、および抗体Ａ１として０．０５ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＮ５、ＭＡｂｓ：ＩｎＡ２４５、ＨｙＴｅｓｔ社製）１．５ｍＬを５０ｍＬの遠沈管に加え、軽く撹拌し、２５℃で１０分間静置した。次いで、１０質量％のＢｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＢＳＡ（Ａ７９０６、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）からなるブロッキング液１ｍＬを加え、軽く撹拌した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）とラックインローター（ＴＭＡ－３００、トミー精工社製）を用い、８，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作金コロイド粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、１．０質量％のＢｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＢＳＡ（Ａ７９０６、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）、１５０ｍＭの塩化ナトリウム（１９２－１３９２５、富士フィルム和光純薬工業社製）、２０ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬工業社製）からなる洗浄液（ｐＨ８．２）３０ｍＬを加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）を用い、８，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作金コロイド粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、２．５質量％のスクロース（１９６－０００１５、富士フィルム和光純薬工業社製）、０．２５質量％のＢｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＢＳＡ（Ａ７９０６、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）、３７．５ｍＭの塩化ナトリウム（１９２－１３９２５、富士フィルム和光純薬工業社製）、２０ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬工業社製）からなる塗布液（ｐＨ８．２）を加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理し、塗布液の液量によりＯＤ５２０＝４．０になるよう調整することで、抗体Ａ１と金コロイドとの複合体Ｘを得た。
（１２）抗体Ａ１と金コロイドとの複合体の調製
ＯＤ５２０＝１．０の金コロイド粒子（ＥＭＧＣ４０：Ｒｅｄ、平均粒子径４０ｎｍ、ＢＢＩ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ社製）１３．５ｍＬ、５０ｍＭのりん酸二水素カリウム（１６６－０４２５５、富士フィルム和光純薬工業社製）（ｐＨ７．０）１．５ｍＬ、および抗体Ａ１として０．０５ｍｇ／ｍＬのマウス由来抗Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ、ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：３ＩＮ５、ＭＡｂｓ：ＩｎＡ２４５、ＨｙＴｅｓｔ社製）１．５ｍＬを５０ｍＬの遠沈管に加え、軽く撹拌し、２５℃で１０分間静置した。次いで、１０質量％のＢｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＢＳＡ（Ａ７９０６、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）からなるブロッキング液１ｍＬを加え、軽く撹拌した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）とラックインローター（ＴＭＡ－３００、トミー精工社製）を用い、８，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作金コロイド粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、１．０質量％のＢｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＢＳＡ（Ａ７９０６、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）、１５０ｍＭの塩化ナトリウム（１９２－１３９２５、富士フィルム和光純薬工業社製）、２０ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬工業社製）からなる洗浄液（ｐＨ８．２）３０ｍＬを加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理した。次いで、遠心分離機（ＭＸ－３０７、トミー精工社製）を用い、８，０００×ｇの遠心を２５℃で１５分間行い、抗体感作金コロイド粒子を沈降させた後に上澄みを除去した。次いで、２．５質量％のスクロース（１９６－０００１５、富士フィルム和光純薬工業社製）、０．２５質量％のＢｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＢＳＡ（Ａ７９０６、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）、３７．５ｍＭの塩化ナトリウム（１９２－１３９２５、富士フィルム和光純薬工業社製）、２０ｍＭのトリス緩衝液（２０４－０７８８５、富士フィルム和光純薬工業社製）からなる塗布液（ｐＨ８．２）を加え、超音波分散機（ＵＨ－５０、エスエムテー社製）で１０秒間処理し、塗布液の液量によりＯＤ５２０＝４．０になるよう調整することで、抗体Ａ１と金コロイドとの複合体Ｘを得た。
（１３）抗体Ｂ１と金コロイドとの複合体の調製
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｂ１としてマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｖｉｒｕｓ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：１１３１、ＶｉｒｏＳｔａｔ社製）を使用する以外は（１２）抗体Ａ１と金コロイドとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｂ１と金コロイドとの複合体Ｙを得た。
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｂ１としてマウス由来抗Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｂ ｖｉｒｕｓ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ、Ｃａｔ：１１３１、ＶｉｒｏＳｔａｔ社製）を使用する以外は（１２）抗体Ａ１と金コロイドとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｂ１と金コロイドとの複合体Ｙを得た。
（１４）抗体Ｃ１と金コロイドとの複合体の調製
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｃ１としてマウス由来抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ａｎｔｉ－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２－ＮＰ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＳＣＶ－１０８、東洋紡社製）を使用する以外は（１２）抗体Ａ１と金コロイドとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｃ１と金コロイドとの複合体Ｚを得た。
抗体Ａ１の代わりに抗体Ｃ１としてマウス由来抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質モノクローナル抗体１（Ａｎｔｉ－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２－ＮＰ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＳＣＶ－１０８、東洋紡社製）を使用する以外は（１２）抗体Ａ１と金コロイドとの複合体の調製と同様の方法で、抗体Ｃ１と金コロイドとの複合体Ｚを得た。
（１５）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレンの作製
前記（４）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレンの作製と同様の方法で、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２を得た。
前記（４）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレンの作製と同様の方法で、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用メンブレン１、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用メンブレン２を得た。
（１６）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドの作製
抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体１の代わりに抗体Ａ１と金コロイドとの複合体Ｘを、抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体１の代わりに抗体Ｂ１と金コロイドとの複合体Ｙを、抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体１の代わりに抗体Ｃ１と金コロイドとの複合体Ｚを、それぞれ使用する以外は（５）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドの作製と同様の方法で、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＸ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＹを得た。
抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体１の代わりに抗体Ａ１と金コロイドとの複合体Ｘを、抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体１の代わりに抗体Ｂ１と金コロイドとの複合体Ｙを、抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体１の代わりに抗体Ｃ１と金コロイドとの複合体Ｚを、それぞれ使用する以外は（５）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドの作製と同様の方法で、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＸ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＹを得た。
（１７）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片およびデバイスの作製
Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１の代わりにＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＸを、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１の代わりにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＹを、それぞれ使用する以外は（６）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片の作製と同様の方法で、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片Ｘを作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表２に示す。
Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１の代わりにＦｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＸを、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッド１の代わりにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用コンジュゲーションパッドＹを、それぞれ使用する以外は（６）Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片の作製と同様の方法で、Ｆｌｕ－Ａ、Ｆｌｕ－Ｂ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質検出用イムノクロマト試験片Ｘを作製し、（９）非特異吸着、（１０）感度、（１１）視認性を評価した。得られた結果を表２に示す。
実施例１～１４の試験片はテストラインＡ～Ｃ、およびコントロールラインが濃く発色しており、視認性も良好であった。一方、比較例１のデバイスはテストラインＡ～Ｃ、およびコントロールラインが薄く、また４本のラインが全て同じ色であるため、項目の識別に誤認を生じる可能性があった。
本発明により、Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質、Ｆｌｕ－ＢのＮタンパク質、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質を同時かつ高感度に検出し得るイムノクロマト試験片を提供することができる。
１：サンプルパッド
２１：コンジュゲーションパッド１
２２：コンジュゲーションパッド２
３１：メンブレン１
３２：メンブレン２
４１：吸収パッド１
４２：吸収パッド２
５：バッキングシート
６：テストラインＡまたはＢ
７：テストラインＢまたはＡ
８：テストラインＣ
９１：コントロールライン１
９２：コントロールライン２
１０：粘着シート
２１：コンジュゲーションパッド１
２２：コンジュゲーションパッド２
３１：メンブレン１
３２：メンブレン２
４１：吸収パッド１
４２：吸収パッド２
５：バッキングシート
６：テストラインＡまたはＢ
７：テストラインＢまたはＡ
８：テストラインＣ
９１：コントロールライン１
９２：コントロールライン２
１０：粘着シート
Claims (7)
- （１）吸収パッド１と、
（２）測定試料中のインフルエンザウイルスＡ（Ｆｌｕ－Ａ）のヌクレオカプシドタンパク質（Ｎタンパク質）と特異的に結合する抗体Ａ２を線状に固定したテストラインＡ、インフルエンザウイルスＢ（Ｆｌｕ－Ｂ）のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ２を線状に固定したテストラインＢ、および前記抗体Ａ２またはＢ２と特異的に結合する抗体Ｄ１を線状に固定したコントロールライン１を具備したメンブレン１と、
（３）Ｆｌｕ－ＡのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ａ１とセルロース系着色微粒子Ａとの複合体、およびＦｌｕ－ＢのＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｂ１とセルロース系着色微粒子Ｂとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド１と、
（４）サンプルパッドと、
（５）測定試料中の重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ１とセルロース系着色微粒子Ｃとの複合体を担持したコンジュゲーションパッド２と、
（６）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮタンパク質と特異的に結合する抗体Ｃ２を線状に固定したテストラインＣ、および前記抗体Ｃ２と特異的に結合する抗体Ｄ２を線状に固定したコントロールライン２を具備したメンブレン２と、
（７）吸収パッド２と、
から構成されることを特徴とするイムノクロマト試験片。 - 前記吸収パッド１、前記メンブレン１、前記コンジュゲーションパッド１、前記サンプルパッド、前記コンジュゲーションパッド２、前記メンブレン２、および前記吸収パッド２が順に連接配置されていることを特徴とする請求項１に記載のイムノクロマト試験片。
- 前記テストラインＡとテストラインＢの発色が異なり、かつテストラインＡまたはテストラインＢの発色とテストラインＣの発色とが同じであることを特徴とする請求項１または２に記載のイムノクロマト試験片。
- 前記テストラインＡ／テストラインＢ／テストラインＣの発色がそれぞれ赤／青／赤、赤／青／青、青／赤／赤、青／赤／青のいずれかであることを特徴とする請求項１～３のいずれかに記載のイムノクロマト試験片。
- 前記テストラインＡとテストラインＢの発色が同じで、かつテストラインＣの発色とは異なることを特徴とする請求項１または２に記載のイムノクロマト試験片。
- 前記テストラインＡ／テストラインＢ／テストラインＣの発色がそれぞれ赤／赤／青、または青／青／赤であることを特徴とする請求項１、２または５のいずれかに記載のイムノクロマト試験片。
- 請求項１から６のいずれかに記載のイムノクロマト試験片、測定試料採取具、フィルター、測定試料希釈液からなることを特徴とするイムノクロマトキット。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021120904A JP2023016530A (ja) | 2021-07-21 | 2021-07-21 | イムノクロマト試験片 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2021120904A JP2023016530A (ja) | 2021-07-21 | 2021-07-21 | イムノクロマト試験片 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023016530A true JP2023016530A (ja) | 2023-02-02 |
Family
ID=85131805
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021120904A Pending JP2023016530A (ja) | 2021-07-21 | 2021-07-21 | イムノクロマト試験片 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2023016530A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024005055A1 (ja) * | 2022-06-30 | 2024-01-04 | 積水メディカル株式会社 | 検査方法、検査試薬、及び検査キット |
-
2021
- 2021-07-21 JP JP2021120904A patent/JP2023016530A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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