JP2022068176A - 操作されたＦｃコンストラクトに関する組成物及び方法 - Google Patents

操作されたＦｃコンストラクトに関する組成物及び方法 Download PDF

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Abstract

【課題】免疫細胞を有意に刺激することなく、免疫疾患及び炎症性疾患を有する患者の治療に用いることが可能な生物学的に活性なＦｃドメインを含有する治療コンストラクトを提供する。【解決手段】ａ）式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、ｉ）Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、ｉｉ）Ｌはリンカーであり、ｉｉｉ）Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む、前記第一のポリペプチドと；ｂ）第三のＦｃドメイン単量体を含む第二のポリペプチドと；ｃ）第四のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドとを含むＦｃコンストラクトであって、前記第一と第三のＦｃドメイン単量体とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、前記第二と第四のＦｃドメイン単量体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが少なくとも一つのアミノ酸修飾を含む、前記Ｆｃコンストラクトである。【選択図】図１６

Description

関連出願への相互参照
この出願は、２０１６年５月２３日出願の同時係属米国特許仮出願第６２／３４０，３
２２号の優先権、及び又は、２０１７年１月６日出願の同時係属米国特許仮出願第６２／
４４３，４５１の優先権の利益を主張する。上記出願の開示は、その全体を参照によって
ここに組み入れるものとする。
背景
治療用タンパク質、例えば、治療用抗体及びＦｃ融合タンパク質は、急速に、免疫疾患
及び炎症性疾患をもつ患者にとって臨床的に重要な薬剤分類になっている。
本開示は、生物学的に活性なＦｃドメインを含有する治療コンストラクトを特徴とする
。こうしたコンストラクトは、所望の血中半減期、ならびに／又は、Ｆｃ受容体に対する
結合親和性及び／もしくは結合活性を有し得る。これらコンストラクトは、例えば、対象
における炎症の軽減、対象における自己抗体のクリアランスの促進、対象における抗原提
示の抑制、例えば対象における免疫複合体に基づく免疫応答の活性化の防止である、免疫
応答の防止、ならびに、対象における免疫疾患及び炎症性疾患（例えば、自己免疫疾患）
の治療に有用である。本明細書に記載のＦｃコンストラクトは、免疫細胞を有意に刺激す
ることなく、免疫疾患及び炎症性疾患を有する患者の治療に用いることが可能である。
概して、この開示は、２～１０個のＦｃドメインを有するＦｃコンストラクト、例えば
２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のＦｃドメインを有するＦｃコンストラク
トを特徴とするものであって、該Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又
は複数のＦｃ受容体に対する結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメ
インの硫酸化のレベル、（ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイ
ン安定性、及び／又は、（ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える
、少なくとも一つのアミノ酸修飾を含む。一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクトが、
２～１０個のＦｃドメイン、２～５個のＦｃドメイン、２～４個のＦｃドメイン、２～３
個のＦｃドメイン、３～５個のＦｃドメイン、２～８個のＦｃドメイン、又は２～６個の
Ｆｃドメインを含む。一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクトが、５～１０個のＦｃド
メインを含む。該コンストラクトは、２～６（例えば、２、３、４、５、又は６）個の会
合したポリペプチドを含み得、各ポリペプチドが少なくとも一つのＦｃドメイン単量体を
含み、コンストラクトの各Ｆｃドメイン単量体は、同一であるか、又は、コンストラクト
の他の単量体と、例えば２０個以下、１５個以下、１０個以下、８個以下、７個以下、６
個以下、５個以下、４個以下、３個以下、又は２個以下である、２０個以下のアミノ酸（
例えば、１５個以下、１０個以下のアミノ酸）が異なる。本明細書に記載のＦｃコンスト
ラクトは、免疫グロブリンの抗原結合ドメインを含まない。一部の実施形態では、Ｆｃコ
ンストラクト（又はＦｃコンストラクト内のＦｃドメイン）は、異なるポリペプチド内に
存在するＦｃドメイン単量体の会合によって全体的に又は一部形成される。或る実施形態
では、Ｆｃコンストラクトは、二つのポリペプチドの会合を促進する追加ドメイン（例え
ば、ＩｇＭテールピース（ｔａｉｌｐｉｅｃｅ）又はＩｇＡテールピース）を含まない。
他の実施形態では、連結してＦｃドメインを形成する二つのＦｃドメイン単量体の間にの
み、Ｆｃコンストラクト内に、共有結合が存在する。他の実施形態では、Ｆｃコンストラ
クトは、Ｆｃドメイン間に共有結合を含まない。さらに他の実施形態では、Ｆｃコンスト
ラクトは、Ｆｃコンストラクト内のＦｃドメインの全て又は実質的に全てが、細胞表面上
のＦｃ受容体と同時に相互作用することができるように、十分な柔軟性を備える。一部の
実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、リンカー（例えば、柔軟なアミノ酸スペーサー）
を介して連結した少なくとも二つのＦｃドメインを含む。一実施形態では、ドメイン単量
体は、一次配列が野生型と異なる又は互いに異なるものであって、それらは、二量体形成
選択性モジュール（ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｍｏｄｕｌｅ
）を有する。
この開示のＦｃコンストラクトは、医薬組成物中にあるものとすることが可能であり、
例えば本明細書に記載するもの等である２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個の
Ｆｃドメインを有するコンストラクトである、２～１０個のＦｃドメイン（例えば、２～
８個のＦｃドメイン、２～６個のＦｃドメイン、２～４個のＦｃドメイン、２～３個のＦ
ｃドメイン、３～５個のＦｃドメイン、又は５～１０個のＦｃドメイン）を有するＦｃコ
ンストラクトの実質的に均質な集団（例えば、少なくとも８５％、９０％、９５％、９８
％、又は９９％均質）を含む。その結果、Ｆｃコンストラクトの実質的な凝集又は望まな
い多量体形成を有さない、医薬組成物を作製することができる。
一態様では、Ｆｃコンストラクトは、二つのＦｃドメインを形成する三つのポリペプチ
ドを含む。第一のポリペプチドは、式Ａ－Ｌ－Ｂを有し、式中、Ａは第一のＦｃドメイン
単量体を含み、Ｌはリンカーであり、Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む。第二のポリ
ペプチドは、第三のＦｃドメイン単量体を含み、第三のポリペプチドは、第四のＦｃドメ
イン単量体を含む。この態様では、第一のＦｃドメイン単量体と第三のＦｃドメイン単量
体とが結合して第一のＦｃドメインを形成する。同様に、第二のＦｃドメイン単量体と第
四のＦｃドメイン単量体とが結合して第二のＦｃドメインを形成する。本開示のこの態様
の例示的なＦｃコンストラクトを図４及び６に示している。
或る実施形態では、第一のＦｃドメイン単量体及び第三のＦｃドメイン単量体は、これ
らＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュール
を含む。他の実施形態では、第二のＦｃドメイン単量体及び第四のＦｃドメイン単量体は
、これらＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジ
ュールを含む。
或る実施形態では、Ａ、Ｂ、第二のポリペプチド、及び第三のポリペプチドのうちの一
つ又は複数が、Ｆｃドメイン単量体からなる。一実施形態では、Ａ、Ｂ、第二のポリペプ
チド、及び第三のポリペプチドのそれぞれが、Ｆｃドメイン単量体からなる。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトが、例えばペプチド、例えば血清タンパク質に
結合するペプチド、例えばアルブミン結合ペプチドである、異種部分をさらに含むことが
可能である。該部分は、例えばリンカーを介して、Ｂ又は第三のポリペプチドのＮ末端又
はカルボキシ末端に連結することができる。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトが、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及びＩｇＧ
ＣＨ１抗体定常ドメインをさらに含む。ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインは、例えばリ
ンカーを介して、Ａ又は第二のポリペプチドのＮ末端に結合していることができる。
他の実施形態では、Ｆｃコンストラクトの第二及び第三のポリペプチドが、同一のアミ
ノ酸配列を有する。
別の態様では、この開示は、三つのＦｃドメインを形成する、四つのポリペプチドを含
むＦｃコンストラクトを特徴とする。第一のポリペプチドは、式Ａ－Ｌ－Ｂを有し、式中
、Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、Ｌはリンカーであり、Ｂは第二のＦｃドメイン
単量体を含む。第二のポリペプチドは、式Ａ’－Ｌ’－Ｂ’を有し、Ａ’は第三のＦｃド
メイン単量体を含み、Ｌ’はリンカーであり、Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む。
第三のポリペプチドは、第五のＦｃドメイン単量体を含み、第四のポリペプチドは、第六
のＦｃドメイン単量体を含む。この態様では、ＡとＡ’とが結合して第一のＦｃドメイン
を形成し、Ｂと第五のＦｃドメイン単量体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、Ｂ
’と第六のＦｃドメイン単量体とが結合して第三のＦｃドメインを形成する。本開示のこ
の態様の例示的なＦｃコンストラクトを図５に示している。
或る実施形態では、Ａ及びＡ’がそれぞれ、これらＦｃドメイン単量体間での二量体形
成を促進する二量体形成選択性モジュールを含む。他の実施形態では、Ｂ及び第五のＦｃ
ドメイン単量体がそれぞれ、これらＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する二量
体形成選択性モジュールを含む。さらに他の実施形態では、Ｂ’及び第六のＦｃドメイン
単量体がそれぞれ、これらＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する二量体形成選
択性モジュールを含む。
或る実施形態では、Ａ、Ｂ、Ａ’、Ｂ’、第三のポリペプチド、及び第四のポリペプチ
ドのうちの一つ又は複数が、Ｆｃドメイン単量体からなる。一実施形態では、Ａ、Ｂ、Ａ
’、Ｂ’、第三のポリペプチド、及び第四のポリペプチドのそれぞれが、Ｆｃドメイン単
量体からなる。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトが、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及びＩｇＧ
ＣＨ１抗体定常ドメインをさらに含み、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインは、リンカーを
介してＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインのＮ末端に結合し、ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメ
インは、例えばリンカーを介してＡのＮ末端に結合している。一実施形態では、Ｆｃコン
ストラクトが、第二のＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及び第二のＩｇＧ ＣＨ１抗体定常
ドメインをさらに含み、第二のＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインは、例えばリンカーを介し
て第二のＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインのＮ末端に結合し、第二のＩｇＧ ＣＨ１抗体
定常ドメインは、例えばリンカーを介してＡ’のＮ末端に結合している。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、例えばリンカーを介して、例えばペプチド
、例えばＢ又はＢ’のＮ末端又はＣ末端と連結したアルブミン結合ペプチドである異種部
分を、さらに含む。
他の実施形態では、Ｆｃコンストラクトの第一及び第二のポリペプチドが、同一のアミ
ノ酸配列を有し、Ｆｃコンストラクトの第三及び第四のポリペプチドが、同一のアミノ酸
配列を有する。
別の態様では、この開示は、二つのポリペプチドを含むＦｃコンストラクトを特徴とす
る。第一のポリペプチドは、式Ａ－Ｌ－Ｂを有し、式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体
を含み、Ｌはリンカーであり、Ｂは血清タンパク質結合部分、例えばアルブミン結合ペプ
チドを含む。第二のポリペプチドが、第二のＦｃドメイン単量体を含む。この態様では、
第一のＦｃドメイン単量体と第二のＦｃドメイン単量体とが結合して、Ｆｃドメインを形
成する。
或る実施形態では、第一のＦｃドメイン単量体及び第二のＦｃドメイン単量体は、第一
のＦｃドメイン単量体及び第二のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的
な二量体形成選択性モジュールを含む。
或る実施形態では、Ａと第二のポリペプチドとがそれぞれ、Ｆｃドメイン単量体からな
る。
さらに別の態様では、この開示は、二つのポリペプチドを含むＦｃコンストラクトを特
徴とする。第一のポリペプチドは、式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有し、式中、ＡはＩｇＧ
ＣＬ抗体定常ドメインを含み、Ｌ１及びＬ２はそれぞれリンカーであり、ＢはＩｇＧ
ＣＨ１抗体定常ドメインを含み、Ｃは第一のＦｃドメイン単量体を含む。第二のポリペプ
チドは、式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有し、式中、Ａ’はＩｇＧ ＣＬ抗体定
常ドメインを含み、Ｌ１’及びＬ２’はそれぞれリンカーであり、Ｂ’はＩｇＧ ＣＨ１
抗体定常ドメインを含み、Ｃ’は第二のＦｃドメイン単量体を含む。この態様では、第一
のＦｃドメイン単量体と第二のＦｃドメイン単量体とが結合して、Ｆｃドメインを形成す
る。本開示のこの態様の例示的なＦｃコンストラクトを図７Ａに示している。
或る実施形態では、第一のＦｃドメイン単量体及び第二のＦｃドメイン単量体は、第一
のＦｃドメイン単量体及び第二のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する二量体
形成選択性モジュールを含む。
或る実施形態では、ＣとＣ’とがそれぞれ、Ｆｃドメイン単量体からなる。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、リンカーを介して、例えばＣ又はＣ’のＮ
末端又はＣ末端に連結したアルブミン結合ペプチドである血清タンパク質結合部分を、さ
らに含む。
さらに別の態様では、この開示は、四つ以上のポリペプチドを含むＦｃコンストラクト
を特徴とする。第一のポリペプチドは、式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有し、式中、ＡはＩ
ｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインを含み、Ｌ１及びＬ２はそれぞれリンカーであり、ＢはＩｇ
Ｇ ＣＨ１抗体定常ドメインを含み、Ｃは第一のＦｃドメイン単量体を含む。第二のポリ
ペプチドは、式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有し、式中、Ａ’はＩｇＧ ＣＬ抗
体定常ドメインを含み、Ｌ１’及びＬ２’はそれぞれリンカーであり、Ｂ’はＩｇＧ Ｃ
Ｈ１抗体定常ドメインを含み、Ｃ’は第二のＦｃドメイン単量体を含む。この態様では、
第一のＦｃドメイン単量体が第三のＦｃドメイン単量体と結合して第一のＦｃドメインを
形成し、第二のＦｃドメイン単量体が第四のＦｃドメイン単量体と結合して第二のＦｃド
メインを形成する。さらに、第一のポリペプチドのＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、
第二のポリペプチドのＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインと結合し、かつ、第二のポリペプチ
ドのＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、第一のポリペプチドのＩｇＧ ＣＬ抗体定常ド
メインと結合して、二つ以上のＦｃドメインを含むＦｃコンストラクトを形成する。本開
示のこの態様の例示的なＦｃコンストラクトを図７Ｂに示している。
別の態様では、この開示は、二つのポリペプチドを含むＦｃコンストラクトを特徴とす
る。第一のポリペプチドが、第一のＦｃドメイン単量体を含み、第二のポリペプチドが、
第二のＦｃドメイン単量体を含む。この態様では、第一のＦｃドメイン単量体と第二のＦ
ｃドメイン単量体とが結合して、Ｆｃドメインを形成する。本開示のこの態様の例示的な
Ｆｃコンストラクトを図１に示している。さらにこの態様では、第一のＦｃドメイン単量
体及び第二のＦｃドメイン単量体はそれぞれ、第一のＦｃドメイン単量体及び第二のＦｃ
ドメイン単量体間での二量体形成を促進する二量体形成選択性モジュールを含む。この実
施形態の例示的なＦｃコンストラクトを図２及び３に示している。
或る実施形態では、第一のポリペプチドと第二のポリペプチドとがそれぞれ、Ｆｃドメ
イン単量体からなる。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、例えばリンカーを介して、例えば第一のポ
リペプチド又は第二のポリペプチドのＮ末端又はＣ末端に連結したアルブミン結合ペプチ
ドである血清タンパク質結合部分を、さらに含む。
別の態様では、この開示は、二つのポリペプチドを含むＦｃコンストラクトを特徴とす
る。第一のポリペプチドは、式Ａ－Ｌ－Ｂを有し、式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体
を含み、Ｌはリンカーであり、Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む。第二のポリペプチ
ドは、式Ａ’－Ｌ’－Ｂ’を有し、Ａ’は第三のＦｃドメイン単量体を含み、Ｌ’はリン
カーであり、Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む。この態様では、第一及び第二のＦ
ｃドメイン単量体はそれぞれ、それらの各ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、操作された空洞
を含み、第二及び第四のＦｃドメイン単量体はそれぞれ、それらの各ＣＨ３抗体定常ドメ
イン内に、操作された突起を有するものであって、該操作された空洞及び該操作された突
起は、空洞に突起が挿入された対を形成するように位置決めされる。またこの態様では、
第一のＦｃドメイン単量体と第三のＦｃドメイン単量体とが結合して第一のＦｃドメイン
を形成し、第二のＦｃドメイン単量体と第四のＦｃドメイン単量体とが結合して第二のＦ
ｃドメインを形成する。
或る実施形態では、Ａ、Ｂ、Ａ’、及びＢ’のうちの一つ又は複数が、Ｆｃドメイン単
量体からなる。一実施形態では、Ａ、Ｂ、Ａ’、及びＢ’のそれぞれが、Ｆｃドメイン単
量体からなる。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、例えばリンカーを介して例えばＢ又はＢ’
のＮ末端又はＣ末端に連結したアルブミン結合ペプチドである血清タンパク質結合部分を
、さらに含む。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトが、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及びＩｇＧ
ＣＨ１抗体定常ドメインをさらに含み、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインは、例えばリン
カーを介してＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインのＮ末端に結合し、ＩｇＧ ＣＨ１抗体定
常ドメインは、リンカーを介してＡのＮ末端に結合している。一実施形態では、Ｆｃコン
ストラクトが、第二のＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及び第二のＩｇＧ ＣＨ１抗体定常
ドメインをさらに含み、第二のＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインは、リンカーを介して第二
のＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインのＮ末端に結合し、第二のＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ド
メインは、リンカーを介してＡ’のＮ末端に結合している。
別の態様では、この開示は、ａ）式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、
式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌはリンカーであり、Ｂは第
二のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる、第一のポリペプチドと、ｂ）式Ａ’－Ｌ’
－Ｂ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、Ａ’は第三のＦｃドメイン単量体を
含む又はからなり、Ｌ’はリンカーであり、Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む又は
からなる第二のポリペプチドと、ｃ）第五のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる第三
のポリペプチドと、ｄ）第六のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる第四のポリペプチ
ドと、からなるＦｃコンストラクトを特徴とする。第一のポリペプチドのＡと第二のポリ
ペプチドのＡ’とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、第一のポリペプチドのＢと第
五のＦｃドメイン単量体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、第二のポリペプチド
のＢ’と第六のＦｃドメイン単量体とが結合して第三のＦｃドメインを形成する。第一の
Ｆｃドメイン単量体及び第三のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、第一のＦｃドメイン単
量体及び第三のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量体形成選択
性モジュールを含み、第二のＦｃドメイン単量体及び第五のＦｃドメイン単量体のそれぞ
れが、第二のＦｃドメイン単量体及び第五のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進
する相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、第四のＦｃドメイン単量体及び第六の
Ｆｃドメイン単量体のそれぞれが、第四のＦｃドメイン単量体及び第六のＦｃドメイン単
量体間での二量体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、Ｆｃコン
ストラクトが、３個以下のＦｃドメインを含有する。
この態様の一部の実施形態では、第一のＦｃドメイン単量体又は第三のＦｃドメイン単
量体のいずれかが、負電荷をもつアミノ酸置換を含み、他のＦｃドメイン単量体が、正電
荷をもつアミノ酸置換を含み、第二のＦｃドメイン単量体及び第四のＦｃドメイン単量体
、又は第五のＦｃドメイン単量体及び第六のＦｃドメイン単量体が、操作された突起を含
み、他方のＦｃドメイン単量体が、操作された空洞を含む。一部の実施形態では、リンカ
ーＬ１、Ｌ２、Ｌ１’、及び／又はＬ２’は、長さ３～２００アミノ酸である。一部の実
施形態では、リンカーＬ及び／又はＬ’は、配列番号：１～２７及び５１～５５のいずれ
か一つの配列を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列からなる。一部の実施形態で
は、リンカーＬ及び／又はＬ’は、最大１０個（例えば、最大９、８、７、６、５、４、
３、２、又は１個）の単一アミノ酸修飾（例えば置換、例えば保存的置換）をもつ、配列
番号：１～２７及び５１～５５のいずれか一つの配列を含む、該配列からなる、又は実質
的に該配列からなる。
別の態様では、この開示は、ａ）式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチ
ドであって、式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌ１はリンカー
であり、Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌ２はリンカーであり、Ｃ
は第三のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる、第一のポリペプチドと、ｂ）式Ａ’－
Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、Ａ’は第四の
Ｆｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌ１’はリンカーであり、Ｂ’は第五のＦｃド
メイン単量体を含む又はからなり、Ｌ２’はリンカーであり、Ｃ’は第六のＦｃドメイン
単量体を含む又はからなる、第二のポリペプチドと、ｃ）第七のＦｃドメイン単量体を含
む又はからなる第三のポリペプチドと、ｄ）第八のＦｃドメイン単量体を含む又はからな
る第四のポリペプチドと、ｅ）第九のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる第五のポリ
ペプチドと、ｆ）第十のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる第六のポリペプチドと、
からなるＦｃコンストラクトを特徴とする。第一のポリペプチドのＡと第七のＦｃドメイ
ン単量体とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、第一のポリペプチドのＢと第二のポ
リペプチドのＢ’とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、第一のポリペプチドのＣと
第八のＦｃドメイン単量体とが結合して第三のＦｃドメインを形成し、第二のポリペプチ
ドのＡ’と第九のＦｃドメイン単量体とが結合して第四のＦｃドメインを形成し、第二の
ポリペプチドのＣ’と第十のＦｃドメイン単量体とが結合して第五のＦｃドメインを形成
する。第一のＦｃドメイン単量体及び第七のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、第一のＦ
ｃドメイン単量体及び第七のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二
量体形成選択性モジュールを含み、第二のＦｃドメイン単量体及び第五のＦｃドメイン単
量体のそれぞれが、第二のＦｃドメイン単量体及び第五のＦｃドメイン単量体間での二量
体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、第三のＦｃドメイン単量
体及び第八のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、第三のＦｃドメイン単量体及び第八のＦ
ｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含
み、第四のＦｃドメイン単量体及び第九のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、第四のＦｃ
ドメイン単量体及び第九のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量
体形成選択性モジュールを含み、第六のＦｃドメイン単量体及び第十のＦｃドメイン単量
体のそれぞれが、第六のＦｃドメイン単量体及び第十のＦｃドメイン単量体間での二量体
形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、Ｆｃコンストラクトが、５
個以下のＦｃドメインを含有する。
この態様の一部の実施形態では、第一、第三、第四、及び第六のＦｃドメイン単量体の
それぞれが、操作された突起を含み、第二のＦｃドメイン単量体が、負電荷をもつアミノ
酸置換を含み、第五のＦｃドメイン単量体が、正電荷をもつアミノ酸置換を含み、第七、
第八、第九、及び第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、操作された空洞を含む。一部
の実施形態では、リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ１’、及び／又はＬ２’は、長さ３～２００ア
ミノ酸である。一部の実施形態では、リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ１’、及び／又はＬ２’は
、配列番号：１、２、及び３のいずれか一つの配列を含む、該配列からなる、又は実質的
に該配列からなる。
別の態様では、この開示は、ａ）式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチ
ドであって、式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌ１はリンカー
であり、Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌ２はリンカーであり、Ｃ
は第三のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる、第一のポリペプチドと、ｂ）式Ａ’－
Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、Ａ’は第四の
Ｆｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌ１’はリンカーであり、Ｂ’は第五のＦｃド
メイン単量体を含む又はからなり、Ｌ２’はリンカーであり、Ｃ’は第六のＦｃドメイン
単量体を含む又はからなる、第二のポリペプチドと、ｃ）第七のＦｃドメイン単量体を含
む又はからなる第三のポリペプチドと、ｄ）第八のＦｃドメイン単量体を含む又はからな
る第四のポリペプチドと、ｅ）第九のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる第五のポリ
ペプチドと、ｆ）第十のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる第六のポリペプチドと、
からなるＦｃコンストラクトを特徴とする。第一のポリペプチドのＡと第二のポリペプチ
ドのＡ’とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、第一のポリペプチドのＢと第七のＦ
ｃドメイン単量体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、第一のポリペプチドのＣと
第八のＦｃドメイン単量体とが結合して第三のＦｃドメインを形成し、第二のポリペプチ
ドのＢ’と第九のＦｃドメイン単量体とが結合して第四のＦｃドメインを形成し、第二の
ポリペプチドのＣ’と第十のＦｃドメイン単量体とが結合して第五のＦｃドメインを形成
する。第一のＦｃドメイン単量体及び第四のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、第一のＦ
ｃドメイン単量体及び第四のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二
量体形成選択性モジュールを含み、第二のＦｃドメイン単量体及び第七のＦｃドメイン単
量体のそれぞれが、第二のＦｃドメイン単量体及び第七のＦｃドメイン単量体間での二量
体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、第三のＦｃドメイン単量
体及び第八のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、第三のＦｃドメイン単量体及び第八のＦ
ｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含
み、第五のＦｃドメイン単量体及び第九のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、第五のＦｃ
ドメイン単量体及び第九のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量
体形成選択性モジュールを含み、第六のＦｃドメイン単量体及び第十のＦｃドメイン単量
体のそれぞれが、第六のＦｃドメイン単量体及び第十のＦｃドメイン単量体間での二量体
形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、Ｆｃコンストラクトが、５
個以下のＦｃドメインを含有する。
この態様の一部の実施形態では、第一のＦｃドメイン単量体が、負電荷をもつアミノ酸
置換を含み、第四のＦｃドメイン単量体が、正電荷をもつアミノ酸置換を含み、第二、第
三、第五、及び第六のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、操作された突起を含み、第七、
第八、第九、及び第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、操作された空洞を含む。一部
の実施形態では、リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ１’、及び／又はＬ２’は、長さ３～２００ア
ミノ酸である。一部の実施形態では、リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ１’、及び／又はＬ２’は
、配列番号：１、２、及び３のいずれか一つの配列を含む、該配列からなる、又は実質的
に該配列からなる。
別の態様では、この開示は、一つ又は複数のＦｃドメインを含むＦｃコンストラクトを
特徴とするものであって、該Ｆｃコンストラクトは単一のポリペプチド配列から構築され
る。該ポリペプチドは、式Ａ－Ｌ－Ｂを有し、式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含
み、Ｌはリンカーであり（任意に、例えば一つ、二つ、又はそれ以上の切断部位をもつ切
断可能なリンカー）、及び、Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む。該リンカーは、十分
な長さ（例えば、長さが、少なくとも１５アミノ酸、好ましくは少なくとも約２０アミノ
酸残基であり、例えば長さ１５～２００アミノ酸である）、及びポリペプチドの第一のＦ
ｃドメイン単量体と第二のＦｃドメイン単量体とが結合してＦｃドメインを形成するよう
な柔軟性の、アミノ酸スペーサーとすることが可能である。或る実施形態では、第一のＦ
ｃドメイン単量体及び第二のＦｃドメイン単量体は、第一のＦｃドメイン単量体及び第二
のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュール
を含む。こうしたコンストラクトは、宿主細胞内で、単一のポリペプチド配列の発現によ
り形成することが可能である。一実施形態では、ポリペプチドは、式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２
－Ｃを有し、式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、Ｌ１はリンカーであり（任意
に、例えば一つ、二つ、又はそれ以上の切断部位により切断可能なリンカー）、Ｂは第二
のＦｃドメイン単量体を含み、Ｌ２はリンカーであり、Ｃは第三のＦｃドメイン単量体で
ある。該リンカーは、十分な長さ（例えば、長さが、少なくとも１５アミノ酸、好ましく
は少なくとも約２０アミノ酸残基であり、例えば長さ１５～２００アミノ酸である）、及
びポリペプチドの第一のＦｃドメイン単量体と第二のＦｃドメイン単量体とが結合してＦ
ｃドメインを形成するような柔軟性の、アミノ酸スペーサーとすることが可能である。或
る実施形態では、第一のＦｃドメイン単量体及び第二のＦｃドメイン単量体は、第一のＦ
ｃドメイン単量体及び第二のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な二
量体形成選択性モジュールを含む。この実施形態の、三つのＦｃドメインを含むＦｃコン
ストラクトの例を、図１０に示している。
本明細書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかにおいては、Ｆｃドメインのうちの少
なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対する結合親和性、（ｉｉ）エフェ
クタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテア
ーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（ｖｉｉ）分解に対する感受性、
のうちの一つ又は複数を変えるアミノ酸修飾を含む。本明細書に記載のＦｃコンストラク
トのいずれかにおいては、一つ又は複数のＦｃ受容体に対する結合親和性を変えるアミノ
酸修飾は、表２のアミノ酸修飾のうちのいずれか一つである。本明細書に記載のＦｃコン
ストラクトのいずれかにおいては、一つ又は複数のＦｃ受容体に対する結合親和性を変え
るアミノ酸修飾は、Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆである。一部の実施形態では、Ｆｃ受容体は
ＦｃγＲＩＩｂである。一部の場合、本明細書に記載の修飾が、ＦｃγＲＩＩｂ受容体に
対する親和性を増加させる。一部の場合、Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆ修飾が、ＦｃγＲＩＩ
ｂに対する結合親和性を増加させる。本明細書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかに
おいては、エフェクタ機能を変えるアミノ酸修飾は、表６のアミノ酸修飾のうちのいずれ
か一つである。本明細書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかにおいては、Ｆｃドメイ
ンの硫酸化のレベルを変えるアミノ酸修飾は、２４１Ｆ、２４３Ｆ、２４６Ｋ、２６０Ｔ
、又は３０１Ｒである。本明細書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかにおいては、半
減期を変えるアミノ酸修飾は、表４のアミノ酸修飾のうちのいずれか一つである。本明細
書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかにおいては、プロテアーゼ耐性を変えるアミノ
酸修飾は、以下のセット：２３３Ｐ、２３４Ｖ、２３５Ａ、及び２３６ｄｅｌ；２３７Ａ
、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３７Ｄ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３７Ｐ、２３９Ｄ、
及び３３２Ｅ；２３７Ｑ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３７Ｓ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ
；２３９Ｄ、２６８Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；２３９Ｄ、３２６Ａ、及び３３３Ａ；
２３９Ｄ及び３３２Ｅ；２４３Ｌ、２９２Ｐ、及び３００Ｌ；２６７Ｅ、２６８Ｆ、３２
４Ｔ、及び３３２Ｅ；２６７Ｅ及び３３２Ｅ；２６８Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；３２
６Ａ、３３２Ｅ、及び３３３Ａ；又は、３２６Ａ及び３３３Ａ、から選択される。本明細
書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかにおいては、Ｆｃドメイン安定性を変えるアミ
ノ酸修飾は、表８のアミノ酸修飾のうちのいずれか一つである。本明細書に記載のＦｃコ
ンストラクトのいずれかにおいては、分解に対するＦｃドメインの感受性を変えるアミノ
酸修飾は、Ｃ２３３Ｘ、Ｄ２３４Ｘ、Ｋ２３５Ｘ、Ｓ２３６Ｘ、Ｔ２３６Ｘ、Ｈ２３７Ｘ
、Ｃ２３９Ｘ、Ｓ２４１Ｘ、及びＧ２４９Ｘであって、Ｘは任意のアミノ酸である。
別の態様では、この開示は、（ａ）式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって
、式中、Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含む又はからなり、Ｌはリンカーであり、Ｂは
第二のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる、第一のポリペプチドと、（ｂ）式Ａ’－
Ｌ’－Ｂ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、Ａ’は第三のＦｃドメイン単量
体を含む又はからなり、Ｌ’はリンカーであり、Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む
又はからなる、第二のポリペプチドと、（ｃ）第五のＦｃドメイン単量体を含む又はから
なる第三のポリペプチドと、ｄ）第六のＦｃドメイン単量体を含む又はからなる第四のポ
リペプチドと、を含むＦｃコンストラクトを特徴とする。一部の場合では、第一のポリペ
プチドのａと第二のポリペプチドのＡ’とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、第一
のポリペプチドのＢと第五のＦｃドメイン単量体とが結合して第二のＦｃドメインを形成
し、第二のポリペプチドのＢ’と第六のＦｃドメイン単量体とが結合して第三のＦｃドメ
インを形成する。一部の場合では、第一のポリペプチド及び第二のポリペプチドは、配列
番号：５０の配列を含む、該配列からなる又は実質的に該配列からなるものであり、また
第三のポリペプチド及び第四のポリペプチドは、配列番号：４８の配列を含む、該配列か
らなる又は実質的に該配列からなるものである。この開示の一部の実施形態では、第一の
ポリペプチド及び第二のポリペプチドのそれぞれは、最大１０個（例えば、最大９、８、
７、６、５、４、３、２、又は１個）の単一アミノ酸修飾（例えば置換、例えば保存的置
換）をもつ、配列番号：５０の配列を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列からな
るものであり、また第三のポリペプチド及び第四のポリペプチドは、最大１０個（例えば
、最大９、８、７、６、５、４、３、２、又は１個）の単一アミノ酸修飾（例えば置換、
例えば保存的置換）をもつ、配列番号：４８の配列を含む、該配列からなる、又は実質的
に該配列からなるものである。
コンストラクトのＦｃドメインのＦｃドメイン単量体は、同一の一次アミノ酸配列を有
することが可能である。例えば、ＦｃドメインのＦｃドメイン単量体は両方とも野生型配
列であってよく、又は、ＦｃドメインのＦｃドメイン単量体は両方とも同一の二量体形成
選択性モジュールを有してよく、例えばＦｃドメインのＦｃドメイン単量体が両方とも、
ＣＨ３ドメイン間の界面における電荷をもつ残基の環の範囲内の少なくとも二つの位置に
おいて、同一の逆電荷の変異を有することができる。
本明細書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかにおいては、あるコンストラクトのＦ
ｃドメインのＦｃドメイン単量体は、二つのＦｃ単量体間（すなわち、Ｆｃコンストラク
トのＦｃドメイン単量体と他の単量体との間）において、異なる配列、例えば２０以下、
１５以下、１０以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、又は２以下の
アミノ酸である、２０以下のアミノ酸（例えば、１５以下、１０以下のアミノ酸）だけ異
なる配列を有することが可能である。例えば、本明細書に記載のコンストラクトのうちの
Ｆｃ単量体配列は異なるものであってよいが、それはＦｃコンストラクトのいずれかの相
補的な二量体形成選択性モジュールが、ドメイン単量体の一方のＣＨ３抗体定常ドメイン
内に操作された空洞と、Ｆｃドメイン単量体の他方のＣＨ３抗体定常ドメイン内に操作さ
れた突起とを含むことが可能であり、該操作された空洞及び該操作された突起は、Ｆｃド
メイン単量体の空洞に突起が挿入された対を形成するように位置決めされるということを
理由とする。例示的な操作された空洞及び突起を表９に示している。他の実施形態では、
相補的な二量体形成選択性モジュールは、ドメイン単量体の一方のＣＨ３抗体定常ドメイ
ン内に操作された（置換された）負電荷をもつアミノ酸と、Ｆｃドメイン単量体の他方の
ＣＨ３抗体定常ドメイン内に操作された（置換された）正電荷をもつアミノ酸とを含み、
負電荷をもつアミノ酸及び正電荷をもつアミノ酸は、相補的なドメイン単量体間において
Ｆｃドメインの形成を促進するように位置決めされる。例示的な相補的アミノ酸の変更を
表１０に示している。
一部の実施形態では、二量体形成選択性モジュールに加えて（例えば、操作された空洞
及び突起、又は操作された正電荷及び負電荷をもつアミノ酸（例えば、例示的なアミノ酸
の変更は表１及び２を参照））、本明細書に記載のＦｃコンストラクトはまた、例えばＦ
ｃコンストラクトを安定化させる又はタンパク質凝集を防止するために役立つような、Ｆ
ｃ単量体配列における野生型配列からのさらなるアミノ酸置換を含んでもよい。
一部の実施形態では、本明細書に記載のＦｃコンストラクトは、２～１０個のＦｃドメ
イン（例えば、２～８個のＦｃドメイン、２～６個のＦｃドメイン、２～４個のＦｃドメ
イン、２～３個のＦｃドメイン、３～５個のＦｃドメイン、又は５～１０個のＦｃドメイ
ン、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個のドメイン）を含み、コンストラ
クトのＦｃドメインのうちの少なくとも二つが、異なる二量体形選択性モジュールを有す
る。一部の実施形態では、本明細書に記載のＦｃコンストラクトは、５～１０個のＦｃド
メイン（例えば、５、６、７、８、９、１０個のドメイン）を含み、コンストラクトのＦ
ｃドメインのうちの少なくとも二つが、異なる二量体形選択性モジュールを有する。例え
ば、コンストラクト５、８、９、及び１０は、操作された空洞及び突起を含む少なくとも
一つのＦｃドメインと、相補的な逆電荷の変異を含む少なくとも一つのＦｃドメインとを
有する。
他の実施形態では、本明細書に記載するＦｃコンストラクト中の一つ又は複数のリンカ
ーは、結合である。
他の実施形態では、本明細書に記載するＦｃコンストラクト中の一つ又は複数のリンカ
ーは、スペーサーであり、例えば、２～２００アミノ酸（例えば、２～１００、３～２０
０、３～１５０、３～１００、３～６０、３～５０、３～４０、３～３０、３～２０、３
～１０、３～８、３～５、４～３０、５～３０、６～３０、８～３０、１０～２０、１０
～３０、１２～３０、１４～３０、２０～３０、１５～２５、１５～３０、１８～２２、
及び２０～３０アミノ酸）のアミノ酸スペーサーである。
或る実施形態では、アミノ酸スペーサーは、グリシンリッチなスペーサー及び／又はセ
リンリッチなスペーサーであり、例えば、該スペーサーは、配列ＧＳ、ＧＧＳ、ＧＧＧＧ
Ｓ（配列番号：１）、ＧＧＳＧ（配列番号：２）、又はＳＧＧＧ（配列番号：３）のうち
の二つ以上のモチーフを含む、該モチーフからなる、又は実質的に該モチーフからなる。
一部の場合では、アミノ酸スペーサーは、グリシンのみを含む、セリンのみを含む、又は
、セリン及びグリシンのみを含む。一部の場合では、アミノ酸スペーサーは、２～３０ア
ミノ酸（例えば、２０アミノ酸）を含み、またグリシンのみを含む。一部の場合では、該
スペーサーは、３～２０アミノ酸（例えば、２０アミノ酸）を含み、またグリシン及びセ
リンのみを含む。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクトがアルブミン結合ペプチドを含む場合には、ア
ルブミン結合ペプチドは、
Figure 2022068176000002
の配列を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列からなる。或る実施形態では、Ｆｃ
コンストラクトがアルブミン結合ペプチドを含む場合には、アルブミン結合ペプチドは、
最大１０個（例えば、最大９、８、７、６、５、４、３、２、又は１個）の単一アミノ酸
修飾（例えば置換、例えば保存的置換）をもつ、
Figure 2022068176000003
の配列を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列からなる。
他の実施形態では、本明細書に記載のＦｃコンストラクト内のＦｃドメイン単量体のう
ちの一つ又は複数が、ＩｇＧヒンジドメイン、ＩｇＧ ＣＨ２抗体定常ドメイン、及びＩ
ｇＧ ＣＨ３抗体定常ドメインを含む。
或る実施形態では、先述のＦｃコンストラクト内のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、
ＩｇＧヒンジドメイン、ＩｇＧ ＣＨ２抗体定常ドメイン、及びＩｇＧ ＣＨ３抗体定常
ドメインを含む。
或る実施形態では、ＩｇＧは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、及びＩ
ｇＧ４からなる群から選択されるサブタイプのものである。
或る実施形態では、Ｆｃドメイン単量体のそれぞれが、１０個以下（例えば、１個以下
、２個以下、３個以下、４個以下、５個以下、６個以下、７個以下、８個以下、９個以下
、又は１０個以下）のアミノ酸修飾を有する。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン単量体
のうちの一つ又は複数が、ヒトＩｇＧ Ｆｃ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２
ｂ、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）である。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン単量体のうち
の一つ又は複数が、最大１０個（例えば、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、又
は１０個）のアミノ酸修飾を有するヒトＩｇＧ Ｆｃドメイン単量体である。
さらに別の態様では、この開示は、本明細書に記載の任意のＦｃコンストラクトの実質
的に均質（例えば、少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％均質）
な集合を含む医薬組成物を特徴とする。一実施形態では、医薬品使用適格の滅菌注射器又
はバイアルが、医薬組成物を含有し、唯一又は主要な活性成分が、本明細書に記載の任意
のＦｃコンストラクトの実質的に均質（例えば、少なくとも８５％、９０％、９５％、９
８％、又は９９％均質）な集合である。該医薬組成物は、例えば塩類、界面活性剤（ｄｅ
ｔｅｒｇｅｎｔ）、サーファクタント、充填剤、ポリマー、防腐剤、及び他の医薬品賦形
剤から選択される、一つ又は複数の不活性成分を含んでもよい。他の実施形態では、実質
的に均質な医薬組成物は、Ｆｃコンストラクトの凝集又は望まない多量体を１０％未満、
５％未満、４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、又は０．５％未満含有する。
別の態様では、この開示は、先述のＦｃコンストラクトのうちのいずれか一つを調製す
る方法を特徴とする。該方法には、Ｆｃコンストラクトを構築するのに必要なポリペプチ
ドをコードするポリヌクレオチドを含む宿主細胞を提供することと、Ｆｃコンストラクト
の形成を可能にする条件下で該宿主細胞中でポリペプチドを発現させることと、Ｆｃコン
ストラクトを回収する（例えば、精製する）こととが含まれる。
一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、異なるポリペプチド内に存在するＦｃド
メイン単量体の会合によって少なくとも一部形成される。或る実施形態では、Ｆｃコンス
トラクトは、異なるポリペプチド内に存在するＦｃドメイン単量体の会合によって形成さ
れる。これら実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、二つのポリペプチドの会合を促進す
る追加ドメイン（例えば、ＩｇＭテールピース又はＩｇＡテールピース）を含まない。他
の実施形態では、連結してＦｃドメインを形成する二つのＦｃドメイン単量体の間にのみ
、共有結合（例えば、ジスルフィド架橋）が存在する。他の実施形態では、Ｆｃコンスト
ラクトは、Ｆｃドメイン間に共有結合（例えば、ジスルフィド架橋）を含まない。さらに
他の実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、Ｆｃコンストラクト内のＦｃドメインの全て
又は実質的に全てが、細胞表面上のＦｃ受容体と同時に相互作用することができるように
、十分な柔軟性を備える。これら実施形態のいずれかのうちの或る実施形態では、Ｆｃコ
ンストラクトは、リンカー（例えば、柔軟なアミノ酸スペーサー）を介して連結した、少
なくとも二つのＦｃドメインを含む。
一実施形態では、ＦｃドメインのＦｃドメイン単量体は、会合してＦｃドメインを形成
する異なるポリペプチド鎖中で見られる。例えば、図４及び図６に示すコンストラクトは
、会合した三つのポリペプチドを含む二つのＦｃドメインを有する。三つのポリペプチド
のうちの一つは、二つのＦｃドメイン単量体を含み、該ポリペプチドのうちの他の二つは
それぞれ、一つのＦｃドメイン単量体を含む。図５に示すコンストラクトは、会合した四
つのポリペプチドを含む三つのＦｃドメインを有し、四つのポリペプチドのうちの二つが
、二つのＦｃドメイン単量体を有し、四つのポリペプチドのうちの他の二つはそれぞれ一
つのＦｃドメイン単量体を有する。図７Ｂに示すＦｃコンストラクトは、２ｎ個のポリペ
プチドを含む、ｎ個のＦｃドメイン（ｎは２～１０）を有することが可能であり、各ポリ
ペプチドは、Ｆｃドメイン単量体、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン、及びＩｇＧ ＣＨ１
抗体定常ドメインを含む。図８及び９に示すコンストラクトはそれぞれ、会合した六つの
ポリペプチドを含む五つのＦｃドメインを有する。六つのポリペプチドのうちの二つが、
三つのＦｃドメイン単量体を有し、六つのポリペプチドのうちの他の四つはそれぞれ一つ
のＦｃドメイン単量体を有する。図１０に示すコンストラクトは、会合した二つのポリペ
プチドを含む三つのＦｃドメインを有する。二つのポリペプチドのそれぞれは、直列に連
結した三つのＦｃドメイン単量体を含有する。
別の態様では、この開示は、Ｆｃドメイン単量体の選択的な二量体形成を促進する組成
物及び方法を特徴とする。この開示は、Ｆｃドメインを含み、該Ｆｃドメインの二つのＦ
ｃドメイン単量体が、ＣＨ３抗体定常ドメイン間の界面における電荷をもつ残基の環の範
囲内の少なくとも二つの位置において、同一の逆電荷の変異を含む。この開示はまた、こ
うしたＦｃドメインの作製方法を含み、ＣＨ３抗体定常ドメイン間の界面における電荷を
もつ残基の環の範囲内の少なくとも二つの位置において、二つのＦｃドメイン単量体配列
内に同一の変異を有する、相補的な二量体形成選択性モジュールを導入することを含む。
ＣＨ３抗体定常ドメイン間の界面は、電荷をもつ残基の環により包囲される疎水性パッチ
（ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｐａｔｃｈ）からなる。一つのＣＨ３抗体定常ドメインが他
と一体となるとき、これら電荷をもつ残基は、反対の電荷をもつ残基と共に対を形成する
。残基の２以上の相補的な対の両要素の電荷が反転していることによって、変異したＦｃ
ドメイン単量体は同じ変異の配列のＦｃドメイン単量体に対して相補性を維持するが、こ
うした変異なしのＦｃドメイン単量体に対する相補性はより小さい。この実施形態では、
同一の二量体形成選択性モジュールが、ホモ二量体形成を促進する。例示的なＦｃドメイ
ンは、二重変異体であるＫ４０９Ｄ／Ｄ３３９Ｋ、Ｋ３９２Ｄ／Ｄ３９９Ｋ、Ｅ３５７Ｋ
／Ｋ３７０Ｅ、Ｄ３５６Ｋ／Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４０９Ｅ／Ｄ３３９Ｋ、Ｋ３９２Ｅ／Ｄ３９
９Ｋ、Ｅ３５７Ｋ／Ｋ３７０Ｄ、又はＤ３５６Ｋ／Ｋ４３９Ｅを含有するＦｃ単量体を含
む。別の実施形態では、Ｆｃドメインは、例えばＫ４０９Ｄ／Ｄ３９９Ｋ／Ｅ３５７Ｋ／
Ｋ３７０Ｅである二重変異体の任意の対を結合した四重変異体を含むＦｃ単量体を含む。
別の実施形態では、同一の二量体形成選択性モジュールに加えて、ＦｃドメインのＦｃド
メイン単量体は、特定の会合を促進する非同一の変異（例えば、操作された空洞と突起）
を有する相補的な二量体形成選択性モジュールを有する。結果として、二つのＦｃドメイ
ン単量体が、二つの二量体形成選択性モジュールを含み、互いに対して相補性を維持する
が、他のＦｃドメイン単量体に対する相補性は小さい。この実施形態は、空洞含有Ｆｃド
メインと突起含有Ｆｃドメイン単量体との間でのヘテロ二量体形成を促進する。一実施例
では、両Ｆｃドメイン単量体の電荷をもつ対の残基内の同一の変異を、一方のＦｃドメイ
ン単量体上の突起及び他方のＦｃドメイン単量体上の空洞と組み合わせる。
別の態様では、この開示は、それを必要とする対象における炎症を軽減する方法を特徴
とする。別の態様では、この開示は、それを必要とする対象における自己抗体のクリアラ
ンスを促進する方法を特徴とする。別の態様では、この開示は、それを必要とする対象に
おける抗原提示を抑制する方法を特徴とする。別の態様では、この開示は、それを必要と
する対象における免疫応答を軽減する方法、例えば、それを必要とする対象における、免
疫複合体に基づく免疫応答の活性化を軽減する方法を特徴とする。これら方法は、対象に
対して本明細書に記載のＦｃコンストラクト又は医薬組成物を投与することを含む。
別の態様では、この開示は、対象に対して本明細書に記載のＦｃコンストラクト又は医
薬組成物（例えば、コンストラクト１～１０及び５＊のいずれか一つ）を投与することに
よって、対象における炎症性疾患又は自己免疫疾患又は免疫疾患を治療する方法を特徴と
する。例示的な疾患には、関節リウマチ（ＲＡ）；全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）；
ＡＮＣＡ関連血管炎；抗リン脂質抗体症候群；自己免疫性溶血性貧血；慢性炎症性脱髄性
ニューロパシー；移植における抗アロ（ａｎｔｉ－ａｌｌｏ）、ＧＶＨＤにおける抗自己
（ａｎｔｉ－ｓｅｌｆ）、抗置換、ＩｇＧ治療、ＩｇＧパラプロテインのクリアランス；
皮膚筋炎；グッドパスチャー症候群；抗体依存性細胞媒介性細胞障害により媒介される器
官系を標的とするＩＩ型過敏症症候群、例えばギラン・バレー症候群、ＣＩＤＰ、皮膚筋
炎、フェルティ症候群、抗体媒介性拒絶反応、自己免疫性甲状腺疾患、潰瘍性大腸炎、自
己免疫性肝疾患；突発性血小板減少性紫斑病；重症筋無力症、視神経脊髄炎；天疱瘡及び
他の自己免疫性水疱性疾患；シェーグレン症候群；抗体依存性ファゴサイトーシスにより
媒介される自己免疫性血球減少症及び他の障害；例えば滑膜炎、皮膚筋炎、全身性血管炎
、糸球体炎、及び血管炎である他のＦｃＲ依存性炎症症候群を含む。
別の態様では、この開示は、それを必要とする対象における炎症の低減に用いる、本明
細書に記載のＦｃコンストラクト又は医薬組成物（例えば、コンストラクト１～１０及び
５＊のいずれか一つ）を特徴とする。別の態様では、この開示は、それを必要とする対象
における自己抗体のクリアランスの促進に用いる、本明細書に記載のＦｃコンストラクト
又は医薬組成物（例えば、コンストラクト１～１０及び５＊のいずれか一つ）を特徴とす
る。別の態様では、この開示は、それを必要とする対象における抗原提示の抑制に用いる
、本明細書に記載のＦｃコンストラクト又は医薬組成物（例えば、コンストラクト１～１
０及び５＊のいずれか一つ）を特徴とする。別の態様では、この開示は、それを必要とす
る対象における免疫応答の軽減、例えば、それを必要とする対象における、免疫複合体に
基づく免疫応答の活性化の軽減に用いる、本明細書に記載のＦｃコンストラクト又は医薬
組成物（例えば、コンストラクト１～１０及び５＊のいずれか一つ）を特徴とする。
別の態様では、この開示は、対象における炎症性疾患又は自己免疫疾患又は免疫疾患の
治療に用いる、本明細書に記載のＦｃコンストラクト又は医薬組成物（例えば、コンスト
ラクト１～１０及び５＊のいずれか一つ）を特徴とする。例示的な疾患には、関節リウマ
チ（ＲＡ）；全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）；ＡＮＣＡ関連血管炎；抗リン脂質抗体
症候群；自己免疫性溶血性貧血；慢性炎症性脱髄性ニューロパシー；移植における抗アロ
（ａｎｔｉ－ａｌｌｏ）、ＧＶＨＤにおける抗自己（ａｎｔｉ－ｓｅｌｆ）、抗置換、Ｉ
ｇＧ治療、ＩｇＧパラプロテインのクリアランス；皮膚筋炎；グッドパスチャー症候群；
抗体依存性細胞媒介性細胞障害により媒介される器官系を標的とするＩＩ型過敏症症候群
、例えばギラン・バレー症候群、ＣＩＤＰ、皮膚筋炎、フェルティ症候群、抗体媒介性拒
絶反応、自己免疫性甲状腺疾患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性肝疾患；突発性血小板減少性
紫斑病；重症筋無力症、視神経脊髄炎；天疱瘡及び他の自己免疫性水疱性疾患；シェーグ
レン症候群；抗体依存性ファゴサイトーシスにより媒介される自己免疫性血球減少症及び
他の障害；例えば滑膜炎、皮膚筋炎、全身性血管炎、糸球体炎、及び血管炎である他のＦ
ｃＲ依存性炎症症候群を含む。
本明細書に記載のＦｃコンストラクトのいずれかにおいては、Ｆｃドメイン単量体の順
序は入れ替え可能であるということが理解される。例えば、式Ａ－Ｌ－Ｂを有するポリペ
プチドにおいて、Ａのカルボキシ末端がＬのアミノ末端と連結可能であり、またＬはその
カルボキシ末端がＢのアミノ末端と連結している。あるいは、Ｂのカルボキシ末端はＬの
アミノ末端と連結可能であり、またＬはそのカルボキシ末端がＣのアミノ末端と連結して
いる。これら構成はどちらも式Ａ－Ｌ－Ｂに含まれる。
関連する態様では、この開示は、先述のＦｃコンストラクトのいずれか一つを発現する
宿主細胞を特徴とする。宿主細胞は、Ｆｃコンストラクトを構築するのに必要なポリペプ
チドをコードするポリヌクレオチドを含み、該ポリヌクレオチドは、宿主細胞内で発現さ
れる。
定義
ここで、「Ｆｃドメイン単量体」という語は、少なくとも一つのヒンジドメインと、第
二の抗体定常ドメイン及び第三の抗体定常ドメイン（ＣＨ２及びＣＨ３）とを含む、ポリ
ペプチド鎖又はその機能的断片（例えば、（ｉ）他のＦｃドメイン単量体と二量体形成し
てＦｃドメインを形成すること、及び（ｉｉ）Ｆｃ受容体と結合することが可能である断
片）を指す。Ｆｃドメイン単量体は、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、又はＩｇＤを含
む、任意の免疫グロブリン抗体アイソタイプとすることが可能である。さらに、Ｆｃドメ
イン単量体は、ＩｇＧサブタイプ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ
３、又はＩｇＧ４）とすることが可能である。Ｆｃドメイン単量体は、抗原認識領域、例
えば可変領域又は相補性決定領域（ＣＤＲ）として機能することが可能な免疫グロブリン
の部分を何も含まない。Ｆｃドメイン単量体は、野生型Ｆｃドメイン単量体配列からの変
更を１０程度（例えば、１～１０、１～８、１～６、１～４のアミノ酸置換、付加、又は
欠失）含有することが可能であり、該変更は、ＦｃドメインとＦｃ受容体との間の相互作
用を変える。好適な変更の例は、この技術分野で公知である。
ここで、「Ｆｃドメイン」という語は、Ｆｃ受容体に結合することが可能である二つの
Ｆｃドメイン単量体による二量体を指す。野生型Ｆｃドメインでは、二つのＦｃドメイン
単量体が二つのＣＨ３抗体定常ドメイン間の相互作用によって二量体形成するのみならず
、二量体形成している二つのＦｃドメイン単量体のヒンジドメイン間に、一つ又は複数の
ジスルフィド結合を形成する。
本開示では、「Ｆｃコンストラクト」という語は、本明細書に記載される、２～１０個
のＦｃドメイン（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のＦｃドメイン
；２～８個のＦｃドメイン、２～６個のＦｃドメイン、２～４個のＦｃドメイン、２～３
個のＦｃドメイン、５～１０個のＦｃドメイン、５～８個のＦｃドメイン、又は５～６個
のＦｃドメイン）の間で形成される会合したポリペプチド鎖を指す。本明細書に記載され
るＦｃコンストラクトは、同一又は異なる配列を有するＦｃドメイン単量体を含むことが
可能である。例えば、Ｆｃコンストラクトは二つのＦｃドメインを有することが可能であ
り、その一方がＩｇＧ１又はＩｇＧ１由来のＦｃドメイン単量体を含み、そのもう一方が
ＩｇＧ２又はＩｇＧ２由来のＦｃドメイン単量体を含む。別の例では、Ｆｃコンストラク
トは二つのＦｃドメインを有することが可能であり、その一方が「空洞に突起が挿入され
た対（ｐｒｏｔｕｂｅｒａｎｃｅ－ｉｎｔｏ－ｃａｖｉｔｙ ｐａｉｒ）」を含み、その
もう一方は「空洞に突起が挿入された対」を含まない。本開示では、Ｆｃドメインは、例
えばＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ、又はＨＶＲである抗体の可変領域を含まない。Ｆｃドメインは
、例えばＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩ
ＩＩｂ、ＦｃγＲＩＶであるＦｃ受容体と結合する最小の構造を形成する。
ここで、「抗体定常ドメイン」という語は、抗体の定常領域ドメイン（例えば、ＣＬ抗
体定常ドメイン、ＣＨ１抗体定常ドメイン、ＣＨ２抗体定常ドメイン、又はＣＨ３抗体定
常ドメイン）に相当するポリペプチドを指す。
ここで、「促進する」という語は、例えば他の別個のＦｃドメイン単量体に対するより
も、互いに高い結合親和性を有する二つのＦｃドメイン単量体でＦｃドメインを形成する
ことを支持するといったように、促すこと及び支持することを意味する。本明細書に記載
するように、結合してＦｃドメインを形成する二つのＦｃドメイン単量体は、それらの各
ＣＨ３抗体定常ドメインの界面において適合性のアミノ酸修飾（例えば、操作された突起
及び操作された空洞）を有することが可能である。適合性のアミノ酸修飾は、こうしたア
ミノ酸修飾を有さない、又は適合しないアミノ酸修飾をもつ他のＦｃドメイン単量体より
も、こうしたＦｃドメイン単量体同士での選択的な相互作用を促進する又は支持する。こ
れは、相互作用する二つのＣＨ３抗体定常ドメインの界面におけるアミノ酸修飾に起因し
て、Ｆｃドメイン単量体が、アミノ酸修飾を有さない他のＦｃドメイン単量体に対するよ
りも互いに対して高い親和性を有することを理由に起こる。
ここで「二量体形成選択性モジュール」という語は、二つのＦｃドメイン単量体間の好
都合な対形成を促進するＦｃドメイン単量体の配列を指す。「相補的」な二量体形成選択
性モジュールは、二つのＦｃドメイン単量体の互いに対する選択的な相互作用を促進する
又は支持する二量体形成選択性モジュールである。相補的な二量体形成選択性モジュール
は、同一の配列又は異なる配列を有することが可能である。例示的な相補的な二量体形成
選択性モジュールを本明細書に記載している。
ここで「操作された空洞（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｃａｖｉｔｙ）」という語は、ＣＨ
３抗体定常ドメイン内の本来のアミノ酸残基のうちの少なくとも一つが、本来のアミノ酸
残基よりも低分子量の側鎖を有する異なるアミノ酸残基で置換されることによって、ＣＨ
３抗体定常ドメイン内に形成された、三次元の空洞を指す。「本来のアミノ酸残基」とい
う語は、野生型のＣＨ３抗体定常ドメインの遺伝コードによってコードされた天然のアミ
ノ酸残基を指す。
ここで「操作された突起（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｐｒｏｔｕｂｅｒａｎｃｅ）」とい
う語は、ＣＨ３抗体定常ドメイン内の本来のアミノ酸残基のうちの少なくとも一つが、本
来のアミノ酸残基よりも高分子量の側鎖を有する異なるアミノ酸残基で置換されることに
よって、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に形成された、三次元の突起を指す。「本来のアミノ
酸残基」という語は、野生型のＣＨ３抗体定常ドメインの遺伝コードによってコードされ
た天然のアミノ酸残基を指す。
「空洞に突起が挿入された対」という語は、第一のＦｃドメイン単量体が、そのＣＨ３
抗体定常ドメイン内に、操作された空洞を含む一方で、第二のＦｃドメイン単量体が、そ
のＣＨ３抗体定常ドメイン内に、操作された突起を含むものである、二つのＦｃドメイン
単量体を含んだＦｃドメインを説明するものである。空洞に突起が挿入された対において
は、第一のＦｃドメイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメイン内の操作された突起は、該突起
が、第二のＦｃドメイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメイン内の操作された空洞と、ＣＨ３
抗体定常ドメイン間の界面における二量体の正常な会合を有意に邪魔することなく相互作
用するように配置される。
ここで、「連結する」という語は、化学的な連結、組換え手段、ならびに例えばジスル
フィド結合及びアミド結合である化学結合を含む手段によって、２以上の成分、要素、成
分、又は例えばポリペプチドであるタンパク質ドメインを組み合わせる又は結合させるこ
とを説明するために用いる。例えば、二つの単一ポリペプチドを連結して、化学的な連結
、化学結合、ペプチドリンカー、又はその他の共有結合手段を介して、一つの隣接し合う
タンパク質構造を形成することが可能である。一部の実施形態では、第一のＦｃドメイン
単量体が、ペプチドリンカーを介して第二のＦｃドメイン単量体に連結し、ここで、該ペ
プチドリンカーのＮ末端が、例えばペプチド結合である化学結合を介して、第一のＦｃド
メイン単量体のＣ末端に連結し、ペプチドリンカーのＣ末端が、例えばペプチド結合であ
る化学結合を介して、第二のＦｃドメイン単量体のＮ末端に連結する。他の実施形態では
、アルブミン結合ペプチドのＮ末端が、上記に記載したものと同一の方式で、リンカーを
介してＦｃドメイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメインのＣ末端に連結する。
ここで、「会合した」という語は、複数のポリペプチド（又は一つの単一ポリペプチド
内の複数の配列）が、少なくとも一つのＦｃドメインを有するＦｃコンストラクトを形成
するように位置されるような、例えば水素結合、疎水性相互作用、又はイオン性相互作用
であるポリペプチド（又は一つの単一ポリペプチド内の配列）間の相互作用を説明するた
めに用いる。例えば、一つのＦｃドメイン単量体をそれぞれ含む二つのポリペプチドが会
合してＦｃコンストラクトを形成することが可能である（例えば、図１～３に図示すると
おり）。一部の実施形態では、例えば二つのＦｃドメイン単量体を含む一つのポリペプチ
ドと、一つのＦｃドメイン単量体をそれぞれ含む二つのポリペプチドとである、三つのポ
リペプチドが会合して、二つのＦｃドメインを有するＦｃコンストラクトを形成する（例
えば、図４及び６に示すとおり）。一部の実施形態では、例えば二つのＦｃドメイン単量
体をそれぞれ含む二つのポリペプチドと、一つのＦｃドメイン単量体をそれぞれ含む二つ
のポリペプチドとである、四つのポリペプチドが会合して、三つのＦｃドメインを有する
Ｆｃコンストラクトを形成する（例えば、図５に図示するとおり）。他の実施形態では、
例えばＦｃドメイン単量体、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン、及びＩｇＧ ＣＨ１抗体定
常ドメインを各ポリペプチドが含む２ｎ個のポリペプチドが会合して、ｎ個のＦｃドメイ
ンを有するＦｃコンストラクトを形成する（図７Ｂに図示するとおり）。二つのポリペプ
チドは、それらの各Ｆｃドメイン単量体を介して、又はポリペプチドの他の要素を介して
、会合することが可能である。例えば図７Ｂにおいては、ポリペプチド７０８が、そのＦ
ｃドメイン単量体を介してポリペプチド７０６と会合し、またポリペプチド７１０のＣＨ
１ドメインと会合しているそのＣＬドメインの会合を介してポリペプチド７１０と会合す
る。ポリペプチド間の会合は、共有結合相互作用を含まない。例えば図１０では、単一ポ
リペプチド内のＦｃ単量体配列１０１４及び１０１２が会合してＦｃドメインを形成し、
Ｆｃ単量体配列１００４及び１００６もそうである。
ここで「リンカー」という語は、二つの要素間、例えばタンパク質ドメイン間の結合を
指す。リンカーは、共有結合又はスペーサーとすることが可能である。「結合」という語
は、化学結合、例えばアミド結合もしくはジスルフィド結合、又は、例えば化学的な連結
である化学反応により形成される任意の種類の結合を指す。「スペーサー」という語は、
二つのポリペプチド又はポリペプチドドメイン（例えば、Ｆｃドメイン単量体）間に生じ
て二つのポリペプチド又はポリペプチドドメイン間に空間及び／又は柔軟性をもたらすよ
うな、部分（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ポリマー）又はアミノ酸配列（
例えば、３～２００アミノ酸、３～１５０アミノ酸、３～１００アミノ酸、３～６０アミ
ノ酸、３～５０アミノ酸、３～４０アミノ酸、３～３０アミノ酸、３～２０アミノ酸、３
～１０アミノ酸、３～８アミノ酸、３～５アミノ酸、４～３０アミノ酸、５～３０アミノ
酸、６～３０アミノ酸、８～３０アミノ酸、１０～２０アミノ酸、１０～３０アミノ酸、
１２～３０アミノ酸、１４～３０アミノ酸、２０～３０アミノ酸、１５～２５アミノ酸、
１５～３０アミノ酸、１８～２２アミノ酸、及び２０～３０アミノ酸の配列）を指す。ア
ミノ酸スペーサーは、ポリペプチドの一次配列の一部（例えば、ポリペプチド骨格を介し
て、離間したポリペプチド又はポリペプチドドメインに連結されるような）である。例え
ばＦｃドメインを形成する二つのヒンジ領域又は二つのＦｃドメイン単量体の間における
ジスルフィド結合の形成は、リンカーとは考えない。
ここで「切断可能なリンカー」という語は、コンストラクトが形成された後で、選択的
に切断することが可能である一つ又は複数の要素を含有するリンカーを指し、例えば切断
可能なリンカーは、プロテアーゼによって選択的に切断されることが可能であるポリペプ
チド配列を含む。
ここで、「アルブミン結合ペプチド」という語は、血清アルブミンに対する親和性及び
血清アルブミンに結合する機能を有する１２～１６アミノ酸のアミノ酸配列を指す。アル
ブミン結合ペプチドは、例えばヒト、マウス、又はラットである様々な起源のものとする
ことが可能である。本開示の一部の実施形態では、アルブミン結合ペプチドがＦｃドメイ
ン単量体のＣ末端と融合して、Ｆｃコンストラクトの血中半減期を増加させる。アルブミ
ン結合ペプチドは、直接又はリンカーを介して、Ｆｃドメイン単量体のＮ末端又はＣ末端
と融合することが可能である。
ここで「多量体」という語は、本明細書に記載の少なくとも二つの会合したＦｃコンス
トラクトを含む分子を指す。
ここで「ポリヌクレオチド」という語は、オリゴヌクレオチド又はヌクレオチド、及び
その断片又は部分を指し、またゲノム由来もしくは合成由来のＤＮＡ又はＲＮＡを指し、
それは一本鎖又は二本鎖であり、センス鎖又はアンチセンス鎖を表し得る。単一のポリヌ
クレオチドが、単一のポリペプチドに翻訳される。
ここで「ポリペプチド」という語は、モノマーがアミド結合を介して共に連結したアミ
ノ酸残基であるような単一のポリマーを説明している。ポリペプチドは、天然、組換え、
又は合成的に産生される任意のアミノ酸配列を包含することを意図する。
ここで「アミノ酸位置」という語は、タンパク質又はタンパク質ドメイン内のアミノ酸
の位置番号を指す。抗体又はＦｃコンストラクトのアミノ酸位置は、Ｋａｂａｔナンバリ
ングシステム（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ
ｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓ
ｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．，ｅｄ ５，１９９１
）を用いて番号付けた。
ここで「アミノ酸修飾」という語は、参照配列（例えば、野生型の、非変異の、又は修
飾されていないＦｃ配列）と比較して、Ｆｃコンストラクトの、薬物動態（ＰＫ）及び／
又は薬力学（ＰＤ）的性質、血中半減期、エフェクタ機能（例えば、細胞溶解（例えば、
抗体依存性細胞媒介毒性（ＡＤＣＣ）及び／又は補体依存性細胞毒性活性（ＣＤＣ））、
ファゴサイトーシス（例えば、抗体依存性細胞ファゴサイトーシス（ＡＤＣＰ）及び／又
は補体依存性細胞毒性（ＣＤＣＣ））、免疫活性化及びＴ－細胞活性化）、Ｆｃ受容体に
対する親和性（例えば、Ｆｃ－ガンマ受容体（ＦｃγＲ）（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６
４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（
ＣＤ１６ａ）、及び／又はＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ））、Ｆｃ－アルファ受容体（
ＦｃαＲ）、Ｆｃ－イプシロン受容体（ＦｃεＲ）、及び／又は胎児性Ｆｃ受容体（Ｆｃ
Ｒｎ））、補体カスケードに関与するタンパク質に対する親和性（例えば、Ｃ１ｑ）、翻
訳後修飾（例えば、グリコシル化、シアリル化）、凝集性（例えば、二量体（例えば、ホ
モ二量体及び／又はヘテロ二量体）及び／又は多量体を形成する能力）、及び、生物物理
学的性質（例えば、ＣＨ１及びＣＬ間の相互作用を変える、安定性を変える、ならびに／
又は、温度及び／もしくはｐＨに対する感受性を変える）上の効果を有し得る、また免疫
学的な及び炎症性疾患の治療の効能の改善を促進し得るような、Ｆｃドメインのポリペプ
チド配列の変更を指す。アミノ酸修飾は、アミノ酸置換、欠失、及び／又は挿入を含む。
一部の実施形態では、アミノ酸修飾は単一アミノ酸修飾である。他の実施形態では、アミ
ノ酸修飾は、複数の（例えば１より多くの）アミノ酸の修飾である。アミノ酸修飾は、ア
ミノ酸置換、欠失、及び／又は挿入の組み合わせを含んでもよい。アミノ酸修飾の説明に
は、Ｆｃポリペプチドに対してコードするヌクレオチド配列の、点突然変異（例えば、単
一のヌクレオチドの他のものとの交換）、挿入、及び欠失（例えば一つ又は複数のヌクレ
オチドの付加及び／又は除去）等の、遺伝子（すなわち、ＤＮＡ及びＲＮＡ）の変更であ
る。
或る実施形態では、Ｆｃコンストラクト内の少なくとも一つ（例えば、少なくとも１、
２、３、４、５、６、７、８、９、１０個）のＦｃドメインがアミノ酸修飾を含む。一部
の例では、少なくとも一つのＦｃドメインが、一つ以上（例えば、２、３、４、５、６、
７、８、９、１０、又は２０個、又はそれ以上）のアミノ酸修飾を含む。一部の例では、
少なくとも一つのＦｃドメインが、１６個以下のアミノ酸修飾（例えば、１個以下、２個
以下、３個以下、４個以下、５個以下、６個以下、７個以下、８個以下、９個以下、１０
個以下、１１個以下、１２個以下、１３個以下、１４個以下、１５個以下、又は１６個以
下のアミノ酸修飾）を含む。一部の場合では、Ｆｃドメイン単量体が、１０個以下のアミ
ノ酸修飾を含む。一部の場合では、Ｆｃドメイン単量体が、１２個以下のアミノ酸修飾を
含む。一部の場合では、Ｆｃドメイン単量体が、１４個以下のアミノ酸修飾を含む。
ここで「宿主細胞」という語は、タンパク質をそれらの対応する核酸から発現するのに
必要であるような、例えばオルガネラである、必要な細胞成分を含む媒体を指す。核酸は
典型的に、この技術分野で公知の従来の技術（形質転換、トランスフェクション、電気穿
孔、リン酸カルシウム沈殿、直接の微量注入等）によって宿主細胞内に導入されることが
可能である核酸ベクター中に含まれる。宿主細胞は、例えば細菌細胞である原核細胞、又
は、例えば哺乳動物細胞（例えばＣＨＯ細胞）である真核細胞とすることができる。本明
細書に記載するように、宿主細胞を用いて、その後結合して所望のＦｃコンストラクトを
形成することが可能である所望のドメインをコードする一つ又は複数のポリペプチドを発
現させる。
ここで「医薬組成物」という語は、活性成分と、活性成分を投与方法に好適にさせるこ
とが可能である一つ又は複数の賦形剤及び希釈剤とを含有する、薬用製剤又は医薬製剤を
指す。本開示の医薬組成物は、Ｆｃコンストラクトと適合性がある薬剤的に許容できる成
分を含む。該医薬組成物は典型的に、静脈投与又は皮下投与のために水性形態である。
ここでポリペプチド又はＦｃコンストラクトの「実質的に均質な集団」は、組成物（例
えば、医薬組成物）中のポリペプチド又はＦｃコンストラクトのうちの少なくとも８５％
が、同数のＦｃドメイン及び同一のＦｃドメイン構造を有するというものである。種々の
実施形態では、組成物中のポリペプチド又はＦｃコンストラクトのうちの少なくとも９０
％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％、又は９９．５％が同一である。したがっ
て、Ｆｃコンストラクトの実質的に均質な集団を含む医薬組成物は、組成物中のＦｃコン
ストラクトのうちの少なくとも８５％が、同数のＦｃドメイン及び同一の構造を有すると
いうものである。Ｆｃコンストラクトの実質的に均質な集団は、Ｆｃコンストラクトの多
量体又は凝集を１０％を超えて含まない（例えば、８％、５％、２％、又は１％を超えな
い）。
ここで「薬剤的に許容できるキャリア」という語は、医薬組成物中の賦形剤又は希釈剤
を指す。薬剤的に許容できるキャリアは、製剤の他の成分と適合性があり、摂取者にとっ
て有害でないものでなくてはならない。本開示では、薬剤的に許容できるキャリアは、Ｆ
ｃコンストラクトに対して十分な薬剤的安定性を与える必要がある。キャリアの性質は、
投与形態によって異なる。例えば、経口投与では、固形キャリアが好ましく、静脈内投与
では概して、水溶液キャリア（例えば、ＷＦＩ及び／又は緩衝液）が用いられる。
ここで「治療有効量」は、例えば薬剤投与量である、対象もしくは患者において所望の
生物学的な効果の誘導に、又は、本明細書に記載の状態又は障害を有する患者の治療に有
効である量を指す。本明細書においては、「治療有効量」が、単回投与又は任意の投薬も
しくは経路での摂取、単独で又は他の治療薬剤と組み合わせての摂取のいずれでも、所望
の治療効果をもたらす量として解釈できるということも理解されたい。
図１は、二つの野生型（ｗｔ）Ｆｃドメイン単量体（１０２及び１０４）の二量体を含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト１）の説明図である。 図２は、二つのＦｃドメイン単量体の二量体を含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト２）の説明図である。第一のＦｃドメイン単量体（２０２）がそのＣＨ３抗体定常ドメイン内に突起を含有し、一方、近接した位置に、第二のＦｃドメイン単量体（２０４）がそのＣＨ３抗体定常ドメイン内に空洞を含有する。 図３は、別のＦｃコンストラクト（コンストラクト３）の説明図である。このＦｃコンストラクトは二つのＦｃドメイン単量体（３０２及び３０４）の二量体を含有するものであって、両Ｆｃドメイン単量体は、ｗｔ配列と比べてそれらのＣＨ３－ＣＨ３界面において異なる電荷をもつアミノ酸を含有し、二つのＦｃドメイン単量体間の好適な静電的相互作用を促進する。 図４は、二つのＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト４）の説明図である。このコンストラクトは、三つのポリペプチドで形成される。第一のポリペプチド（４０２）は、直列に連結した二つのｗｔのＦｃドメイン単量体（４０４及び４０６）を含有する。第二のポリペプチド及び第三のポリペプチド（それぞれ４０８及び４１０）はそれぞれ、ｗｔのＦｃドメイン単量体を含有する。 図５は、四つのポリペプチドで形成される、三つのＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト５又はコンストラクト５＊）の説明図である。第一のポリペプチド（５０２）は、突起含有Ｆｃドメイン単量体（５０４）と直列に連結した、ｗｔ配列と比べてＣＨ３－ＣＨ３界面において異なる電荷をもつアミノ酸を含有する一つのＦｃドメイン単量体（５０６）を含有する。第二のポリペプチド（５０８）は、別の突起含有Ｆｃドメイン単量体（５１０）と直列に連結した、ｗｔ配列と比べてＣＨ３－ＣＨ３界面において異なる電荷をもつアミノ酸を含有するＦｃドメイン単量体（５１２）を含有する。第三のポリペプチド及び第四のポリペプチド（それぞれ５１４及び５１６）はそれぞれ、空洞含有Ｆｃドメイン単量体を含有する。 図６は、三つのポリペプチドで形成される、二つのＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト６）の説明図である。第一のポリペプチド（６０２）は、直列に連結した二つの突起含有Ｆｃドメイン単量体（６０４及び６０６）を含有し、一方、第二のポリペプチド及び第三のポリペプチド（それぞれ６０８及び６１０）はそれぞれ、対応する空洞を含有するように操作されたＦｃドメイン単量体を含有する。 図７Ａは、別のＦｃコンストラクト（コンストラクト７）の説明図である。このＦｃコンストラクトは二つのＣＬ－ＣＨ１－Ｆｃドメイン単量体（７０２及び７０４）の二量体を含有する。この実施形態では、ＣＬ抗体定常ドメインは、隣接するＣＨ１抗体定常ドメインと連結している。図７Ｂは、複数のＦｃドメインを含有する、ＣＬ－ＣＨ１－Ｆｃドメイン単量体（例えば、７０６、７０８、及び７１０）の多量体を含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト８）の説明図である。このＦｃコンストラクトでは、構成要素のポリペプチドは、コンストラクト７の構成要素のポリペプチドと同じとすることが可能である。一つのＦｃコンストラクト（例えば７１２）のＣＬ抗体定常ドメインは、隣接する第二のＦｃコンストラクト（例えば７１４）のＣＨ１抗体定常ドメインと相互作用する。 図８は、六つのポリペプチドで形成される、五つのＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト９）の説明図である。第一のポリペプチド及び第二のポリペプチド（８０２及び８１０）はそれぞれ、直列に連結した三つのＦｃドメイン単量体（それぞれ、８０４、８０６、８０８、及び８１２、８１４、８１６）を含有する。詳細には、ポリペプチド８０２又は８１０においては、ｗｔ配列と比べてＣＨ３－ＣＨ３界面において異なる電荷をもつアミノ酸を含有する第二のＦｃドメイン単量体（８０６又は８１４）であって、第三の突起含有Ｆｃドメイン単量体（８０８又は８１６）と結合している該第二のＦｃドメイン単量体（８０６又は８１４）と、第一の突起含有Ｆｃドメイン単量体（８０４又は８１２）が結合している。第三のポリペプチド～第六のポリペプチド（８１８、８２０、８２２、及び８２４）はそれぞれ、空洞含有Ｆｃドメイン単量体を含有して、それぞれ８０４、８０８、８１２、及び８１６である各Ｆｃドメイン単量体と共にＦｃドメインを形成する。 図９は、六つのポリペプチドで形成される、五つのＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト１０）の説明図である。第一のポリペプチド及び第二のポリペプチド（９０２及び９１０）はそれぞれ、直列に連結した三つのＦｃドメイン単量体（それぞれ、９０４、９０６、９０８、及び９１２、９１４、９１６）を含有する。詳細には、ポリペプチド９０２又は９１０においては、第一の突起含有Ｆｃドメイン単量体（９０４又は９１２）が、ｗｔ配列と比べてＣＨ３－ＣＨ３界面において異なる電荷をもつアミノ酸を含有する第三のＦｃドメイン単量体（９０８又は９１６）と結合している第二の突起含有Ｆｃドメイン単量体（９０６又は９１４）と、結合している。第三のポリペプチド～第六のポリペプチド（９１８、９２０、９２２、及び９２４）はそれぞれ、空洞含有Ｆｃドメイン単量体を含有して、それぞれ９０４、９０６、９１２、及び９１４である各Ｆｃドメイン単量体と共に、Ｆｃドメインを形成する。 図１０は、同一の配列の二つのポリペプチドで形成される、三つのＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクト（コンストラクト１１）の説明図である。二つのポリペプチド（１００２及び１０１０）はそれぞれ、直列に連結した三つのＦｃドメイン単量体（それぞれ１００４、１００６、１００８、及び１０１２、１０１４、１０１６）を含有する。詳細には、各ポリペプチドは、ｗｔ配列と比べてＣＨ３－ＣＨ３界面において異なる電荷をもつアミノ酸をもつ第三のＦｃドメイン単量体（１００８又は１０１６）と結合している第二の空洞含有Ｆｃドメイン単量体（１００６又は１０１４）と結合している、第一の突起含有Ｆｃドメイン単量体（１００４又は１０１２）を含有する。Ｆｃドメイン単量体１００８及び１０１６が会合して、第一のＦｃドメインを形成し、Ｆｃドメイン単量体１００４及び１００６が会合して、第二のＦｃドメインを形成し、Ｆｃドメイン単量体１０１２及び１０１４が会合して第三のＦｃドメインを形成する。コンストラクト１１は、宿主細胞内で、単一のポリペプチド配列の発現により形成することが可能である。 図１１Ａ～１１Ｂは、それぞれ、コンストラクト４の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及び非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥを示している。 図１２Ａ～１２Ｂは、それぞれ、コンストラクト６の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及び非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥを示している。 図１３は、コンストラクト５のＳＤＳ－ＰＡＧＥであり、表は、コンストラクト５の精製前及び精製後における、三つのＦｃドメイン（三量体）、二つのＦｃドメイン（二量体）、又は、一つのＦｃドメイン（単量体）を有する発現タンパク質の百分率を示している。 図１４Ａ及び１４Ｂは、コンストラクト１、５、及び６を用いた、ＴＨＰ－１単球の活性化アッセイ（図１４Ａ）及び阻害アッセイ（図１４Ｂ）を示している。 図１５は、関節リウマチのＫ／ＢｘＮモデルにおける、ＩＶＩＧならびにコンストラクト５及び６の効果を示している。 図１６は、慢性ＩＴＰモデルにおける、ＩＶＩＧならびにコンストラクト５及び６の効果を示している。 図１７は、ＴＨＰ－１単球系細胞における、ＩＶＩＧ又はコンストラクト５のファゴサイトーシスの抑制を示している。 図１８は、コンストラクト５（ＳＩＦ）及びコンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋変異体の発現から得られた清澄培地（ｃｌａｒｉｆｉｅｄ ｍｅｄｉａ）の非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥによるサイズ分布を示している。 図１９は、ＩｇＧ１コントロール、コンストラクト５（ＳＩＦ３）、及びコンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋変異体（ＦｃｆＲＩＩＢ＋）の、Ｆｃガンマ受容体に対する相対的結合を示している。 図２０は、単球由来樹状細胞（ｍｏＤＣ）上のＣＤ８６表面発現を示している。 図２１は、単球由来樹状細胞（ｍｏＤＣ）上のＣＤ８６表面発現を示している。
発明の詳細な説明
ＩｇＧのＦｃドメインを含む治療用タンパク質を用いて、炎症ならびに免疫疾患及び炎
症性疾患を治療することが可能である。本開示は、２個以上（例えば、２～１０個）のＦ
ｃドメインを含有する種々のＦｃコンストラクトを調製するための組成物及び方法を特徴
とする。
Ｉ．Ｆｃドメイン単量体
Ｆｃドメイン単量体は、ヒンジドメイン、ＣＨ２抗体定常ドメイン、及びＣＨ３抗体定
常ドメインを含む。Ｆｃドメイン単量体は、免疫グロブリン抗体アイソタイプＩｇＧ、Ｉ
ｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、又はＩｇＤのものとすることが可能である。Ｆｃドメイン単量体
はまた、任意の免疫グロブリン抗体アイソタイプ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、Ｉｇ
Ｇ２ｂ、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）のものとしてもよい。Ｆｃドメイン単量体の二量体は
、白血球表面上にある受容体である、例えばＦｃγＲＩＩＩａであるＦｃ受容体と結合す
ることが可能なＦｃドメイン（本明細書でさらに規定される）である。本開示では、Ｆｃ
ドメイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメインは、ＣＨ３－ＣＨ３抗体定常ドメインの界面に
おけるアミノ酸置換を含有し、それらドメイン同士の会合を促進し得る。一部の実施形態
では、Ｆｃドメイン単量体は、例えばＣＬ及びＣＨ１抗体定常ドメインである、Ｎ末端に
結合している二つの他の定常ドメインを含む（図７）。他の実施形態では、Ｆｃドメイン
単量体は、例えばアルブミン結合ペプチドである、Ｃ末端に結合しているさらなる部分を
含む。本開示では、Ｆｃドメイン単量体は、例えばＶＨ、ＶＬ、相補性決定領域（ＣＤＲ
）、又は超可変領域（ＨＶＲ）である、いずれの種類の抗体可変領域も含有しない。Ｆｃ
ドメイン単量体は、例えばヒト、マウス、又はラットである、様々な起源のものとするこ
とが可能である。
ＩＩ．Ｆｃドメイン
本明細書で規定するように、Ｆｃドメインは、ＣＨ３抗体定常ドメイン間の相互作用に
よって二量体形成する二つのＦｃドメイン単量体を含む。本開示では、Ｆｃドメインは例
えばＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ、又はＨＶＲである、抗体の可変領域を含まない。Ｆｃドメイン
は、Ｆｃ受容体、例えばＦｃ－ガンマ受容体（すなわち、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ））、
Ｆｃ－アルファ受容体（すなわち、Ｆｃα受容体（ＦｃαＲ））、Ｆｃ－イプシロン受容
体（すなわち、Ｆｃε受容体（ＦｃεＲ））及び／又は胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に
結合する最小の構造を形成する。一部の実施形態では、本開示のＦｃドメインは、Ｆｃγ
受容体（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩ
Ｂ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、及び／又はＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ
１６ｂ））及び／又は胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合する。
ＩＩＩ．Ｆｃドメイン修飾
修飾されていないＦｃドメイン単量体は、天然のヒトＦｃドメイン単量体又はＷＴヒト
Ｆｃドメイン単量体とすることが可能である。Ｆｃドメイン単量体は、ヒンジ、ＣＨ２ド
メイン、及びＣＨ３ドメインを含む天然のヒトＦｃドメイン単量体、もしくは、定方向の
二量体形成を調整又は促進する、最大１６個（例えば、最大２、３、４、５、６、７、８
、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、又は１６個）のアミノ酸修飾（例えば、単
一アミノ酸修飾）を有するその変異体とすることが可能である。一部の場合では、Ｆｃド
メインは少なくとも一つのアミノ酸修飾を含み、該アミノ酸修飾は、（ｉ）一つ又は複数
のＦｃ受容体に対する結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの
硫酸化のレベル、（ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定
性、及び／又は、（ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える（例え
ば、修飾されていないＦｃドメインと比較して）。一部の場合では、Ｆｃドメインは１６
個以下のアミノ酸修飾（例えば、ＣＨ３ドメインにおける２個以下、３個以下、４個以下
、５個以下、６個以下、７個以下、８個以下、９個以下、１０個以下、１１個以下、１２
個以下、１３個以下、１４個以下、１５個以下、又は１６個以下のアミノ酸修飾）を含む
。
この開示のＦｃドメインは、位置４０、９２～１０３、１１３～１１６、１１８、１３
１、１３７～１４６、１６９～１７５、１９６、１９９、２０３、２０６、２１１、２１
４、２１７、２１９～３４１、３４４～３４６、３４９～３７０、３７２～３７４、３７
６～３８０、３８２～４０５、４０７～４２２、４２４、４２６～４４２、及び／又は４
４５～４４７から選択される残基において、少なくとも一つ（例えば、１、２、３、４、
５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、又は１
００個）以上のアミノ酸修飾を含む。一部の実施形態では、アミノ酸修飾はアミノ酸の置
換であって、置換されたアミノ酸は、天然又は非天然のアミノ酸である。一部の実施形態
では、アミノ酸修飾はアミノ酸の欠失であって、少なくとも一つ（例えば、１、２、３、
４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０個）以上の残基が、Ｆｃドメイン
から削除されるものである。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、アミノ酸の挿入
であって、少なくとも一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０
、３０、又は４０個）以上の残基が、Ｆｃドメイン内に挿入されるものである。アミノ酸
修飾は複数の修飾の組み合わせ、例えば、一つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失、及び／
又は挿入の組み合わせとすることが可能である。
Ｆｃ受容体結合親和性
本開示のアミノ酸修飾は、一つ（例えば、１、２、３、４、５、又は６個）以上のＦｃ
受容体（例えば、Ｆｃ－ガンマ受容体（ＦｃγＲ）、Ｆｃ－アルファ受容体（ＦｃαＲ）
、Ｆｃ－イプシロン受容体（ＦｃεＲ）、及び／又は胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ））に
対するＦｃドメインの結合親和性を変更（すなわち、増加又は減少）させることができる
。修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメインと比較して変更（すなわち、増加
又は減少）された親和性で、ＦｃγＲ（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ
Ａ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、及び
／又はＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ））及び／又は胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結
合し得る。修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメインと比較して、一つ（例え
ば、１、２、３、４、５、又は６）以上のＦｃ受容体に関して、変更（すなわち、増加又
は減少）された解離定数（Ｋｄ）を有し得る。さらに、修飾Ｆｃドメインは、修飾されて
いないＦｃドメインと比較して、変更（すなわち、増加又は減少）されたレベルでのグリ
コシル化（例えば、グリガン（ｇｌｙｇａｎ）修飾（例えばマンノース、シアル酸、フコ
ース（Ｆｕｃ）、及び／又はガラクトース（Ｇａｌ）））を有する。Ｆｃ修飾は、一つ（
例えば、１、２、３、４、５、又は６）以上のＦｃ受容体に対するＦｃドメインの親和性
を変え得、一方で、少なくとも一つ（例えば、１、２、３、４、５、又は６）以上の他の
Ｆｃ受容体に対する親和性を逆方向に変える。
表１に、修飾されてＦｃ受容体結合親和性を変えることができる例示的なＦｃドメイン
残基を列記している。一部の実施形態では、表１に列記されている一つ（例えば、１、２
、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０個）以上の残基を修飾する
ものであって、修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメインと比較して、Ｆｃ受
容体に対する変更された結合親和性を有する。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は
、表１に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２
０、３０、又は４０個）以上の残基において生じるアミノ酸置換である。一部の実施形態
では、Ｆｃドメイン修飾は、表１に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４、５、
６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０個）以上の残基において生じるアミノ酸欠
失である。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、表１に列記されている一つ（例え
ば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０個）以上の残基
において生じるアミノ酸挿入である。Ｆｃドメイン修飾は複数の修飾の組み合わせとする
ことが可能であり、例えば、該修飾は、アミノ酸の置換、欠失、及び／又は挿入を含むこ
とが可能である。
表２に、ＦｃドメインのＦｃ受容体に対する結合親和性を変える、例示的なアミノ酸修
飾を列記している。修飾Ｆｃドメインは、表２に列記されている修飾のうちの一つ（例え
ば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０個）以上を含み
得る。また、表２の修飾を、表１に列記されている残基のうちの任意の一つ（例えば、１
、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０個）以上の修飾と組み
合わせてもよい。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも１倍（例
えば、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４
０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍、２００倍、３００倍、４０
０倍、５００倍）、一つ（例えば、２、３、４、５、又は６）以上のＦｃ受容体に対する
修飾Ｆｃドメインの結合の親和性を増加させ得る。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修
飾は、Ｆｃγ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、
ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、及び／又はＦｃγＲＩ
ＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ））及び／又は胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する結合親和性を
増加させる。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ
）に対する結合親和性を増加させる。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも１倍（例
えば、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４
０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍、２００倍、３００倍、４０
０倍、５００倍）、一つ（例えば、２、３、４、５、又は６）以上のＦｃ受容体に対する
修飾されたＦｃドメインの結合の親和性を減少させ得る。一部の実施形態では、Ｆｃドメ
イン修飾は、Ｆｃγ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３
２）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、及び／又はＦｃ
γＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ））及び／又は胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する結合親
和性を減少させる。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３
２）に対する結合親和性を減少させる。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、Ｆｃ
Ｒｎに対する結合親和性を減少させる。
Ｆｃ受容体に対する変更された結合親和性をもつ例示的なＦｃドメインには、二重変異
体Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆを含有するＦｃ単量体が含まれる。Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆ変
異は、これまでに、ＦｃγＲＩＩｂ受容体へのＩｇＧ１の結合を有意に特異的に高めるこ
とが証明されている（Ｃｈｕ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
．２００８ Ｓｅｐ；４５（１５）：３９２６－３３）。
（表１）修飾されてＦｃ受容体結合親和性を変えることができるＦｃドメイン残基
Figure 2022068176000004
（表２）Ｆｃ受容体結合親和性を変えるＦｃドメイン修飾
Figure 2022068176000005
Figure 2022068176000006
Figure 2022068176000007
Figure 2022068176000008
Figure 2022068176000009
Figure 2022068176000010
Figure 2022068176000011
Figure 2022068176000012
Figure 2022068176000013
半減期
半減期を変えるＦｃドメイン修飾は、修飾ＦｃドメインのＦｃＲｎへの結合を、例えば
ｐＨ６．０及び／又はｐＨ７．４における相互作用の親和性を変えることによって、変え
ることができる。半減期を変えるアミノ酸修飾は、ＦｃドメインのＦｃＲｎ受容体への結
合のｐＨ依存性を変えることができる。表３に、修飾されてＦｃドメインの半減期（例え
ば、血中半減期）を変えることができる例示的なＦｃドメイン残基を列記している。一部
の実施形態では、表３に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８
、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残基を修飾することができ、修飾Ｆｃドメイ
ンは、修飾されていないＦｃドメインと比較して、変更された半減期を有する。一部の実
施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、表３に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４
、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残基において生じるアミノ
酸置換である。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、表３に列記されている一つ（
例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残
基において生じるアミノ酸欠失である。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、表３
に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３
０、又は４０）以上の残基において生じるアミノ酸挿入である。Ｆｃドメイン修飾は複数
の修飾の組み合わせとすることが可能であり、例えば、該修飾は、アミノ酸の置換、欠失
、及び／又は挿入を含むことが可能である。
表４に、Ｆｃドメイン半減期を変える例示的な修飾を列記している。修飾Ｆｃドメイン
は、表４に列記されている修飾のうちの一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８
、９、１０、２０、３０、又は４０）以上を含み得る。また、表４の修飾を、表３に列記
されている残基の位置の修飾と組み合わせてもよい。
一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して
、少なくとも０．５倍（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９
倍、又は１０倍）、修飾Ｆｃドメインの半減期を増加させ得る。
一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して
、少なくとも０．５倍（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９
倍、又は１０倍）、修飾Ｆｃドメインの半減期を減少させ得る。
（表３）修飾されて半減期を変えることができるＦｃドメイン残基
Figure 2022068176000014
（表４）半減期を変えるＦｃドメイン修飾
Figure 2022068176000015
Figure 2022068176000016
Figure 2022068176000017
Figure 2022068176000018
Figure 2022068176000019
エフェクタ機能
表５に、修飾されてＦｃドメインのエフェクタ機能（例えば、細胞溶解（例えば、抗体
依存性細胞媒介毒性（ＡＤＣＣ）及び／又は補体依存性細胞毒性活性（ＣＤＣ））、ファ
ゴサイトーシス（例えば、抗体依存性細胞ファゴサイトーシス（ＡＤＣＰ）及び／又は補
体依存性細胞毒性（ＣＤＣＣ））、免疫活性化及びＴ－細胞活性化）を変えることができ
る例示的なＦｃドメイン残基を列記している。一部の実施形態では、表５に列記されてい
る一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）
以上の残基を修飾することができ、該修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメイ
ンと比較して、変更されたエフェクタ機能（例えば、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、ＡＤＣＰ、ＣＤ
ＣＣ、免疫活性化、及び／又はＴ－細胞活性化）を有する。一部の実施形態では、Ｆｃド
メイン修飾は、表５に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、
９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残基において生じるアミノ酸置換である。一部
の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、表５に列記されている一つ（例えば、１、２、３
、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残基において生じるア
ミノ酸欠失である。一部の実施形態では、Ｆｃ修飾は、表５に列記されている一つ（例え
ば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残基に
おいて生じるアミノ酸挿入である。
表６に、Ｆｃドメインのエフェクタ機能（例えば、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、ＡＤＣＰ、ＣＤ
ＣＣ、免疫活性化、及び／又はＴ－細胞活性化）を変える例示的な修飾を列記している。
修飾Ｆｃドメインは、表６に列記されている修飾のうちの一つ（例えば、１、２、３、４
、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上を含み得る。また、表６の修
飾を、表５に列記されている残基の修飾と組み合わせてもよい。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも０．５倍
（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍）、修
飾Ｆｃドメインのエフェクタ機能（例えば、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、ＡＤＣＰ、ＣＤＣＣ、免
疫活性化、及び／又はＴ－細胞活性化）を増加させ得る。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも０．５倍
（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍）、修
飾Ｆｃドメインのエフェクタ機能（例えば、細胞溶解（例えば、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、ＡＤ
ＣＰ、ＣＤＣＣ、免疫活性化、及び／又はＴ－細胞活性化））を増加させ得る。
（表５）修飾されてエフェクタ機能を変えることができるＦｃドメイン残基
Figure 2022068176000020
（表６）エフェクタ機能を変えるＦｃドメイン修飾
Figure 2022068176000021
Figure 2022068176000022
Figure 2022068176000023
Figure 2022068176000024
安定性の変更
Ｆｃドメインの安定性を変えることで、熱的安定性（例えば、融点、Ｔｍ）及び凝集形
態（例えば、酸性、すなわち低ｐＨの条件下での凝集形態）に影響を及ぼすことが可能で
ある。
一部の実施形態では、修飾Ｆｃドメインの熱的安定性を、修飾されていないＦｃドメイ
ンと比較して、少なくとも約０．１°Ｃ（例えば約０．２５°Ｃ、約０．５°Ｃ、約０．
７５°Ｃ、約１°Ｃ、約１．２５°Ｃ、約１．５°Ｃ、約１．７５°Ｃ、約２°Ｃ、約３
°Ｃ、約４°Ｃ、約５°Ｃ、約６°Ｃ、約７°Ｃ、約８°Ｃ、約９°Ｃ、約１０°Ｃ、約
２０°Ｃ、約３０°Ｃ、約４０°Ｃ、又は約５０°Ｃ）、変更（すなわち、増加又は減少
）させることができる。一部の実施形態では、修飾Ｆｃドメインの熱的安定性が、修飾さ
れていないＦｃドメインと比較して増加する。一部の実施形態では、修飾Ｆｃドメインの
熱的安定性が、修飾されていないＦｃドメインと比較して減少する。一部の実施形態では
、修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメインと比較して、凝集性を少なくとも
１％（例えば、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、２０％、３
０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％）以上変えた（すなわち、
増加させた又は減少させた）。一部の実施形態では、修飾Ｆｃドメインの凝集性が、修飾
されていないＦｃドメインと比較して増加する。一部の実施形態では、凝集性が、修飾さ
れていないＦｃドメインと比較して減少する。
表７に、修飾されてＦｃドメインの安定性を変えることができる例示的なＦｃドメイン
残基を列記している。一部の実施形態では、表７に列記されている一つ（例えば、１、２
、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残基を修飾するこ
とができ、修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメインと比較して、変更された
安定性を有する。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、表７に列記されている一つ
（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の
残基において生じるアミノ酸置換である。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、表
７に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、
３０、又は４０）以上の残基において生じるアミノ酸欠失である。一部の実施形態では、
Ｆｃドメイン修飾は、表７に列記されている一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７
、８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上の残基において生じるアミノ酸挿入である
。
表８に、Ｆｃドメインの安定性を変える例示的な修飾を列記している。修飾Ｆｃドメイ
ンは、表８に列記されている修飾のうちの一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、
８、９、１０、２０、３０、又は４０）以上を含み得る。また、表８の修飾を、表７に列
記されている残基の修飾と組み合わせてもよい。
一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して
、少なくとも０．５倍（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９
倍、又は１０倍）、修飾Ｆｃドメインの安定性を増加させ得る。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも０．５倍
（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍）、修
飾Ｆｃドメインの安定性を減少させ得る。
（表７）修飾されて安定性を変えることができるＦｃドメイン残基
Figure 2022068176000025
（表８）安定性を変えるＦｃドメイン修飾
Figure 2022068176000026
分解に対する感受性の変更
分解に対する感受性は、Ｆｃドメイン含有分子をどのように保存及び輸送するかに影響
し得る。温度等の環境条件（例えば、温度、湿度、ｐＨ）に対するＦｃドメインの感受性
を低下させることで、Ｆｃドメイン含有分子を、より容易に輸送可能に及び／又はより長
期間にわたって保存可能にさせることが可能である。修飾されて、分解に対するＦｃドメ
インの感受性を変えることができる例示的なＦｃ残基は、２３３、２３４、２３５、２３
６、２３７、２３９、２４１、及び２４９を含む。一部の実施形態では、残基２３３、２
３４、２３５、２３６、２３７、２３９、２４１、及び２４９からなる群から選択される
一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、又は８つ）の残基を修飾さすることができ
、修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメインと比較して、変更された分解に対
する感受性を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ修飾は、２３３、２３４、２３５、２３
６、２３７、２３９、２４１、及び２４９からなる群から選択される一つ（例えば、１、
２、３、４、５、６、７、又は８）の残基の位置において生じるアミノ酸置換である。一
部の実施形態では、Ｆｃ修飾は、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３９、２
４１、及び２４９からなる群から選択される一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７
、又は８）の残基の位置において生じるアミノ酸欠失である。一部の実施形態では、Ｆｃ
修飾は、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３９、２４１、及び２４９からな
る群から選択される一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、又は８つ）の残基の位
置において生じるアミノ酸挿入である。
分解に対するＦｃドメインの感受性を変える例示的な修飾は、Ｘが任意のアミノ酸であ
る、Ｃ２３３Ｘ、Ｄ２３４Ｘ、Ｋ２３５Ｘ、Ｓ２３６Ｘ、Ｔ２３６Ｘ、Ｈ２３７Ｘ、Ｃ２
３９Ｘ、Ｓ２４１Ｘ、及びＧ２４９Ｘからなる群から選択される一つ（例えば、１、２、
３、４、５、６、７、又は８）の修飾を含み得る。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも１％（例
えば、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、２０％、３０％、４
０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％）以上、修飾Ｆｃドメインの分解を
低減させ得る。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメイ
ンと比較して、少なくとも１％（例えば、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、
９％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％
）以上、加熱による修飾Ｆｃドメインの分解を低減させ得る。一部の実施形態では、Ｆｃ
ドメインは、少なくとも１時間（例えば、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７
時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１日、２日、３日、４日、５日
、６日、又は１週間）以上の期間にわたって加熱される。一部の実施形態では、Ｆｃドメ
インを加熱する際の温度は、少なくとも４５°Ｃ（５０°Ｃ、５５°Ｃ、６０°Ｃ、６５
°Ｃ、７０°Ｃ、７５°Ｃ、８５°Ｃ、又は９５°Ｃ）又はそれ以上高いものとする。修
飾Ｆｃドメインの分解のレベルは、限定するものではないが、還元キャピラリーゲル電気
泳動（ｒＣＧＥ）、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－
ＰＡＧＥ）及び高速サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）を含む当業者に公知で
ある方法によって、凝集、分解、又は断片化の程度を評価することによって測定され得る
のが可能である。
硫酸化
修飾されて、Ｆｃドメインの硫酸化を変えることができる例示的なＦｃ残基は、残基２
４１、２４３、２４６、２６０、及び３０１を含む。一部の実施形態では、２４１、２４
３、２４６、２６０、及び３０１からなる群から選択される一つ（例えば、１、２、３、
４、又は５）のＦｃドメイン残基を修飾することができ、修飾Ｆｃドメインは、修飾され
ていないＦｃドメインと比較して、変更された硫酸化を有する。一部の実施形態では、Ｆ
ｃドメイン修飾は、２４１、２４３、２４６、２６０、及び３０１からなる群から選択さ
れる一つ（例えば、１、２、３、４、又は５）の残基において生じるアミノ酸置換である
。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、残基２４１、２４３、２４６、２６０、及
び／又は３０１からなる群から選択される一つ（例えば、１、２、３、４、又は５）の残
基で生じるアミノ酸欠失である。一部の実施形態では、Ｆｃ修飾は、Ｆｃドメイン残基２
４１、２４３、２４６、２６０、及び／又は３０１からなる群から選択される一つ（例え
ば、１、２、３、４、又は５）の残基の位置で生じるアミノ酸挿入である。
Ｆｃドメインの硫酸化を変える例示的な修飾は、２４１Ｆ、２４３Ｆ、２４６Ｋ、２６
０Ｔ、及び／又は３０１Ｒを含む。修飾Ｆｃドメインは、２４１Ｆ、２４３Ｆ、２４６Ｋ
、２６０Ｔ、及び３０１Ｒからなる群から選択される一つ（例えば、１、２、３、４、又
は５）の修飾を含み得る。これら修飾のうちのいずれか一つを、残基２４１、２４３、２
４６、２６０、及び／又は３０１でのさらなる修飾と組み合わせてもよい。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも０．５倍
（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍）、修
飾Ｆｃドメインの硫酸化を増加させ得る。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも０．５倍
（例えば、１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍）、修
飾Ｆｃドメインの硫酸化を減少させ得る。
プロテアーゼ耐性
Ｆｃドメインは修飾されて、例えば、エンドソームプロテアーゼ、細胞外プロテアーゼ
（例えば、トリプシン、キモトリプシン、プラスミン）、消化プロテアーゼ（例えば、ペ
プシン）、血清プロテアーゼ（例えば、凝血因子）、白血球から放出されるプロテアーゼ
（例えば、エラスターゼ及びカテプシンＧ）及び組織特異的プロテアーゼ（例えば、腫瘍
特異的プロテアーゼ（例えば、マトリックスメタロプロテアーゼ））に対する耐性である
、プロテアーゼ耐性を増加させ得る。プロテアーゼ分解に対する感受性は、Ｆｃドメイン
の半減期を制御する重要な役割を果たすことが可能であり、感受性の増加はより短い半減
期をもたらし、感受性の低下はより長い半減期をもたらす。プロテアーゼ耐性を変えるた
めに、アミノ酸修飾は、プロテアーゼ切断部位を含む又はプロテアーゼ切断部位に影響を
与えるＦｃドメインの領域内でなされ得る。あるいは、Ｆｃドメインのグリコシル化状態
を変えるアミノ酸修飾は、Ｆｃドメインのプロテアーゼ耐性及び／又は感受性特性を変え
得る。
修飾されてプロテアーゼ耐性を変えることができる例示的なＦｃ残基は、２３３、２３
４、２３５、２３６、２３７、２３９、２４３、２６７、２６８、２９２、３００、３２
４、３２６、３３２、及び３３３を含む。一部の実施形態では、２３３、２３４、２３５
、２３６、２３７、２３９、２４３、２６７、２６８、２９２、３００、３２４、３２６
、３３２、及び３３３からなる群から選択される一つ（例えば、１、２、３、４、５、６
、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５）のＦｃドメイン残基を修飾す
ることができ、修飾Ｆｃドメインは、修飾されていないＦｃドメインと比較して、変更さ
れたプロテアーゼ耐性を有する。Ｆｃドメイン修飾は、残基２３３、２３４、２３５、２
３６、２３７、２３９、２４３、２６７、２６８、２９２、３００、３２４、３２６、３
３２、及び３３３から選択される一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、
１０、１１、１２、１３、１４、又は１５）の残基において生じるアミノ酸置換であり得
る。Ｆｃ修飾はまた、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３９、２４３、２６
７、２６８、２９２、３００、３２４、３２６、３３２、及び３３３から選択される一つ
（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５
、又は１６）の残基において生じるアミノ酸欠失であり得る。一部の実施形態では、Ｆｃ
修飾は、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３９、２４３、２６７、２６８、
２９２、３００、３２４、３２６、３３２、及び３３３から選択される一つ（例えば、１
、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５）の残基
の位置において生じるアミノ酸挿入である。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン修飾は、
上記のうちのいずれか一つの組み合わせ（例えば、アミノ酸置換、欠失、及び／又は挿入
の組み合わせ）であり得る。
Ｆｃドメインのプロテアーゼ耐性を変える例示的な修飾は、２３３Ｐ、２３４Ｖ、２３
５Ａ、及び２３６ｄｅｌ；２３７Ａ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３７Ｄ、２３９Ｄ、及
び３３２Ｅ；２３７Ｐ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３７Ｑ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；
２３７Ｓ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３９Ｄ、２６８Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；２
３９Ｄ、３２６Ａ、及び３３３Ａ；２３９Ｄ及び３３２Ｅ；２４３Ｌ、２９２Ｐ、及び３
００Ｌ；２６７Ｅ、２６８Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；２６７Ｅ及び３３２Ｅ；２６８
Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；３２６Ａ、３３２Ｅ、及び３３３Ａ；ならびに、３２６Ａ
及び３３３Ａのうちのいずれか一つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１
０、１１、１２、１３、１４、又は１５）を含み得る。
Ｆｃドメイン修飾は、修飾されていないＦｃドメインと比較して、少なくとも１％（例
えば、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、２０％、３０
％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％）以上、修飾Ｆｃドメインの
プロテアーゼ耐性を増加させ得る。
ＩＶ．二量体形成選択性モジュール
本開示では、二量体形成選択性モジュールは、二つのＦｃドメイン単量体の好ましい対
形成を促進してＦｃドメインを形成する、Ｆｃドメイン単量体の部分である。詳細には、
二量体形成選択性モジュールは、二つのＦｃドメイン単量体の相互作用するＣＨ３抗体定
常ドメイン間の界面に位置するアミノ酸置換を含む、Ｆｃドメイン単量体のＣＨ３抗体定
常ドメインの部分である。二量体形成選択性モジュールにおいては、それら置換に選択さ
れたアミノ酸の適合性の結果として、アミノ酸置換が、二つのＣＨ３抗体定常ドメインの
二量体形成を有利に行う。二量体形成選択性モジュールをもたないＦｃドメイン単量体で
形成される又は二量体形成選択性モジュール内に適合しないアミノ酸置換をもつＦｃドメ
イン単量体で形成される他のＦｃドメインよりも、この好ましいＦｃドメインの最終形態
は、選択的である。この種のアミノ酸置換は、ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ（登録商標）突然変
異誘発等のこの技術分野で周知の従来の分子クローニング技術を用いて行うことが可能で
ある。
一部の実施形態では、二量体形成選択性モジュールは、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、
操作された空洞（本明細書でさらに説明する）を含む。他の実施形態では、二量体形成選
択性モジュールは、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、操作された突起（本明細書でさらに説
明する）を含む。選択的にＦｃドメインを形成するために、適合性の二量体形成選択性モ
ジュールをもつ二つのＦｃドメイン単量体、例えば操作された空洞を含む一方のＣＨ３抗
体定常ドメインと、操作された突起を含むもう一方のＣＨ３抗体定常ドメインとを結合し
て、Ｆｃドメイン単量体の空洞に突起が挿入された対を形成する。
他の実施形態では、正電荷をもつアミノ酸置換を含有する二量体形成選択性モジュール
をもつＦｃドメイン単量体と、負電荷をもつアミノ酸置換を含有する二量体形成選択性モ
ジュールをもつＦｃドメイン単量体とを選択的に結合して、電荷をもつアミノ酸の好まし
い静電的ステアリング（本明細書においてさらに説明する）を経てＦｃドメインを形成す
ることができる。特定の二量体形成選択性モジュールを、さらに以下に説明される表１及
び２にさらに列記しているが、これらに限定されない。
他の実施形態では、二つのＦｃドメイン単量体は、ＣＨ３ドメイン間の界面における電
荷をもつ残基の環内の少なくとも二つの位置において、同一の逆電荷の変異を含有する、
二量体形成選択性モジュールを含む。二つのＦｃドメイン単量体内の残基の２以上の相補
的な対の両要素の電荷が反転していることによって、変異したＦｃドメイン単量体は同じ
変異の配列のＦｃドメイン単量体に対して相補性を維持するが、こうした変異なしのＦｃ
ドメイン単量体に対する相補性はより小さい。一実施形態では、Ｆｃドメインは、二重変
異体であるＫ４０９Ｄ／Ｄ３３９Ｋ、Ｋ３９２Ｄ／Ｄ３９９Ｋ、Ｅ３５７Ｋ／Ｋ３７０Ｅ
、Ｄ３５６Ｋ／Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４０９Ｅ／Ｄ３３９Ｋ、Ｋ３９２Ｅ／Ｄ３９９Ｋ、Ｅ３５
７Ｋ／Ｋ３７０Ｄ、又はＤ３５６Ｋ／Ｋ４３９Ｅを含むＦｃ単量体を含む。別の実施形態
では、Ｆｃドメインは、例えばＫ４０９Ｄ／Ｄ３９９Ｋ／Ｅ３５７Ｋ／Ｋ３７０Ｅである
二重変異体の任意の対を結合した四重変異体を含むＦｃ単量体を含む。
こうしたＦｃドメインの形成は、ＣＨ３抗体定常ドメイン内の適合するアミノ酸置換に
よって促進される。ＣＨ３－ＣＨ３界面において、二つの二量体形成選択性モジュールが
、適合しないアミノ酸置換を含有する場合、例えば、操作された空洞を両方が含有する場
合、操作された突起を両方が含有する場合、又は、同じ電荷をもつアミノ酸を両方が含有
する場合は、Ｆｃドメインの形成は促進されない。
さらに、画成されたＦｃドメイン単量体によるＦｃドメインの形成を促進するために用
いる他の方法には、ヘテロ二量体の形成を可能にする、ロイシンジッパーの単量体α－へ
リックスのＦｃドメイン単量体それぞれに対するＣ末端融合を含むＬＵＺ－Ｙアプローチ
（米国特許出願公開公報第ＷＯ２０１１０３４６０５号）、さらには、ＩｇＡ及びＩｇＧ
ＣＨ３配列の交互セグメントをそれぞれが含むヘテロ二量体のＦｃドメイン単量体によ
りＦｃドメインを生成する、鎖交換操作ドメイン（ＳＥＥＤ）体のアプローチ（Ｄａｖｉ
ｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ．２３：１９５－２０２，
２０１０）が含まれるが、これらに限定されない。
Ｖ．操作された空洞及び操作された突起
操作された空洞及び操作された突起の使用（すなわち、「ノブイントゥホール（ｋｎｏ
ｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ）」ストラテジー）は、Ｃａｒｔｅｒ及びその共同研究者（Ｒｉ
ｄｇｗａｙ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．９：６１７－６１２，１９９６；
Ａｔｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２７０：２６－３５，１９９７；
Ｍｅｒｃｈａｎｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：６７７－６８
１，１９９８）によって記述されている。ノブとホールとの相互作用は、ヘテロ二量体形
成を支持するが、一方、ノブ間及びホール間の相互作用は、立体的な不一致及び好ましい
相互作用の欠如に起因してホモ二量体形成を妨げる。「ノブイントゥホール」技術は、米
国特許第５，７３１，１６８号にも開示されている。
本開示では、操作された空洞及び操作された突起を、本明細書に記載のＦｃコンストラ
クトの調製に用いる。操作された空洞は、あるタンパク質中の本来のアミノ酸が、より低
分子量の側鎖をもつ異なるアミノ酸で置換されたときに形成される空隙である。操作され
た突起は、あるタンパク質中の本来のアミノ酸が、より高分子量の側鎖をもつ異なるアミ
ノ酸で置換されたときに形成される突起である。詳細には、置換されようとするアミノ酸
は、Ｆｃドメイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメイン内にあり、二つのＦｃドメイン単量体
の二量体形成に関与する。一部の実施形態では、一方のＣＨ３抗体定常ドメイン内の操作
された空洞は、もう一方のＣＨ３抗体定常ドメイン内の操作された突起を収納するように
形成されるため、両ＣＨ３抗体定常ドメインが、二つのＦｃドメイン単量体の二量体形成
を促進する又は支持する二量体形成選択性モジュール（上記に記載）として機能する。他
の実施形態では、一方のＣＨ３抗体定常ドメイン内の操作された空洞は、もう一方のＣＨ
３抗体定常ドメイン内の本来のアミノ酸をより良好に収納するように形成されている。さ
らに他の実施形態では、一方のＣＨ３抗体定常ドメイン内の操作された突起は、もう一方
のＣＨ３抗体定常ドメイン内の本来のアミノ酸とのさらなる相互作用を形成するように形
成されている。
操作された空洞は、チロシン又はトリプトファン等のより長い側鎖を含有するアミノ酸
を、アラニン、バリン、又はトレオニン等のより短い側鎖を含有するアミノ酸で置換する
ことによって構築することが可能である。詳細には、一部の二量体形成選択性モジュール
は（上記にさらに記載した）、ＣＨ３抗体定常ドメイン内にＹ４０７Ｖ変異等の操作され
た空洞を含有する。同様に、操作された突起は、より短い側鎖を含有するアミノ酸を、よ
り長い側鎖を含有するアミノ酸で置換することによって構築することが可能である。詳細
には、一部の二量体形成選択性モジュールは（上記にさらに記載した）、ＣＨ３抗体定常
ドメイン内にＴ３６６Ｗ変異等の操作された突起を含有する。本開示では、操作された空
洞及び操作された突起はまた、ヘテロ二量体形成を促進する、ＣＨ３ドメイン間のジスル
フィド結合操作と組み合わされる。詳細には、空洞Ｆｃが、Ｙ３４９Ｃ変異を含有し、ま
た突起Ｆｃが、Ｓ３５４Ｃ変異を含有する。ジスルフィド結合操作又は構造的計算のいず
れかと組み合わせた（ＨＡ－ＴＦ混合）、他の操作された空洞及び操作された突起を表９
に示すが、これらに限定されない。
（表９）
Figure 2022068176000027
ＣＨ３抗体定常ドメイン内の本来のアミノ酸残基を、異なるアミノ酸残基で置換するこ
とは、本来のアミノ酸残基をコードする核酸を変更することによって達成することが可能
である。置換することが可能である本来のアミノ酸残基の数の上限は、界面における十分
な相互作用を維持したままにすることを考えれば、ＣＨ３抗体定常ドメインの界面におけ
る残基の総数である。
ＶＩ．静電的ステアリング
静電的ステアリングは、より高次のタンパク質分子の形成を制御する、ペプチド、タン
パク質ドメイン、及びタンパク質内の、反対の電荷をもつアミノ酸間の好ましい静電的相
互作用の利用である。静電的ステアリングを用いて、二重特異性抗体の生成の際のヘテロ
二量体形成に有利になるよう、ホモ二量体の形成を低減するように抗体ドメインの相互作
用を変える方法が、米国特許出願公開公報第２０１４－００２４１１１号に開示されてい
る。
本開示では、静電的ステアリングを用いて、Ｆｃドメイン単量体の二量体形成及びＦｃ
コンストラクトの形成を制御する。具体的には、静電的ステアリングを用いてＦｃドメイ
ン単量体の二量体形成を制御するために、ＣＨ３－ＣＨ３界面を形成する一つ又は複数の
アミノ酸残基が、正電荷をもつか又は負電荷をもつアミノ酸残基で置換され、それにより
、導入された特定の電荷をもつアミノ酸に応じて、相互作用が静電的に好ましくなるか又
は好ましくないものとなる。一部の実施形態では、リシン、アルギニン、又はヒスチジン
等、界面の正電荷をもつアミノ酸が、アスパラギン酸又はグルタミン酸等の負電荷をもつ
アミノ酸で置換される。他の実施形態では、界面の負電荷をもつアミノ酸が、正電荷をも
つアミノ酸で置換される。電荷をもつアミノ酸は、相互作用するＣＨ３抗体定常ドメイン
の一方又は両方に導入され得る。相互作用するＣＨ３抗体定常ドメインに、電荷をもつア
ミノ酸を導入することによって、二量体形成選択性モジュール（上記においてさらに説明
した）が形成され、それは、電荷をもつアミノ酸間の相互作用の結果としての静電的ステ
アリング効果で制御されるとおりに、Ｆｃドメイン単量体の二量体を選択的に形成するこ
とが可能である。
特定の一実施例では、反転した電荷を含む二量体形成選択性モジュールを形成するため
に、ＣＨ３抗体定常ドメイン内のアミノ酸Ａｓｐ３９９をＬｙｓで置換する、またアミノ
酸Ｌｙｓ４０９をＡｓｐで置換する。Ｆｃドメイン単量体のヘテロ二量体形成は、二つの
Ｆｃドメイン単量体内に異なるが適合する変異（限定するものではないが表１０に含むよ
うな電荷残基対など）を導入することによって促進することが可能であり、Ｆｃドメイン
単量体のホモ二量体形成は、二重変異体Ｋ４０９Ｄ／Ｄ３３９Ｋ又はＫ３９２Ｄ／Ｄ３９
９Ｋなどである同一の変異を、両Ｆｃドメイン単量体内に対称的であるように導入するこ
とによって促進することが可能である。
（表１０）
Figure 2022068176000028
ＶＩＩ．リンカー
本開示では、ポリペプチド又はタンパク質ドメイン及び／又は会合する非タンパク質部
分間における結合又は接続を説明するために、リンカーを用いる。一部の実施形態では、
リンカーは、少なくとも二つのＦｃドメイン単量体間の結合又は接続であり、第一のＦｃ
ドメイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメインのＣ末端を、第二のＦｃドメイン単量体のヒン
ジドメインのＮ末端に対して、二つのＦｃドメイン単量体が互いに直列に連結するように
接続するものである。他の実施形態では、リンカーは、Ｆｃドメイン単量体と、それに結
合しているその他のタンパク質ドメインとの間の結合である。例えばリンカーは、Ｆｃド
メイン単量体のＣＨ３抗体定常ドメインのＣ末端を、アルブミン結合ペプチドのＮ末端に
結合させることが可能である。別の実施例では、リンカーは、ＣＨ１抗体定常ドメインの
Ｃ末端を、Ｆｃドメイン単量体のヒンジドメインのＮ末端に接続させることが可能である
。さらに他の実施形態では、リンカーは、二つの別個のタンパク質ドメイン（Ｆｃドメイ
ンを含まない）を結合させることが可能であって、例えばＣＬ抗体定常ドメインのＣ末端
を、リンカーを介してＣＨ１抗体定常ドメインのＮ末端に結合させることが可能である。
リンカーは、例えばペプチド結合である単純な共有結合、例えばポリエチレングリコー
ル（ＰＥＧ）ポリマーである合成ポリマー、又は、例えば化学的な連結である化学反応で
形成した任意の種類の結合とすることが可能である。リンカーがペプチド結合である場合
は、一方のタンパク質ドメインのＣ末端におけるカルボン酸基が、縮合反応でもう一方の
タンパク質ドメインのＮ末端におけるアミノ基と反応して、ペプチド結合を形成する。詳
細には、ペプチド結合は、この技術分野で周知の従来の有機化学反応を経る合成手段によ
り、又は、宿主細胞からの自然な産生により形成することが可能であるものであって、例
えば二つのＦｃドメイン単量体である、直列のタンパク質両方のＤＮＡ配列をコードする
ポリヌクレオチド配列を、宿主細胞内の、例えばＤＮＡポリメラーゼ及びリボソームであ
る、必要な分子機構によって両方のタンパク質をコードする隣接し合うポリペプチドへと
直接転写又は翻訳されることが可能である。
リンカーが合成ポリマー、例えばＰＥＧポリマーである場合においては、該ポリマーは
、各端部が反応性の化学官能基で官能化されて、二つのタンパク質の接続端にある末端ア
ミノ酸と反応することが可能である。
リンカー（上記に示したペプチド結合は除く）が化学反応により形成される場合におい
ては、例えばアミン、カルボン酸、エステル、アジド、又はこの技術分野で通常用いられ
る他の官能基である化学官能基は、一方のタンパク質のＣ末端及びもう一方のタンパク質
のＮ末端のそれぞれに対して合成的に結合させることが可能である。この二つの官能基は
その後、合成化学手段を経て反応して化学結合を形成することによって、二つのタンパク
質を一つに接続する。こうした化学的連結手順は、当業者にとってルーチンである。
スペーサー
本開示では、二つのＦｃドメイン単量体間のリンカーは、３～２００アミノ酸（例えば
、３～１５０、３～１００、３～６０、３～５０、３～４０、３～３０、３～２０、３～
１０、３～８、３～５、４～３０、５～３０、６～３０、８～３０、１０～２０、１０～
３０、１２～３０、１４～３０、２０～３０、１５～２５、１５～３０、１８～２２、及
び２０～３０アミノ酸）を含むアミノ酸スペーサーであることが可能である。好適なペプ
チドスペーサーはこの分野において公知であり、例えば、グリシン及びセリン等のフレキ
シブルなアミノ酸残基を含有するペプチドリンカーを含む。或る実施形態では、スペーサ
ーは、例えば
Figure 2022068176000029
である、複数のモチーフ又は繰り返しモチーフであるモチーフを含有することが可能であ
る。或る実施形態では、スペーサーは、例えば
Figure 2022068176000030
である、ＧＳのモチーフを含む２～１２アミノ酸を含有することが可能である。他の或る
実施形態では、スペーサーは、例えば
Figure 2022068176000031
である、ＧＧＳのモチーフを含む３～１２アミノ酸を含有することが可能である。さらに
他の実施形態では、スペーサーは、例えば
Figure 2022068176000032
である、ＧＧＳＧ（配列番号：１２）のモチーフを含む４～１２アミノ酸を含有すること
が可能である。他の実施形態では、スペーサーは、例えば
Figure 2022068176000033
である、ＧＧＧＧＳ（配列番号：１６）のモチーフを含有することが可能である。他の実
施形態では、スペーサーはまた、グリシン及びセリン以外のアミノ酸を含有することも可
能であり、例えば
Figure 2022068176000034
である。本開示における或る実施形態では、１２アミノ酸のペプチドスペーサー又は２０
アミノ酸のペプチドスペーサーを用いて、二つのＦｃドメイン単量体、それぞれ配列
Figure 2022068176000035
からなる１２アミノ酸ペプチドスペーサー及び２０アミノ酸のペプチドスペーサーが直列
に接続される（図４～６）。他の実施形態では、配列
Figure 2022068176000036
からなる１８アミノ酸のペプチドスペーサーを用いて、ＣＬ 及びＣＨ１の抗体定常ドメ
インが接続される（図７Ａ～７Ｂ）。或る実施形態では、スペーサーは、例えば
Figure 2022068176000037
である、ＧＧＧＧ（配列番号：５１）のモチーフを含有することが可能である。或る実施
形態では、スペーサーは、
Figure 2022068176000038
である。
ＶＩＩＩ． 血清タンパク質結合ペプチド
血清タンパク質をペプチドに結合することで、タンパク質薬剤の薬物動態を向上させる
ことが可能であり、特に、ここに記載するＦｃコンストラクトは、血清タンパク質結合ペ
プチドと融合し得る。
一例として、ここに記載の方法及び組成物に用いることが可能であるアルブミン結合ペ
プチドは、概して、この技術分野において公知である。一実施形態では、アルブミン結合
ペプチドは、配列
Figure 2022068176000039
を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列からなる。一実施形態では、アルブミン結
合ペプチドは、最大１０個（例えば、最大９、８、７、６、５、４、３、２、又は１個）
の単一アミノ酸修飾（例えば置換、例えば保存的置換）をもつ、配列
Figure 2022068176000040
を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列からなる。
本開示では、アルブミン結合ペプチドは、Ｆｃコンストラクト内の特定のポリペプチド
のＮ末端又はＣ末端に結合し得る。一実施形態では、アルブミン結合ペプチドは、コンス
トラクト１、２、３、又は７Ａ（それぞれ図１、２、３、及び７Ａ）内の一つ又は複数の
ポリペプチドのＣ末端に結合し得る。別の実施形態では、アルブミン結合ペプチドは、コ
ンストラクト４、５、及び６（それぞれ図４、５、及び６）内の直列に接続した二つのＦ
ｃドメイン単量体をコードするポリペプチドのＣ末端に融合することが可能である。さら
に別の実施形態では、アルブミン結合ペプチドは、コンストラクト４及び６（それぞれ図
４及び６）内に示す直列に接続した二つのＦｃドメイン単量体をコードするポリペプチド
内の第二のＦｃドメイン単量体に連結したＦｃドメイン単量体Ｃ末端に結合することが可
能である。アルブミン結合ペプチドは、Ｆｃコンストラクトと遺伝子的に融合すること、
又は、例えば化学的連結である化学的手段を介してＦｃコンストラクトに結合することが
可能である。所望であれば、Ｆｃコンストラクトとアルブミン結合ペプチドとの間にスペ
ーサーを挿入することが可能である。理論に拘束されることなく、開示のＦｃコンストラ
クト内にアルブミン結合ペプチドを包含することが、血清アルブミンに対するその結合を
介して治療用タンパク質の長い保持をもたらし得るということが予測される。
ＩＸ．Ｆｃコンストラクト
概して、この開示は、２～１０個のＦｃドメイン（例えば、２、３、４、５、６、７、
８、９、又は１０個のＦｃドメイン；２～８個のＦｃドメイン、２～６個のＦｃドメイン
、２～４個のＦｃドメイン、２～３個のＦｃドメイン、５～１０個のＦｃドメイン、５～
８個のＦｃドメイン、又は５～６個のＦｃドメイン）を有するＦｃコンストラクトを特徴
とする。これらは、例えばＦｃγＲＩＩＩａであるＦｃ受容体に対する単一の野生型Ｆｃ
ドメインよりも大きい結合親和性及び／又はアビディティーを有し得る。この開示は、Ｆ
ｃドメインの二つのＦｃドメイン単量体が互いと二量体を選択的に形成して、それによっ
て望まない多量体又は凝集の形成を回避するように、相互作用する二つのＣＨ３抗体定常
ドメインの界面においてアミノ酸を操作する方法を開示する。Ｆｃコンストラクトは、偶
数のＦｃドメイン単量体を含み、Ｆｃドメイン単量体の各対がＦｃドメインを形成する。
Ｆｃコンストラクトは、二つのＦｃドメイン単量体の二量体から形成される一つの機能的
なＦｃドメインを、最低でも含む。
一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、二つのＦｃドメイン単量体の二量体を含
む一つのＦｃドメインを含有する（図１～３及び７Ａ）。相互作用するＣＨ３抗体定常ド
メインは、修飾されていないものであり得るか（図１）、又は、それらの界面にアミノ酸
置換を含有し得る。詳細には、アミノ酸置換は、操作された空洞（図２）、操作された突
起（図２）、又は電荷をもつアミノ酸（図３）とすることが可能である。
他の実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、三つのポリペプチドで形成された二つのＦ
ｃドメイン（図４及び６）を含有する。第一のポリペプチドは、リンカーを介した連結で
直列に連結した二つのＦｃドメイン単量体を含有し、第二及び第三のポリペプチドは、一
つのＦｃドメイン単量体を含有する。第二及び第三のポリペプチドは、同一のポリペプチ
ドであってもよく、又は、異なるポリペプチドであってもよい。図４は、こうしたＦｃコ
ンストラクトの例を図示している。第一のポリペプチドは、リンカーを介して直列に連結
した二つの野生型Ｆｃドメイン単量体を含有し、第二及び第三のポリペプチドは、一つの
野生型Ｆｃドメイン単量体をそれぞれ含有する。第一のポリペプチド内の一方のＦｃドメ
イン単量体が、第二のポリペプチドと共に第一のＦｃドメインを形成し、一方、第一のポ
リペプチド内のもう一方のＦｃドメイン単量体が、第三のポリペプチドと共に第二のＦｃ
ドメインを形成する。この第二のポリペプチドと第三のポリペプチドとは、互いに結合又
は連結していない。図６は、図４のものと同様のＦｃコンストラクトを図示している。図
６においては、第一のポリペプチド内のＦｃドメイン単量体は両方とも、ＣＨ３抗体定常
ドメイン内に、操作された突起を含有し、一方、第二及び第三のポリペプチドは、ＣＨ３
抗体定常ドメイン内に、操作された空洞を含有する。空洞に突起が挿入された操作された
ＣＨ３－ＣＨ３界面は、Ｆｃドメイン単量体のヘテロ二量体の形成を支持し、望まない多
量体の制御されていない形成を回避する。本明細書において実施例４でさらに説明するよ
うに、操作されたＣＨ３抗体定常ドメインを含む二量体形成選択性モジュールが、二量体
形成選択性モジュールを有さないＦｃドメイン単量体からのＦｃコンストラクト形成を説
明する実施例３に示すような望まない多量体の形成を防止する。
さらに、他の実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、四つのポリペプチドで形成される
三つのＦｃドメインを含有することが可能である（図５）。第一及び第二のポリペプチド
は、同一又は異なるものとすることが可能であり、第三及び第四のポリペプチドについて
もそうすることが可能である。この実施例では、第一及び第二のポリペプチドは両方とも
、リンカーを介して直列に連結された二つのＦｃドメイン単量体をコードするものであっ
て、一方のＦｃドメイン単量体は、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、電荷をもつアミノ酸置
換を含有し、一方、他方のＦｃドメイン単量体は、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に突起を含
有する。第三及び第四のポリペプチドは両方とも、空洞をもつＦｃドメイン単量体をコー
ドする。第一及び第二のポリペプチドは、それらのＣＨ３抗体定常ドメイン内の逆電荷の
相互作用を介して、互いと共に第一のＦｃドメインを形成する。第二及び第三のＦｃドメ
インは、第一及び第二のポリペプチド内の突起と、第三及び第四のポリペプチド内の空洞
との間の、空洞に突起が挿入される相互作用から形成される。このＦｃコンストラクト内
の各Ｆｃドメイン単量体は、特定のＦｃドメインの形成を促進する二量体形成選択性モジ
ュールを含有する。
さらに他の実施形態では、ＣＨ３抗体定常ドメイン間の相互作用を介するのではなく、
ＣＬ定常ドメインとＣＨ１定常ドメインとの間の相互作用を介して、単一のポリペプチド
が、二量体（例えば、コンストラクト７Ａ、図７Ａ）又は多量体（例えば、コンストラク
ト７Ｂ、図７Ｂ）を形成することが可能である。図７Ｂは、一つのＦｃドメインのＣＬド
メインが隣接するＦｃドメインのＣＨ１ドメインと相互作用するような、複数のＦｃドメ
インを含有するＦｃコンストラクトを図示するものである。
さらに他の実施形態では、Ｆｃコンストラクトは、六つのポリペプチドで形成される五
つのＦｃドメインを含有することが可能である。二つの例を図８及び９に図示している。
これらの図示されたＦｃコンストラクトは、六つのポリペプチドで構成されるが、該ポリ
ペプチドのうち四つが同一の核酸によってコードされることが可能であり、残りの二つの
ポリペプチドもまた、同一の核酸によってコードされることが可能である。結果としてこ
れらＦｃコンストラクトは、好適な宿主細胞内の二つの核酸の発現によって産生可能であ
る。
別の実施形態では、二つ以上のＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクトは、同一の
一次配列を有する二つのポリペプチドで形成可能である。こうしたコンストラクトは、宿
主細胞内で、単一のポリペプチド配列の発現により形成することが可能である。図１０に
一例を図示している。この例では、三つのＦｃドメインを含有するＦｃコンストラクトを
コードするのに、単一の核酸で十分である。同一ポリペプチドの部分である二つのＦｃド
メイン単量体は、十分な長さ及び柔軟性のフレキシブルなリンカーを含むことによってＦ
ｃドメインを形成することが可能になるものであり、このリンカーは、切断可能なリンカ
ーであってもよい。この同一のポリペプチドはまた、任意のフレキシブルなリンカーを介
して連結される第三のＦｃドメイン単量体も含有する。この第三のＦｃドメイン単量体は
、他のＦｃドメイン単量体に連結して図１０に図示するＹ形状Ｆｃコンストラクトを産生
することが可能である。Ｆｃドメインの形成は、図１０にも図示するように、二量体形成
選択性モジュールを使用することで制御することが可能である。一部の場合では、三つの
Ｆｃドメインを含有するＦｃコンストラクトは、例えば図５に示すように、二つのポリペ
プチドから形成可能である。こうしたコンストラクトは、宿主細胞内で、二つのポリペプ
チド配列の発現から形成することが可能である。
一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクト内の一つ又は複数のＦｃポリペプチドが、末
端リシン残基を含有する。一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクト内の一つ又は複数の
Ｆｃポリペプチドが、末端リシン残基を含有していない。一部の実施形態では、Ｆｃコン
ストラクト内のＦｃポリペプチドの全てが、末端リシン残基を含有する。一部の実施形態
では、Ｆｃコンストラクト内のＦｃポリペプチドの全てが、末端リシン残基を含有してい
ない。一例では、Ｆｃポリペプチド内の末端リシン残基は、配列番号：３０、３２、３４
、３６、３８、４０、４２、４４、４５、及び４６（実施例１を参照）のうちのいずれか
一つの配列を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列からなるものであって、除去さ
れて、末端リシン残基を含有しない対応するＦｃポリペプチドを生成することができる。
他の例では、末端リシン残基は、配列番号：４８又は５０（実施例１を参照）の配列を含
む、該配列からなる、又は実質的に該配列からなるＦｃポリペプチドに結合して、末端リ
シン残基を含有する対応するＦｃポリペプチドを生成することができる。別の実施形態で
は、末端リシン残基は、配列番号：４８又は５０（実施例１を参照）の配列を含む、該配
列からなる、又は実質的に該配列からなるＦｃポリペプチドに結合して、最大１０個（例
えば最大９、８、７、６、５、４、３、２、又は１個）の単一アミノ酸修飾（例えば置換
、例えば保存的置換）をもつ末端リシン残基を含有する対応するＦｃポリペプチドを生成
することができる。
Ｘ．宿主細胞及びタンパク質の産生
本開示では、宿主細胞は、本明細書に記載のポリペプチド又はコンストラクトを、それ
らの対応する核酸から発現するのに必要であるような、例えばオルガネラである、必要な
細胞成分を含む媒体を指す。核酸は、この技術分野で公知の従来の技術（形質転換、トラ
ンスフェクション、電気穿孔、リン酸カルシウム沈殿、直接の微量注入等）によって宿主
細胞内に導入されることが可能である核酸ベクター中に含まれ得る。宿主細胞は、哺乳動
物起源又は細菌起源のいずれかのものとすることが可能である。哺乳動物宿主細胞には、
ＣＨＯ（又はＣＨＯ誘導細胞株、例えばＣＨＯ－Ｋ１、ＣＨＯ－ＤＸＢ１１ ＣＨＯ－Ｄ
Ｇ４４）、マウス宿主細胞（例えば、ＮＳ０、Ｓｐ２／０）、ＶＥＲＹ、ＨＥＫ（例えば
、ＨＥＫ２９３）、ＢＨＫ、ＨｅＬａ、ＣＯＳ、ＭＤＣＫ、２９３、３Ｔ３、Ｗ１３８、
ＢＴ４８３、Ｈｓ５７８Ｔ、ＨＴＢ２、ＢＴ２０、及びＴ４７Ｄ、ＣＲＬ７Ｏ３Ｏ、なら
びにＨｓＳ７８Ｂｓｔの細胞が含まれるが、これらに限定されない。また、タンパク質コ
ンストラクトの発現を調節する、又は所望の特定の手法でタンパク質産物を修飾及びプロ
セシングする、宿主細胞を選択することが可能である。様々な宿主細胞が、タンパク質産
物の翻訳後プロセシング及び修飾に関する特性及び特異的な機序を有する。適切な細胞株
又は宿主系を選択して、発現されたタンパク質の正確な修飾及びプロセシングを確実にす
ることが可能である。
タンパク質産物の、それらの対応するＤＮＡプラスミドコンストラクトからの発現及び
分泌のために、プロモーター、エンハンサー、配列、転写ターミネーター、ポリアデニル
化部位、及び選択可能な標識を含む、この技術分野で公知である適切な発現制御要素によ
って制御されるＤＮＡで、宿主細胞がトランスフェクト又は形質転換され得る。治療用タ
ンパク質の発現方法は、この技術分野で公知である。例えば、Ｐａｕｌｉｎａ Ｂａｌｂ
ａｓ，Ａｒｇｅｌｉａ Ｌｏｒｅｎｃｅ（ｅｄｓ．）Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｇｅｎｅ
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ：Ｒｅｖｉｅｗｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ），Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；２ｎｄ
ｅｄ．２００４ ｅｄｉｔｉｏｎ （Ｊｕｌｙ ２０，２００４）；Ｖｌａｄｉｍｉｒ
Ｖｏｙｎｏｖ ａｎｄ Ｊｕｓｔｉｎ Ａ．Ｃａｒａｖｅｌｌａ（ｅｄｓ．）Ｔｈｅｒ
ａｐｅｕｔｉｃ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ
；２ｎｄ ｅｄ．２０１２ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｊｕｎｅ ２８，２０１２）を参照された
い。
ＸＩ．精製
Ｆｃコンストラクトは、タンパク質精製分野で公知である任意の方法、例えばクロマト
グラフィー（例えば、イオン交換、アフィニティー（例えばプロテインＡアフィニティー
）、及びサイズ排除カラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差、又はタンパク質
の精製に関するその他の標準技術によって、精製することが可能である。例えば、Ｆｃコ
ンストラクトは、プロテインＡカラム等のアフィニティーカラムを、適切に選択すること
と、クロマトグラフィーカラム、ろ過、限外ろ過、塩析及び透析手順とを組み合わせるこ
ととによって、単離及び精製することが可能である（例えば、Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｓｃａｌ
ｅ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｕｗｅ Ｇｏｔｔｓｃｈ
ａｌｋ（ｅｄ．）Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，２００９；ａｎｄ
Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ（ｅｄ．） Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ－Ｖｏｌｕｍｅ Ｉ－Ｐｒｏ
ｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｋｌｕｗｅｒ Ａｃａｄｅｍｉｃ
／Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（２００４）を参照）。一部
の例では、Ｆｃコンストラクトは、ペプチド等の標識配列に結合して、精製を容易にする
ことが可能である。標識アミノ酸配列の例は、ヘキサヒスチジンペプチドであり、それは
マイクロモル親和性をもつニッケル官能性アガロースアフィニティーカラムと結合する。
精製に有用な他のペプチドタグには、限定するものではないが、赤血球凝集素「ＨＡ」タ
グが含まれ、それはインフルエンザ赤血球凝集素タンパク質由来のエピトープに対応する
ものである（Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８４，Ｃｅｌｌ ３７：７６７）。
Ｆｃコンストラクトに関しては、精製方法としてプロテインＡカラムクロマトグラフィ
ーを採用することができる。プロテインＡリガンドは、Ｆｃ領域を介してＦｃコンストラ
クトと相互作用するものであって、プロテインＡクロマトグラフィーは、大半の宿主細胞
タンパク質を除去することができる高度な選択的捕捉方法となっている。本開示では、実
施例２に記載するようにプロテインＡカラムクロマトグラフィーを用いて、Ｆｃコンスト
ラクトを精製できる。
ＸＩＩ．医薬組成物／製剤
この開示は、本明細書に記載する一つ又は複数のＦｃコンストラクトを含む医薬組成物
を特徴とする。一実施形態では、医薬組成物は、構造が同一又は実質的に同一であるＦｃ
コンストラクトの実質的に均質な集団を含む。種々の実施例では、医薬組成物は、コンス
トラクト１～１０及び５＊のいずれか一つの実質的に均質な集団を含む。
例えばＦｃコンストラクトである本開示の治療用タンパク質コンストラクトを、医薬組
成物内に組み込むことが可能である。治療用タンパク質を含む医薬組成物は、当業者に公
知である方法によって調製することが可能である。医薬組成物は、水又は他の薬剤的に許
容できる液体の滅菌溶液又は懸濁液を含む注射製剤で非経口投与することが可能である。
例えば医薬組成物は、注射用蒸留水（ＷＦＩ）、生理食塩水、乳化剤、懸濁剤、サーファ
クタント、安定剤、希釈剤、結合剤、賦形剤等の薬剤的に許容できる媒体又は溶媒とＦｃ
コンストラクトとを好適に組み合わせて、次いで通常許容される薬務で求められる単位用
量形態で混合することによって、調製することが可能である。医薬製剤に含まれる活性成
分の量は、指定される範囲内で好適な用量が与えられるようなものとする。
注射用の滅菌組成物は、従来の薬務に従って、媒体として注射用蒸留水を用いて調製す
ることが可能である。例えば、グルコースと、Ｄ－ソルビトール、Ｄ－マンノース、Ｄ－
マンニトール、塩化ナトリウム等の他の添加とを含有する生理食塩水又は等張液を、任意
に、好適な可溶化剤、例えばこの技術分野で通常知られる、エタノール等のアルコール及
びプロピレングリコール又はポリエチレングリコール等のポリアルコール、及びポリソル
ベート８０ＴＭ（商標）、ＨＣＯ－５０等の非イオン性界面活性剤と組み合わせて、注射
用水溶液として用いることができる。治療用タンパク質産物の調製方法は、この技術分野
で公知であり、例えば、Ｂａｎｇａ（ｅｄ．）Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｅｐｔｉｄｅ
ｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｂａｎｇａ（ｅｄ．）［４］Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ， Ｐｒｏｃｅ
ｓｓｉｎｇ ａｎｄ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ（２ｄ ｅｄ．）Ｔａｙｌｏｒ
＆Ｆｒａｎｃｉｓ Ｇｒｏｕｐ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２００６）を参照されたい。
ＸＩＩＩ．用量
医薬組成物は、投与形態と適合性のある手法で、治療効果があるような量で投与されて
、症状の改善又は治療をもたらす。医薬組成物は、例えば静脈内投与形態、皮下投与形態
、接種可能な溶液、薬剤放出カプセル等の経口投与形態である、種々の投与形態で投与さ
れる。個々の対象に適切な用量は、治療目的、投与経路、及び患者の状態に依存する。概
して、組換えタンパク質は、１～２００ｍｇ／ｋｇ、例えば１～１００ｍｇ／ｋｇ、例え
ば２０～１００ｍｇ／ｋｇで投与される。したがって、最適な治療効果を得るために求め
られるとおりに、医療提供者が、用量を誂えて、力価決定し、投与経路を調整することが
必要となる。
ＸＩＶ．適応症
この開示の医薬組成物及び方法は、対象における炎症を軽減し、対象における自己抗体
のクリアランスを促進し、対象における抗原提示を抑制し、免疫応答を軽減し（例えば、
対象における免疫複合体に基づく免疫応答の活性化を防止する）、ならびに対象における
免疫の状態又は疾患及び炎症性の状態又は疾患を治療するのに有用である。例示的な状態
及び疾患には、関節リウマチ（ＲＡ）；全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）；ＡＮＣＡ関
連血管炎；抗リン脂質抗体症候群；自己免疫性溶血性貧血；慢性炎症性脱髄性ニューロパ
シー；移植における抗アロ（ａｎｔｉ－ａｌｌｏ）、ＧＶＨＤにおける抗自己（ａｎｔｉ
－ｓｅｌｆ）、抗置換、ＩｇＧ治療、ＩｇＧパラプロテインのクリアランス；皮膚筋炎；
グッドパスチャー症候群；抗体依存性細胞媒介性細胞障害により媒介される器官系を標的
とするＩＩ型過敏症症候群、例えばギラン・バレー症候群、ＣＩＤＰ、皮膚筋炎、フェル
ティ症候群、抗体媒介性拒絶反応、自己免疫性甲状腺疾患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性肝
疾患；突発性血小板減少性紫斑病；重症筋無力症、視神経脊髄炎；天疱瘡及び他の自己免
疫性水疱性疾患；シェーグレン症候群；抗体依存性ファゴサイトーシスにより媒介される
自己免疫性血球減少症及び他の障害；例えば滑膜炎、皮膚筋炎、全身性血管炎、糸球体炎
、及び血管炎である他のＦｃＲ依存性炎症症候群を含む。
実施例１－ＤＮＡプラスミドコンストラクトの設計及びクローニング
合計八つのＤＮＡプラスミドコンストラクトを用いて、八つのＦｃコンストラクトを構
築した（図１～７Ｂ）。ＤＮＡプラスミドコンストラクトを、タンパク質産生のために、
ヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ）２９３細胞にトランスフェクトした。八つのコードされた分
泌ポリペプチドは、以下に記載するような基本構造を有するものであった。
Ａ．ｗｔ Ｆｃ：野生型Ｆｃドメイン単量体（図１：１０２及び１０４、図４：４０８
及び４１０）。
Ｂ．突起Ｆｃ：ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、操作された突起をもつＦｃドメイン単量
体（図２：２０２）。
Ｃ．空洞Ｆｃ：ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、操作された空洞をもつＦｃドメイン単量
体（図２：２０４、図５：５１４及び５１６）。
Ｃ＊．空洞Ｆｃ＊：ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、操作された空洞をもつＦｃドメイン
単量体（図２：２０４、図５：５１４及び５１６）。空洞Ｆｃ＊はまた、空洞Ｆｃと比べ
て追加のアミノ酸置換を含有する。
Ｄ．電荷Ｆｃ：ＣＨ３抗体定常ドメイン内に反転した電荷をもつＦｃドメイン単量体（
図３：３０２及び３０４）。
Ｅ．ｗｔ－１２－ｗｔ Ｆｃ２：二つのＦｃドメイン単量体を、１２－アミノ酸ＧＧＧ
Ｓペプチドリンカーを介して直列に連結したもの（図４：４０２）。
Ｆ．突起－２０－電荷Ｆｃ２：ＣＨ３抗体定常ドメイン内に反転した電荷をもつＦｃド
メイン単量体と、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に操作された突起をもつＦｃドメイン単量体
とを、２０－アミノ酸ＳＧＧＧペプチドリンカーを介して直列に連結したもの（図５：５
０２及び５０８）。
Ｆ＊．突起－２０－電荷Ｆｃ２＊：ＣＨ３抗体定常ドメイン内に反転した電荷をもつＦ
ｃドメイン単量体と、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に操作された突起をもつＦｃドメイン単
量体とを、２０－アミノ酸ＳＧＧＧペプチドリンカーを介して直列に連結したもの（図５
：５０２及び５０８）。突起－２０－電荷Ｆｃ２＊はまた、突起Ｆｃと比べて追加のアミ
ノ酸置換を含有する。
Ｇ．突起－２０－突起Ｆｃ２：ＣＨ３抗体定常ドメイン内に操作された突起を両方がも
つ二つのＦｃドメイン単量体を、２０－アミノ酸ＧＧＧＳペプチドリンカーを介して直列
に連結したもの（図６：６０２）。
Ｈ．ＣＨＣＬ Ｆｃ＋：ＣＨ１及びＣＬ定常ドメインをもつＦｃドメイン単量体をヒン
ジドメインに結合させたもの（図７Ａ：７０２及び７０４、図７Ｂ：７０６、７０８、７
１０、７１２、７１４、及び７１６）。ＣＬ定常ドメインは、１８アミノ酸ＧＧＧＳペプ
チドリンカーを介してＣＨ１定常ドメインに結合している。
Ｆｃ ＤＮＡ配列は、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃに由来するものとした。突起、空洞、及び電
荷の変異は、親Ｆｃ配列内で置換した。ヒト免疫グロブリンのカッパ軽鎖由来のリーダー
ペプチドをコードするＤＮＡは、５’領域に結合させた。ポリペプチドのうちの一つ（Ｃ
ＨＣＬ Ｆｃ＋）を除いて全てが、アミノ末端上にこのコードされたペプチドを含有し、
アセンブリ及び分泌のために小胞体へのタンパク質移行が行われた。種々のリーダーペプ
チドのうちのいずれか一つを、本開示に関して用いることができるということが理解され
るであろう。該リーダーペプチドは通常、小胞体内腔（ＥＲ ｌｕｍｅｎ）内で切除され
る。５’末端ＥｃｏＲ１部位を含有する１１ヌクレオチド配列を、ＡＴＧ開始コドンの上
流に追加した。３’末端Ｘｈｏ１部位を含有する３０ヌクレオチド配列を、３’末端ＴＧ
Ａ翻訳終止コドンの下流に追加した。ＤＮＡ配列は、哺乳動物細胞での発現のために最適
化され、ｐｃＤＮＡ３．４哺乳動物発現ベクターにクローン化された。
変異は、ＥＵ Ｋａｂａｔナンバリングシステム（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑ
ｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅ
ｒｅｓｔ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅ
ｓｄａ，Ｍｄ．，ｅｄ．５，１９９１）を用いた位置に従う野生型アミノ酸残基と、その
後の一文字コードでの置換残基とによって表される。
上に記載した分泌ポリペプチドＡ～Ｈのヌクレオチド及びアミノ酸配列を、以下に示す
（空洞Ｆｃ＊及び突起－２０－電荷Ｆｃ２＊は除く。それらについてはアミノ酸配列のみ
を示す）。
Figure 2022068176000041
Figure 2022068176000042
Figure 2022068176000043
Figure 2022068176000044
Figure 2022068176000045
Figure 2022068176000046
Figure 2022068176000047
Figure 2022068176000048
Figure 2022068176000049
Figure 2022068176000050
一部の実施形態では、本明細書に記載のＦｃコンストラクト内のＦｃポリペプチドは、
最大１０個（例えば、最大９、８、７、６、５、４、３、２、又は１個）の単一アミノ酸
修飾（例えば置換、例えば保存的置換）をもつ、本明細書に記載の配列のいずれかを含む
、該配列のいずれかからなる、又は実質的に該配列のいずれかからなる。
一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクト内の一つ又は複数のＦｃポリペプチドが、末
端リシン残基を含有する。一部の実施形態では、Ｆｃコンストラクト内の一つ又は複数の
Ｆｃポリペプチドが、末端リシン残基を含有していない。一部の実施形態では、Ｆｃコン
ストラクト内のＦｃポリペプチドの全てが、末端リシン残基を含有する。一部の実施形態
では、Ｆｃコンストラクト内のＦｃポリペプチドの全てが、末端リシン残基を含有してい
ない。一実施形態では、配列番号：３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、
４５、及び４６のうちのいずれか一つの配列を含む、該配列からなる、又は実質的に該配
列からなるＦｃポリペプチド内の末端リシン残基を、除去して、末端リシン残基を含有し
ない対応するＦｃポリペプチドを生成することができる。別の実施例では、末端リシン残
基は、配列番号：４８又は５０の配列を含む、該配列からなる、又は実質的に該配列から
なるＦｃポリペプチドに結合して、末端リシン残基を含有する対応するＦｃポリペプチド
を生成することができる。
実施例２－Ｆｃコンストラクトタンパク質の発現
Ｆｃコンストラクトのタンパク質の発現に関して、実施例１で記載したＡ～Ｈから選択
されるＤＮＡプラスミドコンストラクトのうちの二つを、ＥＸＰＩ２９３細胞（Ｌｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）にトランスフェクトした。リポソームトランスフェクショ
ンを用いて、プラスミドＤＮＡをＥＸＰＩ２９３細胞に導入した。トランスフェクトされ
たプラスミドコンストラクトの総量は固定であるが、一方で、異なるプラスミドコンスト
ラクトの比は、所望のコンストラクトの収量が最大となるように変更した（以下の表１１
を参照）。Ｆｃコンストラクト毎に、トランスフェクトされた二つのＤＮＡプラスミドコ
ンストラクトの比（質量比）を表１１に示している。コンストラクトの図は図１～７Ｂに
示している。
タンパク質の発現後、発現したコンストラクトを、プロテインＡ系のアフィニティーカ
ラムクロマトグラフィーによって細胞培養上清から精製した。培地上清を、ＡＫＴＡ Ａ
ｖａｎｔ分取クロマトグラフィーシステム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓ
ｃｉｅｎｃｅｓ社）を用いて、Ｐｏｒｏｓ ＭａｂＣａｐｔｕｒｅ Ａ（ＬｉｆｅＴｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）カラムにロードした。捕捉したＦｃコンストラクトは、その後リ
ン酸緩衝食塩水で（低塩洗浄）、次いで５００ｍＭのＮａＣｌを補ったリン酸緩衝食塩水
で（高塩洗浄）、洗浄した。Ｆｃコンストラクトは、１００ｍＭのグリシン、１５０ｍＭ
のＮａＣｌ、ｐＨ３の緩衝液で溶離する。カラムから取り出したタンパク質溶液は、１Ｍ
のＴＲＩＳ ｐＨ７．４を添加することによって最終濃度１００ｍＭに中和する。Ｆｃコ
ンストラクトは、Ｐｏｒｏｓ（登録商標） ＸＳ樹脂（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｃｉｅ
ｎｃｅｓ社、カタログ＃ ４４０４３３６）を用いて、イオン交換クロマトグラフィーに
よってさらに分取した。該カラムは、１０ｍＭのＭＥＳ、ｐＨ６（緩衝液Ａ）で予め平衡
化し、１０ｍＭのＭＥＳ、５００ｍＭの塩化ナトリウム、ｐＨ６（緩衝液Ｂ）を用いた勾
配により、サンプルを溶離した。
合計七つのＦｃコンストラクトを得た（以下の表１１及び図１～７Ｂ参照）。精製した
Ｆｃコンストラクトを、還元条件下及び非還元条件下の両方でのＳＤＳ－ＰＡＧＥ（ドデ
シル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動）、それに続くクーマシーブルー染
色によって分析し、予想されるサイズのタンパク質のバンドの存在を確認した。
（表１１）
Figure 2022068176000051
実施例３－コンストラクト４の調製及びＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析
二つのＤＮＡプラスミドコンストラクト、ｗｔ－１２－ｗｔ Ｆｃ２（実施例１のＤＮ
ＡプラスミドコンストラクトＥ）とｗｔ Ｆｃ（実施例１のＤＮＡプラスミドコンストラ
クトＡ）とを用いて、コンストラクト４を発現させた（図４）。二つのプラスミドコンス
トラクトを、タンパク質の発現及び実施例２に示した精製のために、ＨＥＫ ２９３細胞
にトランスフェクトした。図１１Ａ～Ｂは、コンストラクト４の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及
び非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥを示している。還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（図１１Ａ）では、ｗｔ
Ｆｃドメイン単量体に相当する、およそ２５ｋＤａにおけるバンド（レーン２及び３、
図１１Ａ）と、ｗｔ－１２－ｗｔ Ｆｃ２の直列二量体に相当する、５０ｋＤａにおける
バンド（レーン１～３、図１１Ａ）とを観察した。非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（図１１Ｂ）
では、レーン２及び３は、それぞれ高タンパク質量（１／２）及び低タンパク質量（１／
３）で、コンストラクト４の最終タンパク質産物をそれぞれ含有している。コンストラク
ト４を形成するｗｔ－１２－ｗｔ Ｆｃ２直列二量体と二つのｗｔ Ｆｃドメイン単量体
との会合体に相当する、およそ１００ｋＤａにおける一つの主要なバンド、ならびにｗｔ
Ｆｃドメイン単量体と連結していない遊離のｗｔ－１２－ｗｔ Ｆｃ２直列二量体に相
当する、およそ５０ｋＤａにおける概ね同等のシグナル強度のもう一つの主要なバンドが
観察された。
さらに、ｗｔ－１２－ｗｔ Ｆｃ２とｗｔ Ｆｃドメイン単量体との多量体に相当する
、およそ１５０ｋＤａ、２００ｋＤａ、及び２５０ｋＤａにおける高分子量のバンド（レ
ーン２及び３、図１１Ｂ）も観察された。
実施例４－コンストラクト６の調製及びＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析
二つのプラスミドコンストラクト、突起－２０－突起Ｆｃ２（実施例１のＤＮＡプラス
ミドコンストラクトＧ）と、空洞Ｆｃ（実施例１のＤＮＡプラスミドコンストラクトＣ）
とを用いて、コンストラクト６を発現させた（図６）。二つのプラスミドコンストラクト
を、タンパク質の発現及び実施例２に示した精製のために、ＨＥＫ ２９３細胞にトラン
スフェクトした。図１２Ａ～１２Ｂは、コンストラクト６の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及び非
還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥを示している。還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（図１２Ａ）では、空洞Ｆｃ
ドメイン単量体に相当する、およそ２５ｋＤａにおけるバンド（レーン２及び３、図１２
Ａ）と、突起－２０－突起Ｆｃ２の直列二量体に相当する、５０ｋＤａにおけるバンド（
レーン１～３、図１２Ａ）とを観察した。非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（図１２Ｂ）では、レ
ーン２及び３は、高タンパク質量（１／２）及び低タンパク質量（１／３）で、コンスト
ラクト６の最終タンパク質産物をそれぞれ含有している。突起－２０－突起Ｆｃ２直列二
量体と二つの空洞Ｆｃドメイン単量体との会合体に相当する、およそ１００ｋＤａにおけ
る一つの主要なバンド、ならびにいずれの空洞Ｆｃドメイン単量体とも結合していない遊
離の突起－２０－突起Ｆｃ２直列二量体に相当する、およそ５０ｋＤａにおける弱いシグ
ナル強度の小さいバンドが観察された。
同様の実験を、コンストラクト５で行った（図１３）。二つのプラスミドコンストラク
ト、突起－２０－電荷Ｆｃ２（実施例１のＤＮＡプラスミドコンストラクトＦ）と、空洞
Ｆｃ（実施例１のＤＮＡプラスミドコンストラクトＣ）とを用いて、コンストラクト５を
発現させた（図５）。二つのプラスミドコンストラクトを、陽イオン性脂質トランスフェ
クションによって、経験的に決定された比でＥＸＰＩ２９３細胞にトランスフェクトした
。トランスフェクトされた培養物を、細胞培地中で６～８日間インキュベートする。この
期間の後、細胞を遠心分離で取り出した。上清（培地、図１３のレーン１）には、トラン
スフェクトされた細胞が培地に分泌したコンストラクト５が含有される。培地には、混入
した宿主細胞タンパク質も存在している。コンストラクト５は、プロテインＡアフィニテ
ィークロマトグラフィーで培地から精製した。この時点で、培地には、三つのＦｃドメイ
ン（三量体）を有する所望のコンストラクト５のみならず、二つのＦｃドメイン（二量体
、約１０～１５％）と一つのＦｃドメイン（単量体、５～１０％）とを有する構築されな
かったタンパク質の一部を含有した。未だ存在する混入した宿主細胞タンパク質も、少量
存在していた。プロテインＡカラムの溶離液を、緩衝液交換し、濃縮し、Ｓｔｒｏｎｇ
Ｃａｔｉｏｎ Ｅｘｃｈａｎｇｅ（ＳＣＸ）クロマトグラフィーで分取した。簡潔にいう
と、コンストラクト５は、ＳＣＸカラムと結合し、その後塩及びｐＨ勾配により溶離され
た。このステップにより、二つ又は一つのＦｃドメインを有する構築されなかったタンパ
ク質の大半、望まない翻訳後修飾を有するコンストラクト５、及び、混入した宿主細胞タ
ンパク質からの、三つのＦｃドメインを有する所望のコンストラクト５の分離が可能にな
った。濃縮及び緩衝液交換を再度行った後、コンストラクト５の純粋な最終タンパク質産
物が得られた（図１３の純粋欄、レーン２）。
図１３には、コンストラクト５を発現するように操作された培養宿主細胞から得られた
培地のＳＤＳ－ＰＡＧＥ（レーン１）と、純粋なコンストラクト５のＳＤＳ－ＰＡＧＥ（
レーン２）とを図示している。サンプル毎のＳＤＳ－ＰＡＧＥの主要バンドの百分率を示
す表もまた示している。培地サンプル（レーン１）においては、三つのＦｃドメインを有
するコンストラクト５の最終タンパク質産物に相当する、およそ１５０ｋＤａの主要バン
ドが観察された。培地サンプルはまた、二つのＦｃドメインを有するタンパク質に相当す
る１００ｋＤａにおける弱いシグナル強度の小さいバンドと、一つのＦｃドメインを有す
るタンパク質に相当する５０ｋＤａにおける最も弱いシグナル強度の第二の小さいバンド
とを含有した。精製後（レーン２）は、三つのＦｃドメインを有するコンストラクト５の
最終タンパク質産物に相当する、およそ１５０ｋＤａの主要バンドが増強されていた。コ
ンストラクト５のＳＤＳ－ＰＡＧＥでのタンパク質バンドのシグナル強度を定量化するこ
とにより、培地中では、タンパク質精製前、全タンパク質のうちの約７９％がコンストラ
クト５の所望のタンパク質産物であったことが示された。タンパク質精製後は、約９５％
の純度を有する、コンストラクト５の実質的に均質な集団が観察された。
これらの発見は、ＣＨ３抗体定常ドメイン内に、操作された突起又は操作された空洞の
いずれかを含有する選択的な二量体形成モジュールが、自己会合を軽減し、制御されてい
ないＦｃが介在する凝集又は多量体の形成を防止するということを実証しており、本明細
書に記載のコンストラクト内での二量体形成選択性モジュールの使用は、Ｆｃコンストラ
クトの実質的に均質な製剤を得るために用いることが可能であるということを示唆してい
る。この観察は、例えば生物学的活性及び効力を制御するために、コンストラクトを製造
、生成及び精製することにおける利点を有意に含意している。
実施例５－結合親和性及び結合活性
複数のＦｃγ受容体に対するコンストラクトの結合を、細胞ベースのＦＲＥＴ拮抗アッ
セイ（Ｃｉｓｂｉｏ Ｂｉｏａｓｓａｙｓ社）を用いて評価した。コンストラクト５及び
６は、野生型Ｆｃドメイン（コンストラクト１）と比べて、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩ
Ｉｂ、及びＦｃγＲＩＩＩａに対してＩＣ５０が少なくとも１０倍小さかった（すなわち
、結合が増加）。
実施例６－単球活性化アッセイ及び阻害アッセイ
それぞれ一つ、三つ、二つのＦｃドメインを含有するコンストラクト１、５、及び６で
ある三つのＦｃコンストラクトについて、それら自身のＴＨＰ－１単球を活性化する能力
を試験した。ＩＬ－８放出を、単球活性化の指標として用いた。実施例１及び２に記載し
たように、コンストラクト１、５、及び６を発現させて精製した。精製したＦｃコンスト
ラクトのそれぞれを、ＴＨＰ－１単球に添加した。三つのコンストラクトのいずれにおい
ても、実質的なＩＬ－８放出は観察されなかった。データを図１４Ａに提供した。
同じ三つのＦｃコンストラクトについて、その後、Ｆｃ受容体媒介性単球活性化を抑制
する能力を試験した。ＩｇＧ１（１００μｇ／ｍＬ）を、９６ウェルプレート上に固定化
し、ＴＨＰ－１単球によるＩＬ－８放出を誘導するために用いた。続いて、コンストラク
ト１、５、及び６、又はコントロール物質（静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）、ヒト血
清アルブミン（ＨＳＡ）、及びグリシン緩衝液）の連続希釈を、組織培養プレート内で行
った。ＴＨＰ－１単球（１．５ｘ１０５細胞）を、十分に混合しながら直ちに添加した。
培養液を１８時間インキュベートし、ＩＬ－８に関して上清を分析した。コンストラクト
５及び６は、低用量で、コンストラクト１よりも効果的にＩＬ－８放出を抑制することが
わかった。データを図１４Ｂに提供した。
実施例７－Ｋ／ＢｘＮ関節炎モデル
Ｆｃコンストラクト１、５、及び６、ならびにＩＶＩｇについて、Ｋ／ＢｘＮ血清移入
モデルにおいて関節炎からマウスを保護する能力を、Ａｎｔｈｏｎｙ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１０５：１９５７１－１９５７８（２００８）に記
載の方法を用いて試験した。１２週齢のＫ／ＢｘＮマウスを、育成した／Ｊａｃｋｓｏｎ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社より購入した。合計３０匹のＣ５７ＢＬマウスを、それぞ
れ６匹を含む五つの群に分割した。２００μｌのＫ／ＢｘＮ血清（関節炎誘導血清）の注
射の１時間前に、各群に、コンストラクト６を０．１ｇ／ｋｇで２００μｌ、コンストラ
クト５を０．１ｇ／ｋｇで２００μｌ、ＩＶＩｇを０．１ｇ／ｋｇで２００μｌ、ＩＶＩ
ｇを１ｇ／ｋｇで２３０μｌ、又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を２００μｌ、静脈内注
射（ｉ．ｖ．）した（０日目）。足の腫れと、足首の厚さについての臨床試験によって、
炎症を採点した。足の腫れに関しては、足ごとに０～３点で採点した（０は腫れなし、３
は最大の腫れ）。個々のマウスにつき、合計臨床スコアとして、四つの足の点数を加算し
た。足首の厚さに関しては、カリパス測定を用いた。各マウスを、０日目から１０日目ま
で毎日採点した。６匹のマウスの各群についての日平均の臨床スコアを、図１５にプロッ
トした。
図１５に示すように、１ｇ／ｋｇでのＩＶＩｇ、０．１ｇ／ｋｇでのコンストラクト５
、及び、０．１ｇ／ｋｇでのコンストラクト６が、同様のレベルの炎症からの保護をもた
らした。ＩＶＩｇの用量と比較して、コンストラクト５及び６は１０分の１の用量で投与
したことを考慮すると、コンストラクト５及び６が、ＩＶＩｇよりも効力があることが明
らかである。
実施例８－慢性ＩＴＰモデル
コンストラクト１及び５のみならずＩＶＩｇについて、免疫性血小板減少症（ＩＴＰ）
を起こしているマウスを治療する能力を試験した。ＩＴＰは、血小板減少を引き起こす抗
血小板Ａｂによって誘導した。４５匹のＣ５７ＢＬ／６マウス（１８～２２ｇ、Ｃｈａｒ
ｌｅｓ Ｒｉｖｅｒｓ Ｌａｂｓ社、マサチューセッツ州）に、ラット抗－ＣＤ４１抗体
（Ａｂ）（クローンＭＷＲｅｇ３０、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社、カタログ＃１３３９１０）
を１．５μｇ／マウスで、１日１回４日間（１日目、２日目、３日目、及び４日目に）腹
腔内（ｉ．ｐ．）注射した。５匹のマウスに、ラットＩｇＧ１，ｋアイソタイプコントロ
ールＡｂ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社、カタログ＃４００４１４）を１．５μｇ／マウスで注
射して、正常血小板レベルを決定した。１００μｌのＰＢＳ中の抗体（Ａｂ）を投与した
。全てのマウスに対して、３日目の第３回抗－ＣＤ４１ Ａｂ注射の２時間後、食塩水コ
ントロール、１ｇ／ｋｇのＩＶＩｇ、０．０２、０．０３、０．１、及び０．３ｇ／ｋｇ
のコンストラクト１、ならびに、０．００４、０．０２、及び０．１ｇ／ｋｇのコンスト
ラクト５のいずれかを２００μｌで、１回、静脈内投与した。マウスは５日目（第４回抗
－ＣＤ４１ Ａｂ注射の２４時間後）に放血させて、ＶｅｔＳｃａｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅ
ｎｔによって総血小板レベルを定量した。全ての手順は、動物保護法と、実験動物の管理
と使用に関する指針とに従って実行した。
図１６に示すように、血小板レベルは、食塩水コントロールと比較して、０．０２及び
０．１ｇ／ｋｇでのコンストラクト５による治療処置後に有意に増加した（＊＊＊＊ｐ＜
０．０００１、複数の比較試験での一元配置分散分析（Ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡ）に
よる）。これらの群における血小板レベルは、正常なアイソタイプ治療群におけるレベル
と同様であった。１ｇ／ｋｇでのＩＶＩｇならびに０．１及び０．３ｇ／ｋｇでのコンス
トラクト１による治療処置でもまた、食塩水コントロールと比較して、血小板レベルが有
意に増加したが（それぞれ＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、複数の比較の試験での一
元配置分散分析（Ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡ）による）、これら群における血小板レベ
ルは、０．０２及び０．１ｇ／ｋｇでのコンストラクト５の治療群のものよりも低かった
。このモデルでは、コンストラクト５がＩＶＩｇよりも約５０倍の効力があることが明ら
かである。
実施例９－コンストラクト５＊は、ＩＶＩｇと比較して、ＦｃγＲに対する増強された結
合及び結合活性を示す。
実施例８に記載したものと同じプロトコルに従って、突起－２０－電荷Ｆｃ２＊（実施
例１のコンストラクトＦ＊）及び空洞Ｆｃ＊（実施例１のコンストラクトＣ＊）をコード
する二つのプラスミドコンストラクトを用いて、コンストラクト５＊を発現させて精製し
た。このコンストラクトの種々のＦｃ受容体に対する結合プロファイルを、蛍光共鳴エネ
ルギー移動（ＦＲＥＴ）競合結合アッセイにおいてＩＶＩＧのものと比較した。
コンストラクト５＊は、様々なＦｃγ－受容体に対して、ＩＶＩｇと同様の全体的な結
合プロファイルを示したが（ＦｃγＲＩＩｂに関しては最も低い結合親和性が観察された
）、ＩＶＩｇと比較して、全ての低親和性のＦｃγＲに対する結合は大きく増加していた
。ＦｃγＲに対する増加した結合は、より高い結合活性に相当するものであり、それは個
々の結合の相互作用を集めた親和性の累積的な効果を意味する。コンストラクト５＊のＩ
Ｃ５０値は、ＩＶＩｇのものより一貫して低いが、これは個々のＩｇＧ分子と比較して、
低い親和性のＦｃγＲとの結合が著しく増加していることを示唆している。例えば、コン
ストラクト５＊は、ＩＶＩｇと比較して、ＦｃγＲＩＩａ（Ｈ１３１変異体）でおよそ１
７０倍親和性が増加し、ＦｃγＲＩＩｂに対して５５倍増加した親和性をみせた。
実施例１０－ＴＨＰ－１単球系細胞におけるファゴサイトーシスの抑制
コンストラクト５＊及びＩＶＩｇを、ファゴサイトーシスのモデルで試験した。
ファゴサイトーシスは、細胞（食細胞）が細菌等の固体粒子を巻き込み、ファゴソーム
として知られる内部小胞を形成するプロセスである。免疫系では、ファゴサイトーシスは
、病原体及び細胞片を除去するために用いられる主要な機序である。単球及びマクロファ
ージは、ＦｃγＲ媒介の接着（ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ）に大きく依存する機序であるファ
ゴサイトーシスを経て免疫系からのオプソニン化（抗体被覆）粒子を一掃することに特化
した細胞の一つである。しかしながら、自己免疫疾患においては、食細胞が活性化状態と
なることがあり、炎症誘発性サイトカインの有害な放出又は体内の他の重大な細胞のファ
ゴサイトーシスを導く。１０００人以上の供血者の血漿から抽出された、貯蔵された、多
価のＩｇＧ抗体を含有するＩＶＩｇを用いて、自己免疫疾患は治療される。
このアッセイの系では、蛍光標識抗体で被覆したラテックスビーズ、オプソニン化した
細菌又はウイルスの模倣体をＴＨＰ－１細胞に与え、コンストラクト５＊とＩＶＩｇの存
在下及び非存在下において貪食対象となるようにさせた。インキュベーション期間の最後
に、外側のあらゆる蛍光をトリパンブルーでクエンチし、細胞内蛍光量をフローサイトメ
トリーで定量化した。全ての群を、それらの非治療コントロール（ＴＨＰ－１細胞及びラ
テックスビーズのみ）に対して正規化した。結果は、二つの別個の実験を代表するもので
ある。
図１７に示すように、ＴＨＰ－１単球系細胞によるオプソニン化ビーズのファゴサイト
ーシスは、ＩＶＩｇ及びコンストラクト５＊両方での治療によって抑制されるが、コンス
トラクト５＊のＩＣ５０値はＩＶＩｇのもののおよそ１００分の１であった。このことは
、この開示のＦｃコンストラクト、例えばコンストラクト５＊を用いて、自己免疫の適応
症のみならずＩＶＩｇを用いて治療可能である他の適応症を治療することが可能であると
いうことを示唆している。
実施例１１－ＦｃγＲＩＩｂに対するＦｃコンストラクト結合の強化
これまでに、Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆ変異が、ＦｃγＲＩＩｂ受容体へのＩｇＧ１の結
合を有意に特異的に高めることが証明されている（Ｃｈｕ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ４５ ２００８）。Ｓ２６７Ｅ／Ｌ３２８Ｆ変異をコンス
トラクト５（ＳＩＦ）の骨格に組み入れた。このコンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋変
異体は、良好に発現して構築される（図１８を参照）（ＳＩＦ：コンストラクト５、Ｆｃ
γＲＩＩｂ＋：コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋変異体）。図１８は、コンストラク
ト５（ＳＩＦ）及びコンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋変異体の一過性発現から得られ
た清澄培地に関する、非還元ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動結
果の画像である。長鎖及び短鎖のコンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂをコードするプラス
ミドを、１／１（ｗ／ｗ）又は２／１の比でＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクトした。
コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋変異体の、阻害性ＦｃγＲＩＩｂ受容体への結合
が、コンストラクト５（ＳＩＦ３）コントロールと比較すると大きく増強された（結合が
３００倍以上増加）。逆に、活性化ＦｃγＲＩＩａへの結合は、相対的に影響を受けない
が、一方でＦｃγＲＩＩＩａへの結合は減少する（図１９を参照）。
図１９は、ＩｇＧ１コントロール、コンストラクト５、及びコンストラクト５－Ｆｃγ
ＲＩＩｂ＋変異体のＦｃガンマ受容体への結合を比較する、実験結果を要約したグラフで
ある。細胞に基づく、競合的な時間分解蛍光共鳴エネルギー移動アッセイ（ＣｉｓＢｉｏ
Ｂｉｏａｓｓａｙｓ社、マサチューセッツ州ベドフォード）を用いて相対的な結合を測
定した。結果はＥＣ５０値として表しており、特定の細胞表面のＦｃガンマ受容体と結合
する蛍光標識した抗体を移動させるのに必要なプロバンド（ｐｒｏｂａｎｄ）の濃度を示
している。数値が大きいほど、結合又は親和性は小さい。
実施例１２－単球由来樹状細胞（ｍｏＤＣ）活性化の抑制
コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋変異体は、単球由来樹状細胞（ｍｏＤＣ）の活性
化を大きく増強した。プロフェッショナル抗原提示細胞の最も重要な集団である樹状細胞
（ＤＣ）は、抗原物質をプロセシングし、Ｔ細胞応答を開始する目的で、細胞表面にそれ
を提示する。ＦｃγＲは、ｍｏＤＣの機能を制御する際に大きな役割を果たすことが可能
である。ＦｃγＲを活性化することにおいての免疫複合体の接着は、未熟なヒトｍｏＤＣ
の成熟及び活性化の契機となり得る。逆に、阻害性ＦｃγＲＩＩｂの接着は、成熟及び活
性化を抑制し得る（Ｂｏｒｕｃｈｏｖ ＡＭ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ
．２００５ １１５（１０））。我々は、ＦｃコンストラクトがｍｏＤＣの成熟及び活性
化を抑制することができるということを既に証明している（Ｏｒｔｉｚ ｅｔ ａｌ Ｓ
ｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ２０１６及び図３を参照）。一方、ＦｃγＲＩＩｂ＋変異
を伴うＦｃコンストラクト（例えば、コンストラクト５／ＳＩＦ３）は、プレートに固定
したＩｇＧ１等の免疫複合体代替物にさらすことにより、ｍｏＤＣ活性化を有意に増強さ
せることが可能である（図２０）。コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋単独でのインキ
ュベーションは、ｍｏＤＣ活性化を誘導しない（図２１）。
未熟なヒトｍｏＤＣは、１００ｎｇ／ｍＬのＧＭ－ＣＳＦ及び５０ｎｇ／ｍＬのＩＬ－
４の存在下、ネガティブセレクションしたＣＤ１４＋単球より発生させた。採取したＤＣ
を、ＰＢＳ、抗－ＣＤ３２ａ抗体ＩＶ．３、コンストラクト５（ＳＩＦ３）、又はコンス
トラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋のいずれかと共に、３７℃で２０分間、培地中でインキュ
ベートした。ブロッキング後、細胞浮遊液をＩｇＧ１被覆プレートに移し、追加のＧＭ－
ＣＳＦ及びＩＬ－４を補った培地を添加した。４８時間のインキュベーション後、軽く接
着した細胞を、氷冷したＰＢＳでプレートを２回洗浄することによって採取した。採取し
た細胞を、抗－ＨＬＡ－ＤＲ ＦＩＴＣ Ａｂ及び抗－ＣＤ８６－ＰＥ Ｃｙ７ Ａｂで
染色した。細胞を、ＦＡＣＳＣａｎｔｏ（ＢＤ）及びＦｌｏｗＪｏ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（
ＴｒｅｅＳｔａｒ）で分析した。
図２０：コンストラクト５は、プレート固定ＩｇＧによってｍｏＤＣ活性化を抑制する
が、一方、コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋は、活性化を高める。代表となるヒスト
グラムが、ネガティブコントロールとして未処理（ＵＴ）プレート上で培養したｍｏＤＣ
上、又は、活性化するＦｃγＲＩＩａを阻害する抗体（ＩＶ．３）、コンストラクト５、
もしくは増加濃度のコンストラクト５－ＦｃγＲＩＩＢ＋で２０分間前処理したｍｏＤＣ
上の、ＣＤ８６表面発現を示している。処理した細胞はその後、固定化ＩｇＧ１（ＰＢ
ＩｇＧ）を含有するプレートに移した。腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦａ）処置を、ポジ
ティブコントロールとして用いた。ＣＤ８６の表面発現は、フローサイトメトリーで評価
した。ＣＤ８６発現のヒストグラムは、コントロールとして非刺激細胞を用いてゲートし
た。処置条件に対して、ＣＤ８６陽性である細胞の百分率をｙ軸に示した。
図２１：コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩｂ＋は、それ自体ではｍｏＤＣ活性化を誘導
しないが、プレート固定ＩｇＧによって活性化を増強する。代表となるヒストグラムが、
ネガティブコントロールとして未処理（ＵＴ）プレート上で培養したｍｏＤＣ上、又は、
コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩＢ＋で２０分間前処理して、その後未処理プレートに移
した（ＦｃγＲＩＩｂ＋単独）ものであるｍｏＤＣ上の、ＣＤ８６表面発現を示している
。ＰＢＳ（ＰＢ ＩｇＧ）で、活性化ＦｃγＲＩＩａを阻害する抗体（ＩＶ．３）で、又
は、コンストラクト５－ＦｃγＲＩＩＢ＋（ＦｃｇＲＩＩｂ＋）で前処理したｍｏＤＣを
、固定化ＩｇＧ１を含有するプレートに移した。ＣＤ８６の表面発現は、フローサイトメ
トリーで評価した。ＣＤ８６発現のヒストグラムは、コントロールとして非刺激細胞を用
いてゲートした。処置条件に対して、ＣＤ８６陽性である細胞の百分率をｙ軸に示した。

Claims (119)

  1. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌはリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ）第三のＦｃドメイン単量体を含む第二のポリペプチドと；
    ｃ）第四のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のＦｃドメイン単量体と前記第三のＦｃドメイン単量体とが結合して第一のＦ
    ｃドメインを形成し、前記第二のＦｃドメイン単量体と前記第四のＦｃドメイン単量体と
    が結合して第二のＦｃドメインを形成し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  2. 前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体が、前記第一のＦｃ
    ドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な
    二量体形成選択性モジュール（ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｍ
    ｏｄｕｌｅ）を含む、請求項１記載のＦｃコンストラクト。
  3. 前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第四のＦｃドメイン単量体が、前記第二のＦｃ
    ドメイン単量体及び前記第四のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な
    二量体形成選択性モジュールを含む、請求項１又は２に記載のＦｃコンストラクト。
  4. Ａが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１から３のいずれか一項に記載のＦｃコン
    ストラクト。
  5. Ｂが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１から４のいずれか一項に記載のＦｃコン
    ストラクト。
  6. 前記第二のポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１から５のいずれか
    一項に記載のＦｃコンストラクト。
  7. 前記第三のポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１から６のいずれか
    一項に記載のＦｃコンストラクト。
  8. リンカーを介して前記ポリペプチドのうちの一つ又は複数におけるＮ末端又はＣ末端に
    連結したアルブミン結合ペプチドをさらに含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の
    Ｆｃコンストラクト。
  9. ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及びＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインをさらに含み、前
    記ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、リンカーを介してＡ又は前記第二のポリペプチド
    のＮ末端に結合している、請求項１から８のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  10. 前記第二のポリペプチド及び前記第三のポリペプチドが、同一のアミノ酸配列を有する
    、請求項１から９のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  11. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    １から１０のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  12. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌはリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ）式Ａ’－Ｌ’－Ｂ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａ’は第三のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ） 第五のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドと；
    ｄ） 第六のＦｃドメイン単量体を含む第四のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のポリペプチドのＡと前記第二のポリペプチドのＡ’とが結合して第一のＦｃ
    ドメインを形成し、前記第一のポリペプチドのＢと前記第五のＦｃドメイン単量体とが結
    合して第二のＦｃドメインを形成し、前記第二のポリペプチドのＢ’と前記第六のＦｃド
    メイン単量体とが結合して第三のＦｃドメインを形成し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  13. 前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体が、前記第一のＦｃ
    ドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な
    二量体形成選択性モジュールを含む、請求項１２記載のＦｃコンストラクト。
  14. 前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体が、前記第二のＦｃ
    ドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な
    二量体形成選択性モジュールを含む、請求項１２又は１３に記載のＦｃコンストラクト。
  15. 前記第四のＦｃドメイン単量体及び前記第六のＦｃドメイン単量体が、前記第四のＦｃ
    ドメイン単量体及び前記第六のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な
    二量体形成選択性モジュールを含む、請求項１２から１４のいずれか一項に記載のＦｃコ
    ンストラクト。
  16. Ａが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１２から１５のいずれか一項に記載のＦｃ
    コンストラクト。
  17. Ｂが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１２から１６のいずれか一項に記載のＦｃ
    コンストラクト。
  18. Ａ’が、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１２から１７のいずれか一項に記載のＦ
    ｃコンストラクト。
  19. Ｂ’が、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１２から１８のいずれか一項に記載のＦ
    ｃコンストラクト。
  20. 前記第三のポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１２から１９のいず
    れか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  21. 前記第四のポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項１２から２０のいず
    れか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  22. ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及びＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインをさらに含み、前
    記ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインが、リンカーを介して前記ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメ
    インのＮ末端に結合し、前記ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、リンカーを介してＡの
    Ｎ末端に結合している、請求項１２から２１のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト
    。
  23. 第二のＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及び第二のＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインをさ
    らに含み、前記第二のＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインが、リンカーを介して前記第二のＩ
    ｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインのＮ末端に結合し、前記第二のＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ド
    メインが、リンカーを介してＡ’のＮ末端に結合している、請求項２２記載のＦｃコンス
    トラクト。
  24. アルブミン結合ペプチドをさらに含む、請求項１２から２２のいずれか一項に記載のＦ
    ｃコンストラクト。
  25. 前記第一のポリペプチド及び前記第二のポリペプチドが、同一のアミノ酸配列を有し、
    前記第三のポリペプチド及び前記第四のポリペプチドが、同一のアミノ酸配列を有する、
    請求項１２から２３のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  26. 前記第一のポリペプチド及び前記第二のポリペプチドが、配列番号：５０の配列を含み
    、前記第三のポリペプチド及び前記第四のポリペプチドが、配列番号：４８の配列を含む
    、請求項２５記載のＦｃコンストラクト。
  27. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    １２から２５のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  28. 以下：
    ａ）式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌはリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂはアルブミン結合ペプチドを含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ）第二のＦｃドメイン単量体を含む第二のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のＦｃドメイン単量体と前記第二のＦｃドメイン単量体とが結合してＦｃドメ
    インを形成し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  29. 前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第二のＦｃドメイン単量体が、前記第一のＦｃ
    ドメイン単量体及び前記第二のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な
    二量体形成選択性モジュールを含む、請求項２８記載のＦｃコンストラクト。
  30. Ａが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項２８又は２９に記載のＦｃコンストラクト
    。
  31. 第二のポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項２８から３０のいずれか
    一項に記載のＦｃコンストラクト。
  32. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    ２８から３１のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  33. 以下：
    ａ）式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） ＡはＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインを含み、
    ｉｉ） Ｌ１及びＬ２はそれぞれリンカーであり、
    ｉｉｉ）ＢはＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインを含み、
    ｉｖ） Ｃは第一のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ）式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式中
    、
    ｉ） Ａ’はＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインを含み、
    ｉｉ） Ｌ１’及びＬ２’はそれぞれリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’はＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインを含み、
    ｉｖ） Ｃ’は第二のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のＦｃドメイン単量体と前記第二のＦｃドメイン単量体とが結合してＦｃドメ
    インを形成し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  34. 前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第二のＦｃドメイン単量体が、前記第一のＦｃ
    ドメイン単量体及び前記第二のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進する相補的な
    二量体形成選択性モジュールを含む、請求項３３記載のＦｃコンストラクト。
  35. Ｃが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項３３又は３４に記載のＦｃコンストラクト
    。
  36. Ｃ’が、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項３３から３５のいずれか一項に記載のＦ
    ｃコンストラクト。
  37. リンカーを介してＣ又はＣ’のＣ末端に連結したアルブミン結合ペプチドをさらに含む
    、請求項３３から３６のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  38. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    ３３から３７のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  39. 以下：
    ａ）式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） ＡはＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインを含み、
    ｉｉ） Ｌ１及びＬ２はそれぞれリンカーであり、
    ｉｉｉ）ＢはＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインを含み、
    ｉｖ） Ｃは第一のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ）式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式中
    、
    ｉ） Ａ’はＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインを含み、
    ｉｉ） Ｌ１’及びＬ２’はそれぞれリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’はＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインを含み、
    ｉｖ） Ｃ’は第二のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ）第三のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドと；
    ｄ）第四のＦｃドメイン単量体を含む第四のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のＦｃドメイン単量体と前記第三のＦｃドメイン単量体とが結合して第一のＦ
    ｃドメインを形成し、
    前記第二のＦｃドメイン単量体と第四の第三のＦｃドメイン単量体とが結合して第二の
    Ｆｃドメインを形成し、
    前記第一のポリペプチドの前記ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、前記第二のポリペ
    プチドの前記ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインと結合し、
    前記第二のポリペプチドの前記ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、前記第一のポリペ
    プチドの前記ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメインと結合し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  40. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    ３９記載のＦｃコンストラクト。
  41. 以下：
    ａ）第一のＦｃドメイン単量体を含む第一のポリペプチドと；
    ｂ）第二のＦｃドメイン単量体を含む第二のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のＦｃドメイン単量体と前記第二のＦｃドメイン単量体とが結合してＦｃドメ
    インを形成し、前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第二のＦｃドメイン単量体が、前
    記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第二のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進
    する相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  42. 前記第一のポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項４１記載のＦｃコン
    ストラクト。
  43. 前記第二のポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体からなる、請求項４１又は４２に記載
    のＦｃコンストラクト。
  44. アルブミン結合ペプチドをさらに含む、請求項４１から４３のいずれか一項に記載のＦ
    ｃコンストラクト。
  45. ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及びＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインをさらに含み、前
    記ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、リンカーを介して前記第一のポリペプチド又は前
    記第二のポリペプチドのＮ末端に結合している、請求項４１から４４のいずれか一項に記
    載のＦｃコンストラクト。
  46. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    ４１から４５のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  47. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌはリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ’－Ｂ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａ’は第三のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第二のＦｃドメイン単量体が、それらそれぞれ
    のＣＨ３ドメイン内に、操作された空洞を含み、前記第三のＦｃドメイン単量体及び前記
    第四のＦｃドメイン単量体が、それらそれぞれのＣＨ３ドメイン内に、操作された突起を
    含み、前記操作された空洞及び前記操作された突起が、空洞に突起が挿入された対を形成
    するように位置決めされ、前記第一のＦｃドメイン単量体と前記第三のＦｃドメイン単量
    体とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、前記第二のＦｃドメイン単量体と前記第四
    のＦｃドメイン単量体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  48. 前記Ａ、前記Ｂ、前記Ａ’、又は前記Ｂ’のそれぞれが、Ｆｃドメイン単量体からなる
    、請求項４７記載のＦｃコンストラクト。
  49. リンカーを介してＢ又はＢ’のＣ末端に連結したアルブミン結合ペプチドをさらに含む
    、請求項４７又は４８に記載のＦｃコンストラクト。
  50. ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン及びＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインをさらに含み、前
    記ＩｇＧ ＣＨ１抗体定常ドメインが、リンカーを介してＡ又はＡ’のＮ末端に結合して
    いる、請求項４７から４９のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  51. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    ４７から５０のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  52. 前記二量体形成選択性モジュールが、Ｆｃドメイン単量体の一方のＣＨ３ドメイン内に
    操作された空洞と、Ｆｃドメイン単量体の他方のＣＨ３ドメイン内に操作された突起とを
    含み、前記操作された空洞及び前記操作された突起が、Ｆｃドメイン単量体の空洞に突起
    が挿入された対を形成するように位置決めされる、請求項２、３、１３、１４、１５、２
    ９、３４、又は４１のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  53. 前記Ｆｃドメイン単量体の一方がＹ４０７Ｖ及びＹ３４９Ｃを含み、前記Ｆｃドメイン
    単量体の他方がＴ３６６Ｗ及びＳ３５４Ｃを含む、請求項４４記載のＦｃコンストラクト
    。
  54. 前記二量体形成選択性モジュールが、前記ドメイン単量体の一方のＣＨ３ドメイン内に
    負電荷をもつアミノ酸と、前記Ｆｃドメイン単量体の他方のＣＨ３ドメイン内に正電荷を
    もつアミノ酸とを含み、前記負電荷をもつアミノ酸及び前記正電荷をもつアミノ酸が、Ｆ
    ｃドメインの形成を促進するように位置決めされる、請求項２、３、１３、１４、１５、
    ２９、３４、又は４１のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  55. 前記Ｆｃドメイン単量体の一方がＤ３９９Ｋを含み、前記Ｆｃドメイン単量体の他方が
    Ｋ４０９Ｄを含む、請求項５４記載のＦｃコンストラクト。
  56. 前記Ｆｃコンストラクト内の一つ又は複数のリンカーが、結合である、請求項１から５
    ５のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  57. 前記Ｆｃコンストラクト内の一つ又は複数のリンカーが、スペーサーである、請求項１
    から５５のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  58. 前記スペーサーが、配列番号：１～２７のうちのいずれか一つの配列を含む、請求項５
    ７記載のＦｃコンストラクト。
  59. 前記配列が、配列番号：１、２、及び３のうちのいずれか一つからなる、請求項５８記
    載のＦｃコンストラクト。
  60. 前記アルブミン結合ペプチドが、配列番号：２８の配列を含む、請求項８、２３、２８
    、３７、４４、及び４９のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  61. 前記アルブミン結合ペプチドが、配列番号：２８の配列からなる、請求項６０記載のＦ
    ｃコンストラクト。
  62. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ１はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｖ） Ｌ２はリンカーであり、
    ｖ） Ｃは第三のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ）式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式中
    、
    ｉ） Ａ’は第四のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ１’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第五のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｖ） Ｌ２’はリンカーであり、
    ｖ） Ｃ’は第六のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のＦｃドメイン単量体と前記第二のＦｃドメイン単量体とが結合して第一のＦ
    ｃドメインを形成し、前記第四のＦｃドメイン単量体と前記第五のＦｃドメイン単量体と
    が結合して第二のＦｃドメインを形成し、前記第三のＦｃドメイン単量体と前記第六のＦ
    ｃドメイン単量体とが結合して第三のＦｃドメインを形成し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  63. リンカーＬ１及びＬ１’が、切断可能なリンカーである、請求項６２記載のＦｃコンス
    トラクト。
  64. 前記Ｆｃドメインの少なくとも一つの中に、１４個以下のアミノ酸修飾がある、請求項
    ６２又は６３に記載のＦｃコンストラクト。
  65. Ｆｃドメイン単量体のうちの一つ又は複数が、ＩｇＧヒンジドメイン、ＩｇＧ ＣＨ２
    抗体定常ドメイン、及びＩｇＧ ＣＨ３抗体定常ドメインを含む、請求項１から６３のい
    ずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  66. Ｆｃドメイン単量体のそれぞれが、ＩｇＧヒンジドメイン、ＩｇＧ ＣＨ２抗体定常ド
    メイン、及びＩｇＧ ＣＨ３抗体定常ドメインを含む、請求項６５記載のＦｃコンストラ
    クト。
  67. ＩｇＧが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４からなる群か
    ら選択されるサブタイプのものである、請求項６５又は６６に記載のＦｃコンストラクト
    。
  68. 増加した抗炎症活性を有する、請求項１から６７のいずれか一項に記載のＦｃコンスト
    ラクト。
  69. 各Ｆｃドメイン単量体が、１０個以下のアミノ酸修飾を有する、請求項１から６８のい
    ずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  70. 前記Ｆｃドメイン単量体の一つ又は複数が、最大１０個のアミノ酸修飾を有するヒトＩ
    ｇＧ Ｆｃドメイン単量体である、請求項１から６８のいずれか一項に記載のＦｃコンス
    トラクト。
  71. 請求項１から７０のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクトを調製する方法であって
    、
    ａ） 前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む宿主細胞を提供すること
    と、
    ｂ） 前記Ｆｃコンストラクトの形成を可能にする条件下で前記宿主細胞内で前記第一
    のポリペプチド、前記第二のポリペプチド及び前記第三のポリペプチドを発現させること
    と、
    ｃ） 前記Ｆｃコンストラクトを回収することと
    を含む、前記方法。
  72. 請求項１から７０のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクトを発現する宿主細胞であ
    って、該宿主細胞が、前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリ
    ヌクレオチドが前記宿主細胞内で発現される、前記宿主細胞。
  73. ２～１０個のＦｃドメインを有するＦｃコンストラクトの実質的に均質な集団を含む、
    医薬組成物。
  74. 前記２～１０個のＦｃドメインのうちの複数が、二つのＦｃドメイン単量体間での二量
    体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含む二つのＦｃドメイン単量体
    の会合によって形成される、請求項７３記載の医薬組成物。
  75. 前記Ｆｃコンストラクトが、２～３個のＦｃドメインを有する、請求項７３記載の医薬
    組成物。
  76. 前記２～３個のＦｃドメインのうちの複数が、二つのＦｃドメイン単量体間での二量体
    形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含む二つのＦｃドメイン単量体の
    会合によって形成される、請求項７５記載の医薬組成物。
  77. 前記Ｆｃコンストラクトが、２～４個のＦｃドメインを有する、請求項７３記載の医薬
    組成物。
  78. 前記２～４個のＦｃドメインのうちの複数が、二つのＦｃドメイン単量体間での二量体
    形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含む二つのＦｃドメイン単量体の
    会合によって形成される、請求項７７記載の医薬組成物。
  79. 前記Ｆｃコンストラクトが、５～１０個のＦｃドメインを有する、請求項７３記載の医
    薬組成物。
  80. 前記５～１０個のＦｃドメインのうちの複数が、二つのＦｃドメイン単量体間での二量
    体形成を促進する相補的な二量体形成選択性モジュールを含む二つのＦｃドメイン単量体
    の会合によって形成される、請求項７９記載の医薬組成物。
  81. 複数のうちの二つの別個のポリペプチドが、同一のアミノ酸配列を有する、請求項７４
    記載の医薬組成物。
  82. 複数のうちの二つの別個のポリペプチドが、異なるアミノ酸配列を有する、請求項７４
    記載の医薬組成物。
  83. 相補的なＦｃ単量体配列が、相補的な二量体形成選択性モジュールを有する、請求項７
    ４記載の医薬組成物。
  84. 前記Ｆｃコンストラクトが、以下の特性：
    ａ） 異なるポリペプチド内に存在するＦｃドメイン単量体の会合によって少なくとも
    一部形成される、
    ｂ） 二つのポリペプチドの会合を促進する追加ドメインを含まない、
    ｃ） 連結してＦｃドメインを形成する二つのＦｃドメイン単量体間のみに共有結合を
    含む、
    ｄ） Ｆｃドメイン間に共有結合を含まない、
    ｅ） 前記Ｆｃコンストラクト内のＦｃドメインの全て又は実質的に全てが、細胞表面
    上のＦｃ受容体と同時に相互作用することができるように、十分な柔軟性を備える、
    ｆ） リンカーを介して連結した少なくとも二つのＦｃドメインを含む、
    のうちの一つ又は複数（例えば二つ、三つ、四つ、五つ、又は六つ）を有する、請求項７
    ３記載の医薬組成物。
  85. 請求項１から７０のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクトの実質的に均質な集団を
    含む、医薬組成物。
  86. Ｆｃコンストラクトの実質的に均質な集団が、少なくとも８５％均質である、請求項８
    ５記載の医薬組成物。
  87. 前記Ｆｃコンストラクトが、２～５個の会合したポリペプチドを含み、各ポリペプチド
    が、少なくとも一つのＦｃドメイン単量体を含み、該コンストラクトの各Ｆｃドメイン単
    量体が、同一であるか又は１０以下のアミノ酸が異なる、請求項７３から８６のいずれか
    一項に記載の医薬組成物。
  88. 前記Ｆｃコンストラクトが、三つの会合したポリペプチドを含む二つのＦｃドメインを
    含み、該三つのポリペプチドのうちの一つが二つのＦｃドメイン単量体を含み、前記三つ
    のポリペプチドのうちの二つがそれぞれ、一つのＦｃドメイン単量体を含む、請求項７３
    から８６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
  89. 前記Ｆｃコンストラクトが、四つの会合したポリペプチドを含む三つのＦｃドメインを
    含み、該四つのポリペプチドのうちの二つがそれぞれ、二つのＦｃドメイン単量体を含み
    、前記四つのポリペプチドのうちの二つがそれぞれ、一つのＦｃドメイン単量体を含む、
    請求項７３から８６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
  90. 前記Ｆｃコンストラクトが、２ｎ個のポリペプチドを含むｎ個のＦｃドメインからなり
    、各ポリペプチドが、Ｆｃドメイン単量体、ＩｇＧ ＣＬ抗体定常ドメイン、及びＩｇＧ
    ＣＨ１抗体定常ドメインを含む、請求項７３から８６のいずれか一項に記載の医薬組成
    物。
  91. 対象における炎症を治療する方法であって、請求項１から７０のいずれか一項に記載の
    Ｆｃコンストラクト又は請求項７３から９０のいずれか一項に記載の医薬組成物の治療有
    効量を含む医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
  92. 対象における、免疫複合体に基づく免疫応答の活性化を軽減する方法であって、請求項
    １から５８のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト又は請求項７３から９０のいずれ
    か一項に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
  93. 前記対象が、自己免疫疾患を有する、請求項９２記載の方法。
  94. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌはリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ’－Ｂ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａ’は第三のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ）第五のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドと；
    ｄ）第六のＦｃドメイン単量体を含む第四のポリペプチドと
    からなるＦｃコンストラクトであって、
    ＡとＡ’とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、Ｂと前記第五のＦｃドメイン単量
    体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、Ｂ’と前記第六のＦｃドメイン単量体とが
    結合して第三のＦｃドメインを形成し、
    前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第一のＦｃドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第四のＦｃドメイン単量体及び前記第六のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第四のＦｃドメイン単量体及び前記第六のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記Ｆｃコンストラクトが、三つ以下のＦｃドメインを含有し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  95. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｉ） Ｌはリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体からなる、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ’－Ｂ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａ’は第三のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｉ） Ｌ’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体からなる、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ） 第五のＦｃドメイン単量体からなる第三のポリペプチドと；
    ｄ） 第六のＦｃドメイン単量体からなる第四のポリペプチドと
    からなるＦｃコンストラクトであって、
    ＡとＡ’とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、Ｂと前記第五のＦｃドメイン単量
    体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、Ｂ’と前記第六のＦｃドメイン単量体とが
    結合して第三のＦｃドメインを形成し、
    前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第一のＦｃドメイン単量体及び前記第三のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第四のＦｃドメイン単量体及び前記第六のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第四のＦｃドメイン単量体及び前記第六のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記Ｆｃコンストラクトが、三つ以下のＦｃドメインを含有し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  96. 前記第一のＦｃドメイン単量体の相補的な二量体形成選択性モジュールが、負電荷をも
    つアミノ酸置換を含み、前記第三のＦｃドメイン単量体の相補的な二量体形成選択性モジ
    ュールが、正電荷をもつアミノ酸置換を含み、前記第二のＦｃドメイン単量体の相補的な
    二量体形成選択性モジュールが、操作された突起を含み、前記第五のＦｃドメイン単量体
    の相補的な二量体形成選択性モジュールが、操作された空洞を含み、前記第四のＦｃドメ
    イン単量体の相補的な二量体形成選択性モジュールが、操作された突起を含み、前記第六
    のＦｃドメイン単量体の相補的な二量体形成選択性モジュールが、操作された空洞を含む
    、請求項９４又は９５に記載のＦｃコンストラクト。
  97. リンカーＬ及び／又はＬ’が、長さ３～２００アミノ酸である、請求項９４～９６のい
    ずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  98. リンカーＬ及び／又はＬ’が、配列番号：１、２、及び３のうちのいずれか一つの配列
    からなる、請求項９６記載のＦｃコンストラクト。
  99. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ１はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｖ） Ｌ２はリンカーであり、
    ｖ） Ｃは第三のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式
    中、
    ｉ） Ａ’は第四のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ１’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第五のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｖ） Ｌ２’はリンカーであり、
    ｖ） Ｃ’は第六のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ） 第七のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドと；
    ｄ） 第八のＦｃドメイン単量体を含む第四のポリペプチドと；
    ｅ） 第九のＦｃドメイン単量体を含む第五のポリペプチドと；
    ｄ） 第十のＦｃドメイン単量体を含む第六のポリペプチドと
    からなるＦｃコンストラクトであって、
    Ａと前記第七のＦｃドメイン単量体とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、ＢとＢ
    ’とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、Ｃと前記第八のＦｃドメイン単量体とが結
    合して第三のＦｃドメインを形成し、Ａ’と前記第九のＦｃドメイン単量体とが結合して
    第四のＦｃドメインを形成し、Ｃ’と前記第十のＦｃドメイン単量体とが結合して第五の
    Ｆｃドメインを形成し、
    前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第一のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第四のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第四のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記Ｆｃコンストラクトが、五つ以下のＦｃドメインを含有し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  100. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｉ） Ｌ１はリンカーであり、
    ｉｉｉ）Ｂは第二のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｖ） Ｌ２はリンカーであり、
    ｖ） Ｃは第三のＦｃドメイン単量体からなる、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式
    中、
    ｉ） Ａ’は第四のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｉ） Ｌ１’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第五のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｖ） Ｌ２’はリンカーであり、
    ｖ） Ｃ’は第六のＦｃドメイン単量体からなる、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ） 第七のＦｃドメイン単量体からなる第三のポリペプチドと；
    ｄ） 第八のＦｃドメイン単量体からなる第四のポリペプチドと；
    ｅ） 第九のＦｃドメイン単量体からなる第五のポリペプチドと；
    ｄ） 第十のＦｃドメイン単量体からなる第六のポリペプチドと
    からなるＦｃコンストラクトであって、
    Ａと前記第七のＦｃドメイン単量体とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、ＢとＢ
    ’とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、Ｃと前記第八のＦｃドメイン単量体とが結
    合して第三のＦｃドメインを形成し、Ａ’と前記第九のＦｃドメイン単量体とが結合して
    第四のＦｃドメインを形成し、Ｃ’と前記第十のＦｃドメイン単量体とが結合して第五の
    Ｆｃドメインを形成し、
    前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第一のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第二のＦｃドメイン単量体及び前記第五のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第四のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第四のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記Ｆｃコンストラクトが、五つ以下のＦｃドメインを含有し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  101. 前記第二のＦｃドメイン単量体の相補的な二量体形成選択性モジュールが、負電荷をも
    つアミノ酸置換を含み、前記第五のＦｃドメイン単量体の相補的な二量体形成選択性モジ
    ュールが、正電荷をもつアミノ酸置換を含み、前記第一のＦｃドメイン単量体、前記第三
    のＦｃドメイン単量体、前記第四のＦｃドメイン単量体、及び前記第六のＦｃドメイン単
    量体のそれぞれの相補的な二量体形成選択性モジュールが、操作された突起を含み、前記
    第七のＦｃドメイン単量体、前記第八のＦｃドメイン単量体、前記第九のＦｃドメイン単
    量体、及び前記第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれの相補的な二量体形成選択性モジュ
    ールが、操作された空洞を含む、請求項９９又は１００に記載のＦｃコンストラクト。
  102. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ１はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｖ） Ｌ２はリンカーであり、
    ｖ） Ｃは第三のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式
    中、
    ｉ） Ａ’は第四のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ１’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第五のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｖ） Ｌ２’はリンカーであり、
    ｖ） Ｃ’は第六のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ） 第七のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドと；
    ｄ） 第八のＦｃドメイン単量体を含む第四のポリペプチドと；
    ｅ） 第九のＦｃドメイン単量体を含む第五のポリペプチドと；
    ｄ） 第十のＦｃドメイン単量体を含む第六のポリペプチドと
    からなるＦｃコンストラクトであって、
    ＡとＡ’とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、Ｂと前記第七のＦｃドメイン単量
    体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、Ｃと前記第八のＦｃドメイン単量体とが結
    合して第三のＦｃドメインを形成し、Ｂ’と前記第九のＦｃドメイン単量体とが結合して
    第四のＦｃドメインを形成し、Ｃ’と前記第十のＦｃドメイン単量体とが結合して第五の
    Ｆｃドメインを形成し、
    前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第四のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第一のＦｃドメイン単量体及び前記第四のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第二のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第五のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第五のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記Ｆｃコンストラクトが、五つ以下のＦｃドメインを含有し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  103. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ１－Ｂ－Ｌ２－Ｃを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｉ） Ｌ１はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｖ） Ｌ２はリンカーであり、
    ｖ） Ｃは第三のＦｃドメイン単量体からなる、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ１’－Ｂ’－Ｌ２’－Ｃ’を有する第二のポリペプチドであって、式
    中、
    ｉ） Ａ’は第四のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｉ） Ｌ１’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第五のＦｃドメイン単量体からなり、
    ｉｖ） Ｌ２’はリンカーであり、
    ｖ） Ｃ’は第六のＦｃドメイン単量体からなる、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ） 第七のＦｃドメイン単量体からなる第三のポリペプチドと；
    ｄ） 第八のＦｃドメイン単量体からなる第四のポリペプチドと；
    ｅ） 第九のＦｃドメイン単量体からなる第五のポリペプチドと；
    ｄ） 第十のＦｃドメイン単量体からなる第六のポリペプチドと
    からなるＦｃコンストラクトであって、
    ＡとＡ’とが結合して第一のＦｃドメインを形成し、Ｂと前記第七のＦｃドメイン単量
    体とが結合して第二のＦｃドメインを形成し、Ｃと前記第八のＦｃドメイン単量体とが結
    合して第三のＦｃドメインを形成し、Ｂ’と前記第九のＦｃドメイン単量体とが結合して
    第四のＦｃドメインを形成し、Ｃ’と前記第十のＦｃドメイン単量体とが結合して第五の
    Ｆｃドメインを形成し、
    前記第一のＦｃドメイン単量体及び前記第四のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第一のＦｃドメイン単量体及び前記第四のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第二のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第二のＦｃドメイン単量体及び前記第七のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第三のＦｃドメイン単量体及び前記第八のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第五のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第五のＦｃドメイン単量体及び前記第九のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれが、前記
    第六のＦｃドメイン単量体及び前記第十のＦｃドメイン単量体間での二量体形成を促進す
    る相補的な二量体形成選択性モジュールを含み、
    前記Ｆｃコンストラクトが、五つ以下のＦｃドメインを含有し、
    前記Ｆｃドメインのうちの少なくとも一つが、（ｉ）一つ又は複数のＦｃ受容体に対す
    る結合親和性、（ｉｉ）エフェクタ機能、（ｉｉｉ）Ｆｃドメインの硫酸化のレベル、（
    ｉｖ）半減期、（ｖ）プロテアーゼ耐性、（ｖｉ）Ｆｃドメイン安定性、及び／又は、（
    ｖｉｉ）分解に対する感受性、のうちの一つ又は複数を変える少なくとも一つのアミノ酸
    修飾を含む、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  104. 前記第一のＦｃドメイン単量体の相補的な二量体形成選択性モジュールが、負電荷をも
    つアミノ酸置換を含み、前記第四のＦｃドメイン単量体の相補的な二量体形成選択性モジ
    ュールが、正電荷をもつアミノ酸置換を含み、前記第二のＦｃドメイン単量体、前記第三
    のＦｃドメイン単量体、前記第五のＦｃドメイン単量体、及び前記第六のＦｃドメイン単
    量体のそれぞれの相補的な二量体形成選択性モジュールが、操作された突起を含み、前記
    第七のＦｃドメイン単量体、前記第八のＦｃドメイン単量体、前記第九のＦｃドメイン単
    量体、及び前記第十のＦｃドメイン単量体のそれぞれの相補的な二量体形成選択性モジュ
    ールが、操作された空洞を含む、請求項１０２又は１０３に記載のＦｃコンストラクト。
  105. リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ１’、及び／又はＬ２’が、長さ３～２００アミノ酸である、
    請求項９９から１０４のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  106. リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ１’、及び／又はＬ２’が、配列番号：１、２、及び３のうち
    のいずれか一つの配列からなる、請求項１０５記載のＦｃコンストラクト。
  107. それを必要とする対象において、自己抗体のクリアランスを促進すること、抗原提示を
    抑制すること、免疫応答を軽減すること、又は、免疫複合体に基づく免疫応答の活性化を
    軽減することにおいて使用するための、請求項１から７０、又は９４から１０６のいずれ
    か一項に記載のＦｃコンストラクト。
  108. 炎症性疾患又は自己免疫疾患又は免疫疾患（例えば、関節リウマチ（ＲＡ）；全身性エ
    リテマトーデス（ＳＬＥ）；ＡＮＣＡ関連血管炎；抗リン脂質抗体症候群；自己免疫性溶
    血性貧血；慢性炎症性脱髄性ニューロパシー；移植における抗アロ（ａｎｔｉ－ａｌｌｏ
    ）、ＧＶＨＤにおける抗自己（ａｎｔｉ－ｓｅｌｆ）、抗置換、ＩｇＧ治療、ＩｇＧパラ
    プロテインのクリアランス；皮膚筋炎；グッドパスチャー症候群；抗体依存性細胞媒介性
    細胞障害により媒介される器官系を標的とするＩＩ型過敏症症候群、例えばギラン・バレ
    ー症候群、ＣＩＤＰ、皮膚筋炎、フェルティ症候群、抗体媒介性拒絶反応、自己免疫性甲
    状腺疾患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性肝疾患；突発性血小板減少性紫斑病；重症筋無力症
    、視神経脊髄炎；天疱瘡及び他の自己免疫性水疱性疾患；シェーグレン症候群；抗体依存
    性ファゴサイトーシスにより媒介される自己免疫性血球減少症及び他の障害；例えば滑膜
    炎、皮膚筋炎、全身性血管炎、糸球体炎、又は血管炎である他のＦｃＲ依存性炎症症候群
    ）を治療することにおいて使用するための、請求項１から７０、又は９４から１０６のい
    ずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  109. 一つ又は複数のＦｃ受容体に対する結合親和性を変えるアミノ酸修飾が、表２のアミノ
    酸修飾のうちのいずれか一つである、請求項１、１２、２８、３３、３９、４１、４７、
    ６２、９４、９５、９９、１００、１０２、及び１０３のいずれか一項に記載のＦｃコン
    ストラクト。
  110. 一つ又は複数のＦｃ受容体に対する結合親和性を変えるアミノ酸修飾が、Ｓ２６７Ｅ／
    Ｌ３２８Ｆであり、該修飾により、ＦｃγＲＩＩｂに対する結合親和性が増加する、請求
    項１０６記載のＦｃコンストラクト。
  111. エフェクタ機能を変えるアミノ酸修飾が、表６のアミノ酸修飾のうちのいずれか一つで
    ある、請求項１、１２、２８、３３、３９、４１、４７、６２、９４、９５、９９、１０
    ０、１０２、及び１０３のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  112. Ｆｃドメインの硫酸化のレベルを変えるアミノ酸修飾が、２４１Ｆ、２４３Ｆ、２４６
    Ｋ、２６０Ｔ、又は３０１Ｒである、請求項１、１２、２８、３３、３９、４１、４７、
    ６２、９４、９５、９９、１００、１０２、及び１０３のいずれか一項に記載のＦｃコン
    ストラクト。
  113. 半減期を変えるアミノ酸修飾が、表４のアミノ酸修飾のうちのいずれか一つである、請
    求項１、１２、２８、３３、３９、４１、４７、６２、９４、９５、９９、１００、１０
    ２、及び１０３のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  114. プロテアーゼ耐性を変えるアミノ酸修飾が、以下のセット：２３３Ｐ、２３４Ｖ、２３
    ５Ａ、及び２３６ｄｅｌ；２３７Ａ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３７Ｄ、２３９Ｄ、及
    び３３２Ｅ；２３７Ｐ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３７Ｑ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；
    ２３７Ｓ、２３９Ｄ、及び３３２Ｅ；２３９Ｄ、２６８Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；２
    ３９Ｄ、３２６Ａ、及び３３３Ａ；２３９Ｄ及び３３２Ｅ；２４３Ｌ、２９２Ｐ、及び３
    ００Ｌ；２６７Ｅ、２６８Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；２６７Ｅ及び３３２Ｅ；２６８
    Ｆ、３２４Ｔ、及び３３２Ｅ；３２６Ａ、３３２Ｅ、及び３３３Ａ；ならびに、３２６Ａ
    及び３３３Ａ、から選択される、請求項１、１２、２８、３３、３９、４１、４７、６２
    、９４、９５、９９、１００、１０２、及び１０３のいずれか一項に記載のＦｃコンスト
    ラクト。
  115. Ｆｃドメイン安定性を変えるアミノ酸修飾が、表８のアミノ酸修飾のうちのいずれか一
    つである、請求項１、１２、２８、３３、３９、４１、４７、６２、９４、９５、９９、
    １００、１０２、及び１０３のいずれか一項に記載のＦｃコンストラクト。
  116. 分解に対するＦｃドメインの感受性を変えるアミノ酸修飾が、Ｃ２３３Ｘ、Ｄ２３４Ｘ
    、Ｋ２３５Ｘ、Ｓ２３６Ｘ、Ｔ２３６Ｘ、Ｈ２３７Ｘ、Ｃ２３９Ｘ、Ｓ２４１Ｘ、及びＧ
    ２４９Ｘであり、Ｘは任意のアミノ酸である、請求項１、１２、２８、３３、３９、４１
    、４７、６２、９４、９５、９９、１００、１０２、及び１０３のいずれか一項に記載の
    Ｆｃコンストラクト。
  117. 以下：
    ａ） 式Ａ－Ｌ－Ｂを有する第一のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａは第一のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌはリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂは第二のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第一のポリペプチドと；
    ｂ） 式Ａ’－Ｌ’－Ｂ’を有する第二のポリペプチドであって、式中、
    ｉ） Ａ’は第三のＦｃドメイン単量体を含み、
    ｉｉ） Ｌ’はリンカーであり、
    ｉｉｉ） Ｂ’は第四のＦｃドメイン単量体を含む、
    前記第二のポリペプチドと；
    ｃ） 第五のＦｃドメイン単量体を含む第三のポリペプチドと；
    ｄ） 第六のＦｃドメイン単量体を含む第四のポリペプチドと
    を含むＦｃコンストラクトであって、
    前記第一のポリペプチドのＡと前記第二のポリペプチドのＡ’とが結合して第一のＦｃ
    ドメインを形成し、前記第一のポリペプチドのＢと前記第五のＦｃドメイン単量体とが結
    合して第二のＦｃドメインを形成し、前記第二のポリペプチドのＢ’と前記第六のＦｃド
    メイン単量体とが結合して第三のＦｃドメインを形成し、
    前記第一のポリペプチド及び前記第二のポリペプチドが、配列番号：５０の配列を含み
    、前記第三のポリペプチド及び前記第四のポリペプチドが、配列番号：４８の配列を含む
    、
    前記Ｆｃコンストラクト。
  118. 前記第一のポリペプチド及び前記第二のポリペプチドが、最大１０個の単一アミノ酸修
    飾をもつ配列番号：５０の配列を含み、第三のポリペプチド及び第四のポリペプチドが、
    最大１０個の単一アミノ酸修飾をもつ配列番号：４８の配列を含む、請求項１１７記載の
    Ｆｃコンストラクト。
  119. 前記Ｆｃドメイン単量体の一つ又は複数が、Ｆｃ ａｎ ＩｇＧ１ Ｆｃドメイン単量
    体である、請求項１から７０、９４から１０６、又は１０９から１１８のいずれか一項に
    記載のＦｃコンストラクト。
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Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG10201913507SA (en) 2014-05-02 2020-02-27 Momenta Pharmaceuticals Inc Compositions and methods related to engineered fc constructs
KR102462084B1 (ko) 2016-05-23 2022-11-02 모멘타 파머슈티컬스 인코포레이티드 유전자 조작 Fc 작제물에 관한 조성물 및 방법
CN110650748B (zh) * 2017-01-06 2024-01-02 动量制药公司 与经工程改造的Fc构建体相关的组合物和方法
CN113395978A (zh) * 2018-07-11 2021-09-14 动量制药公司 与靶向CTLA-4的工程化Fc-抗原结合结构域构建体有关的组合物和方法
CA3106142A1 (en) * 2018-07-11 2020-01-16 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods related to engineered fc-antigen binding domain constructs targeted to cd38
JP2021531757A (ja) * 2018-07-11 2021-11-25 モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 改変されたＦｃ−抗原結合ドメイン構築体に関する組成物および方法
BR112021000391A2 (pt) * 2018-07-11 2021-04-06 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Composições e métodos relacionados a construtos do domínio de ligação fc-antígeno manipulado direcionado a ccr4
US20210317227A1 (en) * 2018-07-11 2021-10-14 Momenta Pharmaceuticals, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS RELATED TO ENGINEERED Fc-ANTIGEN BINDING DOMAIN CONSTRUCTS
MX2021000287A (es) * 2018-07-11 2021-09-08 Momenta Pharmaceuticals Inc Composiciones y métodos relacionados con constructos de dominio de unión a antígeno-fc modificados genéticamente.
US20210284717A1 (en) * 2018-07-11 2021-09-16 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods related to engineered fc-antigen binding domain constructs
WO2020014419A2 (en) * 2018-07-11 2020-01-16 Momenta Pharmaceuticals Inc Compositions and methods related to engineered fc-antigen binding domain constructs targeted to pd-l1
KR102661494B1 (ko) 2019-03-08 2024-04-29 에이치엘만도 주식회사 랙구동형 동력 보조 조향장치
AU2020344164A1 (en) 2019-09-13 2022-04-14 CSL Behring Lengnau AG Recombinant IgG Fc multimers for the treatment of immune complex-mediated kidney disorders
KR20220110818A (ko) 2019-12-06 2022-08-09 체에스엘 베링 렝나우 아게 Fc 다량체의 안정한 조성물
CN111808170A (zh) * 2020-06-29 2020-10-23 江苏为真生物医药技术股份有限公司 多肽、hla-dr蛋白及其制备方法和应用
EP4255933A1 (en) * 2020-12-07 2023-10-11 Invetx, Inc. Compositions for increasing half-life of a therapeutic agent in livestock animals and methods of use

Family Cites Families (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2556219B1 (fr) 1983-12-07 1987-06-26 Merieux Inst Nouveau medicament immunomodulateur, a base de fragments fc d'igg humaines
US5426641A (en) 1994-01-28 1995-06-20 Bell Communications Research, Inc. Adaptive class AB amplifier for TDMA wireless communications systems
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
AU3804397A (en) 1996-06-14 1998-01-07 Smithkline Beecham Corporation Hexameric fusion proteins and uses therefor
US20090074839A1 (en) 1997-01-22 2009-03-19 Marton Milankovits Pharmaceutical Compositions Primarily for the Treatment and Prevention of Genitourinary Infections and their Extragenital Complications
US7951917B1 (en) * 1997-05-02 2011-05-31 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US20020062010A1 (en) * 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
EP1240337B1 (en) 1999-12-24 2006-08-23 Genentech, Inc. Methods and compositions for prolonging elimination half-times of bioactive compounds
US20050089932A1 (en) 2001-04-26 2005-04-28 Avidia Research Institute Novel proteins with targeted binding
US20050249723A1 (en) 2003-12-22 2005-11-10 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites
JP5620626B2 (ja) 2005-03-31 2014-11-05 中外製薬株式会社 会合制御によるポリペプチド製造方法
GB0614780D0 (en) 2006-07-25 2006-09-06 Ucb Sa Biological products
US7825093B2 (en) 2006-10-25 2010-11-02 Amgen Inc. Methods of using OSK1 peptide analogs
BRPI0620639A2 (pt) 2006-12-21 2011-11-22 Micromet Ag anticorpos de cadeia simples biespecìficos e composição farmacêutica compreendendo os mesmos
US20080260738A1 (en) 2007-04-18 2008-10-23 Moore Margaret D Single chain fc, methods of making and methods of treatment
US20090252729A1 (en) 2007-05-14 2009-10-08 Farrington Graham K Single-chain Fc (scFc) regions, binding polypeptides comprising same, and methods related thereto
CA2688490C (en) 2007-06-01 2022-06-21 Scott E. Strome Immunoglobulin constant region fc receptor binding agents
PL2235064T3 (pl) 2008-01-07 2016-06-30 Amgen Inc Sposób otrzymywania cząsteczek przeciwciał z heterodimerycznymi fc z zastosowaniem kierujących efektów elektrostatycznych
JP5555223B2 (ja) 2008-04-02 2014-07-23 マクロジェニクス，インコーポレーテッド ＨＥＲ２／ｎｅｕ特異的抗体およびその使用方法
JP2012504660A (ja) 2008-10-06 2012-02-23 ユニバーシティ オブ シカゴ 細菌ｅａｐ、ｅｍｐおよび／またはａｄｓａタンパク質に関連する組成物および方法
US20100143353A1 (en) 2008-12-04 2010-06-10 Mosser David M POLYPEPTIDES COMPRISING Fc FRAGMENTS OF IMMUNOGLOBULIN G (lgG) AND METHODS OF USING THE SAME
US10865233B2 (en) 2008-12-18 2020-12-15 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. NKG2D-fc for immunotherapy
MX2011007833A (es) 2009-01-23 2011-10-06 Biogen Idec Inc Polipeptidos fc estabilizados con funcion efectora reducida y metodos de uso.
WO2010135534A2 (en) 2009-05-20 2010-11-25 Children's Medical Center Corporation Compositions for the treatment of metastatic cancer and methods of use thereof
US8858948B2 (en) 2009-05-20 2014-10-14 Theraclone Sciences, Inc. Compositions and methods for the therapy and diagnosis of influenza
JP5683581B2 (ja) * 2009-06-30 2015-03-11 リサーチ ディベロップメント ファウンデーション 免疫グロブリンＦｃポリペプチド
SG179196A1 (en) 2009-09-16 2012-04-27 Genentech Inc Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
AU2010303415B2 (en) 2009-10-07 2015-02-19 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
ES2688978T3 (es) 2009-11-23 2018-11-07 Amgen Inc. Anticuerpo monomérico Fc
GB0922209D0 (en) 2009-12-18 2010-02-03 Univ Nottingham Proteins, nucleic acid molecules and compositions
WO2011146902A1 (en) 2010-05-21 2011-11-24 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Bi-specific fusion proteins
EA201291482A1 (ru) 2010-07-09 2013-10-30 Байоджен Айдек Хемофилия Инк. Химерные факторы коагуляции
CN105820256A (zh) 2010-07-28 2016-08-03 格利克尼克股份有限公司 天然人蛋白片段的融合蛋白以产生有序多聚化免疫球蛋白fc组合物
AU2011288412A1 (en) 2010-08-13 2013-02-21 Medimmune Limited Monomeric polypeptides comprising variant Fc regions and methods of use
EP2635607B1 (en) 2010-11-05 2019-09-04 Zymeworks Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain
DK2654780T3 (en) * 2010-12-23 2017-04-10 Janssen Biotech Inc ACTIVE PROTEASE-RESISTANT ANTIBODY-FC MUTANTS
CA2827188C (en) 2011-03-17 2020-02-11 Itai Benhar Bi- and monospecific, asymmetric antibodies and methods of generating the same
CA2812739A1 (en) 2011-03-25 2012-10-04 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Hetero-dimeric immunoglobulins
EP3693000B1 (en) 2012-06-08 2022-03-02 Bioverativ Therapeutics Inc. Procoagulant compounds
CN104582736A (zh) 2012-06-21 2015-04-29 印第安纳大学研究及科技有限公司 Fc效应子功能改变的肠降血糖素受体配体多肽Fc区融合多肽和缀合物
US9683044B2 (en) 2012-08-20 2017-06-20 Gliknik Inc. Molecules with antigen binding and polyvalent FC gamma receptor binding activity
JP2015536317A (ja) 2012-10-17 2015-12-21 リバプール・スクール・オブ・トロピカル・メディスン 免疫調節タンパク質
CN104558194B (zh) 2013-10-17 2018-04-27 泰州迈博太科药业有限公司 一类抗CD20-Flex双功能融合蛋白、其制备方法及用途
US10137170B2 (en) 2013-12-20 2018-11-27 Indiana University Research And Technology Corporation Lipidated incretin receptor ligand human immunoglobulin Fc-region fusion polypeptides
KR20160107190A (ko) 2014-01-15 2016-09-13 에프. 호프만-라 로슈 아게 변형된 FcRn-결합 및 유지된 단백질 A-결합 성질을 갖는 Fc-영역 변이체
CN113248613A (zh) 2014-01-15 2021-08-13 豪夫迈·罗氏有限公司 具有修饰的FCRN结合性质的Fc区变体
SG11201606597QA (en) 2014-03-05 2016-09-29 Ucb Biopharma Sprl Multimeric fc proteins
RU2016139022A (ru) 2014-03-05 2018-04-25 Юсб Биофарма Спрл МУЛЬТИМЕРНЫЕ Fc-БЕЛКИ
SG10201913507SA (en) * 2014-05-02 2020-02-27 Momenta Pharmaceuticals Inc Compositions and methods related to engineered fc constructs
NZ726514A (en) * 2014-05-29 2019-01-25 Macrogenics Inc Tri-specific binding molecules and methods of use thereof
EP3423572B1 (en) 2016-03-02 2023-11-29 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods related to engineered fc constructs
KR102462084B1 (ko) * 2016-05-23 2022-11-02 모멘타 파머슈티컬스 인코포레이티드 유전자 조작 Fc 작제물에 관한 조성물 및 방법
CN110650748B (zh) 2017-01-06 2024-01-02 动量制药公司 与经工程改造的Fc构建体相关的组合物和方法

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