JP2022000030A - Neuronal differentiation promoter, and neuronal differentiation promoting composition - Google Patents
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Abstract
Description
本開示は、神経分化促進剤及び神経分化促進用組成物に関する。 The present disclosure relates to a nerve differentiation promoting agent and a composition for promoting nerve differentiation.
神経細胞の分化促進に関する技術が提案されている。
例えば、特許文献１には、式（I）で表されるアニリン誘導体が、神経分化促進作用を有することが開示されている。
また、近年、アスタキサンチン、セサミンなどの抗酸化作用を有する成分による種々の機能が注目されている。
アスタキサンチンが有する機能に着目した技術として、例えば、特許文献２には、スポーツ適性に関連する認知行動能力の向上剤として、アスタキサンチンおよび／またはそのエステルを含む、認知行動能力の向上剤が開示されている。
また、セサミン系の化合物が有する機能に着目した技術として、例えば、特許文献３には、胡麻に含まれる成分であるセサミンなどのジオキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を有効成分とする抗疲労剤等が開示されている。
Techniques for promoting the differentiation of nerve cells have been proposed.
For example, Patent Document 1 discloses that the aniline derivative represented by the formula (I) has a nerve differentiation promoting action.
Further, in recent years, various functions by components having an antioxidant action such as astaxanthin and sesamin have been attracting attention.
As a technique focusing on the function of astaxanthin, for example,
Further, as a technique focusing on the function of a sesamin-based compound, for example, Patent Document 3 uses a dioxabicyclo [3.3.0] octane derivative such as sesamin, which is a component contained in sesame, as an active ingredient. Anti-fatigue agents and the like are disclosed.
本発明の一実施形態が解決する課題は、新規な神経分化促進剤を提供することである。
また、本発明の別の一実施形態が解決する課題は、上記の神経分化促進剤を含有する神経分化促進用組成物を提供することである。
An object to be solved by one embodiment of the present invention is to provide a novel neuronal differentiation promoter.
Further, an object to be solved by another embodiment of the present invention is to provide a composition for promoting nerve differentiation containing the above-mentioned nerve differentiation promoting agent.
課題を解決するための具体的な手段には、以下の態様が含まれる。
＜１＞アスタキサンチン及びセサミン系化合物を有効成分とする神経分化促進剤。
＜２＞ セサミン系化合物が、セサミン、エピセサミン、又は、セサミン及びエピセサミンの混合物である上記＜１＞に記載の神経分化促進剤。
＜３＞ 認知機能の低下を予防する用途又は認知機能を改善する用途に用いる、上記＜１＞又は＜２＞に記載の神経分化促進剤。
＜４＞ 精神的疲労感を緩和する用途に用いる、上記＜１＞又は＜２＞に記載の神経分化促進剤。
＜５＞ 上記＜１＞〜＜４＞のいずれか１つに記載の神経分化促進剤と、担体と、を含有する、神経分化促進用組成物。
＜６＞ 担体が、２５℃で粉末であり、かつ、ＨＬＢ値が１０以上のショ糖脂肪酸エステルの粉末と、２５℃で液状の油剤と、を含む、上記＜６＞に記載の神経分化促進用組成物。
Specific means for solving the problem include the following aspects.
<1> A nerve differentiation promoting agent containing astaxanthin and a sesamin compound as active ingredients.
<2> The nerve differentiation promoting agent according to <1> above, wherein the sesamin-based compound is sesamin, episesamin, or a mixture of sesamin and episesamin.
<3> The neuronal differentiation promoting agent according to <1> or <2> above, which is used for the purpose of preventing the deterioration of cognitive function or for improving the cognitive function.
<4> The nerve differentiation promoting agent according to <1> or <2> above, which is used for alleviating a feeling of mental fatigue.
<5> A composition for promoting neuronal differentiation, which comprises the neuronal differentiation promoting agent according to any one of <1> to <4> above and a carrier.
<6> The promotion of neural differentiation according to <6> above, wherein the carrier is a powder at 25 ° C. and contains a powder of a sucrose fatty acid ester having an HLB value of 10 or more and a liquid oil agent at 25 ° C. Composition for.
本発明の一実施形態によれば、新規な神経分化促進剤を提供することができる。
また、本発明の別の一実施形態によれば、上記の神経分化促進剤を含有する神経分化促進用組成物を提供することができる。
According to one embodiment of the present invention, a novel neuronal differentiation promoter can be provided.
Further, according to another embodiment of the present invention, it is possible to provide a composition for promoting nerve differentiation containing the above-mentioned nerve differentiation promoting agent.
以下、本開示の神経分化促進剤及びその応用態様について、実施形態を例に説明する。但し、本開示は、以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜変更を加えて実施することができる。 Hereinafter, the neural differentiation-promoting agent of the present disclosure and its application mode will be described by exemplifying an embodiment. However, the present disclosure is not limited to the following embodiments, and can be carried out with appropriate modifications within the scope of the object of the present invention.
本開示において「〜」を用いて示された数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値をそれぞれ最小値及び最大値として含む範囲を意味する。
本開示中に段階的に記載されている数値範囲において、ある数値範囲で記載された上限値又は下限値は、他の段階的な記載の数値範囲の上限値又は下限値に置き換えてもよい。 また、本開示中に記載されている数値範囲において、ある数値範囲で記載された上限値又は下限値は、実施例に示されている値に置き換えてもよい。
本開示において、各成分の量は、各成分に該当する物質が、組成物中に複数種存在する場合には、特に断らない限り、組成物中に存在する複数種の物質の合計量を意味する。
The numerical range indicated by using "~" in the present disclosure means a range including the numerical values before and after "~" as the minimum value and the maximum value, respectively.
In the numerical range described stepwise in the present disclosure, the upper limit value or the lower limit value described in one numerical range may be replaced with the upper limit value or the lower limit value of another numerical range described stepwise. Further, in the numerical range described in the present disclosure, the upper limit value or the lower limit value described in a certain numerical range may be replaced with the value shown in the examples.
In the present disclosure, the amount of each component means, when a plurality of substances corresponding to each component are present in the composition, the total amount of the plurality of substances present in the composition unless otherwise specified. do.
本開示において「ＨＬＢ（Hydrophile-Lipophile Balance）値」は、成分として市販品を使用し、かつ、市販品のカタログ等の文献において、その市販品のＨＬＢ値が明確に示されている場合には、カタログ等の文献に示された値を採用する。
使用する成分が市販品ではない場合、或いは、市販であってもＨＬＢ値がカタログ等の文献に明確に示されていない場合には、本明細書におけるＨＬＢ値としては、Ｇｒｉｆｆｉｎの算出式によって求められる値を採用する。Ｇｒｉｆｆｉｎの算出式では、Ｓ（エステルのケン化価）の値と、Ｎ（エステルを構成する脂肪酸の中和価）の値とを用いて、下記式に従ってＨＬＢ値が計算される。ＨＬＢ値は２０に近いほど親水的であることを意味し、０に近いほど親油的であることを意味する。
ＨＬＢ値＝２０（１−Ｓ／Ｎ）
In the present disclosure, the "HLB (Hydrophile-Lipophile Balance) value" refers to a case where a commercially available product is used as an ingredient and the HLB value of the commercially available product is clearly indicated in a document such as a catalog of the commercially available product. , The values shown in the literature such as catalogs are adopted.
If the component to be used is not a commercially available product, or if the HLB value is not clearly shown in a document such as a catalog even if it is commercially available, the HLB value in the present specification is determined by the calculation formula of Griffin. Adopt the value to be. In the Griffin calculation formula, the HLB value is calculated according to the following formula using the value of S (saponification value of the ester) and the value of N (neutralization value of the fatty acid constituting the ester). The closer the HLB value is to 20, the more hydrophilic it is, and the closer it is to 0, the more lipophilic it is.
HLB value = 20 (1-S / N)
本開示において「グリセリン脂肪酸エステル」との表現には、グリセリン単位及び脂肪酸単位をそれぞれ１つずつ含むグリセリン脂肪酸エステル、いずれか一方を複数含むグリセリン脂肪酸エステル、いずれも複数含むグリセリン脂肪酸エステルの全てが包含され、これらのグリセリン脂肪酸エステルを区別せずに用いる場合に使用される。 In the present disclosure, the expression "glycerin fatty acid ester" includes all of a glycerin fatty acid ester containing one glycerin unit and one fatty acid unit, a glycerin fatty acid ester containing one or more of them, and a glycerin fatty acid ester containing a plurality of both. And are used when these glycerin fatty acid esters are used without distinction.
本開示において「工程」との語は、独立した工程だけではなく、他の工程と明確に区別できない場合であってもその工程の所期の目的が達成されれば、本用語に含まれる。 In the present disclosure, the term "process" is included in this term not only as an independent process but also as long as the intended purpose of the process is achieved even if it cannot be clearly distinguished from other processes.
本開示において「神経分化」との語は、未分化細胞からの神経細胞への分化（即ち、神経新生）及び神経幹細胞又は神経細胞からの神経突起の伸長（即ち、神経突起伸長）を包含する。 In the present disclosure, the term "neurite differentiation" includes differentiation of undifferentiated cells into neurons (ie, neurogenesis) and extension of neural stem cells or neurites from neurons (ie, neurite outgrowth). ..
［神経分化促進剤］
本開示に係る神経分化促進剤は、アスタキサンチン及びセサミン系化合物を有効成分とする。本開示に係る神経分化促進剤は、脳内の組織における神経分化を促進させる剤である。
[Neurodifferentiation promoter]
The neuronal differentiation promoting agent according to the present disclosure contains astaxanthin and a sesamin-based compound as active ingredients. The nerve differentiation promoting agent according to the present disclosure is an agent that promotes nerve differentiation in tissues in the brain.
本開示に係る神経分化促進剤は、アスタキサンチンとセサミン系化合物との特異的な組み合わせにより、神経分化において顕著に優れた促進効果が発揮されることを見出した本発明者らの知見に基づく。
本開示の神経分化促進剤が、上記の効果を奏する理由としては、本発明者らは以下のように推測している。但し、下記の推測は、本開示の神経分化促進剤が発揮する効果を限定的に解釈するものではなく、一例として説明するものである。
The neuronal differentiation promoting agent according to the present disclosure is based on the findings of the present inventors who have found that a specific combination of astaxanthin and a sesamin-based compound exerts a remarkably excellent promoting effect on neural differentiation.
The present inventors speculate that the reason why the neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure exerts the above-mentioned effects is as follows. However, the following speculation does not limitly interpret the effects exerted by the neurodifferentiation promoting agents of the present disclosure, but is described as an example.
本発明者らは、本開示の神経分化促進剤による神経分化の顕著に優れた促進効果には、アスタキサンチンとセサミン系化合物との体内おける作用の相違及び体内への吸収性の相違の両方が相関していると考えている。作用の相違については、本発明者らは、アスタキサンチンは、細胞の活性化に寄与しうる要素であることを確認している。一方、セサミン系化合物については、本発明者らは、脳内における神経分化に寄与する要素であるとの知見を有する。さらに、吸収性の相違については、本発明者らは、セサミン系化合物はアスタキサンチンに比して体内への吸収速度が速く、その一方で、アスタキサンチンはセサミン系化合物に比して、吸収ピークが緩やかであることを確認している。また、本発明者らは、アスタキサンチンは、未分化の神経細胞に神経突起を生じさせるといった、神経分化の誘導作用を有さないことを確認している。 The present inventors correlate both the difference in the action of astaxanthin and the sesamin-based compound in the body and the difference in the absorption into the body with the remarkably excellent promoting effect of the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure. I think I'm doing it. Regarding the difference in action, the present inventors have confirmed that astaxanthin is an element that can contribute to cell activation. On the other hand, regarding sesamin compounds, the present inventors have found that they are elements that contribute to neural differentiation in the brain. Furthermore, regarding the difference in absorbability, the present inventors have found that sesamin-based compounds have a faster absorption rate into the body than astaxanthin, while astaxanthin has a slower absorption peak than sesamin-based compounds. I have confirmed that. In addition, the present inventors have confirmed that astaxanthin does not have an action of inducing nerve differentiation, such as causing neurites in undifferentiated nerve cells.
上記の相違を有するアスタキサンチン及びセサミン系化合物を組み合わせることで、体内に摂取された本開示の神経分化促進剤は、以下の段階１、段階２及び段階３を経て、神経分化の優れた促進効果を発揮すると推測される。
段階１：セサミン系化合物が脳内における細胞に吸収され、細胞の神経分化に作用し始める。
段階２：セサミン系化合物により上記の段階１の状態になった細胞にアスタキサンチンが吸収され、アスタキサンチンの作用により細胞の活性（即ち、細胞内の代謝）が高まる。なお、細胞の活性化は、細胞内のエネルギー産生代謝経路に関わるＮＡＤＨ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）及びＮＡＤＰＨ（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸）の量を測定することで確認することができる。細胞の活性化は、比色分析を用いて、細胞の代謝亢進の有無を確認することによって確認することもできる。
段階３：段階２において、アスタキサンチンの作用により細胞の活性が高まることで、セサミン系化合物による細胞の神経分化が促進する。
By combining astaxanthin and a sesamin-based compound having the above differences, the neurodifferentiation-promoting agent of the present disclosure taken into the body undergoes the
Step 1: Sesamin compounds are absorbed by cells in the brain and begin to act on the neural differentiation of cells.
Step 2: Astaxanthin is absorbed by the cells in the state of step 1 above by the sesamin compound, and the activity of the cells (that is, intracellular metabolism) is enhanced by the action of astaxanthin. The activation of cells can be confirmed by measuring the amounts of NADH (nicotinamide adenine dinucleotide) and NADPH (nicotinamide adenine dinucleotide phosphate) involved in the intracellular energy production and metabolic pathways. Cell activation can also be confirmed by using colorimetric analysis to confirm the presence or absence of increased metabolism of the cells.
Step 3: In
後述するとおり、本開示の神経分化促進剤は、２５℃で粉末であり、かつＨＬＢ値が１０以上のショ糖脂肪酸エステルと、２５℃で液状の油剤とを含む特定の態様の神経分化促進用組成物とした場合に、アスタキサンチンの体内での吸収性をより高めることができる。このため、この態様の神経分化促進用組成物においては、上記の段階２において、アスタキサンチンが、より高濃度で細胞に吸収されて、細胞の活性化がより高まり、段階３における神経分化がより促進するものと考えられる。
As will be described later, the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure is for promoting nerve differentiation in a specific embodiment including a sucrose fatty acid ester which is powder at 25 ° C. and has an HLB value of 10 or more and an oil agent which is liquid at 25 ° C. When used as a composition, the absorption of astaxanthin in the body can be further enhanced. Therefore, in the composition for promoting neural differentiation in this embodiment, astaxanthin is absorbed by the cells at a higher concentration in the above-mentioned
このような、本開示の神経分化促進剤による効果は、アスタキサンチン又はセサミン系化合物を単独で用いた剤によっては得られない、アスタキサンチン及びセサミン系化合物を有効成分とする本開示の神経分化促進剤に特異的な相乗効果である。例えば、既述の特許文献１（特開２０１２−２２９１８５号公報）等の公知の文献には、アスタキサンチン及びセサミン系化合物の組み合わせによる神経分化促進作用についての着目はない。 Such an effect of the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure cannot be obtained by an agent using astaxanthin or a sesamin compound alone, and the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure containing astaxanthin and a sesamin compound as an active ingredient can be used. It is a unique synergistic effect. For example, known documents such as Patent Document 1 (Japanese Unexamined Patent Publication No. 2012-229185) described above do not pay attention to the neuronal differentiation promoting action by the combination of astaxanthin and the sesamin compound.
なお、本開示の神経分化促進剤によって得られる上記の相乗効果は、上述した本開示の神経分化促進効果が確認できる方法であれば特に限定されないが、遺伝子発現の変化、或いは、細胞の代謝、増殖、分化の変化等により確認することができる。具体的な確認方法の一例としては、以下の方法が挙げられる。
即ち、無処理の神経細胞、アスタキサンチン単独、セサミン系化合物単独、又はアスタキサンチン及びセサミン系化合物の併用にて処理した神経細胞に対して、下記（１）又は（２）に例示する方法を適用することにより確認することができる。
（１）当該細胞からＲＮＡを抽出する。得られたＲＮＡを網羅的な遺伝子発現解析またはＰＣＲ（Polymerase Chain Reaction）法により解析し、アスタキサンチン及びセサミン系化合物のみで変動が認められる遺伝子の発現を確認する。
（２）当該細胞の代謝、増殖、分化の変化等を確認する。
The above-mentioned synergistic effect obtained by the above-mentioned neuronal differentiation-promoting agent of the present disclosure is not particularly limited as long as the above-mentioned method can confirm the above-mentioned neuronal differentiation-promoting effect, but changes in gene expression or cell metabolism, etc. It can be confirmed by changes in proliferation and differentiation. As an example of a specific confirmation method, the following method can be mentioned.
That is, the method illustrated in (1) or (2) below is applied to untreated neurons, astaxanthin alone, sesamin compounds alone, or neurons treated with astaxanthin and sesamin compounds in combination. Can be confirmed by.
(1) RNA is extracted from the cell. The obtained RNA is analyzed by comprehensive gene expression analysis or PCR (Polymerase Chain Reaction) method, and the expression of genes in which fluctuations are observed only with astaxanthin and sesamin compounds is confirmed.
(2) Confirm changes in metabolism, proliferation, differentiation, etc. of the cells.
本開示の神経分化促進効果の確認において、上記（１）又は（２）の方法を採用する場合、（１）及び（２）の方法の両方を行なうことが好ましい。 When the above method (1) or (2) is adopted in the confirmation of the neuronal differentiation promoting effect of the present disclosure, it is preferable to perform both the methods (1) and (2).
上記（１）の方法において発現を確認する遺伝子としては、神経分化との関連が確認されている遺伝子が選択される。上記遺伝子の例としては、ＰＡＸ６遺伝子、ＲＡＢ１３遺伝子、ＰＴＢＰ２遺伝子、ＣＲＥＢＢＰ遺伝子、ＰＰＭＡ１遺伝子、ＭＥＦ２Ａ遺伝子、及び、ＣＲＥＢ３Ｌ２遺伝子からなる群から選択される少なくとも１種の遺伝子が好適に挙げられる。 As the gene whose expression is confirmed by the method (1) above, a gene whose expression has been confirmed to be associated with neural differentiation is selected. Preferable examples of the above genes include at least one gene selected from the group consisting of PAX6 gene, RAB13 gene, PTBP2 gene, CREBBP gene, PPMA1 gene, MEF2A gene, and CREB3L2 gene.
本開示においては、神経分化促進に関連する遺伝子の発現を確認する方法として、ＰＡＸ６遺伝子、ＲＡＢ１３遺伝子、ＰＴＢＰ２遺伝子、ＣＲＥＢＢＰ遺伝子、ＰＰＭＡ１遺伝子、ＭＥＦ２Ａ遺伝子、及び、ＣＲＥＢ３Ｌ２遺伝子からなる群から選択される少なくとも１種の遺伝子の発現を確認する方法を用いる。 In the present disclosure, as a method for confirming the expression of a gene related to promotion of neural differentiation, at least selected from the group consisting of PAX6 gene, RAB13 gene, PTBP2 gene, CREBBP gene, PPMA1 gene, MEF2A gene, and CREB3L2 gene. A method for confirming the expression of one gene is used.
ＰＡＸ６、ＲＡＢ１３、ＰＴＢＰ２、ＣＲＥＢＢＰ、ＰＰＭＡ１、ＭＥＦ２Ａ、及び、ＣＲＥＢ３Ｌ２については、神経分化に関して、以下の事項に関する寄与が確認されている。したがって、神経細胞を本開示の神経分化促剤により処理した結果として、上記の遺伝子の発現が確認されることは、本開示の神経分化促剤が神経分化の促進に寄与又は関与していることを示唆する。
ＰＡＸ６：神経幹細胞の増殖及び分化。
ＲＡＢ１３：神経突起の伸長。
ＰＴＢＰ２：ＲＮＡスプライシング制御因子。発生期の脳形成過程に深く関わる。
ＣＲＥＢＢＰ：神経新生。
ＰＰＭＡ１：神経細胞の分化及び生存。
ＭＥＦ２Ａ：神経細胞の発達・分化や成熟神経細胞におけるシナプス機能の調節。
Regarding PAX6, RAB13, PTBP2, CREBBP, PPMA1, MEF2A, and CREB3L2, contributions to the following matters have been confirmed regarding neural differentiation. Therefore, the fact that the expression of the above genes is confirmed as a result of treating nerve cells with the nerve differentiation promoter of the present disclosure indicates that the nerve differentiation promoter of the present disclosure contributes to or is involved in the promotion of nerve differentiation. Suggests.
PAX6: Neural stem cell proliferation and differentiation.
RAB13: Elongation of neurites.
PTBP2: RNA splicing regulator. It is deeply involved in the brain formation process during development.
CREBBP: Neurogenesis.
PPMA1: Nerve cell differentiation and survival.
MEF2A: Development and differentiation of nerve cells and regulation of synaptic function in mature nerve cells.
上記（２）の方法の例には、神経細胞の代謝促進を確認する方法が含まれる。本開示においては、神経細胞の代謝促進を確認する方法としてＭＴＴ試験を用いる。ＭＴＴ試験は、ＭＴＴ（3-(4,5-di-methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide）を用いた公知の比色分析試験である。 Examples of the method (2) above include a method for confirming the promotion of metabolism of nerve cells. In the present disclosure, the MTT test is used as a method for confirming the promotion of metabolism of nerve cells. The MTT test is a known colorimetric test using MTT (3- (4,5-di-methylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide).
ここで、本開示は、アスタキサンチン及びセサミン系化合物を含み、ＰＡＸ６遺伝子、ＲＡＢ１３遺伝子、ＰＴＢＰ２遺伝子、ＣＲＥＢＢＰ遺伝子、ＰＰＭＡ１遺伝子、ＭＥＦ２Ａ遺伝子、及び、ＣＲＥＢ３Ｌ２遺伝子からなる群から選択される少なくとも１種の遺伝子の発現を促進する遺伝子発現促進剤（以下では、単に「遺伝子発現促進剤」とも称する。）を包含する。
また、本開示は、アスタキサンチン及びセサミン系化合物を含む、神経細胞の代謝促進剤（以下では、単に「代謝促進剤」とも称する。）を包含する。
本開示の遺伝子発現促進剤又は代謝促進剤が含むアスタキサンチン及びセサミン系化合物の種類、含有比率等の詳細は、本開示の神経分化促進剤が含むアスタキサンチン及びセサミン系化合物に関する事項と同様であり、その具体的な内容については後述する。
Here, the present disclosure comprises at least one gene selected from the group consisting of PAX6 gene, RAB13 gene, PTBP2 gene, CREBBP gene, PPMA1 gene, MEF2A gene, and CREB3L2 gene, including astaxanthin and sesamine-based compounds. Includes a gene expression-promoting agent that promotes expression (hereinafter, also simply referred to as "gene expression-promoting agent").
The present disclosure also includes a nerve cell metabolism-promoting agent (hereinafter, also simply referred to as "metabolism-promoting agent") containing astaxanthin and a sesamin-based compound.
Details of the types, content ratios, etc. of astaxanthin and sesamin compounds contained in the gene expression promoter or metabolism promoter of the present disclosure are the same as those of the matters relating to astaxanthin and sesamin compounds contained in the neurodifferentiation promoter of the present disclosure. The specific contents will be described later.
本開示の神経分化促進剤を摂取させる対象は、ヒトであっても、ヒト以外の動物又は細胞であってもよいが、ヒトであることが好ましい。 The subject to which the neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure is ingested may be a human or a non-human animal or cell, but is preferably a human.
本開示の神経分化促進剤は、医療用途に用いてもよく、非医療用途に用いてもよい。 The neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure may be used for medical use or may be used for non-medical use.
本開示の神経分化促進剤による神経分化の促進効果は、認知機能低下の予防又は認知機能の改善に寄与する。したがって、本開示の神経分化促進剤の好適な応用態様は、認知機能の低下を予防する用途又は認知機能を改善する用途に用いる態様を含む。
認知機能とは、ヒトの知的機能を総称した概念であり、理解、判断、記憶、注意、知覚、学習、言語などが含まれる。
The effect of promoting neural differentiation by the neural differentiation promoting agent of the present disclosure contributes to prevention of cognitive decline or improvement of cognitive function. Therefore, preferred application embodiments of the neurodifferentiation-promoting agents of the present disclosure include embodiments used for preventing cognitive decline or improving cognitive function.
Cognitive function is a concept that collectively refers to human intellectual function, and includes understanding, judgment, memory, attention, perception, learning, language, and the like.
本開示において、「認知機能の低下を予防する」とは、本開示の神経分化促進剤の摂取により、認知機能レベルの低下が認められない摂取者において、認知機能レベルの低下を抑制することを意味する。
本開示において、「認知機能を改善する」とは、本開示の神経分化促進剤の摂取により、認知機能レベルの低下が認められる摂取者において、本開示の神経分化促進剤の摂取により、摂取前に比して、認知機能レベルを向上させること、認知機能レベルを維持すること、又は、認知機能レベルの低下の進行を遅延させること、或いは、認知機能レベルの低下が認められない摂取者において、摂取前に比して、認知機能レベルを更に向上させることを意味する。
In the present disclosure, "preventing a decrease in cognitive function" means to suppress a decrease in cognitive function level in an ingestor who does not have a decrease in cognitive function level due to ingestion of the neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure. means.
In the present disclosure, "improving cognitive function" means "improving cognitive function" before ingestion by ingestion of the neuronal differentiation promoter of the present disclosure in an ingestor in which a decrease in cognitive function level is observed by ingestion of the neuronal differentiation promoter of the present disclosure. Ingestors who improve cognitive function levels, maintain cognitive function levels, delay the progression of cognitive function level decline, or do not observe cognitive function level decline. It means that the level of cognitive function is further improved compared to before ingestion.
また、認知機能低下の予防又は認知機能の改善の用途は、本開示の神経分化促進剤を、いわゆる機能性表示食品に適用する場合おいては、例えば、「認知機能の低下が気になる方に」、「記憶力の低下が気になる方に」、「理解力の低下が気になる方に」、「判断力の低下が気になる方に」、「対応力の低下が気になる方に」、「処理能力の低下が気になる方に」、「認識力の低下が気になる方に」、「認知機能の衰え防止に」「理解力の衰え防止に」、「判断力の衰え防止に」、「対応力の衰え防止に」、「処理能力の衰え防止に」「認識力の衰え防止に」等の表示によって示すことができる。 In addition, for the purpose of preventing cognitive decline or improving cognitive function, when the neurodifferentiation promoter of the present disclosure is applied to so-called functional foods, for example, "People who are concerned about cognitive decline". "For those who are worried about poor memory", "For those who are worried about poor comprehension", "For those who are worried about poor judgment", "For those who are worried about poor responsiveness" For those who are concerned about the decline in processing capacity, for those who are concerned about the decline in cognitive ability, for the prevention of cognitive decline, for the prevention of comprehension decline, and for judgment. It can be indicated by indications such as "to prevent the decline of responsiveness", "to prevent the decline of responsiveness", "to prevent the decline of processing capacity", and "to prevent the decline of cognitive ability".
本開示の神経分化促進剤の摂取により、既述の段階１、段階２及び段階３を経て、脳内における神経分化作用が促進され、これにより、段階４：脳の認知機能の低下の予防又は認知機能の改善がなされると考えられる。
Ingestion of the neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure promotes the neuronal differentiation action in the brain through the above-mentioned
本開示の神経分化促進剤を、認知機能の低下の予防又は認知機能を改善する用途に用いる場合、摂取させる対象者は、健常者であっても、認知障害を有する者であってもよい。本開示の神経分化促進剤は、軽度認知障害（Mild Cognitive Impairment：ＭＣＩ）の状態にある者に摂取させた場合、より効果的に作用することができる。 When the neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure is used for the purpose of preventing deterioration of cognitive function or improving cognitive function, the subject to be ingested may be a healthy person or a person with cognitive impairment. The neurodifferentiation promoters of the present disclosure can act more effectively when ingested by persons with mild cognitive impairment (MCI).
また、本開示は、アスタキサンチン及びセサミン系化合物を有効成分として含有する神経分化促進剤（本開示の神経分化促進剤）を用いて、認知機能の低下を改善する方法を含む。 The present disclosure also includes a method for improving cognitive decline by using a neuronal differentiation promoting agent (the neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure) containing astaxanthin and a sesamin-based compound as active ingredients.
本開示の神経分化促進剤を認知機能低下の抑制又は改善の用途に適用する場合、認知機能低下の抑制又は改善の効果は、認知機能検査試験として、Cognitrax（コグニトラックス）認知機能検査試験（以下、単にCognitraxと称する。）を用いて確認することができる。Cognitraxは、米国のCNS Vital Signs社が開発したCNS Vital Signs検査試験に基づく認知機能検査試験である。本開示においては、（株）ヘルス・ソリューションが提供する「Cognitrax ベーシック」を用いて評価した認知機能検査を指標として用いた。 When the neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure is applied to the use of suppressing or ameliorating cognitive decline, the effect of suppressing or ameliorating cognitive decline is as a cognitive function test, Cognitrax cognitive function test (hereinafter referred to as “Cognitrax”). , Simply referred to as Cognitrax). Cognitrax is a cognitive function test based on the CNS Vital Signs test developed by CNS Vital Signs of the United States. In this disclosure, the cognitive function test evaluated using "Cognitrax Basic" provided by Health Solutions Co., Ltd. was used as an index.
脳機能には、言語記憶、視覚記憶、学習などの単純な機能の他に、下記例に示すような高次な機能が含まれる。
・認識又は感知した情報を、的確に、理解及び対応した上で、運転、楽器の演奏などの認知機能を要する器用な運動へと繋げる力。
・物事又は情報を、判断及び認識し、素早くかつ正確に処理する力。
・単純又は複雑な物事に対する注意力。
・物事に対する柔軟な思考力。
・状況を判断しての意思決定力。
Brain functions include simple functions such as language memory, visual memory, and learning, as well as higher-order functions as shown in the following examples.
-The ability to accurately understand and respond to recognized or sensed information, and then connect it to dexterous exercises that require cognitive functions such as driving and playing musical instruments.
-The ability to judge and recognize things or information and process them quickly and accurately.
• Attention to simple or complex things.
・ Flexible thinking ability for things.
・ Decision-making ability to judge the situation.
上記例の中でも、特に、「認識又は感知した情報を、的確に、理解及び対応した上で、運転、楽器の演奏などの認知機能を要する器用な動作へと繋げる力」、並びに、「物事又は情報を、判断及び認識し、素早くかつ正確に処理する力」の２つは、単純な記憶力または学習能力と異なり、より高次な認知機能と言える。本開示の神経分化促進剤は、このような高次な認知機能に対しての低下予防又は改善に優れた効果を有する。
換言すれば、本開示の神経分化促進剤を認知機能の低下予防又は改善する用途に用いる場合、認知機能には、器用な動作に必要な理解力、判断力、対応力及び処理能力からなる群より選択される少なくとも１つの能力が含まれる。
Among the above examples, in particular, "the ability to accurately understand and respond to recognized or sensed information and connect it to dexterous movements that require cognitive functions such as driving and playing musical instruments" and "things or "The ability to judge and recognize information and process it quickly and accurately" can be said to be higher-order cognitive functions, unlike simple memory or learning ability. The neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure has an excellent effect in preventing or improving such a decrease in higher cognitive function.
In other words, when the neurodifferentiation promoter of the present disclosure is used for the purpose of preventing or improving the deterioration of cognitive function, the cognitive function is a group consisting of comprehension, judgment, responsiveness and processing ability necessary for dexterous movement. Includes at least one ability more selected.
Cognitraxは、「言語記憶テスト」、「視覚記憶テスト、「指たたきテスト」、「Symbol Digit Coding（ＳＤＣ）テスト」、「ストループテスト」「注意シフトテスト」及び「持続処理テスト」からなる７つの試験の結果から、「総合記憶力」、「言語記憶力」、「視覚記憶力」、「認知機能速度」、「反応時間」、「総合注意力」、「認知柔軟性」、「処理速度」、「実行機能」、「単純注意力」及び「運動速度」の１１項目を評価する検査試験である。
上記項目のうち、「認知機能速度」は「認識又は感知した情報を、的確に、理解及び対応した上で、運転又は楽器の演奏などの認知機能を要する器用な動作へと繋げる力」に、「処理速度」は「物事又は情報を、判断及び認識し、素早くかつ正確に処理する力」を端的に評価しうる項目である。
ここで、認知機能速度は、運転、楽器の演奏などにも関連するため、表現力を二次的に評価しうるとも考えられる。
Cognitrax consists of seven tests: "Language Memory Test", "Visual Memory Test", "Finger Tap Test", "Symbol Digit Coding (SDC) Test", "Stroop Test", "Attention Shift Test" and "Continuous Processing Test". From the results of, "Comprehensive memory", "Language memory", "Visual memory", "Cognitive function speed", "Reaction time", "Comprehensive attention", "Cognitive flexibility", "Processing speed", "Execution function" This is an inspection test that evaluates 11 items of "simple attention" and "exercise speed".
Of the above items, "cognitive function speed" refers to "the ability to accurately understand and respond to recognized or sensed information and to connect it to dexterous movements that require cognitive functions such as driving or playing musical instruments.""Processingspeed" is an item that can be simply evaluated as "the ability to judge and recognize things or information and process things quickly and accurately".
Here, since the cognitive function speed is related to driving, playing a musical instrument, etc., it is considered that the expressive power can be evaluated secondarily.
このような多面的かつ高度な検査試験を用いることで、本開示の神経分化促進剤の摂取により、器用な動作に必要な理解力、判断力、対応力及び処理能力に相関する高次の認知機能の低下が有意に予防されること、又は、有意に改善されることを確認できる。本開示の神経分化促進剤の摂取は、特に、認知機能速度及び処理速度の項目において有意な改善効果が得られる。 By using such a multifaceted and advanced test, the ingestion of the neurodifferentiation promoter of the present disclosure correlates with the comprehension, judgment, responsiveness, and processing ability required for dexterous movements. It can be confirmed that the decrease in function is significantly prevented or significantly improved. Ingestion of the neurodifferentiation promoter of the present disclosure has a significant improvement effect, especially in the items of cognitive function rate and processing rate.
なお、認知機能検査試験の他の例としては、CogHealth（コグヘルス）が挙げられる。CogHealthとは、パソコン画面上でのトランプを用いた認知機能検査試験であり、「単純反応」「選択反応」「作動記憶」「遅延再生」および「注意分散」の５つの評価項目から構成されている。具体的には、「画面上のトランプが裏から赤にひっくり返ったらボタンを押す」、「画面上に映し出されたトランプの色が赤か黒かを判断してボタンを押す」、「画面上のトランプが一つ前のカードと同じであればボタンを押す」、「同一課題において、画面上に同じトランプが表示されたことがあればボタンを押す」、「上下に動くトランプが、あらかじめ設定された線を越えたらボタンを押す」等のテストを行う。しかしながら、CogHealthでは、いずれの項目もボタンを押す／押さないという単純な作業を元に、その平均反応時間を評価しているため、単純な作業に基づいた認知機能についての確認ができるのみであり、Cognitraxの如く複雑な作業に基づいた多面的な高次の認知機能の確認をすることはできない。 Another example of the cognitive function test is CogHealth. CogHealth is a cognitive function test using playing cards on a personal computer screen, and consists of five evaluation items: "simple reaction", "selective reaction", "working memory", "delayed reproduction", and "attention dispersion". There is. Specifically, "press the button when the playing cards on the screen turn over from the back to red", "determine whether the color of the playing cards projected on the screen is red or black and press the button", "screen If the upper playing card is the same as the previous card, press the button "," If the same playing card is displayed on the screen in the same task, press the button "," The playing cards that move up and down are in advance Perform a test such as "press the button when you cross the set line". However, since CogHealth evaluates the average reaction time based on the simple task of pressing / not pressing any button, it is only possible to confirm the cognitive function based on the simple task. It is not possible to confirm multifaceted higher cognitive functions based on complex tasks such as Cognitrax.
本開示の神経分化促進剤による神経分化の促進効果は、精神的疲労感、すなわち、主観的な精神的疲労の緩和に寄与する。したがって、本開示の神経分化促進剤の好適な応用態様の一つは、精神的疲労感を緩和する用途に用いる態様である。
本開示において精神的疲労感の緩和とは、本開示の神経分化促進剤の摂取により、主観的な精神的疲労のレベルが摂取前に比して低下すること、及び、低下を促進することを意味する。
The effect of promoting neural differentiation by the neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure contributes to a feeling of mental fatigue, that is, alleviation of subjective mental fatigue. Therefore, one of the preferred application embodiments of the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure is an embodiment used for alleviating mental fatigue.
In the present disclosure, alleviation of mental fatigue means that the level of subjective mental fatigue is lowered and promoted by ingestion of the neurodifferentiation promoter of the present disclosure as compared with that before ingestion. means.
また、精神的疲労感の緩和の用途は、本開示の神経分化促進剤を、いわゆる機能性表示食品に適用する場合おいては、例えば、「疲労感が気になる方に」、「疲れやすい方に」「疲労を自覚している方に」、「疲労感を感じている方に」、「日常生活で生じる一過性の疲労感が気になる方に」等の表示によって示すことができる。 In addition, when the neurodifferentiation promoter of the present disclosure is applied to so-called functional foods, for example, "for those who are worried about fatigue", "easy to get tired". "For those who are aware of fatigue", "For those who are feeling tired", "For those who are concerned about the transient fatigue that occurs in daily life", etc. can.
本開示の神経分化促進剤の摂取により、既述の段階１、段階２及び段階３を経て、脳内における神経分化作用が促進され、これにより、段階４’：精神的疲労感が緩和されると考えられる。
By ingesting the neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure, the neuronal differentiation action in the brain is promoted through the above-mentioned
また、本開示は、アスタキサンチン及びセサミン系化合物を有効成分として含有する神経分化促進剤（本開示の神経分化促進剤）を用いて、精神的疲労感を緩和する方法を含む。 The present disclosure also includes a method for alleviating a feeling of mental fatigue by using a nerve differentiation promoting agent (the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure) containing astaxanthin and a sesamin-based compound as active ingredients.
精神的疲労感とは、精神的なストレスにより引き起こされる疲労感を意味する。上述した認知機能の低下は、日常生活における各種の作業において、精神的なストレスを招来する。したがって、認知機能の低下は、精神的疲労感を引き起こす要因に含まれる。 Mental fatigue means a feeling of fatigue caused by mental stress. The above-mentioned deterioration of cognitive function causes mental stress in various tasks in daily life. Therefore, cognitive decline is included in the factors that cause mental fatigue.
精神的疲労感の例としては、具体的には、パーソナルコンピュータ（ＰＣ）等の視覚表示端末（Visual Display Terminals：ＶＤＴ）の操作作業における精神的ストレスにより引き起こされる疲労感が挙げられる。 Specific examples of the feeling of mental fatigue include a feeling of fatigue caused by mental stress in the operation work of visual display terminals (VDT) such as a personal computer (PC).
本開示の神経分化促進剤の１日あたりの摂取量は、摂取対象者の状況（年齢、体重、等）により適宜設定しうるが、アスタキサンチンが０．１ｍｇ以上３０ｍｇ以下（好ましくは１ｍｇ以上２０ｍｇ以下、より好ましくは３ｍｇ以上１２ｍｇ以下）であり、かつ、セサミン系化合物が、０．１ｍｇ以上５０ｍｇ以下（好ましくは３ｍｇ以上３０ｍｇ以下、より好ましくは５ｍｇ以上２０ｍｇ以下）となる量であることが好ましい。 The daily intake of the neurodifferentiation promoter of the present disclosure can be appropriately set depending on the situation (age, body weight, etc.) of the subject, but astaxanthin is 0.1 mg or more and 30 mg or less (preferably 1 mg or more and 20 mg or less). , More preferably 3 mg or more and 12 mg or less), and the amount of the sesamin compound is 0.1 mg or more and 50 mg or less (preferably 3 mg or more and 30 mg or less, more preferably 5 mg or more and 20 mg or less).
本開示の神経分化促進剤の摂取時期及び摂取回数は、特に限定されないが、アスタキサンチンの吸収率がより効率的である観点から、一日一回、食後での摂取であることが好ましい。
本開示の神経分化促進剤の摂取方法としては、経口摂取であることが好ましい。
The timing and frequency of ingestion of the neurodifferentiation promoter of the present disclosure are not particularly limited, but from the viewpoint of more efficient absorption rate of astaxanthin, it is preferably taken once a day after meals.
As a method of ingesting the neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure, oral ingestion is preferable.
本開示の神経分化促進剤は、後述する神経分化促進用組成物の態様とすることが好ましい。本開示の神経分化促進剤に適用しうる剤形は、神経分化促進用組成物の項にて説明する剤形に関する事項と同様である。 The nerve differentiation promoting agent of the present disclosure is preferably in the form of a composition for promoting nerve differentiation described later. The dosage form applicable to the neurodifferentiation promoting agent of the present disclosure is the same as the matters relating to the dosage form described in the section of the composition for promoting neuronal differentiation.
本開示の神経分化促進剤が含有する有効成分であるアスタキサンチン及びセサミン系化合物について詳細に説明する。 The astaxanthin and sesamin compounds which are the active ingredients contained in the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure will be described in detail.
＜アスタキサンチン＞
本開示の神経分化促進剤における有効成分は、その構成要素の一つとしてアスタキサンチンを含む。
アスタキサンチンは、アスタキサンチン及びその誘導体（アスタキサンキチンのエステル等）から選ばれる少なくとも一方を包含する。本明細書では、アスタキサンチン及びその誘導体を総称して「アスタキサンチン」という。
<Astaxanthin>
The active ingredient in the neurodifferentiation promoter of the present disclosure contains astaxanthin as one of its components.
Astaxanthin includes at least one selected from astaxanthin and its derivatives (esters of astaxanthin, etc.). In the present specification, astaxanthin and its derivatives are collectively referred to as "astaxanthin".
アスタキサンチンとしては、植物類、藻類、甲殻類、バクテリア等の天然物に由来するアスタキサンチンの他、常法に従って得られるアスタキサンチンの合成品を用いることもできる。
アスタキサンチンは、赤色酵母ファフィア、緑藻ヘマトコッカス、海洋性細菌、オキアミ等の培養物から抽出することができる。
品質及び生産性の観点からは、アスタキサンチンとしては、ヘマトコッカス藻からの抽出物（以下、「ヘマトコッカス藻抽出物」と称する。）又はオキアミからの抽出物（以下、「オキアミ抽出物」とも称する。）に由来するアスタキサンチンが好ましく、ヘマトコッカス藻抽出物に由来するアスタキサンチンが特に好ましくい。
アスタキサンチンは、油剤に溶解された状態であることが好ましい。
As astaxanthin, astaxanthin derived from natural products such as plants, algae, crustaceans, and bacteria, as well as synthetic astaxanthin obtained by a conventional method can be used.
Astaxanthin can be extracted from cultures of red yeast fafia, green alga Hematococcus, marine bacteria, krill and the like.
From the viewpoint of quality and productivity, astaxanthin is also referred to as an extract from Haematococcus algae (hereinafter referred to as "Haematococcus algae extract") or an extract from Okiami (hereinafter also referred to as "Okiami extract"). Astaxanthin derived from.) Is preferable, and astaxanthin derived from Haematococcus algae extract is particularly preferable.
Astaxanthin is preferably in a state of being dissolved in an oil agent.
ヘマトコッカス藻の具体例としては、ヘマトコッカス・プルビアリス（Haematococcus pluvialis）、ヘマトコッカス・ラキュストリス（Haematococcus lacustris）、ヘマトコッカス・カペンシス（Haematococcus capensis）、ヘマトコッカス・ドロエバゲンシス（Haematococcus droebakensis）、ヘマトコッカス・ジンバビエンシス（Haematococcus zimbabwiensis）等が挙げられる。
これらの中でも、ヘマトコッカス藻としては、ヘマトコッカス・プルビアリス（Haematococcus pluvialis）が好ましい。
Specific examples of Haematococcus algae include Haematococcus pluvialis, Haematococcus lacustris, Haematococcus capensis, Haematococcus capensis, Haematococcus capensis, Haematococcus capensis, and Haematococcus droebagensis. Ensis (Haematococcus zimbabwiensis) and the like can be mentioned.
Among these, as the Haematococcus algae, Haematococcus pluvialis is preferable.
ヘマトコッカス藻抽出物は、上記のヘマトコッカス藻を、必要に応じて、特開平５−６８５８５号公報等に開示された方法により細胞壁を破砕して、アセトン、エーテル、クロロホルム、アルコール（エタノール、メタノール等）などの有機溶剤、又は超臨界状態の二酸化炭素等の抽出媒体を加えることによって得ることができる。 The Haematococcus algae extract is obtained by disrupting the cell wall of the above-mentioned Haematococcus algae by a method disclosed in JP-A-5-68585 and the like, if necessary, and using acetone, ether, chloroform, alcohol (ethanol, methanol). Etc.), or by adding an extraction medium such as carbon dioxide in a supercritical state.
ヘマトコッカス藻抽出物としては、市販品を用いてもよい。
ヘマトコッカス藻抽出物の市販品の例としては、（株）富士フイルムヘルスケアラボラトリーのＡＳＴＯＴＳ（登録商標）−Ｓ、ＡＳＴＯＴＳ（登録商標）−５Ｏ、ＡＳＴＯＴＳ（登録商標）−１０Ｏ等、富士化学工業（株）のアスタリール（登録商標）オイル５０Ｆ、アスタリール（登録商標）オイル５Ｆ等、東洋酵素化学（株）のＢｉｏＡｓｔｉｎ ＳＣＥ７などが挙げられる。ＡＳＴＯＴＳはアスタッツとも称される。
本開示におけるアスタキサンチンとしては、アルコール等の有機溶剤を用いない方法により、天然物より抽出したヘマトコッカス藻抽出物を好適に用いることができる。そのようなヘマトコッカス藻抽出物の例としては、上記のＡＳＴＯＴＳ（登録商標）−１０Ｏが挙げられる。
As the Haematococcus algae extract, a commercially available product may be used.
Examples of commercially available products of Haematococcus algae extract include Astaxanthin (registered trademark) -S, ASTOTS (registered trademark) -5O, ASTOTS (registered trademark) -10O, etc. of Fujifilm Healthcare Laboratory Co., Ltd. Examples thereof include Astaxanthin (registered trademark) oil 50F, Astaxanthin (registered trademark) oil 5F, etc., and BioAston SCE7 of Toyo Enzyme Chemistry Co., Ltd. ASTOTS is also called ASTOTS.
As astaxanthin in the present disclosure, a haematococcus algae extract extracted from a natural product can be preferably used by a method that does not use an organic solvent such as alcohol. Examples of such Haematococcus algae extract include the above-mentioned ASTOTS®-10O.
ヘマトコッカス藻抽出物中におけるアスタキサンチンの色素純分としての含有率は、製造時の取り扱いの観点から、好ましくは０．００１質量％〜５０質量％であり、より好ましくは０．０１質量％〜２５質量％である。
なお、ヘマトコッカス藻抽出物は、特開平２−４９０９１号公報に記載の色素と同様に、色素純分として、アスタキサンチン又はそのエステル体を含有してもよい。
The content of astaxanthin as a pure pigment in the Haematococcus algae extract is preferably 0.001% by mass to 50% by mass, more preferably 0.01% by mass to 25% from the viewpoint of handling at the time of production. It is mass%.
The Haematococcus algae extract may contain astaxanthin or an ester thereof as a pure dye, similar to the dye described in JP-A No. 2-49091.
オキアミ抽出物の市販品の例としては、クリルオイル、（株）マリン大王のＡｓｔａｘ−ＳＴ（商品名）等が挙げられる。 Examples of commercially available products of krill extract include krill oil, Astax-ST (trade name) of Marine Daio Co., Ltd., and the like.
＜セサミン系化合物＞
本開示の神経分化促進剤における有効成分は、その構成要素の一つとしてセサミン系化合物を含む。
セサミン系化合物は、セサミン及びその類縁体を含む化合物群の総称であり、本開示の神経分化促進剤における有効成分には、これらの化合物群から選択される少なくとも１種が含まれる。
<Sesamin compounds>
The active ingredient in the neuronal differentiation promoter of the present disclosure contains a sesamin-based compound as one of its components.
Sesamin-based compounds are a general term for a group of compounds including sesamin and its analogs, and the active ingredient in the neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure includes at least one selected from these compound groups.
セサミン系化合物の具体例としては、セサミン、エピセサミン、セサミノール、エピセサミノール、セサモリン等を例示できる。セサミン系化合物は、これらの化合物の立体異性体又はラセミ体であってもよい。セサミン系化合物は、セサミン、エピセサミン、又は、セサミン及びエピセサミンの混合物であってもよい。
また、セサミン系化合物としては、例えば、特開平４−９３３１号公報に記載されたジオキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体もセサミン類縁体として挙げることができる。セサミン系化合物の代謝物（例えば、特開２００１−１３９５７９号公報に記載の化合物）も、効果が得られることを示す限りにおいて、本開示におけるセサミン類縁体に包含される。
Specific examples of the sesamin-based compound include sesamin, episesamin, sesaminol, episesaminol, sesamolin and the like. The sesamin-based compounds may be stereoisomers or racemates of these compounds. The sesamin-based compound may be sesamin, episesamin, or a mixture of sesamin and episesamin.
Further, as the sesamin-based compound, for example, the dioxabicyclo [3.3.0] octane derivative described in JP-A-4-9331 can also be mentioned as a sesamin analog. Metabolites of sesamin-based compounds (for example, the compounds described in JP-A-2001-139579) are also included in the sesamin analogs in the present disclosure as long as they show that the effect can be obtained.
セサミン系化合物の製造方法は、特に制限されず、公知の方法を用いればよい。例えば、セサミンであれば、ゴマ油から公知の方法によって抽出した抽出物であってもよい。
セサミン系化合物としては、市販品を用いてもよい。市販品の例としては、バイオアクティブズジャパン（株）製のセサヴィタ、ヴィデヤジャパン（株）製のセサミエキス末等が挙げられる。
The method for producing the sesamin-based compound is not particularly limited, and a known method may be used. For example, sesamin may be an extract extracted from sesame oil by a known method.
As the sesamin-based compound, a commercially available product may be used. Examples of commercially available products include Sesavita manufactured by Bioactives Japan Co., Ltd., Sesame extract powder manufactured by Videya Japan Co., Ltd., and the like.
本開示の神経分化促進剤において、アスタキサンチンとセサミン系化合物との含有比率（アスタキサンチン：セサミン系化合物）は、質量基準で、０．１：５０〜５０：０．１が好ましく、１：２０〜２０：１がより好ましく、３：１２〜１２：３がさらに好ましい。 In the nerve differentiation promoting agent of the present disclosure, the content ratio of astaxanthin to the sesamin-based compound (astaxanthin: sesamin-based compound) is preferably 0.1:50 to 50:0.1, preferably 1:20 to 20 on a mass basis. 1 is more preferable, and 3: 12-12: 3 is even more preferable.
［神経分化促進用組成物］
本開示に係る神経分化促進用組成物は、上述した本開示の神経分化促進剤と、担体と、を含有する。神経分化促進用組成物の例としては、医薬用組成物及び食品組成物が挙げられる。
[Composition for promoting neural differentiation]
The composition for promoting neuronal differentiation according to the present disclosure contains the above-mentioned neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure and a carrier. Examples of the composition for promoting neuronal differentiation include a pharmaceutical composition and a food composition.
神経分化促進用組成物が含有する担体としては、神経分化促進用組成物の態様に応じて適宜選択することができる。
ここで、本開示において「担体」とは、有効成分とは反応しない固体又は液体の化合物であり、かつ、組成物の形態の維持に寄与するものを指す。
The carrier contained in the composition for promoting neural differentiation can be appropriately selected depending on the embodiment of the composition for promoting neural differentiation.
Here, the term "carrier" as used herein refers to a solid or liquid compound that does not react with the active ingredient and that contributes to the maintenance of the form of the composition.
担体としては、例えば、乳化剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、湿潤剤、油剤、溶剤等が挙げられる。担体は、神経分化促進剤及びその他の成分の分散媒として機能する成分であってもよい。また、後述するショ糖脂肪酸エステルは、担体の一態様に包含される成分である。 Examples of the carrier include emulsifiers, excipients, binders, disintegrants, lubricants, thickeners, wetting agents, oils, solvents and the like. The carrier may be a component that functions as a dispersion medium for a neuronal differentiation promoter and other components. Further, the sucrose fatty acid ester described later is a component included in one aspect of the carrier.
また、神経分化促進用組成物は、その他の添加剤を含有してもよい。その他の添加剤は、組成物の態様に応じて適宜選択することができる。その他の添加剤の例としては、防腐剤、ｐＨ調整剤、安定剤、酸化防止剤、着色剤、消泡剤、甘味料、香料等が挙げられる。 In addition, the composition for promoting nerve differentiation may contain other additives. Other additives can be appropriately selected depending on the embodiment of the composition. Examples of other additives include preservatives, pH regulators, stabilizers, antioxidants, colorants, defoamers, sweeteners, fragrances and the like.
また、その他の添加剤としては、摂取によって健康に有益な効果（健康維持、健康増進、生活習慣病の予防又は改善などの効果）をもたらすことが期待される機能性成分が挙げられる。 In addition, examples of other additives include functional ingredients that are expected to bring about beneficial effects on health (effects such as health maintenance, health promotion, prevention or improvement of lifestyle-related diseases) by ingestion.
このような機能性成分としては、各種ビタミン、ミネラル（亜鉛等）、クロセチン、コラーゲン（加水分解コラーゲン、水溶性コラーゲン等）、オルニチン、レスベラトロール、クロロゲン酸、カフェ酸、ユビキノン（コエンザイムＱ１０等）、フラボノイド（フラバノン、フラボン、フラボノール、イソフラボン、カテキン、アントシアニン等）、リグナン（セサミン系化合物は含まない。）、クルクミンなどが挙げられる。機能性成分は、植物由来成分でもよく、動物由来成分でもよく、酵母による発酵生産物でも、食用に適した化学合成品であってもよい。 Such functional components include various vitamins, minerals (zinc, etc.), crocetin, collagen (hydrolyzed collagen, water-soluble collagen, etc.), ornithine, resveratrol, chlorogenic acid, caffeic acid, ubiquinone (coenzyme Q10, etc.). , Flavonoids (flavonols, flavones, flavonols, isoflavones, catechins, anthocyanins, etc.), lignans (does not contain sesamine compounds), curcumin, etc. The functional component may be a plant-derived component, an animal-derived component, a fermentation product of yeast, or a chemically synthesized product suitable for food.
神経分化促進用組成物を、医薬組成物に適用する場合でれば、担体又は添加剤として組成物に含有される成分は、薬学上許容される成分から選択すればよい。そのような成分の例としては、第１６改正日本薬局方等に記載される成分が挙げられる。
また、神経分化促進用組成物を、食品組成物に適用する場合であれば、担体及び添加剤として組成物に含有される成分は、一般的に食品に使用することが認められている成分から選択すればよい
When the composition for promoting neuronal differentiation is applied to a pharmaceutical composition, the components contained in the composition as a carrier or an additive may be selected from pharmaceutically acceptable components. Examples of such ingredients include the ingredients described in the 16th revised Japanese Pharmacopoeia and the like.
In addition, when the composition for promoting neural differentiation is applied to a food composition, the components contained in the composition as a carrier and an additive are from the components generally approved for use in food. Just select
神経分化促進用組成物中の神経分化促進剤の含有量は、神経分化促進剤の１日当たりの摂取量を既述の量に設定しうる量であれば特に制限されない。例えば、神経分化促進剤の含有量は、神経分化促進用組成物の全質量に対して、０．０１質量％〜１００質量％未満とすることができ、０．１質量％〜１０質量％であってもよく、０．５質量％〜５質量％であってもよい。 The content of the nerve differentiation promoting agent in the composition for promoting nerve differentiation is not particularly limited as long as the daily intake of the nerve differentiation promoting agent can be set to the above-mentioned amount. For example, the content of the nerve differentiation promoting agent can be 0.01% by mass to less than 100% by mass, and 0.1% by mass to 10% by mass, based on the total mass of the nerve differentiation promoting composition. It may be 0.5% by mass to 5% by mass.
神経分化促進用組成物の剤形としては、例えば、錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤（ソフトカプセル剤又はハードカプセル剤）、液剤、懸濁剤、乳剤等の経口摂取しうる剤形が挙げられる。
これらの中でも、ソフトカプセル剤の剤形とすることが好ましい。剤形をソフトカプセル剤とすることにより、組成物に含まれる各成分の安定性を保持することができる。さらに、組成物に含まれる成分に由来する臭いを遮蔽することができる。
As the dosage form of the composition for promoting neural differentiation, for example, tablets, coated tablets, pills, powders, granules, capsules (soft capsules or hard capsules), liquids, suspensions, emulsions and the like can be orally ingested. Dosage form can be mentioned.
Among these, the dosage form of a soft capsule is preferable. By using a soft capsule as the dosage form, the stability of each component contained in the composition can be maintained. Furthermore, the odor derived from the components contained in the composition can be shielded.
本開示の神経分化促進用組成物を適用してなる食品組成物は、健康食品、機能性食品、栄養補助食品等として好適に用いることができる。これらの食品の形態は、固形状、半固形状、液状、ゲル状等のいかなる形態であってもよい。また、食品組成物は、サプリメントとして提供されることも好ましい。 The food composition to which the composition for promoting neural differentiation of the present disclosure is applied can be suitably used as a health food, a functional food, a dietary supplement and the like. The form of these foods may be any form such as solid, semi-solid, liquid, gel and the like. It is also preferable that the food composition is provided as a supplement.
神経分化促進用組成物の摂取量としては、神経分化促進剤の１日当たりの摂取量が既述の量となる量であればよい。 The intake amount of the composition for promoting nerve differentiation may be any amount as long as the daily intake of the nerve differentiation promoting agent is the amount described above.
本開示の神経分化促進用組成物の好適な一実施態様は、本開示の神経分化促進剤と、担体として、２５℃で粉末であり、かつ、ＨＬＢ値が１０以上のショ糖脂肪酸エステルの粉末（以下、単に「ショ糖脂肪酸エステル」ともいう。）と、２５℃で液状の油剤（以下、「特定油剤」ともいう。）と、を含む組成物である態様である。
本実施態様の組成物において、ショ糖脂肪酸エステルの粉末は、特定油剤を含む分散媒に、分散していることが好ましい。
本実施態様の組成物は、食品組成物であることが好ましい。
A preferred embodiment of the composition for promoting neuronal differentiation of the present disclosure is a powder of a sucrose fatty acid ester having an HLB value of 10 or more, which is a powder at 25 ° C. as a carrier and the neuronal differentiation promoting agent of the present disclosure. It is an embodiment of the composition comprising (hereinafter, also simply referred to as “sucrose fatty acid ester”) and an oil agent liquid at 25 ° C. (hereinafter, also referred to as “specific oil agent”).
In the composition of the present embodiment, the sucrose fatty acid ester powder is preferably dispersed in a dispersion medium containing a specific oil agent.
The composition of this embodiment is preferably a food composition.
本実施態様の組成物では、特定油剤を含む分散媒中にショ糖脂肪酸エステルが含まれることで、水に不溶なアスタキサンチンの水との親和性が、ショ糖脂肪酸エステルにより補完されることから、アスタキサンチンの体内での吸収性が向上するものと考えられる
したがって、本実施態様の組成物とすることで、アスタキサンチンの体内での吸収性がより向上し、既述のセサミン系化合物の作用と相俟って、神経分化の促進効果がより向上する。
In the composition of the present embodiment, since the sucrose fatty acid ester is contained in the dispersion medium containing the specific oil agent, the affinity of astaxanthin insoluble in water with water is complemented by the sucrose fatty acid ester. Therefore, it is considered that the absorption of astaxanthin in the body is improved. Therefore, by using the composition of the present embodiment, the absorption of astaxanthin in the body is further improved, and the action of the sesamine-based compound described above is combined with the action of the above-mentioned sesamine-based compound. Therefore, the effect of promoting neural differentiation is further improved.
以下、本開示の神経分化促進用組成物が、上記の実施態様である場合における好適な成分について、詳細に説明する。 Hereinafter, suitable components in the case where the composition for promoting neural differentiation of the present disclosure is the above-described embodiment will be described in detail.
＜神経分化促進剤＞
神経分化促進剤としては、既述した神経分化促進剤に関する事項が同様に適用されるため、ここでは説明を省略する。
<Nervous differentiation promoter>
As the nerve differentiation promoting agent, the above-mentioned matters relating to the nerve differentiation promoting agent are similarly applied, and thus the description thereof will be omitted here.
＜ショ糖脂肪酸エステルの粉末＞
本実施形態の組成物は、２５℃で粉末であり、かつ、ＨＬＢ値が１０以上のショ糖脂肪酸エステルの粉末を含む。このような特定のショ糖脂肪酸エステルの粉末を含むことにより、アスタキサンチンの体内での吸収性が向上する。
ショ糖脂肪酸エステルの粉末は、１種単独であってもよく、２種以上の併用であってもよい。
<Sucrose fatty acid ester powder>
The composition of the present embodiment is a powder at 25 ° C. and contains a powder of a sucrose fatty acid ester having an HLB value of 10 or more. By including the powder of such a specific sucrose fatty acid ester, the absorption of astaxanthin in the body is improved.
The sucrose fatty acid ester powder may be used alone or in combination of two or more.
ショ糖脂肪酸エステルの粉末は、２５℃で液状の油剤（特定油剤）を含む分散媒中に分散されていることが好ましい。ショ糖脂肪酸エステルは、２５℃で粉末である。ショ糖脂肪酸エステルは２５℃で粉末であることにより、特定油剤を含む分散媒中で良好に分散する。
ショ糖脂肪酸エステルの粉末は、目開き１８０μｍ（約８３メッシュ）のフィルタを通過する大きさであることが好ましく、目開き１５０μｍ（約１００メッシュ）のフィルタを通過する大きさであることがより好ましい。
The sucrose fatty acid ester powder is preferably dispersed in a dispersion medium containing a liquid oil agent (specific oil agent) at 25 ° C. The sucrose fatty acid ester is a powder at 25 ° C. Since the sucrose fatty acid ester is a powder at 25 ° C., it disperses well in a dispersion medium containing a specific oil agent.
The sucrose fatty acid ester powder is preferably sized to pass through a filter with an opening of 180 μm (about 83 mesh), and more preferably sized to pass through a filter with an opening of 150 μm (about 100 mesh). ..
ショ糖脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、アスタキサンチンの体内での吸収性の観点から、１０以上であり、好ましくは１２以上であり、より好ましくは１４以上である。
また、ショ糖脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、両親媒性を示す観点から、好ましくは１９以下である。
The HLB value of the sucrose fatty acid ester is 10 or more, preferably 12 or more, and more preferably 14 or more, from the viewpoint of absorption of astaxanthin in the body.
Further, the HLB value of the sucrose fatty acid ester is preferably 19 or less from the viewpoint of showing amphipathicity.
ショ糖脂肪酸エステルを構成する脂肪酸の炭素数は、例えば、両親媒性を示す観点から、８以上であることが好ましく、１０〜１８であることがより好ましい。
ショ糖脂肪酸エステルの具体例としては、ショ糖ラウリン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖オレイン酸エステル等が挙げられる。
これらの中でも、ショ糖脂肪酸エステルとしては、アスタキサンチンの体内での吸収性の観点から、ショ糖ラウリン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、及びショ糖ステアリン酸エステルから選ばれる少なくとも１種であることが好ましく、ショ糖ラウリン酸エステルであることが特に好ましい。
The number of carbon atoms of the fatty acid constituting the sucrose fatty acid ester is preferably 8 or more, and more preferably 10 to 18, from the viewpoint of showing amphipathicity, for example.
Specific examples of the sucrose fatty acid ester include sucrose lauric acid ester, sucrose myristic acid ester, sucrose palmitic acid ester, sucrose stearic acid ester, sucrose oleic acid ester and the like.
Among these, the sucrose fatty acid ester may be at least one selected from sucrose lauric acid ester, sucrose palmitic acid ester, and sucrose stearic acid ester from the viewpoint of absorption of astaxanthin in the body. Sucrose lauric acid ester is preferable, and sucrose lauric acid ester is particularly preferable.
ショ糖脂肪酸エステルの粉末の市販品としては、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｓ１１７０（商品名、ショ糖ステアリン酸エステル、ＨＬＢ値：約１１（カタログ値）、三菱化学フーズ（株））、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｓ１５７０（商品名、ショ糖ステアリン酸エステル、ＨＬＢ値：約１５（カタログ値）、三菱化学フーズ（株））、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｓ１６７０（商品名、ショ糖ステアリン酸エステル、ＨＬＢ値：約１６（カタログ値）、三菱化学フーズ（株））、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｐ１５７０（商品名、ショ糖パルミチン酸エステル、ＨＬＢ値：約１５（カタログ値）、三菱化学フーズ（株））、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｐ１６７０（商品名、ショ糖パルミチン酸エステル、ＨＬＢ値：約１６（カタログ値）、三菱化学フーズ（株））、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｌ１６９５（商品名、ショ糖ラウリン酸エステル、ＨＬＢ値：約１６（カタログ値）等が挙げられる。 Commercially available powdered sucrose fatty acid esters include Ryoto (registered trademark) Sugar Ester S1170 (trade name, sucrose stearic acid ester, HLB value: approx. 11 (catalog value), Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd.), Ryoto ( Registered trademark) Sugar ester S1570 (trade name, sucrose stearic acid ester, HLB value: approx. 15 (catalog value), Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd.), Ryoto (registered trademark) sugar ester S1670 (trade name, sucrose stearic acid) Ester, HLB value: Approx. 16 (catalog value), Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd., Ryoto (registered trademark) Sugar ester P1570 (trade name, sucrose palmitate, HLB value: Approx. 15 (catalog value), Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd., Ryoto (registered trademark) Sugar Ester P1670 (trade name, sucrose palmitate, HLB value: approx. 16 (catalog value), Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd.), Ryoto (registered trademark) Sugar Ester L1695 (Commercial name, sucrose lauric acid ester, HLB value: about 16 (catalog value) and the like can be mentioned.
ショ糖脂肪酸エステルの粉末の含有量は、例えば、アスタキサンチンの体内での吸収性の観点から、神経分化促進用組成物の全量に対して、０．１質量％以上であることが好ましく、０．５質量％以上であることがより好ましい。
また、ショ糖脂肪酸エステルの粉末の含有量は、例えば、摂取のしやすさの観点から、神経分化促進用組成物の全量に対して、３０質量％以下であることが好ましく、２０質量％以下であることがより好ましい。
The content of the sucrose fatty acid ester powder is preferably 0.1% by mass or more based on the total amount of the composition for promoting neuronal differentiation, for example, from the viewpoint of absorption of astaxanthin in the body. It is more preferably 5% by mass or more.
Further, the content of the sucrose fatty acid ester powder is preferably 30% by mass or less, preferably 20% by mass or less, based on the total amount of the composition for promoting neural differentiation, for example, from the viewpoint of ease of ingestion. Is more preferable.
ショ糖脂肪酸エステルの粉末の含有量は、例えば、アスタキサンチンの体内での吸収性の観点から、アスタキサンチン１００質量部に対して、１００質量部以上であることが好ましく、３００質量部以上であることがより好ましい。
また、ショ糖脂肪酸エステルの粉末の含有量は、例えば、摂取のしやすさの観点から、アスタキサンチン１００質量部に対して、１００００質量部以下であることが好ましく、８０００質量部以下であることがより好ましい。
The content of the sucrose fatty acid ester powder is preferably 100 parts by mass or more, preferably 300 parts by mass or more, with respect to 100 parts by mass of astaxanthin, for example, from the viewpoint of absorption of astaxanthin in the body. More preferred.
Further, the content of the sucrose fatty acid ester powder is preferably 10,000 parts by mass or less, and 8,000 parts by mass or less with respect to 100 parts by mass of astaxanthin, for example, from the viewpoint of ease of ingestion. More preferred.
ＨＬＢ値が１０以上のショ糖脂肪酸エステルは、油に溶解しないため、特定油剤を含む分散媒中では、粉末の状態で存在する。したがって、特定油剤を含む分散媒中に、ショ糖脂肪酸エステルの粉末の存在を確認することができれば、ショ糖脂肪酸エステルのＨＬＢ値が１０以上であるといえる。確認方法としては、光学顕微鏡、遠心分離、溶媒（例えば、ショ糖脂肪酸エステルを溶解させずに、油性成分を溶解させる溶媒）抽出、これらの組み合わせ等が挙げられる。
また、ＨＬＢ値が１０以上のショ糖脂肪酸エステルは、油に溶解しないため、対象物の水抽出物を、液体クロマトグラフ法（ＬＣ：Liquid Chromatography）、質量分析法（ＭＳ：Mass Spectrometry）、赤外分光法（ＩＲ：Infrared Spectroscopy）、核磁気共鳴法（ＮＭＲ：Nuclear Magnetic Resonance）、これらの方法の組み合わせ等を用いて分析することにより、対象物にショ糖脂肪酸エステルが含まれていることを確認することができる。
Since the sucrose fatty acid ester having an HLB value of 10 or more is not soluble in oil, it exists in a powder state in a dispersion medium containing a specific oil agent. Therefore, if the presence of the sucrose fatty acid ester powder can be confirmed in the dispersion medium containing the specific oil agent, it can be said that the HLB value of the sucrose fatty acid ester is 10 or more. Examples of the confirmation method include an optical microscope, centrifugation, extraction of a solvent (for example, a solvent that dissolves an oily component without dissolving the sucrose fatty acid ester), a combination thereof, and the like.
In addition, since sucrose fatty acid esters having an HLB value of 10 or more do not dissolve in oil, the water extract of the object can be obtained by liquid chromatography (LC: Liquid Chromatography), mass spectrometry (MS: Mass Spectrometry), or red. By analyzing using external spectroscopy (IR: Infrared Spectroscopy), nuclear magnetic resonance (NMR), a combination of these methods, etc., it is possible to determine that the object contains sucrose fatty acid ester. You can check.
＜２５℃で液状の油剤＞
本実施態様の組成物は、２５℃で液状の油剤（特定油剤）を含む。特定油剤は、ショ糖脂肪酸エステルの粉末の分散媒として機能する。
特定油剤は、１種単独であってもよく、２種以上の併用であってもよい。
特定油剤は、神経分化促進用組成物に適用でき、かつ、２５℃で液体の油剤であれば、特に制限されない。
なお、本開示において、「２５℃で液体の油剤」とは、融点が２５℃未満である油剤を意味する。
<Liquid oil at 25 ° C>
The composition of this embodiment contains an oil agent (specific oil agent) that is liquid at 25 ° C. The specific oil agent functions as a dispersion medium for the sucrose fatty acid ester powder.
The specific oil agent may be used alone or in combination of two or more.
The specific oil agent is not particularly limited as long as it can be applied to a composition for promoting nerve differentiation and is a liquid oil agent at 25 ° C.
In the present disclosure, the "liquid oil at 25 ° C." means an oil having a melting point of less than 25 ° C.
特定油剤としては、油脂、高級脂肪酸等が挙げられる。
油脂としては、オリーブ油、アボカド油、トウモロコシ油、ナタネ油、卵黄油、小麦胚芽油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、胚芽油、サフラワー油（即ち、紅花油）、パーム油、ココナッツ油、アーモンド油、サザンカ油、ツバキ油、月見草油、グレープシード油等の植物由来の油脂が挙げられる。また、特定油剤としては、これらの植物由来の油脂から抽出されるトコフェロール、トコトリエノール等も挙げられる。
高級脂肪酸としては、炭素数が８以上の脂肪酸であれば、特に制限されるものではなく、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、ベへニン酸、リノール酸、リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸等が挙げられる。
これらの中でも、特定油剤としては、食品組成物に含まれる各成分（アスタキサンチン、ショ糖脂肪酸エステルの粉末等）を安定に配合することができ、また、食品組成物の剤形として、ソフトカプセル剤を選択した場合に、ソフトカプセル化に適した液物性（粘度等）を得ることができる点において、サフラワー油及びココナッツ油から選ばれる少なくとも１種が好ましく、工業的に扱い易いという点において、特にサフラワー油が好ましい。
Examples of the specific oil agent include fats and oils, higher fatty acids and the like.
Oils and fats include olive oil, avocado oil, corn oil, rapeseed oil, egg yolk oil, wheat germ oil, flaxseed oil, safflower oil, cottonseed oil, soybean oil, peanut oil, brown seed oil, kaya oil, rice bran oil, germ oil, Examples thereof include plant-derived fats and oils such as safflower oil (that is, red flower oil), palm oil, coconut oil, almond oil, southern ka oil, camellia oil, evening primrose oil, and grapeseed oil. Moreover, as a specific oil agent, tocopherol, tocotrienol and the like extracted from these plant-derived fats and oils can also be mentioned.
The higher fatty acid is not particularly limited as long as it is a fatty acid having 8 or more carbon atoms, and is not particularly limited. Examples thereof include eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid.
Among these, as the specific oil agent, each component (astaxanthin, safflower fatty acid ester powder, etc.) contained in the food composition can be stably blended, and as the dosage form of the food composition, a soft capsule is used. When selected, at least one selected from safflower oil and coconut oil is preferable in that liquid physical properties (viscosity, etc.) suitable for soft encapsulation can be obtained, and it is particularly easy to handle industrially. Safflower oil is preferred.
特定油剤の含有量は、例えば、製造時におけるハンドリング性の観点から、アスタキサンチン１００質量部に対して、１００質量部以上であることが好ましく、２００質量部以上であることがより好ましい。
また、特定油剤の含有量は、例えば、摂取のしやすさの観点から、アスタキサンチン１００質量部に対して、１００００質量部以下であることが好ましく、８０００質量部以下であることがより好ましい。
The content of the specific oil agent is preferably 100 parts by mass or more, and more preferably 200 parts by mass or more with respect to 100 parts by mass of astaxanthin, for example, from the viewpoint of handleability at the time of production.
Further, the content of the specific oil agent is preferably 10,000 parts by mass or less, and more preferably 8,000 parts by mass or less with respect to 100 parts by mass of astaxanthin, for example, from the viewpoint of ease of ingestion.
＜ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル＞
本実施態様の組成物は、ＨＬＢ値が１０以上のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（以下、単に「ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル」ともいう。）を更に含むことが好ましい。本実施形態の組成物は、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを更に含むことにより、アスタキサンチンの体内での吸収性がより向上する。
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む場合、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは１種単独で含まれてもよく、２種以上が併用されてもよい。
<Polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester>
It is preferable that the composition of the present embodiment further contains a polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester having an HLB value of 10 or more (hereinafter, also simply referred to as “polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester”). By further containing the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester in the composition of the present embodiment, the absorption of astaxanthin in the body is further improved.
When the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is contained, the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester may be contained alone or in combination of two or more.
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、１０以上であることが好ましく、１２以上であることがより好ましい。
また、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、両親媒性を示す観点から、好ましくは１９以下である。
The HLB value of the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is preferably 10 or more, more preferably 12 or more.
The HLB value of the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is preferably 19 or less from the viewpoint of showing amphipathicity.
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルのオキシエチレン基の平均付加数は、例えば、親疎水性バランスの観点から、１０〜３０であることが好ましく、１５〜２５であることが好ましい。 The average number of oxyethylene groups added to the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is, for example, preferably 10 to 30 and preferably 15 to 25 from the viewpoint of the hydrophobicity balance.
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルとしては、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウリン酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチン酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアリン酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレイン酸エステル等が挙げられる。
これらの中でも、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルとしては、アスタキサンチンの体内での吸収性の観点から、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウリン酸エステルが好ましい。
Examples of the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester include polyoxyethylene sorbitan monolauric acid ester, polyoxyethylene sorbitan monopalmitic acid ester, polyoxyethylene sorbitan monostearic acid ester, and polyoxyethylene sorbitan monooleic acid ester.
Among these, as the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, the polyoxyethylene sorbitan monolauric acid ester is preferable from the viewpoint of absorption of astaxanthin in the body.
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルの市販品としては、ウィルサーフ（登録商標） ＴＦ−２０（商品名、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウリン酸エステル、ＨＬＢ値：１６．７（カタログ値）、日油（株））、ウィルサーフ ＴＦ−６０（商品名、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアリン酸エステル、ＨＬＢ値：１５．７（カタログ値）、日油（株））、ウィルサーフ ＴＦ−８０（商品名、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレイン酸エステル、ＨＬＢ値：１５．７（カタログ値）、日油（株））等が挙げられる。 As a commercial product of polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, Wilsurf (registered trademark) TF-20 (trade name, polyoxyethylene sorbitan monolaurate, HLB value: 16.7 (catalog value), Nichiyu Co., Ltd.) , Willsurf TF-60 (trade name, polyoxyethylene sorbitan monostearic ester, HLB value: 15.7 (catalog value), Nichiyu Co., Ltd.), Wilsurf TF-80 (trade name, polyoxyethylene sorbitan) Examples thereof include monooleic acid ester, HLB value: 15.7 (catalog value), and Nichiyu Co., Ltd.
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルの含有量は、例えば、アスタキサンチンの体内での吸収性の観点から、アスタキサンチン１００質量部に対して、２０質量部以上であることが好ましく、５０質量部以上であることがより好ましい。
また、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルの含有量は、例えば、摂取のしやすさの観点から、本実施形態の組成物の全量に対して、１００００質量部以下であることが好ましく、８０００質量部以下であることがより好ましい。
The content of the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is preferably 20 parts by mass or more and 50 parts by mass or more with respect to 100 parts by mass of astaxanthin, for example, from the viewpoint of absorption of astaxanthin in the body. More preferred.
Further, the content of the polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester is preferably 10,000 parts by mass or less, preferably 8,000 parts by mass or less, based on the total amount of the composition of the present embodiment, for example, from the viewpoint of ease of ingestion. Is more preferable.
＜他の成分＞
本実施形態の組成物は、上記した以外の他の成分を、効果を損なわない範囲内で、必要に応じて含んでもよい。他の成分としては、神経分化促進用組成物が含有しうる担体又は添加剤として例示した各種の成分から選択することができる。
<Other ingredients>
The composition of the present embodiment may contain other components other than those described above, if necessary, as long as the effects are not impaired. As the other component, it can be selected from various components exemplified as carriers or additives that can be contained in the composition for promoting neural differentiation.
（クロセチン）
本実施形態の組成物は、クロセチンを更に含むことができる。
クロセチンは、カロテノイドの１種であり、クチナシの果実、サフランの柱頭等に含まれるクロシンを加水分解することにより得ることができる。
本実施形態の組成物は、クロセチンを更に含むことにより、眼精疲労改善効果、睡眠改善効果等の付加的な効果が期待できる。
本実施形態の組成物がクロセチンを含む場合、クロセチンの含有率は、特に制限されず、期待される効果の種類、程度等に応じて、適宜、設定することができる。
(Crocetin)
The composition of this embodiment can further contain crocetin.
Crocetin is a kind of carotenoid and can be obtained by hydrolyzing crocin contained in gardenia fruit, stigma of saffron and the like.
By further containing crocetin, the composition of the present embodiment can be expected to have additional effects such as an eye strain improving effect and a sleep improving effect.
When the composition of the present embodiment contains crocetin, the content of crocetin is not particularly limited and can be appropriately set according to the type and degree of the expected effect.
（乳化剤）
本実施形態の組成物は、乳化剤を含んでもよい。乳化剤を含むことにより、本実施形態の組成物は、特定油剤を含む分散媒中にショ糖脂肪酸エステルの粉末をより安定に含むことができる。
本実施形態の組成物が乳化剤を含む場合、乳化剤を１種単独で含んでもよく、２種以上を組み合わせて含んでもよい。
(emulsifier)
The composition of this embodiment may contain an emulsifier. By including the emulsifier, the composition of the present embodiment can more stably contain the sucrose fatty acid ester powder in the dispersion medium containing the specific oil agent.
When the composition of the present embodiment contains an emulsifier, the emulsifier may be contained alone or in combination of two or more.
乳化剤としては、特に制限されるものではなく、例えば、ノニオン性界面活性剤が好ましい。
ノニオン性界面活性剤としては、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノール酸エステル等が挙げられる。
これらの中でも、ノニオン性界面活性剤としては、例えば、両親媒性を示す観点から、ＨＬＢ値が１５以下であるグリセリン脂肪酸エステルが好ましく、ＨＬＢ値が１〜１０の範囲であるグリセリン脂肪酸エステルがより好ましい。
グリセリン脂肪酸エステルとしては、平均重合度が１〜１０のポリグリセリンと、炭素数８〜１８の脂肪酸、例えば、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、又はリノール酸とのエステルであることが好ましい。
The emulsifier is not particularly limited, and for example, a nonionic surfactant is preferable.
Examples of the nonionic surfactant include glycerin fatty acid ester and polyglycerin condensed ricinoleic acid ester.
Among these, as the nonionic surfactant, for example, a glycerin fatty acid ester having an HLB value of 15 or less is preferable, and a glycerin fatty acid ester having an HLB value in the range of 1 to 10 is more preferable from the viewpoint of exhibiting amphipathicity. preferable.
The glycerin fatty acid ester includes polyglycerin having an average degree of polymerization of 1 to 10 and fatty acids having 8 to 18 carbon atoms such as caprylic acid, capric acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, or It is preferably an ester with linolic acid.
グリセリン脂肪酸エステルの市販品としては、エマックス（登録商標） ＢＷ−３６（商品名、ＨＬＢ値：３〜５、理研ビタミン（株））、ＳＹグリスター（登録商標） ＭＳ−３Ｓ（商品名、テトラグリセリンモノステアリン酸エステル、ＨＬＢ値：８．４、阪本薬品工業（株））、ＳＹグリスター（登録商標） ＭＯ−３Ｓ（商品名、テトラグリセリンモノオレイン酸エステル、ＨＬＢ値：８．８、阪本薬品工業（株））、ＳＹグリスター（登録商標） ＰＯ−５Ｓ（商品名、ヘキサグリセリンペンタオレイン酸エステル、ＨＬＢ値：４．７、阪本薬品工業（株））等が挙げられる。 Commercially available glycerin fatty acid esters include Emax® BW-36 (trade name, HLB value: 3-5, RIKEN Vitamin Co., Ltd.), SY Glister® MS-3S (trade name, tetraglycerin). Monostearic acid ester, HLB value: 8.4, Sakamoto Yakuhin Kogyo Co., Ltd., SY Glister (registered trademark) MO-3S (trade name, tetraglycerin monooleic acid ester, HLB value: 8.8, Sakamoto Yakuhin Kogyo) ), SY Glister (registered trademark) PO-5S (trade name, hexaglycerin pentaoleic acid ester, HLB value: 4.7, Sakamoto Pharmaceutical Co., Ltd.) and the like.
本実施形態の組成物が乳化剤を含む場合、乳化剤の含有量は、例えば、特定油剤を含む分散媒中におけるショ糖脂肪酸エステルの粉末の分散安定性の観点から、特定油剤１００質量部に対して、１質量部〜１０００質量部であることが好ましい。 When the composition of the present embodiment contains an emulsifier, the content of the emulsifier is, for example, relative to 100 parts by mass of the specific oil agent from the viewpoint of dispersion stability of the sucrose fatty acid ester powder in the dispersion medium containing the specific oil agent. It is preferably 1 part by mass to 1000 parts by mass.
［神経分化促進用組成物の製造方法］
神経分化促進用組成物の製造方法は、特に限定されず、公知の方法を用いることができる。
神経分化促進用組成物が、本開示の神経分化促進剤と、担体として、２５℃で粉末であり、かつ、ＨＬＢ値が１０以上のショ糖脂肪酸エステルの粉末と、２５℃で液状の油剤（特定油剤）を含む分散媒と、を含む組成物の態様である場合には、例えば、以下に述べる方法により製造することができる。
[Method for producing a composition for promoting neural differentiation]
The method for producing the composition for promoting neuronal differentiation is not particularly limited, and a known method can be used.
The composition for promoting nerve differentiation is a nerve differentiation promoting agent of the present disclosure, a powder of a sucrose fatty acid ester powdered at 25 ° C. and an HLB value of 10 or more, and an oil agent liquid at 25 ° C. as a carrier. In the case of a composition containing a dispersion medium containing a specific oil agent), it can be produced, for example, by the method described below.
上記実施態様の組成物は、神経分化促進剤と、ショ糖脂肪酸エステルの粉末と、特定油剤と、必要に応じて、他の成分と、を混合すること（以下、「混合工程」ともいう。）を含む方法により、製造することができる。
混合方法は、特に制限されるものではなく、例えば、全ての成分を一度に混合してもよいし、逐次混合してもよい。ショ糖脂肪酸エステルの粉末を良好に分散させる観点からは、アスタキサンチンと特定油剤とを混合してオイル溶液を得た後、得られたオイル溶液に、セサミン系化合物、ショ糖脂肪酸エステルの粉末等の成分を混合することが好ましい。
The composition of the above embodiment is a mixture of a nerve differentiation promoting agent, a powder of a sucrose fatty acid ester, a specific oil agent, and, if necessary, other components (hereinafter, also referred to as a “mixing step”). ) Can be produced.
The mixing method is not particularly limited, and for example, all the components may be mixed at once or sequentially. From the viewpoint of sucrose fatty acid ester powder being well dispersed, astaxanthin and a specific oil agent are mixed to obtain an oil solution, and then the sesamine compound, sucrose fatty acid ester powder, etc. are added to the obtained oil solution. It is preferable to mix the components.
混合手段としては、特に制限されるものではなく、市販のいずれの混合手段を用いてもよい。混合手段としては、撹拌機、ミキサー等の混合手段が挙げられる。
混合の際の温度、時間等の条件は、特に制限されるものではなく、食品組成物に含まれる成分の種類により、適宜調整することができる。例えば、ショ糖脂肪酸エステルの粉末を含んで混合する際の温度は、ショ糖脂肪酸エステルが粉末の形態を保持できる温度である必要があることから、ショ糖脂肪酸エステルの融点未満の温度に設定することが好ましい。
The mixing means is not particularly limited, and any commercially available mixing means may be used. Examples of the mixing means include mixing means such as a stirrer and a mixer.
Conditions such as temperature and time at the time of mixing are not particularly limited, and can be appropriately adjusted depending on the type of the component contained in the food composition. For example, the temperature at which the sucrose fatty acid ester powder is contained and mixed is set to a temperature lower than the melting point of the sucrose fatty acid ester because the sucrose fatty acid ester needs to be at a temperature that can maintain the powder morphology. Is preferable.
上記の製造方法は、必要に応じて、上記混合工程以外の他の工程を含むことができる。他の工程としては、例えば、混合工程前の前処理工程として、ショ糖脂肪酸エステルの粉末を粉砕処理する粉砕工程が挙げられる。
粉砕手段としては、食品原料の乾式粉砕に適した装置、例えば、微粉砕機、グラインダー、クラッシャー、ミル等を使用した手段が挙げられる。
ショ糖脂肪酸エステルの粉末の粉砕処理は、ベタツキを抑制する観点から、ショ糖脂肪酸エステルの粉末の温度を、好ましくは５℃〜２５℃、より好ましくは１０℃〜２０℃に保った状態で行う。
また、ショ糖脂肪酸エステルの粉末の粉砕処理は、粉砕品の９０％以上が、好ましくは目開き１８０μｍ（約８３メッシュ）のフィルタを通過し、より好ましくは目開き１５０μｍ（約１００メッシュ）のフィルタを通過するように行う。
The above-mentioned production method may include steps other than the above-mentioned mixing step, if necessary. As another step, for example, as a pretreatment step before the mixing step, there is a pulverization step of pulverizing the sucrose fatty acid ester powder.
Examples of the crushing means include means using an apparatus suitable for dry crushing of food raw materials, for example, a fine crusher, a grinder, a crusher, a mill and the like.
The pulverization treatment of the sucrose fatty acid ester powder is carried out in a state where the temperature of the sucrose fatty acid ester powder is preferably maintained at 5 ° C to 25 ° C, more preferably 10 ° C to 20 ° C from the viewpoint of suppressing stickiness. ..
Further, in the pulverization treatment of the sucrose fatty acid ester powder, 90% or more of the pulverized product preferably passes through a filter having an opening of 180 μm (about 83 mesh), and more preferably a filter having an opening of 150 μm (about 100 mesh). Do so as to pass through.
剤形をソフトカプセル剤とする場合には、カプセル皮膜内に、混合工程にて得られた混合液（以下、「中身液」ともいう。）を封入する工程、中身液を封入したカプセル皮膜を乾燥させる工程等の製剤化工程等を含んでもよい。 When the dosage form is a soft capsule, the step of encapsulating the mixed solution obtained in the mixing step (hereinafter, also referred to as "content liquid") in the capsule film, and the step of encapsulating the capsule film containing the content liquid are dried. It may include a formulation step such as a step of making it.
カプセル皮膜は、ゼラチン、グリセリン、及び水を含むことが好ましい。
カプセル皮膜におけるグリセリンの含有量は、例えば、ゼラチン１００質量部に対して、１０質量部〜７０質量部であることが好ましい。
カプセル皮膜内に中身液を封入する方法としては、ロータリー式（ロータリーダイ式等）、シームレス式、平板式等の公知の方法が挙げられる。
中身液を封入したカプセル皮膜を乾燥させる方法としては、特に制限されるものではなく、タンブラー乾燥機（即ち、回転ドラム式乾燥機）等の公知の乾燥機を使用することができる。
乾燥の際の温度、時間等の条件は、特に制限されるものではなく、食品組成物に含まれる成分及びカプセル皮膜に含まれる成分の種類により、適宜調整することができる。
The capsule coating preferably contains gelatin, glycerin, and water.
The content of glycerin in the capsule film is preferably, for example, 10 parts by mass to 70 parts by mass with respect to 100 parts by mass of gelatin.
Examples of the method of enclosing the content liquid in the capsule film include known methods such as a rotary type (rotary die type, etc.), a seamless type, and a flat plate type.
The method for drying the capsule film containing the content liquid is not particularly limited, and a known dryer such as a tumbler dryer (that is, a rotary drum type dryer) can be used.
Conditions such as temperature and time at the time of drying are not particularly limited, and can be appropriately adjusted depending on the types of the components contained in the food composition and the components contained in the capsule film.
乾燥機による乾燥後は、ソフトカプセルを更に乾燥させることが好ましい。この場合の乾燥温度としては、２０℃〜３０℃程度が好ましく、湿度としては、１０％ＲＨ〜５０％ＲＨ程度が好ましく、乾燥時間としては、３日〜１０日程度が好ましい。 After drying with a dryer, it is preferable to further dry the soft capsules. In this case, the drying temperature is preferably about 20 ° C. to 30 ° C., the humidity is preferably about 10% RH to 50% RH, and the drying time is preferably about 3 to 10 days.
ソフトカプセル剤の形状としては、特に制限されるものではなく、楕円（ＯＶＡＬ）、長方形（ＯＢＬＯＮＧ）、球状（ＲＯＵＮＤ）等のいずれの形態をとることもできる。これらの形状にするため、当業界で周知の方法又は装置を適用することができる。 The shape of the soft capsule is not particularly limited, and may take any form such as an ellipse (OVAL), a rectangle (OBLONG), and a spherical shape (ROUND). Methods or devices well known in the art can be applied to these shapes.
以下、本発明を実施例により更に具体的に説明するが、本発明はその主旨を超えない限り、以下の実施例に限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, but the present invention is not limited to the following Examples as long as the gist of the present invention is not exceeded.
１．細胞代謝試験
細胞代謝試験は、神経芽細胞腫細胞株ＮＢ−１（以下、「ＮＢ−１細胞」と略称する。）を、処理液（ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アスタキサンチン含有溶液、セサミン含有溶液、又は、アスタキサンチン及びセサミンの混合溶液）を用いて処理し、処理後の細胞における細胞代謝機能の向上の有無を観察することにより行なった。試験は、細胞数測定キット（ＭＴＴ Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔ Ｋｉｔ、ナカライテスク（株））を用いたＭＴＴ試験により行なった。詳細は以下の通りである。
1. 1. Cell metabolism test In the cell metabolism test, a neuroblastoma cell line NB-1 (hereinafter abbreviated as "NB-1 cell") is subjected to a treatment solution (dimethylsulfoxide (DMSO), astaxanthin-containing solution, sesamine-containing solution, etc.). Alternatively, it was treated with a mixed solution of astaxanthin and sesamine), and the presence or absence of improvement in cell metabolic function in the treated cells was observed. The test was carried out by the MTT test using a cell number measurement kit (MTT Cell Count Kit, Nacalai Tesque Co., Ltd.). The details are as follows.
・ＮＢ−１細胞：
国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所ＪＣＲＢ細胞バンク（JCRB0621）より入手した。
・細胞培養：
「ＲＰＭＩ１６４０（富士フイルム和光純薬（株））／１０％ＦＢＳ（コーニング社）／１％ペニシリン−ストレプトマイシン（富士フイルム和光純薬（株））」を用いて培養した。
NB-1 cells:
Obtained from JCRB Cell Bank (JCRB0621), National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition.
・ Cell culture:
It was cultured using "RPMI1640 (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) / 10% FBS (Corning) / 1% penicillin-streptomycin (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)".
・アスタキサンチン：
ＡＳＴＯＴＳ−１０Ｏ（商品名、ヘマトコッカス藻由来アスタキサンチンオイル、アスタキサンチン濃度：１０質量％、富士フイルム（株））
・セサミン：
ゴマエキス セサヴィタ（登録商標）（商品名、Ｗｈｉｔｅ Ｓｅｓａｍｉｎ Ｅｘｔｒａｃｔ ９０質量％、セサミン系化合物、バイオアクティブズジャパン（株））
・ Astaxanthin:
ASTOTS-10O (trade name, astaxanthin oil derived from Haematococcus algae, astaxanthin concentration: 10% by mass, FUJIFILM Corporation)
・ Sesamin:
Sesame extract Sesavita (registered trademark) (trade name, White Semin Extract 90% by mass, sesamin compound, Bioactives Japan Co., Ltd.)
＜処理液の調製＞
処理液として、下記に示すアスタキサンチン溶液、セサミン溶液、及びアスタキサンチン−セサミン混合溶液、及び、ＤＭＳＯ（コントロール）を用いた。
<Preparation of treatment liquid>
As the treatment liquid, the astaxanthin solution, the sesamin solution, the astaxanthin-sesamin mixed solution, and DMSO (control) shown below were used.
・アスタキサンチン溶液（溶液Ａ１及び溶液Ａ２）
上記のアスタキサンチンをＤＭＳＯに溶解させて、３１μｍｏｌ／Ｌ（溶液Ａ１）、及び、６３μｍｏｌ／Ｌ（溶液Ａ２）の２種の溶液をそれぞれ調製した。
-Astaxanthin solution (solution A1 and solution A2)
The above astaxanthin was dissolved in DMSO to prepare two kinds of solutions, 31 μmol / L (solution A1) and 63 μmol / L (solution A2), respectively.
・セサミン溶液（溶液Ｓ１及び溶液Ｓ２）
上記のセサミンをＤＭＳＯに溶解させて、セサミン濃度が、５２μｍｏｌ／Ｌ（溶液Ｓ１）、及び、１０５μｍｏｌ／Ｌ（溶液Ｓ２）の２種の溶液をそれぞれ調製した。
-Sesamin solution (solution S1 and solution S2)
The above sesamin was dissolved in DMSO to prepare two solutions having a sesamin concentration of 52 μmol / L (solution S1) and 105 μmol / L (solution S2), respectively.
・アスタキサンチン−セサミン混合溶液（溶液ＡＳ１及び溶液ＡＳ２）
上記のアスタキサンチン及びセサミンをＤＭＳＯに溶解させて、アスタキサンチン濃度及びセサミン濃度（アスタキサンチン＋セサミン）が、３１μｍｏｌ／Ｌ＋５２μｍｏｌ／Ｌ（溶液ＡＳ１）、及び、６３μｍｏｌ／Ｌ＋１０５μｍｏｌ／Ｌ（溶液ＡＳ２）の２種の混合溶液をそれぞれ調製した。溶液ＡＳ１及び溶液ＡＳ２は、本開示の神経分化促進剤を含む。
-Astaxanthin-sesamin mixed solution (solution AS1 and solution AS2)
The above astaxanthin and sesamine are dissolved in DMSO, and the astaxanthin concentration and the sesamine concentration (astaxanthin + sesamine) are a mixture of 31 μmol / L + 52 μmol / L (solution AS1) and 63 μmol / L + 105 μmol / L (solution AS2). Each solution was prepared. Solution AS1 and solution AS2 contain the neurodifferentiation promoters of the present disclosure.
＜ＭＴＴ試験＞
ＮＢ−１細胞を無血清培地を用いて４×１０５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの播種密度で、９６ウェルプレート（コーニング社）に播種した。２４時間後、上記で調製した処理液とＭＴＴ（１０μＬ／ｗｅｌｌ）とを各ウェルに添加して、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で３時間反応させた。その後、可溶化溶液を各ウェルに１００μＬずつ添加して、混合した後、マイクロプレートリーダー（FlexStation 3、Molecular Devices社）を用いて、５７０ｎｍの吸光度を測定した。ｎ＝３にて実施した。マイクロプレートリーダーでの読み取りを１０分間隔で２回繰り返し、各サンプル液につき計６つのデータを得た。得られたデータの最大値と最小値とを棄却した結果を、結果を図１に示す。
<MTT test>
NB-1 cells were seeded on 96-well plates (Corning) at a seeding density of 4 × 10 5 cells / well using serum-free medium. After 24 hours, the treatment solution prepared above and MTT (10 μL / well) were added to each well and reacted at 37 ° C. for 3 hours in a CO 2 incubator. Then, 100 μL of the solubilizing solution was added to each well, mixed, and then the absorbance at 570 nm was measured using a microplate reader (FlexStation 3, Molecular Devices). It was carried out at n = 3. Reading with a microplate reader was repeated twice at 10-minute intervals, and a total of 6 data were obtained for each sample solution. The results of rejecting the maximum and minimum values of the obtained data are shown in FIG.
＜結果＞
図１に示すように、処理液としてアスタキサンチン−セサミン混合溶液（溶液ＡＳ１及び溶液ＡＳ２）を用いた試験の結果は、その他の処理液を用いた試験の結果との対比において、有意に神経細胞の代謝が向上していることが分かる。
<Result>
As shown in FIG. 1, the results of the test using the astaxanthin-sesamine mixed solution (solution AS1 and solution AS2) as the treatment solution were significantly more neuronal than the results of the test using other treatment solutions. It can be seen that the metabolism is improved.
２．遺伝子発現解析試験
遺伝子発現解析試験は、ＮＢ−１細胞を、処理液（ＤＭＳＯ、アスタキサンチン溶液、セサミン溶液、又は、アスタキサンチン−セサミン混合溶液を用いて処理し、処理後の細胞を破砕して、ＤＮＡマクロアレイに供することにより行なった。詳細は以下の通りである。
2. 2. Gene expression analysis test In the gene expression analysis test, NB-1 cells are treated with a treatment solution (DMSO, astaxanthin solution, sesamine solution, or astaxanthin-sesamine mixed solution), and the treated cells are disrupted to generate DNA. This was done by submitting to a macro array. Details are as follows.
＜処理液の準備＞
上記の細胞代謝試験で用いた処理液のうち、ＤＭＳＯ、溶液Ａ１（アスタキサンチン濃度：３１μｍｏｌ／Ｌ）、溶液Ｓ１（セサミン濃度：５２μｍｏｌ／Ｌ）、及び、溶液ＡＳ１（アスタキサンチン濃度３１μｍｏｌ／Ｌ＋セサミン濃度５２μｍｏｌ／Ｌ）を、処理液として用いた。
<Preparation of treatment liquid>
Among the treatment solutions used in the above cell metabolism test, DMSO, solution A1 (astaxanthin concentration: 31 μmol / L), solution S1 (sesamine concentration: 52 μmol / L), and solution AS1 (astaxanthin concentration 31 μmol / L + sesamine concentration 52 μmol). / L) was used as the treatment solution.
＜サンプルの調製＞
ＮＢ−１細胞（細胞代謝試験で用いたものと同じ）に対して、処理液（ＤＭＳＯ、溶液Ａ１、溶液Ｓ１又は溶液ＡＳ１）を６時間作用させたサンプルを、それぞれ調製した。具体的には、ＮＢ−１細胞を無血清培地を用いて４×１０５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの播種密度で、９６ウェルプレート（コーニング社）に播種した。２４時間後、上記で調製した処理液を各ウェルに添加して、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で６時間反応させた。
<Preparation of sample>
Samples were prepared by allowing the treatment solution (DMSO, solution A1, solution S1 or solution AS1) to act on NB-1 cells (the same as those used in the cell metabolism test) for 6 hours. Specifically, NB-1 cells were seeded on 96-well plates (Corning) at a seeding density of 4 × 10 5 cells / well using serum-free medium. After 24 hours, the treatment solution prepared above was added to each well and reacted at 37 ° C. for 6 hours in a CO 2 incubator.
＜ＲＮＡの抽出＞
サンプル５００μＬから、ＴＲＩｚｏｌ Ｒｅａｇｅｎｔの定法に従いＲＮＡを抽出し、１０μｇをＲＮｅａｓｙ ｍｉｎｉ ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）を用いて精製した。
精製は、一部の変更を除きキットの定法に従った。すなわち、凝集に用いる１００％エタノールの量を２５０μＬから９５０μＬに変更したほか、ＲＮａｓｅフリー水１００μＬを５０μＬずつスピンカラム・メンブレンに透過させてＲＮＡを溶出した。
また、ＲＮＡ溶出時には、ＲＮａｓｅフリー水をスピンカラム・メンブレンに添加後、１分間静置した後に遠心操作を行った。
得られたＲＮＡサンプルをエタノール沈澱法により精製及び濃縮した後、１０μＬの溶液から１μＬを用いてＮａｎｏＤｒｏｐ（Thermo fisher scientific社）にて吸光度を測定し、濃度を算出した。また、Ａｇｉｌｅｎｔ ２１００ バイオアナライザ ＲＮＡ６０００ナノキット（Ａｇｉｌｅｎｔ）を用いてＲＮＡの品質チェックを行った。すべてのサンプルにおいてＲＮＡ Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ Ｎｕｍｂｅｒ （ＲＩＮ）が９．４以上であり、ほぼ分解のない状態であることが確認された。
<RNA extraction>
RNA was extracted from 500 μL of the sample according to the TRIzol Reagent standard, and 10 μg was purified using the RNeasy mini kit (QIAGEN).
Purification followed the kit's conventions, with some modifications. That is, the amount of 100% ethanol used for aggregation was changed from 250 μL to 950 μL, and 100 μL of RNase-free water was permeated through the spin column membrane by 50 μL to elute RNA.
At the time of RNA elution, RNase-free water was added to the spin column membrane, allowed to stand for 1 minute, and then centrifuged.
The obtained RNA sample was purified and concentrated by the ethanol precipitation method, and then the absorbance was measured with NanoDrop (Thermo fisher scientific) using 1 μL from a 10 μL solution to calculate the concentration. In addition, RNA quality was checked using the Agilent 2100 Bioanalyzer RNA6000 Nanokit (Agilent). It was confirmed that the RNA integrity number (RIN) was 9.4 or higher in all the samples, and there was almost no degradation.
＜ＤＮＡマイクロアレイ実験＞
・ＤＮＡマイクロアレイデータの取得
上記にて得た精製ＲＮＡを５００ｎｇ用いて、ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標） ＷＴ ＰＬＵＳ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ ｆｉｓｈｅｒ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の定法に従い、ＤＮＡマイクロアレイに供するサンプルを調製した。合成したｃＲＮＡおよびｓｉｎｇｌｅ−ｓｔｒａｎｄｅｄ ｃＤＮＡについては、ＮａｎｏＤｒｏｐ（Thermo fisher scientific社）にて吸光度を測定し、濃度を算出した後、Ａｇｉｌｅｎｔ ２１００ バイオアナライザにて電気泳動し、伸長反応の確認を行った。
泳動確認後のｃＤＮＡは、断片化した後、ラベル化し、Ｃｌａｒｉｏｍ（登録商標） Ｓ Ａｒｒａｙ， ｈｕｍａｎ（Thermo fisher scientific社）にハイブリダイズし、ＤＮＡマイクロアレイデータを得た。使用装置は、以下の通りである。
<DNA microarray experiment>
-Acquisition of DNA microarray data Using 500 ng of the purified RNA obtained above, a sample to be used for the DNA microarray was prepared according to the standard method of GeneChip (registered trademark) WT PLUS Reagent Kit (Thermo Fisher scientific). For the synthesized cRNA and single-stranded cDNA, the absorbance was measured by NanoDrop (Thermo fisher scientific), the concentration was calculated, and then electrophoresis was performed with an Agilent 2100 bioanalyzer to confirm the elongation reaction.
The cDNA after confirmation of migration was fragmented, labeled, and hybridized to Caryom (registered trademark) S Array, human (Thermo fisher scientific) to obtain DNA microarray data. The equipment used is as follows.
・ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標） Ｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｓｔａｔｉｏｎ ４５０（ＤＮＡマイクロアレイの洗浄および染色）
・ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標） Ｓｃａｎｎｅｒ ３０００ ７Ｇ（ＤＮＡマイクロアレイの画像スキャン）
・Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ（登録商標） ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）Ｃｏｍｍａｎｄ Ｃｏｎｓｏｌｅ（登録商標） （ＡＧＣＣ） ｓｏｆｔｗａｒｅ ｐｒｏｇｒａｍ
GeneChip® Fluids Station 450 (cleaning and staining of DNA microarrays)
-GeneChip (registered trademark) Scanner 3000 7G (image scan of DNA microarray)
Affymetrix® GeneChip® Command Console® (AGCC) software program
＜ＤＮＡマイクロアレイデータの正規化及び変動プローブセットの抽出＞
各個体データについて、計算環境Ｒ３．４．４にてＦａｃｔｏｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｏｒ Ｒｏｂｕｓｔ Ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ Ｓｕｍｍａｒｉｚａｔｉｏｎ（ｑＦＡＲＭＳ）による正規化を行った。
その後、Ｒ３．３．１にてｒａｎｋ ｐｒｏｄｕｃｔｓ法を実行し、ＤＭＳＯ処理群 対 アスタキサンチン処理群、ＤＭＳＯ処理群 対 セサミン処理群、及び、ＤＭＳＯ処理群 対 アスタキサンチン−セサミン処理群の３パターンの２群間比較を行った。ＦＤＲ＜０．０５を有意な発現変動と定義し、該当プローブセットを「発現変動プローブセット」として抽出し、その中から神経細胞分化に関連する遺伝子をさらに抽出した。
<Normalization of DNA microarray data and extraction of variable probe set>
Each individual data was normalized by Factor Analysis for Robust Microarray Summarization (qFARMS) in the calculation environment R3.4.
After that, the rank products method was executed in R3.3.1 between the two groups of three patterns: DMSO treatment group vs. astaxanthin treatment group, DMSO treatment group vs. sesamine treatment group, and DMSO treatment group vs. astaxanthin-sesamine treatment group. A comparison was made. FDR <0.05 was defined as a significant expression variation, and the corresponding probe set was extracted as an "expression variation probe set", from which genes related to neuronal differentiation were further extracted.
１）ＤＮＡマイクロアレイデータからの発現変動プローブセットの抽出
ＤＭＳＯ処理群に対する各処理群の発現変動プローブセットを抽出した。すなわち、いずれかの処理群間で、ＦＤＲ＊＜０．０５の有意な発現変動が認められたプローブセットを抽出した。
＊ＦＤＲ：False Discovery Rate 有意水準指標の一つ。
1) Extraction of expression variation probe set from DNA microarray data The expression variation probe set of each treatment group was extracted with respect to the DMSO treatment group. That is, a probe set in which a significant expression variation of FDR * <0.05 was observed between any of the treatment groups was extracted.
* FDR: False Discovery Rate One of the significance level indicators.
２）アスタキサンチン−セサミン処理群に特異的な変動プローブセットを用いた神経分化に関連する遺伝子の抽出
上記の１）において、アスタキサンチン−セサミン処理群において特異的に発現が増加した１２８のプローブセットを対象に、神経細胞分化に関連する遺伝子を抽出したところ、ＰＡＸ６、ＲＡＢ１３、ＰＴＢＰ２、ＣＲＥＢＢＰ、ＰＰＭ１Ａ、ＭＥＦ２Ａ、及びＣＲＥＢ３Ｌ２が確認された。
2) Extraction of genes related to neural differentiation using a variable probe set specific to the astaxanthin-sesamine treatment group In 1) above, 128 probe sets whose expression was specifically increased in the astaxanthin-sesamine treatment group were targeted. When genes related to nerve cell differentiation were extracted, PAX6, RAB13, PTBP2, CREBBP, PPM1A, MEF2A, and CREB3L2 were confirmed.
＜ＤＮＡマイクロアレイデータの正規化及び解析＞
各個体データについて、Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｃｏｎｓｏｌｅ （ＴＡＣ） ソフトウェア（Ｔｈｅｒｍｏ ｆｉｓｈｅｒ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ 社）で、ｓｓｔ−ＲＭＡ正規化を行った。その後、神経細胞分化に関連する遺伝子に関してＲ３．３．２を用いて一元配置分散分析後、Ｔｕｒｋｅｙ ＨＳＤ で有意差を検定し、ｐ＜０．０５を有意な発現変動と定義した。
<Normalization and analysis of DNA microarray data>
For each individual data, sst-RMA normalization was performed with the Transcriptome Analysis Console (TAC) software (Thermo Fisher Scientific). Then, after one-way ANOVA with R3.3.2 for genes related to neuronal differentiation, a significant difference was tested with Turkey HSD, and p <0.05 was defined as a significant expression variation.
結果を図２に示す。図２中、「Ａｓｔ」は「アスタキサンチン」を示し、「Ｓｅｓ」は「セサミン」を示し、「Ａｓｔ．Ｓｅｓ」は「アスタキサンチン−セサミン」を示す。 The results are shown in FIG. In FIG. 2, "Ast" indicates "astaxanthin", "Ses" indicates "sesamin", and "Ast. Ses" indicates "astaxanthin-sesamin".
図２に示すとおり、アスタキサンチン／セサミン系化合物処理群で特異的に発現上昇が認められた遺伝子として、ＣＲＥＢＢＰ及びＲＡＢ１３が確認された。 As shown in FIG. 2, CREBBP and RAB13 were confirmed as genes whose expression was specifically increased in the astaxanthin / sesamin compound treatment group.
以上のとおり、アスタキサンチンとセサミン系化合物との組み合わせは、アスタキサンチンを単独で用いた場合、又は、セサミン系化合物を単独で用いた場合に対比して、「細胞代謝試験」では神経細胞の代謝向上が確認され、「遺伝子発現解析試験」では神経細胞分化に関連する遺伝子の発現上昇が確認された。これらの結果は、本開示の神経分化促進剤によって、アスタキサンチン又はセサミン系化合物を、それぞれ単独で用いた剤によっては得られない、神経細胞の顕著な分化促進効果が得られることを裏付けるものである。 As described above, the combination of astaxanthin and the sesamine-based compound improves the metabolism of nerve cells in the "cell metabolism test" as compared with the case of using astaxanthin alone or the case of using the sesamine-based compound alone. It was confirmed, and in the "gene expression analysis test", increased expression of genes related to nerve cell differentiation was confirmed. These results support that the neuronal differentiation-promoting agent of the present disclosure can obtain a remarkable differentiation-promoting effect of nerve cells, which cannot be obtained by an agent using astaxanthin or a sesamin-based compound alone. ..
３．神経分化促進剤及び神経分化促進用組成物
［神経分化促進用組成物の製造］
アスタキサンチン及びセサミン系化合物を有効成分とする神経分化促進剤を含む組成物（神経分化促進用組成物）を、下記に実施例に示すソフトカプセル製剤として製造した。
3. 3. Nerve differentiation promoting agent and composition for promoting nerve differentiation [Manufacturing of composition for promoting nerve differentiation]
A composition containing a neuronal differentiation promoting agent containing astaxanthin and a sesamin-based compound as active ingredients (composition for promoting neuronal differentiation) was produced as a soft capsule preparation shown in Examples below.
＜実施例１＞
サフラワー油（食用油脂、日清オイリオ（株））１１６．１９質量部と、エマックス（登録商標） ＢＷ−３６（商品名、グリセリン脂肪酸エステル、ＨＬＢ値：３〜５、理研ビタミン（株））１５質量部と、を６０℃の加熱下で、攪拌機を用いて十分に混合し、均一なオイル溶液とした。オイル溶液が均一であることは、目視にて確認した。
このオイル溶液を５０℃に冷却した後、ＳＹグリスターＣＲＳ−７５（商品名、ポリグリセリン縮合リシノール酸エステル、阪本薬品工業（株））７質量部と、Ｅ−ＭＩＸ−α１０００（商品名、ビタミンＥ（トコフェロール）、タマ生化学（株））２．２５質量部と、を加えて混合し、さらに、アスタッツ−１０Ｏ（商品名、ヘマトコッカス藻由来アスタキサンチンオイル、アスタキサンチン濃度：１０質量％、（株）富士フイルムヘルスケアラボラトリー）３４．５質量部と、ＳＹグリスターＭＯ−３Ｓ（商品名、テトラグリセリンモノオレイン酸エステル、阪本薬品工業（株））４質量部と、ウィルサーフ ＴＦ−２０（商品名、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウリン酸エステル、ＨＬＢ値：１６．７（カタログ値）、日油（株））３質量部と、を加え、十分に混合し、混合物を得た。なお、混合物の調製には、攪拌機を用いた。
<Example 1>
Safflower oil (edible oil, Nisshin Oillio Co., Ltd.) 116.19 parts by mass and Emax (registered trademark) BW-36 (trade name, glycerin fatty acid ester, HLB value: 3-5, RIKEN Vitamin Co., Ltd.) 15 parts by mass were sufficiently mixed with a stirrer under heating at 60 ° C. to obtain a uniform oil solution. It was visually confirmed that the oil solution was uniform.
After cooling this oil solution to 50 ° C, 7 parts by mass of SY Glister CRS-75 (trade name, polyglycerin condensed lysinoleic acid ester, Sakamoto Yakuhin Kogyo Co., Ltd.) and E-MIX-α1000 (trade name, vitamin E). (Tocopherol), Tama Biochemical Co., Ltd. (2.25 parts by mass) and mixed, and further, ester-10O (trade name, ester derived from hematococcus algae, esterin concentration: 10% by mass, Co., Ltd.) Fujifilm Healthcare Laboratory) 34.5 parts by mass, SY Glister MO-3S (trade name, tetraglycerin monooleic acid ester, Sakamoto Yakuhin Kogyo Co., Ltd.) 4 parts by mass, and Wilsurf TF-20 (trade name, Polyoxyethylene sorbitan monolauric acid ester, HLB value: 16.7 (catalog value), 3 parts by mass of Nichiyu Co., Ltd. were added and mixed well to obtain a mixture. A stirrer was used to prepare the mixture.
得られた混合物に、ＬＡＬＭＩＮ Ｓｅ２０００（商品名、ミネラル酵母、ミネラル：Ｓｅ（セレン）、三輪製薬（株））６．２５質量部と、ビール酵母亜鉛１０％含有（商品名、ビール酵母、亜鉛１０質量％含有、Ｋｅｌａｔｒｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ製）２５質量部と、Ｒ−αリポ酸ＣＤ（商品名、αリポ酸Ｒ体のシクロデキストリン包接体、（株）シクロケム）６．２５質量部と、ビタミンＣ（商品名、扶桑化学工業（株））２５質量部と、ゴマエキス セサヴィタ（登録商標）（商品名、Ｗｈｉｔｅ Ｓｅｓａｍｉｎ Ｅｘｔｒａｃｔ ９０質量％、セサミン系化合物、バイオアクティブズジャパン（株））５．５６質量部と、を加え、攪拌機を用いて十分に混合した後、得られた混合物を、湿式ミルを用いて粉砕処理し、粉砕処理物を得た。 The obtained mixture contains 6.25 parts by mass of LALMIN Se2000 (trade name, mineral yeast, mineral: Se (selenium), Miwa Pharmaceutical Co., Ltd.) and 10% of beer yeast zinc (trade name, beer yeast, zinc 10). 25 parts by mass of R-α lipoic acid CD (trade name, cyclodextrin inclusion body of α-lipoic acid R compound, Cyclochem Co., Ltd.) and 6.25 parts by mass of vitamin C (trade name, α-lipoic acid R-form cyclodextrin inclusion body) and vitamin C (trade name, α-lipoic acid R-form cyclodextrin inclusion body) Product name, Fuso Chemical Industry Co., Ltd. 25 parts by mass, sesame extract Sesavita (registered trademark) (trade name, White Semin Extract 90% by mass, Sesamine compound, Bioactives Japan Co., Ltd.) 5.56 parts by mass , And thoroughly mixed using a stirrer, and then the obtained mixture was pulverized using a wet mill to obtain a pulverized product.
次に、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｌ１６９５（商品名、ショ糖ラウリン酸エステル、ＨＬＢ値：約１６、三菱化学フーズ（株））を、１０℃〜２０℃の温度を保った状態で、粉砕機を用いて乾式粉砕処理し、リョートー（登録商標）シュガーエステル Ｌ１６９５の粉砕品（ショ糖脂肪酸エステルの粉砕品）を得た。得られたショ糖脂肪酸エステルの粉砕品の９０％以上が、目開き１５０μｍ（約１００メッシュ）のフィルタを通過することを確認した。
得られたショ糖脂肪酸エステルの粉砕品２５質量部と、サフラワー油（食用油脂、日清オイリオ（株））２５質量部と、をミキサーを用いて、室温（２５℃）で混合し、得られた混合物と、上記にて得られた粉砕処理物の全量と、を室温（２５℃）にて、攪拌機を用いて十分に混合したものを、ソフトカプセルの中身液とした。
Next, Ryoto (registered trademark) sugar ester L1695 (trade name, sucrose lauric acid ester, HLB value: about 16, Mitsubishi Chemical Foods Co., Ltd.) was pulverized while maintaining a temperature of 10 ° C to 20 ° C. A pulverized product of Ryoto (registered trademark) sugar ester L1695 (crushed product of sucrose fatty acid ester) was obtained by dry pulverization using a machine. It was confirmed that 90% or more of the obtained pulverized sucrose fatty acid ester passed through a filter having an opening of 150 μm (about 100 mesh).
25 parts by mass of the obtained crushed sucrose fatty acid ester and 25 parts by mass of safflower oil (edible oil and fat, Nisshin Oillio Co., Ltd.) were mixed at room temperature (25 ° C.) using a mixer to obtain the obtained product. The mixture obtained above and the total amount of the pulverized product obtained above were sufficiently mixed at room temperature (25 ° C.) using a stirrer to obtain a soft capsule content liquid.
次に、ゼラチン１００質量部に対してグリセリンを３５質量部含むゼラチンシートを、ダイロールに送りながらシート接合部に中身液３００ｍｇを滴下し、楕円（ＯＶＡＬ）形状のソフトカプセルを作製した。作製したソフトカプセルに対して、タンブラー乾燥及び静置乾燥を行い、ソフトカプセル製剤とした。乾燥後のソフトカプセル製剤の重量を測定したところ、１粒あたり４６０±３０ｍｇであった。
得られたソフトカプセル製剤には、傷、割れ等の欠陥は認められなかった。
Next, a gelatin sheet containing 35 parts by mass of glycerin with respect to 100 parts by mass of gelatin was sent to a die roll, and 300 mg of the content liquid was dropped onto the sheet joint to prepare an elliptical (OVAL) -shaped soft capsule. The prepared soft capsule was tumbler-dried and statically dried to prepare a soft capsule preparation. The weight of the soft capsule preparation after drying was measured and found to be 460 ± 30 mg per capsule.
No defects such as scratches and cracks were observed in the obtained soft capsule preparation.
［評価］
実施例１で得たソフトカプセル製剤（製剤１）及び神経分化促進剤を含まないプラセボ製剤を用いて、認知機能低下の改善及び精神的疲労感の緩和についての評価を行なった。
実施例製剤である製剤１に含有される神経分化促進剤は、有効成分として、アスタキサンチン ６ｍｇ及びセサミン １０ｍｇを含有する。
[evaluation]
Using the soft capsule preparation (formulation 1) obtained in Example 1 and the placebo preparation containing no neuronal differentiation promoter, the improvement of cognitive decline and the alleviation of mental fatigue were evaluated.
The neurodifferentiation-promoting agent contained in the preparation 1 which is the example preparation contains 6 mg of astaxanthin and 10 mg of sesamin as active ingredients.
（１）認知機能低下の改善
評価試験は、軽度認知障害（ＭＣＩ）を有する５０歳〜７９歳の男女を被験者として、ランダム化二重盲検並行群間プラセボ比較試験により行なった。
被験者のうち７名を製剤１の摂取群とし、７名をプラセボ製剤の摂取群とし、合計１４名を評価した。
各被験者は、１２週間、２粒のカプセル製剤を摂取した。
認知機能検査は、各被験者について、Cognitrax認知機能検査ツール（Cognitraxベーシック，（株）ヘルス・ソリューション提供，http://www.cognitrax.jp/）を用い、摂取前、摂取６週後、及び摂取１２週後のそれぞれの時点において実施した。
その後、Cognitrax試験評価項目である、総合記憶力、言語記憶力、視覚記憶力、認知機能速度、反応時間、総合注意力、認知柔軟性、処理速度、実行機能、単純注意力、及び運動速度の各項目についての標準化スコアを解析した。各検査時のプラセボ製剤の摂取群と製剤１の摂取群の比較を対応のないt検定で統計解析を行い、摂取前からの変化量に関しても同様の解析を行った。
認知機能速度及び処理速度の２項目における摂取１２週目の変化量について、結果を表１及び図３に示す。図３中、「＊」はｐ＜０．０５を示す。
その結果、認知機能速度及び処理速度の２項目における摂取１２週目の変化量に対し、製剤１の摂取群に有意な改善が認められた。
(1) Improvement of cognitive decline The evaluation test was conducted by a randomized, double-blind, parallel-group, placebo-controlled trial in men and women aged 50 to 79 years with mild cognitive impairment (MCI).
Seven of the subjects were ingested with the preparation 1, 7 were in the placebo ingestion group, and a total of 14 subjects were evaluated.
Each subject ingested two capsules for 12 weeks.
The cognitive function test was performed for each subject using the Cognitrax cognitive function test tool (Cognitrax Basic, provided by Health Solution Co., Ltd., http://www.cognitrax.jp/) before ingestion, 6 weeks after ingestion, and ingestion. It was carried out at each time point after 12 weeks.
After that, about each item of Cognitrax test evaluation items, total memory, verbal memory, visual memory, cognitive function speed, reaction time, total attention, cognitive flexibility, processing speed, executive function, simple attention, and motor speed. The standardized score of was analyzed. The comparison between the intake group of the placebo preparation and the intake group of the preparation 1 at the time of each test was statistically analyzed by the unpaired t-test, and the same analysis was performed on the amount of change from before the intake.
The results of changes in the two items of cognitive function rate and processing rate at the 12th week of ingestion are shown in Table 1 and FIG. In FIG. 3, “*” indicates p <0.05.
As a result, a significant improvement was observed in the ingestion group of the pharmaceutical product 1 with respect to the change in the two items of cognitive function rate and processing rate at the 12th week of ingestion.
（２）精神的疲労感の緩和についての評価
評価試験は、日常作業で疲れを感じている３０歳〜６０歳の健常な男女を被験者として、ランダム化二重盲検２試験区クロスオーバー試験により行なった。
日常作業で疲れを感じていることは、具体的には、Ｃｈａｌｄｅｒ Ｆａｔｉｇｕｅ Ｓｃａｌｅのスコアが２１点以上であることで判断した。
被験者を半数ずつの２群にわけ、１群は、製剤１、プラセボ製剤の順で、もう１群はプラセボ製剤、製剤１の順で製剤を摂取し、合計２２名を評価した。
各被験者は、４週間、毎朝食後に２粒のカプセル製剤を摂取した。
評価試験は、日本疲労学会のガイドラインに示されているＶｉｓｕａｌ Ａｎａｌｏｇｕｅ Ｓｃａｌｅ（ＶＡＳ）に準じて、主観指標を用いて行った。具体的には、摂取４週後の時点において、各被験者について、精神作業負荷としてパソコンによる短期記憶課題（２−ｂａｃｋ課題）３０分と探索作業（Advanced Trail Making Test：ＡＴＭＴ）３０分とを交互に４セット、計４時間行ない、主観指標（疲労感）を測定することで実施した。
疲労感は、日本疲労学会のガイドラインに示されているＶｉｓｕａｌ Ａｎａｌｏｇｕｅ Ｓｃａｌｅ（ＶＡＳ）に準じて、負荷開始前、負荷２時間後、負荷４時間後、回復２時間後、回復４時間後、及び翌朝の６点で評価した。
結果を表２、図４及び図５に示す。表２、図４及び図５中、「＊」はｐ＜０．０５を示し、「＊＊」はｐ＜０．０１を示す。
その結果、実施例製剤である製剤１の摂取群はプラセボ製剤の摂取群と比較して、負荷開始前からの変化量において、翌朝の時点で有意な疲労感の低下がみられた。
また、負荷４時間後からの変化量において、回復２時間後、及び回復４時間後での有意な疲労感の低下が確認された。
このことから、実施例製剤が、精神作業負荷による疲労感（精神的疲労感）からの回復を促進することが明らかとなった。
(2) Evaluation of alleviation of mental fatigue The evaluation test was conducted by a randomized, double-blind, two-test group crossover study in healthy men and women between the ages of 30 and 60 who are tired from daily work. I did it.
The feeling of tiredness in daily work was determined by the fact that the score of the Chandler Fatigue Scale was 21 points or more.
The subjects were divided into two groups of half each, and one group ingested the pharmaceutical product 1 and the placebo preparation in this order, and the other group ingested the pharmaceutical product and the pharmaceutical product 1 in that order, and a total of 22 subjects were evaluated.
Each subject took 2 capsules after every breakfast for 4 weeks.
The evaluation test was conducted using a subjective index according to the Visual Analogue Scale (VAS) shown in the guidelines of the Japanese Society of Fatigue. Specifically, at 4 weeks after ingestion, for each subject, 30 minutes of short-term memory task (2-back task) and 30 minutes of exploration work (Advanced Trail Making Test: ATMT) were alternated as mental workload. 4 sets were performed for a total of 4 hours, and the subjective index (feeling of fatigue) was measured.
The feeling of fatigue is according to the Visual Analogue Scale (VAS) shown in the guidelines of the Japanese Society of Fatigue, before the start of loading, 2 hours after loading, 4 hours after loading, 2 hours after recovery, 4 hours after recovery, and the next morning. It was evaluated with 6 points.
The results are shown in Table 2, FIG. 4 and FIG. In Table 2, FIG. 4 and FIG. 5, “*” indicates p <0.05, and “**” indicates p <0.01.
As a result, the ingestion group of the preparation 1 which is the example preparation showed a significant decrease in the feeling of fatigue at the time of the next morning in the amount of change from before the start of loading as compared with the ingestion group of the placebo preparation.
In addition, it was confirmed that the amount of change from 4 hours after loading showed a significant decrease in fatigue after 2 hours of recovery and 4 hours after recovery.
From this, it was clarified that the example preparation promotes recovery from fatigue (mental fatigue) due to mental work load.
Claims (10)
機能が、ヒトにおいて機械又は道具を正確に使うこと、及びヒトにおいて精神と身体が強調した動作から選択される少なくとも１つである、機能性食品組成物。 A functional food composition containing astaxanthin, sesamin, episesamin, and at least one sesamin-based compound selected from a mixture of sesamin and episesamin as an active ingredient for preventing or improving function.
A functional food composition whose function is at least one selected from accurate use of machines or tools in humans and mental and physical emphasized movements in humans.
機能が、ヒトにおいて認知機能を要する器用な動作へと繋げること、及び、ヒトにおいて物事又は情報を判断及び認識し、素早くかつ正確に処理することから選択される少なくとも１つである、機能性食品組成物。 A functional food composition containing astaxanthin, sesamin, episesamin, and at least one sesamin-based compound selected from a mixture of sesamin and episesamin as an active ingredient for preventing or improving function.
Functional foods, the function of which is at least one selected from linking to dexterous movements requiring cognitive function in humans and judging and recognizing things or information in humans and processing them quickly and accurately. Composition.
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