JP2020158404A - ヒアルロン酸産生促進剤 - Google Patents
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Abstract
Description
〔実施例1〜3、比較例1〜2〕
植物油の不鹸化物を有効成分とする本発明のヒアルロン酸産生促進剤のヒアルロン酸産生促進作用を、正常ヒト繊維芽細胞を用いて調べた。特許文献1及び2に準じる比較例として、それぞれ大豆胚芽塩酸抽出物及びβ−シトステロールの評価も同様に行った。
成人由来正常ヒト繊維芽細胞(製品名KF−4019、倉敷紡績株式会社製)を入手した。
以下の培地を用意した。
増殖培地:10%FBS及び1%Penicillin−Streptomycin添加DMEM培地
試験培地:1%FBS及び1%Penicillin−Streptomycin添加DMEM培地
ヒアルロン酸産生促進剤の有効成分として以下の被験物質を用意した。
(1)植物油の不鹸化物
大豆胚軸油(下記の大豆胚軸油の製造方法で製造したもの)、大豆油又はコーン油(ともに株式会社J−オイルミルズ製の精製油)3gを共栓付三角フラスコ(容量300mL)に測り取った。上記油脂の入った三角フラスコに、25mLの2M水酸化カリウム−エタノール溶液、及び25mLの0.05g/mL没食子酸エタノール溶液を添加して混合溶液を得た。上記フラスコに2個の沸騰石を加え、還流冷却管付きソックスレー抽出器を接続し、沸騰蒸気で1時間加熱して鹸化した。還流冷却管から上記フラスコを外して、鹸化液を分液ロート(容量500mL)に移した。三角フラスコ内の残存した鹸化液を100mLの熱水で洗って上記分液ロートに移した。上記分液ロートに50mLの蒸留水を入れて静置することにより、室温まで冷却した。三角フラスコを100mLのジエチルエーテルで洗い、その洗浄液を分液ロートに入れ、1分間激しく攪拌し、2層に分かれるまで静置した。上記分液ロートの下層(水層)を除去し、30mLの蒸留水を加え、水層部で分液ロートの内壁部分を洗いながら緩やかに2〜3回回転させ、静置した。上記分液ロートの下層(水層)を除去し、30mLの蒸留水を加え、充分に振り混ぜて水洗した。この作業を、下層の洗浄液がフェノールフタレイン溶液で着色しなくなるまで繰り返した。上記分液ロートの上層(ジエチルエーテル層)をビーカーに回収して、無水硫酸ナトリウムで脱水した。この脱水物をロータリーエバポレータで濃縮乾固した。得られた乾固物を細胞試験に使用する不鹸化物とした。大豆胚軸油、大豆油及びコーン油の不鹸化物の収率は、それぞれ、1.82質量%、0.24質量%及び0.70質量%であった。
大豆種子を80℃、45分間加熱し、粗砕機で1/2未満の大きさに粉砕することにより、子葉、種皮及び胚軸の混合物を得た。得られた混合物を、風力分級機にかけて種皮を除き、子葉及び胚軸混合物を得た。得られた子葉及び胚軸混合物を、篩分機を用いて、タイラー7メッシュ篩上画分を取り除き、さらにタイラー10メッシュ篩下タイラー14メッシュ篩上の画分を分取することで、胚軸画分(大豆胚軸40質量%)を得た。上記胚軸画分を60℃に加温して、圧ぺん機でフレークにし、n−ヘキサンで油分を抽出してミセラを得た。得られたミセラから減圧下、60〜80℃で残留するn−ヘキサンを除去して粗原油を得た。粗原油を常法により、脱ガム処理、脱酸処理、脱色処理、脱臭処理を行って、大豆胚軸油を得た。
特許文献1に記載の実施例3のダイズ胚芽抽出物の調製方法を参考にして、大豆胚芽塩酸抽出物の調製を以下の手順で行った。大豆胚芽(加藤製油株式会社製)をブレンダーにかけて粉砕した。粉砕した大豆胚芽を100gビーカーに測り取り、1N塩酸500mLを添加して1時間攪拌し、懸濁液を得た。8gのポリフェノール除去剤(製品名:ポリクラールVT、富士フィルム和光純薬工業製)を上記懸濁液に添加し、再度1時間攪拌した。前記溶液を遠心分離機にかけて沈殿物を除去し、残った液層を濾紙で濾過して得た濾液を塩酸抽出溶液として回収した。回収した塩酸抽出溶液を、30%水酸化ナトリウム水溶液を用いて中和した。その中和液を再度濾過し、100mLのプラスチックチューブに回収、−80℃で凍結した。凍結させた中和液を凍結乾燥機で凍結乾燥した。凍結乾燥物を乳鉢で細かく粉砕した粉末を大豆胚芽塩酸抽出物とした。
β−シトステロール(純度97%以上の試薬)をタマ生化学株式会社から入手した。
(1)細胞前培養
前記増殖培地を用いて成人由来正常ヒト繊維芽細胞をT−75フラスコに起眠し、CO2インキュベーター(5%CO2、37℃、湿潤)内で培養した。培地交換を一日おきに行い、80%コンフルエントに到達した時点で細胞を回収して以下の試験に供した。
細胞毒性の見られない濃度域を決定するために、被験物質の濃度を7段階に変えて以下の試験を行った(各n=3)。上記細胞を5×103cells/0.1mL/ウェルとなるよう上記増殖培地で調製し、96ウェルプレートに播種した。CO2インキュベーター内(5%CO2、37℃)で1日間培養後、DMSOに被験物質を溶解させ、DMSO濃度が0.1質量%となるように添加した試験培地、又は被験物質無溶解の、DMSO濃度が0.1質量%となるように添加した試験培地(対照)に置換した。その後、3日間培養し、wst−8法で生細胞数測定を行った。具体的には、生細胞数測定試薬SF(ナカライテスク株式会社製、Cat.No.07553−15)を10%添加した培地に交換し、CO2インキュベーター内(5%CO2、37℃)でインキュベートし、60分間の吸光度(450nm)変化量をプレートリーダーで測定した。
細胞増殖の見られる濃度域を決定するために、被験物質を3段階の濃度に変えてDMSOに溶解させ、さらに試験培地にDMSO濃度が0.1質量%となるように添加して得た被験物質添加試験培地について、以下の試験を行った(各n=5)。また、対照として0.1質量%DMSO溶媒添加試験培地についても同様の試験を行った。
実施例1〜3では植物油(大豆胚軸油、大豆油又はコーン油)の不鹸化物、比較例1では大豆胚芽塩酸抽出物、そして比較例2ではβ−シトステロール(試薬)をそれぞれ有効成分とするヒアルロン酸産生促進剤のヒアルロン酸産生率を以下の手順で測定した。
そこで、β−シトステロールを有効成分として含むヒアルロン酸産生促進剤について、有効成分濃度を0.124〜50μg/mLに変えてヒアルロン酸産生率を測定するとともに、大豆胚軸油不鹸化物を有効成分として含むヒアルロン酸産生促進剤について、有効成分濃度を10〜50μg/mLに変えてヒアルロン酸産生率を測定した。結果を表7及び図2に示す。なお、細胞当たりのヒアルロン酸産生量は、Student‘s tによる有意差検定により、対照(0.1質量%DMSO)に対して実施例1の大豆胚軸油不鹸化物の濃度を10μg/mLとした検体は、危険率5%で有意差があった。
Claims (8)
- 植物油の不鹸化物を有効成分とするヒアルロン酸産生促進剤。
- 前記植物油が、大豆胚軸油、大豆油及びコーン油からなる群から選ばれる一種又は二種以上である、請求項1に記載のヒアルロン酸産生促進剤。
- 前記不鹸化物を、0.1質量%以上100質量%以下含有する、請求項1又は2に記載のヒアルロン酸産生促進剤。
- 請求項1〜3のいずれか一項に記載のヒアルロン酸産生促進剤、並びに、化粧品学的又は薬学的に許容される添加剤を含有する美容組成物。
- 植物油の不鹸化物、並びに、化粧品学的又は薬学的に許容される添加剤を含有する美容組成物。
- 皮膚の保湿、皮膚の張り向上、及び皮膚のしわ改善から選ばれる少なくとも一種の用途に用いるための請求項4又は5に記載の美容組成物。
- 経皮投与用である、請求項4〜6のいずれか一項に記載の美容組成物。
- 請求項4又は5に記載の美容組成物の製造方法であって、植物油の不鹸化物、並びに、化粧品学的又は薬学的に許容される添加剤を配合することを含む、前記製造方法。
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Citations (5)
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---|---|---|---|---|
JPS63277604A (ja) * | 1987-05-11 | 1988-11-15 | Showa Denko Kk | α−リノレン酸含有化粧料 |
JPH08208452A (ja) * | 1994-11-05 | 1996-08-13 | Soc Prod Nestle Sa | 香粧用脂質組成物およびその製造方法 |
JP2002138013A (ja) * | 2000-10-27 | 2002-05-14 | Pias Arise Kk | Hne・アクロレインの生成抑制・分解促進剤及び皮膚抗老化外用剤 |
WO2012057123A1 (ja) * | 2010-10-27 | 2012-05-03 | 株式会社 資生堂 | コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤、線維芽細胞増殖促進剤、および抗シワ剤 |
WO2018012262A1 (ja) * | 2016-07-13 | 2018-01-18 | 株式会社J-オイルミルズ | メタボリックシンドローム抑制剤 |
-
2019
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Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS63277604A (ja) * | 1987-05-11 | 1988-11-15 | Showa Denko Kk | α−リノレン酸含有化粧料 |
JPH08208452A (ja) * | 1994-11-05 | 1996-08-13 | Soc Prod Nestle Sa | 香粧用脂質組成物およびその製造方法 |
JP2002138013A (ja) * | 2000-10-27 | 2002-05-14 | Pias Arise Kk | Hne・アクロレインの生成抑制・分解促進剤及び皮膚抗老化外用剤 |
WO2012057123A1 (ja) * | 2010-10-27 | 2012-05-03 | 株式会社 資生堂 | コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤、線維芽細胞増殖促進剤、および抗シワ剤 |
WO2018012262A1 (ja) * | 2016-07-13 | 2018-01-18 | 株式会社J-オイルミルズ | メタボリックシンドローム抑制剤 |
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