JP2017122122A - ヒアルロニダーゼ阻害剤、並びにこれを配合してなる化粧料組成物及び機能性食品 - Google Patents
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ヒアルロニダーゼは、ヒアルロン酸を分解することにより、結合組織の再構築における細胞活動の一環を担う酵素である。ヒアルロニダーゼは、加齢や炎症時に活性化され、これが過剰に作用するとヒアルロン酸の分解量が増加する。ヒアルロニダーゼが活性化しすぎると、ヒアルロン酸の合成より、分解される速度が大きくなり、結果として、炎症反応の亢進や、皮膚のシワ、関節痛等の原因となる。また、ヒアルロニダーゼはヒスタミンの放出に関与しており、花粉症等のアレルギーの発生にも関わっている。
これまでにヒアルロニダーゼの活性阻害作用を有する成分として、様々な報告がなされている。例えば、特許文献1には、ブドウの抽出物を有効成分にすること、特許文献2には、低分子化サイリウムシードガム、特許文献3には、ワイルドタイム及びホップの抽出物がヒアルロニダーゼ阻害剤として報告されている。
かかる状況下、本発明の目的は、従来報告されていない麹菌発酵物由来のヒアルロニダーゼ活性阻害剤およびその応用品を提供することである。
<1> 白麹菌(Aspergillus kawachii)、黒麹菌(Aspergillus awamori)及び黄麹菌(Aspergillus oryzae)から選択される少なくとも1種を繁殖させた米麹加工物を含有するヒアルロニダーゼ阻害剤。
<2> 前記米麹加工物が、前記米麹の乾燥物である前記<1>に記載のヒアルロニダーゼ阻害剤。
<3> 前記米麹加工物が、前記米麹と、水、エタノール及び1,3−ブチレングリコールから選択される1種以上を主溶媒として含有する抽出溶媒とを接触させ、前記米麹に含有される成分を抽出して得られる抽出物である前記<1>に記載のヒアルロニダーゼ阻害剤。
<4> 前記抽出溶媒が、水を主体とする溶媒である前記<3>に記載のヒアルロニダーゼ阻害剤。
<5> 前記<1>から<4>のいずれかに記載のヒアルロニダーゼ阻害剤を配合してなる化粧料組成物。
<6> 前記<1>から<4>のいずれかに記載のヒアルロニダーゼ阻害剤を配合してなる機能性食品。
<1A> ヒアルロニダーゼに、白麹菌(Aspergillus kawachii)、黒麹菌(Aspergillus awamori)及び黄麹菌(Aspergillus oryzae)から選択される少なくとも1種を繁殖させた米麹の溶媒抽出物を接触させる工程を含むことを特徴とするヒアルロニダーゼの活性を阻害する方法(但し、ヒトに対する医療行為を除く)。
本発明は、白麹菌(Aspergillus kawachii)、黒麹菌(Aspergillus awamori)及び黄麹菌(Aspergillus oryzae)から選択される少なくとも1種を繁殖させた米麹加工物を含有するヒアルロニダーゼ活性阻害剤(以下、「本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤」、又は「本発明の阻害剤」と記載する場合がある。)に関する。
以下、本発明の阻害剤について詳細に説明する。
本発明の阻害剤に含有される米麹は、麹菌として白麹菌(Aspergillus kawachii)を繁殖させた米麹(以下、「米麹(白麹菌)」と記載する場合がある。)または、黒麹菌(Aspergillus awamori)を繁殖させた米麹(以下、「米麹(黒麹菌)」と記載する場合がある。)、及び黄麹菌(Aspergillus oryzae)を繁殖させた米麹(以下、「米麹(黄麹菌)」と記載する場合がある。)が挙げられる。なお、以下、米麹(白麹菌)、米麹(黒麹菌)及び米麹(黄麹菌)を総称して「本発明の米麹」と記載する場合がある。
好適な一例を挙げると、精白米を水で精米した後、冷水に浸漬する。その後、余計な水切りを行い、精白米を蒸しあげる。蒸しあがった精白米の水分を飛ばし、麹菌を混ぜ込んでいく。次に麹菌を混ぜた精白米を35〜40℃で18時間保温し、その後、麹菌が付着した精白米を均一に広げ34℃で6時間保温する。これを2回繰り返し、麹を製造する。
麹菌としては、白麹菌、黒麹菌及び黄麹菌から選択される少なくとも1種を使用できる。
本発明に係る米麹加工物(以下、「本発明の米麹加工物」と記載する場合がある。)における「加工」の種類は、本発明の米麹加工物の効果を損なわないものであるならば、適宜のものが選択でき、例えば、抽出、粉砕、乾燥などが挙げられる。また、本発明の米麹加工物における「加工物」の形態としては、後述で説明する溶媒抽出物と、本発明の米麹を乾燥物にしたものが好適である。本発明の米麹加工物は、ヒアルロニダーゼ阻害作用を有すると共に、人体に対する毒性や刺激性が少ない。そのため、化粧料組成物、機能性食品などの用途に使用することができる。
本発明に係る米麹の乾燥物(以下、単に「乾燥物」と記載する場合がある。)とは、本発明の米麹から水分を抜き取り乾燥させることにより得られるもののことである。この乾燥の方法や乾燥条件は、本発明の米麹加工物の効果を損なわないような一般的なものを適宜用いることができる。例えば、真空乾燥、天日乾燥、加熱乾燥、フリーズドライ、ドライヤーの温風を用いるなど公知の乾燥方法を使用すればよい。
本発明の阻害剤において、本発明の米麹の溶媒抽出物(以下、単に「抽出物」と記載する場合がある。)とは、抽出対象となる本発明の米麹を溶媒に接触させることにより、当該米麹に含まれる有効成分を抽出した形態のものを総括した概念である。本発明の阻害剤における抽出物は、具体的には、本発明の米麹を溶媒抽出して得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。また、液状の抽出物を乾燥して得られる乾燥物も、本発明における抽出物に該当するものとする。
これらの抽出溶媒は単独又はこれら2種以上の混合物として使用することができ、2種以上の溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。
抽出溶媒としては、水、エタノール及び1,3−ブチレングリコールから選択される1種以上を主溶媒として含有する抽出溶媒であることが好ましい。ここで、「主溶媒」とは溶媒全量の50体積%以上(100体積%含む)を占める溶媒を意味する。
化粧料組成物や機能性食品として配合する観点では、水を主溶媒とすることが好ましい。水以外の溶媒としては、上記の溶媒を使用することができ、抽出効率や、目的とする化粧料組成物、機能性食品等の応用用途等を考慮して適宜選択される。
また、抽出物に含まれる残渣を取り除くため、濾過や遠心分離を行ってもよい。また、得られた抽出液はそのまま利用してもよいが、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
加温により米麹のデンプンやタンパク質などが分解され豊富な栄養成分(アミノ酸・糖など)を抽出液中に含有させることができる。なお、抽出操作の温度としては、本発明の効果であるヒアルロニダーゼ阻害活性を損なわない限りは適宜のものを選択することができる。また、必要に応じて抽出物の割合を高めるため、減圧濃縮や凍結乾燥により溶媒除去してもよい。
本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤は、ヒアルロニダーゼの活性を阻害できるので、ヒアルロニダーゼの活性が関与する疾患の予防、治療、症状の改善に寄与することができる。
本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤を配合した組成物は、各種化粧料組成物、機能性食品等の用途に使用することができる。
本発明の化粧料組成物は、上述したヒアルロニダーゼ阻害剤を配合してなることを特徴とする。なお、本発明の化粧料組成物は、一般的な美容用途等の化粧品に使用できるほか、入浴剤やシャンプー、石鹸など皮膚を保護し、洗浄するボディーケア製品用にも使用することができる。
また、本発明の化粧料組成物には、本発明の効果を損なわない範囲で通常化粧料や皮膚外用医薬で使用される任意の成分を添加することができる。かかる任意成分の具体例としては、増粘・ゲル化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、色素剤、金属封鎖剤、防腐剤、pH調整剤、香料、ミツロウ等が挙げられる。これら任意成分の配合割合は、その目的に応じて適宜選択して決定することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲で、他の薬効植物抽出物を添加してもよい。
本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤は、日常的に経口摂取しやいように、各種の食品、飲料と混ぜて機能性食品とすることで、長期的に摂取することも容易である。
ここでいう「機能性食品」とは、一般食品に加えて、健康の維持の目的で摂取する食品および/又は飲料を意味し、保健機能食品である特定保健用食品や栄養機能食品や、健康食品、栄養補助食品、栄養保険食品等を含む概念である。この中でも保健機能食品である特定保健用食品や栄養機能食品が好ましい機能性食品の態様である。なお、機能性食品として製品化する場合には、食品に用いられる様々な添加剤、具体的には、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、漂白剤、防菌防黴剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料等を添加していてもよい。
本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤は、このような食品、飲料に添加することにより、簡易に経口摂取することができる。
<米麹(白麹菌)>
白麹菌(Aspergillus kawachii)を繁殖させた米麹は、株式会社ビオックから入手した白麹K型菌を用いて製造した。
<米麹(黒麹菌)>
黒麹菌(Aspergillus awamori)を繁殖させた米麹は、株式会社ビオックから入手した泡盛用黒麹種菌を用いて製造した。
<米麹(黄麹菌)>
黄麹菌(Aspergillus oryzae)を繁殖させた米麹は、株式会社ビオックから入手した清酒用黄麹種菌を用いて製造した。
抽出溶媒としての水(50mL)に、米麹(白麹菌)(5g)を浸漬し、室温で3時間静置した。遠心分離後、上澄みを濾過して白麹水抽出物を得、後述のヒアルロニダーゼ阻害活性の評価に供した。
米麹(白麹菌)に代えて、米麹(黒麹菌)を使用した以外は、上記白麹水抽出物の調製と同様にして黒麹水抽出物を得、後述のヒアルロニダーゼ阻害活性の評価に供した。
米麹(白麹菌)に代えて、米麹(黄麹菌)を使用した以外は、上記白麹水抽出物の調製と同様にして黄麹水抽出物を得、後述のヒアルロニダーゼ阻害活性の評価に供した。
0.1Mの酢酸緩衝液(pH4.0)で4mg/mLの濃度になるように調製したウシ精巣由来ヒアルロニダーゼ(SIGMA−ALDRICH社製)溶液50μLを、米麹の抽出物100μLに添加し、撹拌後、37℃で20分間インキュベートした。
次に、ヒアルロニダーゼ溶液に米麹の抽出物を添加したこの溶液に、同緩衝液で0.5mg/mLの濃度になるように調製したCompound48/80溶液を100μL添加し、37℃で20分間インキュベートし、ヒアルロニダーゼを活性化させた。
さらに、ヒアルロニダーゼを活性化させたこの溶液に、同緩衝液で0.8mg/mLの濃度になるように調製した鶏冠由来ヒアルロン酸(和光純薬社製)溶液を250μL添加し、37℃で40分間反応させた。
この酵素反応をさせた反応液に、0.4NのNaOH溶液を100μL添加し、反応を停止させた。次に、0.8Mのホウ酸溶液(pH9.1)を100μL添加し、95℃で3分間加温した後、水冷した。水冷したこの溶液に対して1%p-ジメチルアミノベンズアルデヒド試薬を3mL添加し、37℃で20分間反応後、585nmにおける吸光度を測定した(A)。さらに酵素を添加せずに緩衝液を加えて同様の操作と測定を行った(B)。(A),(B)と同様の操作と測定を、試料を添加せずに水を加えてそれぞれ実施した(C、D)。上記方法で吸光度を求め、次式により、阻害率を算出した。
ヒアルロニダーゼ活性阻害率(%)=[1−(A−B)/(C−D)] × 100
白麹水抽出物、黒麹水抽出物及び黄麹水抽出物について、上述の方法でヒアルロニダーゼの阻害率を評価した。結果を図1に示す。
Claims (3)
- 白麹菌(Aspergillus kawachii)、黒麹菌(Aspergillus awamori)及び黄麹菌(Aspergillus oryzae)から選択される少なくとも1種を繁殖させた米麹加工物を含有することを特徴とするヒアルロニダーゼ阻害剤。
- 請求項1に記載のヒアルロニダーゼ阻害剤を配合してなることを特徴とする化粧料組成物。
- 請求項1に記載のヒアルロニダーゼ阻害剤を配合してなることを特徴とする機能性食品。
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