JP2016506736A5

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Info

Publication number: JP2016506736A5
Application number: JP2015556262A
Authority: JP
Filing date: 2014-02-06
Publication date: 2017-03-09
Anticipated expiration: 2034-02-06

Claims

ｉｎｖｉｔｒｏヒト膵臓内胚葉細胞集団およびＥＲＢＢ受容体チロシンキナーゼ活性化作用物質を含む組成物。
ＥＲＢＢ受容体チロシンキナーゼ活性化作用物質が、ヘレグリン−１、ヘレグリン−２およびヘレグリン−３およびヘレグリン−４からなる群から選択されるヘレグリンアイソフォームを含む、請求項１に記載の組成物。
ヘレグリンアイソフォームがヘレグリン−１およびヘレグリン−４を含む、請求項２に記載の組成物。
ヘレグリンアイソフォームがヘレグリン−４を含む、請求項２に記載の組成物。
インスリンを生成する方法であって、
ａ．前腸内胚葉細胞集団をＥＲＢＢ受容体チロシンキナーゼ活性化作用物質と接触させ、それにより、内分泌細胞および非内分泌細胞亜集団を含む細胞集団を生成するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）の亜集団をｉｎｖｉｖｏで成熟させ、それによりインスリン分泌細胞を得るステップであって、インスリン分泌細胞がグルコース刺激に応答してインスリンを分泌するステップと
を含む方法。
前腸内胚葉細胞培養物をｒｈｏキナーゼ阻害剤と接触させることをさらに含む、請求項５に記載の方法。
ｒｈｏキナーゼ阻害剤が、Ｙ−２７６３２、ファスジル、Ｈ−１１５２Ｐ、Ｗｆ−５３６、Ｙ−３０１４１、ＲＯＣＫのアンチセンス核酸、ＲＮＡ干渉誘導核酸、競合的ペプチド、アンタゴニストペプチド、阻害性抗体、抗体−ＳｃＦＶ断片、ドミナントネガティブバリアント、それらの誘導体およびそれらの発現ベクターからなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
ｒｈｏキナーゼ阻害剤が、Ｙ−２７６３２、ファスジル、Ｈ−１１５２Ｐ、Ｗｆ−５３６、Ｙ−３０１４１およびそれらの誘導体からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤が、Ｙ−２７６３２、ファスジル、Ｈ−１１５２Ｐおよびそれらの誘導体からなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
インスリンを生成する方法であって、
ａ．脱分化した遺伝的にリプログラミングされた細胞を、ＴＧＦβ受容体ファミリーメンバーを活性化する作用物質を含む第１の培地とｉｎｖｉｔｒｏで接触させるステップと、
ｂ．ＴＧＦβ受容体ファミリーメンバーを活性化する作用物質を欠く第２の培地でステップ（ａ）の細胞をｉｎｖｉｔｒｏで培養し、それにより前腸内胚葉細胞を生成するステップと、
ｃ．ステップ（ｂ）の前腸内胚葉細胞をＥＲＢＢ受容体チロシンキナーゼ活性化作用物質と接触させ、それにより、内分泌細胞および非内分泌細胞亜集団を含む細胞集団を生成するステップと、
ｄ．ステップ（ｃ）の細胞亜集団をｉｎｖｉｖｏで成熟させ、それによりインスリン分泌細胞を得るステップであって、インスリン分泌細胞がグルコース刺激に応答してインスリンを分泌するステップと
を含む方法。
非内分泌細胞がＣＨＧＡ陰性（ＣＨＧＡ−）細胞である、請求項１０に記載の方法。
内分泌細胞がＣＨＧＡ陽性（ＣＨＧＡ＋）細胞である、請求項１０に記載の方法。
ＣＨＧＡ陰性（ＣＨＧＡ−）細胞がさらにＮＫＸ６．１を発現する、請求項１１に記載の方法。
前腸内胚葉細胞をｒｈｏキナーゼ阻害剤と接触させることをさらに含む、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の方法。
ｒｈｏキナーゼ阻害剤が、Ｙ−２７６３２、ファスジル、Ｈ−１１５２Ｐ、Ｗｆ−５３６、Ｙ−３０１４１、ＲＯＣＫのアンチセンス核酸、ＲＮＡ干渉誘導核酸、競合的ペプチド、アンタゴニストペプチド、阻害性抗体、抗体−ＳｃＦＶ断片、ドミナントネガティブバリアント、それらの誘導体およびそれらの発現ベクターからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。